CN111879840A - 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法 - Google Patents

子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111879840A
CN111879840A CN202010800795.XA CN202010800795A CN111879840A CN 111879840 A CN111879840 A CN 111879840A CN 202010800795 A CN202010800795 A CN 202010800795A CN 111879840 A CN111879840 A CN 111879840A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hdl
density lipoprotein
sample
preeclampsia
detecting
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN202010800795.XA
Other languages
English (en)
Inventor
邓杏飞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Ardent Biomed Technology Co ltd
Original Assignee
Guangdong Ardent Biomed Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Ardent Biomed Technology Co ltd filed Critical Guangdong Ardent Biomed Technology Co ltd
Priority to CN202010800795.XA priority Critical patent/CN111879840A/zh
Publication of CN111879840A publication Critical patent/CN111879840A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/447—Systems using electrophoresis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/36—Gynecology or obstetrics
    • G01N2800/368—Pregnancy complicated by disease or abnormalities of pregnancy, e.g. preeclampsia, preterm labour

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，包括以下步骤：预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒，获取血样样本，使用高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒对待测血样进行检测；将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血样置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组分。本结构提高对子痫前期的判断准确度。

Description

子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法
技术领域
本发明涉及一种医学分析的技术领域，尤其是一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法。
背景技术
HDL是一组大小不同、成分各异的异质性颗粒，包含大约等量的脂质(胆固醇和磷脂)和蛋白质，主要由肝脏和小肠分泌，其中70％～80％来自于肝脏，是循环系统中HDL的主要来源。HDL颗粒的密度范围介于1063～1210g/L之间，直径大约5～17nm。根据所含的脂质、载脂蛋白(apolipoprotein，Apo)、酶和脂质转运蛋白的不同及亚组间颗粒的密度、大小、电荷等差异，再以不同物理和化学方法，可产生不同的亚组分类方法，比如:根据密度，可分为HDL-2(密度1063～1125g/L)和HDL-3(密度1125～1210g/L)；根据电泳迁移率，可分为α-HDL和pre-β-HDL；根据电泳迁移率与颗粒大小，可分为HDL-2b(9.7～12nm)、HDL-2a(8.8～9.7nm)、HDL-3a(8.2～8.8nm)、HDL-3b(7.8～8.2nm)、HDL-3c(7.2～7.8nm)等。近期的蛋白质组学研究发现，在HDL中有多达数十种蛋白质存在，并有各自的生理功能，如作为HDL主要成分的ApoA1、参与调节ApoA1空间构象的ApoA2、可促进HDL功能的ApoM、拮抗ApoA1功能的血浆淀粉样蛋白A等。
研究证实高密度脂蛋白HDL水平与2型糖尿病、脂类紊乱、动脉粥样硬化等呈反比关系。体内输入重组高密度脂蛋白可以增加2型糖尿病患者胰腺B细胞的功能，如增加血浆胰岛素水平同时降低葡萄糖水平，高密度脂蛋白也可以减少应激导致的胰腺B细胞凋亡而抵抗糖尿病的发生，胰腺B细胞脂调节异常是其功能障碍的主要原因。动物实验表明用他汀类药物减少B细胞内胆固醇含量或用甲基-β-环糊精增加胆固醇消耗，均能明显改善胰腺分泌胰岛素功能。这些研究结果表明，高密度脂蛋白介导的胰腺细胞内胆固醇的流出可以增加胰岛素的分泌，而且ATP结合转运蛋白ATP结合盒转运蛋白A1及ATP结合盒转运蛋白G1在调节p细胞内胆固醇稳定及胰岛素分泌方面有重要作用。因此，高密度脂蛋白可以通过直接刺激胰岛素分泌或降低胰腺胆固醇的积聚而改善胰腺B细胞的分泌功能。
子痫前期(pre-eclampsia，PE)是指妊娠20周以后出现的新发高血压伴多系统受累和损害的综合征。在世界范围内，每年子痫前期可造成大于50万新生儿和胎儿以及大于7万孕产妇死亡，全球发病率约2％～8％。影响子痫发病的病理生理机制与孕妇的激素水平和生理改变导致血管内皮损伤,血管壁炎症收缩,血液流变学和凝血功能改变,出现高血压,蛋白尿或血尿等；而重度子痫前期可继发出现溶血、肝酶升高、血小板减少,甚至子痫发作等，即HELLP综合征，导致全身多个系统器官损害。病因至今尚不清楚，可导致严重的母儿并发症。除终止妊娠外，无有效治疗方法。现有的治疗是为了控制病情，争取延长孕周，经过多次研究表明孕前及孕期的脂代谢和脂肪酸代谢异常在某些子痫前期发生发展中发挥了重要作用。高密度脂蛋白(HDL)颗粒表面含有多种脂蛋白与血管内皮细胞和免疫细胞直接作用,保护血管内皮功能和调节免疫细胞,起到抗血凝,抗氧化应激和炎症反应作用。但是HDL是由功能不同的亚组份构成,而且虽然HDL总浓度通常比较恒定,但是HDL亚组份与机体病理生理改变而动态改变；因而精确分离和分析HDL亚组份在预测子痫前期的发生和治疗效果检测中有重要作用。
螺旋动脉的重铸涉及母体对生长发育的胎儿营养物质的供给及气体的交换，此过程的障碍将导致FGR及子痫前期等并发症的发生。蜕膜NK细胞是子宫着床位点最主要的白细胞，相较于循环中的NK细胞，其对滋养细胞没有细胞毒性，在正常妊娠早期可通过分泌白细胞介素－8(interleukin 8，IL-8)、白细胞介素－10(interleukin 10，IL-10)等趋化因子以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、胎盘生长因子PLGF等促进滋养细胞的侵袭、螺旋动脉的重铸。在生理性缺氧的情况下，PlGF有助于滋养细胞和内皮细胞的增殖，其与HDL-胆固醇(HDL-C)主要呈负相关关系。
此外，被补体系统激活的中性粒细胞在母胎界面的募集将会引起肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha，TNF-α)水平升高，抗原抗体反应的补体在毛细血管周围的过度沉积，继而造成VEGF等血管生成因子减少，导致螺旋动脉重铸障碍造成胎盘形成不良及母体血管低灌注，诱发子痫前期的发生。最终导致胎盘形成不良及流产等。而抑制补体的激活或减少中性粒细胞乃至减少TNF-α的产生，都将会促进螺旋动脉的重铸并改善妊娠结局。
而HDL存在如C3、C4A、C4B、C9等多种补体蛋白和蛋白酶抑制剂，通过调节补体系统的活化参与固有免疫，其不同亚组分携带补体蛋白含量及蛋白酶抑制剂含量差异在与PIGF的关联性以及与PE的关联性亦不同。因此如何检测高密度脂蛋白HDL亚组分与子痫前期存在潜在关系显得尤为重要。
发明内容
本发明的目的是为了解决上述现有技术的不足而提供一种提高对子痫精确确定的一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法。
为了实现上述目的，本发明所设计的一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，包括以下步骤：
S1、预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒，获得待测血样，使用高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒对待测血样进行检测高密度脂蛋白HDL亚组分；
S2、在石英基片的微细通道中，以电场为驱动力，借助于离子或分子在电迁移或分配行为上的差异，对血样样本中高密度脂蛋白的多种亚组分进行高速分离分析的技术，具体将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；
S3、向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血样置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组份；
S4、通过检测与脂蛋白结合的荧光染料，形成每个样品的荧光信号强度比迁移时间的电泳迹线，然后通过数据分析软件分析电泳图谱，计算HDL-2B、HDL-3亚组份的峰面积占整个HDL-C峰面积的比例，即得HDL-2B、HDL-3的百分比含量，最终与参考正常血样的HDL-2B、HDL-3百分比含量进行对比，当HDL-2B、HDL3百分比含量超出正常范围，同时检测待测血样样本中的胎盘生长素含量以及血清TC、TG、LDL-C的含量与设有含量进行对比；当血清TC、TG、LDL-C含量同步增加，且血压均在子痫病例范围内，另外PLGF含量降低到预设范围，认定为子痫前期。
进一步，在步骤S3中的微流控电泳芯片需要在10～30℃空间内进行储存。
进一步，在步骤S2中的荧光染料需要在2～8℃中密封避光保存，在步骤S3中凝胶染料需要在2～8℃中密封避光保存。
进一步，在步骤S1中血样样本采集的具体步骤如下：按临床实验室常规方法采集血液，采集后的血液室温放置30-60min后，在4℃条件下1000g离心15min，小心收集上层血清或血浆。
进一步，其特征在于在步骤S3中微流控电泳芯片的操作步骤如下：
S3-1、将S端施加高压，SW、B、BW接地，然后将血清样品溶液从S池流向SW池；
S3-2、一段时间后，血清样品溶液将充满微流控电泳芯片十字口通道，这时切换电极，B接低压，BW接高压，位于微流控电泳芯片十字通道的血液样品溶液的流向为B到BW，这就实现了血清样品溶液的分离，并在分离通道出口端前装有检测器，由于血液样品溶液组分的淌度不同，它们的迁移速度不同，因而经过一定时间后，各组分将按其速度或淌度大小顺序依次到达检测位置；
S3-3、当光照射到光阴极时，光阴极向真空中激发出光电子，这些光电子按聚焦极电场进入倍增系统，并通过进一步的二次发射得到倍增放大，然后把放大后的电子用阳极收集作为信号输出；
S3-4、检测器将光信号转换为电信号被检出，得到按时间分布的电泳谱图。
进一步，所述的检测器由光电发射阴极和聚焦电极、电子倍增极及电子收集极组成。
进一步，所述微流控电泳芯片的使用环境温度范围5℃—40℃，使用环境湿度：5％—80％；使用环境的外接电源为100-240V，频率为50/60Hz，功率要求为120VA。
进一步，在步骤S4中，由于子痫前期脂代谢紊乱中以TG水平增高最为显著，TG水平增高与子痫前期发生风险增高相关，也早已将血浆TG作为子痫前期的一项预测指标，因此高TG血症通过脂质交换使低密度脂蛋白胆固醇升高、高密度脂蛋白胆固醇降低，三者代谢关系密切，因此如果其中与脂质代谢密切相关的载脂蛋白apo-AI与apo-AIV在HDL3中表达显著高于HDL2，即认定为子痫前期。
本发明提供的一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，利用预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分检测试剂盒，获得待测血样，将待测血样样本放入到高密度脂蛋白HDL亚组分检测试剂盒中进行检测；在石英基片的微细通道中，以电场为驱动力，借助于离子或分子在电迁移或分配行为上的差异，对血样样本中的多种组分进行高速分离分析的技术，具体将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血样置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组份；通过检测与脂蛋白结合的荧光染料，形成每个样品的荧光信号强度比迁移时间的电泳迹线，然后通过数据分析软件分析电泳图谱，计算HDL-2B、HDL-3亚组份的峰面积占整个HDL-C峰面积的比例，即得HDL-2B、HDL-3的百分比含量，最终与参考正常血样的HDL-2B、HDL-3百分比含量进行对比当HDL-2B百分比低于正常范围或HDL-3百分比高于正常范围，同时检测待测血样样本中的胎盘生长素含量以及血清TC、TG、LDL-C的含量与设有含量进行对比；当血清TC、TG、LDL-C含量同步增加，且血压均在子痫病例范围内，另外PLGF含量降低到预设范围，认定为子痫前期。最终通过对高密度脂蛋白亚组份的精准分析结合常规血压测量以及通过HDL亚组分和胎盘生长激素搭配检测来同步判断方法来确定是否子痫病的方法，提高测量准确度。
附图说明
图1为微流控电泳芯片中分离的具体走向示意图。
图2为HDL亚组份分离效果图。
具体实施方式
下面结合实施例对发明创造作作为优选考虑说明。
实施例1：
如图1、图2所示，本实施例提供的一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，包括以下步骤：
S1、预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒，获得待测血样，使用高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒对待测血样进行检测高密度脂蛋白HDL亚组分；
S2、在石英基片的微细通道中，以电场为驱动力，借助于离子或分子在电迁移或分配行为上的差异，对血样样本中高密度脂蛋白的多种亚组分进行高速分离分析的技术，具体将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；
S3、向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血样置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组份；
S4、通过检测与脂蛋白结合的荧光染料，形成每个样品的荧光信号强度比迁移时间的电泳迹线，然后通过数据分析软件分析电泳图谱，计算HDL-2B、HDL-3亚组份的峰面积占整个HDL-C峰面积的比例，即得HDL-2B、HDL-3的百分比含量，最终与参考正常血样的HDL-2B、HDL-3百分比含量进行对比，当HDL-2B、HDL3百分比含量超出正常范围，同时检测待测血样样本中的胎盘生长素含量以及血清TC、TG、LDL-C的含量与设有含量进行对比；当血清TC、TG、LDL-C含量同步增加，且血压均在子痫病例范围内，另外PLGF含量降低到预设范围，认定为子痫前期。
进一步，在步骤S3中的微流控电泳芯片需要在10～30℃空间内进行储存。
进一步，在步骤S2中的荧光染料需要在2～8℃中密封避光保存，在步骤S3中凝胶染料需要在2～8℃中密封避光保存。
进一步，在步骤S1中血样样本采集的具体步骤如下：按临床实验室常规方法采集血液，采集后的血液室温放置30-60min后，在4℃条件下1000g离心15min，小心收集上层血清或血浆。
进一步，其特征在于在步骤S3中微流控电泳芯片的操作步骤如下：
S3-1、将S端施加高压，SW、B、BW接地，然后将血清样品溶液从S池流向SW池；
S3-2、一段时间后，血清样品溶液将充满微流控电泳芯片十字口通道，这时切换电极，B接低压，BW接高压，位于微流控电泳芯片十字通道的血液样品溶液的流向为B到BW，这就实现了血清样品溶液的分离，并在分离通道出口端前装有检测器1，由于血液样品溶液组分的淌度不同，它们的迁移速度不同，因而经过一定时间后，各组分将按其速度或淌度大小顺序依次到达检测位置；
S3-3、当光照射到光阴极时，光阴极向真空中激发出光电子，这些光电子按聚焦极电场进入倍增系统，并通过进一步的二次发射得到倍增放大，然后把放大后的电子用阳极收集作为信号输出；
S3-4、检测器1将光信号转换为电信号被检出，得到按时间分布的电泳谱图。
进一步，所述的检测器1由光电发射阴极和聚焦电极、电子倍增极及电子收集极组成。
进一步，所述微流控电泳芯片的使用环境温度范围5℃—40℃，使用环境湿度：5％—80％；使用环境的外接电源为100-240V，频率为50/60Hz，功率要求为120VA。
进一步，在步骤S4中，由于子痫前期脂代谢紊乱中以TG水平增高最为显著，TG水平增高与子痫前期发生风险增高相关，也早已将血浆TG作为子痫前期的一项预测指标，因此高TG血症通过脂质交换使低密度脂蛋白胆固醇升高、高密度脂蛋白胆固醇降低，三者代谢关系密切，因此如果其中与脂质代谢密切相关的载脂蛋白apo-AI与apo-AIV在HDL3中表达显著高于HDL2，即认定为子痫前期。
由于胎盘生长因子是一种高度特异性的标志物，胎盘合体滋养层细胞有供氧压力时PlGF水平显著降低，使用AlereTriagePlGF可用来评估胎盘功能不全，以及对由此引起的子痫前期进行预测、鉴别和治疗监测。
1、正常妊娠时血液PIGF水平的变化趋势在子宫螺旋动脉重塑过程中，合体滋养层细胞分泌胎盘生长因子PlGF，促进血管生成，改善血流灌注。正常妊娠时，随妊娠进展血清中PIGF水平呈峰形。健康孕妇血清PLGF妊娠过程中的变化：孕5～15周PLGF水平低，15-26周PLGF表达迅速增加，在妊娠28～30周达高峰。妊娠早期胎盘循环未完全建立，胎盘处于相对缺氧状态，此时PIGF水平较低；妊娠10～12周时，绒毛间隙血流建立，胎盘发展至妊娠中期，母体血流增加，氧分压上升，胎盘管生成主要由分支结构向非分支结构转变，而PIGF主要调节非分支血管的生成，PIGF合成也逐渐增加；妊娠28～30周时达到高峰之后胎盘逐渐成熟老化，PIGF水平也随之明显下降。
2、PlGF可用来评估胎盘合体滋养层细胞病及其并发症胎盘绒毛拥挤使得合体滋养层细胞有供氧压力，PlGF水平显著降低，导致胎盘发育不良和胎盘功能不全，难以给胎儿提供充分的养分和氧气，可能引发一系列的疾病，诸如流产、妊娠期高血压、子痫前期PE、胎儿生长受限和早产等，情况严重时还会引起相关并发症，诸如死胎、子痫、HELLP综合征和胎盘早剥等。
3、预测子痫前期一项SCOPE前瞻性研究分析了孕14-16周低危初产妇，在多中心新西兰、澳大利亚、英国和爱尔兰进行临床试验，入选3529例单胎初产妇187例发展为PE，在评估母体危险因素生育治疗史、PE家族病史、平均动脉压情况下，结合PlGF评估AUC可达0.84。孕11-16周在评估母体危险因素参考NICE指南的基础上，联合考虑胎盘生长因子PlGF≤87pg/mL和平均动脉压MAP>85mmHg进行子痫前期医学量表综合分析，可提高高危人群检出率。
4、鉴别区分胎盘源性的子痫前期的临床症状与慢性高血压、肾病,系统性红斑狼疮、血小板异常性出血、糖尿病血管并发症、妊娠引起的急性脂肪肝等疾病的症状相似，通过检测PLGF水平参考值为100pg/mL可以鉴别区分出胎盘源性的子痫前期。
5、采取合理措施降低子痫前期发生风险早中孕期评估子痫前期的发生风险，对高危人群通过服用低剂量阿司匹林和补充钙质等方法可使子痫前期平均发生风险大大降低。
6、子痫前期的危险分层和监测胎盘发育不良容易引起早发型子痫前期，进而引发早产，孕34周前要考虑促胎肺成熟和抑制宫缩。通过对PlGF水平进行定量评估：PlGF≧100pg/ml提示胎盘功能正常，因此可以通过检测PLGF来发送实现处于子痫前期的症状，及时发现问题。
本实施例利用预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分检测试剂盒，获得待测血样，将待测血样样本放入到高密度脂蛋白HDL亚组分检测试剂盒中进行检测；在石英基片的微细通道中，以电场为驱动力，借助于离子或分子在电迁移或分配行为上的差异，对血样样本中的多种组分进行高速分离分析的技术，具体将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血样置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组份；通过检测与脂蛋白结合的荧光染料，形成每个样品的荧光信号强度比迁移时间的电泳迹线，然后通过数据分析软件分析电泳图谱，计算HDL-2B、HDL-3亚组份的峰面积占整个HDL-C峰面积的比例，即得HDL-2B、HDL-3的百分比含量，最终与参考正常血样的HDL-2B、HDL-3百分比含量进行对比，当HDL-2B、HDL3百分比含量超出正常范围，同时检测待测血样样本中的胎盘生长素含量以及血清TC、TG、LDL-C的含量与设有含量进行对比；当血清TC、TG、LDL-C含量同步增加，且血压均在子痫病例范围内，另外PLGF含量降低到预设范围，认定为子痫前期，最终通过对高密度脂蛋白亚组份的精准分析结合血液中的PLGF获得胎盘生长素含量对比以及通过HDL亚组分和胎盘生长激素搭配检测来同步判断方法来确定是否子痫病的方法，提高测量准确度以实现对子痫和女妊娠综合征发病风险进行精准评估。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点，对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于包括以下步骤：
S1、预先设置高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒，获得待测血样，使用高密度脂蛋白HDL亚组分分析试剂盒对待测血样进行检测高密度脂蛋白HDL亚组分；
S2、在石英基片的微细通道中，以电场为驱动力，借助于离子或分子在电迁移或分配行为上的差异，对血样样本中高密度脂蛋白的多种亚组分进行高速分离分析的技术，具体将血液样品经过静置离心处理后分离出血浆/血清，将血浆/血清样品中加入含有亲脂性荧光染料的样本缓冲液中；该染料会特异性地与脂蛋白结合；
S3、向微流控电泳芯片中灌入凝胶染料并加入待检血清/血浆样本置于微流控电泳芯片分析仪上检测，在外加电场的作用下，电渗流作用将样品送入分离通道，待检样品中的HDL在分子筛和电荷的作用下可被分离成多个亚组份；
S4、通过检测与脂蛋白结合的荧光染料，形成每个样品的荧光信号强度比迁移时间的电泳迹线，然后通过数据分析软件分析电泳图谱，计算HDL-2B、HDL-3亚组份的峰面积占整个HDL-C峰面积的比例，即得HDL-2B、HDL-3的百分比含量，最终与参考正常血样的HDL-2B、HDL-3百分比含量进行对比，当HDL-2B、HDL3百分比含量超出正常范围，同时检测待测血样样本中的胎盘生长素含量以及血清TC、TG、LDL-C的含量与设有含量进行对比；当血清TC、TG、LDL-C含量同步增加，且血压均在子痫病例范围内，另外PLGF含量降低到预设范围，认定为子痫前期。
2.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于，在步骤S3中的微流控电泳芯片需要在10～30℃空间内进行储存。
3.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于，在步骤S2中的荧光染料需要在2～8℃中密封避光保存，在步骤S3中凝胶染料需要在2～8℃中密封避光保存。
4.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于：在步骤S1中血样样本采集的具体步骤如下：按临床实验室常规方法采集血液，采集后的血液室温放置30-60min后，在4℃条件下1000g离心15min，小心收集上层血清或血浆。
5.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于在步骤S3中微流控电泳芯片的操作步骤如下：
S3-1、将S端施加高压，SW、B、BW接地，然后将血清样品溶液从S池流向SW池；
S3-2、一段时间后，血清样品溶液将充满微流控电泳芯片十字口通道，这时切换电极，B接低压，BW接高压，位于微流控电泳芯片十字通道的血液样品溶液的流向为B到BW，这就实现了血清样品溶液的分离，并在分离通道出口端前装有检测器(1)，由于血液样品溶液组分的淌度不同，它们的迁移速度不同，因而经过一定时间后，各组分将按其速度或淌度大小顺序依次到达检测位置；
S3-3、当光照射到光阴极时，光阴极向真空中激发出光电子，这些光电子按聚焦极电场进入倍增系统，并通过进一步的二次发射得到倍增放大，然后把放大后的电子用阳极收集作为信号输出；
S3-4、检测器(1)将光信号转换为电信号被检出，得到按时间分布的电泳谱图。
6.根据权利要求5所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于：所述的检测器(1)由光电发射阴极和聚焦电极、电子倍增极及电子收集极组成。
7.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于：所述微流控电泳芯片的使用环境温度范围5℃—40℃，使用环境湿度：5％—80％；使用环境的外接电源为100-240V，频率为50/60Hz，功率要求为120VA。
8.根据权利要求1所述一种子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法，其特征在于：在步骤S4中，由于子痫前期脂代谢紊乱中以TG水平增高最为显著，TG水平增高与子痫前期发生风险增高相关，也早已将血浆TG作为子痫前期的一项预测指标，因此高TG血症通过脂质交换使低密度脂蛋白胆固醇升高、高密度脂蛋白胆固醇降低，三者代谢关系密切，因此如果其中与脂质代谢密切相关的载脂蛋白apo-AI与apo-AIV在HDL3中表达显著高于HDL2，即认定为子痫前期。
CN202010800795.XA 2020-08-11 2020-08-11 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法 Withdrawn CN111879840A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010800795.XA CN111879840A (zh) 2020-08-11 2020-08-11 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010800795.XA CN111879840A (zh) 2020-08-11 2020-08-11 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111879840A true CN111879840A (zh) 2020-11-03

Family

ID=73203432

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010800795.XA Withdrawn CN111879840A (zh) 2020-08-11 2020-08-11 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111879840A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113933129A (zh) * 2021-09-14 2022-01-14 深圳大学 子痫前期诊断试剂盒以及荧光染料的应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113933129A (zh) * 2021-09-14 2022-01-14 深圳大学 子痫前期诊断试剂盒以及荧光染料的应用
CN113933129B (zh) * 2021-09-14 2024-01-12 深圳大学 子痫前期诊断试剂盒以及荧光染料的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11802880B2 (en) Device and method for detection of analytes
Sheller-Miller et al. Exosomes cause preterm birth in mice: evidence for paracrine signaling in pregnancy
Heng et al. Human cervicovaginal fluid biomarkers to predict term and preterm labor
US20210057039A1 (en) Systems and methods of using machine learning analysis to stratify risk of spontaneous preterm birth
Pala et al. Adiponectin levels in gestational diabetes mellitus and in pregnant women without glucose intolerance
JP2019505815A (ja) 自然早産リスクを層別化するための循環マイクロ粒子の使用
Lizewska et al. Maternal plasma metabolomic profiles in spontaneous preterm birth: preliminary results
Suvakov et al. Overlapping pathogenic signalling pathways and biomarkers in preeclampsia and cardiovascular disease
US20190317108A1 (en) Markers and their ratio to determine the risk for early-onset preeclampsia
CN111879840A (zh) 子痫前期判断过程中对高密度脂蛋白亚组分的检测方法
Farhat et al. Association of resolvin level in pregnant women with preeclampsia and metabolic syndrome
Mukherjee et al. New immune horizons in therapeutics and diagnostic approaches to Preeclampsia
Weiwei et al. Expressions of adiponectin receptors in placenta and their correlation with preeclampsia
Yin et al. Serum levels and placental expression of NGAL in gestational diabetes mellitus
Surmiak et al. Malondialdehyde and neutrophil gelatinase-associated lipocalin as markers of oxidative stress in small for gestational age newborns from hypertensive and preeclamptic pregnancies
Cekmez et al. Proadrenomedullin and serum amyloid A as a predictor of subclinical chorioamnionitis in preterm premature rupture of membranes
CN112180098B (zh) 胎盘相关疾病标志物的筛选方法及标志物
Kumar et al. Dynamic alteration in the vaginal secretory proteome across the early and mid-trimesters of pregnancy
CN113748344A (zh) 肥胖孕妇先兆子痫风险的检测
Rees et al. The dynamic inflammatory profile of pregnancy can be monitored using a novel lipid-based mass spectrometry technique
Lianou et al. Biomarkers of cardiovascular disease risk in the neonatal population
Ma et al. Establishment of reference intervals for maternal blood and umbilical cord blood procalcitonin in healthy Chinese women in late pregnancy
Nawaz et al. Evaluation of Differential Levels of Serum Interleukin-6 in Pre-Eclamptic and Normal Pregnancy Women
RU2760824C1 (ru) Способ прогнозирования риска развития гестационного сахарного диабета у первородящих пациенток позднего репродуктивного возраста после применения вспомогательных репродуктивных технологий
Parvanehvar et al. Maternal serum adiponectin and leptin levels and their gene expression, postpartum body mass index, and breastfeeding duration based on mode of delivery: a prospective study

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20201103