CN111961043A - 乙酰唑胺衍生物及其制备方法和在制备治疗冠心病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
Description
技术领域
本发明涉及一种乙酰唑胺衍生物及其制备方法,还涉及其在制备治疗冠心病药物中的应用。
背景技术
冠心病是由冠状动脉器质性狭窄或阻塞造成心肌组织缺血(细胞水平缺氧)引起的心肌损伤,亦称缺血性心脏病。据2019年我国心血管病中心发布的数据显示,国内患冠心病等心血管病的人数已高达2.9亿,发病率和致死率高,严重威胁民众健康。缺氧是引起心肌损伤的重要因素,然而现有药物在缺氧微环境中药效大幅降低。因此,围绕缺氧对现有药物分子进行结构优化,克服缺氧微环境对药效的影响,对治疗冠心病等心血管疾病具有重要意义。
阿司匹林等非甾体抗炎药物具有抗血小板活性功效,是公认的用于防治冠心病、减少心肌损伤的药物。不过,近年来报道的临床数据表明,在患者心肌缺氧程度增加的情况下,阿司匹林等用药量不得不大幅提高,增加了用药风险。另外非甾体抗炎药物在缺氧条件下药效显著降低,在对患者进行血液再灌注治疗时,通过服用阿司匹林等药物减少心肌缺氧损伤的实际药效十分有限。
乙酰唑胺是一种公认的碳酸酐酶抑制剂,通过靶向碳酸酐酶,可调节缺氧造成的细胞外微环境中的pH异常。鉴于肿瘤组织中常见缺氧微环境,碳酸酐酶抑制剂常见在抗肿瘤药物分子设计方面得到广泛研究,但是其在心肌缺氧条件下用于调节微环境的异常酸性、克服药物缺氧耐药方面的相关研究还未见报道。
发明内容
技术问题:为了解决现有非甾体抗炎药物在缺氧条件下治疗心肌缺氧药效降低和治疗效果不佳等问题,本发明提供了一种将碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺通过连接基团与阿司匹林为代表的具有羧酸基团的非甾体抗炎药键连得到的一类乙酰唑胺衍生物,该类乙酰唑胺衍生物克服了传统非甾体抗炎药物在缺氧状态下的耐药性,在治疗心肌缺氧损伤性疾病时,在缺氧微环境中药效显著提高,本发明还披露了其制备方法及其在制备治疗冠心病药物中的应用。
技术方案:本发明的技术方案是公开了一种通过连接基团将碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺Ac与阿司匹林As为代表的具有羧酸基团的非甾体抗炎药键连得到的一类乙酰唑胺衍生物I,结构通式如式1所示:
式1
式1中,OOC-NSAID代表失去一个羧酸质子的非甾体抗炎药。
其中,
所述的具有羧酸基团的非甾体抗炎药为阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生、双氯芬酸、菲诺洛芬、氟比洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、甲芬那酸、奥沙普秦、双水杨酯、舒林酸或托美汀中的任意一种。
所述的含有阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生和双氯芬酸的乙酰唑胺衍生物分别为I-1、I-2、I-3、I-4、I-5,其结构式如式2表示:
式2。
所述的乙酰唑胺衍生物I的合成路线如下所示:
上述合成路线中,OOC-NSAID代表失去一个羧酸质子的非甾体抗炎药。
本发明所述的乙酰唑胺衍生物I的制备方法,是将乙酰唑胺与具有羧酸基团的非甾体抗炎药通过连接基团键连得到一类乙酰唑胺衍生物I,其合成步骤如下:
步骤1.将乙酰唑胺酸性水解得化合物1;
步骤2.将化合物1和6-庚炔酸反应得化合物2;
步骤3.将含羧酸基团的非甾体抗炎药NSAID-COOH与2-溴乙醇反应得化合物3;
步骤4.将化合物3和叠氮化钠反应得化合物4;
步骤5.将化合物2和化合物4反应得乙酰唑胺衍生物I。
上述合成路线中, NSAID-COOH代表具有羧酸基团的非甾体抗炎药,OOC-NSAID代表失去一个羧酸质子的非甾体抗炎药。当非甾体抗炎药为阿司匹林时,所得乙酰唑胺衍生物为I-1;当非甾体抗炎药为吲哚美辛时,所得乙酰唑胺衍生物为I-2;当非甾体抗炎药为布洛芬时,所得乙酰唑胺衍生物为I-3;当非甾体抗炎药为萘普生时,所得乙酰唑胺衍生物为I-4;当非甾体抗炎药为双氯芬酸时,所得乙酰唑胺衍生物为I-5。I-1、I-2、I-3、I-4和I-5的结构如式2所示。
所示的合成路线中的反应条件如下:
条件(i)中,反应温度为85°C,反应时间为4-6 h;
条件(ii)中,反应体系中还包括吡啶,所述化合物1、6-庚炔酸和吡啶的摩尔比为1:1.1:2,反应温度为0°C,反应时间为6 h;
条件(iii)中,反应体系中还包括三乙胺,所述阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生或双氯芬酸非甾体抗炎药与2-溴乙醇、三乙胺的摩尔比为1:1:1.5,反应温度为0°C,反应时间为6 h;
条件(iv)中,所述化合物3和叠氮化钠的摩尔比为1:2,反应温度为50°C,反应时间为10-12 h;
条件(v)中,反应体系中还包括抗坏血酸,所述化合物2、化合物4、醋酸铜和抗坏血酸的摩尔比为1:1:0.2:0.4,反应温度为室温,反应时间为4 h;
其中,化合物1-4的结构如所述的乙酰唑胺衍生物I的合成路线所示。
本发明还包括乙酰唑胺衍生物在制备治疗冠心病药物中的应用,所述乙酰唑胺衍生物I具有良好的抑制碳酸酐酶9的活性,可在缺氧微环境中有效改善心肌缺氧损伤,应用在制备治疗心肌缺氧损伤类疾病药物中。
有益效果:该类乙酰唑胺衍生物克服了传统非甾体抗炎药物在缺氧状态下的耐药性,在治疗心肌缺氧损伤性疾病时,在缺氧微环境中药效显著提高,该有益效果在细胞与动物水平实验中得以验证。对心肌细胞H9c2进行给药和缺氧造模后,利用CCK8细胞活力检测试剂盒检测到细胞活力的不同变化,化合物I-1在0.01−10 µM浓度范围内均能提高细胞活力,而阿司匹林(As)在缺氧条件下几乎不发挥提高细胞活力的作用。化合物I-2表现出类似于化合物I-1的作用,且明显优于对照组吲哚美辛(Y)。对心肌细胞H9c2进行缺氧造模后,细胞中碳酸酐酶9(CAIX)表达上调,化合物I-1和I-2在0.01−10 µM浓度范围内下调CAIX表达,并且呈现出浓度依赖性。对空白对照组小鼠、缺氧模型小鼠、给药组小鼠的心脏进行TTC染色后发现缺氧程度的不同,与空白组相比,缺氧模型组小鼠(85 mg/kg异丙肾上腺素)的心脏缺氧面积显著增加,20 mg/kg化合物I-1预处理的小鼠心脏缺氧面积显著降低,且明显优于阿司匹林组(As)。
附图说明
图1是1% O2条件下,CCK8法检测化合物I-1、乙酰唑胺(Ac)、阿司匹林(As)对心肌细胞H9c2的活力改善作用;数据以三次独立实验的平均SD表示。*p<0.05, **<0.01(与空白对照组相比);#p<0.05(组间比较)。
图2是1% O2条件下,CCK8法检测化合物I-2、乙酰唑胺(Ac)、吲哚美辛(Y)对心肌细胞H9c2的活力改善作用;数据以三次独立实验的平均SD表示。*p<0.05, **<0.01(与空白对照组相比);#p<0.05(组间比较)。
图3是Western blot法检测化合物I-1在不同浓度下对心肌细胞H9c2中碳酸酐酶9的表达调节作用。
图4是Western blot法检测化合物I-2在不同浓度下对心肌细胞H9c2中碳酸酐酶9的表达调节作用。
图5是TTC染色法对比空白对照组、缺氧模型(85 mg/kg 异丙肾上腺素)和给药组(20 mg/kg 阿司匹林+85 mg/kg 异丙肾上腺素、20 mg/kg 化合物I-1+85 mg/kg 异丙肾上腺素)小鼠的心肌缺氧程度。
图6是图5中TTC染色法对比空白对照组、缺氧模型和给药组小鼠的心肌缺氧程度的柱状数量图。
具体实施方式
根据下述实施例,可以更好地理解本发明。然而,本领域的技术人员容易理解实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1. 5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-磺酰胺(化合物1)的制备
1
称取5.0 g乙酰唑胺于烧瓶中,加入30 mL无水乙醇,室温搅拌,加入5 mL浓盐酸,油浴加热至85 °C回流,待固体全部溶解,使用薄层色谱监测反应。反应完成后,旋干,用少量饱和碳酸氢钠溶液调pH至碱性。用乙酸乙酯萃取三次,旋干溶剂得白色固体3.5 g,产率86.4%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 8.06 (s, 2H), 7.81 (s, 2H).
实施例2. N-(5-磺酰胺基-1,3,4-噻二唑-2-基)庚-6-炔酰胺(化合物2)的制备
2
将 277 mg 6-庚炔酸溶于二氯甲烷,冰浴下滴加 2 当量草酰氯,再滴入一滴N,N-二甲基甲酰胺,继续搅拌 6-8 h,旋干备用。取 360 mg 化合物1溶于N,N-二甲基甲酰胺,冰浴下加入 316 mg吡啶,随后滴加6-庚炔酰氯的N,N-二甲基甲酰胺溶液,继续搅拌6 h,用薄层色谱监测反应。反应结束后,旋干溶剂,硅胶柱层析得白色粉末物 0.42 g,产率为 73.7%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 13.0 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 2.78 (t, J =2.4 Hz, 1H), 2.55 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.20–2.17 (m, 2H), 1.73–1.68 (m, 2H),1.50–1.45 (m, 2H).
实施例3.2-溴乙基 2-乙酰氧基苯甲酸酯(化合物3a)的制备
3a
将360 mg阿司匹林溶于二氯甲烷,冰浴下滴加2 当量草酰氯,再滴入一滴N,N-二甲基甲酰胺,继续搅拌6-8 h,旋干备用。取250 mg 2-溴乙醇溶于二氯甲烷,冰浴下加入303 mg三乙胺,随后滴加阿司匹林酰氯的二氯甲烷溶液,继续搅拌6 h,用薄层色谱监测反应。反应结束后,用二氯甲烷萃取,旋干溶剂,硅胶柱层析分离得淡黄色油状物 0.40 g,产率为70.2%。
实施例4. 2-叠氮基 2-乙酰氧基苯甲酸酯(化合物4a)的制备
4a
将实施例3所得的化合物3a (286 mg)溶于6 mLN,N-二甲基甲酰胺中,加入130 mgNaN3,加热至50 °C搅拌过夜,旋干,硅胶柱层析得 190 mg淡黄色油状物,产率为 76.3%。
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.04 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 7.8Hz, 1H), 7.33 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 4.8Hz, 2H), 3.59 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H).
实施例5.2-(4-(5-氧杂-5-((5-磺酰胺基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨基)戊基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙基2-乙酰氧基苯甲酸酯(化合物I-1)的制备
I-1
将60 mg化合物2溶于8 mL甲醇,加入8 mg醋酸铜,搅拌5 min,加入52 mg化合物4a,搅拌5 min,加入15 mg 抗坏血酸继续搅拌4 h,旋干,硅胶柱层析得 80 mg白色固体粉末,产率为 71.4%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 13.00 (s, 1H), 8.32 (br, 2H), 7.93 (s,1H), 7.82 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.69–7.60 (m, 1H), 7.42–7.32 (m, 1H), 7.21 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.61 (s, 2H), 2.69–2.59 (m, 2H), 2.59–2.50 (m,2H), 2.20 (s, 3H), 1.70–1.54 (m, 4H). 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6) δ 172.19,169.10, 164.26, 163.40, 161.13, 150.16, 146.66, 134.52, 131.16, 126.24,124.10, 122.50, 122.34, 63.27, 48.28, 34.55, 28.35, 24.67, 23.92, 20.65. HRMS(m/z) (ESI): calcd for C20H24N7O7S2 [M+H]+: 538.1173, found: 538.1116.
实施例6.2-溴乙基 2-(1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酸酯(化合物3b)的制备
3b
将716 mg吲哚美辛溶于10 mL 二氯甲烷,冰浴下滴加2当量草酰氯,再滴入一滴N,N-二甲基甲酰胺,继续搅拌6-8 h,旋干备用。取250 mg 2-溴乙醇溶于6 mL二氯甲烷,冰浴下加入303 mg三乙胺,随后滴加吲哚美辛酰氯的二氯甲烷溶液,继续搅拌6 h,用TCL监测反应。反应结束后,用二氯甲烷萃取,旋干溶剂,硅胶柱层析得淡黄色油状物 710 mg,产率为76.7%。
实施例7.2-叠氮乙基2-(1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酸酯(化合物4b)的制备
4b
将实施例6所得的化合物3b (463 mg)溶于8 mL N,N-二甲基甲酰胺,加入130 mgNaN3,加热至50 °C搅拌过夜,旋干,硅胶柱层析得370 mg淡黄色油状物,产率为 86.8%。
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 7.67–7.65 (m, 2H), 7.48–7.46 (m, 2H), 6.97(d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 9.0, 2.5 Hz,1H), 4.32–4.25 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.72 (s, 2H), 3.49–3.44 (m, 2H), 2.40(s, 3H).
实施例8.2-(4-(5-氧杂-5-((5-磺酰胺基-1,3,4-噻唑-2-基)氨基)戊基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙基 2-(1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酸酯(化合物I-2)的制备
I-2
将72 mg化合物2溶于8 mL无水甲醇,室温下加入9 mg醋酸铜,搅拌5 min,继续加入106mg化合物4b,搅拌5 min,再加入18 mg 抗坏血酸,室温下继续搅拌4 h,旋干,硅胶柱层析,得 135 mg白色固体粉末,产率为 75.8%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 12.98 (s, 1H), 8.29 (s, 2H), 7.69–7.62 (m,5H), 6.99 (s, 1H), 6.93 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.56(s, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.78–3.73 (m, 5H), 2.64–2.55 (m, 4H), 2.14 (s, 3H),1.65 (s, 2H), 1.56 (s, 2H). 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6) δ 170.12, 167.84,155.60, 146.69, 137.69, 135.49, 134.03, 131.25, 131.16, 131.09, 130.44,130.15, 129.13, 129.05, 128.97, 122.15, 121.96, 114.61, 112.35, 111.45,101.52, 62.79, 55.40, 48.36, 29.14, 28.35, 24.63, 23.98, 22.08, 13.10. ESI-MS(m/z): calcd for C30H30ClN8O7S2 [M-H]-: 713.1, found: 713.2.
实施例9.2-(4-(5-氧杂-5-((5-磺酰胺基-1,3,4-噻唑-2-基)氨基)戊基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙基 2-(4-异丁基苯基)丙酸酯(化合物I-3)的制备
I-3
制备方法同I-1,白色固体粉末,产率为 73.5%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 12.95 (s, 1H), 8.27 (s, 2H), 7.62 (s, 1H),7.25 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.32 (s,2H), 3.66–3.63 (m, 1H), 2.45–2.40 (m, 4H), 2.32 (s, 2H), 1.80–1.78 (m, 1H),1.55–1.52 (m, 4H), 1.49 (s, 3H), 0.88–0.86 (m, 6H). 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6)δ 171.25, 168.76, 153.15, 148.29, 138.72, 131.21, 129.43, 128.31, 128.18,120.90, 59.83, 51.32, 43.68, 41.26, 37.35, 30.28, 29.15, 28.32, 27.43, 21.96,13.54. ESI-MS (m/z): calcd for C24H34N7O5S2 [M+H]+: 564.2, found: 564.3.
实施例10.2-(4-(5-氧杂-5-((5-磺酰胺基-1,3,4-噻唑-2-基)氨基)戊基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙基 (S)-2-(6-甲氧基萘-2-基)丙酸酯(化合物I-4)的制备
I-4
制备方法同I-1,白色固体粉末,产率为 70.6%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 12.76 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 7.75 (d, J =8.8 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.33 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.32 (s,2H), 3.82 (s, 3H), 3.69–3.72 (m, 1H), 2.60–2.56 (m, 2H), 2.25 (s, 2H), 1.59–1.53 (m, 7H). 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6) δ 171.08, 168.76, 156.43, 155.87,151.85, 132.64, 132.26, 130.78, 129.07, 128.98, 128.65, 127.03, 126.04,122.54, 118.24, 105.52, 60.55, 55.28, 50.94, 40.69, 37.19, 31.86, 30.75,30.24, 13.77. ESI-MS (m/z): calcd for C25H30N7O6S2 [M+H]+: 587.2, found: 587.1.
实施例11.2-(4-(5-氧杂-5-((5-磺酰胺基-1,3,4-噻唑-2-基)氨基)戊基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙基 2-(2-((2,6-二氯苯基)氨基)苯基)乙酸酯(化合物I-5)的制备
I-5
制备方法同I-1,白色固体粉末,产率为 68.5%。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δ 12.87 (s, 1H), 9.52 (s, 1H), 8.34 (s, 2H),7.86 (s, 1H), 7.42 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.30–7.28 (m, 1H), 7.19–7.15 (m, 3H),6.83–6.81 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 2.57–2.54 (m,2H), 2.32 (s, 2H), 1.56–1.51 (m, 4H). 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6) δ 171.83,168.22, 156.88, 151.57, 140.75, 134.92, 131.26, 129.38, 127.21, 127.08,126.96, 126.43, 124.19, 123.54, 119.34, 118.65, 60.61, 50.91, 37.75, 35.08,30.72, 30.32, 29.18. ESI-MS (m/z): calcd for C25H27Cl2N8O5S2 [M+H]+: 653.1,found: 653.0.
试验例1.化合物I-1和I-2对缺氧造模的心肌细胞H9c2的细胞作用
(a)药品与试剂
CCK-8检测试剂盒(碧云天生物技术有限公司,上海),阿司匹林、吲哚美辛、乙酰唑胺、DMEM培养基、胎牛血清、PBS。
(b)实验原理
CCK-8包含WST-8和电子载体1-甲氧基PMS,WST-8被细胞内脱氢酶还原生成水溶性橙黄色甲瓒并溶解在细胞培养液中,甲瓒含量与活细胞的数量成正比。用酶标仪测定450 nm处甲瓒的吸光度,并通过吸光度值计算细胞活力的变化。
(c) 实验操作
(1)在96孔板中,用含10%胎牛血清的DMEM培养液培养心肌细胞,待细胞贴壁后,分别给予不同浓度的阿司匹林As、吲哚美辛Y、乙酰唑胺Ac、化合物I-1或化合物I-2,常氧培养2 h;
(2)将细胞至于三气培养箱中缺氧(1% O2)造模4 h;
(3)取出96孔板,每孔加入10 μL CCK8后置于普通培养箱培养1-2 h,酶标仪检测。
(d) 实验结果
如图1、图2所示,在缺氧条件下,阿司匹林As和吲哚美辛Y对细胞活力几乎没有改善作用,而经碳酸酐酶9抑制剂乙酰唑胺衍生的化合物I-1和I-2均能显著提高细胞活力,I-1在较低浓度时仍能发挥作用。
试验例2.化合物I-1和I-2对缺氧造模的心肌细胞H9c2中碳酸酐酶9的表达调节作用
(a)药品与试剂
Western Blot专用细胞裂解液,Western Blot制胶试剂盒(碧云天生物技术有限公司,上海)、蛋白定量用BCA检测试剂盒(碧云天生物技术有限公司,上海),电离缓冲液、湿转液、一抗(anti-CAIX, proteintech, 1:500, 11071-1-AP; anti-GAPDH, BioworldTechnology, 1:500, AP0063)、二抗(Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) HRP, 1:3000,Bioworld Technology, BS13278)。
(b)实验原理
根据Western Blot条带分析蛋白表达水平的变化。
(c) 实验操作
(1)利用细胞裂解液提取蛋白,12000转离心15 min收集蛋白,用BCA试剂盒对蛋白进行定量,加入loading buffer沸水中煮5 min备用;
(2)制备SDS-PAGE胶,上样分离蛋白条带;
(3)将蛋白条带转移到PVDF膜后,牛奶封闭、依次孵一抗、二抗,利用化学发光显影仪可视化蛋白条带,由此分析各组蛋白表达的变化。
(d) 实验结果
如图3、图4所示,在常氧条件下,碳酸酐酶9在心肌细胞中表达较低,而在缺氧条件下表达显著升高,化合物I-1和I-2均能抑制碳酸酐酶9的过表达。
试验例3.化合物I-1对心肌缺氧小鼠的心肌损伤改善作用
(a)药品与试剂及实验动物
TTC染色液,PBS,6-8周雄性昆明小鼠。
(b)实验原理
TTC是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体。与正常组织中的脱氢酶反应呈红色,而在缺血组织中的脱氢酶活性下降呈白色。
(c)实验操作
(1)小鼠心脏分离后,用1%三苯基四唑氯(TTC)染色;
(2)用PBS洗涤心脏,切成5片,37℃水浴TTC溶液染色15 - 30 min,显微镜下拍照,计算心肌梗死面积百分比。
(d) 实验结果
如图5、图6所示,与空白组相比,异丙肾上腺素ISO造模的小鼠缺血面积明显增多,而经化合物I-1预处理的小鼠缺血面积显著减少,效果优于等浓度的阿司匹林组。
Claims (8)
2.根据权利要求1所述的乙酰唑胺衍生物I,其特征在于,所述的失去一个羧酸质子的非甾体抗炎药为阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生、双氯芬酸、菲诺洛芬、氟比洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、甲芬那酸、奥沙普秦、双水杨酯、舒林酸或托美汀中的任意一种。
5.根据权利要求4所述的乙酰唑胺衍生物I的合成路线,其特征在于,所述的乙酰唑胺衍生物I的制备方法,是将乙酰唑胺与含羧酸基团的非甾体抗炎药通过连接基团键连得到一类乙酰唑胺衍生物I,其合成步骤如下:
步骤1.将乙酰唑胺酸性水解得化合物1;
步骤2.将化合物1和6-庚炔酸反应得化合物2;
步骤3.将含羧酸基团的非甾体抗炎药NSAID-COOH与2-溴乙醇反应得化合物3;
步骤4.将化合物3和叠氮化钠反应得化合物4;
步骤5.将化合物2和化合物4反应得乙酰唑胺衍生物I;
其中,化合物1-4和乙酰唑胺衍生物I的结构如权利要求4所述的合成路线所示。
6.根据权利要求5所述的乙酰唑胺衍生物I的制备方法,其特征在于,所述的乙酰唑胺衍生物I的合成路线中,当非甾体抗炎药为阿司匹林时,所得乙酰唑胺衍生物为I-1;当非甾体抗炎药为吲哚美辛时,所得乙酰唑胺衍生物为I-2;当非甾体抗炎药为布洛芬时,所得乙酰唑胺衍生物为I-3;当非甾体抗炎药为萘普生时,所得乙酰唑胺衍生物为I-4;当非甾体抗炎药为双氯芬酸时,所得乙酰唑胺衍生物为I-5;其中,I-1、I-2、I-3、I-4和I-5的结构如权利要求1和权利要求3所定义。
7. 根据权利要求5 所述的乙酰唑胺衍生物I的制备方法,其特征在于,
所示的合成路线中的反应条件如下:
条件(i)中,反应温度为85°C,反应时间为4-6 h;
条件(ii)中,反应体系中还包括吡啶,所述化合物1、6-庚炔酸和吡啶的摩尔比为1:1.1:2,反应温度为0°C,反应时间为6 h;
条件(iii)中,反应体系中还包括三乙胺,所述阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生或双氯芬酸非甾体抗炎药与2-溴乙醇、三乙胺的摩尔比为1:1:1.5,反应温度为0°C,反应时间为6 h;
条件(iv)中,所述化合物3和叠氮化钠的摩尔比为1:2,反应温度为50°C,反应时间为10-12 h;
条件(v)中,反应体系中还包括抗坏血酸,所述化合物2、化合物4、醋酸铜和抗坏血酸的摩尔比为1:1:0.2:0.4,反应温度为室温,反应时间为4 h;
其中,化合物1-4的结构如权利要求4所述的乙酰唑胺衍生物I的合成路线所示。
8.一种如权利要求1所述的乙酰唑胺衍生物I在制备治疗冠心病药物中的应用,其特征在于,所述乙酰唑胺衍生物I具有良好的抑制碳酸酐酶9的活性,可在缺氧微环境中有效改善心肌缺氧损伤,应用在制备治疗心肌缺氧损伤类疾病药物中。
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