CN111876312A - 一种核酸提取试剂盒与核酸提取方法 - Google Patents

Abstract

核酸提取用装置，包括试剂盒主体，试剂盒主体为上部开口的壳体结构，试剂盒主体的一侧连接把手，本发明在试剂盒主体上增设了热缩管和把手，把手一方面能够方便使用者拿取试剂盒主体，另一方面能够为热缩管提供导向作用，当试剂盒主体使用完成后，使用者可以推动热缩管沿着把手套在试剂盒主体上，然后使用者使用热风枪对热缩管进行加热，热缩管加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体上，将试剂盒主体上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体内部的试剂轻易泄露。

Description

一种核酸提取试剂盒与核酸提取方法

技术领域

本发明涉及一种试剂盒,更确切的说是一种核酸提取试剂盒与核酸提取方法。

背景技术

基因分析是指对生物试样中所采集的核酸等生物遗传物质进行检验和分析的过程，其中生物试样是指靶标生物(也包括生物尸体在内)的血液、血浆、血清、精液、淋巴液等各种体液，皮肤、毛发、肌肉组织等各种组织，粪便、尿等各种排泄物，或者来自它们中的试样。通过对它们进行检验，有可能在早期就能够检测出疾病及其发病危险、传染病、恶性肿瘤等，在临床实践中具有很重要的位置。

从生物样品中提取核酸是基因分析中的重要过程，比如，在人体中采集血液或组织液进行检测时，需要只对核酸进行提取纯化，因此需要将核酸与其他组分进行分离，在这个过程中需要对试样进行物理和化学溶解处理，并通过操作来降解蛋白质或脂质从而使核酸产生游离，由于步骤较多，在操作过程中很容易早晨试样的污染；另一方面目前提取中需要使用有机溶剂，一般有机溶剂均具有毒性，还会产生废弃物，污染环境，并且在实际操作中离心分离中也会对试样造成污染，并且操作者也有被感染的风险。

目前的核酸检测试剂盒，都需要额外提供滤筒或回收管或废液管等，并且设备在运转前后对周围环境还可能造成污染，另外为了将试样溶解在操作中需要振动操作，有废液飞散的可能性，并且因溶液产生的泡沫污染所提取试样的可能，现有的装置上的废液管很容易发生翻倒，容易污染操作台。另外，我们在应用中发现这种装置在使用完成后，内部的试剂容易泄露，对实验环境造成污染。

发明内容

本发明的目的是提供一种核酸提取试剂盒与核酸提取方法，能够在试剂盒主体上增设了热缩管和把手，把手一方面能够方便使用者拿取试剂盒主体，另一方面能够为热缩管提供导向作用，当试剂盒主体使用完成后，使用者可以推动热缩管沿着把手套在试剂盒主体上，然后使用者使用热风枪对热缩管进行加热，热缩管加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体上，将试剂盒主体上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体内部的试剂轻易泄露。

本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：

核酸提取用装置，包括试剂盒主体，试剂盒主体为上部开口的壳体结构，试剂盒主体的一侧连接把手，把手上套有热缩管，试剂盒主体的两侧分别开设第一环形槽和第二环形槽，热缩管套在试剂盒主体上之后，热缩管的两侧能够分别和第一环形槽和第二环形槽配合。

为了进一步实现本发明的目的，还可以采用以下技术方案:所述试剂盒主体的内部一侧开设第一试剂孔、第二试剂孔、第三试剂孔、第四试剂孔、第五试剂孔、第六试剂孔、第七试机孔、第八试剂孔。

所述试剂盒主体的内部设置废液孔、回收孔和提取滤筒。

所述试剂盒主体的内部设置试样孔。

所述试剂盒主体的内部安装滴管固定板、扎带固定板、第一固定板，滴管固定板上连接滴管固定环，扎带固定板的一侧连接扎带，第一固定板的一侧安装可拆卸固定环装置，所述可拆卸固定环装置包括第二固定板，第二固定板的一侧连接钩面粘扣，第一固定板的一侧连接毛面粘扣，毛面粘扣能够与钩面粘扣配合，第二固定板的一侧连接可拆卸固定环，试剂盒主体的内部安装U形板，U形板的一侧开设螺孔，U 形板通过螺孔螺纹连接螺栓。

本发明还包括一种核酸提取方法，是使用了试剂盒主体和提取滤筒的核酸提取方法，所述试剂盒主体至少具有存积试剂的废液孔、回收所提取核酸的回收孔和数个试剂孔，所述提取滤筒是具有提取并分离核酸功能的过滤器；

具体的包括以下步骤：

①核酸发生游离的步骤：使用生物化学试剂将核酸从生物体细胞中溶出，游离出生物体细胞外；

②将溶出的含有核酸的溶液加入废液孔所载置的提取滤筒中；

③将提取滤筒中的上述溶液中保留核酸，将其余废液废弃入废液孔中；

④将提取滤筒中的核酸从回收孔中回收。

本发明的优点在于：本发明在试剂盒主体上增设了热缩管和把手，把手一方面能够方便使用者拿取试剂盒主体，另一方面能够为热缩管提供导向作用，当试剂盒主体使用完成后，使用者可以推动热缩管沿着把手套在试剂盒主体上，然后使用者使用热风枪对热缩管进行加热，热缩管加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体上，将试剂盒主体上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体内部的试剂轻易泄露，避免对实验环境造成污染，另一方面热缩管热缩后与第一环形槽和第二环形槽配合的部分会进一步缩小，从而牢固箍住试剂盒主体的两侧，避免热缩管与试剂盒主体脱离，提高了热缩管对试剂盒主体防护的稳定性。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为本发明的主视结构示意图；

图2为本发明的俯视结构示意图。

图3为本发明的结构示意图之三；

图4为本发明的结构示意图之四；

图5为本发明的结构示意图之五；

图6为本发明的结构示意图之六；

图7为本发明的结构示意图之七；

图8为提取滤筒的结构示意图。

标注部件：1试剂盒主体 2第一试剂孔 3第二试剂孔 4第三试剂孔 5第四试剂孔6 第五试剂孔 7第六试剂孔 8第七试机孔 9第八试剂孔 10废液孔 11回收孔 12提取滤筒12a筒状主体 12b过滤器部件 12c支承过滤器部件 12d排出部 13试样孔 15热缩管 16把手 17第一环形槽 18第二环形槽 19滴管固定板 20滴管固定环 21扎带 22扎带固定板 23第一固定板 24毛面粘扣 25钩面粘扣 26第二固定板 27可拆卸固定环 28U形板 29螺栓30分注移液吸头 31加压喷嘴 32分注喷嘴。

具体实施方式

生物体体液包括血液、对靶标生物(也包括生物的尸体在内)的血浆、血清、精液、淋巴液等各种体液，皮肤、毛发、肌肉组织等各种组织，粪便、尿等各种排泄物，或者来自它们中的试样；

以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明。

实施例1：

核酸提取用装置，如图1-图8所示，包括试剂盒主体1，试剂盒主体1为上部开口的壳体结构，试剂盒主体1的一侧连接把手16，把手16上套有热缩管15，试剂盒主体1的两侧分别开设第一环形槽17和第二环形槽18，热缩管15套在试剂盒主体1 上之后，热缩管15的两侧能够分别和第一环形槽17和第二环形槽18配合。

本发明在试剂盒主体1上增设了热缩管15和把手16，把手16一方面能够方便使用者拿取试剂盒主体1，另一方面能够为热缩管15提供导向作用，当试剂盒主体 1使用完成后，使用者可以推动热缩管15沿着把手16套在试剂盒主体1上，然后使用者使用热风枪对热缩管15进行加热，热缩管15加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体1上，将试剂盒主体1上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体1内部的试剂轻易泄露，避免对实验环境造成污染，另一方面热缩管15热缩后与第一环形槽17和第二环形槽18配合的部分会进一步缩小，从而牢固箍住试剂盒主体1的两侧，避免热缩管15与试剂盒主体1脱离，提高了热缩管15对试剂盒主体1防护的稳定性。

适用范围具体实施的选材和可行性分析：我们实际制作的样品以说明书附图作为图纸，按照说明书附图中各个部件的比例和配合方式实施，所述的连接为强力胶黏剂连接焊接铆接法兰连接一体成型式连接等常用的连接方式，实际制作时可以根据实际连接强度需要无需创造性的选择对应的连接方式连接点的厚度和强度。提取滤筒12包括筒状主体12a，在上端开口的筒状主体12a的中央部，保持有用于吸附核酸的过滤器部件12b，而且，为了防止过滤器部件12b的变形，在正下方配置有支承过滤器部件12c。在筒状主体12a的过滤器部件的下方部形成为漏斗状，并在下端中心部按规定的长度突出形成有喷嘴状的排出部12d。试剂盒主体1的一侧设置分注移液吸头30、加压喷嘴31、分注喷嘴32。

实施例2：

核酸提取用装置，如图1-图8所示，包括试剂盒主体1，试剂盒主体1为上部开口的壳体结构，试剂盒主体1的一侧连接把手16，把手16上套有热缩管15，试剂盒主体1的两侧分别开设第一环形槽17和第二环形槽18，热缩管15套在试剂盒主体1 上之后，热缩管15的两侧能够分别和第一环形槽17和第二环形槽18配合。所述试剂盒主体1的内部一侧开设第一试剂孔2、第二试剂孔3、第三试剂孔4、第四试剂孔 5、第五试剂孔6、第六试剂孔7、第七试机孔8、第八试剂孔9。

本发明的第一试剂孔2、第二试剂孔3、第三试剂孔4、第四试剂孔5、第五试剂孔6、第六试剂孔7、第七试机孔8、第八试剂孔9可以方便试剂盒主体1存放不同的试剂。

实施例3：

核酸提取用装置，如图1-图8所示，包括试剂盒主体1，试剂盒主体1为上部开口的壳体结构，试剂盒主体1的一侧连接把手16，把手16上套有热缩管15，试剂盒主体1的两侧分别开设第一环形槽17和第二环形槽18，热缩管15套在试剂盒主体1 上之后，热缩管15的两侧能够分别和第一环形槽17和第二环形槽18配合。所述试剂盒主体1的内部设置废液孔10、回收孔11和提取滤筒12。

本发明的废液孔10可以存放废液，本发明的回收孔11可以回收试剂，本发明的提取滤筒12能够方便进行提取操作。

实施例4：

核酸提取用装置，如图1-图8所示，包括试剂盒主体1，试剂盒主体1为上部开口的壳体结构，试剂盒主体1的一侧连接把手16，把手16上套有热缩管15，试剂盒主体1的两侧分别开设第一环形槽17和第二环形槽18，热缩管15套在试剂盒主体1 上之后，热缩管15的两侧能够分别和第一环形槽17和第二环形槽18配合。所述试剂盒主体1的内部设置试样孔13。

本发明的试样孔13可以方便试剂盒主体1存放试样。

所述试剂盒主体1的内部安装滴管固定板19、扎带固定板22、第一固定板23，滴管固定板19上连接滴管固定环20，扎带固定板22的一侧连接扎带21，第一固定板23 的一侧安装可拆卸固定环装置，所述可拆卸固定环装置包括第二固定板26，第二固定板26的一侧连接钩面粘扣25，第一固定板23的一侧连接毛面粘扣24，毛面粘扣24 能够与钩面粘扣25配合，第二固定板26的一侧连接可拆卸固定环27，试剂盒主体1 的内部安装U形板28，U形板28的一侧开设螺孔，U形板28通过螺孔螺纹连接螺栓 29。

本发明的滴管固定板19和滴管固定环20相结合，可以在试剂盒主体1的内部形成对滴管的支撑结构，从而方便使用者临时在试剂盒主体1的内部放置滴管，避免滴管歪倒。本发明的扎带固定板22和扎带21相结合，能够方便在试剂盒主体1内部绑定测试中使用到的工具。本发明的固定环27可以方便与记录笔结合，方便测试人员放置记录笔，当需要使用时，可以利用手部力量带动毛面粘扣24和钩面粘扣25脱离配合，从而很容易将笔从试剂盒主体1内取下，当在测试过程中需要临时在试剂盒主体1的内部临时放置笔时，可以利用毛面粘扣24和钩面粘扣25配合，从而使笔在固定环27上更加稳定的放置在试剂盒主体1内部。本发明的本发明的和螺栓29结合，可以方便在测试过程中辅助夹住用到的工具。

实施例5

本发明还包括一种核酸提取方法，是使用了实施例1～4所述的任一种试剂盒主体和提取滤筒的核酸提取方法，所述试剂盒主体至少具有存积试剂的废液孔、回收所提取核酸的回收孔和数个试剂孔，所述提取滤筒是具有提取并分离核酸功能的过滤器；

具体的包括以下步骤：

①核酸发生游离的步骤：使用生物化学试剂将核酸从生物体细胞中溶出，游离出生物体细胞外；

②将溶出的含有核酸的溶液加入废液孔所载置的提取滤筒中；

③将提取滤筒中的上述溶液中保留核酸，将其余废液废弃入废液孔中；

④将提取滤筒中的核酸从回收孔中回收。

具体的核酸提取工艺：

通过提取滤筒移动装置，提取滤筒12被移送至废液孔10的上部。另一方面，通过分注移液管来吸取在试样孔13中所添加的血液。然后，将血液移送至试剂孔中的溶解液中进行混合，使核酸(DNA)从血细胞中溶出。此时，使用者可以推动热缩管15 沿着把手16套在试剂盒主体1上，然后使用者使用热风枪对热缩管15进行加热，热缩管15加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体1上，将试剂盒主体1上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体1内部的试剂轻易泄露，避免对实验环境造成污染。通过分注移液管，将血液添加于填充有溶解生物材料的离液剂(溶解液)的试剂孔5中。在试剂孔内，通过使用移液管反复排出和吸取溶解液和血液的混合液以使其完全混合，并使生物材料溶解。

接着被溶解的溶液，通过分注喷嘴32和分注移液吸头30被移送至废液孔10上的筒状主体12a中，并添加于过滤器部件12b中。将血液细胞中溶出的核酸吸附于过滤器部件12b上。

接着，加压喷嘴31移动至提取滤筒上方，接着下降，通过加压空气将未吸附于过滤器上的混入了杂质的溶液作为废液推送至废液孔中。此时，为了从过滤器部件12b 中将溶液全部去除，需要对加压喷嘴施加比透过过滤器的压力更大的压力。但是，基于该大的压力，会产生溶液的飞散或泡沫，很可能会对试剂盒本体内的操作环境造成污染。因此，优选施加溶液不会完全透过过滤器程度的压力。即在上述空气加压工序中，含杂质的溶液的一部分残留在提取滤筒的排出部12d附近，但通过反复进行后述的核酸清洗工序，能够除掉杂质。

优选的可以多次设置溶出工序：用移液管从另外填充有离液剂或溶解液的试剂孔4中注入溶解液，并排出至提取滤筒上。然后通过加压空气，将没有吸附于过滤器上的混入了杂质的溶液废弃于废液孔中。如此，通过包括多次的溶出工序，在不污染试剂盒本体程度的压力下，也可以实现溶出核酸的操作。

<核酸清洗工艺>

本发明的核酸提取用装置，通过以下步骤清洗吸附有核酸的过滤器：首先，通过分注装置从加有清洗液的第一试剂孔～第六试剂孔中进行分注，并添加于前述提取滤筒12中。接着，通过使用了加压空气的提取滤筒加压装置，将未吸附和结合于过滤器上的杂质推送至废液孔10中。通过使用第一试剂孔～第六试剂孔的清洗液清洗被吸附的核酸，进行重复清洗工艺操作。并且，当具有多个分注移液管(分注移液吸头30) 的情况下，可在上述清洗工艺或者下述回收工艺中使用不同的试剂时进行交换。

<回收工艺>

采用回收孔11对核酸进行回收工艺操作。首先，通过提取滤筒移动装置，将提取滤筒12移送至回收孔11的上部，回收至清净的回收孔11中。采用分注机并通过分注移液吸头30，将溶出试剂孔的溶出液添加于提取滤筒12中。同样地，采用加压喷嘴31并通过加压空气，将所溶出的核酸与溶出液一起从提取滤筒12回收至回收孔11 中。并且，可采用试剂孔8的稀释液调节回收溶液的浓度。

此外，在试剂盒主体1上增设了热缩管15和把手16，把手16一方面能够方便使用者拿取试剂盒主体1，另一方面能够为热缩管15提供导向作用，当试剂盒主体1 使用完成后，使用者可以推动热缩管15沿着把手16套在试剂盒主体1上，然后使用者使用热风枪对热缩管15进行加热，热缩管15加热缩小后，一方面能够整体紧密套在试剂盒主体1上，将试剂盒主体1上部的开口封闭，从而避免了试剂盒主体1内部的试剂轻易泄露，避免对实验环境造成污染，另一方面热缩管15热缩后与第一环形槽17和第二环形槽18配合的部分会进一步缩小，从而牢固箍住试剂盒主体1的两侧，避免热缩管15与试剂盒主体1脱离，提高了热缩管15对试剂盒主体1防护的稳定性。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明。

Claims (6)

1.核酸提取用装置，其特征在于：包括试剂盒主体(1)，试剂盒主体(1)为上部开口的壳体结构，试剂盒主体(1)的一侧连接把手(16)，把手(16)上套有热缩管(15)，试剂盒主体(1)的两侧分别开设第一环形槽(17)和第二环形槽(18)，热缩管(15)套在试剂盒主体(1)上之后，热缩管(15)的两侧能够分别和第一环形槽(17)和第二环形槽(18)配合。

2.根据权利要求1所述的核酸提取用装置，其特征在于：所述试剂盒主体(1)的内部一侧开设第一试剂孔(2)、第二试剂孔(3)、第三试剂孔(4)、第四试剂孔(5)、第五试剂孔(6)、第六试剂孔(7)、第七试机孔(8)、第八试剂孔(9)。

3.根据权利要求1所述的核酸提取用装置，其特征在于：所述试剂盒主体(1)的内部设置废液孔(10)、回收孔(11)和提取滤筒(12)。

4.根据权利要求1所述的核酸提取用装置，其特征在于：所述试剂盒主体(1)的内部设置试样孔(13)。

5.根据权利要求1所述的核酸提取用装置，其特征在于：所述试剂盒主体(1)的内部安装滴管固定板(19)、扎带固定板(22)、第一固定板(23)，滴管固定板(19)上连接滴管固定环(20)，扎带固定板(22)的一侧连接扎带(21)，第一固定板(23)的一侧安装可拆卸固定环装置，所述可拆卸固定环装置包括第二固定板(26)，第二固定板(26)的一侧连接钩面粘扣(25)，第一固定板(23)的一侧连接毛面粘扣(24)，毛面粘扣(24)能够与钩面粘扣(25)配合，第二固定板(26)的一侧连接可拆卸固定环(27)，试剂盒主体(1)的内部安装U形板(28)，U形板(28)的一侧开设螺孔，U形板(28)通过螺孔螺纹连接螺栓(29)。

6.一种核酸提取方法，其特征在于：是使用了试剂盒主体和提取滤筒的核酸提取方法，所述试剂盒主体至少具有存积试剂的废液孔、回收所提取核酸的回收孔和数个试剂孔，所述提取滤筒是具有提取并分离核酸功能的过滤器；

具体的包括以下步骤：

①核酸发生游离的步骤：使用生物化学试剂将核酸从生物体细胞中溶出，游离出生物体细胞外；

②将溶出的含有核酸的溶液加入废液孔所载置的提取滤筒中；

③将提取滤筒中的上述溶液中保留核酸，将其余废液废弃入废液孔中；

④将提取滤筒中的核酸从回收孔中回收。

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