CN111848573B - 苯并噻吩酰胺类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本申请涉及苯并噻吩酰胺类化合物及其制备方法和用途，具体地，本申请涉及式(I)所示化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N‑氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，所述化合物可用于制备治疗细胞增殖性疾病的药物，

Description

苯并噻吩酰胺类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及苯并噻吩酰胺类化合物及其药物组合物、所述化合物的制备方法和及其在制备治疗与细胞增殖性疾病相关的药物中的用途。

背景技术

STING(Stimulator of interferon gene,干扰素基因刺激蛋白)也被称为TMEM173、MPYS、MITA或者ERIS，是免疫反应中重要的信号分子。当STING受到配体(例如源于细菌的环二核苷酸(cyclic dinucleotide,CDN))刺激活化时，会上调IRF3和NF-κB信号通路。具体而言就是活化的STING招募细胞质中的TANK结合激酶(TBK1)，介导TBK1对IRF3的磷酸化，从而导致干扰素和其它细胞因子的生成。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白，具有调节免疫功能、增强疫苗作用、抗病毒、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡等功能(Nature,2008,455,674-678；Science Signaling,2012,5,ra20)。此外，STING蛋白还参与肿瘤免疫、自身免疫性炎症、自噬等多种病理和生理过程。STING介导的I型干扰素信号通路是肿瘤特异性T细胞的激活和肿瘤浸润性淋巴细胞浸润的关键步骤，而在肝细胞癌、胃癌及结直肠癌等多种肿瘤组织中，STING低表达促进肿瘤免疫耐受和/或免疫逃逸的发生。大量研究表明，STING激动剂具有显著抗肿瘤活性。例如，STING激动剂(ADU-S100)在小鼠模型中能够抑制二次接种移植瘤的生长，长时间逆转肿瘤免疫耐受现象，抑制肿瘤复发。

目前，已公开的STING激动剂主要是具有环二核苷酸类似物结构的化合物。如MIW815(ADU-S100)已进入临床1期，招募的患者疾病类型包括Merkel细胞癌、腮腺癌、结直肠癌、子宫内膜癌、乳腺癌、食管癌、集合管癌、卵巢癌、霍奇金淋巴瘤、血管上皮瘤和皮肤-可接触的晚期/转移性实体瘤和淋巴瘤等。

另外，陆续有研究机构公开了非环二核苷酸结构的STING激动剂。WO2018067423公开了一类苯并噻吩类化合物，作为STING激动剂，用于细胞增殖相关的疾病(如癌症)的治疗。WO2018234805、WO2018234807和WO2018234808公布了一类杂环化合物，可以调节或激活人STING蛋白，用于多种疾病(包括癌症)的治疗。

因此，STING激动剂作为药物在医药行业具有良好的应用前景。为了达到更好的肿瘤治疗效果，更好地满足市场需求，亟需开发出新的高效的STING激动剂。

发明内容

在一个方面，本申请提供一种苯并噻吩酰胺类化合物，其对STING信号通路具有明显激活作用，可用于启动体内T细胞的抗肿瘤免疫反应，治疗肿瘤等细胞增殖性疾病。

具体地，所述化合物具有式(I)的结构，

其中：

X¹和X³各自独立地选自共价键、O、S和N(R^a)；

X²选自C_1-6亚烷基、C_2-6亚烯基、C_2-6亚炔基、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环基、C_1-6亚烷基-X⁴-和C_1-6亚烷基-X⁴-C_1-6亚烷基，所述C_1-6亚烷基、C_2-6亚烯基、C_2-6亚炔基、C_3-6亚环烷基和3-6元亚杂环基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基和C_1-6烷氧基；

X⁴选自O、S、N(R^a)、C(O)、C(O)-N(R^a)、S(O)、S(O)₂、S(O)₂-N(R^a)、O-C(O)-N(R^a)、N(R^a)-C(O)-N(R^a)和N(R^a)-S(O)₂-N(R^a)；

L¹选自共价键和(C(R⁹)₂)_p；

L²选自共价键和(C(R¹⁰)₂)_q；

R¹和R²各自独立地选自卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、-C(O)-N(R^a)(R^b)、-N(R^a)-C(O)-R^b、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基，所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基和C_1-6卤代烷基；

R³和R⁴各自独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-6烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基，所述C_1-6烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基任选地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6烷氧基；

R⁵和R⁶各自独立地选自氢、C_1-6烷基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、-C_1-6烷基-C_3-10环烷基和-C_1-6烷基-3-10元杂环基，所述C_1-6烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基任选地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、-OR^a、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a和-S(O)₂R^a；

R⁷和R⁸各自独立地选自氢、C_1-6烷基、-OR^a、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基和-CO₂R¹¹，所述C_1-6烷基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1、2或3个独立选自下列的基团取代：卤素、氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和C_1-6卤代烷氧基，任选地，所述基团C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和C_1-6卤代烷氧基进一步地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷氧基和-SO₂R^a；

各R⁹独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基、-C_1-6烷基-C_3-6环烷基、-C_1-6烷基-3-6元杂环基、-C_1-6烷基-C_6-10芳基、-C_1-6烷基-5-10元杂芳基和-C_1-6烷基-OR^a，所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基和C_1-6烷氧基；或者两个R⁹与其连接的碳原子共同形成C_3-10环烷基或3-10元杂环基；或者任意一个R⁹和R⁵连同它们之间的原子共同形成3-10元杂环基；

各R¹⁰独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6环烷基、-C_1-6烷基-C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基、-C_1-6烷基-C_3-6环烷基、-C_1-6烷基-3-6元杂环基、-C_1-6烷基-C_6-10芳基、-C_1-6烷基-5-10元杂芳基和-C_1-6烷基-OR^a，所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、氰基、羟基和C_1-6烷氧基；或者两个R¹⁰与其连接的碳原子共同形成C_3-10环烷基或3-10元杂环基；或者任意一个R¹⁰和R⁶连同它们之间的原子共同形成3-10元杂环基；

R¹¹选自氢、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基和-C_1-6烷基-3-10元杂环基，所述C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基任选地被1、2、3或4个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷氧基和-SO₂R^a；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基、C_1-6烷氧基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基、-C_1-6烷基-C_3-10环烷基、-C_1-6烷基-3-6元杂环基、-C_1-6烷基-C_6-10芳基和-C_1-6烷基-5-10元杂芳基，所述C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基、C_1-6烷氧基、3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1、2或3个独立选自羟基和-N(R^a)(R^b)的取代基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-7元杂环基；

m和n各自独立地选自0、1、2和3；

p和q各自独立地选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L¹选自共价键和(C(R⁹)₂)_p；

各R⁹独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基、-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-C_1-4烷基-3-6元杂环基、-C_1-4烷基-C_6-10芳基、-C_1-4烷基-5-10元杂芳基和-C_1-4烷基-OR^a，所述C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_1-4烷氧基；或者两个R⁹与其连接的碳原子共同形成C_3-6环烷基或3-6元杂环基；或者任意一个R⁹和R⁵连同它们之间的原子共同形成3-6元杂环基；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-6元杂环基；

p选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L¹选自共价键和(C(R⁹)₂)_p；

各R⁹独立地选自氢、-OR^a、C_1-4烷基和C_3-6环烷基，所述C_1-4烷基和C_3-6环烷基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_1-4烷氧基；或者两个R⁹与其连接的碳原子共同形成C_3-6环烷基或3-6元杂环基；或者任意一个R⁹和R⁵连同它们之间的原子共同形成3-6元杂环基；

R^a选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

p选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L¹选自(CH₂)_p；

p选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L²选自共价键和(C(R¹⁰)₂)_q；

各R¹⁰独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基、-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-C_1-4烷基-3-6元杂环基、-C_1-4烷基-C_6-10芳基、-C_1-4烷基-5-10元杂芳基和-C_1-4烷基-OR^a，所述C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_1-4烷氧基；或者两个R¹⁰与其连接的碳原子共同形成C_3-6环烷基或3-6元杂环基；或者任意一个R¹⁰和R⁶连同它们之间的原子共同形成3-6元杂环基；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-6元杂环基；

q选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L²选自共价键和(C(R¹⁰)₂)_q；

各R¹⁰独立地选自氢、-OR^a、C_1-4烷基和C_3-6环烷基，所述C_1-4烷基和C_3-6环烷基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_1-4烷氧基；或者两个R⁹与其连接的碳原子共同形成C_3-6环烷基或3-6元杂环基；或者任意一个R¹⁰和R⁶连同它们之间的原子共同形成3-6元杂环基；

R^a选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

q选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述L²选自(CH₂)_q；

q选自1、2和3。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R⁷和R⁸各自独立地选自氢、C_1-6烷基、-OR^a、3-10元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基和-CO₂R¹¹，所述C_1-6烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1、2或3个独立选自下列的基团取代：卤素、氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和C_1-6卤代烷氧基，任选地，所述基团C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和C_1-6卤代烷氧基进一步地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷氧基和-SO₂R^a；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基和C_1-6烷氧基，所述C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基和C_1-6烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-7元杂环基；

R¹¹选自氢、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基和-C_1-6烷基-3-10元杂环基，所述C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基任选地被1、2、3或4个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-6烷氧基和-SO₂R^a。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R⁷和R⁸各自独立地选自-OR^a、3-6元杂环基、C_6-10芳基、5-10元杂芳基和-CO₂R¹¹，所述3-6元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1、2或3个独立选自下列的基团取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基，任选地，所述基团C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4卤代烷氧基进一步地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-4烷氧基和-SO₂R^a；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-6元杂环基；

R¹¹选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基、3-6元杂环基和-C_1-4烷基-3-6元杂环基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和3-6元杂环基任选地被1、2、3或4个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-4烷氧基和-SO₂R^a。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R⁷和R⁸各自独立地选自-OR^a、5-6元杂芳基和-CO₂R¹¹，所述5-6元杂芳基任选地被1个或2个独立选自下列的基团取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-2烷基、C_1-2烷氧基、C_1-2卤代烷氧基，任选地，所述基团C_1-2烷基、C_1-2烷氧基和C_1-2卤代烷氧基进一步地被1个或2个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-2烷氧基和-SO₂R^a；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-2烷基、C_1-2卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-2烷氧基，所述C_1-2烷基、C_1-2卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-2烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-6元杂环基；

R¹¹选自氢、C_1-2烷基、C_1-2卤代烷基、C_5-6环烷基、5-6元杂环基和-C_1-2烷基-5-6元杂环基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_5-6环烷基和5-6元杂环基任选地被1、2、3或4个独立选自下列的取代基取代：氰基、羟基、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、C_1-2烷氧基和-SO₂R^a。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R⁷和R⁸各自独立地选自-OR^a、5-6元杂芳基和-CO₂R¹¹；

R^a选自C_1-2烷基；

所述5-6元杂芳基任选地被C_1-2烷基取代；

R¹¹选自C_1-2烷基。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R⁷和R⁸各自独立地选自-COOH、

-COOEt、-OMe和

在一些实施方案中，通式(I)中所述X¹和X³各自独立地选自共价键、O、S和N(R^a)，R^a选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X¹和X³各自独立地选自共价键、O和S。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X¹和X³各自独立地选自共价键和O。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X¹和X³均为O。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X²选自C_1-4亚烷基、C_2-4亚烯基、C_2-4亚炔基、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环基、C_1-4亚烷基-X⁴-和C_1-4亚烷基-X⁴-C_1-4亚烷基，所述C_1-4亚烷基、C_2-4亚烯基、C_2-4亚炔基、C_3-6亚环烷基和3-6元亚杂环基任选地被一个或多个独立选自下列的取代基取代：卤素、CN、羟基和C_1-6烷氧基；

X⁴选自O、S、N(R^a)、C(O)、C(O)-N(R^a)、S(O)、S(O)₂、S(O)₂-N(R^a)、O-C(O)-N(R^a)、N(R^a)-C(O)-N(R^a)和N(R^a)-S(O)₂-N(R^a)；

R^a选自H和C_1-6烷基。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X²选自C_1-4亚烷基和C_2-4亚烯基。

在一些实施方案中，通式(I)中所述X²选自C_1-3亚烷基。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R¹连至式(I)中苯并噻吩环的5-位或6-位碳原子，相应地，X¹连至式(I)中苯并噻吩环的6-位或5-位碳原子。

在一些实施方案中，通式(I)中所述R²连至式(I)中苯并噻吩环的5-位或6-位碳原子，相应地，X³连至式(I)中苯并噻吩环的6-位或5-位碳原子。

在一些实施方案中，通式(I)中R¹和R²各自独立地选自卤素、氰基、-OR^a、-SR^a、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a、-C(O)-N(R^a)(R^b)、-N(R^a)-C(O)-R^b、C_1-3烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基，所述C_1-3烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-8环烷基、3-8元杂环基、C_6-10芳基和5-10元杂芳基任选地被1个或2个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-3烷氧基、C_1-3烷基和C_1-3卤代烷基；

R^a和R^b各自独立地选自H、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-8环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-8环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-7元杂环基。

在一些实施方案中，通式(I)中R¹和R²各自独立地选自-OR^a；

R^a选自氢和C_1-4烷基，所述C_1-4烷基任选地被1个或2个羟基所取代。

在一些实施方案中，通式(I)中R³和R⁴各自独立地选自氢、卤素、氰基、-OR^a、-N(R^a)(R^b)、C_1-4烷基、C_3-8环烷基和3-8元杂环基，所述C_1-4烷基、C_3-8环烷基和3-8元杂环基任选地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基和C_1-4烷氧基；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-8环烷基和C_1-4烷氧基，所述C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、C_3-8环烷基和C_1-4烷氧基任选地被1个或2个羟基所取代；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-7元杂环基。

在一些实施方案中，通式(I)中R³和R⁴各自独立地选自H和C_1-4烷基。

在一些实施方案中，通式(I)中R⁵和R⁶各自独立地选自氢、C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C_3-10环烷基和-C_1-6烷基-3-10元杂环基，所述C_1-6烷基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基任选地被1、2或3个独立选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羟基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、-OR^a、-N(R^a)(R^b)、-CO₂R^a和-S(O)₂R^a；

R^a和R^b各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-3卤代烷基、C_3-6环烷基和C_1-3烷氧基；

或者R^a、R^b连同其相连的氮原子共同形成3-7元杂环基。

在一些实施方案中，通式(I)中R⁵和R⁶各自独立地选自氢、C_1-4烷基、C_1-4卤代烷基、-C_1-4亚烷基-CN、-C_1-4亚烷基-OH、-C_1-4亚烷基-COOH、-C_1-4亚烷基-CO₂-C_1-4烷基、-C_1-4亚烷基-O-C_1-4烷基、-C_1-4亚烷基-O-C_3-6环烷基、-C_1-4亚烷基-NH₂、-C_1-4亚烷基-N(C_1-4烷基)(C_1-4烷基)和-C_1-4亚烷基-S(O)₂-C_1-4烷基。

在一些实施方案中，通式(I)中R⁵和R⁶各自独立地选自C_1-4烷基。

在一些实施方案中，本申请所述化合物具有下示结构：

其中各基团和取代基如本文中任一项所定义。

在一些实施方案中，本申请所述化合物具有式(II)的结构：

其中，R¹、R²、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、L¹、L²、X²、m和n如本文中任一项所定义。

在一些实施方案中，本文所述化合物具有如下结构：

异构体

在另一个方面，本申请涉及所述化合物的异构体，包括但不限于立体异构体和互变异构体。

所述立体异构体是指，分子中原子或原子团的连接次序相同，但空间排列不同而形成的异构体。在本申请中，化合物的立体异构分为构象和构型异构，而构型异构还分为顺反异构和旋光异构。因此，在本申请中，所述立体异构体包括所述化合物的所有可能的构象和构型异构体，例如外消旋体(外消旋混合物)，单一对映异构体，单一非对映异构体，非对映异构体以任意比例的混合物以及顺反异构体。例如，当所述化合物含有烯烃双键时，除非特别说明，否则包括其顺式异构体和反式异构体，及二者任意比例的混合物。

所述互变异构体是指，因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。此类互变异构体的典型实例为酮-烯醇互变异构体。本申请中所述化合物可以以互变异构体形式存在，并因此涵盖所有可能的互变异构体，及其混合物。

多晶型物

构成化合物的分子、原子或离子在空间可按一定规律周期重复排列，其排列具有三维空间的周期性，隔一定的距离重复出现，化合物的此种形态称为晶体。化合物可以两种或多种结晶状态存在，结构相同的分子，结晶成不同的固体形式，称为多晶型物或多晶形。因此，在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的多晶型物。

晶体的制备步骤在本领域中是已知的。包括但不限于结晶或重结晶、升华、从其它相转化成固体、从超临界流体中结晶等。晶体的结构主要通过X射线衍射进行测定，具体测试方法及参数设定等为本领域已知。

N-氧化物

由于化合物中的含氮结构可被氧化形成N-氧化物。因此，在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的N-氧化物。

本领域技术人员应当理解，由于氮需要可用的孤对电子来氧化成氧化物，因此并非所有的含氮杂环都能够形成N-氧化物，可形成N-氧化物的含氮杂环为本领域已知。同时，本领域技术人员还应当认识到叔胺能够形成N-氧化物。用于制备含氮杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法是本领域技术人员熟知的，包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷来氧化杂环和叔胺。这些用于制备N-氧化物的方法已在文献中得到广泛描述和综述，参见例如：T.L.Gilchrist,Comprehensive Organic Synthesis,vol.7,pp748-750；A.R.Katritzky和A.J.Boulton,Eds.,Academic Press；以及G.W.H.Cheeseman和E.S.G.Werstiuk，Advances in Heterocyclic Chemistry,vol.22,pp 390-392,A.R.Katritzky和A.J.Boulton,Eds.,Academic Press。

同位素标记的化合物

在另一个方面，本申请还涉及同位素标记的所述化合物，其与本申请中所述化合物的结构相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本申请所述化合物中的同位素包括但不限于氢的同位素(例如²H、³H)；碳的同位素(例如¹¹C、¹³C及¹⁴C)；氯的同位素(例如³⁶Cl)；氟的同位素(例如¹⁸F)；碘的同位素(例如¹²³I及¹²⁵I)；氮的同位素(例如¹³N及¹⁵N)；氧的同位素(例如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O)；磷的同位素(例如³²P)；及硫的同位素(例如³⁵S)。

代谢物

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的代谢物形式。

在一些实施方案中，所述代谢物特指所述化合物在体内多种药物代谢酶(尤其是肝药酶)的作用下，经生物转化形成具有药理活性的代谢物形式，其仍能保持原型的药理作用。

前药

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的前药。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。因此，在这些情况中，用于限定本申请中所述治疗方法的术语“给药”应包括用所要求保护的化合物中的一种或多种的前药形式来治疗相应疾病或病症，但是在向个体给药后所述前药形式在体内应当转化成所述化合物。例如，在“Design of Prodrug”,ed.H.Bundgaard,Elsevier,1985中，描述了选择和制备适合的前药衍生物的常规方法。

溶剂合物

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的溶剂合物。所述溶剂合物是指所述化合物与制药上可接受的溶剂结合而成的混合物形式。在一些实施方案中，所述制药上可接受的溶剂包括水，乙醇，乙酸等。溶剂化物包括化学计算量的溶剂合物和非化学计算量的溶剂合物，例如水合物。

药学上可接受的盐

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物的药学上可接受的盐，其包括(1)所述化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH、-OH、-SO₃H等)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，例如所述化合物与碱金属或碱土金属形成的盐、所述化合物的铵盐，和所述化合物与含氮有机碱形成的盐；以及(2)所述化合物中存在的碱性官能团(例如-NH₂等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，例如所述化合物与无机酸或有机羧酸形成的盐。

药物组合物

在另一个方面，本申请还涉及药物组合物，其含有前述的化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，任选地，其进一步含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

本文中所述药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。其中所述的载体包括但不限于：离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白如人血白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、甘油、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质、如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶态氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜂蜡、羊毛脂。

所述赋形剂是指在药物制剂中除主药以外的附加物。其性质稳定，与主药无配伍禁忌，不产生副作用，不影响疗效，在常温下不易变形、干裂、霉变、虫蛀、对人体无害、无生理作用，不与主药产生化学或物理作用，不影响主药的含量测定等。如片剂中的黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂；中药丸剂中的酒、醋、药汁等；半固体制剂软膏剂、霜剂中的基质部分；液体制剂中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等均可称为赋形剂。

所述药物组合物可以通过以下途径给药：胃肠外、局部、静脉内、口服、皮下、动脉内、真皮内、经皮、直肠、颅内、腹膜内、鼻内、肌内途径或作为吸入剂。在一些实施方案中，所述药物组合物可以任选地与在治疗各种疾病中至少有一定效果的其它试剂联合给药。

所述药物组合物可根据给药途径配成各种适宜的剂型。

当口服用药时，所述药物组合物可制成任意口服可接受的制剂形式，包括但不限于片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液。水悬浮液制剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。

当皮肤局部施用时，所述药物组合物可制成适当的软膏、洗剂或霜剂制剂形式，其中将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中。软膏制剂可使用的载体包括但不限于：矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蜡和水；洗剂或霜剂可使用的载体包括但不限于：矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸、吐温60、十六烷酯蜡、十六碳烯芳醇、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。

所述药物组合物还可以无菌注射制剂形式用药，包括无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。其中，可使用的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质，如单甘油酯或二甘油酯。

可通过合适的体外或体内测定来确定所述药物组合物的效果以及给药是否适用于治疗个体所患疾病或医学疾病状态。通常，足以实现预防或治疗效果的所述药物组合物的有效量为约0.001mg/千克体重/天至约10,000mg/千克体重/天。合适的情况下，剂量为约0.01mg/千克体重/天至约1000mg/千克体重/天。剂量范围可以为每天、每两天或每三天约0.01至1000mg/kg受试者体重，更通常为0.1至500mg/kg受试者体重。

用途和治疗方法

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物在制备用于调节(例如激活或激动)STING蛋白的药物中的用途。

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物在制备治疗细胞增殖性疾病的药物中的用途。

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物，其用于调节(例如激活或激动)STING蛋白。

在另一个方面，本申请还涉及所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物，其用于治疗胞增殖性疾病。

在另一个方面，本申请还涉及一种调节(例如激活或激动)STING蛋白的方法，其包括向有此需要的受试者或细胞施用有效量的所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物。

在另一个方面，本申请还涉及一种治疗细胞增殖性疾病的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的所述化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，或者所述药物组合物。

在一些实施方案中，所述细胞增殖性疾病为癌症。

制备方法

本发明提供制备式(II)的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

其中，LG表示离去基团，所述的离去基团包括但不限于卤素原子、甲磺酰基氧基、对甲基苯磺酰基氧基等，R¹、R²、R⁵、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、L¹、L²、X²、m和n如式(I)化合物所定义。

步骤(1)使化合物IN-1与巯基乙酸甲酯进行反应以得到化合物IN-2；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈及其任意组合，优选N,N-二甲基甲酰胺。所述反应优选在适合的碱存在下进行。所述碱可选自二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠，优选碳酸钾。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-100℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(2)使化合物IN-2进行反应以得到化合物IN-3；

所述反应优选在适合的溶剂中进行。所述溶剂可选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、水及其任意组合，优选甲醇与水的混合溶剂。所述反应优选在适合的碱存在下进行。所述碱可选自氢氧化锂、氢氧化钠，优选氢氧化钠。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-60℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(3)使化合物IN-3与化合物IN-4进行反应以得到化合物IN-5；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二氯甲烷及其任意组合，优选四氢呋喃。所述反应优选在适合的缩合剂存在下进行。所述缩合剂可选自二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、HATU、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐，优选HATU。所述反应优选在适合的有机碱存在下进行。所述有机碱可选自三乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二异丙基乙胺，优选二异丙基乙基胺。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-60℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(4)使化合物IN-5进行反应以得到化合物IN-6；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自二氯甲烷、氯仿、甲苯及其任意组合，优选二氯甲烷。所述反应优选在适合的路易斯酸存在下进行。所述路易斯酸可选自三溴化硼、三氯化铝等，优选三氯化铝。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-100℃。所述反应优选进行合适的时间，例如15-36小时。

步骤(5)使化合物IN-6与化合物IN-7进行反应以得到化合物IN-8；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、四氢呋喃、丙酮等及其任意组合，优选丙酮。所述反应优选在适合的碱存在下进行。所述碱可选自碳酸钾、碳酸钠、氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、甲醇钠等，优选碳酸钾。所述反应优选在适合的催化剂存在下进行。所述催化剂可选自碘化钾、碘化钠等，优选碘化钾。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为20-100℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(6)使化合物IN-1-1与巯基乙酸甲酯进行反应以得到化合物IN-2-1；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、乙腈及其任意组合，优选N,N-二甲基甲酰胺。所述反应优选在适合的碱存在下进行。所述碱可选自二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠，优选碳酸钾。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-100℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(7)使化合物IN-2-1进行反应以得到化合物IN-3-1；

所述反应优选在适合的溶剂中进行。所述溶剂可选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、水及其任意组合，优选甲醇与水的混合溶剂。所述反应优选在适合的碱存在下进行。所述碱可选自氢氧化锂、氢氧化钠，优选氢氧化钠。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-60℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(8)使化合物IN-3-1与化合物IN-4-1进行反应以得到化合物IN-5-1；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二氯甲烷及其任意组合，优选四氢呋喃。所述反应优选在适合的缩合剂存在下进行。所述缩合剂可选自二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、HATU、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐，优选HATU。所述反应优选在适合的有机碱存在下进行。所述有机碱可选自三乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二异丙基乙胺，优选二异丙基乙基胺。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-60℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

步骤(9)使化合物IN-5-1进行反应以得到化合物IN-6-1；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自二氯甲烷、氯仿、甲苯及其任意组合，优选二氯甲烷。所述反应优选在适合的路易斯酸存在下进行。所述路易斯酸可选自三溴化硼、三氯化铝等，优选三氯化铝。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为25-100℃。所述反应优选进行合适的时间，例如15-36小时。

步骤(10)使化合物IN-6-1与化合物IN-8进行反应以得到化合物II；

所述反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选四氢呋喃。所述反应优选在适合的膦试剂存在下进行。所述膦试剂可选自三正丁基膦，三苯基膦等，优选三苯基膦。所述反应优选在适合的偶氮试剂存在下进行。所述偶氮试剂可选自偶氮二甲酸二异丙酯、偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酰二哌啶等，优选偶氮二甲酸二异丙酯。所述反应优选在适合的温度下进行，所述温度优选为20-60℃。所述反应优选进行合适的时间，例如2-8小时。

在本申请中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所用的有机合成及纯化、细胞培养、分子遗传学、核酸化学、免疫学实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的常规步骤。同时，为了更好地理解本发明，下面提供相关术语的定义和解释。

如本文中所使用的，术语“卤素”指氟、氯、溴和碘。

如本文中所使用的，术语“C_1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括C_1-5烷基、C_1-4烷基、C_1-3烷基和C_1-2烷基等。其典型的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。

如本文中所使用的，术语“C_1-6亚烷基”表示如前所述的C_1-6烷基进一步失去一个氢原子后得到的结构，包括C_1-5亚烷基、C_1-4亚烷基、C_1-3亚烷基和C_1-2亚烷基等。其典型的实例为亚甲基、亚乙基、1,3-亚丙基、1,4-亚丁基等。

如本文中所使用的，术语“C_2-6烯基”是指含有至少一个碳碳双键以及2-6个碳原子的直链或支链烃基，包括C_2-4烯基等。其典型的实例为乙烯基、丙烯基、2-丙烯基、丁烯基、2-丁烯基、丁二烯基、戊烯基、2-甲基-丁烯基、3-甲基-丁烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基、己烯基、2-乙基-丁烯基、3-甲基-戊烯基、4-甲基-戊烯基、1,3-己二烯基、1,4-己二烯基、1,5-己二烯基等。

如本文中所使用的，术语“C_2-6亚烯基”是指如前文所述的C_2-6烯基进一步失去一个氢原子后得到的结构，包括C_2-4亚烯基等。其典型的实例为亚乙烯基、1,3-亚丙烯基等。

如本文中所使用的，术语“C_2-6炔基”是指含有至少一个碳碳三键以及2-6个碳原子的直链或支链烃基，包括C_2-4炔基等。其典型的实例为乙炔基、丙炔基、2-丙炔基、丁炔基等。

如本文中所使用的，术语“C_2-6亚炔基”是指如前文所述的C_2-6炔基进一步失去一个氢原子后得到的结构，包括C_2-4亚炔基等。其典型的实例为亚乙炔基、1,3-亚丙炔基等。

如本文中所使用的，术语“C_1-6卤代烷基”是指如前文所述的C_1-6烷基进一步被至少一个如前文所述的卤素取代后得到的结构，包括C_1-4卤代烷基，C_1-3卤代烷基和C_1-2卤代烷基。典型的实例为三氟甲基、氯甲基、

如本文中所使用的，术语“C_1-6烷氧基”是指以C_1-6烷基-O-方式形成的基团，其中“C_1-6烷基”的定义如前文所述，包括C_1-4烷氧基，C_1-3烷氧基和C_1-2烷氧基。典型的实例为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等。

如本文中所使用的，术语“C_1-6卤代烷氧基”是指如前文所述C_1-6烷氧基进一步被至少一个如前文所述的卤素取代后得到的结构，包括C_1-4卤代烷氧基，C_1-3卤代烷氧基和C_1-2卤代烷氧基。典型的实例为三氟甲氧基等。

如本文中所使用的，术语“C_3-10环烷基”是指具有3至10个碳原子的单环、双环或三环饱和或部分不饱和的非芳族环状烃基，包括C_3-8环烷基，C_3-6环烷基和C_5-6环烷基。典型的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、降冰片烷基(norbornyl)、十氢化萘基、金刚烷(adamant)基、螺戊基、二环[2.1.0]戊基、二环[3.1.0]己基、螺[2.4]庚基、螺[2.5]辛基、二环[5.1.0]辛基、螺[2.6]壬基、二环[2.2.0]己基、螺[3.3]庚基、二环[4.2.0]辛基、和螺[3.5]壬基等。

如本文中所使用的，术语“C_3-10亚环烷基”是指如前所述的C_3-10环烷基进一步失去一个氢原子后得到的结构，包括C_3-8亚环烷基，C_3-6亚环烷基和C_5-6亚环烷基。典型的实例包括亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚环庚基、亚环辛基等。

如本文中所使用的，术语“C_6-10芳基”是指含有6至10个成环碳原子的芳族基团，例如苯基或萘基。

如本文中所使用的，术语“5-10元杂芳基”是指含有5-10个环成员的芳香族基团，且所述环成员中至少1个(例如1、2、3或4个)为选自N、O和S的杂原子，包括5-6元杂芳基。所述杂芳基可为单环杂芳基、双环杂芳基或多环杂芳基。典型的实例为呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基等。

如本文中所使用的，术语“3-10元杂环基”是指含有至少一个(例如，含有1个、2个或3个)选自N、O和S的杂原子的饱和或部分饱和的环状烃基，包括3-8元杂环基、3-7元杂环基、3-6元杂环基和5-6元杂环基。典型的实例为环氧乙烷基、环氧丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、咪唑啉基、二氢吡唑基、吡唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、哌啶基、噁嗪基等。

如本文中所使用的，术语“3-10元亚杂环基”是指如前所述的3-10原杂环基进一步失去一个氢原子后得到的结构，包括3-8元亚杂环基、3-7元亚杂环基、3-6元亚杂环基和5-6元亚杂环基。典型的实例为亚环氧乙烷基、亚环氧丁烷基、亚吡咯烷基、亚四氢呋喃基、亚咪唑啉基、亚二氢吡唑基、亚吡唑烷基、亚噻唑烷基、亚异噻唑烷基、亚异噁唑烷基、亚吗啉基、亚硫代吗啉基、亚哌嗪基、亚哌啶基、亚噁嗪基等。

如本文中所使用的，术语“一个或多个”是指在合理条件下的1个或多个(例如2个、3个、4个、5个或10个)。

当某一基团被描述为“任选地被一个或多个取代基取代”，则该基团可(1)未被取代或(2)被取代。如果某一基团上的碳被描述为任选地被一个或多个选自下述的取代基取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的任选的取代基替代。如果某一基团上的氮被描述为任选地被一个或多个下述的取代基取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的任选的取代基替代。

本文中所用术语“有效量”是指足以实现所需治疗效果的量，例如，实现减轻与待治疗疾病相关的症状的量。

本文中所用术语“治疗”目的是减轻或消除所针对的疾病状态或病症。如果受试者按照本文所述方法接受了治疗量的所述晶型或其药物组合物，该受试者一种或多种指征和症状表现出可观察到的和/或可检测出的降低或改善，则受试者被成功地“治疗”了。还应当理解，所述的疾病状态或病症的治疗不仅包括完全地治疗，还包括未达到完全地治疗，但实现了一些生物学或医学相关的结果。

发明的有益效果

本申请提供了一类苯并噻吩酰胺类化合物、其立体异构体、互变异构体、多晶型物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或其溶剂合物或药学上可接受的盐，其对STING信号通路具有明显激活作用，可用于肿瘤等疾病的治疗。

附图说明

图1显示了化合物1和化合物2对STING、TBK1和IRF3的磷酸化水平的影响。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

化合物的结构是通过核磁共振(¹H NMR)或质谱(MS)来确定的。

¹H NMR的测定是用JEOL Eclipse 400核磁仪，测定溶剂为氘代甲醇(CD₃OD)、氘代氯仿(CDCl₃)或六氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移(δ)是以10^-6(ppm)作为单位给出。

MS的测定用Agilent(ESI)质谱仪，生产商：Agilent，型号：Agilent 6120B。

采用制备高效液相色谱法进行制备的方法：

仪器型号：Agilent 1260，色谱柱：Waters SunFire Prep C18OBD(19mm×150mm×5.0μm)；色谱柱温：25℃；流速：20.0mL/min；检测波长：214nm；洗脱梯度：(0min：10％A，90％B；16.0min：90％A，10％B)；流动相A：乙腈；流动相B：0.05％甲酸水溶液。

薄层色谱硅胶板(TLC)使用Merck产的铝板(20×20cm)，薄层层析分离纯化采用的规格是烟台产GF 254(1mm)。

反应的监测采用薄层色谱法(TLC)或LC-MS，使用的展开剂体系有：二氯甲烷和甲醇体系，正己烷和乙酸乙酯体系，石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节或者加入三乙胺等进行调节。

微波反应使用Biotage Initiator+(400W,RT～300℃)微波反应器。

柱层析一般使用200～300目硅胶为载体。洗脱剂的体系包括：二氯甲烷和甲醇体系，石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺进行调节。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温(20℃～35℃)；

本发明所使用的试剂购自Acros Organics、Aldrich Chemical Company、特伯化学等公司。

在常规的合成法以及实施例、和中间体合成例中，各缩写的意思如以下所示。

中间体制备例1：3-(6-羟基-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-A)和3-(5-羟基-6-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-B)的制备

第一步：5,6-二甲氧基苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯的制备

将6-氟藜芦醛(10.0g,54.3mmol)溶于DMF(200mL)中，加入巯基乙酸甲酯(6.9g,65.2mmol)和碳酸钾(22.5g,162.9mmol)，加热至60℃反应15小时。将反应液缓慢倾入水(1000mL)中搅拌2小时，过滤并用水(500mL)洗涤固体，60℃真空干燥后得到本步的标题化合物(12.0g，收率：87.6％)。

MS m/z(ESI):253.0[M+H]⁺。

第二步：5,6-二甲氧基苯并[b]噻吩-2-甲酸的制备

将5,6-二甲氧基苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(12.0g,47.6mmol)溶于甲醇(100mL)和水(20mL)中，加入氢氧化钠(3.8g,95.1mmol)后，室温反应4小时。将反应液40℃减压浓缩除去部分甲醇，将剩余物加入水(500mL)中，用稀盐酸调节pH＝3，过滤并用水(500mL)洗涤固体，60℃真空干燥后得到标题化合物(8.0g，收率：70.6％)。

MS m/z(ESI):239.0[M+H]⁺。

第三步：3-(5,6-二甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯的制备

将5,6-二甲氧基苯并[b]噻吩-2-甲酸(5.0g,21.0mmol)和3-(甲氨基)丙酸乙酯(4.1g,31.5mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入HATU(16.0g,42.0mmol)和DIPEA(8.1g,63.0mmol)后加热至60℃反应4小时。将反应液倾入水(200mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤并将滤液减压浓缩得到标题化合物(6.12g，收率：83.0％)。

MS m/z(ESI):352.1[M+H]⁺。

第四步：3-(6-羟基-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-A)和3-(5-羟基-6-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-B)的制备

将3-(5,6-二甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(2.2g,6.3mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，室温下缓慢加入三氯化铝(8.3g,62.6mmol)后，维持室温搅拌24小时。将反应液倾入水(200mL)中，用稀盐酸调节pH＝3，乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤并将滤液减压浓缩，浓缩物经制备高效液相色谱仪纯化得到3-(6-羟基-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-A:1.32g，收率：59.4％)和3-(5-羟基-6-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-B:543mg，收率：24.4％)。

Int-A:

MS m/z(ESI):338.1[M+H]⁺；

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:9.55(s,1H),7.62(s,1H),7.38(s,1H),7.27(s,1H),4.07(q,J＝8.0Hz,2H),3.85-3.83(m,3H),3.73-3.65(m,2H),3.21-3.18(m,3H),2.68-2.65(m,2H),1.17(t,J＝8.0Hz,3H)。

Int-B:

MS m/z(ESI):338.1[M+H]⁺；

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:9.25(s,1H),7.58(s,1H),7.50(s,1H),7.23(s,1H),4.07(q,J＝8.0Hz,2H),3.85-3.82(m,3H),3.73-3.68(m,2H),3.21-3.18(m,3H),2.68-2.65(m,2H),1.17(t,J＝8.0Hz,3H)。

中间体制备例2：3-(6-(3-羟丙基)-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-C)的制备

将3-(6-羟基-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-A，150.0mg,444.6μmol)溶于丙酮(10mL)中，加入碳酸钾(122.7mg,889.2μmol)、碘化钾(14.8mg,88.9μmol)和3-溴-1-丙醇(92.7mg,666.9μmol)后，加热至60℃反应5小时。将反应液浓缩后倾入水(50mL)中，乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤并将滤液减压浓缩，浓缩物经制备高效液相色谱仪纯化得到标题化合物(Int-C，80.0mg，收率：45.5％)。

MS m/z(ESI):396.1[M+H]⁺。

实施例1：3,3’-((6,6’-(丙烷-1,3-二基双(氧))双(5-甲氧基苯并[b]噻吩-2,2’-羰基))双(甲氨基二基))二丙酸二乙酯(化合物1)的制备

将3-(6-(3-羟丙基)-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-C，68.0mg,202.3μmol)、3-(6-羟基-5-甲氧基-N-甲基苯并[b]噻吩-2-甲酰胺基)丙酸乙酯(Int-A，80.0mg,202.3μmol)和三苯基膦(106.0mg,404.6μmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，氮气保护下搅拌0.5小时后加入偶氮二甲酸二异丙酯(237.0mg,429.8μmol)，室温搅拌12小时。将反应液40℃减压浓缩除去四氢呋喃，浓缩物经制备高效液相色谱仪纯化得到标题化合物(19mg，收率：12.5％)。

MS m/z(ESI):715.2[M+H]⁺。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.44(s,2H),7.32(s,2H),7.20(s,2H),4.36-4.33(m,4H),4.19-4.13(m,4H),3.92(s,6H),3.87-3.84(m,4H),3.27(s,6H),2.73-2.70(m,4H),2.47-2.44(m,2H),1.31-1.25(m,6H)。

实施例2：3,3’-((6,6’-(丙烷-1,3-二基双(氧))双(5-甲氧基苯并[b]噻吩-2,2’-羰基))双(甲氨基二基))二丙酸(化合物2)的制备

将3,3’-((6,6’-(丙烷-1,3-二基双(氧))双(5-甲氧基苯并[b]噻吩-2,2’-羰基))双(甲氨基二基))二丙酸二乙酯(30.0mg,42.0μmol)溶于乙醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化钠(8.3mg,209.8umol)后维持室温反应4小时。将反应液倾入水(30mL)中，用稀盐酸调节pH＝3，乙酸乙酯(8mL)萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤并将滤液减压浓缩，浓缩物经制备高效液相色谱仪纯化得到标题化合物(15.0mg，收率：54.3％)。

MS m/z(ESI):659.2[M+H]⁺。

¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.57(s,2H),7.46(s,2H),7.36(s,2H),4.33-4.30(m,4H),3.88(s,6H),3.87-3.84(m,4H),3.31(s,6H),2.72-2.68(m,4H),2.36-2.33(m,2H)。

生物学测试

在以下实验例中使用的对照化合物1：ADU-S100(1638750-96-5)购自MCE，对照化合物2：

按照现有技术方法合成。

实验例1.化合物对STING介导的干扰素(Interferon，IFN)信号通路的激动作用

本实验通过在THP1-Blue^TMISG细胞(InvivoGen)中检测IFN调节因子(interferonregulatory factor)调控的SEAP(secreted embryonic alkaline phosphatase,分泌型胚碱性磷酸酶)报告基因活性来评估待测化合物在细胞水平对STING介导的IFN信号通路的激动作用。

将处于对数生长期的THP1-BlueTMISG细胞(InvivoGen)离心，用细胞培养液重悬使其密度为2×10⁶个/ml，以50μl/孔接种到96孔细胞培养板(Corning)中。用细胞培养液将待测化合物1母液梯度稀释成60、7.5、0.94、0.12、0.015、0.0018、0.00023和0μM的2×工作浓度稀释液；用细胞培养液将待测化合物2母液梯度稀释成200、66.67、22.22、7.41、2.47、0.82、0.27和0μM的2×工作浓度稀释液，添加50μl/孔化合物2×工作浓度稀释液至96孔板中(阴性对照孔中加入50μl 2％DMSO培液)，将培养板置于细胞培养箱孵育16h。细胞孵育结束后，将10μl细胞培养上清液转移至96孔板中，加入90μl/孔的QUANTI-Blue(InvivoGen)溶液，37℃孵育3h，使用酶标仪读取620nm下的吸光度值(OD_620nm)。EC₅₀通过Graphpad Prism软件拟合计算，实验结果如表一所示。

表一.测试化合物对STING介导的Interferon(IFN)信号通路的激动作用

化合物编号	<![CDATA[EC<sub>50</sub>(nM)]]>	<![CDATA[E<sub>max</sub>(OD<sub>620nm</sub>)]]>
			1	7.3	1.85
2	6590	1.48

备注：EC₅₀指化合物刺激产生的OD_620nm值达到E_max一半时的化合物浓度；E_max指化合物刺激产生的最高OD_620nm值。

结果表明化合物1和化合物2对THP1-BlueTMISG细胞中STING介导的干扰素(Interferon，IFN)信号通路具有很强的激动作用。

实验例2.化合物对STING下游细胞因子IFN-β的激动作用

本实验通过采用ELISA检测方法检测STING下游细胞因子IFN-β的变化来评估化合物在细胞水平对STING蛋白的激动作用。

将处于对数生长期的THP-1细胞(南京科佰)离心，用细胞培养液重悬使其密度为8×10⁶个细胞/mlL，将250μL/孔细胞悬液接种到24孔细胞培养板(Corning)中；用细胞培养液将待测化合物稀释至2×工作液浓度。将250μl待测化合物2×工作液浓度稀释液加入至24孔板中(阴性对照孔中加入250μl 2％DMSO培液)，使其与细胞充分混匀后，将24孔板放置于细胞培养箱中孵育8h。孵育结束后，在300g转速条件下，离心5min收集上清；吸取细胞培养液100μl，按Human IFN-βELISA试剂盒(PBL-41410)步骤孵育一抗抗体及HRP标记的二抗，显色，并读取450nm波长下的吸光度(OD_450nm)。使用Graphpad Prism软件根据标准曲线，计算出IFN-β的浓度。

实验例3.化合物对STING信号通路的激动作用

本实验通过采用蛋白质印迹法检测STING及其下游蛋白TBK1(TANK-结合激酶1)、IRF3(干扰素调节因子3)磷酸化水平的变化来评估测试化合物在细胞水平对STING信号通路的激动作用。

将对数生长期的THP-1细胞离心，用细胞培养液重悬使其密度为4×10⁶个/ml，将细胞悬液按照0.5ml/孔接种到12孔细胞培养板(Corning)中。用细胞培养液将对照化合物稀释成浓度为60μM的2×工作浓度稀释液，将本发明化合物稀释成2×工作液浓度稀释液(其中，化合物1稀释成浓度为0.006μM、0.6μM、60μM的2×工作浓度稀释液；化合物2稀释成浓度为6μM、20μM、60μM的2×工作浓度稀释液)。将0.5mL化合物稀释液加入12孔板中(阴性对照孔中加入500μl 2％DMSO培液)，置于细胞培养箱孵育3小时；孵育结束后离心收集细胞，用60μL细胞裂解液(CST)裂解细胞30分钟，12000rpm，离心15分钟，收集上清液测定蛋白浓度，然后加入适量5×蛋白上样缓冲液，95℃下加热10分钟，制成蛋白电泳样品，最后进行蛋白质印迹法实验检测相应蛋白的磷酸化水平，实验结果如附图1所示。

蛋白质印迹法实验所用一抗购自CST：STING(D2P2F)兔mAb，Phospho-STING(Ser366)兔mAb，Phospho-IRF3(Ser396)(D601M)兔mAb，IRF3(D83B9)兔mAb，TBK1/NAK(D1B4)兔mAb，Phospho-TBK1/NAK(Ser172)(D52C2)

兔mAb，GAPDH(D16H11)兔mAb；二抗辣根过氧化物酶-缀合的山羊抗兔IgG(H+L)购自Zsgb-bio。

结果表明，化合物1和化合物2对THP-1细胞中STING及其下游蛋白TBK1、IRF3的磷酸化水平有很强的激动作用。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (13)

1.化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(I)的结构，

其中：X¹和X³为O；X²选自C_1-4亚烷基；

L¹选自共价键和(C(R⁹)₂)_p；L²选自共价键和(C(R¹⁰)₂)_q；

R¹和R²各自独立地选自-OR^a；R³和R⁴各自为氢；R⁵和R⁶各自独立地选自氢和C_1-4烷基；R⁷和R⁸各自独立地选自-CO₂R¹¹；各R⁹独立地选自氢和C_1-4烷基；各R¹⁰独立地选自氢和C_1-4烷基；R¹¹选自氢和C_1-4烷基；

R^a选自C_1-4烷基；

p和q各自独立地选自1、2和3。

2.权利要求1的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，

其中，L¹为(CH₂)_p。

3.权利要求1的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，

其中，L²为(CH₂)_q。

4.权利要求1-3任一项的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，

其中，R⁷和R⁸各自独立地选自-COOH和-COOEt。

5.权利要求1-3任一项的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，其中，X²选自C_1-3亚烷基。

6.权利要求1-3任一项所述的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，其中：R⁵和R⁶各自独立地选自C_1-4烷基。

7.权利要求1的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，其中所述化合物具有如下结构：

8.药物组合物，其含有权利要求1-7任一项的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，任选地，其进一步含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

9.权利要求1-7任一项的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，或者权利要求8的药物组合物在制备用于调节STING蛋白的药物中的用途。

10.权利要求9所述的用途，所述的调节为激活或激动。

11.权利要求1-7任一项的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐，或者权利要求8的药物组合物在制备治疗细胞增殖性疾病的药物中的用途。

12.权利要求11的用途，所述细胞增殖性疾病为癌症。

13.式(II)化合物的制备方法，其包括以下步骤：

其中，LG表示离去基团，R¹、R²、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、L¹、L²、X²如权利要求1-7中任一项所定义；m和n均为1；

步骤(1)使化合物IN-1与巯基乙酸甲酯进行反应以得到化合物IN-2；

步骤(2)使化合物IN-2进行反应以得到化合物IN-3；

步骤(3)使化合物IN-3与化合物IN-4进行反应以得到化合物IN-5；

步骤(4)使化合物IN-5进行反应以得到化合物IN-6；

步骤(5)使化合物IN-6与化合物IN-7进行反应以得到化合物IN-8；

步骤(6)使化合物IN-1-1与巯基乙酸甲酯进行反应以得到化合物IN-2-1；

步骤(7)使化合物IN-2-1进行反应以得到化合物IN-3-1；

步骤(8)使化合物IN-3-1与化合物IN-4-1进行反应以得到化合物IN-5-1；

步骤(9)使化合物IN-5-1进行反应以得到化合物IN-6-1；

步骤(10)使化合物IN-6-1与化合物IN-8进行反应以得到所述式(II)化合物。

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