CN111848281A - 一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥及其制备方法，涉及农业化肥应用领域。该肥料包括：低阶煤基腐植酸盐100份、植物精油1‑20份、氮肥5‑10份、磷肥10‑15份、钾肥10‑15份、硫酸锌4‑6份、硫酸锰5‑10份、硼酸3‑8份、硅酸钠7‑12份，具体制备方法为：1)按比例分别称取原料；2)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入水中，搅拌至完全溶解；3)将低阶煤基腐植酸盐加入水溶解，并依次加入氮肥、磷肥、钾肥，搅拌后加入植物精油；4)将步骤2)中所得溶液加入步骤3)中的溶液中，搅拌即得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。利用本方法做制备的肥料，在杀虫抗菌的同时，增强土壤肥力，提供给植物均衡营养，改善作物品质，增加作物产量。

Description

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥及其制备方法

技术领域

本发明属于农业化肥应用领域，具体涉及一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥及其制备方法。

背景技术

肥料是农业生产中必不可少的生产资料，稳定的土壤肥力是农业可持续发展的必要条件，而土壤养分供应平衡则是土壤肥力的重要基础。普通肥料作物吸收慢、肥效低，大量使用使得土壤肥力降低、养分不均衡，土壤板结，而且造成了环境污染等一系列问题。

植物在生长发育过程中，在外界环境的影响下，受到病虫害的干扰，超出了它的承受范围，致使植物生长发育不正常，产量下降，品质变差。而田间对病虫害的防治中，也存在着很多问题，如传统杀虫剂中存在有毒、有害的物质，会对生态环境产生危害，同时也会杀死大量对植物没有危害的其它生物，进一步对土壤结构及生态产生破坏。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥及其制备方法，以克服传统肥料对土壤与生态环境带来的危害，为植物提供杀虫及全面营养的功效。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，以质量份数计，包括：腐植酸盐100份、植物精油1-20份、氮肥5-10份、磷肥10-15份、钾肥10-15份、硫酸锌4-6份、硫酸锰5-10份、硼酸3-8份、硅酸钠7-12份。

优选地，所述腐植酸盐为腐植酸铵、腐植酸钾和腐植酸钠中的任意一种或几种。

优选地，所述植物精油从含有植物精油的天然植物中提取出，所述含植物精油的天然植物为肉桂、茴香、丁香和百里香中的任意一种。

进一步优选地，从含有植物精油的天然植物中提取植物精油的方法为：将含有植物精油的天然植物洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：(20-70)mL的比例将含有植物精油的天然植物在水中浸泡1.5-4h后，常压下蒸馏4-7h，将馏出液冷却至室温后转移至油水分离器分离，收集油状液体，得到植物精油。

优选地，所述氮肥为硫酸铵、碳酸氢铵和尿素中的任意一种。

优选地，所述磷肥为过磷酸钙、磷酸二铵和磷酸二氢钾中的任意一种。

优选地，所述钾肥为氯化钾或硫酸钾。

本发明还公开了上述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥的制备方法，包括以下步骤：

1)按比例称取腐植酸盐、植物精油、氮肥、磷肥、钾肥、硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠；

2)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠加入水中，搅拌至完全溶解；

3)将低阶煤基腐植酸盐加入水溶解，并依次加入氮肥、磷肥、钾肥，充分搅拌，随后加入植物精油，继续搅拌至完全混合均匀，得到低阶煤基腐植酸盐营养-植物精油溶液；

4)将步骤2)中所得溶液加入步骤3)中的所得低阶煤基腐植酸盐营养-植物精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明提供了一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，包括低阶煤基腐植酸盐、植物精油、氮肥、磷肥、钾肥、硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠。其中植物精油是具有挥发性的植物次代谢产物，广泛存在于植物的各个部分，其抑菌光谱性好，对环境危害小，这种物质能溶解昆虫体表蜡质层进入害虫体内，并且能在害虫表面起到封闭作用，从而能更好的杀灭害虫。植物精油与腐植酸盐配合，结合N肥、P肥、K肥等使得有机、无机化合物进行相互作用，能够实现均衡营养、抗菌杀虫等多重功效。此外，本申请中所使用的低阶煤基腐植酸盐、植物精油均为安全无害的绿色原料，不会对土壤和周围的生态环境造成破坏。与传统肥料相比，本申请中的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对青菜叶片中的叶绿素、维生素C以及过氧化物酶活性的合成产生了很大的刺激，对丙二醛的产生起到抑制作用，延缓了青菜的损伤及衰老程度，加速了其体内的代谢活动。低阶煤基腐植酸、植物精油以及植物生长所需营养元素的协同作用，增强了植物抵抗细菌的能力和对根线虫的致死率，提升植物对抗灾害的性能，使得植物生长受外部不良环境的影响显著减小。

本发明提供了一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥的制备方法，采用本方法制备出的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，在杀虫抗菌的同时，增强土壤肥力，提供给植物均衡营养，改善作物品质，增加作物产量。该方法制备方便、生产简单、安全性高且对环境友好。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸铵100份、肉桂精油10份、硫酸铵5份、过磷酸钙10份、氯化钾15份、硫酸锌4份、硫酸锰5份、硼酸8份、硅酸钠12份，以质量份数计。其具体制备步骤为：

1)将天然植物肉桂洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：30mL的比例在水中浸泡2h后，在常压下蒸馏4h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到肉桂精油；2)按质量份数计，分别称取腐植酸铵100份、肉桂精油10份、硫酸铵5份、过磷酸钙10份、氯化钾15份、硫酸锌4份、硫酸锰5份、硼酸8份、硅酸钠12份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸铵加入适量的水溶解，并依次加入称取好的硫酸铵、过磷酸钙、氯化钾，充分搅拌使腐植酸铵与硫酸铵、过磷酸钙、氯化钾混合均匀，随后加入肉桂精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸铵营养-肉桂精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸铵营养-肉桂精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例2

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸钾100份、茴香精油15份、碳酸氢铵10份、磷酸二铵10份、氯化钾10份、硫酸锌5份、硫酸锰8份、硼酸4份、硅酸钠10份，以质量份数计。其具体制备步骤为：

1)将天然植物茴香洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：20mL的比例将天然植物茴香在水中浸泡3h后，在常压下蒸馏6h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到茴香精油；

2)按质量份数计，分别称取腐植酸钾100份、茴香精油15份、碳酸氢铵10份、磷酸二铵10份、氯化钾10份、硫酸锌5份、硫酸锰8份、硼酸4份、硅酸钠10份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸钾加入适量的水溶解，并依次加入碳酸氢铵、磷酸二铵、氯化钾，充分搅拌使腐植酸钾与碳酸氢铵、磷酸二铵、氯化钾混合均匀，随后加入茴香精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸钾营养-茴香精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸铵营养-茴香精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例3

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸钠100份、丁香精油8份、硫酸铵7份、磷酸二铵14份、硫酸钾13份、硫酸锌6份、硫酸锰7份、硼酸6份、硅酸钠10份，以质量分数计，其具体制备步骤为：

1)将天然植物丁香洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：40mL的比例将天然植物丁香在水中浸泡3.5h后，在常压下蒸馏4.5h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到丁香精油；

2)按质量份数计，分别称取腐植酸钠100份、丁香精油8份、硫酸铵7份、磷酸二铵14份、硫酸钾13份、硫酸锌6份、硫酸锰7份、硼酸6份、硅酸钠10份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸钠加入适量的水溶解，并依次加入硫酸铵、磷酸二铵、硫酸钾，充分搅拌使腐植酸钠与硫酸铵、磷酸二铵、硫酸钾混合均匀，随后加入丁香精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸钠营养-丁香精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸钠营养-丁香精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例4

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸铵50份、腐植酸钾50份、百里香精油12份、尿素8份、磷酸二氢钾15份、氯化钾12份、硫酸锌4.5份、硫酸锰6.5份、硼酸5份、硅酸钠9份，以质量分数计，其具体制备步骤为：

1)将天然植物百里香洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：45mL的比例将天然植物百里香在水中浸泡2.5h后，在常压下蒸馏5h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到百里香精油；

2)按质量份数计，分别称取腐植酸铵50份、腐植酸钾50份、百里香精油12份、尿素8份、磷酸二氢钾15份、氯化钾12份、硫酸锌4.5份、硫酸锰6.5份、硼酸5份、硅酸钠9份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸铵、腐植酸钾加入适量的水溶解，并依次加入尿素、磷酸二氢钾、氯化钾，充分搅拌使腐植酸铵、腐植酸钾与尿素、磷酸二氢钾、氯化钾混合均匀，随后加入百里香精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸铵、腐植酸钾营养-百里香精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸铵、腐植酸钾营养-百里香精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例5

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸钾40份、腐植酸钠60份、茴香精油18份、硫酸铵9份、过磷酸钙11份、硫酸钾11份、硫酸锌5份、硫酸锰9份、硼酸4份、硅酸钠8份，以质量分数计，其具体制备步骤为：

1)将天然植物茴香洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：50mL的比例将天然植物茴香在水中浸泡4h后，在常压下蒸馏6.5h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到茴香精油；

2)按质量份数计，分别称取腐植酸钾40份、腐植酸钠60份、茴香精油18份、硫酸铵9份、过磷酸钙11份、硫酸钾11份、硫酸锌5份、硫酸锰9份、硼酸4份、硅酸钠8份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸钾、腐植酸钠加入适量的水溶解，并依次加入硫酸铵、过磷酸钙、硫酸钾，充分搅拌使腐植酸钾、腐植酸钠与硫酸铵、过磷酸钙、硫酸钾混合均匀，随后加入茴香精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸钾、腐植酸钠营养-茴香精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸盐营养-茴香精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例6

一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥料，包括腐植酸铵30份、腐植酸钠70份、肉桂精油20份、碳酸氢铵10份、磷酸二氢钾13份、氯化钾10份、硫酸锌4份、硫酸锰10份、硼酸3份、硅酸钠7份，以质量分数计，其具体制备步骤为：

1)将天然植物肉桂洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以料液比为1g：70mL的比例将天然植物肉桂在水中浸泡3h后，在常压下蒸馏7h，控制温度使馏出液保持2-3滴每秒。当提取器中的油量不再增加，停止加热。待系统冷却至室温后，将馏出液转移至油水分离器中，开启油水分离器下端的活塞，将水缓慢从底部放出，之后收集油状液体，得到肉桂精油；

2)按质量份数计，分别称取腐植酸铵30份、腐植酸钠70份、肉桂精油20份、碳酸氢铵10份、磷酸二氢钾13份、氯化钾10份、硫酸锌4份、硫酸锰10份、硼酸3份、硅酸钠7份；

3)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠混合加入适量的水，搅拌至完全溶解；

4)将腐植酸铵、腐植酸钠加入适量的水溶解，并依次加入碳酸氢铵、磷酸二氢钾、氯化钾，充分搅拌使腐植酸铵、腐植酸钠与硫碳酸氢铵、磷酸二氢钾、氯化钾混合均匀，随后加入肉桂精油，搅拌至完全混合均匀，得到腐植酸铵、腐植酸钠营养-肉桂精油溶液；

5)将步骤3)中所得溶液加入步骤4)中的所得腐植酸铵、腐植酸钠营养-肉桂精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。

实施例中使用的低阶煤基腐植酸盐是从低阶煤里面提取的矿源腐植酸(燃烧值越低的煤其腐殖酸含量才越大)。

普通腐植酸肥：

包括腐植酸铵100份、硫酸铵5份、过磷酸钙10份、氯化钾15份、硫酸锌4份、硫酸锰5份、硼酸3份、硅酸钠7份，以质量份数计。

针对实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥进行植物施肥验证，其作物品质以及抗菌、杀虫检测结果如下所示：

(1)含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对青菜叶绿素含量的影响

叶绿素是植物进行光合作用必须的物质。本发明中叶绿素含量的测试及计算方法为：

称取青菜叶片0.2g，置于研钵内，添取少许碳酸钙，继续加入3mL的丙酮，研磨均匀后，添加2mL的丙酮，研磨至叶片泛白色，静置3～5分钟后，将上述浆液通过漏斗过滤到25mL棕色容量瓶中。研钵残渣用5mL丙酮清洗，移至漏斗过滤。将滤渣中的叶片弃用，滤纸上残留的叶绿素用丙酮冲洗到棕色容量瓶中，用丙酮定容至25mL，摇匀。以纯丙酮溶液为对照组，然后分别在665nm、645nm波长下测定其吸光度，并计算叶绿素总含量。

其中：V为提取液总体积(mL)；W为植物样品鲜重(g)。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥对青菜叶绿素含量的影响见表1。由表1可知，无论是实施例1-6，还是两组对照组，叶绿素含量均呈现先增加后减少的趋势，这是由于植物生长到达一定阶段，植物开始老化所致，且实施例1-6中个阶段对应的叶绿素含量均高于两组对照组，这说明实施例1-6中的植物精油与低阶煤基腐植酸盐、氮肥、磷肥、钾肥、微量量元素协同配合，对叶绿素合成起到了一定的促进作用，有利于植物生长。

表1不同实施例对青菜叶绿素含量的影响

(2)含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对青菜维生素C含量的影响

维生素C是人体不可缺少的一种有机化合物，也是维持生命的要素。本申请中维生素C含量的测试及计算方法为：

维生素C含量的测定采用氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性条件下滴定测定，滴定时溶液由无色变为淡红色那一刻，即为滴定终点。首先取一定体积的标准Vc溶液(0.1mg/mL)用2,6-二氯酚靛酚滴定至溶液呈粉红色且15s内无颜色消失发生，然后取同样量的2％的草酸做空白对照，并按上述方法滴定，最后称取菜叶1g撕碎后加入2％的草酸溶液5mL研磨成浆，将浆液转入到离心管中同时用少许2％的草酸溶液清洗研钵并合并液体，在8000r/min的转速下离心5min后将上清液转移至容量瓶中定容，取一定量的液体迅速用2,6-二氯酚靛酚滴定至液体呈粉红色，测定V_c含量。

式中：

V为滴定样品所用2,6-二氯酚靛酚用量(mL)；

V₁为样品定容后的总体积(mL)；

V₂为所取待测样品的体积(mL)；

L为每1mL2,6-二氯酚靛酚溶液所氧化的Vc含量(mg/mL)。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥对青菜维生素C含量的影响见表2。由表2可知，青菜维生素C含量的趋势与叶绿素是大致相同的，维生素C的含量同样受植物生长周期的影响，且施用实施例1-6所制备的含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对青菜作用后，维生素C含量增加的更明显。

表2不同实施例对青菜维生素C含量的影响

(3)含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对丙二醛含量的影响

丙二醛是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生能够加剧膜的损伤。本申请中丙二醛含量的测试及计算方法为：

称取三氯乙酸(TCA)10g，定容至100mL容量瓶内，配制10％(TCA)溶液。称取硫代巴比妥酸(TBA)0.125g，定容至25mL容量瓶内，配制0.6％(TBA)溶液。称取0.5g青菜叶片放入研钵中，加入3mL 10％TCA，研磨匀浆后添加2mL 10％TCA继续研磨，在4000r/min转速下离心15min(4℃)，上清液的体积即为MDA提取液总体积。称取提取液2mL(即为测定用提取液体积)到具塞试管中，加入2mL 0.6％TBA(提取液与TBA体积之和即为反应液体积)，混合均匀后，沸水浴中反应20min，立即移入冰水中，迅速冷却后在4000r/min的条件下离心，在532nm、600nm和450nm处检测所得上清液的吸光度值，计算MDA含量。

对照组为2mL水加2mL0.6％TBA。

其中：V为反应液体积(ml)；V_s为测定用提取液体积(ml)；V_t为提取液总体积(ml)；W：植物样品鲜重(g)。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥对青菜丙二醛含量的影响见表3。由表3可知，植物在生长周期内的丙二醛含量也是呈现先增长后减小的趋势，但施用实施例1-6所制备的含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对植物施用后，丙二醛含量在同期内明显减小，说明植物精油与低阶煤基腐植酸盐、氮肥、磷肥、钾肥、微量元素协同配合在一定程度上能够抑制植物丙二醛的产生，利于青菜生长。

表3不同实施例对青菜丙二醛含量的影响

(4)含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对过氧化物酶活性的影响

过氧化物酶是植物体内重要的氧化还原酶，与光合作用、呼吸作用及生长素的氧化等都有关，可以保证细胞膜的通透性，使植物免受活性氧的危害而旺盛生长。本申请中过氧化物酶活性(POD)的测试及计算方法为：

由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调配制得100mmol/L pH为6.0磷酸缓冲液。取50mL上述溶液置于烧杯中，加入28μL愈创木粉，加入19μL的30％过氧化氢溶液，混匀，作为反应混合液保存在冰箱内备用。称取0.25g长势较好的青菜叶片放入研钵中，加入5mL pH值为6.0的磷酸缓冲液研成匀浆，在7000r/min转速下离心15min(4℃)，将上清液移入25mL容量瓶内，用磷酸缓冲液定容至25mL，低温保存备用。取用上述提取液1mL再加入3mL的反应混合液，置于比色皿中，立即启动秒表记录反应时间，测定其在470nm波长处的吸光度，每隔一分钟读取一次，计算POD活性。对照组为3mL反应混合液和1mL磷酸缓冲液。

其中：ΔA₄₇₀为吸光度差；Δt为吸光度差所对应的时间(min)；V₁为提取液总体积(ml)；V₂测定用提取液体积(ml)：W：为植物样品鲜重(g)。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥对青菜过氧化物酶活性的影响见表4。由表4可知，植物过氧化物酶活性受生长周期的影响，前期含量是逐渐增加的，后期随着叶片老化，植物逐渐衰老，植物中的过氧化物酶活性也逐渐降低，但实施例1-6与空白组、普通腐植酸肥相比，同一时期内，使用实施例1-6施用后植物中的过氧化物酶活性明显更高的，说明实施例1-6对植物POD活性的合成有促进作用，植物生长受外部不良环境的影响减弱，细胞膜的通透性得以保持，植物对抗灾害的性能提升。

表4不同实施例对过氧化物酶活性的影响

(5)含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥抗菌实验测试数据

本申请中抗菌性的测试及计算方法为：

采用滤纸片法，将直径为6mm的圆形新华滤纸片干热灭菌(160℃、2h)后备用。把已灭菌的纸片放入黄酮类防虫抗菌腐植酸硒肥或普通腐植酸肥中充分浸透，取出后平摊于无菌平皿内，自然挥干待用。

将斜面保藏菌转接到接种到牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，置于37℃的恒温培养箱，培养24h。取活化好的菌种，用无菌生理盐水制成10⁵cfu/mL的菌悬液。取上述配制好的菌悬液0.2mL，滴入固体培养基表面，用无菌涂布器均匀涂布于其上，用无菌镊子夹取浸渍色素溶液黄酮类防虫抗菌腐植酸硒肥或普通腐植酸肥挥干后的滤纸片，放入平皿中。用浸渍蒸馏水挥干后的做空白对照。每个样品做3个重复。将平板放入细菌培养箱中，37℃培养18h后，取出观察，测量抑菌圈直径，取平均值。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥抗菌性见表5。由表5可知，空白例和普通腐植酸肥均无抗菌能力，实施例1-6对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有一定的抑制作用，这说明植物精油的添加，起到了抗菌的效果。

表5不同实施例抗菌性测试

(6)含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥杀虫实验数据

本申请中虫害致死率测试及计算方法为：

剖开已感染根结线虫的芹菜根系，在实验室内通过贝尔曼漏斗法提取虫体，从所得虫体中挑取卵囊，卵囊用0.2％次氯酸钠溶液消毒0.5min后，经无菌水冲冼。置卵囊于无菌水中孵化，取2d后孵出的线虫，供测定用。将各实施例肥料液与虫样液共混直接触杀，虫样浓度1000～1200只/mL；100～400倍显微下连续观察72h，记录虫体数量变化情况，来计算肥料对根结线虫的致死率。

实施例1～6制得的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥和普通腐植酸肥对根结线虫的杀线活性的影响见表6。由表6可知，与空白例和普通腐植酸肥料相比，实施例1-6所制备的含植物精油的营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对根结线虫具有明显的致死作用。

表6不同实施例对根结线虫的杀线活性

注：致死率评级为AA：100％；A：90％～100％；BB：70％～90％；B：50％～70％；CC：30％～50％；C：15％～30％；DD：5％～15％；D：<5％；“-”代表未发现死亡虫体。

综上所述，本发明中的含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥对青菜叶片中的叶绿素、维生素C以及过氧化物酶活性的合成产生了很大的刺激，对丙二醛的产生起到抑制作用，延缓了青菜的损伤及衰老程度，加速了青菜体内的代谢活动。低阶煤基腐植酸盐、植物精油以及植物生长所需营养元素的协同作用，增强了植物抵抗细菌的能力和对根线虫的致死率，提升植物对抗灾害的性能，使得植物生长受外部不良环境的影响显著减小。

以上内容仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明权利要求书的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，以质量份数计，包括：腐植酸盐100份、植物精油1-20份、氮肥5-10份、磷肥10-15份、钾肥10-15份、硫酸锌4-6份、硫酸锰5-10份、硼酸3-8份、硅酸钠7-12份。

2.如权利要求1所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，所述腐植酸盐为腐植酸铵、腐植酸钾和腐植酸钠中的任意一种或几种。

3.如权利要求1所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，所述植物精油从含有植物精油的天然植物中提取出，所述含植物精油的天然植物为肉桂、茴香、丁香和百里香中的任意一种。

4.如权利要求3所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，从含有植物精油的天然植物中提取植物精油的方法为：将含有植物精油的天然植物洗净并干燥，粉碎后过80目筛，以1g：(20-70)mL的比例将含有植物精油的天然植物在水中浸泡1.5-4h后，常压下蒸馏4-7h，将馏出液冷却至室温后转移至油水分离器分离，收集油状液体，得到植物精油。

5.如权利要求1所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，所述氮肥为硫酸铵、碳酸氢铵和尿素中的任意一种。

6.如权利要求1所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，所述磷肥为过磷酸钙、磷酸二铵和磷酸二氢钾中的任意一种。

7.如权利要求1所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥，其特征在于，所述钾肥为氯化钾或硫酸钾。

8.权利要求1～7中任意一项所述的一种含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)按比例称取腐植酸盐、植物精油、氮肥、磷肥、钾肥、硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠；

2)将硫酸锌、硫酸锰、硼酸、硅酸钠加入水中，搅拌至完全溶解；

3)将低阶煤基腐植酸盐加入水溶解，并依次加入氮肥、磷肥、钾肥，充分搅拌，随后加入植物精油，继续搅拌至完全混合均匀，得到低阶煤基腐植酸盐营养-植物精油溶液；

4)将步骤2)中所得溶液加入步骤3)中的所得低阶煤基腐植酸盐营养-植物精油溶液中，充分搅拌至均匀，制得含植物精油营养均衡型杀虫抗菌腐植酸肥。