CN111741959B - Btk的抑制剂及其突变体 - Google Patents

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Abstract

本公开包括式(I)的化合物，其中Q1、Q2、Q3、W、X、Y、Z1、m、n、弹头(warhead)、R1、R2、R3、R4和R5在本文中定义。还公开了用这些化合物治疗新生物性疾病、自身免疫性疾病和炎性病症的方法

Description

BTK的抑制剂及其突变体
对相关申请的交叉引用
本申请根据35 U.S.C.119(e)要求于2018年2月19日提交的美国临时专利申请号62/631,945的申请目的权益，其全部内容通过引用并入本文。
发明背景
Bruton酪氨酸激酶(Btk)是Tec家族的非受体蛋白激酶，在大多数造血细胞如B细胞、肥大细胞和巨噬细胞中表达，但在T细胞、自然杀伤细胞和浆细胞中不表达[Smith，C.I.et a1.Journal of Immunology(1994)，152(2)，557-65]。Btk是BCR和FcR信号传导途径的关键部分，并且对Btk的靶向抑制是一种治疗许多不同人类疾病(如B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病和炎性病症)的新方法[Uckun，Fatih M.et al，Anti-Cancer Agents inMedicinal Chemistry(2007)，Shinohara et al，Cell 132(2008)pp794-806；Pan，Zhengying，Drug News&Perspectives(2008)，21(7)；7(6)，624-632；Gilfillan et al，Immunological Reviews 288(2009)pp 149-169；Davis et a1，Nature，463(2010)pp 88-94]。
共价Bruton酪氨酸激酶(BTK)抑制剂(包括伊布替尼(ibrutinib)和acalabrutinib)已经改变了一些BTK依赖性B细胞恶性肿瘤的治疗方式，所述B细胞恶性肿瘤包括慢性淋巴细胞性白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症、套细胞淋巴瘤和边缘区淋巴瘤。尽管伊布替尼在B细胞恶性肿瘤中具有令人印象深刻的临床反应，但仍出现原发性和继发性抗性病例，其中预后不良且治疗选择有限。对不可逆的BTK抑制剂(如伊布替尼)产生抗性的大多数CLL患者都发生BTK-C481S突变。据报道，80％的复发CLL的患者将具有C481S突变[Maddocks KJ，et a1..JAMA Onco1.2015；1：80-87]。俄亥俄州立大学的另一个研究小组在Journal of Clinical Oncology[Vol 35，第13号，2017，第1437页]上报道，在第四年，约有20％的使用伊布替尼的患者有临床进展。在这些复发的患者中，85％获得了C481S突变。此外，这些突变平均在复发前九个月内被检测到。
尽管BTK抑制剂如伊布替尼和ACP-196对本领域做出了重大贡献，但强烈需要在本领域继续寻找高效力且选择性的BTK甲制剂，所述BTK抑制剂不仅可以不可逆地抑制WTBTK，而且还可逆地抑制C481S突变体BTK。
发明概述
本发明涉及一类有力且选择性的Btk抑制剂，其合理地设计为不仅不可逆地抑制WT BTK，而且还可逆地抑制C481S突变体BTK。因此，本发明的化合物可以用于治疗对第一代BTK抑制剂如伊布替尼和ACP-196(Acalabrutinib)具有抗性/难治性的患者，特别是具有BTK C481S突变的患者。本发明的化合物可以用于治疗患有疾病如自身免疫性疾病或炎性病症的患者。
在一方面，本发明涉及式(I)的化合物或其N-氧化物，或所述式(I)的化合物或其N-氧化物的药学上可接受的盐、溶剂合物、多形体、互变异构体、立体异构体、同位素形式或前药：
其中
Q1是5-6元芳基或杂芳基；
Q2是5-7元杂环烷基或杂芳基；
Q3是5元杂芳基；
W、X、Y、Z1各自独立是C(Ra)或N；
R1和R5各自独立是H、D、烷基、螺烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、杂环烷基、螺杂环烷基、杂环烯基、芳基、杂芳基、卤代、硝基、氧代、氰基、ORa、SRa、烷基-Ra、NH(CH2)pRa、C(O)Ra、S(O)Ra、SO2Ra、C(O)ORa、OC(O)Ra、NRbRc、C(O)N(Rb)Rc、N(Rb)C(O)Rc、-P(O)RbRc、-烷基-P(O)RbRc、-S(O)(＝N(Rb))Rc、-N＝S(O)RbRc、＝NRb、SO2N(Rb)Rc或N(Rb)SO2Rc，其中所述环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基、杂芳基任选地用一个或多个Rd取代；
R2是H或烷基；
R3是H、卤代、烷基、卤代烷基或羟基烷基；
R4是H、卤代或低烷基；
R1基团的两个与其附接的原子一起可以任选地形成任选地用一个或多个Rd取代的环烷基或杂环烷基；
R5基团的两个与其附接的原子一起可以任选地形成任选地用一个或多个Rd取代的环烷基或杂环烷基；
Ra、Rb、Rc和Rd独立是H、D、烷基、螺烷基、烯基、炔基、卤代、氰基、胺、硝基、羟基、＝O、-P(O)RbRc、-烷基-P(O)RbRc、-S(O)(＝N(Rb))Rc、-N＝S(O)RbRc、＝NRb、C(O)NHOH、C(O)OH、C(O)NH2、烷氧基、烷氧基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基羰基氨基、烷基氨基、氧代、卤代-烷基氨基、环烷基、环烯基、杂环烷基、螺杂环烷基、杂环烯基、芳基或杂芳基，其中所述烷基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基、杂芳基任选地用一个或多个Re取代；
Re是H、D、烷基、螺烷基、烯基、炔基、卤代、氰基、胺、硝基、羟基、＝O、C(O)NHOH、烷氧基、烷氧基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基羰基氨基、烷基氨基、氧代、卤代-烷基氨基、环烷基、环烯基、杂环烷基、螺杂环烷基、杂环烯基、芳基或杂芳基；
m、n、p和q各自独立是0、1、2、3或4；并且
弹头(warhead)是
在一个优选的实施方案中，化合物以式(II)表示：
其中
k是0、1或2；
s是0、1、2或3；并且
Q4是5-7元环烷基、环烯基、杂环烷基或杂环烯基；并且其余变量如式(I)所定义。
在一个更优选的实施方案中，化合物以式(III)表示：
其中
r是0、1、2或3；并且其余变量如式(I)或式(II)所定义。
在一个更优选的实施方案中，化合物以式(IV)表示：
其中
k是1或2；并且
r是1或2；并且其余变量如式(I)或式(II)所定义。
本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以以非对映异构体、对映异构体或其混合物存在。每个不对称碳原子可以为R或S构型，并且这两种构型在本发明的范围内。
还考虑了此类化合物中的任一种的经修饰的化合物，包括与未修饰的化合物相比具有改善的(例如，增强的，更大的)药物溶解性、稳定性、生物利用度和/或治疗指数的修饰。示例性的修饰包括(但不限于)适用的前药衍生物和富含氘的化合物。
应当认识到，本发明的化合物可以以盐或溶剂合物的形式存在并以此形式任选施用。本发明涵盖上述化合物及其修饰中任一种的任何药学上可接受的盐和溶剂合物。
用于治疗新生物性疾病、自身免疫性疾病和炎性病症的药物组合物、其治疗用途和化合物在制备用于治疗疾病/病症的药物中的用途也在本发明的范围内，所述药物组合物含有上述一种或多种化合物、其修饰和/或盐。
本发明还涉及通过向有此需要的受试者施用有效量的上述一种或多种化合物、其修饰和/或盐和组合物治疗新生物性疾病的方法，特别是B细胞恶性肿瘤，包括但不限于B细胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)、毛细胞淋巴瘤、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、慢性和急性骨髓性白血病以及慢性和急性淋巴细胞性白血病。
可以使用根据本发明的化合物和组合物影响的自身免疫性和/或炎性疾病包括但不限于：银屑病、变态反应、克罗恩氏病、肠易激综合征、干燥综合征(Sjogren’s disease)、组织移植物排斥和移植器官的超急性排斥、哮喘、系统性红斑狼疮(及相关的肾小球肾炎)、皮肌炎、多发性硬化、硬皮病、血管炎(ANCA相关和其他血管炎病)、自身免疫性溶血和血小板减少状态、肺出血肾炎综合征(Goodpasture′s syndrome)(及相关的肾小球肾炎和肺出血)、动脉粥样硬化、类风湿关节炎、慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)、艾迪生氏病(Addison′s disease)、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、糖尿病、败血性休克和重症肌无力。
在下面的描述中阐述了本发明的一个或多个实施方案的细节。通过说明书和权利要求书，本发明的其他特征、目的和优点将变得明显。应当理解，本文所述的本发明的所有实施方案/特征(化合物、药物组合物、制备/使用方法等)，包括实施例和原始权利要求书中所述的任何特定特征可以彼此组合，除非不适用或明确排除。
发明详述
本文所述的示例性化合物包括但不限于以下：
N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
(E)-N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺、
(R)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(2-(4-(4，4-二氟环己基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-4-(2，6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-((2′S)-4，4-二氟-2′-甲基-[1，4′-联哌啶]-1′-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-((2S)-4-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-4-(二甲基氨基)-2-甲基哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)一3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
(S)-N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丁-2-炔酰胺、
(Z)-2-氰基-N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)-4-甲基-4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)戊-2-烯胺、
(Z)-2-氰基-N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)-4-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)戊-2-烯胺、
(Z)-2-氰基-N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)-4-甲基-4-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)戊-2-烯胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-吗啉代丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)丙-2-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-(2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)丙-2-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-(4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-1-吗啉代丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-1-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-2-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(哌啶-3-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪e-1-羰基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(2-(4-(4，4-二氟环己基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-(4，4-二氟-[1，4′-联哌啶]-1′-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-氟-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-甲基-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(3-氰基-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-(异丙基磺酰基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-((2′S)-4，4-二氟-2′-甲基-[1，4′-联哌啶]-1′-基)-5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊二烯并[4，5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺。
本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以以非对映异构体、对映异构体或其混合物存在。化合物的合成可以采用外消旋体、非对映异构体或对映异构体作为起始材料或中间体。非对映异构化合物可以通过层析或结晶法分离。类似地，对映体混合物可以使用相同的技术或本领域已知的其他技术分离。每个不对称碳原子可以为R或S构型，并且这两种构型在本发明的范围内。
也涵盖任何一种此类化合物的经修饰的化合物，包括与未修饰的化合物相比具有改善的(如，增强的、更大的)药学溶解度、稳定性、生物利用性和/或治疗指数的修饰。修饰的实例包括但不限于前药衍生物和氘富集的化合物。例如：
·前药衍生物：当对受试者施用时，前药将在体内转化为本发明的活性化合物[Nature Reviews of Drug Discovery，2008，Volume 7，p255]。注意到，在多个实例中，前药自身也落入根据本发明的化合物的范围范畴内。本发明的化合物的前药可通过标准有机反应制备，例如，通过与氨甲酰化剂(如，1，1酰氧烷基氯化碳(1，1-acyloxyalkylcarbonochloridate)、碳酸对硝基苯酯(para-nitrophenyl carbonate)等)或酰化剂反应制备。制备前药的方法及策略的其他实例记载于Bioorganic and MedicinalChemistry Letters，1994，Vo1.4，p.1985。
·氘富集的化合物：氘(D或2H)是氢的稳定的非放射性同位素，并且具有2.0144的原子量。氢天然作为同位素XH(氢或氕)、D(2H或氘)、及T(3H或氚)的混合物存在。氘的天然丰度是0.015％。本领域技术人员认识到在所有具有H原子的化合物中，H原子实际上以H和D的混合物表示，约0.015％是D。因此，具备已经富集至大于其天然丰度0.015％的氘含量的化合物应视为非天然的，因此相对于其非富集的对应体是新的。
应当认识到，本发明的化合物可以以盐及溶剂合物的形式存在并以此形式任选施用。例如，根据本领域中公知的过程，将本发明的化合物转化为衍生自多种有机酸和无机酸以及有机碱和无机碱的其药学上可接受的形式并以此形式使用该化合物，处于本发明的范围内。
当本发明的化合物拥有游离碱形式时，可通过使游离碱形式的化合物与药学上可接受的无机酸或有机酸反应而将该化合物制备为药学上可接受的酸加成盐，例如，氢卤酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐；其他矿物酸，如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等；以及烷基和单芳基磺酸盐如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐；以及其他有机酸及其相对应的盐，如醋酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸、苯甲酸盐、水杨酸盐和抗坏血酸盐。本发明的其他酸加成盐包括但不限于：己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、盐酸盐、氯苯甲酸盐、环戊基丙酸盐、双葡萄糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、延胡索酸盐、半乳糖酸盐(来自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、油酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、3-苯基丙酸盐、膦酸酯及邻苯二甲酸盐。应当理解，游离碱形式的物理性质，如在极性溶剂中的溶解度，典型地在某种程度上不同于其各自的盐形式，但用于本发明的目的时，该盐与其各自的游离碱形式等效。
当本发明的化合物拥有游离酸形式时，可通过使游离酸形式的化合物与药学上可接受的无机碱或有机碱反应而制备药学上可接受的碱加成盐。此类碱的实例是碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属烷氧化物，如乙醇钾和丙醇钠；以及各种有机碱，如氢氧化铵、哌啶、二乙醇胺和N-甲基谷氨酰胺。还包括本发明的化合物的铝盐。本发明的其他碱加成盐包括但不限于：铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐和锌盐。有机碱加成盐包括但不限于伯胺盐、仲胺盐、叔胺盐、包括天然存在的取代胺在内的取代胺的盐、环状胺的盐和碱性离子交换树脂的盐，如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、氯普鲁卡因(chloroprocaine)、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺(苄星青霉素(benzathine))、二环己基胺、二乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡糖胺(glucamine)、葡糖胺、组氨酸、海巴明青霉素(hydrabamine)、异丙胺、利多卡因(1idocaine)、赖氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因(procaine)、嘌呤、可可碱、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羟基甲基)甲胺(氨丁三醇)。应当理解，游离酸形式的物理性质，如在极性溶剂中的溶解度，典型地在某种程度上不同于其各自的盐形式，但用于本发明的目的时，该盐与其各自的游离酸形式等效。
在一方面，药学上可接受的盐是盐酸盐、氢溴酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、醋酸盐、延胡索酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、马来酸盐、硝酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、碳酸盐、氢氧化钠盐、氢氧化钙盐、氢氧化钾盐、氨丁三醇盐、或其混合物。
本发明的包含含有叔氮的基团的化合物可使用例如下述试剂季胺化：(C1-4)烷基卤化物，如甲基、乙基、异丙基及叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二(C1-4)烷基酯，如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二戊酯；烷基卤化物，如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；以及芳基(C1-4)烷基卤化物，如苄基氯和苯乙基溴。此类盐允许制备本发明的水溶性和油溶性化合物两者。
具有叔氮原子的抗癌剂的氨氧化物，亦称氨-N-氧化物和N-氧化物，已经作为前药被研发[Mol Cancer Therapy.2004Mar；3(3)：233-44]。包含叔氮原子的本发明的化合物可通过试剂，例如过氧化氢(H2O2)、Caro酸或过酸如间氯过氧苯甲酸(mCPBA)氧化以形成氨氧化物。
本发明涵盖包含本发明的化合物和药物赋形剂，以及其他常规的无药学活性剂的药物组合物。一般用作载体或稀释剂的任何惰性赋形剂均可用于本发明的组合物中，如糖、多元醇、可溶性聚合物、盐和脂质。可采用的糖和多元醇包括但不限于，乳糖、蔗糖、甘露醇、及山梨醇。例示性的可采用的可溶性聚合物为聚氧乙烯、泊洛沙姆(poloxamer)、聚乙烯基吡咯烷酮、及葡聚醣。可用的盐包括但不限于氯化钠、氯化镁和氯化钙。可采用的脂质包括但不限于脂肪酸、甘油脂肪酸酯、糖脂质、及磷脂质。
此外，药物组合物可以进一步包含粘合剂(如，阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、卡波姆、乙基纤维素、瓜尔胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚维酮)、崩解剂(如，玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、瓜尔胶、羧基乙酸淀粉钠、Primogel)、各种pH和离子强度的缓冲剂(如，tris-HCL、醋酸盐、磷酸盐)、用以防止吸收至表面的添加剂如白蛋白或明胶、洗涤剂(如，Tween 20、Tween 80、Pluronic F68、胆汁酸盐)、蛋白酶抑制剂、表面活性剂(如，月桂基硫酸钠)、渗透促进剂、增溶剂(如，甘油、聚乙烯甘油、环糊精)、助流剂(如，胶体二氧化硅)、抗氧化剂(如，抗坏血酸、偏亚硫酸氢钠、丁酸化羟基苯甲醚)、稳定剂(如，羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、黏度增强剂(如，卡波姆、胶体二氧化硅、乙基纤维素、瓜尔胶)、甜味剂(如，蔗糖、阿斯巴甜、柠檬酸)、芳香剂(如，薄荷油、水杨酸甲酯、或橙味剂)、防腐剂(如，硫柳汞、苯甲醇、对羟基苯甲酸酯类)、润滑剂(如，硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇、月桂基硫酸钠)、流动助剂(如，胶体二氧化硅)、增塑剂(如，对苯二甲酸二乙酯、柠檬酸三乙酯)、乳化剂(如，卡波姆、羟丙基纤维素、月桂基硫酸钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠)、聚合物涂层(如，泊洛沙姆或泊洛沙胺)、涂层及膜形成剂(如，乙基纤维素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)及/或佐剂。
在一个实施方案中，药物组合物制备为具有会保护该化合物不被从身体快速清除的载体，如控释配制剂，包括植入物和微胶囊化的递送系统。可使用生物可降解的、生物相容的聚合物，如乙烯-醋酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯、及聚乳酸。制备此类配制剂的方法对于本领域技术人员是明显的。材料亦可从Alza Corporation和NovaPharmaceuticals，Inc商购。脂质体悬浮体(包括用针对病毒抗原的单克隆抗体靶向到感染细胞的脂质体)也可用作药学上可接受的载体。这些可根据本领域技术人员已知的方法制备，例如如US专利号4,522,811中描述。
另外，本发明涵盖包含任何固体或液体物理形式的本发明化合物的药物组合物。例如，化合物可以是晶体形式或无定形的形式，且具有任何粒径。该颗粒可以是微粒化的或者可以是成块的微粒、粉末、油、油状悬浮体或任何其他固体或液体物理形式。
当根据本发明的化合物展现不足够的溶解度时，可使用使化合物增溶的方法。此类方法是本领域技术人员已知的，且包括但不限于，pH调节和盐形成；使用共溶剂如乙醇、丙二醇、聚乙二醇(PEG)300、PEG 400、DMA(10-30％)、DMSO(10-20％)、NMP(10-20％)；使用表面活性剂如聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20(1-10％)、cremophor EL、Cremophor RH40、Cremophor RH60(5-10％)、Pluronic F68/Poloxamer 188(20-50％)、Solutol HS15(20-50％)、维生素ETPGS、以及d-α-生育酚PEG 1000琥珀酸酯(20-50％)；使用络合作用如HPβCD和SBEβCD(10-40％)；以及使用先进的途径，如胶束、聚合物的加入、纳米颗粒悬浮体、以及脂质体形成。
极其多种施用方法可与本发明的化合物联用。本发明的化合物可口服、胃肠外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌肉内、直肠、经口含、鼻内、脂质体、经由吸入、阴道、眼内、经由局部递送(例如，通过导管或支架)、皮下、脂肪内、关节内、或鞘内施用或组合施用。根据本发明的化合物亦可以缓释剂型施用或共施用。化合物可以是气体、液体、半液体或固体形式，以适用于待使用的施用途径的模式配制。对于口服施用，适当的固体口服配制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微丸剂、囊剂和泡腾剂、粉末剂等。适当的液体口服配制剂包括溶液、悬浮体、分散体、乳液、油等。对于胃肠外施用，典型使用冻干粉末的重建。
如本文中使用，“酰基”指以式-C(O)-R表示的含有羰基的取代基，其中，R是H、烷基、碳环、杂环、碳环取代的烷基或杂环取代的烷基，其中，该烷基、烷氧基、碳环和杂环如本文中定义。酰基包括烷酰基(如，乙酰基)、芳酰基(如，苯甲酰基)、及杂芳酰基。
“脂肪族”指以构造碳原子的直链或支链排列为特征的部分，且可以是饱和的，或是具有一个或多个双键或三键的部分不饱和的。
术语“烷基”指含有1至20个碳原子的直链或支链烃(如，C1-C10)。烷基的实例包括但不限于，甲基、亚甲基、乙基、亚乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。优选地，烷基具有1至10个碳原子。更优选地，烷基具有1至4个碳原子。
术语“烯基”指含有2至20个碳原子(如，C2-C10)和一个或多个双键的直链或支链烃。烯基的实例包括但不限于乙烯基、丙烯基和烯丙基。优选地，烯基具有2至10个碳原子。更优选地，烯基具有2至4个碳原子。
术语“炔基”指含有2至20个碳原子(如，C2-C10)和一个或多个三键的直链或支链烃。炔基的实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基和2-丁炔基和1-甲基-2-丁炔基。优选地，炔基具有2至10个碳原子。更优选地，炔基具有2至4个碳原子。
术语“烷基氨基”指-N(R)-烷基，其中R可以是H、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基、或杂芳基。
“烷氧基”指具有进一步烷基取代基的氧部分。
“烷氧基羰基”指附接至羰基的烷氧基。
“氧代烷基”指进一步经羰基取代的烷基。该羰基可以是醛、酮、酯、酰胺、酸或酰氯。
术语“环烷基”指具有3至30个碳原子(如，C3-C12，C3-C8，C3-C6)的饱和烃环系统。环烷基的实例包括但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、及环辛基。术语“环烯基”指具有3至30个碳原子(如，C3-C12)和一个或多个双键的非芳烃环系统。实例包括环戊烯基、环己烯基、及环庚烯基。
术语“杂环烷基”指非芳香族的5至8元的单环状、8至12元的双环状、或11至14元的三环状的环系统，该环系统具有一个或多个杂原子(如，O、N、S、P或Se)。杂环烷基的实例包括但不限于哌嗪基、吡咯烷基、二口恶烷基、吗啉基和四氢呋喃基。
术语“杂环烯基”指非芳香族的5至8元的单环状、8至12元的双环状、或11至14元的三环状的环系统，该环系统具有一个或多个杂原子(如，O、N、S、P或Se)和一个或多个双键。
术语“芳基”指6个碳原子的单环状、10个碳原子的双环状、14个碳原子的三环状的芳环系统。芳基的实例包括但不限于，苯基、萘基和蒽基。术语“杂芳基”指5至8元的单环状、8至12元的双环状、或11至14元的三环状的芳香族环系统，该环系统具有一个或多个杂原子(如，O、N、S、P、或Se)。杂芳基的实例包括吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基和噻唑基。
上文提及的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、烷基氨基、芳基和杂芳基包括取代部分和非取代部分两者。位于烷基氨基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基和杂芳基上的可能的取代基包括但不限于，C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C20环烷基、C3-C20环烯基、C1-C20杂环烷基、C1-C20杂环烯基、C1-C10烷氧基、芳基、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基、氨基、C1-C10烷基氨基、芳基氨基、羟基、卤素、氧代(O＝)、硫代(S＝)、硫基、硅基、C1-C10烷硫基、芳硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰基氨基、氨基酰基、氨基硫代酰基、脒基、巯基、酰氨基、硫脲基、硫氰酸酯基、磺酰胺基、胍、脲基、氰基、硝基、酰基、硫代酰基、酰氧基、脲基、氨甲酰基、羧基和羧酸酯。另一方面，位于烷基、烯基或炔基上的可能的取代基包括除C1-C10烷基以外的上文提及的全部取代基。环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、芳基和杂芳基也可彼此稠合。
“氨基”指进一步具有两个取代基的氮部分，其中，每个取代基具有与氮进行α键结的氢或碳原子。除非明确指出，否则本发明的含有氨基部分的化合物可包括其经保护的衍生物。用于氨基部分的适当的保护基包括乙酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基等。
“芳香族”指如下部分，其中构造原子构成不饱和的环系统，该环系统中所有原子均为sp2杂化，且π电子总数等于4n+2。芳香族环可以使得环原子仅为碳原子或可包括碳原子和非碳原子(见杂芳基)。
“氨甲酰基”指基团-OC(O)NRaRb，其中Ra和Rb各自独立为两个进一步的取代基，该取代基中，氢或碳原子位于氮的α位。注意，氨甲酰基部分可包括其经保护的衍生物。适用于氨甲酰基部分的保护基的实例包括乙酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基等。注意，未保护的衍生物和经保护的衍生物均落入本发明的范围内。
“羰基”指基团-C(O)-。注意，羰基可进一步经多种取代基取代以形成不同的羰基，包括酸、酰卤、酰胺、酯和酮。
“羧基”指基团-C(O)O-。注意，本发明的含有羧基部分的化合物可包括其经保护的衍生物，即，其中氧原子经保护基取代。适用于羧基部分的保护基包括苄基、叔丁基等。
“氰基”指基团-CN。
“甲酰基”指基团-CH＝O。
“亚胺甲基”指基团-HC＝NH。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
作为分离的基团或较大基团的一部分，“卤素取代的烷基”指经一个或多个“卤素”原子取代的“烷基”，此类术语如本申请中所定义。卤素取代的烷基包括卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、全卤代烷基等。
“羟基”指基团-OH。
“亚胺衍生物”指包含-C(＝NR)-部分的衍生物，其中R包含位于该氮的α位的氢或碳原子。
“异构体”意为任何具有相同分子式，但其原子键结的特性或序列不同或其原子在空间中的排列不同的化合物。其原子在空间中的排列不同的异构体称为“立体异构体”。彼此不是镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，而作为无法重叠的镜像的立体异构体称为“对映异构体”或有时“光学异构体”。键结有四个不同取代基的碳原子称为“手性中心”。具有一个手性中心的化合物具有两种相反手性的对映异构形式。两种对映异构形式的混合物称为“外消旋混合物”。
“硝基”指基团-NO2。
“经保护的衍生物”指化合物的衍生物，其中，反应性位点被保护基所阻断。经保护的衍生物可用于制备药物或其本身可能具有抑制剂活性。适用保护基的综合列表可见于T.W.Greene，Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，Wiley&Sons，1999。
术语“取代的”指原子或原子组已经作为附接至另一基团的取代基替换氢。对于芳基和杂芳基，术语“取代的”指其中此类取代被允许的任何水平的取代，即单取代、二取代、三取代、四取代或五取代。独立选择取代基，且该取代可位于任何化学上可及的位置处。术语“未取代的”指给定部分通过可用的价态可仅由氢取代基组成(未取代的)。
如果官能团描述为“任选取代”，则该官能团可以是(1)没有被取代或(2)经取代。如果官能团的碳描述为任选经一系列取代基中的一个或多个取代，则该碳上的一个或多个氢原子(只要存在，可为任何程度)可独立地及/或一起被替换为独立选定的任选的取代基。
“硫化物”意为-S-R，其中，R是H、烷基、碳环、杂环、碳环烷基或杂环烷基。具体的硫化物基团是巯基；烷基硫化物，例如，甲基硫化合物(-S-Me)；芳基硫化合物，如苯基硫化合物；芳烷基硫化合物，如，苄基硫化合物。
“亚磺酰基”意为基团-S(O)-。注意，亚磺酰基可进一步经多种取代基取代以形成不同的亚磺酰基团，包括亚磺酸、亚磺酰胺、亚磺酸酯和亚砜。
“磺酰基”意为基团-S(O)(O)-。注意，磺酰基团可进一步经多种取代基取代以形成不同的磺酰基团，包括磺酸、磺酰胺、磺酸酯和砜。
“硫代羰基”意为基团-C(S)-。注意，硫代羰基可进一步经多种取代基取代以形成不同的硫代羰基，包括硫代酸、硫代酰胺、硫代酯、和硫代酮。
“动物”包括人、非人类哺乳动物(如，非人灵长动物、啮齿动物、小鼠、大鼠、仓鼠、狗、猫、兔、牛、马、绵羊、山羊、猪、鹿等)和非哺乳动物(如，鸟类等)。
如本文中使用的“生物利用度”是施用剂量的药物或药物组合物中，完整到达体循环的分数或百分比。通常，当静脉内施用药物时，其生物利用度是100％。但当经由其他途径(如，口服)施用药物时，其生物利用度下降(如，由于不完全吸收和首过代谢而造成生物利用度下降)。改善生物利用度的方法包括前药途径、盐合成、减小粒径、络合、改变物理形态、固体分散体、喷射干燥和热熔融挤出。
“疾病”具体包括动物或其部位的任何不健康状况，且包括可能由施加至该动物的医疗或兽药治疗造成或伴随医疗或兽药治疗的不健康状况，即，此类疗法的“副作用”。
“药学上可接受的”指可用于制备药物组合物的通常为安全、非毒性、且既不在生物学上也不在其他方面是不希望的，且包括可为兽医学用途以及人类医药用途所接受的。
“药学上可接受的盐”指本发明的化合物的如上文定义的药学上可接受的有机盐或无机盐，且该盐具备所希望的药理活性。此类盐包括与无机酸或有机酸形成的酸加成盐。药学上可接受的盐也包括碱加成盐，其可在存在能与无机碱或有机碱反应的酸性质子存在时形成。例示性的盐包括但不限于，硫酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸性柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、单宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、延胡索酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、蔗糖盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐“去铁胺(mesylate)”、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、双羟萘酸盐(即，1，1’-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐))、碱金属(如，钠和钾)盐、碱土金属(如，镁)盐和铵盐。药学上可接受的盐可牵涉纳入另一分子如醋酸根离子、琥珀酸根离子或其他抗衡离子。该抗衡离子可以是任何使母体化合物电荷稳定的有机部分或无机部分。此外，药学上可接受的盐在其结构中可具有超过一个的带电原子。对于多个带电原子作为药学上可接受的盐的一部分的例子，该盐可具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子及/或一个或多个抗衡离子。
“药学上可接受的载体”指与本发明的化合物混合以形成药物组合物的无毒溶剂、分散剂、赋形剂、佐剂或其他材料，即能够向患者施用的剂型。药学上可接受的载体的实例包括合适的聚乙二醇(例如PEG400)、表面活性剂(例如Cremophor)或环多糖(例如羟丙基-β-环糊精或磺丁基醚β-环糊精)、聚合物、脂质体、胶束、纳米球等。
如国际纯化学和应用化学联合会(The Intemational Union of Pure andApplied Chemistry)所界定，“药效团”是确保与特定生物学靶点的最优超分子相互作用并触发(或阻断)其生物学应答所必需的空间和电子特征的集合。例如，喜树碱(Camptothecin)是公知的药物拓扑替康(topotecan)和伊立替康(irinotecan)的药效团。氮芥是一系列广泛使用的氮芥药物如美法仑(Melphalan)、环磷酰胺(Cyclophosphamide)、苯达莫司汀(Bendamustine)等的药效团。
“前药”意为一种化合物，其在体内可代谢性地转化为根据本发明的活性药物。例如，包含羟基的抑制剂可以以酯的形式施用，该酯在体内可通过水解转化为羟基化合物。
“稳定性”通常指药物保留其特性而不丧失潜能的时间长度。有时这指货架期。影响药物稳定性的因素还特别包括药物的化学结构、配方中的杂质、pH、含水量、以及环境因素如温度、氧化、光和相对湿度。可通过提供适当的化学及/或晶体修饰(如，可改变水合作用动力学的表面修饰；可具有不同性质的不同晶体)、赋形剂(如，除该剂型中该活性物质外的任何物质)、封装条件、存储条件等来改善稳定性。
本文中描述的组合物的“治疗有效量”指以适用于任何医疗处置的合理的效益/风险比，对所治疗的受试者提供治疗效果的该组合物的量。该治疗效果可以是客观的(即，可通过一些测试或标志物测量)或主观的(即，受试者呈现效果的迹象或感觉)。上述组合物的有效量可以是从约0.1mg/kg至约500mg/kg的范围，优选从约0.2至约50mg/kg。有效剂量还将依据施用途径以及与其他药剂合用的可能性而改变。但应理解，本发明的组合物的每日总剂量将由主治医生在可靠医疗判断的范畴内决定。对于特定患者的具体治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括被治疗的病症和该病症的严重性；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康情况、性别和饮食；施用时间、施用途径、以及所采用的具体化合物的排泄速率；治疗的持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；以及医疗领域公知的类似因素。
如本文中所用，术语“治疗”指将化合物施用于具有新生物性或免疫病症、或具有其症状或素因的受试者，目的为治愈、痊愈、缓解、解除、改变、补救、减轻、改善或影响该病症、该病症的症状或该病症的素因。
术语“有效量”指在该受试者中赋予所希望的疗效所需的活性剂的量。如本领域技术人员所知，有效量可依据施用途径、赋形剂的使用、以及与其他试剂共用的可能性而改变。
“受试者”指人类和非人类动物。非人类动物的实例包括所有脊椎动物，如哺乳动物，如非人灵长动物(尤其是高级灵长动物)、狗、啮齿动物(如，小鼠或大鼠)、豚鼠、猫、和非哺乳动物如鸟类、两栖动物、爬行动物等。在优选的实施方案中，受试者是人类。另一具体实施例中，受试者是实验动物或适合作为疾病模型的动物。
“组合疗法”包括对受试者施用本发明的受试化合物以及与该化合物进一步组合的另一生物活性成分(例如但不限于，第二种且不同的抗新生物剂)和非药物疗法(例如但不限于手术或放射治疗)。例如，本发明的化合物可以与其他药学活性化合物或非药物疗法，优选能够增强本发明化合物的效果的化合物组合使用。本发明的化合物可与其他疗法同时施用(作为单一制剂或分离的制剂)或序贯施用。通常，组合疗法设想在单个治疗周期或单个疗程中施用两种或多种药物/治疗。
在一个实施方案中，本发明的化合物与一种或多种传统化学治疗剂组合施用。传统的化学治疗剂包括肿瘤学领域中的多种治疗方法。为了缩小肿瘤，破坏手术后剩余的剩余癌细胞，诱导缓解，维持缓解和/或减轻与癌症或其治疗有关的症状，在疾病的各个阶段施用这些药剂。此类药剂的实例包括但不限于烷基化试剂，例如氮芥(例如，苯达莫司汀，环磷酰胺，美法仑，氯丁酸苄酯，异环磷酰胺)，亚硝基脲(例如卡莫司汀，洛莫司汀和链佐星)，亚乙基亚胺(例如塞替派，六甲基黑色素)，烷基磺酸盐(例如，白消安)，肼和三嗪(例如，六甲蜜胺，丙卡巴肼，达卡巴嗪和替莫唑胺)和铂基试剂(例如，卡铂，顺铂和奥沙利铂)；植物生物碱，例如鬼臼毒素(例如依托泊苷和替尼泊苷(Tenisopide))，紫杉烷类(例如紫杉醇和多西他赛)，长春花生物碱(例如长春新碱，长春花碱和长春瑞滨)；抗肿瘤抗生素，例如色霉素(例如放线菌素D和普卡霉素)，蒽环类药物(例如多柔比星，柔红霉素，表柔比星，米托蒽醌和伊达比星)，以及杂类抗生素例如丝裂霉素和博来霉素；抗代谢物，例如叶酸拮抗剂(例如甲氨蝶呤)，嘧啶拮抗剂(例如5-氟尿嘧啶，氟尿苷(Foxuridine)，阿糖胞苷，卡培他滨和吉西他滨)，嘌呤拮抗剂(例如6-巯基嘌呤和6-硫代鸟嘌呤)和腺苷脱氨酶抑制剂(例如克拉屈滨，氟达拉滨，奈拉滨(Nelarabine)和喷司他丁)；拓扑异构酶抑制剂，例如拓扑异构酶I抑制剂(托泊替康，伊立替康)，拓扑异构酶II抑制剂(例如安吖啶，依托泊苷，磷酸依托泊苷，替尼泊苷)，以及杂类抗新生物药物，例如核糖核苷酸还原酶抑制剂(羟基脲)，肾上腺皮质类固醇抑制剂(米托坦)、抗微管剂(雌莫司汀)和类维生素A(贝沙罗汀，异维A酸，维甲酸(ATRA)。
在本发明的一方面，可以将化合物与一种或多种调节与多种疾病状态有关的蛋白激酶的靶向抗癌剂组合施用。此类激酶的实例可包括但不限于ABL1、ABL2/ARG、ACK1、AKT1、AKT2、AKT3、ALK、ALK1/ACVRL1、ALK2/ACVR1、ALK4/ACVR1B、ALK5/TGFBR1、ALK6/BMPR1 B、AMPK(A1/B1/G1)、AMPK(A1/B1/G2)、AMPK(A1/B1/G3)、AMPK(A1/B2/G1)、AMPK(A2/B1/G1)、AMPK(A2/B2/G1)、AMPK(A2/B2/G2)、ARAF、ARK5/NUAK1、ASK1/MAP3K5、ATM、Aurora A、AuroraB、Aurora C、AXL、BLK、BMPR2、BMX/ETK、BRAF、BRK、BRSK1、BRSK2、BTK、CAMK1a、CAMK1b、CAMKld、CAMK1g、CAMKIIa、CAMKIIb、CAMKIId、CAMKIIg、CAMK4、CAMKK1、CAMKK2、CDC7-DBF4、CDK1-细胞周期蛋白A、CDK1-细胞周期蛋白B、CDK1-细胞周期蛋白E、CDK2-细胞周期蛋白A、CDK2-细胞周期蛋白A1、CDK2-细胞周期蛋白E、CDK3-细胞周期蛋白E、CDK4-细胞周期蛋白D1、CDK4-细胞周期蛋白D3、CDK5-p25、CDK5-p35、CDK6-细胞周期蛋白D1、CDK6-细胞周期蛋白D3、CDK7-细胞周期蛋白H、CDK9-细胞周期蛋白K、CDK9-细胞周期蛋白T1、CHK1、CHK2、CK1al、CK1d、CKlepsilon、CK1g1、CK1g2、CK1g3、CK2a、CK2a2、c-KIT、CLK1、CLK2、CLK3、CLK4、c-MER、c-MET、COT1/MAP3K8、CSK、c-SRC、CTK/MATK、DAPK1、DAPK2、DCAMKL1、DCAMKL2、DDR1、DDR2、DLK/MAP3K12、DMPK、DMPK2/CDC42BPG、DNA-PK、DRAK1/STK17A、DYRK1/DYRK1A、DYRK1B、DYRK2、DYRK3、DYRK4、EEF2K、EGFR、EIF2AK1、EIF2AK2、EIF2AK3、EIF2AK4/GCN2、EPHA1、EPHA2、EPHA3、EPHA4、EPHA5、EPHA6、EPHA7、EPHA8、EPHB1、EPHB2、EPHB3、EPHB4、ERBB2/HER2、ERBB4/HER4、ERK1/MAPK3、ERK2/MAPK1、ERK5/MAPK7、FAK/PTK2、FER、FES/FPS、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGR、FIT1/VEGFR1、FIT3、FLT4/VEGFR3、FMS、FRK/PTK5、FYN、GCK/MAP4K2、GRK1、GRK2、GRK3、GRK4、GRK5、GRK6、GRK7、GSK3a、GSK3b、Haspin、HCK、HGK/MAP4K4、HIPK1、HIPK2、HIPK3、HIPK4、HPK1/MAP4K1、IGF1R、IKKa/CHUK、IKKb/IKBKB、IKKe/IKBKE、IR、IRAK1、IRAK4、IRR/INSRR、ITK、JAK1、JAK2、JAK3、JNK1、JNK2、JNK3、KDR/VEGFR2、KHS/MAP4K5、LATS1、LATS2、LCK、LCK2/ICK、LKB1、LIMK1、LOK/STK10、LRRK2、LYN、LYNB、MAPKAPK2、MAPKAPK3、MAPKAPK5/PRAK、MARK1、MARK2/PAR-1Ba、MARK3、MARK4、MEK1、MEK2、MEKK1、MEKK2、MEKK3、MELK、MINK/MINK1、MKK4、MKK6、MLCK/MYLK、MLCK2/MYLK2、MLK1/MAP3K9、MLK2/MAP3K10、MLK3/MAP3K11、MNK1、MNK2、MRCKa/、CDC42BPA、MRCKb/、CDC42BPB、MSK1/RPS6KA5、MSK2/RPS6KA4、MSSK1/STK23、MST1/STK4、MST2/STK3、MST3/STK24、MST4、mTOR/FRAP1、MUSK、MYLK3、MYO3b、NEK1、NEK2、NEK3、NEK4、NEK6、NEK7、NEK9、NEK11、NIK/MAP3K14、NLK、OSR1/OXSR1、P38a/MAPK14、P38b/MAPK11、P38d/MAPK13、P38g/MAPK12、P70S6K/KPS6KB1、p70S6Kb/、RPS6KB2、PAK1、PAK2、PAK3、PAK4、PAK5、PAK6、PASK、PBK/TOPK、PDGFRa、PDGFRb、PDK1/PDPK1、PDK1/PDHK1、PDK2/PDHK2、PDK3/PDHK3、PDK4/PDHK4、PHKg1、PHKg2、PI3Ka、(p110a/p85a)、PI3Kb、(p110b/p85a)、PI3Kd、(p110d/p85a)、PI3Kg(p120g)、PIM1、PIM2、PIM3、PKA、PKAcb、PKAcg、PKCa、PKXb1、PKCb2、PKCd、PKCepsilon、PKCeta、PKCg、PKCiota、PKCmu/PRKD1、PKCnu/PRKD3、PKCtheta、PKCzeta、PKD2/PRKD2、PKG1a、PKG1b、PKG2/PRKG2、PKN1/PRK1、PKN2/PRK2、PKN3/PRK3、PLK1、PLK2、PLK3、PLK4/SAK、PRKX、PYK2、RAF1、RET、RIPK2、RKPK3、RIPK5、ROCK1、ROCK2、RON/MST1R、ROS/ROS1、RSK1、RSK2、RSK3、RSK4、SGK1、SGK2、SGK3/SGKL、SIK1、SIK2、SLK/STK2、SNARK/NUAK2、SRMS、SSTK/TSSK6、STK16、STK22D/TSSK1、STK25/YSK1、STK32b/YANK2、STK32c/YANK3、STK33、STK38/NDR1、STK38L/NDR2、STK39/STLK3、SRPK1、SRPK2、SYK、TAK1、TAOK1、TAOK2/TAO1、TAOK3/JIK、TBK1、TEC、TESK1、TGFBR2、TIE2/TEK、TLK1、TLK2、TNIK、TNK1、TRKA、TRKB、TRKC、TRPM7/CHAK1、TSSK2、TSSK3/STK22C、TTBK1、TTBK2、TTK、TXK、TYK1/LTK、TYK2、TYRO3/SKY、ULK1、ULK2、ULK3、VRK1、VRK2、WEE1、WNK1、WNK2、WNK3、YES/YES1、ZAK/MLTK、ZAP70、ZIPK/DAPK3、KINASE、MUTANTS、ABL1(E255K)、ABL1(F317I)、ABL1(G250E)、ABL1(H396P)、ABL1(M351T)、ABL1(Q252H)、ABL1(T315I)、ABL1(Y253F)、ALK(C1156Y)、ALK(L1196M)、ALK(F1174L)、ALK(R1275Q)、BRAF(V599E)、BTK(E41K)、CHK2(I157T)、c-Kit(A829P)、c-KIT(D816H)、c-KIT(D816V)、c-Kit(D820E)、c-Kit(N822K)、C-Kit(T670I)、c-Kit(V559D)、c-Kit(V559D/V654A)、c-Kit(V559D/T670I)、C-Kit(V560G)、c-KIT(V654A)、C-MET(D1228H)、C-MET(D1228N)、C-MET(F1200I)、c-MET(M1250T)、C-MET(Y1230A)、C-MET(Y1230C)、C-MET(Y1230D)、C-MET(Y1230H)、c-Src(T341M)、EGFR(G719C)、EGFR(G719s)、EGFR(L858R)、EGFR(L861Q)、EGFR(T790M)、EGFR、(L858R，T790M)、EGFR(d746-750/T790M)、EGFR(d746-750)、EGFR(d747-749/A750P)、EGFR(d747-752/P753S)、EGFR(d752-759)、FGFR1(V561M)、FGFR2(N549H)、FGFR3(G697C)、FGFR3(K650E)、FGFR3(K650M)、FGFR4(N535K)、FGFR4(V550E)、FGFR4(V550L)、FLT3(D835Y)、FLT3(ITD)、JAK2(V617F)、LRRK2(G2019S)、LRRK2(I2020T)、LRRK2(R1441C)、p38a(T106M)、PDGFRa(D842V)、PDGFRa(T674I)、PDCFRa(V561D)、RET(E762Q)、RET(G691S)、RET(M918T)、RET(R749T)、RET(R813Q)、RET(V804L)、RET(V804M)、RET(Y791F)、TIF2(R849W)、TIF2(Y897S)和TIF2(Y1108F)。
在本发明的另一方面，本发明化合物可以与一种或多种调节非激酶生物学靶标，途径或过程的靶向抗癌剂联合给药。此类靶途径或过程包括但不限于热激蛋白(例如HSP90)，聚ADP(二磷酸腺苷)-核糖聚合酶(PARP)，缺氧诱导因子(HIF)，蛋白酶体，Wnt/Hedgehog/Notch信号传导蛋白，TNF-α，基质金属蛋白酶，法呢基转移酶，凋亡途径(例如Bcl-xL，Bcl-2，Bcl-w)，组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)，组蛋白乙酰基转移酶(HAT)和甲基转移酶(例如组蛋白赖氨酸甲基转移酶，组蛋白精氨酸甲基转移酶，DNA甲基转移酶等)。
在本发明的另一方面，将本发明的化合物与一种或多种其他抗癌剂组合施用，所述其他抗癌剂包括但不限于基因疗法，RNAi癌症疗法，化学保护剂(例如，氨磺汀(amfostine)，美司钠，右雷佐生)，药物-抗体缀合物(例如brentuximab vedotin，ibritumomab tioxetan)，癌症免疫疗法(例如白介素-2)，癌症疫苗(例如sipuleucel-T)或单克隆抗体(例如贝伐单抗(Bevacizumab)，阿仑珠单抗(Alemtuzumab)，利妥昔单抗，曲妥珠单抗等)。
在本发明的另一方面，主题化合物与放射疗法或手术组合施用。放射通常在内部(在癌症部位附近植入放射性物质)或从使用光子(X射线或γ射线)或粒子放射的机器外部传递。在组合疗法进一步包括放射治疗的情况下，可以在任何合适的时间进行放射治疗，只要获得了由治疗剂和放射治疗的组合的共同作用产生的有益效果即可。例如，在适当的情况下，当从治疗剂的施用暂时去除放射治疗时，可能直到几天甚至几周，仍可获得有益效果。
在某些实施方案中，本发明的化合物与放射疗法，手术或抗癌剂中的一种或多种组合施用，所述放射治疗剂，手术或抗癌剂包括但不限于DNA破坏剂，抗代谢物，拓扑异构酶抑制剂，抗微管剂，激酶抑制剂，表观遗传剂，HSP90抑制剂，PARP抑制剂、BCL-2抑制剂、药物-抗体缀合物和靶向VEGF，HER2，EGFR，CD50，CD20，CD30，CD33等的抗体。
在某些实施方案中，本发明的化合物与下列一种或多种组合施用：阿巴瑞克、醋酸阿比特龙、阿地白介素、阿仑珠单抗、六甲蜜胺、阿那曲唑、天冬酰胺酶、苯达莫司汀、贝伐单抗、贝沙罗汀、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐比(bortezombi)、brentuximab vedotin、白消安、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、西妥昔单抗、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯法拉滨、氯米芬、克唑替尼、环磷酰胺、达沙替尼、柔红霉素脂质体、地西他滨、地加瑞克(degarelix)、地尼白介素2(denileukin diftitox)、地尼白介素2、地诺单抗(denosumab)、多西他赛、多柔比星、多柔比星脂质体、表柔比星、甲磺酸艾日布林(eribulin mesylate)、厄洛替尼、雌莫司汀、磷酸依托泊苷、依维莫司、依西美坦、氟达拉滨、氟尿嘧啶、福莫司汀、氟维司群、吉非替尼、吉西他滨、gemtuzumab ozogamicin、醋酸戈舍瑞林、醋酸组氨瑞林、羟基脲、ibritumomab tiuxetan、伊达比星、异环磷酰胺、甲磺酸伊马替尼、干扰素alfa 2a、ipilimumab、ixabepilone、二苯磺酸拉帕替尼(1apatinib ditosylate)、来那度胺、来曲唑、亚叶酸钙、乙酸亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、氮芥、美法仑、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、米托蒽醌、奈拉滨(nelarabine)、尼洛替尼(nilotinib)、奥沙利铂、紫杉醇、紫杉醇蛋白结合颗粒、帕米膦酸(pamidronate)、帕尼单抗(Panitumumab)、培门冬酶、PEG干扰素alfa-2b、培美曲塞二钠、喷司他丁、雷洛昔芬、利妥昔单抗、索拉非尼、链佐星、马来酸舒尼替尼、他莫昔芬、西罗莫司(temsirolimus)、替尼泊苷、沙利度胺、托瑞米芬、托西莫单抗、曲妥珠单抗、维甲酸、乌拉莫司汀、凡德他尼(Vandetanib)、威罗菲尼(vemurafenib)、长春瑞滨、唑来磷酸、放射疗法或手术。
在某些实施方案中，本发明的化合物与一种或多种抗炎剂组合施用。抗炎剂包括但不限于NSAID、非特异性和COX-2特异性环氧化酶抑制剂、金化合物、皮质类固醇、甲氨蝶呤、肿瘤坏死因子受体(TNF)受体拮抗剂、免疫抑制剂和甲氨蝶呤。NSAID的实例包括但不限于布洛芬(ibuprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、萘普生(naproxen)和萘普生钠、双氯芬酸(diclofenac)、双氯芬酸钠和米索前列醇(misoprosto1)的组合、舒林酸(sulindac)、奥沙普秦(oxaprozin)、二氟尼柳(diflunisal)、吡罗昔康(piroxicam)、吲哚美辛(indomethacin)、依托度酸(etodolac)、非诺洛芬钙(fenoprofen calcium)、酮洛芬(ketoprofen)、萘丁美酮钠(sodium nabumetone)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、托美丁钠(tolmetin sodium)和羟氯喹。NSAID的实例还包括COX-2特异性抑制剂，如塞来昔布(celecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、鲁米昔布(1umiracoxib)和/或依托昔布(etoricoxib)。
在一些实施方案中，抗炎剂是水杨酸盐(酯)。水杨酸盐(酯)包括但不限于乙酰水杨酸或阿司匹林、水杨酸钠和胆碱和水杨酸镁。抗炎剂也可以是皮质类固醇。例如，皮质类固醇可以是可的松、地塞米松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、磷酸泼尼松龙钠或泼尼松。
在另外的实施方案中，抗炎剂是金化合物，如硫代苹果酸金钠或金诺芬(auranofin)。
本发明还包括其中抗炎剂是代谢抑制剂，如二氢叶酸还原酶抑制剂，如甲氨蝶呤，或二氢乳清酸脱氢酶抑制剂，如来氟米特(leflunomide)。
本发明的其他实施方案涉及下述组合，其中至少一种抗炎化合物是抗C5单克隆抗体(如依库珠单抗(eculizumab)或培克珠单抗(pexelizumab))、TNF拮抗剂如恩那西普(entanercept)或英利昔单抗(infliximab)，其是抗TNF alpha单克隆抗体。
在某些实施方案中，本发明的化合物与一种或多种免疫抑制剂组合施用。
在一些实施方案中，免疫抑制剂是糖皮质激素、甲氨蝶呤、环磷酰胺、硫唑嘌呤(azathioprine)、巯基嘌呤、来氟米特、环孢菌素、他克莫司(tacrolimus)和霉酚酸酯、放线菌素D、蒽环类、丝裂霉素C、博来霉素、光神霉素(mithramycin)或芬戈莫德(fingolimod)。
本发明进一步提供了用于预防或治疗新生物性疾病、自身免疫性疾病或炎性病症的方法。在一个实施方案中，本发明涉及在需要治疗的受试者中治疗新生物性疾病、自身免疫性疾病或炎性病症的方法，该方法包括对所述受试者施用治疗有效量的本发明化合物。在一个实施方案中，本发明进一步提供了本发明的化合物在制备用于中止或减少新生物性疾病、自身免疫性疾病或炎性病症的药物中的用途。
在一个实施方案中，新生物性疾病是B细胞恶性肿瘤，其包括但不限于B细胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)、毛细胞淋巴瘤、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、多发性骨髓瘤、慢性和急性骨髓性白血病以及慢性和急性淋巴细胞性白血病。
可以使用根据本发明的化合物和组合物影响的自身免疫性和或炎性疾病包括但不限于变态反应、阿尔茨海默氏病、急性播散性脑脊髓炎、艾迪生(Addison)氏病、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征、哮喘、动脉粥样硬化、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性溶血和血小板减少状态、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、大疱性类天疱疮、乳糜泻、chagas病、慢性阻塞性肺疾病、慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)、churg-strauss综合征、克罗恩氏病、皮肌炎、1型糖尿病、子宫内膜异位症、肺出血肾炎综合征(Goodpasture’ssyndrome)(及相关的肾小球肾炎和肺出血)、格雷夫斯病(graves’disease)、格-巴二氏综合征(guillain-barré syndrome)、桥本病、化脓性汗腺炎、特发性血小板减少性紫癜、间质性膀胱炎、肠易激综合征、红斑狼疮、硬斑病、多发性硬化、重症肌无力、发作性睡病、神经性肌强直、帕金森氏病、寻常型天疱疮、恶性贫血、多肌炎、原发性胆汁性肝硬化、银屑病、银屑病关节炎、类风湿性关节炎、精神分裂症、败血性休克、硬皮病、干燥综合征、系统性红斑狼疮(及相关肾小球肾炎)、颞动脉炎、移植器官的器官移植物排斥和超急性排斥、血管炎(与ANCA相关的血管炎病(vasculitides)和其他血管炎病)、白癜风和韦格纳肉芽肿病。
应理解，本发明并不限于本文中显示和描述的具体实施方案，可做出多种改变和修饰而不悖离由权利要求书所界定的本发明的精神和范畴。
根据本发明的化合物可根据多种反应方案合成。必要的起始材料可通过标准有机化学过程获得。联系下述代表性的合成方案和实施例，可更好地理解本发明的化合物和过程，这些方案和实施例仅用作例示而非限制本发明的范围。对于所公开的实施方案的各种改变和修饰对于该领域技术人员是显而易见的，且可做出改变和修饰，包括但不限于与化学结构、取代基、衍生物、及/或本发明的方法相关的改变和修饰，而不悖离本发明的精神和所附权利要求书的范围。
在方案A中，反应物5可以通过3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2(1H)-酮与适当的苯胺反应来制备。反应物5中的硝基可以是其他基团，如经保护的胺基或-NHC(O)-弹头。
典型的起始材料(CAS 1346674-23-4)可商购。但是，至该中间体的报道的途径(例如在WO 2013067274中)需要至少7个合成步骤。合成不仅很长，而且还包括几种有毒或有害并具有环境责任的试剂和溶剂。我们在本文方案1中描述了一种关注于可持续化学使用的新的、更有效且更具成本效益的途径(三个合成步骤)：
在方案1中，起始材料3-甲基环戊-2-烯-1-酮通过标准有机反应以高收率转化为3，3-二甲基环戊烷-1-酮，其可以进一步转化为中间体3。最后，中间体3可以与哌嗪-2-酮反应以产生CAS 1346674-23-4的靶分子。
中间体可以通过与方案1类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂来制备。
中间体可以通过与方案1类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂，或通过标准有机反应来制备。
中间体可以通过与方案1类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂，或通过标准有机反应来制备。/>
方案A中描述了合成其中R3为-CH2OH的式(IV)化合物的典型方法。一般方案A中的R1、R4、X、弹头和m与上述概述部分中描述的那些相同。
在方案A中，合适的起始材料1可以与2反应形成中间体3，该中间体3可以通过标准有机反应以高产率转化为4。同时，中间体5可以通过使可商购的3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2(1H)-酮(CAS 87486-34-8)与适当的4-取代的3-硝基苯胺反应而获得。然后，4与5的偶联反应将生成硝基中间体6，可以将其还原为胺中间体7。最后，可以将7还原为醇中间体8，该中间体可以使适当的丙烯酰氯反应生成式(IV)。
式(III)化合物可以通过与方案A类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂来制备。
式(II)化合物可以通过与方案A类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂来制备。
式(I)化合物可以通过与方案A类似的方法，通过使用不同的起始材料和试剂来制备。
联系下述实施例，可更好地理解本发明的化合物和过程，所述实施例意图仅用作例示而非限制本发明的范围。对于所公开的实施方案的各种改变和修饰对于本领域技术人员是显而易见的，且可做出改变和修饰，包括但不限于与化学结构、取代基、衍生物、及/或本发明的方法相关的改变和修饰，而不悖离本发明的精神和所附权利要求书的范围。
若呈现NMR数据，则1H谱在XL400(400MHz)上获得并且以来自Me4Si的ppm低磁场报告，在括号中指示质子数、多重态和以赫兹计的偶联常数。若呈现HPLC数据，则使用Agilent1100系统进行分析。若呈现LC/MS数据，则使用Applied Biosystems API-100质谱仪和Shimadzu SCL-10A LC柱进行分析。
实施例1：制备7，7-二甲基-3，4，7，8-四氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-1(6H)-酮。
将CuI(47.6g，249.93mmol，1.20当量)在乙醚(500mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的1000-mL的圆底烧瓶中。在0℃下向溶液中加入MeLi(286mL/2M，2.20当量)，并将混合物在相同温度下搅拌2小时。在相同温度下向溶液中加入3-甲基环戊-2-烯-1-酮(20g，208.06mmol，1.00当量)。将所得溶液在0℃的水/冰浴中搅拌2小时。然后，当TLC显示SM消失(PE∶EA＝1∶1)时，通过添加500mL的NH4Cl(aq.)淬灭反应。所得溶液用3×200ml的乙醚萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。得到21g(90％)的3，3-二甲基环戊-1-酮，为无色油。
将N，N-二甲基甲酰胺(41.6g，569.16mmol，3.00当量)在二氯甲烷(200mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的500mL的圆底烧瓶中。在0℃下向溶液中加入POCl3(57.3g，373.70mmol，2.00当量)，然后将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。在相同温度下向溶液中加入3，3-二甲基环戊-1-酮(21.0g，187.22mmol，1.00当量)。将所得溶液在油浴中于55℃搅拌过夜。然后当TLC显示反应已完成(PE∶EA＝1∶1)时，通过添加200mL水性NaAcO淬灭反应。所得溶液用3×200二氯甲烷萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。得到30g(粗品)的2-氯-4，4-二甲基环戊-1-烯-1-甲醛(carbaldehyde)为棕色油。
将哌嗪-2-酮(18.7g，186.78mmol，1.00当量)和DIEA(24.2g，187.25mmol，1.00当量)在NMP(45mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。然后在100℃下向溶液中滴加2-氯-4，4-二甲基环戊-1-烯-1-甲醛(29.7g，187.23mmol，1.00当量)。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌30分钟。然后，当TLC显示反应已完成(EA)时，通过添加200mL水淬灭反应。通过过滤收集固体。得到20g(52％)4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为灰白色固体。LC-MS：(ES，m/z)：205[M+H]+。1H-NMR：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ7.38(s，1H)、6.36(s，1H)、3.92(t，J＝5.9Hz，2H)、3.45(m，2H)、2.50(s，2H)、2.38(s，2H)、1.19(s，6H)。
实施例2：制备N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺
将4-氟-3-硝基苯胺(100g，0.64mol)和N-甲基哌嗪(256g，2.56mol)的混合物溶解在乙醇中。将混合物保持回流24h，然后允许混合物冷却至室温，将反应真空浓缩并过滤，得到作为红色固体的4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯胺(131g，86％)1H-NMR(300MHZ，CDCl3)7.11(d，1H)、7.02(d，1H)、6.807-6.845(m，1H)、3.76(s，2H)、2.98(m，4H)、2.557(m，4H)、2.35(s，3H)。
4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯胺(14.53g，0.0615mol)、3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2(1H)-酮(16.5g，0.0615mol)、碳酸铯(40.1g，0.123mol)、DMF(14ml)和1，4-二恶烷(200ml)的混合物在鼓泡氮气通入所得悬浮液30分钟后，加入Xantphons(3.5g，0.00615mol)和三(二苄叉基丙酮)二钯(tris(dibenzylideneacetone)dipalladium)(0)(6.3g，0.00615mol)。然后将反应混合物在100℃加热2h，此后，将混合物冷却至室温，并用90∶10的二氯甲烷/甲醇(500ml)和水(300m1)稀释，分离各层，用90∶10的二氯甲烷/甲醇(500ml)萃取水层，合并的有机层用卤水洗涤并用硫酸钠干燥。通过过滤除去干燥剂，将滤液减压浓缩，并将得到的残余物通过快速柱色谱法(90∶10二氯甲烷/甲醇)纯化，得到D(12g，46％)1H-NMR(300MHZ，CDCl3)、8.31(d，2H)、7.85(m，1H)、7.23(d，1H)、6.82(s，1H)、3.55(s，3H)、3.08(m，4H)、2.59(m，4H)、2.38(s，3H)。
可商购的起始材料4-氯-2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)烟醛(CAS#1434050-55-1，1.5g，4.37mmol，1.0当量)、Pin2B2(2.8g，11mmol，2.5当量)、Pd(dppf)Cl2(356mg，0.44mmol，0.1当量)和KOAc(1.3g，13moml，3.0当量)在1，4-二恶烷(150mL)中的混合物在N2气氛下回流4h。将混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液，得到(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲酰吡啶-4-基)硼酸(3.0g)为棕色油，其无需进一步纯化即可用于下一步。ESI-MS(M+H)+：354.2。
(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲酰吡啶-4-基)硼酸(来自上一步的粗品，4.37mmol，1.0当量)、5-溴-1-甲基-3-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯基)氨基)吡嗪-2(1H)-酮(实施例1，900mg，2.2mmol，0.5eq)、Pd(dppf)Cl2(360mg，0.44mmol，0.1当量)和K2CO3(1.5g，13moml，3.0当量)在二恶烷(50mL)和H2O(5mL)中的混合物在90℃和N2气氛下搅拌4小时。将混合物冷却至室温并浓缩，并将残余物通过硅胶上的柱色谱法纯化(DCM∶MeOH＝30∶1)，得到2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-4-(4-甲基-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯基)氨基)-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)烟醛为棕色固体(600mg，两步Y：40％)。ESI-MS(M+H)+：652.1。
2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-4-(4-甲基-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯基)氨基)-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)烟醛(600mg，0.92mmol，1.0当量)(600mg，0.92mmol，1.0当量)和Pd/C(120mg，20％wt)在MeOH(20mL)中的混合物在1个H2压力的气氛下于室温氢化16小时。通过硅藻土(Celite)垫滤出催化剂，并将滤液浓缩，得到4-(6-((3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)烟醛为棕色固体(600mg)。ESI-MS(M+H)+：622.1。
向4-(6-((3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)烟醛(来自前一步骤的粗品，0.92mmol，1.0当量)在MeOH(10mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(70mg，1.8mmol，2.0当量)在MeOH(10mL)中的溶液。将溶液在室温搅拌16小时。浓缩，残余物通过Pre-HPLC纯化(A：H2O，0.05％NH3.H2O，B：MeCN)以得到2-(4-(6-((3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-7，7-二甲基-3，4，7，8-四氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-1(6H)-酮作为褐色固体(150mg，两步Y：56％)。ESI-MS(M+H)+：624.1。
向2-(4-(6-((3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-7,7-二甲基-3,4,7,8-四氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-1(6H)-酮(150mg，0.24mmol，1.0当量)、丙烯酸(26mg，0.36mmol，1.5当量)和HATU(123mg，0.36mmol，1.5当量)在DMF(5mL)中的混合物添加TEA(73mg，0.72mmol，3.0当量)。将混合物在室温搅拌4小时。反应混合物通过Pre-HPLC纯化(A：H2O，0.05％NH3.H2O；B：MeCN)以得到N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺作为棕色固体(38mg，Y：23％)。ESI-MS(M+H)+：678.1.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：9.24(s，1H)、9.06(s，1H)、8.88(s，1H)、8.46(d，J＝5.2Hz，1H)、7.88(d，J＝4.8Hz，1H)、7.75(s，1H)、7.63(dd，J＝2.0Hz，4.4Hz，1H)、7.12(d，J＝8.4Hz，1H)、6.66-6.56(m，1H)、6.57(s，1H)、6.33-6.28(m，1H)、5.79-5.76(m，1H)、5.04(br s，1H)、4.60-4.46(m，2H)、4.26-4.18(m，3H)、3.86-3.83(m，1H)、3.55(s，3H)、2.79-2.75(m，4H)、2.67-2.57(m，6H)、2.43(s，2H)、2.24(s，3H)、1.22(s，6H)。
实施例3：制备(S)-N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺
将4-氟-3-硝基苯胺(50g，320.28mmol，1.00当量)、CH3CN(500mL)、NMM(64.7g，639.64mmol，2.00当量)、Cbz-Cl(87.4g，512.34mmol，1.60当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的1000-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到45g(48％)的N-(4-氟-3-硝基苯基)氨基甲酸苄酯为黄色固体。LC-MS：(ES，m/z)：[M+H]+＝291，1H-NMR：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.15(m，1H)、7.65(m，1H)、7.42-7.32(m，5H)、7.22(m，1H)、6.80(s，2H)、5.22(s，2H)。
将DMSO(100mL)中的N-(4-氟-3-硝基苯基)氨基甲酸苄酯(10g，34.45mmol，1.00当量)的溶液、(3S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7.58g，37.85mmol)、DIEA(6.67g，51.61mmol，1.50当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于110℃搅拌过夜。用水稀释所得溶液。所得溶液用乙酸乙酯萃取，合并有机层，并在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到10g(62％)的(3S)-4-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：[M+H]+＝471.1H-NMR：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ7.86(s，1H)、7.60(m，1H)、7.44-7.31(m，7H)、5.21(s，2H)、3.90(t，J＝11.4Hz，2H)、3.21-3.02(m，3H)、2.79-2.72(m，2H)、1.49(s，9H)、0.80(d，J＝6.3Hz，3H)。
将(3S)-4-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.5g，26.57mmol，1.00当量)在二恶烷(100mL)中的溶液、氯化氢二恶烷(25mL)放入氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。得到12.5g(粗品)的N-[4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：371[M+H]+。
将乙醇(100ml)中的N-[4-[(2S)-2-甲基哌嗪-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯溶液、氧杂环丁烷-3-酮(oxetan-3-one)(2.2g，30.53mmol，1.20当量)、NaBH3CN(1.67g，26.58mmol，1.00当量)放入氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1：1)的硅胶柱上。得到5g(35％)的N-[4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：427[M+H]+1H-NMR(300MHz，CD3OD，ppm)：δ7.86(s，1H)、7.60(m，1H)、7.48-7.31(m，6H)、5.21(s，2H)、4.75-4.55(m，5H)、3.55(m，1H)、3.26-3.10(m，2H)、2.97-2.72(m，3H)、2.30-2.11(m，3H)，1.80(t，J＝4.7Hz，1H)、1.49(s，9H)、0.80(d，J＝6.3Hz，3H)。
将乙醇(50ml)中的N-[4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯(5.0g，11.72mmol，1.00当量)的溶液、AcOH(7.0g，116.57mmol，10.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL圆底烧瓶中。随后加入粉尘Zn(4.6g，6.00当量)。将所得溶液在室温搅拌1h。滤出固体。将所得混合物在真空下浓缩，并施加在硅胶柱上。得到1.0g(22％)的N-[3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：397[M+H]+.1H-NMR(300MHz，CD3OD，ppm)：δ7.46-7.31(m，5H)、7.02(m，2H)、6.75(d，J＝8.4，1H)、5.20(s，2H)、4.85-4.64(m，4H)、3.67-3.55(m，3H)，3.17(m，1H)、2.92-2.78(m，4H)、2.25(m，1H)、1.95(m，1H)、0.80(d，J＝6.0Hz，3H)。
将N-[3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯在四氢呋喃(10mL)中的溶液、NMM(510mg，5.04mmol，2.00当量)、(Boc)2O(820mg，3.76mmol，1.50当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到0.9g(72％)N-(3-[[(terr-butoxy)羰基]氨基]-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：497[M+H]+。
将N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯在甲醇(10mL)的溶液、钯碳(0.1g，0.10当量)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到0.6g(91％)的N-[5-氨基-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：363[M+H]+1H-NMR-PH-：(300MHz，CD3OD，ppm)：δ7.46-7.31(m，5H)、7.02(m，2H)、6.75(d，J＝8.4，1H)、4.78-4.64(m，4H)、3.60(m，1H)、3.10-2.70(m，5H)、2.22(m，1H)、1.95(m，1H)、0.77(d，J＝6.0Hz，3H)。
将N-[5-氨基-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯在IPA(10mL)中的溶液、3，5-二溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(980mg，3.66mmol，1.00当量)、DIEA(640mg，4.95mmol，1.50当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于80℃搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到1.2g(66％)的N1[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：551[M+H]+ 1H-NMR：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.31(s，1H)、8.20(s，1H)、7.99(s，1H)、7.20(d，J＝8.7，1H)、6.95(d，J＝8.7，1H)、6.75(s，1H)、4.78-4.64(m，5H)、3.60(m，1H)、3.20-2.72(m，7H)、2.22(m，1H)、1.95(m，1H)、0.79(d，J＝6.0Hz，3H)。
将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.09mmol，1.00当量)在二氯甲烷中(6ml)的溶液、三氟乙酸(1.2mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。将得到的混合物在真空下浓缩。得到500mg(粗品)的3-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：451[M+H]+。
将3-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(500mg，1.11mmol，1.00当量)在二恶烷(15mL)/H2O(1mL)的溶液、(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-[(恶烷2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(431mg，0.98mmol，1.10当量)、Pd(dppf)Cl2(50mg，0.07mmol，0.10当量)、碳酸钾(307mg，2.22mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1小时。将得到的混合物在真空下浓缩，用H2O稀释并用EA萃取。得到500mg(59％)10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(粗品)为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：764[M+H]+。
将10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(500mg，0.65mmol，1.00当量)在二氯甲烷(5mL)中的溶液、三氟乙酸(1mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于40℃搅拌15分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到80mg(18％)的10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS：(ES，m/z)：680[M+H]+。
将10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(80mg，0.12mmol，1.00当量)在CH3CN(1mL)中的溶液、丙-2-烯酸(10mg，0.14mmol，1.20当量)、HATU(49.2mg，0.13mmol，1.10当量)、NMM(17.7mg，0.17mmol，1.50当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到27mg(31％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)丙-2-烯酰胺为灰白色固体。LC-MS：(ES，m/z)：734[M+H]+.1H-NMR：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.25(s，1H)、9.19(s，1H)、9.11(s，1H)、8.49(d，J5.1Hz，1H)、7.95(d，J＝5.1Hz，1H)、7.77(s，1H)、7.60(d，J＝8.7，1H)、7.25(d，J＝8.7，1H)、6.63-6.57(m，2H)、6.30(m，1H)、5.80(d，J＝3.9Hz，1H)、5.02(m，1H)、4.65-4.41(m，6H)、4.35-4.15(m，3H)、3.85(m，1H)、3.60-3.43(m，4H)、3.10(m，1H)、2.85-2.54(m，6H)、2.45(m，2H)、2.22(m，1H)、1.95(t，J＝6.6Hz，1H)、1.25(s，6H)、0.76(d，J＝6.0Hz，3H)。
实施例4：制备(S)N-(5-((6-(3-(7,7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺
将4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(3.0g，14.69mmol，1.00当量)在二恶烷(30mL)中的溶液、2，6-二溴苯甲醛(4.65g，17.62mmol，1.20当量)、Cs2CO3(9.6g，29.46mmol，2.00当量)、Pd2(dba)3(300mg，0.33mmol，0.10当量)、Xantphos(300mg，0.52mmol，0.10当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至RT。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1：1)的硅胶柱上。得到4.0g(70％)的2-溴-6-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]苯甲醛为灰白色固体。(ES，m/z)：387[M+H]+.1H-NMR：(300MHz，CD3OD，ppm)：δ10.36(s，1H)、7.43(d，J＝7.8Hz，1H)，7.25(m，2H)、6.60(s，1H)、3.99(t，J＝6.0Hz，2H)、3.63(t，J＝6.0Hz，3H)、2.55(s，2H)、2.45(s，2H)、1.24(s，6H)。
将2-溴-6-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]苯甲醛(1.0g，2.58mmol，1.00当量)在二恶烷(10mL)中的溶液、Pin2B2(1.64g，2.50当量)、Pd(dppf)Cl2(100mg，0.14mmol，0.10当量)、KOAc(760mg，7.74mmol，3.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌30分钟。将反应混合物冷却至RT。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到400mg(44％)的(3-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-2-甲酰苯基)硼酸为棕色固体。LC-MS：(ES，m/z)：353[M+H]+。
将(3-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-2-甲酰苯基)硼酸(346mg，0.98mmol，1.00当量)、3-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(441mg，0.98mmol，1.00当量)在二恶烷(10mL)/H2O(1mL)中的溶液、Pd(dppf)Cl2(30mg，0.04mmol，0.10当量)、碳酸钾(271mg，1.96mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1小时。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到500mg(75％)的2-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-6-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]苯甲醛为棕色油。LC-MS：(ES，m/z)：677[M+H]+。
将2-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-6-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]苯甲醛(500mg，0.74mmol，1.00当量)在乙醇(10mL)中的溶液、NaBH4(16.8mg，0.44mmol，0.60当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到240mg(48％)的10-[3-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-2-(羟基甲基)苯基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为浅棕色固体。LC-MS：(ES，m/z)：679[M+H]+。
将10-[3-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-2-(羟基甲基)苯基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(240mg，0.35mmol，1.00当量)在CH3CN(10mL)中的溶液、丙-2-烯酸(30.5mg，0.42mmol，1.20当量)、HATU(147.7mg，0.39mmol，1.10当量)、NMM(71.4mg，0.71mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-mL的圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。粗产物通过制备型HPLC纯化。得到60mg(23％)的N-(5-[[6-(3-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)丙-2-烯酰胺为灰白色固体。LC-MS：(ES，m/z)：733[M+H]+.1H-NMR：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.17(m，2H)、8.91(s，1H)、7.82-7.63(m，2H)、7.49-7.42(m，2H)、7.40-7.23(m，2H)、6.67-6.49(m，2H)、6.25(m，1H)、5.80(d，J＝10.5Hz，1H)、4.81(m，1H)、4.62-4.40(m，6H)、4.25-4.02(m，3H)、3.93(m，1H)、3.60-3.40(m，4H)、3.10(m，1H)、2.80-2.60(m，4H)、2.55(s，2H)、2.45(s，2H)、2.22(m，1H)、1.95(t，J＝6.8Hz，1H)、1.22(s，6H)、0.73(d，J＝6.0Hz，3H)。
实施例5：制备N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺
将N-(3-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(5g，24.01mmol，1.00当量)、3，5-二溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(5.8g，21.65mmol，1.50当量)、DIEA(4.9g，37.98mmol，2.00当量)、异丙醇(50mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃下搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速PE∶EA＝100/20在30分钟内增加至PE∶EA＝100/50纯化。得到7.4g(78％)的N-[3-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为浅黄色固体。LC-MS：(ES，m/z)：[M+H]+＝395.1H-NMR-：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ9.32(s，1H)、9.28(s，1H)，7.91(s，1H)、7.52(d，J＝5.4Hz，1H)、7.16-7.09(m，2H)、3.45(s，3H)、1.47(s，9H)。
将N-[3-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(400mg，0.51mmol，1.00当量)、氯化氢/二恶烷(10mL)。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。得到300mg(90％)的3-[(3-氨基苯基)氨基]-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为黄色固体。LC-MS：(ES，m/z)：[M+H]+＝295。
将3-[(3-氨基苯基)氨基]-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(200mg，0.68mmol，1.00当量)、(2-4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^2，6]十二-2(6)，7-二烯-10-基-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(298mg，0.68mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(58mg，0.07mmol，0.10当量)、碳酸钾(281mg，2.04mmol，3.00当量)、二恶烷(12mL)、水(2mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃下搅拌30分钟。冷却后，将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用甲醇稀释。粗产物通过快速MeCN：H2O＝25/75在13分钟内增加至MeCN：H2O＝50/50纯化。得到280mg(68％)的10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS(ES，m/z)：[M+H]+＝610。
将10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(230mg，0.38mmol，1.00当量)、三氟乙酸(1mL)、二氯甲烷(20mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。所得溶液用乙酸乙酯稀释。用碳酸氢钠饱和溶液将溶液的pH值调节至8。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到150mg(76％)的10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为无色油。LC-MS--714-4：(ES，m/z)：[M+H]+＝526。
将10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(150mg，0.28mmol，1.00当量)、丙-2-烯酸(20.1mg，0.28mmol，1.00当量)、NMM(58mg，0.38mmol，2.00当量)、HATU(141mg，0.25mmol，1.30当量)、MeCN(5mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到32.4mg(18％)的N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]苯基)丙-2-烯酰胺为灰白色固体。LC-MS：(ES，m/z)：[M+H]+＝580。1H-NMR：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ9.99(s，1H)、9.24(s，1H)、8.47(m，2H)、7.84-7.73(m，2H)、7.60(d，J＝7.5Hz，1H)、7.30-7.20(m，2H)、6.58(s，1H)、6.55-6.25(m，2H)、5.76(d，J＝9.9Hz，1H)、4.97(m，1H)、4.64-4.45(m，2H)、4.33-4.15(m，3H)、3.88(m，1H)、3.57(s，3H)、2.59(d，J＝5.1Hz，2H)、2.42(d，J＝5.1Hz，2H)、1.22(s，6H)。
实施例7：制备N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯基)丙烯酰胺
将4-溴-3-硝基苯胺(5g，23.04mmol，1.00当量)、4-(四甲基-1，3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1，2，3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(14g，45.28mmol，2.00当量)、Pd(dppf)Cl2(2g，2.33mmol，0.10当量)、碳酸钾(19g，137.47mmol，6.00当量)、二恶烷(80mL)、水(20mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在90℃C搅拌过夜。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速PE∶EA＝50/50在30分钟内增加至PE∶EA＝20/80纯化。得到5.7g(77％)的4-(4-氨基-2-硝基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯为浅黄色油。LC-MS--1：(ES，m/z)：[M+H]+＝320。1H-NMR-PH--1：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ7.05(m，2H)、6.80(d，J＝8.1Hz，1H)，5.74(s，2H)、5.49(s，1H)、3.88(m，2H)、3.46(t，J＝10.8Hz，2H)、2.17(s，2H)。
将4-(4-氨基-2-硝基苯基)-1，2，3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(7g，21.92mmol，1.00当量)、水(10mL)、碳酸钠(4.6g，43.40mmol，2.00当量)、二氯甲烷(50mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。随后在在0℃滴加Cbz-Cl(4.5g，26.47mmol，1.20当量)并搅拌5分钟。将所得溶液在室温搅拌过夜。所得混合物用2x100mL的卤水洗涤。将得到的混合物在真空下浓缩。得到7g(70％)的4-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯为黄色油。LC-MS--2：(ES，m/z)：[M+H]+＝454。1H-NMR-PH--2：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ10.27(s，1H)、8.13(s，1H)、7.68(d，J＝8.4Hz，1H)、7.46-7.32(m，7H)，5.62(s，1H)、5.19(s，2H)、3.92(m，2H)、3.53(t，J＝10.8Hz，2H)、2.24(s，2H)。
将4-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(5g，11.03mmol，1.00当量)、氯化氢/二恶烷(40mL)放入250-mL圆底烧瓶中.将所得溶液在室温搅拌1.5小时。得到的混合物在真空下浓缩。得到4.5g(粗品)的N-[3-硝基-4-(1，2，3,6-四氢吡啶-4-基)苯基]氨基甲酸苄酯为浅黄色固体。LC-MS--3：(ES，m/z)：[M+H]+＝354。
将N-[3-硝基-4-(1，2，3,6-四氢吡啶-4-基)苯基]氨基甲酸苄酯(4.5g，25.47mmol，1.00当量)、氧杂环丁烷-3-酮(1.35g，37.47mmol，1.50当量)、NaCNBH3(1.6g，50.79mmol，2.00当量)、甲醇(30mL)放入250-mL圆底烧瓶中.将所得溶液在50℃搅拌4h。用乙酸乙酯萃取所得溶液，并合并有机层。所得混合物用2x100mL氯化钠洗涤。将固体在烘箱中减压干燥并在真空下浓缩。得到3.6g(61％)的N-[3-硝基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]苯基]氨基甲酸苄酯为白色固体。LC-MS--4：(ES，m/z)：[M+H]+＝410。1H-NMR-PH--4：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ10.27(s，1H)、8.09(s，1H)、7.67(d，J＝8.4Hz，1H)、7.46-7.32(m，6H)，5.59(s，1H)、5.19(s，2H)、4.56(t，J＝9Hz，2H)、4.49(t，J＝9Hz，2H)、3.60(m，1H)、2.92(s，2H)、2.48(m，2H)、2.26(s，2H)。
将N-[3-硝基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]苯基]氨基甲酸苄酯(3.6g，8.79mmol，1.00当量)、乙酸(5.25g，87.42mmol，10.00当量)、乙醇(25mL)、锌(2.8g，42.81mmol，5.00当量)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。所得溶液用乙酸乙酯稀释。用碳酸钠(1mol/L)将pH调节至8。所得混合物用2x200mL H2O洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。粗产物通过快速PE：EA＝100/30在45分钟内增加至PE：EA＝100/50纯化。得到2.5g(75％)的N-[3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]苯基]氨基甲酸苄酯为黄色油。LC-MS--5：(ES，m/z)：[M+H]+＝380。1H-NMR-PH--5：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.61(s，1H)、7.52-7.28(m，5H)、6.87(s，1H)、6.77(d，J＝7.8Hz，1H)、6.61(d，J＝8.1Hz，1H)、5.60(s，1H)、5.13(s，2H)、4.74(s，2H)、4.57(t，J＝9Hz，2H)、4.50(t，J＝9Hz，2H)、3.52(m，1H)、2.92(s，2H)、2.48(m，2H)、2.28(s，2H)。
将N-[3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]苯基]氨基甲酸苄酯(2.5g，13.18mmol，1.00当量)、TEA(2g，39.53mmol，3.00当量)、二碳酸二叔丁酯(1.75g，16.04mmol，1.30当量)、四氢呋喃(30mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在65℃搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速PE：EA＝100/30在25分钟内增加至PE：EA＝100/50纯化。得到2g(63％)的N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]苯基)氨基甲酸苄酯为黄色油。LC-MS--6：(ES，m/z)：[M+H]+＝480。1H-NMR-PH--6：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.74(s，1H)、8.20(s，1H)、7.47-7.28(m，6H)、7.24(d，J＝8.1Hz，1H)、7.05(d，J＝8.4Hz，1H)、5.75(s，1H)、5.14(s，2H)、4.57(s，2H)、4.57(t，J＝9Hz，2H)、4.50(t，J＝9Hz，2H)、3.54(m，1H)、2.92(s，2H)、2.48(m，2H)、2.28(s，2H)、1.22(s，9H)。
将N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-1，2，3,6-四氢吡啶-4-基]苯基)氨基甲酸苄酯(1.4g，2.92mmol，1.00当量)、钯碳(140mg，0.10当量)、乙酸乙酯(40mL)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到610mg(60％)的N-[5-氨基-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为浅黄色固体。LC-MS--7：(ES，m/z)：[M+H]+＝348。1H-NMR-PH--7：(300MHz，d6-DMSO，PPm)：δ8.26(s，1H)、6.90(d，J＝7.8Hz，1H)、6.40(m，2H)、4.87(s，2H)、4.54(t，J＝7.2Hz，2H)、4.46(t，J＝7.2Hz，2H)、3.37(m，1H)、2.78(d，J＝10.8Hz，2H)、2.60(m，1H)、1.80-1.45(m，6H)、1.21(s，9H)。
将N-[5-氨基-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(600mg，2.30mmol，1.00当量)、3，5-二溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(550mg，2.74mmol，1.20当量)、DIEA(435mg，4.50mmol，2.50当量)、异丙醇(25mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速PE：EA＝100/85纯化。得到600mg(65％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为浅黄色固体。LC-MS--8：(ES，m/z)：[M+H]+＝534。1H-NMR-PH--8：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.40(s，1H)、8.57(s，1H)、7.79(s，1H)、7.72(d，J＝8.4Hz，1H)、7.32(s，1H)、7.23(d，J＝8.4Hz，1H)、4.54(t，J＝6.3Hz，2H)、4.46(t，J＝6.3Hz，2H)、3.45-3.37(m，5H)、2.83-2.70(m，3H)、1.83-1.52(m，6H)、1.38(s，9H)。
将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.12mmol，1.00当量)、三氟乙酸(2mL)、二氯甲烷(20mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌3h。将得到的混合物在真空下浓缩。将所得溶液用甲醇稀释，并用碳酸钾将pH调节至8。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到410mg(84％)的3-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为浅黄色固体。LC-MS--9：(ES，m/z)：[M+H]+＝434。
将3-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(300mg，0.7mmol，1.00当量)、(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十-二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(350mg，0.8mmol，1.10当量)、Pd(dppf)Cl2(60mg，0.03mmol，0.10当量)、K2CO3(286mg，2.03mmol，3.00当量)、二恶烷(20mL)、水(2mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。将所得溶液用甲醇稀释。粗产物通过快速MeCN：H2O＝20/80在12分钟内增加至MeCN：H2O＝55/45纯化。得到210mg(81％)的10-[4-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为浅黄色固体。LC-MS--10：(ES，m/z)：[M+H]+＝749。
将10-[4-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(210mg，0.28mmol，1.00当量)、二氯甲烷(10mL)、三氟乙酸(1mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。将得到的混合物在真空下浓缩，并用碳酸氢钠溶液将pH调节至8。所得混合物用EA萃取并用卤水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。得到135mg(72％)的10-[4-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为浅黄色固体。LC-MS--11：(ES，m/z)：[M+H]+＝665。1H-NMR-PH--11：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.55(d，J＝5.1Hz，1H)、8.20(s，1H)、8.00(s，1H)、7.76(d，J＝5.1Hz，1H)、7.29(s，1H)、7.23(d，J＝5.7Hz，1H)、7.23(d，J＝5.4Hz，1H)、6.85(s，1H)、5.02(m，1H)、4.82-4.37(m，7H)、4.20(m，2H)、3.92(m，1H)、3.70-3.50(m，5H)、2.98(m，2H)、2.62-2.47(m，5H)、2.07-1.82(m，6H)、1.73-1.45(m，5H)、1.28(s，6H)。
将10-[4-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(135mg，0.23mmol，1.00当量)、丙-2-烯酸(17mg，0.23mmol，1.00当量)、HATU(94mg，0.25mmol，1.10当量)、NMM(54mg，0.53mmol，2.50当量)、MeCN(5mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到15.2mg(11％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基)丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--0：(ES，m/z)：[M+H]+＝719。1H-NMR-PH--0：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ9.54(s，1H)、9.32(s，1H)、8.45(d，J＝4.8Hz，1H)、8.32(m，1H)、7.79-7.70(m，3H)、7.25(d，J＝8.7Hz，1H)、6.61-6.44(m，2H)、6.27(m，1H)、5.75(d，J＝10.8Hz，1H)、5.01(m，1H)、4.67-4.42(m，6H)、4.35-4.15(m，3H)、3.87(m，1H)、3.57(s，3H)、3.40(m，1H)、2.85-2.57(m，5H)、2.45(m，2H)、1.84-1.55(m，6H)、1.23(s，6H)。
实施例8：制备N-(5-((6-(3-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯基)丙烯酰胺
将3-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(300mg，0.69mmol，1.00当量)、(3-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-2-formyl苯基)硼酸(260mg，0.74mmol，1.10当量)、Pd(dppf)Cl2(35mg，0.05mmol，0.10当量)、碳酸钾(286mg，2.07mmol，3.00当量)、二恶烷(15mL)、水(2mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液搅拌40分钟在100℃2h。将得到的混合物在真空下浓缩。将得到的溶液用甲醇萃取，并合并有机层。粗产物通过快速MeCN∶H2O＝30/70在12分钟内增加到MeCN∶H2O＝65/35纯化。得到268mg(59％)的2-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-6-[4，4-甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]苯甲醛为浅黄色固体。LC-MS--1：(ES，m/z)：662[M+H]+。
将2-[6-(3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-6-4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^2，6]十二-2(6)，7-二烯-10-基苯甲醛(240mg，0.36mmol，1.00当量)、NaBH4(7mg，0.18mmol，0.50当量)、乙醇(8mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将所得溶液浓缩并用甲醇稀释。用碳酸钾将pH调节至8。滤出固体，并在真空下浓缩滤液。得到132mg(55％)的10-[3-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-2-(羟基甲基)苯基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为浅黄色油。LC-MS--2：(ES，m/z)：664[M+H]+1H-NMR-PH--2：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ8.71(s，1H)、7.53-7.25(m，5H)、7.04(d，J＝8.4Hz，1H)、6.90(d，J＝8.4Hz，1H)、6.53(s，1H)、4.81(m，3H)、4.62-4.40(m，6H)、4.25-4.02(m，3H)、3.93(m，1H)、3.55(s，1H)、3.35(m，1H)，2.80(m，2H)、2.55(s，2H)、2.45(s，2H)、1.95-1.4(m，7H)、1.22(s，6H)。
将10-[3-[6-([3-氨基-4-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-2-(羟基甲基)苯基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(100mg，0.15mmol，1.00当量)、丙-2-烯酸(12mg，0.17mmol，1.10当量)、HATU(68mg，0.18mmol，1.20当量)、NMM(30mg，0.30mmol，2.00当量)、MeCN(4mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到20.5mg(20％)的N-(5-[[6-(3-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.v^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-2-(羟基甲基)苯基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基]苯基)丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--0：(ES，m/z)：718[M+H]+1H-NMR-PH--0：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.28(s，1H)、7.95(s，1H)、7.70-7.20(m，7H)、6.80(s，1H)、6.45-6.25(m，2H)、5.73(s，1H)、4.70(m，4H)、4.62-4.37(m，3H)、4.25-4.10(m，3H)、3.95(m，1H)、3.65(s，3H)、3.55(m，1H)、2.90(m，2H)、2.70-2.45(m，6H)、2.04-1.80(m，5H)、1.26(s，6H)。
实施例9：制备N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺
将1-溴-3，5-二硝基苯(5.5g，22.27mmol，1.00当量)在二恶烷(50mL)中的溶液、1-甲基哌嗪(2.64g，26.36mmol，1.20当量)、Cs2CO3(14.5g，44.50mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。随后添加Pd2(dba)3(550mg，0.60mmol，0.10当量)、BINAP(770mg，1.24mmol，0.15当量)。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至25℃。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/己烷(1∶1)的硅胶柱上。得到4.0g(67％)的1-(3，5-di硝基苯基)-4-甲基哌嗪为黄色固体。LC-MS-1：(ES，m/z)：267[M+H]+。
将1-(3，5-二基苯基)-4-甲基哌嗪(1.3g，4.88mmol，1.00当量)在甲醇(10mL)中的溶液、钯碳(0.1g，0.10当量)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2h。滤出固体。将得到的混合物在真空下浓缩。得到1.0g(99％)的5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1，3-二胺为棕色油。LC-MS-2：(ES，m/z)：207[M+H]+。1H-NMR-PH-1：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ5.44(s，2H)、5.38(s，1H)、4.49(s，4H)、2.95(t，J＝6.5Hz，4H)、2.38(t，J＝6.5Hz，4H)、2.19(s，3H)。
将3，5-二溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(1.0g，3.73mmol，1.00当量)在IPA(10mL)中的溶液、5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1，3-二胺(1.0g，4.85mmol，1.00当量)、DIEA(530mg，4.10mmol，1.10当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于40℃搅拌1h。将反应混合物冷却至25℃。通过过滤收集固体。得到0.5g(34％)的3-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为棕色固体。LC-MS-3：(ES，m/z)：392[M+H]+。
将3-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基-1,2-二-氢吡嗪-2-酮(300mg，0.76mmol，1.00当量)在二恶烷(10mL)/H2O(1mL)中的溶液、(2-[4,4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(300mg，0.68mmol，1.00当量)、碳酸钾(240mg，1.74mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。随后添加Pd(dppf)Cl2(30mg，0.04mmol，0.10当量)。将所得溶液在油浴中与100℃搅拌1h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有CH3CN∶H2O(1∶1)的柱上。得到190mg(35％)的10-[4-(6-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS-4：(ES，m/z)：708[M+H]+。
将10-[4-(6-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(190mg，0.27mmol，1.00当量)在二氯甲烷(5mL)中的溶液、三氟乙酸(1mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在油浴中于40℃搅拌20分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。得到190mg(粗品)的10-[4-(6-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色油。LC-MS-5：(ES，m/z)：624[M+H]+。
将丙-2-烯酸(21mg，0.29mmol，1.10当量)、HATU(122.5mg，0.32mmol，1.20当量)、NMM(54mg，0.53mmol，2.00当量)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得混合物搅拌10分钟。向混合物中添加10-[4-(6-[[3-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(190mg，0.30mmol，1.00当量)。将所得溶液在室温搅拌1h。粗产物通过快速Prep-HPLC纯化。得到23mg(11％)的N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙-2-烯酰胺为浅棕色固体。LC-MS-0：(ES，m/z)：678[M+H]+。1H-NMR-PH-1：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.88(s，1H)、9.02(s，1H)、8.49(d，J＝5.1Hz，1H)、7.80-7.74(m，3H)、7.50(s，1H)、6.97(s，1H)、6.57(s，1H)、6.52-6.25(m，2H)、5.75(d，J＝9.6H，1H)、5.02(m，1H)、4.67-4.49(m，2H)、4.32-4.15(m，3H)、3.90(m，1H)、3.55(s，3H)、3.13(m，4H)、2.60(m，2H)、2.45(m，6H)、2.25(s，3H)、1.23(s，3H)。
实施例10：制备N-(3-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)丙烯酰胺
合成1-[(3，5-二基苯基)甲基]-4-甲基哌嗪：将1-(氯甲基)-3,5-二基苯(3g，13.85mmol，1.00当量)、1-甲基哌嗪(1.38g，13.78mmol，1.00当量)、碳酸钾(4.8g，34.73mmol，2.50当量)、四氢呋喃(30mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在70℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。粗产物通过从乙醚中重结晶来纯化。得到3g(77％)的1-[(3，5-二基苯基)甲基]-4-甲基哌嗪为黄色固体。LC-MS--718-1：(ES，m/z)：281[M+H]+1H-NMR-PH--718-1：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ8.73(s，1H)、8.56(s，2H)、3.74(s，2H)、2.44(br s，4H)，2.34(br s，4H)、2.16(s，3H)。
合成5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯-1，3-二胺：将1-[(3，5-二基苯基)甲基]-4-甲基哌嗪(2.0g，7.14mmol，1.00当量)、钯碳(0.2g，0.10当量)、甲醇(40mL)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌3h。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。得到1.1g(70％)的5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯-1，3-二胺为无色油。LC-MS--718-2：(ES，m/z)：221[M+H]+。1H-NMR-PH--718-2：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ5.76(s，2H)，5.70(s，1H)、4.61(s，4H)，3.12(s，2H)、2.30(br s，8H)、2.15(s，3H)。
合成3-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮：将3,5-二溴-1-甲基-1,2-二氢吡嗪-2-酮(1.0g，1.00当量)、5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯-1，3-二胺(0.7g，1.00当量)、DIEA(1.0g，7.74mmol，2.50当量)、异丙醇(15mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到153mg(14％)的3-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为浅黄色固体。LC-MS--718-3：(ES，m/z)：407[M+H]+。1H-NMR-PH--718-3：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ8.92(s，1H)，7.28(s，1H)、6.95-6.93(m，2H)、6.28(s，1H)，5.01(s，2H)、3.44(s，3H)、3.27(s，2H)、2.39-2.36(m，8H)、2.15(s，3H)。
合成10-[4-[6-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将3-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(100mg，0.25mmol，1.00当量)、(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(120mg，0.27mmol，1.10当量)、Pd(dppf)Cl2(20mg，0.03mmol，0.10当量)、碳酸钾(68mg，0.49mmol，2.00当量)、二恶烷(10mL)、水(1mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃搅拌30分钟。将反应混合物冷却至室温。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到30mg(17％)的10-[4-[6-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基]-4,4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS--718-4：(ES，m/z)：722[M+H]+。
合成10-[4-[6-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将二氯甲烷(2mL)、三氟乙酸(0.2mL)、10-4-[6-(3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^2，6]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(30mg，0.03mmol，1.00当量)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。得到20mg(74％)的10-[4-[6-([3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为黄色油。LC-MS--718-5：(ES，m/z)：638[M+H]+。
合成N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-5-[(4-甲基哌嗪-1一基)甲基]苯基)丙-2-烯酰胺：将丙-2-烯酸(20mg，0.28mmol，1.00当量)、10-4-[6-(3-氨基-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^2，6]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(2.7mg，1.20当量)、HATU(14mg，1.20当量)、NMM(8mg，2.50当量)、MeCN(2mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到5mg(3％)的N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基)丙-2-烯酰胺为棕色固体。LC-MS--718-0：(ES，m/z)：692[M+H]+。1H-NMR-PH--718-0：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ8.56-8.52(m，2H)、8.33(s，1H)、7.83-7.78(m，3H)、7.30(s，2H)、6.82(s，1H)、6.44(d，J＝15.3Hz，1H)、6.30(dd，J＝17.1，9.9Hz，1H)、5.74(dd，J＝9.9，1.5Hz，1H)、4.84-4.79(m，1H)、4.54-4.50(m，2H)、4.16-4.12(m，2H)、3.93-3.90(m，1H)、3.65(s，3H)、3.49(s，2H)、2.56-2.51(m，13H)、2.32(s，3H)、1.27(s，6H)。
实施例11：制备(S)N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺
合成2，4-二溴-3-甲基吡啶：将(i-Pr)2NH(3.19g，1.50当量)在四氢呋喃(50mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL三颈圆底烧瓶中。随后在-30℃添加n-C4H9Li(10ml，1.5当量)并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。随后在-70℃添加2，4-二溴吡啶(5g，21.11mmol，1.00当量)并将混合物在相同温度下搅拌30分钟。在-70℃向上述溶液中加入碘甲烷(4.5g，1.50当量)。将所得溶液在-70℃搅拌30分钟。然后通过加入100mL水性NH4Cl淬灭反应。将所得溶液用3x50mL的乙酸乙酯萃取，并将有机层合并，并用Na2SO4干燥。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到3.0g(57％)的2，4-二溴-3-甲基吡啶为白色固体。LC-MS--727-1：(ES，m/z)：252[M+H]+ 1H-NMR-PH--727-1：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ7.99(d，J＝5.1Hz，1H)、7.45(d，J＝5.1Hz，1H)、2.58(s，3H)。
合成10-(4-溴-3-甲基吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(1.0g，4.90mmol，1.00当量)在二恶烷(10mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中。然后将2，4-二溴-3-甲基吡啶(1.59g，6.34mmol，1.30当量)、Pd2(dba)3(100mg，0.11mmol，0.10当量)、Xantphos(100mg，0.17mmol，0.10当量)、Cs2CO3(3.19g，9.79mmol，2.00当量、)添加到混合物。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(1∶1)的硅胶柱上。得到1.0g(55％)的10-(4-溴-3-甲基吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS--727-2(ES，m/z)：374[M+H]+。1H-NMR-PH--727-1：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.10(d，J＝5.4Hz，1H)、7.41(d，J＝5.1Hz，1H)、6.79(s，1H)、4.44-4.41(m，1H)、4.15-4.09(m，2H)、3.90-3.86(m，1H)、2.54(s，2H)、2.49(s，2H)、2.34(s，3H)、1.25(s，6H)。
合成(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)硼酸：将10-(4-溴-3-甲基吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(500mg，1.34mmol，1.00当量)在二恶烷(5mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中，然后向溶液中添加Pin2B2(850mg，2.50当量)、KOAc(400mg，4.08mmol，3.00当量)、Pd(dppf)Cl2(50mg，0.07mmol，0.10当量)。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1h。将反应混合物冷却至室温。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。用CH3CN：H2O(1∶1)通过快速Prep-HPLC纯化残余物。得到150mg(33％)的(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)硼酸为棕色固体。LC-MS--727-3：(ES，m/z)：340[M+H]+。
合成10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-甲基吡啶-2-基]-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)硼酸(120mg，0.35mmol，1.00当量)在二恶烷(1mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中，然后向溶液中添加3-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(100mg，0.22mmol，1.10当量)、Pd(dppf)Cl2(10mg，0.01mmol，1.00当量)、碳酸钾(73mg，0.53mmol，2.00当量)。将所得溶液在油浴中于100℃搅拌1h。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物在真空下浓缩。通过快速Prep-HPLC纯化残余物。得到120mg(51％)的10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-甲基吡啶-2-基]-4,4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为棕色固体。LC-MS--727-4：(ES，m/z)：664[M+H]+。
合成N-(5-[[6-(2-[4,4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)丙-2-烯酰胺：将10-[4-[6-([3-氨基-4-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基]氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-甲基吡啶-2-基]-4,4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(200mg，0.30mmol，1.00当量)在CH3CN(1mL)中的溶液放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中，然后向溶液中添加丙-2-烯酸(21.7mg，0.30mmol，1.00当量)、HATU(115mg，0.30mmol，1.00当量)、NMM(61mg，0.60mmol，2.00当量)。将所得溶液在室温搅拌4h。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速Prep-HPLC纯化。得到21.1mg(10％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]-2-[(2S)-2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基]苯基)丙-2-烯酰胺为浅黄色固体。LC-MS--727-0：(ES，m/z)：718[M+H]+。1H-NMR-PH--727-1：(300MHz，d6-DMSO3，ppm)：δ8.88(d，J＝5.7Hz，1H)、8.32(d，J＝5.7Hz，1H)、7.67-7.59(m，2H)、7.33-7.27(m，2H)、6.64-6.55(m，2H)、6.24(d，J＝16.5Hz，1H)、5.76(d，J＝11.4Hz，1H)、4.72-4.65(m，4H)、4.19-4.09(m，4H)、3.90-3.83(m，2H)、3.54(s，3H)、3.30-3.12(m，3H)、3.00-2.83(m，3H)、2.51(s，2H)、2.40(s，2H)、2.26(s，3H)、1.18(s，6H)、0.74-0.71(m，3H)。
实施例12：制备N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺
合成2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将2-甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(18g，84.40mmol，1.00当量)、吗啉(8g，91.83mmol，1.10当量)、NaCNBH3(10g，2.00当量)、乙醇(200mL)放入500-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在50℃搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。粗产物通过快速Prep-HPLC纯化。得到9.4g(39％)的2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯为无色油。LC-MS--729-1：(ES，m/z)：285[M+H]+。1H-NMR-PH--729-1：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ4.01-3.94(m，1H)、3.75-3.72(m，4H)、3.17-3.07(m，1H)、2.56-2.51(m，4H)、2.42-2.37(m，1H)、1.89-1.83(m，2H)、1.68-1.53(m，3H)、1.48(s，9H)、1.27(d，J＝6.3Hz，3H)。
合成4-(2-甲基哌啶-4-基)吗啉：将2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(5g，17.58mmol，1.00当量)、氯化氢/二恶烷(50mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。将所得混合物用MeCN稀释，并用碳酸钾碱化。将混合物过滤并将滤液浓缩。得到3g(93％)的4-(2-甲基哌啶-4-基)吗啉为白色固体。LC-MS--729-2：(ES，m/z)：185[M+H]+。
合成N-[4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯，将4-(2-甲基哌啶-4-基)吗啉(3g，16.28mmol，1.00当量)、N-(4-氟-3-硝基苯基)氨基甲酸苄酯(5.6g，19.29mmol，1.20当量)、碳酸钾(6.75g，48.91mmol，3.00当量)、MeCN(60mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在90℃搅拌过夜。通过过滤收集固体。将得到的混合物在真空下浓缩，并施加到具有乙酸乙酯/石油醚(75∶25)的硅胶柱上。粗产物通过快速Prep-HPLC纯化，其中MeCN∶0.1％TFA/H2O＝20/80在12分钟内增加到MeCN∶0.1％TFA/H2O＝45/55。得到1.5g(21％)的N-[4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯为黄色固体。LC-MS--729-3：(ES，m/z)：455[M+H]+。1H-NMR-PH--729-3：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ10.21(s，1H)、9.90(br s，1H)、7.87(s，1H)、7.64-7.52(m，2H)、7.50-7.30(m，5H)、5.18(s，2H)、4.10-3.96(m，2H)、3.80-3.60(m，2H)、3.55-3.30(m，3H)、3.20-2.97(m，4H)、2.69(t，J＝11.1Hz，1H)、2.25-2.10(m，2H)、1.75-1.55(m，1H)、1.40-1.30(m，1H)、0.74(d，J＝6.0Hz，3H)。
合成N-[3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯：将N-[4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯(1.2g，2.64mmol，1.00当量)、Zn(1.0g，15.38mmol，6.00当量)、NH4Cl(1.7g，31.78mmol，12.00当量)、MeOH(15mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1h。通过过滤收集固体。将滤液在真空下浓缩。将残余物施加到具有二氯甲烷/甲醇(15∶1)的硅胶柱上。得到0.84g(75％)的N-[3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯为棕色固体。LC-MS--729-4：(ES，m/z)：425[M+H]+。
合成N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯：将N-[3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯(0.5g，3.53mmol，1.00当量)、Boc2O(0.38g，5.28mmol，1.50当量)、DIEA(0.38g，8.84mmol，2.50当量)、四氢呋喃(15mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在75℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物在真空下浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(75∶25)的硅胶柱上。得到0.5g(80％)的N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯为浅黄色固体。LC-MS--729-5：(ES，m/z)：252[M+H]+。1H-NMR-PH--729-5：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.69(s，1H)、8.19(s，1H)、8.05(s，1H)、7.46-7.30(m，5H)、7.18-7.15(m，1H)、7.10-7.06(m，1H)、5.14(s，2H)、3.59(br s，4H)、2.90-2.47(m，4H)、2.42-2.25(m，2H)、2.0-1.82(m，2H)、1.72-1.60(m，1H)、1.50-1.32(m，12H)、0.71(d，J＝6.0Hz，3H)。
合成N-[5-氨基-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯：将N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯(500mg，1.52mmol，1.00当量)、钯碳(50mg)、甲醇(30mL)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在25℃搅拌3h。将混合物在真空下浓缩。得到381mg(粗品)的N-[5-氨基-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为无色油。LC-MS--729-6：(ES，m/z)：391[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯：将N-[5-氨基-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.54mmol，1当量)、3，5-二溴-1-甲基-1,2-二氢吡嗪-2-酮(250mg，1.87mmol，1.21当量)、DIEA(250mg，3.87mmol，2.52当量)、i-PrOH(10mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯的硅胶柱上。得到265mg(59.73％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为黄色固体。LC-MS--729-7：(ES，m/z)：577[M+H]+。1H-NMR-PH--729-7：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.38(s，1H)、8.41(s，1H)、8.04(s，1H)、7.59-7.55(m，1H)、7.32(s，1H)、7.23(d，J＝0.9Hz，1H)、3.65-3.55(m，4H)、3.44(s，3H)、2.92-2.52(m，4H)、2.42-2.28(m，2H)、2.00-1.82(m，2H)、1.50-1.30(m，13H)、0.73-0.69(m，3H)。
合成3-([3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.31mmol，1当量)、HCl/二恶烷(5mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌4小时。将得到的混合物浓缩。得到160mg(96.45％)的3-([3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为浅黄色固体。LC-MS--729-8：(ES，m/z)：477[M+H]+。
合成10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将3-([3-氨基-4-[2-甲基-4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(160mg，0.34mmol，1当量)、(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-4-基)硼酸(147mg，0.33mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(30mg，0.03mmol，0.10当量)、K2CO3(116mg，0.84mmol，2.50当量)、二恶烷(5mL，无限mmol，无限当量)、H2O(0.5mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在90℃搅拌40分钟。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物浓缩。并通过快速Prep-HPLC纯化。得到210mg(79.12％)的10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基)-4,4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为固体。LC-MS--729-9：(ES，m/z)：792[M+H]+。
合成10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮：将10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-[(恶烷-2-基氧基)甲基]吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(200mg，0.38mmol，1.00当量)、三氟乙酸(1mL)、二氯甲烷(20mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物在真空下浓缩。将所得溶液用乙酸乙酯稀释，并用碳酸氢钠水溶液碱化。滤出固体，并将滤液在真空下浓缩。得到130mg(76％)的10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮为无色油。LC-MS--729-10：(ES，m/z)：708[M+H]+。
合成N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]苯基)丙-2-烯酰胺：将10-(4-[6-[(3-氨基苯基)氨基]-4-甲基-5-氧代-4，5-二氢吡嗪-2-基]-3-(羟基甲基)吡啶-2-基)-4，4-二甲基-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-9-酮(100mg，0.19mmol，1.00当量)、丙-2-烯酸(13.7mg，0.19mmol，1.00当量)、NMM(38.5mg，0.38mmol，2.00当量)、HATU(94mg，0.25mmol，1.30当量)、MeCN(5mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到19.7mg(18％)的N-(3-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基]氨基]苯基)丙-2-烯酰胺为灰白色固体。LC-MS--729-0：(ES，m/z)：762[M+H]+。1H-NMR-PH--729-0：(300MHz，DMSO，ppm)：δ9.23(s，2H)、9.14(s，1H)、8.49(d，J＝5.1Hz，1H)、7.96-7.95(m，1H)、7.77(s，1H)、7.61(d，J＝8.1Hz，1H)、7.23(d，J＝8.7Hz，1H)、6.68-6.62(m，1H)、6.57(s，1H)、6.30(d，J＝17.1Hz，1H)、5.80(d，J＝11.7Hz，1H)、5.03-5.00(m，1H)、4.65-4.40(m，2H)、4.32-4.16(m，4H)、3.85-3.83(m，1H)、3.68-3.55(m，7H)、3.01-2.72(m，2H)、2.71-2.52(m，4H)、2.48-2.25(m，4H)、1.98-1.78(m，2H)、1.72-1.52(m，1H)、1.46-1.30(m，1H)、1.23(s，6H)、0.76(d，J＝5.7Hz，3H)。
实施例13：制备(R)N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6,7,8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)苯基)丙烯酰胺
合成N-[4-[(3R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯为黄色固体：将(3R)-N,N-二甲基吡咯烷-3-胺二盐酸盐(5g，26.72mmol，1当量)、N-(4-氟-3-硝基苯基)氨基甲酸苄酯(9.3g，32.07mmol，1.20当量)、TEA(10.8g，106.89mmol，4.00当量)、DMF(80mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。然后通过加入200mL的水淬灭反应。将所得溶液用2x200ml的乙酸乙酯萃取。有机混合物用2x200ml卤水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。粗产物通过从MeCN中重结晶来纯化。得到5.2g(50.62％)的N-[4-[(3R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯为黄色固体。LC-MS--729-C-1：(ES，m/z)：385[M+H]+。1H-NMR-PH--729-C-1：(300MHz，d6-DMSO，ppm)：δ9.78(s，1H)、7.96(s，1H)、7.52-7.37(m，6H)、7.06(d，J＝9.3Hz，1H)、5.15(s，2H)、3.30-3.27(m，1H)、3.13-3.01(m，3H)、2.71-2.68(m，1H)、2.17(s，6H)、1.83-1.71(m，1H)。
合成N-[3-氨基-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯：将N-[4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-硝基苯基]氨基甲酸苄酯(5g，13.01mmol，1当量)、锌(5.1g，78.04mmol，6.00当量)、NH4Cl(8.3g，156.07mmol，12.00当量)、MeOH(100mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌1小时。将得到的混合物浓缩。得到3.9g(84.60％)的N-[3-氨基-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯为灰色固体。LC-MS--729-C-2：(ES，m/z)：365[M+H]+。
合成N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯：将N-[3-氨基-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸苄酯(3g，16.93mmol，1当量)、二碳酸二叔丁酯(2.2mg，20mmol)、DIEA(2.73g，40mmol)、THF(50mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在75℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(50∶50)的硅胶柱上。得到2.6g(68％)的N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯为黄色固体。LC-MS--729-C-3：(ES，m/z)：465[M+H]+。1H-NMR-PH--729-C-3：(300MHz，DMSO，ppm)：δ9.51(s，1H)、8.06(s，1H)、7.54(s，1H)、7.41-7.33(m，5H)、7.14-7.11(m，1H)、6.89(d，J＝9.0Hz，1H)、5.13(s，2H)、3.21-3.12(m，1H)、3.09-2.99(m，3H)、2.79-2.69(m，1H)、2.17(s，6H)、2.09-2.00(m，1H)，1.78-1.65(m，1H)，1.44(s，9H)。
合成N-[5-氨基-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯：将N-(3-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基)氨基甲酸苄酯(2g，0.44mmol，1当量)、Pd/C(200mg)、MeOH(50mL)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2小时。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将得到的混合物浓缩。得到1.15g的N-[5-氨基-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为棕色油。LC-MS--729-C-4：(ES，m/z)：321[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯：将N-[5-氨基-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(1g，1当量)、3，5-二溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮(1g，1.20当量)、DIEA(1g，2.49当量)、i-PrOH(10mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在80℃搅拌过夜.将反应混合物冷却至室温。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有EA/PE(50∶50)的硅胶柱上。得到1g(60.62％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯为黄色固体。LC-MS--729-C-5：(ES，m/z)：507[M+H]+。
合成3-([3-氨基-4-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基甲酸叔丁酯(1g，0.39mmol，1当量)、HCl/二恶烷(10mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物浓缩。得到750mg(93.43％)的3-([3-氨基-4-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二氢吡嗪-2-酮为浅黄色固体。LC-MS--729-C-6：(ES，m/z)：407[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]丙-2-烯酰胺：将3-([3-氨基-4-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基-1，2-二二氢吡嗪-2-酮(600mg，1.96mmol，1当量)、丙-2-烯酸(127.2mg，2.36mmol，1.2当量)、HATU(672mg，2.36mmol，1.2当量)、NMM(596mg，7.86mmol，4.0当量)、MeCN(15mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到307mg(45.25％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]丙-2-烯酰胺为浅黄色固体。LC-MS--729-C-1：(ES，m/z)：461[M+H]+。
合成N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)苯基)丙烯酰胺：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基]-2-[(3S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基]苯基]丙-2-烯酰胺(50mg，0.11mmol，1当量)、(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)硼酸(50.0mg，0.14mmol，1.3当量)、Pd(dppf)Cl2(9.3mg，0.01mmol，0.1当量)、K2CO3(37.4mg，0.27mmol，2.5当量)、二恶烷(5mL)、H2O(0.5mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL圆底烧瓶中.将所得溶液在90℃搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温。滤出固体。浓缩滤液。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到14mg(18.67％)的N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)苯基)丙烯酰胺为白色固体。LC-MS--729-C-0：(ES，m/z)：692[M+H]+。1H-NMR-PH--729-C-0：(300MHz，DMSO，ppm)：δ9.38(d，J＝5.1Hz，1H)、9.17(s，1H)、8.44(d，J＝5.1Hz，1H)、8.34-8.32(m，1H)、7.76-7.63(m，3H)、6.86(d，J＝8.7Hz，1H)、6.62-6.48(m，2H)、6.27(d，J＝16.2Hz，1H)、5.73(d，J＝11.4Hz，1H)、5.05-4.95(m，1H)、4.70-4.38(m，2H)、4.29-4.20(m，3H)、3.89-3.84(m，1H)、3.55(s，3H)、3.14-3.07(m，3H)、2.74-2.49(m，6H)、2.15(s，6H)、2.05(m，1H)、1.75-1.69(m，1H)、1.23(s，6H)。
实施例14：制备N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(哌啶-3-基)苯基)丙烯酰胺
合成3-(4-氨基-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯：将3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2--二氧杂硼杂环戊-2-基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(8.55g，27.647mmol，1.20当量)、4-溴-3-硝基苯胺(5.00g，23.039mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(1.88g，2.304mmol，0.10当量)、K2CO3(6.37g，46.091mmol，2.00当量)、二恶烷(80.00mL)、H2O(20.00mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的500-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃搅拌2小时。滤出固体。浓缩合并的有机层。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(60：40)的硅胶柱上。得到7g(95.14％)的3-(4-氨基-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶e-1-羧酸叔丁酯为白色固体。LC-MS--751-1：(ES，m/z)：320[M+H]+。
合成3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶e-1-羧酸叔丁酯：将3-(4-氨基-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(7.00g，21.919mmol，1.00当量)、Na2CO3(4.65g，43.838mmol，2.00当量)、DCM(50.00mL)放入250-mL三颈圆底烧瓶中。随后在0℃搅拌下添加H2O(10.00mL)。在0℃下向其中加入氯甲酸苄酯(4.49g，26.303mmol，1.20当量)。将所得溶液在室温搅拌过夜。然后通过添加水将反应淬灭。混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。得到9g的3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶e-1-羧酸叔丁酯为浅黄色油。LC-MS--751-2：(ES，m/z)：454[M+H]+。
合成3-(2-氨基-4-[[(苄氧基)羰基]氨基]苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶e-1-羧酸叔丁酯：将3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-硝基苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(5.00g，11.025mmol，1.00当量)、Fe(3.08g，55.127mmol，5.00当量)、CH3COOH(20.00mL)、H2O(2.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在60℃搅拌1小时。将得到的混合物浓缩。将所得溶液用乙酸乙酯萃取。用NaHCO3将溶液的pH值调节至7。所得混合物用卤水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(60：40)的硅胶柱上。得到4g(85.66％)的3-(2-氨基-4-[[(苄氧基)羰基]氨基]苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯为黄色固体。LC-MS--751-3：(ES，m/z)：424[M+H]+。1HNMR--751-3：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.49(s，1H)、7.49-7.32(m，5H)、6.88(d，J＝2.0Hz，1H)、6.76(d，J＝8.2Hz，1H)、6.61(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)、5.78-5.70(s，1H)、5.13(s，2H)、4.84(s，2H)、3.89(d，J＝2.7Hz，2H)、3.48(t，J＝5.6Hz，2H)、2.25-2.13(s，2H)、1.42(s，9H)。
合成3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯：将3-(2-氨基-4-[[(苄氧基)羰基]氨基]苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(4.00g，9.445mmol，1.00当量)、二碳酸二叔丁酯(4.12g，18.890mmol，2.00当量)、K2CO3(2.61g，18.885mmol，2.00当量)、二恶烷(80.00mL)、H2O(40.00mL)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。然后通过添加水将反应淬灭。所得溶液用乙酸乙酯萃取。所得混合物用卤水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(40∶60)的硅胶柱上。得到5g(101.10％)的3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基)-5,6-二氢-2H-吡啶e-1-羧酸叔丁酯为白色固体。LC-MS--751-4：(ES，m/z)：524[M+H]+。1H NMR--751-4：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.79(s，1H)、8.31(s，1H)、7.51(d，J＝2.1Hz，1H)、7.50-7.31(m，5H)、7.25(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)、7.07(d，J＝8.4Hz，1H)、5.69(s，1H)、5.16(s，2H)、3.97(s，2H)、3.45(t，J＝5.7Hz，2H)、2.18(s，2H)、1.42(s，18H)。
合成3-[4-氨基-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-(4-[[(苄氧基)羰基]氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基)-5，6-二氢-2H-吡啶-羧酸叔丁酯(5.00g，9.549mmol，1.00当量)、Pd/C(500.00mg)、MeOH(100mL)、EA(50.00mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。通过过滤收集固体。浓缩合并的有机层。得到3.4g(90.95％)的3-[4-氨基-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯为无色油。LC-MS--751-5：(ES，m/z)：392[M+H]+。
合成3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-[4-氨基-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.40g，8.684mmol，1.00当量)、3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2-酮(2.56g，9.553mmol，1.1当量)、i-PrOH(50.00mL)、DIEA(2.24g，17.369mmol，2.0当量)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在90℃搅拌过夜。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(40∶60)的硅胶柱上。得到4g(79.62％)的3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯为浅黄色固体。
LC-MS--751-6：(ES，m/z)：578[M+H]+。
合成3-[[3-氨基-4-(哌啶-3-基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮：将3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.00g)放入250-mL圆底烧瓶中。向上述添加HCl(g)/MeOH(80.00mL)。将所得溶液在室温搅拌2小时。将得到的混合物浓缩。得到2.9g的3-[[3-氨基-4-(哌啶-3-基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮为白色固体。LC-MS--751-7：(ES，m/z)：378[M+H]+。
合成3-[2-氨基-4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-[[3-氨基-4-(哌啶-3-基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮(2.90g，7.666mmol，1.00当量)、Boc2O(1.84g，8.431mmol，1.10当量)、TEA(1.55g，15.333mmol，2.00当量)、DCM(50ml)放入250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物浓缩。粗产物通过从乙醚中重结晶来纯化。得到2.5g(68.17％)的3-[2-氨基-4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯为白色固体。LC-MS--751-8：(ES，m/z)：478[M+H]+。1HNMR--751-8：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ8.99(s，1H)、7.27(s，1H)、7.11-7.01(m，2H)、6.92(d，J＝9.0Hz，1H)、4.90(s，2H)、3.98(s，2H)、3.43(s，3H)、2.84-2.54(m，3H)、1.90-1.82(m，1H)、1.73-1.64(m，1H)、1.60-1.46(m，2H)、1.42(s，9H)。
合成3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-[2-氨基-4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(500.00mg，1.045mmol，1.00当量)、丙烯酰氯(141.90mg，1.568mmol，1.5当量)、NMM(211.43mg，2.090mmol，2.00当量)、DCM(10mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2小时。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(70：30)的硅胶柱上。得到300mg(53.91％)的3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯为黄色固体。LC-MS--751-9：(ES，m/z)：532[M+H]+。1HNMR--751-9：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.67(s，1H)、9.47(s，1H)、7.86-7.75(m，2H)、7.36-7.25(m，2H)、6.58-6.43(m，1H)、6.24(dd，J＝17.0，2.1Hz，1H)、5.75(d，J＝7.6Hz，1H)、4.10-3.81(m，2H)、3.44(s，3H)、2.83-2.62(m，3H)、1.87-1.76(m，1H)、1.70(d，J＝13.4Hz，1H)、1.65-1.50(m，1H)、1.37(s，9H)。
合成3-(4-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-[4-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(300.00mg，0.563mmol，1.00当量)、2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基硼酸(248.46mg，0.732mmol，1.30当量)、Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(46.01mg，0.056mmol，0.10当量)、K2CO3(155.51mg，1.127mmol，2.00当量)、DME(10.00mL)、H2O(2.00mL)放入用氮气惰性气氛维持的40-mL微波管中。将所得溶液在90℃搅拌1小时。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(40∶60)的硅胶柱上。得到240mg(57.03％)的3-(4-[[6-(2-[4,4--二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯为黄色固体。LC-MS--751-10：(ES，m/z)：747[M+H]+。
合成N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(哌啶-3--基)苯基)丙-2-烯酰胺-：将3-(4-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基.3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(丙-2-烯酰胺基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(150.00mg，0.201mmol，1.00当量)、DCM(8.00mL)、TFA(1.5.mL)放入25-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2.5小时。将得到的混合物浓缩。然后通过添加NaHCO3淬灭反应。经所得溶液用二氯甲烷萃取。所得混合物用卤水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到80mg(61.59％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(哌啶-3-基)苯基)丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--751-0：(ES，m/z)：647[M+H]+。1H NMR--751-0：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.61(s，1H)、9.29(s，1H)、8.32(d，J＝5.0Hz，1H)、8.16(d，J＝7.2Hz，1H)、7.77(d，J＝8.5Hz，1H)、7.49(d，J＝4.8Hz，1H)、7.43(s，1H)、7.21(d，J＝8.6Hz，1H)、6.60-6.47(m，2H)、6.23(d，J＝16.6Hz，1H)、5.70(d，J＝10.2Hz，1H)、4.30-4.11(m，3H)、3.84(d，J＝12.5Hz，1H)、3.57(s，3H)、2.99-2.73(m，3H)、2.58(d，J＝5.5Hz，2H)、2.43(s，3H)、2.29(s，3H)、1.83-1.69(m，1H)、1.69-1.58(m，1H)、1.58-1.37(m，2H)、1.23(s，7H)。
实施例15：制备N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基)丙烯酰胺
合成2-氨基-4-硝基苯甲酸甲酯。将2-氨基-4-硝基苯甲酸(2.00g)、SOCl2(4.00mL)、MeOH(20.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在55℃搅拌3小时。将反应混合物冷却。粗产物通过从乙醚中重结晶来纯化。通过过滤收集固体。得到1g的2-氨基-4-硝基苯甲酸甲酯为黄色固体。LC-MS--752-1：(ES，m/z)：197[M+H]+。1H NMR--752-1：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.02(d，J＝8.8Hz，1H)、7.53(d，J＝2.2Hz，1H)、7.42(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)、6.05(brs，2H)、3.94(s，3H)。
合成2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸甲酯：将2-氨基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.00g，5.098mmol，1.00当量)、Boc2O(3.34g，15.293mmol，3.00当量)、TEA(1.03g，10.196mmol，2.00当量)、DMAP(0.06g，0.510mmol，0.10当量)、THF(20.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌4小时。然后通过添加水将反应淬灭。将所得溶液用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥并浓缩。得到1.8g(89.08％)的2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸甲酯为黄色固体。LC-MS--752-2：(ES，m/z)：397[M+H]+。1HNMR--752-2：(300MHz，CDCl3，ppm)：δ8.26(dd，J＝8.6，2.2Hz，1H)、8.17(d，J＝8.6Hz，1H)、8.10(d，J＝2.2Hz，1H)、3.94(s，3H)、1.42(s，18H)。
合成2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸：将2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸甲酯(1.80g，1当量)、LiOH(300.00mg)、H2O(4.00mL)、THF(20.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌过夜。然后通过添加1N盐酸水溶液到反应溶液中将反应淬灭，并用乙酸乙酯萃取。有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩。得到1g(57.59％)的2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸为黄色固体。
LC-MS--752-3：(ES，m/z)：383[M+H]+。
合成N-(叔丁氧基羰基)-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-5-硝基苯基]氨基甲酸叔丁酯-：将2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-硝基苯甲酸(1.00g，2.615mmol，1.00当量)、哌嗪、1-甲基-(0.31g，3.138mmol，1.20当量)、HATU(1.49g，3.923mmol，1.50当量)、NMM(0.53g，5.231mmol，2.00当量)、DCM(15.00mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌4小时。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(100∶1)的硅胶柱上。得到500mg(41.16％)的N-(叔丁氧基羰基)-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-5-硝基苯基]氨基甲酸叔丁酯为浅黄色固体。LC-MS--752-4：(ES，m/z)：465[M+H]+。
合成N-[5-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯：将N-(叔丁氧基羰基)-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)-5-硝基苯基]氨基甲酸叔丁酯(500.00mg)、MeOH(20.00ml)、Pd/C(500.00mg)放入用H2惰性气氛吹扫并维持的100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌6小时。通过过滤收集固体。浓缩合并的有机层。得到400mg的N-[5-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯为无色油。LC-MS--752-5：(ES，m/z)：435[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯：将N-[5-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(400.00mg，0.921mmol，1.00当量)、3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2-酮(369.92mg，1.381mmol，1.5当量)、Pd2(dba)3(168.59mg，0.184mmol，0.2当量)、XantPhos(213.05mg，0.368mmol，0.4当量)、Cs2CO3(599.85mg，1.841mmol，2.0当量)、甲苯(25.00mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃搅拌4小时。将得到的混合物浓缩。将残余物施加到具有乙酸乙酯/石油醚(70：30)的硅胶柱上。得到200mg(34.96％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯为浅黄色固体。LC-MS--752-6：(ES，m/z)：621[M+H]+。
合成3-[[3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]-N-(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(200.00mg)、在1,4-二恶烷(10.00mL)中的HCl(气体)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2小时。将得到的混合物浓缩。得到120mg的3-[[3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮为白色固体。LC-MS--752-7：(ES，m/z)：421[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]丙-2-烯酰胺：将3-[[3-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]氨基]-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮(120.00mg，0.285mmol，1.00当量)、丙烯酰氯(28.36mg，0.313mmol，1.10当量)、NMM(57.62mg，0.570mmol，2.00当量)、DCM(10.00mL)放入50-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物浓缩。粗产物通过快速Prep-HPLC 0.1％NH3.H2O：MeCN＝30％在9分钟内增加至0.1％NH3.H2O：MeCN＝58％来纯化。得到80mg(59.09％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--752-8：(ES，m/z)：475[M+H]+。
合成-752-0：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基]丙-2-烯酰胺(80.00mg，0.168mmol，1.00当量)、2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基硼酸(73.00mg，0.219mmol，1.30当量)、Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(13.74mg，0.017mmol，0.10当量)、K2CO3(46.52mg，0.337mmol，2.00当量)、DME(8.00mL)、H2O(2.00mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中。将所得溶液在90℃搅拌1小时。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到20mg(17.23％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基)丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--752-0：(ES，m/z)：690[M+H]+。1HNMR--752-0：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.76(s，1H)、9.52(s，1H)、8.48(s，1H)、8.34(d，J＝5.0Hz，1H)、7.81(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)、7.58-7.47(m，2H)、7.20(d，J＝8.5Hz，1H)、6.59-6.44(m，2H)、6.24(dd，J＝17.1，1.8Hz，1H)、5.74(dd，J＝12.2，2.4Hz，1H)、4.29-4.10(m，3H)、3.86(d，J＝11.9Hz，1H)、3.59(s，3H)、2.68-2.54(m，2H)、2.43(s，2H)、2.29(s，7H)、2.16(s，3H)、1.23(s，6H)。
实施例16：制备N-(5-((6-(2-(7，7-二甲基-1-氧代-1，3，4，6，7，8-六氢-2H-环戊[4，5]吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3，4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-1-吗啉代丙-2-基)苯基)丙烯酰胺
合成5-溴-1-甲基-3-([4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]-3-硝基苯基]氨基)吡嗪-2-酮：将4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]-3-硝基苯胺(400.00mg，1.432mmol，1.00当量)、3，5-二溴-1-甲基吡嗪-2-酮(498.72mg，1.862mmol，1.30当量)、Pd2(dba)3(131.13mg，0.143mmol，0.10当量)、XantPhos(165.71mg，0.286mmol，0.20当量)、Cs2CO3(933.11mg，2.864mmol，2.00当量)、二恶烷(20.00mL)放入用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在100℃搅拌4小时。通过过滤收集固体。浓缩合并的有机层。粗产物通过从MeCN中重结晶来纯化。得到350mg(52.41％)的5-溴-1-甲基-3-([4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]-3-硝基苯基]氨基)吡嗪-2-酮为棕色固体。LC-MS--753-1：(ES，m/z)：466[M+H]+。1H NMR--753-1：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ9.90(s，1H)、8.19(d，J＝2.4Hz，1H)、8.08(dd，J＝8.9，2.5Hz，1H)、7.62(d，J＝9.0Hz，1H)、7.43(s，1H)、3.53-3.39(m，7H)、2.53-2.47(m，2H)、2.23(t，J＝4.6Hz，4H)、1.29(s，6H)。
合成3-([3-氨基-4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮：将5-溴-1-甲基-3-([4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]-3-硝基苯基]氨基)吡嗪-2-酮(350.00mg，0.751mmol，1.00当量)、CH3COOH(1352.13mg，22.516mmol，30.00当量)、Zn(736.37mg，11.258mmol，15.00当量)、EtOH(30.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌2小时。通过过滤收集固体。浓缩合并的有机层。将所得溶液用乙酸乙酯萃取。将所得混合物用卤水洗涤。混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。得到300mg(91.60％)的3-([3-氨基-4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮为棕色油。LC-MS--753-2：(ES，m/z)：436[M+H]+。
合成N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]丙-2-烯酰胺：将3-([3-氨基-4-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]氨基)-5-溴-1-甲基吡嗪-2-酮(300.00mg，0.688mmol，1.00当量)、丙烯酰氯(74.67mg，0.825mmol，1.20当量)、NMM(139.08mg，1.375mmol，2.00当量)、DCM(10.00mL)放入100-mL圆底烧瓶中。将所得溶液在室温搅拌30分钟。将得到的混合物浓缩。粗产物通过快速Prep-HPLC 0.1％NH4HCO3：MeCN＝30％在9分钟内增加至0.1％NH4HCO3：MeCN＝70％来纯化。得到260mg(77.11％)的N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]丙-2-烯酰胺为白色固体。LC-MS--753-3：(ES，m/z)：490[M+H]+。1H NMR--753-3：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ10.75(s，1H)、9.40(s，1H)、7.95(s，1H)、7.77(d，J＝8.5Hz，1H)、7.39-7.25(m，2H)、6.61-6.44(m，1H)、6.27(dd，J＝16.9，2.1Hz，1H)、5.81(d，J＝11.0Hz，1H)、3.54(s，4H)、3.44(s，3H)、2.36(s，4H)、1.35(s，6H)。
合成N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基)丙-2-烯酰胺：将N-[5-[(6-溴-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基)氨基]-2-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基]丙-2-烯酰胺(200.00mg，0.408mmol，1.00当量)、2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基硼酸(193.67mg，0.571mmol，1.40当量)、Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(33.30mg，0.041mmol，0.10当量)、K2CO3(112.73mg，0.816mmol，2.00当量)、DME(10.00mL)、H2O(2.00mL)放入用氮气惰性气氛维持的40-mL微波管中。将所得溶液在95℃搅拌2小时。粗产物通过Prep-HPLC纯化。得到150mg(52.18％)的N-(5-[[6-(2-[4，4-二甲基-9-氧代-1，10-二氮杂三环[6.4.0.0^[2，6]]十二-2(6)，7-二烯-10-基]-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代吡嗪-2-基]氨基]-2-[2-甲基-1-(吗啉-4-基)丙-2-基]苯基)丙-2-烯酰胺为浅棕色固体。LC-MS--753-0：(ES，m/z)：705[M+H]+。1H NMR--753-0：(300MHz，DMSO-d6，ppm)：δ10.78(s，1H)、9.26(s，1H)、8.38-8.29(m，2H)、7.69(d，J＝8.6Hz，1H)、7.54(d，J＝5.2Hz，1H)、7.43(s，1H)、7.28(d，J＝8.8Hz，1H)、6.58-6.45(m，2H)、6.27(d，J＝16.8Hz，1H)、5.76(d，J＝10.2Hz，1H)、4.31-4.10(m，3H)、3.84(d，J＝12.4Hz，1H)、3.57(s，3H)、3.57-3.47(m，4H)、2.58(d，J＝5.8Hz，2H)、2.43(s，2H)、2.34(d，J＝4.7Hz，4H)、2.29(s，3H)、1.34(d，J＝4.2Hz，6H)、1.23(s，6H)。
实施例A：以下化合物是通过与通用方案和以上实施例中公开的方法基本相同、相似或类似的方法制备的。
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生物实施例1：结合常数(Ka)测定
通过KINOMEscanTM测定法测定化合物的Kd，该测定法是业内最全面的用于针对大量人类激酶筛选化合物的高通量系统。KINOMEscanTM测定法是基于竞争结合测定法，该测定法定量测量化合物与固定化的，活性位点定向的配体竞争的能力。通过组合三个组分进行测定法：加DNA标签的激酶；固定化配体；和测试化合物。经由DNA标签的定量PCR测量测试化合物与固定化的配体竞争的能力。在衍生自BL21菌株的大肠杆菌宿主中制备了加激酶标签的T7噬菌体菌株。使大肠杆菌生长至对数期并用T7噬菌体感染，并在32℃摇动温育直至裂解。将裂解物离心并过滤以除去细胞碎片。其余的激酶在HEK-293细胞中产生，随后用DNA加标签以进行qPCR检测。在室温下，用生物素化的小分子配体处理链霉抗生物素蛋白包被的磁珠30分钟，以生成用于激酶测定法的亲和树脂。用过量的生物素封闭配体珠，并用封闭缓冲液(SeaBlock(Pierce)，1％BSA，0.05％Tween 20、1mM DTT)洗涤，以去除未结合的配体并减少非特异性结合。通过在1x结合缓冲液(20％SeaBlock，0.17xPBS，0.05％Tween 20、6mMDTT)中组合激酶、有配体的亲和珠和测试化合物来组装结合反应。所有反应均在聚苯乙烯96孔板中以0.135ml的最终体积进行。将测定板在室温下摇动温育1小时，并用洗涤缓冲液(1x PBS，0.05％Tween 20)洗涤亲和珠。然后将珠重悬于洗脱缓冲液(1x PBS，0.05％Tween20、0.5μM非生物素化的亲和配体)中，并在室温下摇动温育30分钟。通过qPCR测量洗脱液中的激酶浓度。在以100x最终测试浓度在100％DMSO中制备每种测试化合物的11点3倍系列稀释液，然后在测定法中稀释至1x(最终DMSO浓度＝1％)。使用化合物最高浓度＝30,000nM测定大多数Kd。如果测定的初始Kd＜0.5nM(测试的最低浓度)，则以从较低的最高浓度开始的系列稀释液重复进行测量。Kd值报告为40,000nM，表明Kd被确定为>30,000nM。结合常数(Kd)是使用Hill方程通过标准剂量反应曲线计算的：反应＝背景+(信号-背景)/[1+(Kd Hi1l斜率/剂量Hill斜率)]。Hill斜率设置为-1。使用非线性最小平方拟合(1east square fit)和Levenberg-Marquardt算法拟合曲线。用一定范围剂量的测试化合物进行的此类测定法允许确定近似的Kd值的测定。尽管本发明化合物的Kd随预期的结构变化而变化，但是这些试剂通常表现出的活性在Kd＝0.1-1000nM的范围内。
生物学实施例2：体外透析测定法(不可逆测定法)
在存在0.1nM酶和40mM ATP的情况下测定测试化合物的IC50。将0.003mM化合物(39xIC50@40mM ATP)与2nM BTK在不含ATP的测定缓冲液中预温育2小时。将化合物-酶复合物针对补充有40mM ATP的相同缓冲液进行透析24小时。累积透析因子>160,000x。透析后，在存在40mM ATP和1mM底物肽的情况下测量BTK活性，并与未透析样品中的BTK活性进行比较。测定缓冲液：100mM HEPES，pH7.5；0.1％BSA，0.01％Triton-X 100；5mM MgCl2；1mMDTT。在这项研究中，伊布替尼(FDA批准的不可逆BTK抑制剂)用作阳性对照，而Saurosporine(可逆BTK抑制剂)用作阴性对照。下表显示了24小时透析后的回收。
在该测定法中，可逆的BTK抑制剂GDC-0853用作参考化合物。在WO 2013067274中公开的GDC-0853是一种口服生物可利用的、选择性的和可逆的Bruton酪氨酸激酶(BTK)抑制剂，其IC50范围为2-9nM，用于嗜碱性粒细胞活化、B细胞受体活化和全血裂解物中的组成型p-BTK活性。1，2在大鼠中，治疗超过7天导致胰腺中毒，但即使剂量更高，它也不会在小鼠或狗中发生。含有GDC-0853的配制剂在I期临床试验中具有良好的耐受性，并且处于类风湿关节炎、红斑狼疮和其他自身免疫性疾病的另外的临床试验中。
WT BTK透析测定法的数据清楚地表明，伊布替尼、实施例2、实施例3、实施例11、实施例12是WT BTK的不可逆抑制剂，而GDC-0853是可逆WT BTK抑制剂。
透析24小时后回收 结论(WT BTK)
伊布替尼 ～1％ 不可逆/共价抑制
实施例2 ～1％ 不可逆/共价抑制
实施例3 ～1％ 不可逆/共价抑制
实施例11 ～1％ 不可逆/共价抑制
实施例12 ～1％ 不可逆/共价抑制
GDC-0853 ～100％ 可逆
对于C481S BTK酶，伊布替尼和我们的化合物(如实施例2)与C481S BTK可逆结合，因为半胱氨酸残基不再可用于共价结合。
生物实施例3：针对WT和C481S BTK的生化酶促测定法(IC50)
基于卡尺(Caliper)的激酶测定法(Caliper LifeSciences，Hopkinton，MA)用于测量本公开化合物的对WT和C481S Btk激酶活性的抑制。伊布替尼和ACP＝196用作对照化合物。将测试化合物的系列稀释液与人重组WT BTK或C481S Btk(0.5nM)、ATP(16μM)和磷酸受体肽底物FAM-GEEPLYWSFPAKKK-NH2(1μM)在室温下温育3小时。然后用EDTA，终浓度20mM终止反应，并在Caliper Desktop Profiler(Caliper LabChip 3000)上定量磷酸化的反应产物。计算每种化合物稀释液的抑制百分比，并计算产生50％抑制的浓度。
下表显示了WT BTK、C481S BTK的IC 50，以及对于伊布替尼、ACP-196、本公开的某些化合物，C481S与WT BTK的IC 50比率。如预期的那样，伊布替尼和ACP-196两者都大大丧失了与C481S BTK酶的结合亲和力：伊布替尼在C481S BTK中比WT BTK弱X990倍，而ACP-196在C481S BTK中比WT BTK弱X483倍。相反，发明人出乎意料地发现，与WT BTK相比，我们的化合物仍有力地抑制C481S BTK。实施例2在C481S BTK测定法中比伊布替尼更有力X64，且比ACT-196更有力X477。这些数据表明我们的化合物(如实施例2)通过与常规共价BTK抑制剂(如伊布替尼和ACP-196)不同的机制可逆地与BTK结合，因此对于那些由于C481结合位点的突变而对伊布替尼和ACP-196具有抗性的患者可能是重要的选项。
生物实施例4：基于钙通量荧光的测定法
根据制造商的说明，在FlexStation II384荧光测量成像读板器(MolecularDevices)中进行基于钙通量荧光的测定法。简而言之，洗涤在补充有10％FBS(Invitrogen)的RPM1培养基中活跃生长的Ramos细胞(ATCC)，并以每100μl每孔约5x105个细胞重新分配于96孔板中的低血清培养基中。将要测定的化合物溶于DMSO中，然后在低血清培养基中稀释至范围为0至10μM的终浓度(以0.3的稀释系数)。然后将稀释的化合物添加到每个孔中(最终DMSO浓度为0.01％)，并在5％CO2培养箱中于37度温育1小时。之后，将100μl的钙敏感染料(来自Calcium 3测定试剂盒，Molecular Devices)添加到每个孔中，并再温育1小时。用山羊抗人IgM抗体(80ug/ml；Jackson ImmunoResearch)刺激经化合物处理的细胞，并使用λEx＝485nm和λEm＝538nm在FlexStation II384中读取200秒。使用内置的SoftMax程序(Molecular devices)记录并分析相对荧光单位(RFU)和IC50。
生物学实施例5：抑制B细胞活化-Ramos细胞中的B细胞FLIPR测定法
通过确定测试化合物对经抗IgM刺激的B细胞应答的作用，证明了本发明化合物对B细胞活化的抑制。B细胞FLIPR测定法是基于细胞的功能性方法，其确定抗IgM抗体刺激引起的细胞内钙增加的潜在抑制剂的作用。在生长培养基中培养Ramos细胞(人伯基特氏淋巴瘤细胞系，ATCC-No.CRL-1596)(如下所述)。测定前一天，将Ramos细胞重悬于新鲜的生长培养基(与上述相同)中，并在组织培养瓶中设置为0.5x106/mL的浓度。在测定的当天，在组织培养瓶中补充有1μM FLUO-3AM(TefLabs Cat-No.0116，在无水DMSO和10％丙酮酸中制备)的生长培养基中对细胞计数并设置为1x106/mL的浓度，并且在37℃(5％CO2)下温育1小时。为了去除细胞外染料，通过离心(5分钟，1000rpm)收集细胞，以1x106个细胞/mL重悬于FLIPR缓冲液(如下所述)中，然后以每孔1x105个细胞分配到96孔聚D-赖氨酸包被的黑色/透明板(BD Cat-No.356692)中。以范围为100μM至0.03μM的各种浓度(7个浓度，详情如下)加入测试化合物，并允许其与细胞在室温下温育30分钟。通过添加10μg/mL抗IgM(SouthernBiotech，Cat-No.2020-01)刺激Ramos细胞Ca2+信号传导，并在FLIPR(Molecular Devices，使用带有480nM激发的氩激光的CCD摄像机捕获96孔板的影像)上进行测量。
·生长培养基：RPMI 1640培养基，其具有L-谷氨酰胺(Invitrogen，Cat-No.61870-010)、10％胎牛血清(FBS，Summit Biotechnology Cat-No.FP-100-05)；1mM丙酮酸钠(Invitrogen Cat.No.11360-070)。
·FLIPR缓冲液：HBSS(Invitrogen，Cat-No.141175-079)、2mM CaCl2(Sigma Cat-No.C-4901)、HEPES(Invitrogen，Cat-No.15630-080)、2.5mM丙磺舒(Probenecid)(Sigma，Cat-No.P-8761)、0.1％BSA(Sigma，Cat-No.A-7906)、llmM葡萄糖(Sigma，Cat-No.G-7528)；
·测定法和分析：使用最大-最小统计量报告了细胞内钙的增加(使用MolecularDevices FLIPR对照和统计量导出软件从添加刺激性抗体引起的峰中减去静息基线)。使用非线性曲线拟合确定IC50(GraphPad Prism)。
生物学实施例6：体外抗增殖测定法
通过PerkinElmerATPliteTM发光测定系统测定细胞抗增殖。简而言之，将各种测试癌细胞系以每孔约1x104个细胞的密度在Costar 96孔板中分配，并在补充有5％FBS的培养基中与不同浓度的化合物温育约72小时。然后通过加入5mL的底物缓冲液来重建1个冻干的底物溶液小瓶，并轻轻搅拌直至溶液均匀。将约50μL的哺乳动物细胞裂解液添加到微孔板每孔100μL的细胞悬液中，并将该板在定轨摇床中以约700rpm摇动约5分钟。该规程用于裂解细胞并稳定化ATP。接下来，将50μL底物溶液添加到孔中，并将微孔板在定轨摇床中以约700rpm摇动5分钟。最后，通过PerkinElmer微孔板闪烁计数器测量发光。用一定剂量范围的测试化合物进行的此类测定允许测定本发明化合物的细胞抗增殖IC50。
生物学实施例7：体内异种移植物研究
通常，在6-8周龄时从供应商处获得无胸腺裸鼠(CD-1nu/nu)或SCID小鼠，并使其适应至少7天的时段。然后将癌细胞植入裸鼠中。根据具体的肿瘤类型，通常在植入后约两周就可检测到肿瘤。当肿瘤大小达到约100-200mm3时，将具有可察觉的肿瘤大小和形状的动物随机分为各8只小鼠的组，包括1个媒介物对照组和治疗组。剂量根据每次研究的目的和长度(通常进行约3-4周)而不同。每周通常测量三次肿瘤大小和体重。除了确定肿瘤大小变化之外，最后一次肿瘤测量还用于生成肿瘤大小变化率(T/C值)，由美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)开发的用于异种移植肿瘤评估的标准度量。在大多数情况下，使用以下公式计算％T/C值：％T/C＝100×ΔT/ΔC，若ΔT>0的话。然而，当发生肿瘤消退(ΔT＜0)时，使用以下公式：％T/T0＝100×ΔT/T0。＜42％的值被认为是显著的。
生物学实施例8：小鼠胶原诱导的关节炎(mCIA)
在第0天，用完全弗氏佐剂(CFA)中的II型胶原(i.d.)乳剂在尾巴的根部或背部的几个部位对小鼠进行注射。胶原免疫后，动物将在21至35天左右发展关节炎。在第21天，通过在不完全弗氏佐剂(IFA；i.d.)中系统施用胶原来同步(加强)关节炎的发作。第20天后每天对动物检查作为加强的信号的任何轻度关节炎发作(1或2的得分；参见下面的得分说明)。加强后，对小鼠进行评分，并且对于规定的时间(通常2-3周)和给药频率每日(QD)或每日两次(BID)，给药候选治疗剂。使用评分系统对爪和肢关节发展的炎症进行定量，该评分系统涉及按照下述标准评估4个爪：
评分：
1＝爪或一趾肿胀和/或发红。
2＝两个或更多个关节肿胀。
3＝爪的严重肿胀，超过两个关节受累。
4＝整个爪和趾的严重关节炎。
在第0天进行评估，以进行基线测量，并在第一个体征或每周肿胀多达3次时再次开始评估，直到实验结束。通过将各个爪的四个得分相加，得出每只动物的最高得分16，获得每只小鼠的关节炎指数。
生物学实施例9：大鼠胶原诱发的关节炎(rCIA)
在第0天，用不完全弗氏佐剂(IFA)中的牛II型胶原的乳剂在背部的几个部位对大鼠进行皮内(i.d.)注射。在第7天左右在尾巴的根部或背部的交替部位给予胶原乳剂的加强注射(i.d.)。一般在初次注射胶原后12-14天观察到关节炎。从第14天开始，可以如下所述(关节炎的评估)评估动物的关节炎发展。从二次攻击时开始，且对于规定的时间(通常为2至3周)和给药频率每日(QD)或每日两次(BID)，以预防性方式向动物给药候选治疗剂。使用评分系统对爪和四肢关节发展的炎症进行定量，该评分系统涉及按照上述标准评估4个爪。在第0天进行评估，以进行基线测量，并在第一个体征或每周肿胀多达3次时再次开始评估，直到实验结束。通过将各个爪的四个得分相加，得出每只动物的最高得分16，获得每只小鼠的关节炎指数。
生物学实施例10：大鼠体内哮喘模型
每周一次持续三周(第0、7和14天)用0.2ml明矾中的100μg的OA(卵清蛋白)i.p.对雄性Bro、wn-Norway大鼠进行致敏。在第21天(最后一次致敏后一周)，在OA气雾剂攻击(1％OA达45分钟)前用媒介物或化合物配制剂对大鼠q.d.皮下给药0.5小时并在攻击后4或24小时终止。处死时，从所有动物收集血清和血浆分别用于血清学和PK。插入气管套管，并用PBS灌洗肺3次。分析BAL液的总白细胞数和差异白细胞计数。由Coulter计数器确定等份细胞(20-100μl)中的总白细胞数。对于差异白细胞计数，将50-200μL的样品在Cytospin中离心，并将载玻片用Diff-Quik染色。使用标准形态学标准在光学显微术下计数单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞的比例，并以百分比表示。与对照水平相比，代表性的Btk抑制剂在OA致敏和攻击的大鼠的BAL中显示总白细胞计数降低。

Claims (14)

1.式(III)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中
X是C(Ra)或N；
R1各自独立是H、D、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、3至6元环烷基、5至8元杂环烷基、卤素、硝基、氰基、ORa、SRa、C1-C10烷基-Ra，其中所述3至6元环烷基、5至8元杂环烷基任选地用一个或多个Rd取代；
R2是H或C1-C4烷基；
R3是H、卤素、C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基、或羟基C1-C4烷基；
R4是H、卤素、或C1-C4烷基；
Ra和Rd各自独立是H、D、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、卤素、氰基、硝基、羟基、＝O、C1-C10烷氧基、卤代C1-C10烷基、羟基C1-C10烷基、氨基C1-C10烷基、3至6元环烷基、5至8元杂环烷基，其中所述C1-C10烷基、3至6元环烷基、5至8元杂环烷基任选地用一个或多个Re取代；
Re是H、D、C1-C10烷基、卤素、氰基、羟基、C1-C10烷氧基、3至6元环烷基、5至8元杂环烷基；
m是0、1、2、3或4；
k是0,1或2；
s是0,1,2或3；且
r是0,1,2或3。
2.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物以式(IV)表示，其中：
其中
k是1或2；并且
r是1或2。
3.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(2-(4-(4,4-二氟环己基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-吗啉代哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-(4,4-二氟-[1,4'-联哌啶]-1'-基)-5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、
N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-甲基-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-氟-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(3-氰基-5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-3-(异丙基磺酰基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺、
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)丙烯酰胺、
N-(2-((2'S)-4,4-二氟-2'-甲基-[1,4'-联哌啶]-1'-基)-5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺、或
N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺。
4.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自下组：
(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺,
(S)-N-(2-(4-(4,4-二氟环己基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，和
(R)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)苯基)丙烯酰胺。
5.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是N-(3-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺。
6.根据权利要求3的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺。
7.根据权利要求3的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-(羟基甲基)吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺。
8.根据权利要求3的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是(S)-N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-(2-甲基-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺。
9.根据权利要求3的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物是N-(5-((6-(2-(7,7-二甲基-1-氧代-1,3,4,6,7,8-六氢-2H-环戊二烯并[4,5]吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-3-甲基吡啶-4-基)-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢吡嗪-2-基)氨基)-2-((2S)-2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)丙烯酰胺。
10.药物组合物，其包含如权利要求1中所定义的式(III)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的稀释剂或载体。
11.如权利要求1中限定的式(III)的化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗新生物性疾病、自身免疫性疾病或炎性病症。
12.权利要求11的用途，其中所述自身免疫性疾病或炎性病症是寻常型天疱疮、类风湿关节炎、哮喘、多发性硬化、系统性红斑狼疮或变态反应。
13.权利要求11的用途，其中所述新生物性疾病是B细胞恶性肿瘤或实体瘤。
14.权利要求11的用途，其中所述新生物性疾病是慢性淋巴细胞性白血病、小淋巴细胞性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤或多发性骨髓瘤。
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WO (1) WO2019161152A1 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11100492B2 (en) * 2018-02-19 2021-08-24 Peter Garrett General purpose re-loadable card aggregation implementation
EP3930717A1 (en) * 2019-02-25 2022-01-05 Guangzhou Lupeng Pharmaceutical Company Ltd. Inhibitor of btk and mutants thereof
WO2021038540A1 (en) 2019-08-31 2021-03-04 Sun Pharma Advanced Research Company Limited Cycloalkylidene carboxylic acids and derivatives as btk inhibitors
US20220363689A1 (en) * 2019-10-05 2022-11-17 Newave Pharmaceutical Inc. Inhibitor of btk and mutants thereof
US11416840B1 (en) * 2019-12-31 2022-08-16 American Express Travel Related Services Company, Inc. Computer-based systems utilizing cards with cellular capabilities and methods of use thereof
WO2021164735A1 (en) 2020-02-20 2021-08-26 Hutchison Medipharma Limited Heteroaryl heterocyclic compounds and uses thereof
US11116737B1 (en) 2020-04-10 2021-09-14 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of using probenecid for treatment of coronavirus infections
MX2023001865A (es) 2020-08-14 2023-05-09 Guangzhou Lupeng Pharmaceutical Company Ltd Composiciones de forma de dosificación que comprenden un inhibidor de btk y mutantes de este.
TW202220998A (zh) 2020-09-21 2022-06-01 大陸商和記黃埔醫藥（上海）有限公司 雜芳基雜環化合物及其用途
CA3202745A1 (en) * 2020-12-20 2022-06-23 Yi Chen Btk degrader
US20230267444A1 (en) * 2022-02-18 2023-08-24 Bank Of America Corporation Proximity-based device pairing system via acoustic communication for secure resource transfer
US20230376945A1 (en) * 2022-05-23 2023-11-23 American Express Travel Related Services Company, Inc. Virtualized transaction instruments using processing aliases

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103038233A (zh) * 2010-05-07 2013-04-10 吉利德康涅狄格有限公司 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
CN104125959A (zh) * 2011-11-03 2014-10-29 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
WO2015050703A1 (en) * 2013-10-04 2015-04-09 Yi Chen Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2015082583A1 (en) * 2013-12-05 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds with electrophilic functionality
CN110446710A (zh) * 2016-12-15 2019-11-12 豪夫迈·罗氏有限公司 制备btk抑制剂的方法

Family Cites Families (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US5590038A (en) * 1994-06-20 1996-12-31 Pitroda; Satyan G. Universal electronic transaction card including receipt storage and system and methods of conducting electronic transactions
DE19940695B4 (de) * 1999-08-27 2008-03-27 ITT Manufacturing Enterprises, Inc., Wilmington Elektronisches Mediagerät
AUPQ583600A0 (en) * 2000-02-24 2000-03-16 Cds Worldwide Pty Ltd Vehicle parking system
US20020134837A1 (en) * 2001-01-23 2002-09-26 Jakob Kishon Method and apparatus for electronically exchanging data
US20030085288A1 (en) * 2001-11-06 2003-05-08 Luu Deniel V.H. Contactless SIM card carrier with detachable antenna and carrier therefore
US6899276B2 (en) * 2002-02-15 2005-05-31 Axalto Sa Wrapped-card assembly and method of manufacturing the same
EP1365353A3 (en) * 2002-05-20 2004-03-03 Quadnovation, Inc. Contactless transaction card and adapter therefor
US20030222152A1 (en) * 2002-05-28 2003-12-04 Boley George E.S. Pre-paid debit & credit card
US7280847B2 (en) * 2002-07-26 2007-10-09 Way Systems Inc System and method for mobile transactions using the bearer independent protocol
US7336973B2 (en) * 2002-10-30 2008-02-26 Way Systems, Inc Mobile communication device equipped with a magnetic stripe reader
US6776332B2 (en) * 2002-12-26 2004-08-17 Micropin Technologies Inc. System and method for validating and operating an access card
US7440771B2 (en) * 2003-02-28 2008-10-21 American Express Travel Related Services Company, Inc. Transaction card providing displayed information
WO2005119607A2 (en) * 2004-06-03 2005-12-15 Tyfone, Inc. System and method for securing financial transactions
US7097108B2 (en) * 2004-10-28 2006-08-29 Bellsouth Intellectual Property Corporation Multiple function electronic cards
US20060287004A1 (en) * 2005-06-17 2006-12-21 Fuqua Walter B SIM card cash transactions
US8762263B2 (en) * 2005-09-06 2014-06-24 Visa U.S.A. Inc. System and method for secured account numbers in proximity devices
US7568631B2 (en) * 2005-11-21 2009-08-04 Sony Corporation System, apparatus and method for obtaining one-time credit card numbers using a smart card
US20070131759A1 (en) * 2005-12-14 2007-06-14 Cox Mark A Smartcard and magnetic stripe emulator with biometric authentication
US7784692B1 (en) * 2005-12-29 2010-08-31 United Services Automobile Association (Usaa) Single access vehicle
US7828204B2 (en) * 2006-02-01 2010-11-09 Mastercard International Incorporated Techniques for authorization of usage of a payment device
US20070185820A1 (en) * 2006-02-08 2007-08-09 Talker Albert I Multi-account security verification system with a virtual account and linked multiple real accounts
US7949373B2 (en) * 2007-01-16 2011-05-24 Jonathan Merrill Whiting Combined telephone and credit transaction enabler
US8827164B2 (en) * 2007-01-26 2014-09-09 Lg Electronics Inc. Contactless interface within a terminal to support a contactless service
SG10202107066WA (en) 2007-03-28 2021-07-29 Pharmacyclics Llc Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2009137076A2 (en) * 2008-05-07 2009-11-12 Yinzi Cai A one card system
ES2711249T3 (es) 2008-06-27 2019-04-30 Celgene Car Llc Compuestos de heteroarilo y usos de los mismos
CN102160061B (zh) * 2008-08-20 2014-04-09 X卡控股有限公司 安全智能卡系统
US8083141B1 (en) * 2009-07-17 2011-12-27 United Services Automobile Association (Usaa) Systems and methods for transactions with a headless automated teller machine or point of sale device
US9691059B1 (en) * 2009-07-17 2017-06-27 United Services Automobile Association (Usaa) Systems and methods for transactions using an ATM/credit/debit card and a second communications channel to an account holder's bank
US8671055B2 (en) * 2010-03-02 2014-03-11 Digital Life Technologies, Llc Portable E-wallet and universal card
US20120123868A1 (en) * 2010-11-17 2012-05-17 David Brudnicki System and Method for Physical-World Based Dynamic Contactless Data Emulation in a Portable Communication Device
US10586227B2 (en) * 2011-02-16 2020-03-10 Visa International Service Association Snap mobile payment apparatuses, methods and systems
US10026078B1 (en) * 2011-04-26 2018-07-17 Jpmorgan Chase Bank, N.A. System and method for accessing multiple accounts
US8538845B2 (en) * 2011-06-03 2013-09-17 Mozido, Llc Monetary transaction system
US8977569B2 (en) * 2011-09-29 2015-03-10 Raj Rao System and method for providing smart electronic wallet and reconfigurable transaction card thereof
US8600863B2 (en) * 2012-01-16 2013-12-03 International Business Machines Corporation Financial services card that provides visual indicator according to available balance defined policies
US9009069B2 (en) * 2012-02-10 2015-04-14 Target Brands, Inc. Phased debit activation system and method
US20150348018A1 (en) * 2012-02-15 2015-12-03 Blackhawk Network, Inc. System and Method of Registering Stored-Value Cards into Electronic Wallets
US9063737B2 (en) * 2012-07-02 2015-06-23 Square, Inc. Wireless card reader with one or more card interfaces
US8820649B2 (en) * 2012-11-20 2014-09-02 Omne Mobile Payments, Inc. Electronic card with a programmable magnetic stripe
US8825532B1 (en) * 2013-02-21 2014-09-02 Kamfu Wong Payment system and method using a mobile telephone network for charging and settlement
MX2015010983A (es) 2013-03-05 2015-10-26 Hoffmann La Roche Inhibidores de tirosina-cinasa de bruton.
US20140279476A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Visa International Service Association Multiple Account Dynamic Card Apparatuses, Methods and Systems
KR102273997B1 (ko) 2013-06-26 2021-07-08 애브비 인코포레이티드 Btk 억제제로서 1급 카복스아미드
US20150069126A1 (en) * 2013-09-09 2015-03-12 Omne Mobile Payments, Inc. Method and apparatus for enabling communication between two devices using magnetic field generator and magnetic field detector
WO2015073888A2 (en) * 2013-11-14 2015-05-21 Protean Payment, Inc. Method for remotely controlling a reprogrammable payment card
KR101598371B1 (ko) * 2014-07-14 2016-02-29 브릴리언츠 주식회사 스마트멀티카드
US10614450B1 (en) * 2014-08-08 2020-04-07 Squre, Inc. Controlled emulation of payment cards
US20180189527A1 (en) * 2017-01-03 2018-07-05 Soo Hyang KANG Method for activating multi-function device card
KR20180092075A (ko) * 2017-02-08 2018-08-17 삼성전자주식회사 카드 정보를 처리하기 위한 방법 및 그 전자 장치
US11157908B2 (en) * 2017-07-14 2021-10-26 The Toronto-Dominion Bank Smart chip card with fraud alert and biometric reset
AU2019210748B2 (en) 2018-01-29 2021-08-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Degradation of Bruton's tyrosine kinase (BTK) by conjugation of BTK inhibitors with E3 ligase ligand and methods of use
US11100492B2 (en) * 2018-02-19 2021-08-24 Peter Garrett General purpose re-loadable card aggregation implementation
US10755533B2 (en) * 2018-05-02 2020-08-25 International Business Machines Corporation Secure anti-skimmer technology for use with magnetic cards
US20200005269A1 (en) * 2018-06-27 2020-01-02 Chi-Yuan Ou General purpose reloadable card consolidating multiple transaction cards
EP3930717A1 (en) 2019-02-25 2022-01-05 Guangzhou Lupeng Pharmaceutical Company Ltd. Inhibitor of btk and mutants thereof
US10810570B1 (en) * 2019-09-30 2020-10-20 Square, Inc. Point of sale device with cradle for mobile computing device
US20220363689A1 (en) 2019-10-05 2022-11-17 Newave Pharmaceutical Inc. Inhibitor of btk and mutants thereof
WO2021091575A1 (en) 2019-11-08 2021-05-14 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for degrading btk via ubiquitin proteosome pathway

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103038233A (zh) * 2010-05-07 2013-04-10 吉利德康涅狄格有限公司 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
CN104125959A (zh) * 2011-11-03 2014-10-29 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为btk活性的抑制剂的杂芳基吡啶酮和氮杂-吡啶酮化合物
WO2015050703A1 (en) * 2013-10-04 2015-04-09 Yi Chen Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2015082583A1 (en) * 2013-12-05 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds with electrophilic functionality
CN110446710A (zh) * 2016-12-15 2019-11-12 豪夫迈·罗氏有限公司 制备btk抑制剂的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Two-Step Synthesis of 3,4-Dihydropyrrolopyrazinones from Ketones and Piperazin-2-ones;Cosme Sandoval等;《Organic Letters》;20180206;第20卷(第4期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
SG11202006274XA (en) 2020-07-29
US20200377478A1 (en) 2020-12-03
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US20220076238A1 (en) 2022-03-10
MX2020008627A (es) 2020-09-21
CN111741959A (zh) 2020-10-02
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US11501284B2 (en) 2022-11-15
KR20200122348A (ko) 2020-10-27
AU2019222475A1 (en) 2020-07-30
EP3755702A1 (en) 2020-12-30
MA51899A (fr) 2020-12-30
WO2019161152A1 (en) 2019-08-22
IL276575B1 (en) 2024-01-01
JP2021514390A (ja) 2021-06-10
US20230140433A1 (en) 2023-05-04
CA3088796A1 (en) 2019-08-22
IL276575A (en) 2020-09-30
IL276575B2 (en) 2024-05-01
US20200286074A1 (en) 2020-09-10

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US20160214963A1 (en) Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
US20220135569A1 (en) Inhibitor of btk and mutants thereof
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