CN111937895B - 含吡唑醚菌酯及其组合物在防治桃枝枯病中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了含吡唑醚菌酯的组合物，所述组合物包括吡唑醚菌酯和生物农药，所述生物农药为中生菌素或申嗪霉素，所述吡唑醚菌酯和生物农药质量比为1:1～3:1。本发明还公开了防控桃枝枯病的复合制剂，所述复合制剂包括吡唑醚菌酯或所述的含吡唑醚菌酯的组合物。本发明还公开了吡唑醚菌酯或所述的含吡唑醚菌酯的组合物或所述的复合制剂在防治桃枝枯病中的应用。本发明吡唑醚菌酯与生物农药中生菌素或申嗪霉素复配对桃枝枯病菌具有毒力增效作用，能有效防治桃枝枯病，因此可以研发新型复配剂或直接混合使用，减少化学农药用量，延缓抗药性产生，用于桃枝枯病的绿色防治。

Description

含吡唑醚菌酯及其组合物在防治桃枝枯病中的应用
技术领域
本发明涉及植物病害的防治，属于植物保护学科中的生物防治和化学防治研究与应用领域，具体涉及含吡唑醚菌酯及其组合物在防治桃枝枯病中的应用。
背景技术
桃枝枯病又名缢缩性溃疡病，是近几年来我国南方桃产区发生与危害严重的一种真菌病害，严重影响桃树生长和果实产量。近几年，我国南方桃主产区，如江苏无锡、常州、浙江嘉兴、上海南汇、云南昆明、四川成都等地，该病害开始出现并不断蔓延，给桃产业发展造成了严重影响。目前，该病害在南方多个桃产区已成为危害桃产业的主要病害，发病桃树平均损失20-50％，部分发病比较严重的桃树面临绝收的风险。化学防治是控制该病的主要手段，如喷施多菌灵、咪鲜胺及三唑类杀菌剂苯醚甲环唑等，然而果园常年施用会使病菌产生抗药性，增加农药用量，污染环境和破坏生态平衡。生物防治因对人畜安全、环境兼容性好、病菌不易产生抗药性，引起了人们广泛的关注，但其也存在田间药效慢、防效不稳定等问题。而生物与化学农药相结合的防治策略既能有效控制病虫害，又能降低化学农药使用量，符合我国农药减量化政策。
生物农药：中生菌素是中国农科院生防所研制的一种农用抗生素，是由淡紫灰链霉菌海南变种发酵制成，属于糖苷类抗生素。是一种杀菌谱较广的保护性杀菌剂，具有触杀、渗透作用。中生菌素对农作物的细菌性病害及部分真菌性病害具有很高的活性，同时可提高植物的抗病能力。使用安全，开始在苹果、葡萄等果树病害防治上应用。
申嗪霉素是上海交通大学生命科学与技术学院与上海农乐生物制品股份有限公司合作开发的新型微生物源绿色农药，是由荧光假单胞菌M18发酵产生的一种抗菌素——吩嗪-1-羧酸，具有广谱抑制植物病原真菌并促进植物生长作用的双重功能，具有广谱、高效的特点，2011年获得农药登记证，已用于多种农作物真菌病害防控，防效显著。
化学农药：目前产区连年使用多菌灵等化学农药防治桃枝枯病，但申请人前期研究发现田间已出现抗多菌灵菌株，多菌灵防效降低，生产上也出现了增加多菌灵用量喷施防治的现象。因此有必要筛选出其他可有效防治桃枝枯病的化学农药。
吡唑醚菌酯化学名称为N-[2-[[1-(4-氯苯基)吡唑-3-基]氧甲基]苯基]-N-甲氧基氨基甲酸甲酯，是一种新型的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，为线粒体呼吸抑制剂，对多种植物病原真菌具有显著的抗菌活性，能抑制病菌孢子萌发和叶片内菌丝的生长。对作物病害具有保护、治疗作用。是1993年巴斯夫公司发现的含吡唑结构的strobin类杀菌剂，2002年上市。高效、广谱、低毒，且对环境安全、友好。
发明内容
发明目的：为了减少化学农药使用，有效防治桃枝枯病，本发明提供了含吡唑醚菌酯的组合物。
本发明还提供了一种防控桃枝枯病的复合制剂、防治方法及应用，化学农药和生物农药可直接混合使用或研制成剂型，生产不同复合物交替轮换使用。通过复配我们不仅能够减少化学农药的使用量，减少环境压力，还能够提高对桃枝枯病的防效。
技术方案：为了解决上述技术问题，本发明提供了含吡唑醚菌酯的组合物，所述组合物包括吡唑醚菌酯和生物农药，所述吡唑醚菌酯和生物农药质量比为1∶1～3∶1，所述生物农药为中生菌素或申嗪霉素。
其中，作为优选地，所述吡唑醚菌酯和生物农药质量比为1∶1、1∶3或3∶1。
其中，所述吡唑醚菌酯为吡唑醚菌酯乳油、所述中生菌素为中生菌素可湿性粉剂，所述申嗪霉素为申嗪霉素悬浮剂。
其中，作为优选地，所述吡唑醚菌酯为250g/L的吡唑醚菌酯乳油、所述中生菌素为3％中生菌素可湿性粉剂，所述申嗪霉素为1％申嗪霉素悬浮剂。
本发明的两种制剂可以直接混合使用，也可研发成复配剂使用，如研发成悬浮剂，或可湿性粉剂等等。
本发明内容还包括一种防控桃枝枯病的复合制剂，所述复合制剂包括吡唑醚菌酯或所述的含吡唑醚菌酯的组合物。
其中，所述复合制剂的剂型为可湿性粉剂、乳油、悬浮剂或水分散粒剂中的一种。
本发明内容还包括吡唑醚菌酯或所述的含吡唑醚菌酯的组合物或所述的复合制剂在防治桃枝枯病中的应用其中，所述吡唑醚菌酯和生物农药质量比为1∶1、1∶3或3∶1。
本发明吡唑醚菌酯与生物农药中生菌素复配三个比例均具有增效作用，有防治桃枝枯病的潜力。室内毒力测定表明吡唑醚菌酯与申嗪霉素1∶1和3∶1复配对桃枝枯病菌毒力具有增效作用，1∶3复配比也具有相加作用。
吡唑醚菌酯为本发明申请人实验室筛选出的对桃枝枯病有较好防治效果的化学农药，可替代生产上防治桃枝枯病的多菌灵等化学农药，或交替使用。申请人前期研究已发现田间已出现对多菌灵产生抗性的桃枝枯病菌。使用本发明的含有吡唑醚菌酯的组合物可有效防治桃枝枯病，减少吡唑醚菌酯使用量，降低选择压力，可避免病菌对吡唑醚菌酯产生抗性。
有益效果：相比于现有技术，本发明具备以下优点：化学农药吡唑醚菌酯与生物农药中生菌素或申嗪霉素复配对桃枝枯病菌具有毒力增效作用，能有效防治桃枝枯病，因此可以研发新型复配剂或直接混合使用，减少化学农药用量，延缓抗药性产生，用于桃枝枯病的绿色防治。
附图说明
图1是吡唑醚菌酯与生物农药不同复配比对桃枝枯病的抑制效果。图注：A、CK；B、吡唑醚菌酯；C、中生菌素；D、申嗪霉素；E、吡唑醚菌酯与中生菌素1∶1复配液；F、吡唑醚菌酯与中生菌素1∶3复配液；G、吡唑醚菌酯与中生菌素3∶1复配液；H、吡唑醚菌酯与申嗪霉素1∶1复配液；I、吡唑醚菌酯与申嗪霉素1∶3复配液；J、吡唑醚菌酯与申嗪霉素3∶1复配液。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案进行进一步说明。
实施例1吡唑醚菌酯对桃枝枯病的防效
选择吡唑醚菌酯以及目前生产上常用于防治枝枯病的化学杀菌剂多菌灵、咪鲜胺和烯唑醇等进行田间小区防治试验，设5个处理，分别是250g/L吡唑醚菌酯乳油稀释1000倍液、50％多菌灵可湿性粉剂稀释500倍液、45％咪鲜胺悬浮剂稀释900倍液、12.5％烯唑醇可湿性粉剂稀释750倍液和清水对照。试验桃园选择在江苏无锡阳山镇寺前村无锡太湖阳山水蜜桃科技有限公司水蜜桃基地，从桃萌芽期开始进行防治，共进行4次药剂防治，每次间隔约14d，分别于最后1次药后15d和40d进行病枝率调查[病枝率(％)＝病枝数/调查枝条数×100]，计算防治效果(％)[＝(对照病枝率-处理病枝率)/对照病枝率×100)]，数据采用SPSS16.0软件和Duncan氏新复极差法进行统计分析。
田间试验结果表明(表1)，吡唑醚菌酯对桃枝枯病的防效最好，药后15d和40d防效分别为60.50％和72.99％，其次是多菌灵和咪鲜胺，防效为48.17％～58.00％。药后15d吡唑醚菌酯与多菌灵和咪鲜胺对桃枝枯病的防效差异不显著，药后40d吡唑醚菌酯对桃枝枯病防效显著高于多菌灵、咪鲜胺和烯唑醇。由此可见，吡唑醚菌酯对桃枝枯病具有较好的防治效果，未来可以成为多菌灵等常用杀菌剂的替代药剂或交替施用，用于桃枝枯病的防治。
表1吡唑醚菌酯杀菌剂对桃枝枯病的田间防效
Figure BDA0002640003270000041
注：同列不同的小写字母表示经Duncan氏新复极差法检验在P＜0.05水平差异显著。
实施例2吡唑醚菌酯与生物农药复配对桃枝枯病菌的联合毒力
(1)单剂毒力测定
在无菌条件下，将不同浓度的吡唑醚菌酯、中生菌素和申嗪霉素配制好，根据菌丝生长速率法，桃枝枯病菌(Phomopsis amygdali)在PDA平板上25℃培养5d后，用打孔器在菌落边缘打直径为6mm的菌饼，用挑针分别接种到不同药剂处理的培养基平板中央(注：待溶化后的培养基温度降低至50℃以下时加入药剂，以保证药剂的最佳效果)，在25℃条件下培养5d后，用十字交叉法测量菌落直径，每个处理重复3次，清水处理作为对照。计算出不同浓度药剂对病菌菌丝生长的抑制率[菌丝生长抑制率＝(对照菌落生长直径-处理菌落生长直径)/对照菌落生长直径×100％]。对药剂浓度对数(横坐标)及对应的菌丝生长抑制率转换的机率值(纵坐标)进行回归分析，按毒力回归方程y＝ax+b计算药剂抑制菌丝生长的有效中浓度(EC50)作为毒力参数。毒力测定结果表明，吡唑醚菌酯、中生菌素和申嗪霉素三种单剂对桃枝枯病菌均有较好的抑制效果，EC50值分别为1.6533μg/mL、1.2749μg/mL和0.4501μg/mL(表2)，开展后续的复配联合毒力测定。
(2)复配药剂毒力测定
本发明的三种药剂吡唑醚菌酯、中生菌素、申嗪霉素使用的是原药或商品制剂，分别为95％吡唑醚菌酯原药、3％中生菌素可湿性粉剂或1％申嗪霉素悬浮剂。
将95％的吡唑醚菌酯原药用适量丙酮溶解，后用无菌水稀释成母液(一般稀释到104μg/mL)。
设置复配组合：1)吡唑醚菌酯原药与中生菌素按1∶1、1∶3和3∶1三个质量比例制成复配剂；2)吡唑醚菌酯原药与申嗪霉素按1∶1、1∶3和3∶1三个质量比例制成复配剂。
将桃枝枯病菌直径6mm菌饼接于含不同浓度复配剂的PDA平皿中央，在25℃条件下培养5d后测量菌落直径，每个处理重复3次，不含任何药剂的处理作为对照。计算各复配剂对病菌菌丝生长的抑制率。按照上述回归分析方法计算获得各配比混剂对病菌菌丝生长的有效抑制中浓度EC50值。根据下列公式评价A与B混合后的联合毒力作用，计算SR(增效比)：
Figure BDA0002640003270000051
式中a、b为单剂A、B在混剂中的比例；EC(A)50、EC(B)50分别为A、B单剂的EC50实测值；EC50(th)为混剂的EC50理论值；EC50(ob)为混剂的EC50实测值。SR表示A、B单剂混合后的相互作用：当SR＜0.5时为拮抗作用；当SR＝0.5～1.5，为相加作用；当SR＞1.5时，为增效作用。
结果由表2可知，吡唑醚菌酯与中生菌素在1∶1、1∶3和3∶1的质量配比下SR值均大于1.5，对桃枝枯病菌的联合毒力均表现为增效作用。吡唑醚菌酯与申嗪霉素与在1∶1和3∶1的质量配比下对桃枝枯病菌表现了较强的增效作用，在1∶3的配比下SR值为1.22，表现为相加作用。因此化学农药吡唑醚菌酯与生物农药中生菌素和申嗪霉素复配可以达到增效作用，具有防治桃枝枯病的潜力。这些结果说明了利用吡唑醚菌酯与中生菌素、申嗪霉素复配来防治桃枝枯病是可行的，且可以减少化学农药吡唑醚菌酯使用量，减缓田间病菌抗药性产生。
表2吡唑醚菌酯与生物农药复配对桃枝枯病菌的联合毒力
Figure BDA0002640003270000052
Figure BDA0002640003270000061
实施例3吡唑醚菌酯与生物农药复配对桃枝枯病抑制效果
(1)离体接种病害抑制效果
将桃枝枯病菌在PDA培养基、25℃培养箱中培养至桃枝枯病菌产生分生孢子器，成熟后收集分生孢子，以无菌水稀释，血球计数板测量分生孢子浓度，配制成1×106个/mL分生孢子悬浮液备用。
本发明的三种药剂吡唑醚菌酯、中生菌素、申嗪霉素均使用的是商品制剂，分别为250g/L吡唑醚菌酯乳油、3％中生菌素可湿性粉剂或1％申嗪霉素悬浮剂。
将吡唑醚菌酯、中生菌素、申嗪霉素按照推荐用量稀释后，制备吡唑醚菌酯分别与中生菌素、申嗪霉素在1∶1、1∶3和3∶1质量比例下的复配剂。
选择绿色、健康、大小相近的桃树新梢枝条，采集回实验室后用灭菌的剪刀去除枝叶并剪成长度为10cm的枝条。然后在超净台中用75％酒精进行消毒、无菌水冲洗3次，并用灭菌干燥纱布吸干水分备用。
用注射器吸取1mL上述配制的分生孢子悬浮液，依次针刺接种到上述经过处理的桃枝中部，接种完成后，在室内晾干60min，后将适量制备的复配药剂用喷瓶喷雾到枝条接种部位，以喷施无菌水为空白对照，每个处理3次重复。喷施完成后将枝条放置在经消毒、以含无菌水的灭菌纱布铺垫、保鲜膜密封的搪瓷浅盆中，于25℃培养箱中培养，5d后利用“十字交叉法”测量接种部位病斑长、短径，计算病斑面积：病斑面积(mm2)＝1/4×π×长径×短径。
由表3可知，吡唑醚菌酯与中生菌素复配施用，与单剂吡唑醚菌酯和中生菌素喷施相比，病斑面积显著减少(图1)，其中在1∶3质量比例下病斑抑制率最高，达86.58％，该比例的室内毒力增效系数也是最大的，同时复配药剂的有效成分浓度显著低于单剂的浓度，因此与中生菌素复配能达到减量使用吡唑醚菌酯，增加防效的目的。
由表4可知，吡唑醚菌酯与申嗪霉素在1∶1及3∶1的质量比例下复配后，病斑面积显著小于单剂吡唑醚菌酯和申嗪霉素及1∶3质量比例下的病斑面积(图1)，病斑抑制率即防效分别为86.43％和87.59％，1∶3质量比例下的防效与单剂差异不显著，但使用浓度明显低于单剂浓度，达到减量化学农药的目的。
在接种防治试验中，三种单剂的病斑面积差异不显著，但化学农药吡唑醚菌酯与中生菌素或申嗪霉素复配后，显示出显著的病斑抑制率，与室内毒力测定结果相符和，同时复配药剂的有效成分浓度也明显低于单剂有效成分浓度，因此吡唑醚菌酯与生物农药复配不仅可以减少药剂使用量，包括化学农药和生物农药，同时还能具有增效防治的作用。
表3吡唑醚菌酯与中生菌素复配对桃枝枯病的抑制作用
Figure BDA0002640003270000071
注：表中数据为5d时的病斑面积，不同的小写字母表示经Duncan氏新复极差法检
验在P＜0.05水平差异显著。
表4吡唑醚菌酯与申嗪霉素复配对桃枝枯病的抑制作用
Figure BDA0002640003270000072
Figure BDA0002640003270000081
注：表中数据为5d时的病斑面积。不同的小写字母表示经Duncan氏新复极差法检
验在P＜0.05水平差异显著。
(2)田间小区防治试验效果
本发明的三种药剂吡唑醚菌酯、中生菌素、申嗪霉素均使用的是商品制剂，分别为250g/L吡唑醚菌酯乳油、3％中生菌素可湿性粉剂和1％申嗪霉素悬浮剂。在江苏无锡阳山镇寺前村田间选择桃树进行了250g/L吡唑醚菌酯乳油、3％中生菌素可湿性粉剂、1％申嗪霉素悬浮剂、吡唑醚菌酯与中生菌素1∶1质量比复配混液、吡唑醚菌酯与申嗪霉素1∶1质量比复配混液的防治试验处理，以及清水对照。每处理3棵桃树。结果表明2次药后10d，吡唑醚菌酯分别与生物农药中生菌素和申嗪霉素复配的防效为80.4％～86.1％，显著高于单剂吡唑醚菌酯(70.6％)、中生菌素(67.3％)和申嗪霉素(71.8％)的防治效果。因此，本申请的吡唑醚菌酯与生物农药复配可用于桃枝枯病田间防治，具有显著的效果。

Claims (1)

1.含吡唑醚菌酯的组合物或复合制剂在防治桃枝枯病中的应用，其特征在于，所述含吡唑醚菌酯的组合物包括吡唑醚菌酯和申嗪霉素；所述吡唑醚菌酯和申嗪霉素质量比为3:1；所述复合制剂的剂型为可湿性粉剂、乳油或悬浮剂中的一种。
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熊彩珍 等.桃枝枯病防治药剂比较试验.《浙江农业科学》.2013,(第6期),第713-715页. *
生物农药与化学农药复配对桃枝枯病菌的毒力;尤春梅 等;《安徽农业科学》;20160802;第44卷(第15期);第152-154页 *

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