CN111777437B - 一种棘孢木霉菌肥及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种棘孢木霉菌肥及其制备方法，以糖蜜酒精浓缩液和豆泥为原料生产棘孢木霉菌肥，原料完全采用工厂废弃物，实现废弃物资源化利用，且制备方法简单，制得的棘孢木霉菌肥对植物生长具有促进作用；方法具体包括如下步骤：(1)取保藏的棘孢木霉原种经多次划线分离出单菌落；(2)挑取单菌落接种于糖蜜酒精浓缩液培养基中进行活化培养，得到活化棘孢木霉菌；(3)将活化棘孢木霉菌接种至液体培养基中进行液体扩大培养，得到棘孢木霉液体菌种；(4)将棘孢木霉菌液体菌种接种至豆泥固态培养基中，搅拌均匀后平铺进行固态培养，得到固态培养物；(5)将固体培养物低温烘干，然后粉碎或造粒得到棘孢木霉菌肥。

Description

一种棘孢木霉菌肥及其制备方法
技术领域
本发明涉及微生物肥料技术领域，更具体的说是涉及一种棘孢木霉菌肥 及其制备方法。
背景技术
木霉菌属真菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、丛梗孢科、木霉属， 具体包括哈茨木霉T.harzianum、深绿木霉T.atroviride、绿色木霉T.virens、里 氏木霉T.reesei、长枝木霉T.longibrachiatum和棘孢木霉T.asperellum等菌种。 其广泛存在于不同环境条件下的土壤中，可产生多种对植物病原真菌、细菌 及昆虫具有拮抗作用的生物活性物质，比如细胞壁降解酶类和次级代谢产物， 并能提高农作物的抗逆性，促进植物生长和提高农产品产量，所以目前被广 泛应用于生物防治、生物肥料及土壤改良剂。
但是现有的木霉菌生产方法是大多是以粮食及其副产品为主要原料，相 比于采用工厂废弃物、废水为主要原料而言，成本相对较高，且会造成资源 浪费，无法有效处理工厂废弃物、废水。
因此，提供一种以废弃物、废水为主要原料的棘孢木霉菌肥的制备方法 是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
鉴于此，本发明提供了一种棘孢木霉菌肥及其制备方法，以糖蜜酒精浓 缩液和豆泥为原料生产棘孢木霉菌肥，原料完全采用工厂废弃物，实现废弃 物资源化利用，且制备方法简单，制得的棘孢木霉菌肥对植物生长具有促进 作用。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种棘孢木霉菌肥的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)取保藏的棘孢木霉原种经多次划线分离出单菌落；
(2)挑取所述单菌落接种于糖蜜酒精浓缩液培养基中进行活化培养，得 到活化棘孢木霉菌；
(3)将所述活化棘孢木霉菌接种至液体培养基中进行液体扩大培养，得 到棘孢木霉液体菌种；
(4)将所述棘孢木霉菌液体菌种接种至豆泥固态培养基中，搅拌均匀后 平铺进行固态培养，得到固态培养物；
(5)将所述固体培养物低温烘干，然后粉碎或造粒得到所述棘孢木霉菌 肥。
上述技术方案的有益效果是：本发明公开的棘孢木霉菌肥的制备方法配 方合理、工艺简单、成本低廉、可大规模生产，有利于进行工业化推广，且 制备得到的棘孢木霉菌肥施用于土壤，能够增加土壤氮元素含量，活化土壤 磷、钾元素，促进农作物生长。
优选的，步骤(1)中所述划线分离是在PDA培养基中进行。
其中，所述PDA培养基采用如下重量份数的原料制成：200份去皮马铃 薯、20份葡萄糖、17～20份琼脂和1000份蒸馏水；具体是先取200g去皮马 铃薯，切小块，加水煮30min，过滤；然后加入17～20g琼脂和20g葡萄糖， 最后补足1000mL蒸馏水，制得最终的PDA培养基。
优选的，步骤(2)中所述糖蜜酒精浓缩液培养基由糖蜜酒精浓缩液和水 按照质量体积比为(50～400)g：1L均匀混合后灭菌制得，所述糖蜜酒精浓缩 液培养基的pH值为5.0～8.0；所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；所述 活化培养的温度为25-32℃，摇床转速为120-200r/min，培养时间2-4d。
优选的，所述灭菌压力为0.1MPa、温度为121℃、时间为20min。
上述优选技术方案的有益效果是：本发明仅采用糖蜜酒精浓缩液与水混 合制得糖蜜酒精浓缩液培养基，其中糖蜜酒精浓缩液属于工厂废弃物，来源 稳定，价格低廉，用于制备木霉菌肥，能够减少环境污染，实现废弃物资源 化利用；并且，其适合用于棘孢木霉菌的液体扩大培养，为菌种的生长提供 丰富的营养。
优选的，步骤(3)中所述液体培养基由糖蜜酒精浓缩液和水以(50～400) g：1L的比例混匀后灭菌制得，且pH值为5.0～8.0；
其中，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；
所述液体扩大培养接种量的体积比为4～15％，所述液体扩大培养的温度 为25-32℃、摇床转速为120-200r/min、培养时间2-4d。
上述优选技术方案的有益效果是：本发明液体扩大培养采用的培养基组 分单一，但营养丰富，可满足菌种生长繁殖的营养需求；制备简单，操作简 便；培养参数范围比较广，无需严格控制。
优选的，步骤(4)中所述豆泥固态培养基包括如下质量百分比的组分： 70-90％的豆泥和10-30％的糖蜜酒精浓缩液，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为 50-70Bx；所述固态培养的接种量为质量百分比5～30％，所述固态培养的平铺 厚度为2-5cm，温度为25-32℃，湿度为85～98％，时间为5-10d。
优选的，所述豆泥固态培养基是由组成原料按比例混合后灭菌制得，灭 菌条件为常压蒸汽消煮10min。
优选的，所述豆泥是豆制品加工厂的废弃物，所述豆泥含水率为15～30％， 容重为1049g/L、EC值为4.32ms/cm、pH值为5.12，包括如下质量百分比的 组分：38％的有机质、16％的水分、0.21％的碱解氮、1.03％的有效磷和0.89％ 的速效钾。
优选的，所述糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液经 浓缩而成，所述糖蜜酒精浓缩液的pH为4.0，密度为1.2g/cm3，锤度为60Bx， 包括如下质量百分比的组分：35％的有机质、45％的水分、8％的总养分、2％ 的氨基酸，22％的黄腐酸、8％的糖分和12％的粗蛋白，所述总养分包括质量 比为2:0.5:5.5的氮、有效磷和速效钾。
其中，糖蜜酒精废液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的副产品，是一种 高浓度的有机废液，含有大量的碳水化合物、脂肪、蛋白质、纤维素等有机 物，经过脉冲沉降除渣，多效蒸发除去水分，即可得到糖蜜酒精浓缩液。外 观为黑褐色稠状液体，焦糖气味。
豆泥为豆制品加工厂的废弃物，外观为浅灰色粉状或含有一些小颗粒， 表面看起来湿润，但含水率较低。
上述优选技术方案的有益效果是：本发明仅以糖蜜酒精浓缩液和豆泥为 原料制得固态培养基，适合棘孢木霉生长繁殖，无论是菌肥的培养过程中还 是施用于大田后，均可为菌种的生长提供丰富的营养，为菌种功效发挥提供 保障；并且，糖蜜酒精浓缩液和豆泥均为工厂的废弃物，来源稳定、价格低 廉，用于制备木霉菌肥可以减少环境污染，实现废弃物资源化利用；原料含 水率低，制备菌肥过程中只需补水保持空气湿度即可，降低后续低温烘干的 能耗，缩短生产周期，降低生产成本。
优选的，步骤(5)中所述低温烘干的温度为40～45℃，时间24～60h，烘 干后物料含水率≤30％；所述粉碎得到粉剂产品，细度≤0.18mm；所述造粒 制得颗粒产品，细度为1.0～4.75mm。
本发明还提供了一种棘孢木霉菌肥，采用上述方法制备得到。
上述优选技术方案的有益效果是：本发明制备得到的棘孢木霉菌肥可增 加土壤氮元素含量，活化土壤磷、钾元素，并且对作物生长具有促生作用， 同时对枯萎病等土传病害具有一定防控作用。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种棘 孢木霉菌肥及其制备方法，具有如下有益效果：
(1)本发明公开的制备方法配方合理，工艺简单，成本低廉，可大规模 生产。
(2)所选原料均为工厂的废弃物，来源稳定，价格低廉，用于制备木霉 菌肥，减少环境污染，实现废弃物资源化利用；且适合棘孢木霉生长繁殖， 均可为菌种的生长提供丰富的营养，为菌种功效发挥提供保障；
(3)所选原料含水率低，制备菌肥过程中只需补水保持空气湿度即可， 降低后续低温烘干的能耗，缩短生产周期，降低生产成本；
(4)制备得到的棘孢木霉菌肥可增加土壤氮元素含量，活化土壤磷、钾 元素，且对作物生长具有促生作用，同时对枯萎病等土传病害具有一定防控 作用。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所 描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发 明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的 所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例公开了一种棘孢木霉菌肥的制备方法，具体包括如下步骤：
(1)取保藏的棘孢木霉原种，在PDA培养基中经多次划线分离出单菌 落；
PDA培养基采用如下重量份数的原料制成：200份去皮马铃薯、20份葡 萄糖、17～20份琼脂和1000份蒸馏水；具体是先取200g去皮马铃薯，切小块， 加水煮30min，过滤；然后加入17～20g琼脂和20g葡萄糖，最后补足1000mL 蒸馏水，制得最终的PDA培养基。
(2)挑取单菌落接种于糖蜜酒精浓缩液培养基中进行活化培养，得到活 化棘孢木霉菌；
其中，糖蜜酒精浓缩液培养基由糖蜜酒精浓缩液和水按照质量体积比为 (50～400)g：1L均匀混合后灭菌制得，糖蜜酒精浓缩液培养基的pH值为 5.0～8.0；糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；活化培养的温度为25-32℃，摇 床转速为120-200r/min，培养时间2-4d；其中灭菌压力为0.1MPa、温度为 121℃、时间为20min。
(3)将活化棘孢木霉菌接种至液体培养基中进行液体扩大培养，得到棘 孢木霉液体菌种；液体扩大培养的接种量为体积比4～15％，液体扩大培养的 温度为25-32℃、摇床转速为120-200r/min、培养时间2-4d；
其中，液体培养基由糖蜜酒精浓缩液和水以(50～400)g：1L的比例混匀 后灭菌制得，且pH值为5.0～8.0，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx。
(4)将棘孢木霉菌液体菌种接种至豆泥固态培养基中，搅拌均匀后平铺 进行固态培养，得到固态培养物；豆泥固态培养基包括如下质量百分比的组 分：70-90％的豆泥和10-30％的糖蜜酒精浓缩液，糖蜜酒精浓缩液的锤度为 50-70Bx，将原料按比例混合后灭菌制得，灭菌条件为常压蒸汽消煮10min； 固态培养的接种量为质量百分比5～30％，固态培养的平铺厚度为2-5cm，温 度为25-32℃，湿度为85～98％，时间为5-10d。
(5)将固体培养物在40～45℃条件下烘干24～60h，烘干后物料含水率≤ 30％；然后粉碎粉碎得到细度≤0.18mm粉剂产品棘孢木霉菌肥，或者造粒制 得细度为1.0～4.75mm颗粒产品棘孢木霉菌肥。
其中，豆泥是豆制品加工厂的废弃物，豆泥含水率为15～30％，容重为 1049g/L、EC值为4.32ms/cm、pH值为5.12，包括如下质量百分比的组分： 38％的有机质、16％的水分、0.21％的碱解氮、1.03％的有效磷和0.89％的速效 钾。
糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液经浓缩而成，糖 蜜酒精浓缩液的pH为4.0，密度为1.2g/cm3，锤度为60Bx，包括如下质量百 分比的组分：35％的有机质、45％的水分、8％的总养分(2％的氮，0.5％的有 效磷和5.5％的速效钾)、2％的氨基酸，22％的黄腐酸、8％的糖分和12％的 粗蛋白。
实施例1
一种棘孢木霉菌肥及其制备方法，具体包括如下步骤：
(1)取出-20℃甘油冷冻保藏的棘孢木霉PZ6(Trichoderma asperellumPZ6， 保藏编号CCTCC No：M 2016043，保藏日期2016年1月18日，保藏单位中 国典型培养物保藏中心，保藏地址中国湖北省武汉市武汉大学中典型培养物 保藏中心)，在PDA培养基上多次划线分离出单菌落；挑取单菌落接种于100 毫升糖蜜酒精浓缩液培养基(由糖蜜酒精浓缩液和水以100g：1L的比例混匀 后灭菌制得)，接种量为1×103cfu/mL，然后在28℃温度下摇床活化培养48h， 其中摇床转速为160r/min；
将活化后的菌液按体积比4％转接至液体培养基中，在28℃温度下摇床培 养48h，得到棘孢木霉液体菌种,其中摇床转速为160r/min，所述液体培养基 由糖蜜酒精浓缩液和水以150g：1L的比例混匀后灭菌制得，且pH值为 5.0～8.0。
(2)将液体菌种按质量比10％接种于豆泥固态培养基(豆泥80％，浓缩 液20％)，搅拌混匀，地面铺开，物料厚度约4cm，盖上薄膜保湿，控制温 度为25-32℃，湿度为85～98％，固态培养10d，培养过程中第4d、第7d物料 表面全部变绿时翻动物料；
(3)培养结束后45℃低温烘干至含水率30％以下，粉碎至细度≤0.18mm， 得到棘孢木霉菌肥粉剂产品。
实施例2
本发明实施例2公开了一种棘孢木霉菌肥及其制备方法，具体包括如下 步骤：
(1)取出-20℃甘油冷冻保藏的棘孢木霉PZ6(保藏编号CCTCC No：M 2016043)，在PDA培养基上多次划线分离出单菌落，挑取单菌落接种于100 毫升糖蜜酒精浓缩液培养基(由糖蜜酒精浓缩液和水以100g：1L的比例混匀 后灭菌制得)，接种量为1×103cfu/mL，在28℃温度下摇床活化培养48h，其 中摇床转速为160r/min；
将活化后的菌液按体积比4％转接至液体培养基中，在28℃温度下摇床培 养48h，得到棘孢木霉液体菌种,其中摇床转速为160r/min；所述液体培养基 由糖蜜酒精浓缩液和水以180g：1L的比例混匀后灭菌制得，且pH值为 5.0～8.0；
(2)将液体菌种按质量比10％接种于豆泥固态培养基(豆泥80％，浓缩 液20％)，搅拌混匀，地面铺开，物料厚度约5厘米，盖上薄膜保湿，控制 温度在25-32℃，湿度在85～98％，固态培养10天，培养过程中第4天、第7 天物料表面全部变绿时翻动物料；
(3)培养结束后45℃低温烘干至含水率30％以下，造粒，得到细度为 1.0～4.75mm的棘孢木霉菌肥颗粒产品。
实施例3
本发明实施例3公开了一种棘孢木霉菌肥及其制备方法，具体包括如下 步骤：
(1)取出-20℃甘油冷冻保藏的棘孢木霉PZ6(保藏编号CCTCC No：M 2016043)，在PDA培养基上多次划线分离出单菌落；
挑取单菌落接种于100毫升糖蜜酒精浓缩液培养基(由糖蜜酒精浓缩液 和水以200g：1L的比例混匀后灭菌制得),摇床活化培养48小时，摇床培养 温度为28℃，转速为160r/min；
将活化后的菌液按体积比5％转接至液体培养基中，进行摇瓶培养48h， 其中摇瓶培养温度为28℃，转速为160r/min；接着，按5％接种量转接至发酵 罐培养48h得到棘孢木霉液体菌种，其中发酵罐培养温度为28℃，转速为 120r/min，通气比1:1；液体培养基由糖蜜酒精浓缩液和水以300g：1L的比例 混匀后灭菌制得，且pH值为5.0～8.0；
(2)将液体菌种按质量比20％接种于豆泥固态培养基(豆泥90％，浓缩 液10％)，搅拌混匀，地面铺开，物料厚度约5厘米，盖上薄膜保湿，控制 温度在25-32℃，湿度在85～98％，固态培养10天，培养过程中第4天、第7 天物料表面全部变绿时翻动物料；
(3)培养结束后打开薄膜，自然晾干至含水率30％以下，造粒，得到得 到细度为1.0～4.75mm的棘孢木霉菌肥颗粒产品。
效果验证
一、检测实施例1～3制备得到的棘孢木霉菌肥的孢子量
采用血球计数法对实施例1-3制备的棘孢木霉进行孢子量检测，结果如表 1所示。
表1棘孢木霉菌肥孢子量检测表
样品编号 孢子量(亿个/克)
实施例1 19.5
实施例2 18.7
实施例3 17.9
由上述表1数据可以看出，采用本发明的技术方案制备的木霉菌肥，孢 子量可以达到十几亿，远超过国家标准。虽然目前市场上的木霉菌剂最高含 量可达100亿/克，但这个为纯孢子菌剂的含量，通常需要去除培养基物料， 分离提纯方可达到，工艺较为复杂，很难大量生产。本发明的方法将木霉培 养好后，直接粉碎或造粒制成菌肥产品，一方面简化了加工工艺，节省加工 成本，另一方面充分利用了培养物料的营养成分及菌种培养过程中的代谢产 物，增强产品大田应用效果。
二、活化土壤养分试验
1、供试肥料：实施例1制备的棘孢木霉菌肥
2、对照基质：灭活的实施例1制备的棘孢木霉菌肥
3、试验设计
处理一：供试肥料
处理二：对照基质
4、试验方法
以供试肥料作为试验组，经高温高压灭菌的供试肥料作为基质对照组。 干泥土过筛，随机分为250克/份的6等分，每份添加2％钾长石，2％磷酸三 钙，混匀，试验组3份，每份添加1％的供试肥料，混匀，分别为样品1-1、 1-2、1-3；对照组3份，每份添加1％的基质，混匀，分别为样品2-1、2-2、 2-3。每份样品添加20％的水分，混匀，室内放置，10天后，自然晾干，检测 土壤碱解氮、有效磷、速效钾指标，计算氮、磷、钾增加率，得到的结果如 下表2所示。
表2土壤氮磷钾含量测定表
Figure BDA0002582127220000091
由上表4可以看出，相比于对照组实施例1碱解氮增加24.0％、有效磷增 加12.6％、速效钾增加3.5％，由此可见，本发明的棘孢木霉菌肥能够增加土 壤氮元素含量，活化土壤磷、钾元素。
三、香蕉盆栽肥效试验
1、供试肥料：实施例3制备的菌肥
2、供试作物：桂蕉1号
3、试验设计
本试验设4个处理，3次重复，每重复5株，采用完全随机区组设计
处理一：空白对照
处理二：常规施肥
处理三：常规施肥+供试肥料(实施例3制备的菌肥)
处理四：常规施肥+基质(灭活的实施例3菌肥)
4、试验方法
(1)选择稻田土，晒干，拍碎，过筛除去大颗粒，备用；
(2)将泥土随机分为3.5千克的60等分，处理一空白对照组的15分泥 土不添加任何肥料，处理二常规对照组添加泥土重量2％的有机肥，处理三试 验组添加泥土重量2％的有机肥和1‰实施例3制备的菌肥，处理四基质对照 组添加泥土重量2％的有机肥和1‰灭活的实施例3制备的菌肥，将肥料与泥 土搅拌混匀，装盆；
(3)挑选长势基本一致的生长至7-8张叶的香蕉二级种苗移栽至各个处 理的泥土中栽种，每盆栽种一株，淋足定根水。同时测量香蕉种苗假茎粗度、 株高、叶片数等指标。
(4)各处理按照统一标准进行水分管理，观察记录生长情况，60天后统 计各处理香蕉假茎粗度、株高、新增叶片数的变化值等。
5、试验结果
施用实例3制备的木霉菌肥香蕉苗长势旺，植株较为高大，叶片浓绿， 植株高度、沿地表假茎粗度、新增叶片数都较对照处理显著提高，结果统计 如下表3所示。
表3施肥处理对室内盆栽试验香蕉生物效应的影响
Figure BDA0002582127220000111
由上表可以看出，相同种植时间条件下，处理三(常规施肥+供试肥料) 比处理一(空白对照)香蕉苗株高增高15.6cm，沿地表假茎粗度增加3.62mm， 新增3.4张叶片；处理三(常规施肥+供试肥料)比处理二(常规施肥)香蕉 苗株高增高10.2cm，沿地表假茎粗度增加1.91mm，新增2张叶片；处理三(常 规施肥+供试肥料)比处理四(常规施肥+基质)香蕉苗株高增高7cm，沿地 表假茎粗度增加0.79mm，新增1张叶片。
由此可见，本发明的棘孢木霉菌肥可以加快香蕉的生长，具有明显的促 生作用。
四、香蕉大田肥效及枯萎病防效试验
1、供试肥料：实施例3制备的菌肥
2、供试作物：桂蕉9号
3、试验设计和方法
大田试验安排在武鸣培桂村香蕉种植基地，前茬为种植桂蕉1号，平均 发病率为80.93％，属枯萎病重病区。2018年11月种植，未经轮作，直接挖 坑种植桂蕉9号。
4、试验设计
处理一：常规施肥为对照
处理二：常规施肥+供试肥料(实施例3制备的菌肥)
5、试验方法
1、试验区采用随机分布，每处理3个小区，每小区60株。10月底调查 统计香蕉抽蕾率、发病率等情况。
2、供试肥料(实例3制备的菌肥)在5月、7月各施用一次，每次1.5kg/ 株。10月底调查统计香蕉抽蕾率、发病率等情况。
6、试验结果
施用实施例3制备的木霉菌肥对香蕉大田植株生殖生长有积极的促进作 用，较之处理一，具有提早抽蕾的效果；处理二对香蕉枯萎病具有一定的防 控作用。结果统计如下表4所示。
表4供试菌肥在大田对香蕉生长及枯萎病防控的影响
Figure BDA0002582127220000121
从表4可以看出，处理二对大田植株生殖生长有积极的促进作用，平均 抽蕾率达到21.65％，较之处理一的6.34％，具有提早抽蕾的效果。处理二还 具有一定防控枯萎病的作用。在处理一平均发病率为35.68％情况下，处理二 平均发病率为11.59％，平均防效为67.64％。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都 是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。 对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述 的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用 本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易 见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下， 在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例， 而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (5)

1.一种棘孢木霉菌肥的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
(1)取保藏的棘孢木霉原种在PDA培养基中经多次划线分离出单菌落；
(2)挑取所述单菌落接种于糖蜜酒精浓缩液培养基中进行活化培养，得到活化棘孢木霉菌；所述糖蜜酒精浓缩液培养基由糖蜜酒精浓缩液和水以(50～400)g：1L的比例混匀后灭菌制得，且pH值为5.0～8.0；其中，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；所述活化培养的温度为25-32℃，摇床转速为120-200r/min，培养时间2-4d，活化接种量为1×10 3 cfu/mL；
(3)将所述活化棘孢木霉菌接种至液体培养基中进行液体扩大培养，得到棘孢木霉液体菌种；所述液体培养基由糖蜜酒精浓缩液和水以(50～400)g：1L的比例混匀后灭菌制得，且pH值为5.0～8.0；其中，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；所述液体扩大培养接种量的体积比为4～15％，所述液体扩大培养的温度为25-32℃、摇床转速为120-200r/min、培养时间2-4d；
(4)将所述棘孢木霉菌液体菌种接种至豆泥固态培养基中，搅拌均匀后平铺进行固态培养，得到固态培养物；所述豆泥固态培养基包括如下质量百分比的组分：70-90％的豆泥和10-30％的糖蜜酒精浓缩液；其中，所述糖蜜酒精浓缩液的锤度为50-70Bx；所述固态培养接种量的质量比为5～30％，所述固态培养的平铺厚度为2-5cm，温度为25-32℃，湿度为85～98％，时间为5-10d；所述棘孢木霉为棘孢木霉PZ6，保藏编号CCTCC No:M 2016043，保藏日期2016年1月18日，保藏单位中国典型培养物保藏中心，保藏地址中国湖北省武汉市武汉大学中典型培养物保藏中心；
(5)将所述固体培养物烘干，然后粉碎或造粒得到所述棘孢木霉菌肥。
2.根据权利要求1所述的一种棘孢木霉菌肥的制备方法，其特征在于，所述豆泥是豆制品加工厂的废弃物，所述豆泥的含水率为15～30％，容重为1049g/L、EC值为4.32ms/cm、pH值为5.12。
3.根据权利要求1所述的一种棘孢木霉菌肥的制备方法，其特征在于，所述糖蜜酒精浓缩液是以糖蜜为原料生产酒精后产生的废液经浓缩而成；所述糖蜜酒精浓缩液的pH为4.0，密度为1.2g/cm 3 ，锤度为60Bx。
4.根据权利要求1所述的一种棘孢木霉菌肥的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述烘干的温度为40～45℃，时间24～60h，烘干后物料含水率≤30％；所述粉碎得到粉剂产品，细度≤0.18mm；所述造粒制得颗粒产品，细度为1.0～4.75mm。
5.一种棘孢木霉菌肥，其特征在于，采用权利要求1～4任一项所述方法制备得到。
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