CN111712255A - 用抗pd-1抗体治疗癌症的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗患者中的癌症的方法，其包括约每六周向所述患者施用特定量的PD‑1拮抗剂、例如抗PD‑1抗体或其抗原结合片段(例如，派姆单抗)。在一些实施方案中，抗PD‑1抗体或其抗原结合片段的量为约400 mg。在某些实施方案中，所述PD‑1拮抗剂是派姆单抗或其抗原结合片段。还提供了包含一定剂量的抗PD‑1抗体或其抗原结合片段的组合物和试剂盒，及其用于治疗癌症的用途。

Description

用抗PD-1抗体治疗癌症的方法

发明领域

本发明涉及可用于治疗癌症的疗法。具体而言，本发明涉及用于治疗癌症的方法，其包括使用本文指定的剂量方案向有此需要的患者施用抗PD-1抗体或其抗原结合片段。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年2月13日提交的美国临时申请号62/630,038和2018年9月18日提交的美国临时申请号62/732,828的益处，其内容在此以其整体通过引用并入。

电子提交的序列表的引用

本申请的序列表经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表电子提交，其具有文件名“24567WOPCT-SEQLIST-25JAN2019.TXT”、2019年1月25日的创建日期和23.7 kb的大小。经由EFS-Web提交的该序列表是本说明书的一部分，并且以其整体通过引用并入本文。

发明背景

PD-1被认为是在免疫调节与外周耐受性的维持中的重要角色。PD-1适度表达于幼稚T、B和NKT细胞上并通过在淋巴细胞、单核细胞和骨髓细胞上的T/B细胞受体信号传导上调(Sharpe等人, The function of programmed cell death 1 and its ligands inregulating autoimmunity and infection. Nature Immunology (2007); 8:239-245)。

两种PD-1的已知配体，PD-L1 (B7-H1)和PD-L2 (B7-DC)，在各种组织中产生的人类癌症中表达。在例如卵巢癌、肾癌、结肠直肠癌、胰腺癌、肝癌和黑色素瘤的大样品集合中，已显示PD-L1表达与预后不良和总体存活减少相关，而不管后续的治疗(Dong等人, Nat Med. 8(8):793-800 (2002); Yang等人 Invest Ophthalmol Vis Sci. 49: 2518-2525(2008); Ghebeh等人 Neoplasia 8:190-198 (2006); Hamanishi等人, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 104: 3360-3365 (2007); Thompson等人, Cancer 5: 206-211 (2006); Nomi等人, Clin. Cancer Research 13:2151-2157 (2007); Ohigashi等人, Clin. Cancer Research 11: 2947-2953 (2005); Inman等人, Cancer 109: 1499-1505(2007); Shimauchi等人 Int. J. Cancer 121:2585-2590 (2007); Gao等人 Clin. Cancer Research 15: 971-979 (2009); Nakanishi J. Cancer Immunol Immunother.56: 1173- 1182 (2007); 和Hino等人, Cancer 00: 1-9 (2010))。

类似地，在肿瘤浸润淋巴细胞上的PD-1表达被发现标记在乳腺癌和黑色素瘤中的功能障碍性T细胞(Ghebeh等人, BMC Cancer. 2008 8:5714-15 (2008); Ahmadzadeh等人, Blood 114: 1537-1544 (2009))并与肾癌的预后不良相关(Thompson等人, Clinical Cancer Research 15: 1757-1761(2007))。因此，已提出PD-L1表达肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用，以减轻T细胞活化并逃避免疫监视，从而造成针对肿瘤的免疫应答受损。

靶向PD-1轴的免疫检查点疗法已导致多种人癌症中的临床应答的开创性改善(Brahmer等人, N Engl J Med 2012, 366: 2455-65; Garon等人 N Engl J Med 2015,372: 2018-28; Hamid等人, N Engl J Med 2013, 369: 134-44; Robert等人, Lancet2014, 384: 1109-17; Robert等人, N Engl J Med 2015, 372: 2521-32; Robert等人,N Engl J Med 2015, 372: 320-30; Topalian等人, N Engl J Med 2012, 366: 2443-54; Topalian等人, J Clin Oncol 2014, 32: 1020-30; Wolchok等人, N Engl J Med2013, 369: 122-33)。靶向PD-1轴的免疫疗法包括针对PD-1受体的单克隆抗体(KEYTRUDA™ (派姆单抗), Merck and Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA和OPDIVO™ (尼沃单抗),Bristol-Myers Squibb Company, Princeton, NJ, USA)以及结合PD-L1配体的那些(MPDL3280A; TECENTRIQ™ (阿特珠单抗), Genentech, San Francisco, CA, USA;IMFINZI™ (度伐单抗), AstraZeneca Pharmaceuticals LP, Wilmington, DE;BAVENCIO™ (avelumab), Merck KGaA, Darmstadt, Germany)。两种治疗方法均已证明在许多癌症类型中的抗肿瘤作用。

开发额外的给药时间表将是有益的，所述给药时间表允许施用对患者更方便的安全且有效剂量的抗PD-1抗体。

发明概述

本发明提供了用抗PD-1抗体或其抗原结合片段治疗癌症患者的替代的、频率较低的给药方案，其中预期给药时间表提供安全且有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段。具体地，本发明提供了治疗人患者中的癌症的方法，其包括每六周向所述患者施用约400 mg的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)包含如SEQ ID NO:1、2和3中所示的氨基酸序列的轻链互补决定区(CDR)和包含如SEQ ID NO:6、7和8中所示的氨基酸序列的重链CDR；或(b)包含如SEQ ID NO:11、12和13中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ ID NO:14、15和16中所示的氨基酸序列的重链CDR。在本发明的优选实施方案中，所述抗体或抗原结合片段是派姆单抗。

在本发明的实施方案中，向所述患者施用的抗PD-1抗体或其抗原结合片段的量为约350 mg至约450 mg。在进一步实施方案中，抗体或抗原结合片段的量为约400 mg。在进一步实施方案中，抗体或抗原结合片段的量为400 mg。

在本文的所有上述治疗方法、组合物和用途中，所述PD-1抗体或抗原结合片段抑制PD-L1与PD-1的结合，并且优选还抑制PD-L2与PD-1的结合。在本发明的治疗方法、组合物和用途的一些优选实施方案中，所述PD-1抗体或抗原结合片段是单克隆抗体，其特异性结合PD-1并阻断PD-L1与PD-1的结合。在一个具体实施方案中，所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，且其中所述重链和轻链包含图1中显示的氨基酸序列(SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:10)。

在任何上述治疗方法、组合物和用途的一些实施方案中，所述癌症表达PD-L1和PD-L2中的一者或两者。在一些实施方案中，PD-L1表达在癌症中升高。

在本文所述的任何方法的某些实施方案中，将所述抗PD-1抗体或抗原结合片段皮下施用于患者。

在本文所述的任何方法的替代实施方案中，将所述抗PD-1抗体或抗原结合片段静脉内施用于患者。

附图简述

图1显示可用于本发明中的示例性抗PD-1单克隆抗体的轻链和重链的氨基酸序列(分别为SEQ ID NO:5和10)。轻链和重链可变区加下划线(SEQ ID NO 4和9)，并且CDR呈粗体和加框。

图2显示，对于400 mg Q6W的稳态下的派姆单抗Cmax位于2 mg/kg Q3W和200 mgQ3W至10 mg/kg Q2W的范围内。

图3显示，相对于2 mg/kg Q3W和200 mg Q3W，对于400 mg Q6W的稳态下的派姆单抗暴露(Cavg和Cmin)是相似的。

图4A和4B显示与200 mg, Q3W平坦给药方案(上)、Q3W, 2 mg/kg基于重量的给药方案(中)和Q2W, 10 mg/kg基于重量的给药方案(下)相比，400 mg Q6W给药方案的稳态下的派姆单抗药代动力学概况。提供了对数标尺浓度(图4A)和线性标尺浓度(图4B)的结果。

发明详述

I. 定义和缩写

如整个说明书和所附权利要求中所用，以下缩写适用：

AE 不良事件

AUCss 稳态下的浓度-时间曲线下面积

BICR 不知情的独立中央审查

Cavg,ss 稳态下的时间平均的浓度

CDR 互补决定区

CI 置信区间

Cmax,ss 稳态下的峰值浓度

Cmin,ss 稳态下的谷值浓度

CPS 组合阳性评分

DOR 应答的持续时间

ECG 心电图

ECOG 东方协作肿瘤小组

E-R 暴露(浓度)-应答

FFPE 福尔马林固定石蜡包埋的

FR 框架区

GM 几何平均值

HCC 肝细胞癌

HNSCC 头颈部鳞状细胞癌

HL 霍奇金淋巴瘤

IgG 免疫球蛋白G

IHC 免疫组织化学或免疫组织化学的

IV 静脉内

LPS 淋巴瘤比例评分

mAb 单克隆抗体

MCC 默克尔细胞癌

MEL 黑色素瘤

MMR 错配修复

MPS 修改的比例评分

MRI 磁共振成像

MSI-H 微卫星不稳定性-高

NCI CTCAE 美国国家癌症研究所–不良事件的通用术语标准

NSCLC 非小细胞肺癌

ORR 客观应答率

OS 总体存活

PD 疾病进展

PD-1 程序性死亡1(又称程序性细胞死亡-1和程序性死亡受体1)

PD-L1 程序性细胞死亡1配体1

PD-L2 程序性细胞死亡1配体2

PFS 无进展存活

PK 药代动力学

Q2W 每两周一剂

Q3W 每三周一剂

Q6W 每六周一剂

RCC 肾细胞癌

SAE 严重不良事件

SC 皮下

TPS 肿瘤比例评分

V_H 免疫球蛋白重链可变区

V_L 免疫球蛋白轻链可变区

为了可以更容易地理解本发明，下文具体定义了某些技术和科学术语。除非在本文件中别处特别地定义，本文使用的所有其他的技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员通常理解的意义。

对“或”的提及指示任一种或两种可能性，除非上下文清楚地指出所指示的可能性之一。在一些情况下，采用“和/或”来突出任一种或两种可能性。

如本文(包括随附权利要求)所用，除非上下文明确指示，否则词语的单数形式(诸如“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”)包括其相应多个指示物。

当修饰物质或组合物的量(例如，mg)或表征方法中的步骤的参数的值等时，术语“约”是指可能发生的数值的变异，例如，通过参与物质或组合物的制备、表征和/或使用的典型的测量、处理和取样程序；通过这些程序中的无意错误；通过制作或使用组合物或实施程序所用的成分的制造、来源或纯度的差异；等。在某些实施方案中，“约”可以意指±0.1%、± 0.5%、± 1%、± 2%、± 3%、± 4%、± 5%、± 6%、± 7%、± 8%、± 9%或± 10%的变异。当提及“约400mg”的剂量时，剂量可以是360 mg至440 mg、370 mg至430 mg、380 mg至420 mg、390 mg至410 mg、395 mg至405 mg、400 mg至440 mg或390 mg至440 mg。在替代实施方案中，所述剂量可以是360 mg、365 mg、370 mg、375 mg、380 mg、385 mg、390 mg、395mg、400 mg、405 mg、410 mg、415 mg、420 mg、425 mg、430 mg、435 mg或440 mg。当指治疗性治疗方案中的施用之间的时间量(即，抗PD-1抗体或其抗原结合片段的施用之间的时间量，例如“约6周”，其在本文中与“近似每六周”可互换使用)，“约”是指规定的时间 ± 由于患者/临床医生在6周的目标日期左右的时间安排和可用性而可能发生的变异。例如，“约6周”可以指6周±5天，6周±4天，6周±3天，6周±2天或6周±1天，或者可以指5周2天至6周5天。

药代动力学的“稳态”是由于多个剂量而使药物浓度的任何积累已最大化，并且在施用的每次后续剂量后全身性药物暴露被认为是均匀的时间段；在派姆单抗的特定情况下，在施用~16周时和之后达到稳态。

AUCss、Cavg,ss和Cmin,ss是其施用后人中对药物(例如派姆单抗)的全身性暴露的药代动力学量度，并且通常被认为是药物效力的驱动力。AUCss和Cavg,ss代表给药间隔内的平均暴露量，但在单位方面不同。“Cmin,ss”代表在给药间隔结束时，即将在施用下一剂量之前观察到的最小或最低(谷值)药物浓度。

“Cmax,ss”是在其施用后不久观察到的最大或最高(峰值)药物浓度。在派姆单抗(其作为静脉内输注施用)的特定情况下，峰值浓度在输注结束后立即出现。Cmax,ss是通常被认为是驾驶员安全的驱动力的度量。

“施用”和“治疗”在其应用至动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，是指外源性药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体接触。如本文所用，“治疗(treat或treating)”癌症意指向具有癌症或诊断具有癌症的受试者施用抗PD-1抗体或抗原结合片段，以实现至少一种阳性治疗效果，诸如例如，减少癌细胞数量，减小肿瘤大小，降低癌细胞浸润至外周器官中的速率，或降低肿瘤转移或肿瘤生长的速率。“治疗”可以包括以下中的一项或多项：诱导/增加抗肿瘤免疫应答，减少一种或多种肿瘤标志物的数量，中止或延迟肿瘤或血液癌的生长或与PD-1与其配体PD-L1和/或PD-L2的结合相关的疾病(“PD-1相关疾病”)(诸如癌症)的进展，PD-1相关疾病的稳定化，抑制肿瘤细胞的生长或存活，消除或减小一个或多个癌性病变或肿瘤的大小，降低一种或多种肿瘤标志物的水平，改善或废除PD-1相关疾病的临床表现，降低PD-1相关疾病(诸如癌症)的临床症状的严重程度或持续时间，相对于未治疗的类似患者的预期存活期延长患者的存活期，和诱导癌性病况或其他PD-1相关疾病的完全或部分缓解。

可以许多方式测量癌症的阳性治疗效果(参见W. A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009))。例如，关于肿瘤生长抑制，根据NCI标准，≦42%的T/C是抗肿瘤活性的最低水平。< 10%的T/C被视为高抗肿瘤活性水平，其中T/C (%)=治疗的中值肿瘤体积/对照的中值肿瘤体积×100。在一些实施方案中，通过治疗有效量实现的治疗为无进展存活(PFS)、无疾病存活(DFS)或总体存活(OS)中的任一者。PFS也称为“肿瘤进展时间”，其指示在治疗期间和之后癌症不生长的时间长度，且包括患者已经历完全应答或部分应答的时间量，以及患者已经历稳定疾病的时间量。DFS是指在治疗期间和之后患者保持无疾病的时间长度。OS是指与原始(naive)或未治疗的个体或患者相比预期寿命的延长。尽管本发明的治疗方法、组合物和用途的一个实施方案可能不会在每一患者中有效实现阳性治疗效果，但应当在统计显著量的受试者中实现，如通过本领域已知的任一统计检验(诸如Student氏t检验、卡方检验、根据Mann和Whitney的U-检验、Kruskal-Wallis检验(H检验)、Jonckheere-Terpstra检验和Wilcoxon检验)来确定。

术语“患者”(在本文中可替代地称为“受试者”或“个体”)是指能够用本发明的方法和组合物治疗的哺乳动物(例如，大鼠、小鼠、狗、猫、兔)，最优选人。在一些实施方案中，患者是成年患者。在其他实施方案中，患者是儿科患者。

术语"抗体"是指表现出期望的生物或结合活性的任何形式的抗体。因此，它在最广泛意义上使用并特别地覆盖，但不限于，单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、人源化、完全人抗体和嵌合抗体。"亲本抗体"是在用于预期用途的抗体的修饰，诸如用作人治疗剂的抗体的人源化之前，通过使免疫系统暴露于抗原而获得的抗体。

通常，基本的抗体结构单元包含四聚体。每个四聚体包括两个相同的多肽链对，每对具有一条"轻"链(约25 kDa)和一条"重"链(约50-70 kDa)。每条链的氨基-末端部分包括主要负责抗原识别的约100-110或更多个氨基酸的可变区。重链的羧基-末端部分可限定主要地负责效应子功能的恒定区。通常，人轻链被分类为κ和λ轻链。此外，人重链通常被分类为μ、δ、γ、α或ε，且将抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在轻链和重链内，可变区和恒定区由约12或更多个氨基酸的"J"区连接，其中重链也包括约10个以上的氨基酸的"D"区。通常参见，Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W., 编辑, 第2版. RavenPress, N.Y. (1989)。

每个轻/重链对的可变区形成抗体结合位点。因此，通常，完整的抗体具有两个结合位点。除了双功能或双特异性抗体中，两个结合位点通常是相同的。

通常，重链和轻链二者的可变结构域均包含3个高变区，也称为互补决定区(CDRs)，其位于相对保守的框架区(FR)内。CDRs通常由框架区对齐，使得能够结合特定表位。通常，从N-末端至C-末端，轻链和重链可变结构域二者均包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。氨基酸分配到每个结构域通常根据以下的定义：Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat,等人；National Institutes of Health, Bethesda,Md.；第5版；NIH Publ. No. 91-3242 (1991)；Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75；Kabat,等人, (1977) J. Biol. Chem. 252:6609-6616；Chothia,等人, (1987) J Mol. Biol. 196:901-917或Chothia,等人, (1989) Nature 342:878-883。

术语"高变区"是指负责抗原-结合的抗体的氨基酸残基。高变区包含来自"互补决定区"或"CDR"的氨基酸残基(即在轻链可变结构域中的CDRL1、CDRL2和CDRL3，以及在重链可变结构域中的CDRH1、CDRH2和CDRH3)。参见，Kabat等人(1991) Sequences of Proteinsof Immunological Interest, 第5版. Public Health Service, National Institutesof Health, Bethesda, Md. (由序列限定抗体的CDR区)；也参见Chothia和Lesk (1987)J. Mol. Biol. 196: 901-917 (由结构限定抗体的CDR区)。术语"框架"或"FR"残基是指除了本文定义为CDR残基的高变区残基以外的那些可变结构域残基。

除非另外指明，否则"抗体片段"或"抗原结合片段"是指抗体的抗原结合片段，即保留特异性结合由全长抗体结合的抗原的能力的抗体片段，例如，保留一个或多个CDR区的片段。抗体结合片段的实例包括，但不限于，Fab、Fab'、F(ab')₂和Fv片段。

"特异性结合”特定靶蛋白的抗体是，与其他蛋白相比，表现出优先结合该靶标的抗体，但这种特异性不需要绝对结合特异性。如果抗体结合确定靶蛋白在样品中的存在，例如，不产生不期望的结果诸如假阳性，则该抗体被认为对其意欲靶标是"特异性的"。可用于本发明中的抗体或其结合片段，将以结合非-靶蛋白的亲和力的至少两倍，优选地至少10倍，更优选至少20-倍，和最优选至少100-倍的亲和力结合靶蛋白。如本文所用，据说抗体是特异性结合包含给定氨基酸序列，例如成熟人PD-1或人PD-L1分子的氨基酸序列的多肽，如果它结合包含该序列的多肽、但不结合缺乏该序列的蛋白的话。

"嵌合抗体"是指这样的抗体，其中重链和/或轻链的部分与源自特定物种(例如人)或属于特定抗体类或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，而所述链的其余部分与源自另一个物种(例如小鼠)或属于另一个抗体类或亚类的抗体中的对应序列相同或同源；以及此类抗体的片段，只要它们表现出期望的生物活性。

“人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白蛋白序列的抗体。人抗体可含有鼠碳水化合物链，如果在小鼠，在小鼠细胞，或在源自小鼠细胞的杂交瘤中产生的话。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”是指仅分别包含小鼠或大鼠免疫球蛋白序列的抗体。

"人源化抗体"是指含有来自非-人(例如鼠)抗体以及人抗体的序列的抗体形式。此类抗体含有源自非-人免疫球蛋白的最小序列。通常，人源化抗体将基本上包含至少一个、通常两个可变结构域中的全部，其中所有或基本上所有的高变环对应于非-人免疫球蛋白的那些，并且所有或基本上所有的FR区是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体任选地还将包含至少一部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，通常为人免疫球蛋白的恒定区。当有必要区分人源化抗体与亲本啮齿动物抗体时，在抗体克隆名称中添加前缀“hum”、“hu”或“h”。啮齿动物抗体的人源化形式将通常包含亲本啮齿动物抗体的相同的CDR序列，尽管可包括某些氨基酸取代，以增加亲和力，增加人源化抗体的稳定性，或为了其他理由。

术语“癌症”、“癌性”或“恶性”是指或描述哺乳动物中特征通常在于不受调节的细胞生长的生理学病况。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、白血病、胚细胞瘤和肉瘤。此类癌症的更具体实例包括、但不限于鳞状细胞癌、骨髓瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经胶质瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、急性骨髓性白血病(AML)、多发性骨髓瘤、胃肠(道)癌症、肾癌、卵巢癌、肝癌、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、结肠直肠癌、子宫内膜癌、肾癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、软骨肉瘤、成神经细胞瘤、胰腺癌、多形性成胶质细胞瘤、宫颈癌、脑癌、胃癌、膀胱癌、肝瘤、乳腺癌、结肠癌和头颈癌。可根据本发明治疗的额外癌症包括特征在于在测试组织样品中PD-L1和PD-L2中的一者或两者的表达升高的那些。

“生物治疗剂”是指一种生物分子，诸如抗体或融合蛋白，其阻断任何生物途径中的配体/受体信号传导，所述信号传导支持肿瘤维持和/或生长或抑制抗肿瘤免疫应答。

“CDR”或“CDRs”意指通常使用Kabat编号系统定义的免疫球蛋白可变区中的互补性决定区。

“含铂化疗”(也称为platins)是指作为铂的配位络合物的用于治疗癌症的化疗剂的用途。含铂化疗剂是使DNA交联、导致DNA错配修复无效并通常导致凋亡的烷基化剂。platins的实例包括顺铂、卡铂和奥沙利铂。

“化疗剂”是可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的类别包括，但不限于：烷基化剂、抗代谢药、激酶抑制剂、纺锤体毒剂植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、光敏化剂、抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)、抗孕酮剂、雌激素受体下调剂(ERD)、雌激素受体拮抗剂、促黄体激素释放激素激动剂、抗雄激素剂、芳香酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、抑制参与异常细胞增殖或肿瘤生长的基因表达的反义寡核苷酸。可用于本发明的治疗方法中的化疗剂包括细胞生长抑制剂和/或细胞毒性剂。

“Chothia”意指Al-Lazikani等人, JMB 273:927-948 (1997)中所述的抗体编号系统。

“保守修饰变体”或“保守取代”是指用具有类似特征(例如电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、主链构象和刚度等)的其他氨基酸取代蛋白中的氨基酸，使得所述变化可以经常做出，而不改变蛋白的生物活性或其他期望的特性，诸如抗原亲和力和/或特异性。本领域技术人员认识到，通常，在多肽的非必需区域中的单个氨基酸取代不会实质上改变生物活性(参见，例如，Watson等人(1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., 第224页(第4版))。另外，在结构上或在功能上类似的氨基酸的取代不太可能破坏生物活性。示例性的保守取代阐述在表1中。

表1. 示例性保守氨基酸取代

如整个说明书和权利要求中所用，“基本上由…组成(consists essentiallyof)”和变型(诸如“基本上由…组成”(“consist essentially of”或“consistingessentially of”))指示包括任何所述的要素或要素组，且任选包括具有与所述要素类似或不同的性质且不会显著改变指定剂量方案、方法或组合物的基本或新型特性的其他要素。作为非限制性实例，基本上由所述氨基酸序列组成的PD-1抗原结合片段还可以包括一个或多个氨基酸，包括一个或多个氨基酸残基的取代，其不会实质性影响结合化合物的特性。

“包含(Comprising)”或变型诸如“包含(comprise)”、“包含(comprises)”或“由...构成”在整个说明书和权利要求中以包括性意义使用，即指定所述特征的存在，但不排除可以实质上增强本发明的任何实施方案的操作或效用的进一步特征的存在或添加，除非上下文由于明确的语言或必要的含义而另有要求。

“诊断性抗PD-L单克隆抗体”意指特异性结合在某些哺乳动物细胞的表面上表达的指定PD-L (PD-L1或PD-L2)的成熟形式的mAb。成熟的PD-L缺乏分泌前前导序列，也被称为前导肽。术语“PD-L”和“成熟的PD-L”在本文中可互换地使用，并且应当被理解为意指相同的分子，除非另外指出或从上下文容易明白。

如本文所用，诊断性抗人PD-L1 mAb或抗hPD-L1 mAb是指特异性结合成熟的人PD-L1的单克隆抗体。成熟的人PD-L1分子由下述序列的氨基酸19-290组成：

。

可用作诊断性mAb用于免疫组织化学(IHC)检测在福尔马林固定的、石蜡包埋的(FFPE)肿瘤组织切片中的PD-L1表达的诊断性抗人PD-L1 mAb的具体实例是抗体20C3和抗体22C3，其描述于WO 2014/100079中。这些抗体包含下表2中所示的轻链和重链可变区氨基酸序列：

已经报道可用于IHC检测FFPE组织切片中的PD-L1表达的另一种抗人PD-L1 mAb(Chen, B.J. 等人, Clin Cancer Res 19: 3462-3473 (2013))是可从Sino Biological,Inc. (Beijing, P.R. China；目录号10084-R015)公开获得的兔抗人PD-L1 mAb。

如本文所用的“框架区”或“FR”意指排除CDR区的免疫球蛋白可变区。

"分离的抗体"和“分离的抗体片段”是指纯化状态并且在这样的上下文中意指命名的分子基本上不含其他生物分子诸如核酸、蛋白、脂质、碳水化合物或其他物质诸如细胞碎片和生长培养基。通常，术语"分离的"并不意指完全不存在这样的物质或不存在水、缓冲剂或盐，除非它们以基本上干扰如本文描述的结合化合物的实验或治疗应用的量存在。

如本文所用，“Kabat”意指由Elvin A. Kabat首创的免疫球蛋白比对和编号系统((1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 第5版. Public HealthService, National Institutes of Health, Bethesda, Md.)。

如本文所用，"单克隆抗体"或“mAb”或“Mab”，是指基本上同质的抗体群体，即构成群体的抗体分子在氨基酸序列中是相同的，除了可以少量存在的可能天然存在的突变。相比之下，常规的(多克隆)抗体制备物通常包括许多不同的抗体，所述抗体在它们的可变结构域，特别是它们的CDRs(其对不同的表位经常是特异性的)中具有不同的氨基酸序列。修饰词"单克隆的"表明如从基本上同质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应被解释为需要通过任何具体方法生产抗体。例如，待根据本发明使用的单克隆抗体可通过由Kohler等人 (1975) Nature 256: 495首次描述的杂交瘤方法制得，或可通过重组DNA方法(参见，例如美国专利号4,816,567)制得。"单克隆抗体"也可使用在例如Clackson等人 (1991)Nature 352: 624-628和Marks等人 (1991) J. Mol. Biol. 222: 581-597中描述的技术，分离自噬菌体抗体文库。也参见Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731。

可用于本发明的任何治疗方法、组合物和用途中的“抗PD-1抗体”包括特异性结合人PD-1的单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段。PD-1及其配体的替代名称或同义词包括：对于PD-1；PDCD1、PD1、CD279和SLEB2；对于PD-L1，PDCD1L1、PDL1、B7H1、B7-4、CD274和B7-H；和对于PD-L2，PDCD1L2、PDL2、B7-DC、Btdc和CD273。在其中正在治疗人个体的本发明的任何治疗方法、组合物和用途中，PD-1抗体或其抗原结合片段是PD-1拮抗剂，其阻断人PD-L1与人PD-1的结合，或阻断人PD-L1和PD-L2两者与人PD-1的结合。可以在NCBI基因座编号NP_005009中发现人PD-1氨基酸序列。可以分别在NCBI基因座编号NP_054862和NP_079515中发现人PD-L1和PD-L2氨基酸序列。抗PD-1抗体可以是可以是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体，并且可包括人恒定区。在一些实施方案中，恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3和IgG4恒定区，且在优选的实施方案中，人恒定区是IgG1或IgG4恒定区。在一些实施方案中，抗原结合片段选自Fab、Fab'-SH、F(ab')₂、scFv和Fv片段。

“PD-L1”或“PD-L2”表达意指在细胞表面上指定PD-L蛋白或在细胞或组织内指定PD-L mRNA的任何可检测表达水平，除非另有定义。可在肿瘤组织切片的IHC测定中用诊断性PD-L抗体或通过流式细胞术检测PD-L蛋白表达。或者，可使用特异性结合期望PD-L靶标(例如，PD-L1或PD-L2)的结合剂(例如，抗体片段、亲和体等)通过PET成像检测肿瘤细胞的PD-L蛋白表达。用于检测和测量PD-L mRNA表达的技术包括RT-PCR和实时定量RT-PCR。

已描述用于在肿瘤组织切片的IHC测定中对PD-L1蛋白表达进行定量的几种方法。参见例如Thompson等人, PNAS 101 (49): 17174-17179 (2004); Thompson等人, Cancer Res. 66:3381-3385 (2006); Gadiot等人, Cancer 117:2192-2201 (2011); Taube等人,Sci Transl Med 4, 127ra37 (2012); 和Toplian等人, New Eng. J Med. 366 (26):2443-2454 (2012)。

一种方法采用针对PD-L1表达阳性或阴性的简单二进制终点，其中阳性结果在表现出细胞-表面膜染色的组织学证据的肿瘤细胞的百分比方面进行定义。对于PD-L1表达为总肿瘤细胞的至少1%且优选5%，将肿瘤组织切片计数为阳性。

在另一方法中，在肿瘤细胞中以及在主要包含淋巴细胞的浸润免疫细胞中对肿瘤组织切片中的PD-L1表达进行定量。表现出膜染色的肿瘤细胞和浸润免疫细胞的百分比单独定量为<5%、5%至9%，且然后以10%增量至最多100%。对于肿瘤细胞，如果评分为<5%评分，则PD-L1表达被计数为阴性，且如果评分≥5%，则计数为阳性。免疫浸润物中的PD-L1表达被报告为被称为调节的炎症评分(AIS)的半定量测量，其通过膜染色细胞的百分比乘以浸润物强度来确定，其被分级为无(0)、轻度(1的评分，淋巴细胞稀疏)、中等(2的评分，通过淋巴细胞组织细胞聚集物的肿瘤的病灶浸润)或严重(3的评分，弥漫浸润)。如果AIS≥5，则将肿瘤组织切片计数为通过免疫浸润物的PD-L1表达阳性。

还可以通过使用评分方法评价组织切片中的肿瘤细胞和浸润免疫细胞两者中的PD-L1表达，对已经用诊断性PD-L1抗体通过IHC染色的来自肿瘤的组织切片针对PD-L1蛋白表达进行评分。参见WO 2014/165422。一种PD-L1评分方法包括检查组织切片中的每个肿瘤巢的染色，以及为组织切片分配修改的H评分(MHS)和修改的比例评分(MPS)中的一项或两项。为了分配MHS，在所有检查的肿瘤巢中所有存活的肿瘤细胞和染色的单核炎性细胞中估算四个单独的百分比：(a)没有染色的细胞(强度= 0)，(b)弱染色(强度= 1 +)，(c)中度染色(强度= 2 +)和(d)强染色(强度= 3 +)。细胞必须至少部分膜染色以包括在弱、中度或强染色百分比中。然后将估算的百分比(其总和为100%)输入下式：1 x (弱染色细胞的百分比)+ 2 x(中度染色细胞的百分比)+ 3 x(强染色细胞的百分比)，并且结果作为MHS分配至组织切片。通过在所有检查的肿瘤巢中的所有存活的肿瘤细胞和染色的单核炎性细胞中估算具有所有强度的至少部分膜染色的细胞的百分比来分配MPS，并将所得的百分比分配给组织切片作为MPS。在一些实施方案中，如果MHS或MPS为阳性，则将肿瘤指定为PD-L1表达阳性。

用于评分/定量肿瘤中的PD-L1表达的另一种方法是“组合阳性评分”或“ CPS”，这是指从患者的肿瘤样品确定PD-L1表达评分的算法。CPS可用于选择患者用于用特定治疗方案进行治疗，所述特定治疗方案包括这样的治疗方法，其包括施用抗PD-1抗体，其中相对于不表达PD-L1的相同患者群体，特定患者群体中的PD-L1的表达与更高应答率相关。CPS通过如下计算：确定来自具有肿瘤的患者的肿瘤组织中存活的PD-L1阳性肿瘤细胞的数量、存活的PD-L1阴性肿瘤细胞的数量以及存活的PD-L1阳性单核炎性细胞(MIC)的数量，并使用下式计算CPS：

(# PD-L1阳性肿瘤细胞) + (# PD-L1阳性MIC) x 100%

(# PD-L1阳性肿瘤细胞) + (PD-L1阴性肿瘤细胞)。

在具体实施方案中，所使用的PD-L1表达评分方法是“淋巴瘤比例评分”。淋巴瘤的特征在于汇合细胞的均质群，其抹掉淋巴结的结构或转移部位的结构。“LPS”或“淋巴瘤比例评分”是表达PD-L1的该细胞群体的百分比。当确定LPS时，没有尝试区分真正的赘生性细胞与反应性细胞。PD-L1表达的特征在于在任何强度下的部分或全部膜染色。

PD-L1表达的又另一种评分方法是“TPS”或“肿瘤比例评分”，其为在细胞膜上表达PD-L1的肿瘤细胞的百分比。TPS通常包括以任何强度(弱、中度或强)表达PD-L1的赘生性细胞的百分比，其可以使用如上所述的诊断性抗人PD-L1 mAb (例如抗体20C3和抗体22C3)使用免疫组织化学测定法进行测定。如果存在膜染色(包括具有部分膜染色的细胞)，则认为细胞表达PD-L1。

可将PD-L mRNA表达水平与经常用于定量RT-PCR中的一种或多种参考基因(诸如泛素C)的mRNA表达水平进行比较。

在一些实施方案中，基于与适当对照的PD-L1表达(蛋白和/或mRNA)水平的比较，将恶性细胞和/或肿瘤内浸润免疫细胞的PD-L1表达(蛋白和/或mRNA)的水平确定为“过表达”或“升高”。例如，对照PD-L1蛋白或mRNA表达水平可以是在相同类型的非恶性细胞中或在来自匹配正常组织的切片中进行定量的水平。在一些优选实施方案中，如果肿瘤样品中的PD-L1蛋白(和/或PD-L1 mRNA)比对照多至少10%、20%或30%，则确定该样品中的PD-L1表达升高。

“组织切片”是指单一部分或单片组织样品，例如，从正常组织或肿瘤的样品切下的组织薄片。

“肿瘤”在其应用至被诊断具有或怀疑具有癌症的受试者时是指具有任一大小的恶性或潜在恶性赘生物或组织块，且包括原发性肿瘤和继发性赘生物。实体瘤是通常不含囊肿或液体区域的组织的异常生长或块。不同类型的实体瘤针对形成其的细胞类型来命名。实体瘤的实例是肉瘤、癌和淋巴瘤。白血病(血液癌)通常不形成实体瘤(NationalCancer Institute, Dictionary of Cancer Terms)。

如本文所用的“可变区”或“V区”意指在不同的抗体之间的序列中是可变的IgG链的区段。其延伸到轻链中的Kabat残基109和重链中的Kabat残基113。

如本文所用的“RECIST 1.1应答标准”意指Eisenhauer, E.A.等人, Eur. J. Cancer 45:228-247 (2009)中针对基于测量应答的背景认为适当的目标病变或非目标病变所述的定义。

II． 可用于本发明中的PD-1抗体和抗原结合片段

结合人PD-1、可用于本发明的治疗方法、组合物和用途中的mAb的实例描述在US 7,521,051、US 8,008,449和US 8,354,509中。可用作本发明的治疗方法、组合物和用途中的PD-1拮抗剂的具体抗人PD-1 mAb包括：派姆单抗 (以前被称为MK-3475、SCH 900475和lambrolizumab)、人源化的IgG4 mAb(其具有在WHO Drug Information, 第27卷, 第2期,第161-162页(2013)中描述的结构，且其包含图1中所示的重链和轻链氨基酸序列)和人源化抗体h409A11、h409A16和h409A17(其描述在WO 2008/156712和表3中)。

在本发明的治疗方法、组合物、试剂盒和用途的一些实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)包含如SEQ ID NO:1、2和3中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ ID NO:6、7和8中所示的氨基酸序列的重链CDR；或(b)包含如SEQ ID NO:11、12和13中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ ID NO:14、15和16中所示的氨基酸序列的重链CDR。在本发明的一些实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是人抗体。在其他实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是人源化抗体。在其他实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是嵌合抗体。在具体实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体。

在本发明的治疗方法、组合物、试剂盒和用途的其他实施方案中，所述PD-1抗体或其抗原结合片段特异性结合人PD-1且包含：(a)包含如SEQ ID NO:9或其变体中所示的氨基酸序列的重链可变区，和(b)包含选自SEQ ID NO:4或其变体；SEQ ID NO:22或其变体；和SEQ ID NO:23或其变体的氨基酸序列的轻链可变区。

除了具有在框架区中(即，在CDR的外面)的最多达17个保守氨基酸取代且优选地具有在框架区中的小于10、9、8、7、6或5个保守氨基酸取代以外，重链可变区序列序列或全长重链序列的变体与参考序列相同。除了具有在框架区中(即，在CDR的外面)的最多达5个保守氨基酸取代且优选地具有在框架区中的小于4、3或2个保守氨基酸取代以外，轻链可变区序列或全长轻链序列的变体与参考序列相同。

在本发明的治疗方法、组合物、试剂盒和用途的另一个实施方案中，所述PD-1抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体，其特异性结合人PD-1且包含：(a)包含如SEQ ID NO:10或其变体中所示的氨基酸序列或由其组成的重链；和(b)包含如SEQ ID NO:5或其变体；SEQID NO:24或其变体；或SEQ ID NO:25或其变体中所示的氨基酸序列或由其组成的轻链。

在本发明的治疗方法、组合物和用途的又另一个实施方案中，所述PD-1抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体，其特异性结合人PD-1且包含：(a)包含如SEQ ID NO:10中所示的氨基酸序列或由其组成的重链；和(b)包含如SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列或由其组成的轻链。

下面表3提供了用于本发明的治疗方法、组合物、试剂盒和用途中的示例性抗PD-1mAb的氨基酸序列的列表。

III. 本发明的方法和用途

本发明提供了治疗人患者中的癌症的方法，其包括每约六周一次向所述患者施用约400 mg的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)包含如SEQ ID NO:1、2和3中所示的氨基酸序列的轻链互补决定区(CDR)和包含如SEQ IDNO:6、7和8中所示的氨基酸序列的重链CDR；或(b)包含如SEQ ID NO:11、12和13中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ ID NO:14、15和16中所示的氨基酸序列的重链CDR。在本发明的具体实施方案中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是派姆单抗。

在本发明的一些实施方案中，约每六周一次向所述患者施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段，持续12周或更长时间。在其他实施方案中，每六周一次向所述患者施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段，持续18周或更长时间，24周或更长时间，30周或更长时间，36周或更长时间，42周或更长时间，48周或更长时间，54周或更长时间，60周或更长时间，66周或更长时间，72周或更长时间，78周或更长时间，84周或更长时间，或90周或更长时间。

在第一个实施方案(实施方案E1)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第二个实施方案(实施方案E2)中，本发明包括治疗人患者中的不可切除或转移性黑色素瘤的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第三个实施方案(实施方案E3)中，本发明包括治疗人患者中的转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E3的一个子实施方案(实施方案E3-A)中，所述患者患有具有高PD-L1表达的肿瘤[(肿瘤比例评分(TPS) ≥50%)]，且先前未用含铂化疗治疗。

在实施方案E3的一个进一步子实施方案(实施方案E3-B)中，所述患者患有具有PD-L1表达的肿瘤(TPS ≥1%)，且先前用含铂化疗治疗。在实施方案E3-B的具体实施方案中，所述患者在接受含铂化疗时或之后具有疾病进展。

在实施方案E3的另一个子实施方案(实施方案E3-C)中，所述患者患有具有PD-L1表达的肿瘤(TPS ≥1%)，且先前未用含铂化疗治疗。

在实施方案E3的又另一个子实施方案(实施方案E3-D)中，未针对PD-L1表达测试患者的肿瘤。在该实施方案中，所述患者用抗PD-1抗体或其抗原结合片段治疗，而无论PD-L1表达。在具体实施方案中，所述患者先前未用含铂化疗治疗。

在实施方案E3的某些实施方案(包括实施方案E3-A、E3-B和E3-C)中，通过FDA-批准的测试确定PD-L1 TPS。

在实施方案E3的某些实施方案(包括实施方案E3-A、E3-B、E3-C和E3-D)中，所述患者的肿瘤没有EGFR或ALK基因组畸变。

在实施方案E3的某些实施方案(包括实施方案E3-A、E3-B、E3-C和E3-D)中，所述患者的肿瘤具有EGFR或ALK基因组畸变，并且在接受针对EGFR或ALK畸变的治疗时或之后、接受所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段之前具有疾病进展。

在第四个实施方案(实施方案E4)中，本发明包括治疗人患者中的转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的方法，其包括：(1)每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，和(2)向所述患者施用培美曲塞和卡铂。在实施方案E4的子实施方案中，在开始用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂的组合治疗方案之前，所述患者先前未用抗癌治疗剂治疗。

在实施方案E3和E4(包括其子实施方案)的某些实施方案中，所述患者具有非鳞状非小细胞肺癌。

在实施方案E4的子实施方案中，培美曲塞以500 mg/m²的量施用于所述患者。

在实施方案E4的子实施方案中，将培美曲塞每21天经由静脉内输注施用于所述患者。在具体实施方案中，输注时间为约10分钟。

在实施方案E4的子实施方案(实施方案E4-A)中，本发明进一步包括在向患者施用培美曲塞之前约7天开始，并继续直至向所述患者施用最后一剂培美曲塞后约21天，向所述患者每天一次施用约400 μg至约1000 μg的叶酸。在某些实施方案中，所述叶酸经口施用。

在实施方案E4和E4-A(实施方案E4-B)的子实施方案中，本发明进一步包括在第一次施用培美曲塞之前约1周和约每三个周期的培美曲塞施用(即，近似每9周)，向所述患者施用约1 mg维生素B₁₂。在某些实施方案中，维生素B₁₂肌肉内施用。

在实施方案E4、E4-A和E4-B(实施方案E4-C)的子实施方案中，本发明进一步包括在培美曲塞施用前一天、培美曲塞施用当天和培美曲塞施用后一天向患者一天两次施用约4 mg地塞米松。在某些实施方案中，地塞米松经口施用。

在第五个实施方案(实施方案E5)中，本发明包括治疗人患者中的复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E5的子实施方案中，所述患者先前用含铂化疗治疗。在某些实施方案中，所述患者在含铂化疗时或之后具有疾病进展。

在第六个实施方案(实施方案E6)中，本发明包括治疗人患者中的难治性经典霍奇金淋巴瘤(cHL)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第七个实施方案(实施方案E7)中，本发明包括治疗人患者中的经典霍奇金淋巴瘤(cHL)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中在(a)一线或多线针对cHL的疗法，(b) 2线或更多线针对cHL的疗法，或(c) 3线或更多线针对cHL的疗法之后，患者已经复发。

在实施方案E6和E7的子实施方案中，所述患者是成年患者。

在实施方案E6和E7的替代子实施方案中，所述患者是儿科患者。

在第八个实施方案(实施方案E8)中，本发明包括治疗人患者中的局部晚期或转移性尿路上皮癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E8的子实施方案中，所述患者不适合进行含顺铂的化疗。

在实施方案E8的子实施方案中，所述患者在含铂化疗期间或之后或在用含铂化疗进行新辅助或辅助治疗的12个月内具有疾病进展。

在实施方案E8的子实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1 (CPS >10)。

在第九个实施方案(实施方案E9)中，本发明包括治疗人患者中的不可切除或转移性、微卫星不稳定性-高(MSI-H)或错配修复(MMR)缺陷的实体瘤的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E9的一个子实施方案中，所述患者在先前的抗癌治疗之后具有疾病进展。

在第十个实施方案(实施方案E10)中，本发明包括治疗人患者中的不可切除或转移性、MSI-H或MMR缺陷的结肠直肠癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E10的一个子实施方案中，所述患者在先前用氟嘧啶、奥沙利铂和伊立替康治疗后具有疾病进展。

在第十一个实施方案(实施方案E11)中，本发明包括治疗人患者中的复发性局部晚期或转移性胃癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第十二个实施方案(实施方案E12)中，本发明包括治疗人患者中的复发性局部晚期或转移性胃食管连接腺癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E11和E12的子实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1 [组合阳性评分(CPS) ≥1]。

在实施方案E11和E12的子实施方案中，所述患者在一线或多线先前疗法时或之后具有疾病进展。在具体实施方案中，所述线先前疗法包括含氟嘧啶化疗和含铂化疗。

在实施方案E11和E12的子实施方案中，所述患者在两线或更多线先前疗法(包括含氟嘧啶化疗和含铂化疗)时或之后具有疾病进展。

在实施方案E11和E12的子实施方案中，所述患者在一线或多线先前疗法(包括HER2/neu-靶向疗法)时或之后具有疾病进展。

在实施方案E11和E12的子实施方案中，所述患者在两线或更多线先前疗法(包括HER2/neu-靶向疗法)时或之后具有疾病进展。

在第十三个实施方案(实施方案E13)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述患者具有选自以下的癌症：黑色素瘤、肺癌、头颈癌、膀胱癌、乳腺癌、胃肠道癌、多发性骨髓瘤、肝细胞癌、淋巴瘤、肾癌、间皮瘤、卵巢癌、食道癌、肛门癌、胆道癌、结肠直肠癌、宫颈癌、甲状腺癌和唾液腺癌。

在第十四个实施方案(实施方案E14)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述患者具有小细胞肺癌。

在第十五个实施方案(实施方案E15)中，本发明包括治疗人患者中的非霍奇金淋巴瘤的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E15的一个子实施方案中，所述非霍奇金淋巴瘤是原发性纵隔大B-细胞淋巴瘤(PMBCL)。在其中所述患者具有PMBCL的一些实施方案中，所述患者具有难治性PMBCL。在一些实施方案中，所述患者在一线或多线先前疗法之后已经复发。在一些实施方案中，所述患者在两线或更多线先前疗法之后已经复发。在一些实施方案中，所述患者先前未用另一线疗法治疗。

在第十六个实施方案(实施方案E16)中，本发明包括治疗人患者中的转移性鳞状NSCLC的方法，其包括：(1)每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，和(2)向所述患者施用(i)卡铂和紫杉醇，或(ii)卡铂和nab-紫杉醇。

在第十七个实施方案(实施方案E17)中，本发明包括治疗人患者中的默克尔细胞癌(MCC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。在实施方案E17的具体子实施方案中，所述癌症是复发性局部晚期MCC。在实施方案E17的具体子实施方案中，所述癌症是转移性MCC。

在实施方案E17的子实施方案中，所述患者是成年患者。在实施方案E17的替代子实施方案中，所述患者是儿科患者。

在第十八个实施方案(实施方案E18)中，本发明包括用于辅助治疗人患者中的黑色素瘤的方法，其包括每近似六周一次向患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述患者先前已经切除一个或多个黑色素瘤病变。在实施方案E18的子实施方案中，所述方法包括治疗切除的高危III期黑色素瘤。

在第十九个实施方案(实施方案E19)中，本发明包括治疗人患者中的肝细胞癌(HCC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。在实施方案E19的一些实施方案中，所述患者先前用索拉非尼治疗。

在第二十个实施方案(实施方案E20)中，本发明包括治疗人患者中的肾细胞癌(RCC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E20的子实施方案中，所述癌症是晚期透明细胞RCC。

在实施方案E20的子实施方案中，所述患者具有晚期或转移性肾细胞癌(RCC)。

在实施方案E20的子实施方案(实施方案E20A)中，所述患者用阿西替尼进一步治疗。在本发明的子实施方案中，口服阿西替尼。

在实施方案E20A的具体实施方案中，所述患者近似每12小时或一天两次服用5 mg阿西替尼。

在实施方案E20A的替代实施方案中，阿西替尼剂量为每天两次2.5 mg、3 mg、7 mg或10 mg。

在第二十一个实施方案(实施方案E21)中，本发明包括治疗人患者中的乳腺癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E21的一个子实施方案中，所述乳腺癌是三重阴性的乳腺癌。

在实施方案E21的一个子实施方案中，所述乳腺癌是ER+/HER2-乳腺癌。

在第二十二个实施方案(实施方案E22)中，本发明包括治疗人患者中的鼻咽癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第二十三个实施方案(实施方案E23)中，本发明包括治疗人患者中的甲状腺癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第二十四个实施方案(实施方案E24)中，本发明包括治疗人患者中的唾液腺癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在第二十五个实施方案(实施方案E25)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述癌症选自：黑色素瘤、非小细胞肺癌、复发性或难治性经典霍奇金淋巴瘤、原发性纵隔大B-细胞淋巴瘤、头颈部鳞状细胞癌、尿路上皮癌、食道癌、胃癌、宫颈癌、PMBCL、MSI-H癌、肝细胞癌和默克尔细胞癌。

在第二十六个实施方案(实施方案E26)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述癌症是血液恶性肿瘤(Heme malignancy)。

在实施方案E26的一个子实施方案中，所述血液恶性肿瘤选自：急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、弥漫性大B-细胞淋巴瘤(DLBCL)、EBV-阳性DLBCL、原发性纵膈大B-细胞淋巴瘤、富含T-细胞/组织细胞的大B-细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(HL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓细胞白血病-1蛋白(MCL-1)、骨髓增生异常综合征(MDS)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)和小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)。

在第二十七个实施方案(实施方案E27)中，本发明包括治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段，其中所述患者患有具有高突变负荷的肿瘤。

在具体实施方案中，高突变负荷是每兆碱基检查的基因组至少约10个突变，每兆碱基检查的基因组至少约11个突变，每兆碱基检查的基因组至少约12个突变，或每兆碱基检查的基因组至少约13个突变。

在第二十八个实施方案(实施方案E28)中，本发明包括治疗人患者中的食道癌的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。

在实施方案E28的子实施方案中，所述患者在接受所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段之前用一线先前标准疗法进行。在一个进一步实施方案中，所述患者在接受所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段之前用一线或多线先前标准疗法进行。在另一个实施方案中，所述患者在接受所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段之前用两线或更多线先前标准疗法进行。在具体实施方案中，所述标准疗法包括以下中的一种或多种：紫杉醇、多西他赛或伊立替康。

在实施方案E28的子实施方案中，所述患者具有食管的晚期或转移性腺癌或鳞状细胞癌。

在实施方案E28的子实施方案中，所述患者具有食管胃连接部的晚期或转移性Siewert I型腺癌。

在实施方案E28的子实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1 (组合阳性评分(CPS) ≥10)。

在第二十九个实施方案(实施方案E29)中，本发明包括治疗人患者中的高危非肌肉侵袭性膀胱癌(NMIBC)的方法，其包括每近似六周一次向所述患者施用400 mg的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述患者患有具有原位癌(CIS)或CIS加上乳头状疾病的NMIBC。

在实施方案E29的一个子实施方案中，所述患者在用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段治疗之前先前用标准疗法治疗。在一些实施方案中，所述先前疗法是卡介苗(BCG)疗法。在具体实施方案中，所述患者对BCG疗法没有应答。在一些实施方案中，所述患者不适合进行根治性膀胱切除术或选择不经历根治性膀胱切除术。

在上述本发明的任何方法(包括实施方案E1-E29)中，所述PD-1抗体或抗原结合片段是本文的发明详述的第II部分“可用于本发明中的PD-1抗体和抗原结合片段”中所述的任何抗体或抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗PD-1抗体是派姆单抗或其抗原结合片段，或与派姆单抗交叉竞争结合人PD-1的抗体。在一些实施方案中，所述抗PD-1抗体是派姆单抗的变体；即抗体或抗原结合片段，其具有包含如SEQ ID NO:1、2和3中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ ID NO:6、7和8中所示的氨基酸序列的重链CDR。

在上述本发明的任何方法(包括实施方案E1-E29)中，每近似六周一次向所述患者施用所述PD-1抗体或抗原结合片段。在具体实施方案中，每六周、每六周±5天、±4天、±3天、±2天或±1天向所述患者施用所述PD-1抗体或抗原结合片段。

在本文的任何治疗方法的实施方案中，向患者施用包含本文所述的任何抗PD-1抗体或抗原结合片段的药物的静脉内输注。

在本文的任何治疗方法的替代实施方案中，向所述患者皮下施用(例如，由临床医生)或所述患者皮下施用任何抗PD-1抗体或抗原结合片段。

在本文所述的任何方法(包括实施方案E1-E29及其子实施方案)中，所述方法可以进一步包括一种或多种“额外治疗剂”(如本文所用，“额外治疗剂”是指相对于所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段的额外药剂)。所述额外治疗剂可以是，例如，除了抗PD-1抗体以外的化疗剂、生物治疗剂(包括但不限于针对CTLA4、VEGF、EGFR、Her2/neu、VEGF受体、其他生长因子受体、CD20、CD40、CD-40L、OX-40、4-1BB和ICOS的抗体)、免疫原性剂(例如，减弱的癌细胞、肿瘤抗原、抗原呈递细胞诸如用肿瘤衍生的抗原或核酸脉冲的树突细胞、免疫刺激细胞因子(例如，IL-2、IFNα2、GM-CSF)，和用编码免疫刺激细胞因子(例如但不限于GM-CSF)的基因转染的细胞。

如上所示，在本发明的方法的一些实施方案中，所述方法进一步包括施用额外治疗剂。在具体实施方案中，所述额外治疗剂是抗CTLA4抗体或其抗原结合片段，抗LAG3抗体或其抗原结合片段，抗GITR抗体或其抗原结合片段，抗TIGIT抗体或其抗原结合片段，抗CD27抗体或其抗原结合片段，抗ILT3抗体或其抗原结合片段，或抗ILT4抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是表达IL-12的新城疫病毒载体。在一个进一步实施方案中，所述额外治疗剂是地那西利(dinaciclib)。在另一个实施方案中，所述额外治疗剂是navarixin。在一个进一步实施方案中，所述额外治疗剂是vicriviroc。

在一个进一步实施方案中，所述额外治疗剂是溶瘤病毒。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是柯萨奇病毒或CVA21。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是CAVATAK™。

在又另一个实施方案中，所述额外治疗剂是STING激动剂。在一个进一步实施方案中，额外治疗剂是IL-27拮抗剂。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是PARP抑制剂。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是多激酶抑制剂。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是MEK抑制剂。在一个实施方案中，所述额外治疗剂是4-1BB激动剂。

化疗剂的实例包括烷化剂诸如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯诸如白消安、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡；氮杂环丙烷类诸如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替派(uredopa)；乙撑亚胺类和甲基蜜胺类包括六甲蜜胺(altretamine)、三亚乙基蜜胺(triethlenemelamine)、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三甲基蜜胺(trimethylolomelamine)；多聚乙酰类(acetogenins) (特别是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成的类似物托泊替康)；苔藓抑素(bryostatin)；callystatin；CC-1065 (包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；隐藻素(cryptophycin) (特别是隐藻素1和隐藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；多卡米星(duocarmycin) (包括合成类似物，KW-2189和CBI-TMI)；软珊瑚醇(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；珊瑚类二萜(sarcodictyin)；海绵素(spongistatin)；氮芥类诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、氧化二氯甲基二乙胺盐酸盐、美法仑、新恩比兴(novembichin)、苯乙酸氮芥胆甾醇酯(phenesterine)、泼尼氮芥、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，诸如卡莫司汀、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀(ranimustine)；抗生素，诸如烯二炔抗生素类(例如，加利车霉素(calicheamicin)，特别是加利车霉素γ1I和加利车霉素phiI1，参见例如Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33:183-186 (1994)；达内霉素(dynemicin)，包括达内霉素A；双磷酸盐类，诸如氯膦酸(clodronate)；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔类抗生素发色团)、阿克莱诺霉素(aclacinomysin)、放线菌素D、奥瑟霉素(authramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素C、carabicin、洋红霉素(caminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycinis)、更生霉素、道诺霉素、地托比星(detorubicin)、6-二氮杂-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(包括吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉子基(pyrrolino)-多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素类诸如丝裂霉素C、麦考酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链霉黑素、链脲菌素、杀结核菌素、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢药，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨、阿扎胞苷(6-azacitidine)、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素类，诸如二甲睾酮、屈他雄酮丙酸盐、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯；抗肾上腺药，诸如氨基格鲁米特、米托坦、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；贝塔布辛(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；伊达曲仙(edatraxate)；德弗法明(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；伊弗尼辛(elfornithine)；依利醋铵；埃博霉素(epothilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明(lonidamine)；美登素生物碱类(maytansinoids)，诸如美坦辛(maytansine)和安丝菌素(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；雷佐生(razoxane)；根霉素；西左非兰(sizofuran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2′,2″-三氯代三乙胺；单端孢霉烯类毒素(trichothecenes) (特别是T-2毒素、verracurinA, 杆孢菌素(roridin) A和蛇形菌素(anguidine))；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派(thiotepa)；紫杉烷(taxoid)，例如紫杉醇和多西他赛；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；二盐酸米托蒽醌注射液(novantrone)；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基蝶呤；卡培他滨(xeloda)；伊班膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；维A酸类，诸如维A酸；卡培他滨；以及上述任何药物的药学上可接受的盐、酸和衍生物。也包括用来调节或抑制作用于肿瘤的激素的抗-激素剂，诸如抗-雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、那洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和托瑞米芬(toremifene) (Fareston)；抑制芳香酶的芳香酶抑制剂，其调节肾上腺中雌激素的产生，诸如例如4(5)-咪唑类、氨基格鲁米特、醋酸甲地孕酮、依西美坦(exemestane)、福美坦(formestane)、法倔唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole)、来曲唑和阿那曲唑(anastrozole)；和抗-雄激素类，诸如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及上述任何药物的药学上可接受的盐、酸或衍生物。

在包括施用额外治疗剂(即，除了PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段以外)的步骤的一些实施方案中，使用当将所述组合疗法中的额外治疗剂用作单一疗法用于治疗相同癌症时常用的相同剂量方案(剂量、频率和治疗持续时间)施用所述药剂。在其他实施方案中，与当将所述组合疗法中的额外治疗剂用作单一疗法时相比，所述患者接受更低总量的该药剂，例如，更小的剂量、更低频率的给药和/或更短的治疗持续时间。

可以口服地、肿瘤内地或胃肠外地施用组合疗法中的额外治疗剂，包括静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下、直肠、局部和经皮施用途径。例如，所述组合治疗可以包含抗PD-1抗体或其抗原结合片段以及抗CTLA抗体或其抗原结合片段(其两者均可以静脉内或皮下施用)，以及化疗剂(其可以经口施用)。

本发明的组合疗法可以在除去肿瘤的外科手术之前或之后使用，且可以在辐射疗法之前、期间或之后使用。当患者的肿瘤不可切除时，也可以使用本发明的组合疗法。

在一些实施方案中，将本发明的组合疗法施用于先前没有用生物治疗剂或化疗剂治疗的患者，即，是未经治疗的。在其他实施方案中，将所述组合疗法施用于在用生物治疗剂或化疗剂的先前疗法之后没有实现持久应答的患者，即，所述患者是经历过治疗的。

本发明的组合疗法可用于治疗这样的肿瘤：其足够大以致于通过触诊或通过本领域中众所周知的成像技术(诸如MRI、超声或CAT扫描)发现。在一些实施方案中，本发明的组合疗法用于治疗具有至少约200 mm³、300 mm³、400 mm³、500 mm³、750 mm³或最多达1000 mm³的尺寸的晚期肿瘤。

在一些实施方案中，将本发明的组合疗法施用于具有表达PD-L1的癌症的人患者。在一些实施方案中，在取自患者的肿瘤样品的FFPE或冷冻组织切片上在IHC测定中使用诊断性抗人PD-L1抗体或其抗原结合片段检测PD-L1表达。在用抗PD-1抗体或其抗原结合片段的治疗开始之前，患者的医师可以安排诊断测试来确定取自患者的肿瘤组织样品中的PD-L1表达，但设想，所述医师可以在治疗开始之后的任何时间(诸如例如在治疗周期完成后)安排第一个或后续诊断测试。

额外治疗剂的剂量的选择取决于几个因素，包括实体的血清或组织转换率、症状的水平、实体的免疫原性和所治疗个体中的靶细胞、组织或器官的可及性。额外治疗剂的剂量应当是提供可接受的副作用水平的量。因此，每种额外治疗剂(例如生物治疗剂或化疗剂)的剂量量和给药频率将部分地取决于具体治疗剂、所治疗的癌症的严重程度和患者特征。选择适当剂量的抗体、细胞因子和小分子的指导是可获得的。参见，例如Wawrzynczak(1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina(编) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker,New York, NY; Bach (编) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert等人 (2003) New Engl. J. Med. 348:601-608; Milgrom等人 (1999) New Engl. J. Med. 341:1966-1973;Slamon等人 (2001) New Engl. J. Med. 344:783-792; Beniaminovitz等人 (2000) New Engl. J. Med. 342:613-619; Ghosh等人 (2003) New Engl. J. Med. 348:24-32;Lipsky等人 (2000) New Engl. J. Med. 343:1594-1602; Physicians' Desk Reference2003 (Physicians' Desk Reference, 第57版); Medical Economics Company; ISBN:1563634457; 第57版(November 2002)。适当的剂量方案的确定可通过临床医师，例如使用本领域中已知或怀疑影响治疗或预测影响治疗的参数或因素进行，并将取决于例如，患者的临床史(例如先前疗法)，待治疗的癌症的类型和分期和对组合疗法中的一种或多种治疗剂的应答的生物标志物。

IV. 组合物和试剂盒

本发明还涉及包含一定剂量的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)或其抗原结合片段和药学上可接受的载体或赋形剂的组合物，其中所述剂量为约400 mg。所述抗PD-1抗体可以例如使用常规细胞培养和回收/纯化技术在CHO细胞中产生。

在本发明的实施方案中，所述组合物进一步包含在约pH 5.0至pH 6.0的组氨酸缓冲液。在具体实施方案中，组氨酸以约10 mM的浓度存在。

在本发明的实施方案中，所述组合物进一步包含蔗糖。在具体实施方案中，蔗糖以约70 mg/mL的浓度存在。

在本发明的实施方案中，所述组合物进一步包含聚山梨醇酯80。在具体实施方案中，聚山梨醇酯80以约0.2 mg/mL的浓度存在。

在一些实施方案中，所述组合物包含10 mM组氨酸(pH 5.5)、7%蔗糖、0.02%聚山梨醇酯80和400 mg抗PD-1抗体或其抗原结合片段。

在本发明的实施方案中，所述组合物是液体。

在替代实施方案中，所述组合物是冻干的。

在本发明的组合物中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段可以是即发明详述的第II部分“可用于本发明中的PD-1抗体和抗原结合片段”中所述的任何抗体或抗原结合片段(例如派姆单抗)。

在一些实施方案中，包含抗PD-1抗体作为PD-1拮抗剂的组合物可作为液体制剂提供或通过在使用之前用注射用无菌水重构冻干粉末而制备。WO 2012/135408描述了适合用于本发明中的包含派姆单抗的液体和冻干药物的制备。

本发明还涉及用于治疗具有癌症的患者的试剂盒，所述试剂盒包含：(a) 400 mg抗PD-1抗体或其抗原结合片段，和(b)用于在本文描述的用于治疗癌症的任何方法中使用抗PD-1抗体或其抗原结合片段的说明书。

在本发明的任何试剂盒中，所述PD-1抗体或抗原结合片段可以是发明详述的第II部分“可用于本发明中的PD-1抗体和抗原结合片段”中所述的任何抗体或抗原结合片段。

本发明的试剂盒可以在容器和包装插页中提供抗PD-1或其抗原结合片段。所述容器含有至少一剂(即约400 mg)包含抗PD-1抗体或其抗原结合片段的药物，和包含用于使用所述药物治疗具有癌症的患者的指导的包装插页或标签。所述容器可以由相同的或不同的形状(例如，小瓶、注射器和瓶子)和/或材料(例如，塑料或玻璃)构成。所述试剂盒可以进一步包含在药物施用中可能有用的其他材料，诸如稀释剂、过滤器、IV袋和管线、针头和注射器。在所述试剂盒的一些优选实施方案中，该说明书指出该药物意欲用于治疗具有肿瘤的患者，其中所述肿瘤通过例如IHC测定法表达PD-L1。在一些实施方案中，所述肿瘤具有>1%PD-L1的肿瘤比例评分(TPS)。在另一个实施方案中，所述肿瘤具有>50% PD-L1的TPS。PD-L1TPS是样品中的表达PD-L1的肿瘤细胞的数目。在进一步实施方案中，所述肿瘤具有>5% PD-L1、>10 PD-L1、>15% PD-L1、>20% PD-L1、>25% PD-L1、>30% PD-L1、>35% PD-L1、>40% PD-L1或>45% PD-L1的TPS。在另一个实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1，其中CPS为>10%。在另一个实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1，其中CPS为>5%。在另一个实施方案中，所述患者的肿瘤表达PD-L1，其中CPS为>1%。

从本文所含的教导，本发明的这些和其他方面(包括下面列出的示例性具体实施方案)将是显而易见的。

一般方法

分子生物学中的标准方法描述于：Sambrook, Fritsch和Maniatis (1982 & 1989第2版，2001第3版) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring HarborLaboratory Press, Cold Spring Harbor, NY；Sambrook和Russell (2001) Molecular Cloning, 第3版, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY；Wu (1993) Recombinant DNA, 第217卷, Academic Press, San Diego, CA) 。标准方法还出现于Ausbel, 等人(2001) Current Protocols in Molecular Biology, 第1-4卷,John Wiley and Sons, Inc. New York, NY，其描述细菌细胞中的克隆和DNA诱变(第1卷)、哺乳动物细胞和酵母中的克隆(第2卷)、糖缀合物和蛋白表达(第3卷)和生物信息(第4卷)。

描述了用于蛋白纯化的方法，包括免疫沉淀、色谱法、电泳、离心和结晶(Coligan等人(2000) Current Protocols in Protein Science,第1卷, John Wiley and Sons,Inc., New York)。描述了化学分析、化学修饰、翻译后修饰、融合蛋白的产生、蛋白的糖基化(参见例如Coligan等人(2000) Current Protocols in ProteinScience，第2卷 ，JohnWiley and Sons, Inc., New York；Ausubel等人(2001) Current Protocols in Molecular Biology，第3卷 ，John Wiley and Sons,Inc., NY, NY，第16.0.5-16.22.17页；Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis,MO；第45-89页；Amersham Pharmacia Biotech(2001) BioDirectory, Piscataway, N.J.，第384-391页)。描述了多克隆和单克隆抗体的产生、纯化和片段化(Coligan等人(2001)Current Protocols in Immunology，第1卷，John Wiley and Sons, Inc., New York；Harlow和Lane(1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor, NY；Harlow和Lane，同上)。用于表征配体/受体相互作用的标准技术是可得的(参见例如Coligan等人(2001) Current Protocols in Immunology，第4卷 ，John Wiley, Inc., New York)。

可制备单克隆、多克隆和人源化抗体(参见例如Sheperd和Dean(编辑) (2000)Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY；Kontermann和Dubel(编辑) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York；Harlow和Lane(1988)Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ColdSpring Harbor, NY，第139-243页；Carpenter等人(2000) J. Immunol. 165：6205；He等人(1998) J. Immunol. 160：1029；Tang等人(1999) J. Biol. Chem. 274: 27371-27378；Baca等人(1997) J. Biol. Chem. 272: 10678-10684；Chothia等人(1989) Nature 342:877-883；Foote和Winter (1992) J. Mol. Biol. 224: 487-499；美国专利号6,329,511)。

人源化的一种替代方案是使用在噬菌体上展示的人类抗体文库或在转基因小鼠中人类抗体文库(Vaughan等人(1996) Nature Biotechnol. 14: 309-314；Barbas (1995)Nature Medicine 1: 837-839；Mendez等人(1997) Nature Genetics 15: 146-156；Hoogenboom和Chames (2000) Immunol. Today 21: 371-377；Barbas等人(2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ColdSpring Harbor, New York；Kay等人(1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA；de Bruin等人(1999) Nature Biotechnol. 17: 397-399)。

抗原的纯化不是抗体产生所必需的。动物可用携带目标抗原的细胞免疫。然后可以从免疫的动物分离脾细胞，且脾细胞可与骨髓瘤细胞系融合以产生杂交瘤(参见例如Meyaard等人(1997)Immunity 7: 283-290；Wright等人(2000) Immunity13: 233-242；Preston等人，同上；Kaithamana等人(1999) J. Immunol. 163: 5157-5164)。

抗体可缀合至例如小药物分子、酶、脂质体、聚乙二醇(PEG)。抗体可用于治疗、诊断、试剂盒或其他目的，且包括偶联至例如染料、放射性同位素、酶或金属(例如胶态金)的抗体(参见例如Le Doussal等人(1991) J. Immunol. 146: 169-175；Gibellini等人(1998) J. Immunol. 160: 3891-3898；Hsing和Bishop (1999) J. Immunol. 162: 2804-2811；Everts等人(2002) J. Immunol. 168: 883-889)。

用于流式细胞术的方法，包括荧光活化的细胞分选(FACS)，是可得的(参见例如Owens, 等人 (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 第2版 ；Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, JohnWiley and Sons, Hoboken, NJ)。适用于修饰核酸(包括核酸引物和探针、多肽和抗体)以用作例如诊断试剂的荧光试剂是可得的(Molecular Probes (2003) Catalogue,Molecular Probesy, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St.Louis, MO)。

描述了免疫系统的组织学的标准方法(参见例如Muller-Harmelink (编辑)(1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York,NY；Hiatt等人(2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, andWilkins, Phila, PA；Louis等人(2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY)。

用于测定例如抗原片段、前导序列、蛋白折叠、功能结构域、糖基化位点和序列比对的软件包和数据库是可得的(参见例如GenBank, Vector NTI® Suite (Informax,Inc, Bethesda, MD)；GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA)；DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada)；Menne, 等人(2000)Bioinformatics 16: 741-742；Menne, 等人(2000) Bioinformatics Applications Note16: 741-742；Wren, 等人 (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68: 177-181；von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133: 17-21；von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14: 4683-4690)。

为了描述和公开可能与本发明结合使用的方法和材料的目的，本文提及的所有出版物都通过引用并入。

已经参考附图在本文中描述了本发明的不同实施方案，应当理解，本发明不限于那些精确的实施方案，并且本领域技术人员可以在其中进行各种改变和修改而不背离如所附权利要求中所定义的本发明的范围或精神。

实施例1

基于使用建模和模拟的评估，跨多种肿瘤类型的派姆单抗的每周六次(Q6W)给药时间表

派姆单抗(目前被批准用于多种癌症适应症中的抗PD-1检查点抑制剂)，已经证明当以200 mg或2 mg/kg Q3W的剂量施用时的安全性和有效性。替代的延长给药方案将为患者和处方者两者提供便利和灵活性的益处。针对效力和安全性两者的派姆单抗药代动力学(PK)和暴露(浓度)-应答(E-R)关系的稳健表征允许使用基于模型的方法来支持派姆单抗的替代给药方案。

在达到PK稳态后，通过将暴露与批准的Q3W (200 mg和2 mg/kg)方案相匹配，选择派姆单抗的Q6W时间表的剂量；基于E-R的知识，对方案之间的效力和安全性建立桥梁。使用建立的派姆单抗的群体PK模型(具有时间依赖性的消除)(其充分描述了跨多种肿瘤类型的PK)，模拟了给药最长达24周的PK暴露，以确保所有受试者中的稳态。使用稳态下的暴露度量、AUCss或时间-平均的浓度(Cavg,ss)和谷值浓度(Cmin,ss)(其在方案之间进行比较)来对效力建立桥梁。通过确保稳态下的预测峰值浓度(Cmax,ss)低于10 mg/kg Q2W的最大临床施用和良好耐受的剂量的那些，来对派姆单抗在Q6W时间表的安全性概况建立桥梁。

预期在施用400 mg Q6W后派姆单抗的PK与批准的200 mg Q3W和2 mg/kg Q3W给药方案下的PK遵循相似的概况(参见图4)。如方案之间所比较的暴露度量概述于表4中。基于与在 200 mg Q3W达到的那些相比类似的预测暴露(Cavg,ss或AUCss，几何平均值(GM)高~1%)，选择派姆单抗的400 mg Q6W给药方案(参见图3)。预测少于1%的受试者具有的Cmin,ss与在200 mg Q3W和2 mg/kg Q3W的那些相比更低(图3)。400 mg Q6W的预测Cmax,ss远远低于(GM低~65%)用10 mg/kg Q2W(这已显示具有跨多种肿瘤类型的可接受的安全性)所实现的预测Cmax,ss(参见图2)。鉴于在临床测试的剂量下派姆单抗的相似暴露概况和建立的平坦的E-R关系，预期跨肿瘤类型用400 mg Q6W实现的临床结果与用200 mg Q3W的那些相似。

基于本文使用的建模和模拟方法，预期派姆单抗的400 mg Q6W给药方案会导致PK暴露类似于批准的200 mg Q3W和2 mg/kg给药方案。PK模拟表明，在派姆单抗暴露的方面–在400 mg Q6W的剂量间隔内的平均浓度(Cavg)(或曲线下面积[AUC])类似于在批准的200mg Q3W剂量下的平均浓度(Cavg)(或曲线下面积[AUC])，因此在给药方案之间对效力建立桥梁。在大多数(> 99%)的患者中，在400 mg Q6W的谷值浓度(Cmin)通常在用2 mg/kg或200mg Q3W实现的那些的范围内。在400 mg Q6W的峰值浓度(Cmax)远远低于10 mg/kg Q2W的最高临床测试剂量的Cmax，支持400 mg Q6W的安全性概况应当与确立的派姆单抗的安全性概况相当。表明派姆单抗的暴露-应答(ER)跨适应症是平坦的，并且在黑色素瘤和NSCLC中的OS预测表明，鉴于类似的暴露，预期在400 mg Q6W的效力类似于在200 mg或2 mg/kg Q3W的暴露；因此，预期400 mg Q6W跨适应症是有效的。

表4. 基于模拟的400 mg Q6W给药方案的派姆单抗PK暴露度量的概述

实施例2

评估具有晚期黑色素瘤的参与者中静脉内输注400 mg 派姆单抗 Q6W的安全性和耐受性的派姆单抗的1期随机临床研究

设计该研究以评价当每6周(Q6W)施用时派姆单抗的药代动力学(PK)、安全性和耐受性。向100名参与者的群组给予400 mg 派姆单抗 Q6W。从该参与者群组收集PK、效力和安全性数据。在该研究中登记具有晚期黑色素瘤的至少18岁的男性/女性参与者。该研究中未使用基于年龄、性别或其他特征的分层。

从第1至第18个周期，参与者接受400 mg 派姆单抗 Q6W的IV输注。从这些参与者收集PK、效力和安全性数据。结果提供了当Q6W施用时派姆单抗的初步PK、效力和安全性数据。基于对派姆单抗临床药理学及其充分建立的E-R概况的稳健理解，预期在其中批准200mg Q3W 派姆单抗(包括单一疗法以及与其他药剂组合)的所有治疗环境中，这种给药时间表产生类似的效力和安全性。因此，400 mg Q6W方案会具有与200 mg Q3W(基于建模和模拟分析的派姆单抗的临床使用中频率较低的给药方案)类似的益处-风险概况(参见实施例1)。

研究设计

根据良好临床实践(GCP)进行该研究，所述研究是派姆单抗在具有晚期黑色素瘤的参与者中的一项随机化、交叉、多中心、开放标签的安全性研究。该1期研究在具有不可切除或转移性黑色素瘤的参与者中进行。治疗期每42天继续最长达18个周期(近似2年)。只要参与者正从治疗受益并且没有疾病进展或不符合研究退出的任何标准，治疗就将继续。更详细地，该研究由以下组成：(1)最长达28-天持续时间的筛选期，以确保参与者符合该研究的条件；以及(2)用派姆单抗治疗的近似104周的干预期。参与者以Q6W经30分钟经由IV输注接受派姆单抗，持续最长达18个周期，和(3)随访期，在此期间监测参与者的AE持续30天，和监测参与者的严重不良事件(SAE)持续90天(如果参与者开始新的抗癌疗法，则为30天)。追踪在治疗中止时具有进行性AE的参与者，直至解决，稳定，以其他方式解释该事件，或参与者失去随访。

由于除了放射线照相疾病进展以外的原因而中止的参与者进行疾病状态的治疗后随访成像，直至根据RECIST 1.1放射线照相记录到疾病进展，并且当临床上适当时，根据iRECIST现场证实，开始非研究癌症治疗，撤回同意，变得失去随访或研究结束。在存活随访期中，针对总体存活通过电话跟踪所有参与者，直到死亡，参与者撤回同意，变得失去随访或研究结束。

登记入该研究的所有参与者都具有晚期黑色素瘤的诊断。该研究的结果将有助于理解当在Q6W给药方案中施用时的派姆单抗的PK特征。包括通常用于评估研究性全身性抗癌治疗的安全性参数作为安全性终点，包括但不限于不良事件(AE)/严重不良事件(SAE)的发生率、因果关系和结果；以及生命体征和实验室值的变化。将评价AE，如通过美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准[NCI CTCAE] 4.0版所定义。

该试验的目标是表征作为IV输注Q6W施用后派姆单抗的PK概况。在所有参与者完成第5周期后分析PK数据。PK参数包括AUC、Cmax和Cmin。抗药物抗体(ADA)的形成可能会混淆治疗剂量下的药物暴露，并且引发随后的输注-相关毒性。确定在第1、2、4和5周期各自的开始时对派姆单抗的抗药物抗体应答。探索ADAs的存在对派姆单抗的暴露的任何影响。

该研究使用基于RECIST 1.1标准的ORR，如通过不知情的独立中央审查(BICR)评价为主要终点。客观应答率是晚期研究的临床益处的可接受的量度，所述晚期研究证明新的抗肿瘤疗法的优越性，尤其是如果这种作用的量级很大且该疗法具有可接受的风险/益处概况。图像被提交至成像CRO (iCRO)，并由对治疗分配不知情的独立中央审查读取，以使应答评价中的偏差最小化。

总体存活(OS)是次要终点，并且已被公认为是在随机化临床研究中证明新的抗肿瘤疗法的优越性的金标准。RECIST 1.1在评价效力量度的图像时由BICR使用，并且在确定资格时由局部位点使用。RECIST工作组已经开发和公开了基于免疫的治疗剂的改良RECIST1.1 (iRECIST)评价，并得到来自行业和学术界的领先专家的意见，以及来自美国食品药物管理局和欧洲药品管理局的参与。目标病变的一维测量，非目标病变的定性评价以及应答类别与RECIST 1.1相同，直至通过RECIST 1.1看到进展。然而，如果参与者临床上稳定，则可以进行额外的成像以证实放射线照相进展。研究者使用iRECIST以评价肿瘤应答和进展，并且制定治疗决策以及用于探索性效力分析(如有规定)。

纳入标准

只有适用所有以下标准，参与者才有资格被纳入研究：

• 参与者具有晚期黑色素瘤的组织学或细胞学证实的诊断

• 根据美国癌症联合委员会(AJCC)分期系统，参与者具有不可切除的III期或IV期黑色素瘤，不适合局部疗法。

• 参与者未针对晚期或转移性疾病进行治疗，除了以下情况：BRAF V600突变型黑色素瘤可能已经接受护理标准靶向疗法(例如，BRAF/MEK抑制剂，单独或组合)，并且符合该研究的条件

• 如果其在随机化之前至少4周完成并且所有相关的AE都已经恢复至基线或稳定(最近的先前疗法的毒性作用解决至1级或更低[[除了脱发])，则允许先前的辅助或新辅助黑色素瘤疗法。如果受试者接受>30 Gy的主要手术或放射疗法，则他们必须已从由干预引起的毒性和/或并发症恢复。

如果女性参与者没有怀孕，没有母乳喂养并且同意在治疗期期间并且持续至少120天遵循特定的避孕指导或提供知情同意，则她符合参与的条件。

参与者应当具有东部合作肿瘤组(ECOG)表现状态0(完全活跃，能够不受限制地进行所有疾病前表现)或1(身体剧烈活动受限制，但能走动并能够进行轻度或久坐性质的工作，例如，灯塔工作，办公室工作)，并且应当具有如表5中所定义的足够的器官功能。在开始研究干预之前的72小时内收集样本。

表5. 足够的器官功能实验室值

排除标准

如果适用以下任何标准，则从研究排除参与者：

• 参与者是有生育能力的妇女(WOCBP)，其在随机化或治疗分配前72小时内尿液妊娠测试呈阳性。如果尿液测试呈阳性或不能被证实为阴性，则需要血清妊娠测试。

• 参与者已经接受针对不可切除或转移性黑色素瘤的先前全身治疗(除了上述纳入标准中所示)。

• 参与者已经接受用抗PD-1、抗PD-L1或抗PD-L2或针对另一种刺激性或共抑制性T-细胞受体(例如，OX-40和CD137)的药剂或在辅助环境中允许的除了抗CTLA-4以外的特异性靶向检查点途径的任何其他抗体或药物。

• 参与者在研究治疗开始的2周内已经接受先前的放射疗法。参与者必须已经从所有放射相关的毒性恢复，不需要皮质类固醇，并且没有放射性肺炎。

• 参与者在第一剂的研究药物前30天内已经接受活疫苗。活疫苗的实例包括，但不限于，以下：麻疹、腮腺炎、风疹、水痘/带状疱疹(鸡痘)、黄热病、狂犬病、卡介苗(BCG)和伤寒疫苗。用于注射的季节性流感疫苗通常是杀灭病毒疫苗，并且是允许的；然而，鼻内流感疫苗(例如，FluMist®)是减毒活疫苗，并且是不允许的。

• 参与者当前正在参与或已经参与研究性药剂的研究，或者在第一剂研究干预前的4周内已经使用研究性装置。

• 参与者在第一剂的研究药物前7天内被诊断为免疫缺陷或者正在接受慢性全身性类固醇疗法(给药超过每天10 mg的泼尼松当量)或任何其他形式的免疫抑制疗法。

• 参与者具有已知的额外恶性肿瘤，其在过去2年内正在进展或已经需要主动治疗。注意：不排除已经经历潜在治愈性疗法的具有皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌或原位癌(例如，乳腺癌、原位宫颈癌)的参与者。

• 参与者具有已知的活跃CNS转移和/或癌性脑膜炎。具有先前治疗的脑转移的参与者可以参与，条件是他们通过重复成像(注意重复成像应当在研究筛选期间进行)是放射线照相稳定(即，没有进展的证据)至少4周，临床上稳定并且在第一剂治疗干预前至少14天不需要类固醇治疗。

• 参与者对派姆单抗和/或其任何赋形剂具有严重的超敏反应(≥3级)。

• 参与者具有眼部黑色素瘤。

• 参与者具有活动性自身免疫性疾病，其在过去2年中已经需要全身治疗(即，使用疾病改良剂、皮质类固醇或免疫抑制药物)。替代疗法(例如，针对肾上腺或垂体功能不全的甲状腺素、胰岛素或生理性皮质类固醇替代疗法)不被视为全身治疗的形式，并且是允许的。

• 参与者具有(非感染性)肺炎病史，其需要类固醇或具有目前的肺炎。

• 参与者具有活动性感染，其需要全身疗法。

• 参与者具有人免疫缺陷病毒(HIV)感染的已知病史。

• 参与者具有乙型肝炎的已知病史(定义为乙型肝炎表面抗原[HBsAg]反应性)或已知的活动性丙型肝炎病毒(定义为检测到HCV RNA [定性])感染。

• 参与者具有任何病况、疗法或实验室异常的历史或当前证据(其可能混淆研究的结果，在整个研究持续时间中干扰参与者的参与)，或根据治疗研究者的意见不符合参与者参与的最佳利益。

• 参与者具有已知的精神病或药物滥用病症，其会干扰与研究要求的合作。

• 从筛选随访开始到研究干预的最后一次剂量后的120天，受试者在预计的研究持续时间内怀孕，哺乳或预期怀孕或生下孩子。

研究干预的中止和参与者退出

研究干预的中止不代表从研究退出。由于关于研究干预中止后的临床事件的某些数据可能对研究是重要的，因此它们必须通过参与者的最后安排的随访来收集，即使参与者已经中止研究干预。因此，在方案规定的治疗期完成前中止研究干预的所有参与者仍将继续参与研究。

参与者可以出于任何原因随时中止研究干预，或者在发生任何不利影响时由研究者酌情决定退出研究干预。此外，如果研究干预不适当，违反研究计划或出于行政和/或其他安全性原因，研究者可能使参与者中止研究干预。

出于以下任何原因，参与者必须中止研究干预，但继续在研究中进行监测：

• 参与者或参与者的合法可接受的代表要求中止研究干预。

• 参与者持续连续超过12周中断研究干预施用，或累积3次错过给药。

• 研究者认为参与者的医疗状况或个人情况使参与者处于由于继续施用研究干预而导致的不必要的风险中。

• 参与者具有证实的阳性血清妊娠测试。

• 参与者具有证实的放射照相疾病进展

• 参与者具有任何恶性肿瘤的任何进展或复发，或需要积极治疗的另一恶性肿瘤的任何发生

• 参与者具有不可接受的不良经历。

• 参与者具有除了上述另一恶性肿瘤以外的并发疾病，这阻止进一步的治疗施用。

• 研究者决定中止治疗。

• 参与者具有复发性2级肺炎

• 参与者已经完成派姆单抗的35次治疗(近似2年)

如果参与者或参与者的合法可接受的代表从研究撤回同意，则该参与者退出研究。如果参与者退出研究，则他们将不再接受研究治疗或在安排的方案随访中进行跟踪。

知情同意

研究者或具有医学资格的指定人员在参与临床研究之前获得来自每个潜在参与者或每个参与者的合法可接受的代表的书面同意。如果在研究期间参与者的状态发生变化(例如，大多数要求的健康或年龄)，则研究者或具有医学资格的指定人员确保存在适当的同意。

效力/评价

肿瘤评价包括所有已知或疑似的疾病部位。在基线以及当怀疑疾病进展或脑转移时，影像学可以包括胸部、腹部和骨盆计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)。强烈优选通过CT获取肿瘤成像。对于胸部、腹部和骨盆，当禁忌使用用含碘对比剂的CT或当当地实践要求时，可以使用对比增强MRI。对于脑部，MRI是强烈优选的成像方式。

在整个研究中，在参与者中使用相同的成像方式技术(理想地，相同的扫描仪，并且一致使用对比剂)。一致使用成像技术将有助于优化现有和新肿瘤负荷的评价的可重复性，并提高对应答或进展的评价的准确性。所有研究参与者的所有安排的图像都由研究者审查疾病进展。此外，在非安排时间点获得以确定疾病进展的图像(包括经由其他方式获得的那些)(以及由于其他原因获得、但基于研究者评价捕获放射学进展的图像)也在研究地点提交。

筛选时由BICR基于RECIST 1.1的可测量疾病的证实将用于确定参与者的资格。在参与者分配之前，需要BICR证实参与者的图像显示至少1个病变适合根据RECIST 1.1选择作为目标病变。

初始肿瘤成像

在第一剂当天之前的28天内进行筛选时的初始肿瘤成像。在筛选评价中不包括在治疗的第1周期第1天后获得的任何图像。现场研究小组审查筛选图像，以证实参与者具有根据RECIST 1.1可测量的疾病。如果进行脑成像以记录现有转移的稳定性，则尽可能使用MRI。如果MRI在医学上是禁忌的，则用对比剂的CT是可接受的替代品。

研究期间的肿瘤成像

在第一剂当天起12周(84天 ±7 天])进行第一次研究时成像评价。随后每9周(63天±7天)或更频繁地(如果在临床上适用)进行肿瘤成像。在52周(365天±7天)后，仍然进行治疗的参与者将每12周(84天±7天)进行成像。

通过重复成像评价证实客观应答。在观察到应答的第一指标后至少4周进行肿瘤成像以证实PR或CR。然后，参与者将返回至定期安排的成像，以下一个安排的成像时间点开始。如果其晚少于4周，则接受额外成像用于证实的参与者无需经历下一次安排的肿瘤成像；肿瘤成像可以在随后安排的成像时间点继续。

根据改良的iRECIST，在临床上稳定的参与者中，在疾病进展(PD)的首次放射学证据后4至8周现场证实疾病进展。具有未证实的疾病进展的参与者可以根据研究者的判断继续进行治疗，直至现场证实进展。如果其晚少于4周，则接受证实性成像的参与者无需经历下一次安排的肿瘤成像；如果在临床上稳定，则肿瘤成像可以在随后安排的成像时间点继续。如现场评价的已通过iRECIST证实疾病进展的参与者将中止研究治疗。

治疗结束和随访肿瘤成像

对于中止研究干预的参与者，在治疗中止时(±4周窗口)进行肿瘤成像。如果在中止日期之前的4周内获得先前的成像，则在治疗中止时不必进行成像。对于由于记录的疾病进展而中止研究干预的参与者，如果研究者选择不执行iRECIST，则这是最终需要的肿瘤成像。

对于中止研究干预而没有记录的疾病进展的参与者，应当作出每种努力以通过使用每12周(±7天)接受治疗的同时使用的相同成像时间表的肿瘤成像继续监测疾病状态，直至开始新的抗癌治疗，疾病进展，怀孕，死亡，撤回同意，或研究结束，以先到者为准。

疾病的RECIST 1.1评价

RECIST 1.1用作评价肿瘤应答、疾病进展日期的主要量度，并且作为与疾病状态相关的所有方案指南的基础(例如，中止研究干预)。尽管RECIST 1.1提及总共最多5个目标病变，每个器官2个，但如果临床相关，该方案允许总共最多10个目标病变，并且每个器官5个，以实现更广泛的肿瘤负荷的采样。

疾病的iRECIST评价

iRECIST基于RECIST 1.1，但适用于考虑用免疫治疗药物所见的独特肿瘤应答。研究者将使用iRECIST以评价肿瘤应答和进展，并做出治疗决策。当在临床上稳定时，参与者直到与当地放射学合作的研究者证实进展才中止。尽管有初始的放射性PD，但这种允许继续治疗考虑到以下观察：一些参与者在开始免疫疗法后的前几个月中可能已经具有短暂的肿瘤发作，且然后经历随后的疾病应答。

当现场评价PD的首次放射学证据时，被认为临床上不稳定的任何参与者都从研究干预中止，并且不需要具有重复的肿瘤成像用于通过iRECIST证实PD。如果研究者决定继续治疗，则参与者可以继续接受研究干预，并且应当根据研究者评价，在4至8周后重复肿瘤评价，以通过iRECIST证实PD。如果重复成像没有根据iRECIST证实PD，如研究者所评价，并且参与者继续是临床上稳定的，则研究干预继续并且遵循定期成像时间表。如果证实PD，则参与者从研究干预中止。

如果参与者具有证实的放射线照相进展(iCPD)，则中止研究干预；然而，如果参与者实现临床上有意义的益处，则考虑继续研究干预的例外。在这种情况下，如果继续研究干预，则将继续进行肿瘤成像。进展的首次放射学证据后的成像和治疗要求的概述提供于表6中。

表6 疾病进展的首次放射学证据后的成像和治疗

安全性评价

安全性评价包括收集AE和SAE，监测生命体征和实验室评价(包括妊娠测试)，心电图(ECG)的性能和身体检查以及同时用药的验证。

不良事件

研究者或有资格的指定人员评价每个受试者，以评估潜在的新的或恶化的AE，如果临床适用，则更频繁地进行评估。AE的评价包括但不限于类型，发生率，严重程度(通过美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准[NCI CTCAE] 4.0版分级)，时机，严重性和与研究药物的相关性。记录在研究期间发生的不良事件，包括基线体征和症状。

完全身体检查

研究者或有资格的指定人员在筛选时段期间进行完整的身体检查。临床上明显的异常发现被记录为病史。在第一剂研究干预后，新的临床上明显的异常发现被记录为AE。

定向身体检查

对于不需要完全身体检查的周期，研究者或有资格的指定人员在施用研究干预之前按照临床适用进行定向的身体检查。新的临床上明显的异常发现被记录为AE。

生命体征

生命体征在休息5分钟后在半仰卧位置测量，并且包括温度，收缩和舒张血压，呼吸速率，脉搏速率和重量。仅在筛选时收集高度。

心电图

使用当地标准程序进行标准的12-导联ECG。筛选时临床上明显的异常发现被记录为病史。在临床上必要时，在研究中进行额外一项或多项ECG。在随访ECG上看到的临床上明显的发现被记录为AE。

临床安全性实验室评价

表7中详述的测试由当地实验室进行。如根据研究者确定必要，可以在研究期间的任何时间进行额外测试。

表7 方案要求的安全性实验室评价

用于收集AE、SAE和其他可报告的安全性事件信息的时间段和频率

如果参与者正在接受安慰剂磨合(run-in)或其他磨合治疗，如果在签署同意表格后、但在治疗分配/随机化之前发生的所有AE、SAE和其他可报告的安全事件引起从研究排除参与者，或者是方案规定的干预(包括但不限于常规疗法、饮食或程序的洗出或中止)的结果，则研究者必须报告该事件。研究者必须报告从治疗分配/随机化时间到研究干预终止后30天的所有AE。

如果参与者开始新的抗癌疗法，则从治疗分配/随机化时间至停止研究干预后90天或停止研究干预后30天(以较早者为准)符合严格标准的所有AE必须由研究者报告。此外，如果在上述指定时间段以外的任何时间提请研究者注意的任何SAE被认为是药物相关的，则立即报告该事件。

效力分析的统计方法

客观应答率(ORR) – ORR被计算为：报告为已经实现通过BICR验证的证实的CR或PR的参与者的数目除以APaT群体中包括的参与者的数目的比率。没有进行ORR评价的APaT分析群体中的参与者将被计数为无应答者。对于真正的ORR，计算95%精确二项式CI(基于Clopper和Pearson,1934的方法)。

无进展存活(PFS) - 非参数Kaplan-Meier方法用于估算PFS分布。将计算自研究治疗的第一天起在不同的随访时间的中值PFS和PFS点估算值的95% CI。由于定期评价疾病进展，因此PD可以在未记录PD的最后一次评价和记录PD的评价之间的时间间隔内的任何时间发生。PD的真实日期将近似为通过BICR基于RECIST 1.1客观记录PD的首次评价日期。死亡始终被视为PFS事件。没有经历PFS事件的参与者将在最后一次疾病评价中进行检查。对于PFS的分析，如果事件(PD或死亡)在多于一次错过疾病评价之后立即发生，则在错过随访之前的最后一次疾病评价中对数据进行检查。同样，在开始新的抗癌疗法之前，在最后一次疾病评价时对新的抗癌疗法后的数据进行检查。如果参与者符合多种检查标准，则将应用最早出现的审查标准。

总体存活(OS) - 非参数Kaplan-Meier方法用于估算OS分布。计算自研究治疗的第一天起在各个随访时间计算中值OS和OS点估算值的95% CI。

应答的持续时间(DOR) - 使用非参数Kaplan-Meier方法描述性概述DOR。在该分析中仅包括显示CR或PR的参与者子集。

关键效力终点的分析策略

表8概述关键效力终点的主要分析方法。

表8. 关键效力终点的分析策略

安全性分析的统计方法

通过对所有相关参数(包括不良经历和实验室参数)的临床检查来评价安全性和耐受性。经由点估算值与95% CI概述由以下组成的广泛AE类别：具有任何AE、药物相关的AE、严重AE、与药物相关和严重的AE以及由于AE而中止的参与者的百分比(表9)。

表9. 安全性参数的分析策略

AE是临床研究参与者中的任何不良医学事件发生，与研究干预的使用在时间上相关，无论是否被认为与研究干预相关。因此，AE可以是与药物的使用在时间上相关的任何不利和意外的体征(包括异常的实验室发现)、症状或疾病(新的或恶化的)。包括以下作为AE：

• 任何异常的实验室测试结果(血液学、临床化学或尿液分析)或其他安全性评价(例如，ECG、放射学扫描、生命体征测量)，包括从基线恶化的那些，或在研究者的医学和科学判断中被认为临床显著的的那些。

• 慢性或间歇性预先存在的病况的恶化，包括病况的频率和/或强度的增加。

• 研究干预施用后检测或诊断的新病况，即使其在研究开始之前可能已经存在。

• 怀疑的药物-药物相互作用的体征、症状或临床后遗症。

• 研究干预或伴随用药的怀疑过量的体征、症状或临床后遗症。

• 研究期间的恶性肿瘤的体征和症状的恶化被报道为AE。通过放射线照相或其他方法上测量恶性病变评价的疾病进展不被报告为AE，除非该事件导致住院或死亡。

对于该研究的目的，以下事件不符合AE定义：

• 内科或外科程序(例如，内窥镜检查，阑尾切除术)：导致该程序的病况是AE。

• 其中没有发生不良医疗事件发生的情况(社交和/或方便入院)。

• 在研究开始时存在或检测到的未恶化的先前存在的疾病或病况的预期的日与日波动。

• 在知情同意之前计划进行手术以治疗尚未恶化的预先存在的病况。

如果事件不是根据以上定义的AE，则其不是SAE，即使满足严重病况。SAE被定义为在任何剂量下发生以下情况的任何不良医学事件发生：

• 导致死亡

• 威胁生命。“严重”的定义中的术语“威胁生命”是指其中参与者在事件时处于死亡的风险中的事件。它不是指假设可能引起死亡(如果其更严重)的事件。

• 需要住院患者住院或延长现有住院。住院被定义为住院患者住院，无论停留的长度，即使住院是继续观察的预防措施。针对尚未恶化的预先存在的病况的选择性程序的住院不是SAE。预先存在的病况是在使用MSD产品之前诊断出并记录在参与者的病史中的临床病况。

• 导致持续或显著的残疾/无行为能力。术语残疾意指人进行正常生活功能的能力的实质性破坏。此定义并非意欲包括具有相对较小医学意义的经历，诸如简单的头痛，恶心，呕吐，腹泻，流感和意外创伤(例如脚踝扭伤)，其可能干扰或阻止日常生活功能，但并不构成实质性破坏。

• 是服用该产品的参与者的后代中的先天性异常/出生缺陷，与诊断时间无关。

在决定SAE报告是否适于其他情况(诸如可能不会立即威胁生命或导致死亡或住院、但可危及参与者或可能需要医学或外科干预以预防以上定义中列出的其他结果之一的重要医学事件)中，做出医学或科学判断。这些事件通常被认为是严重的。此类事件的实例包括侵袭性或恶性癌症，在急诊室或家中对变应性支气管痉挛的强化治疗，不导致住院的血液体液不调或抽搐，或药物依赖或药物滥用的发展。

人口统计和基线特征

显示筛选、分配的受试者的数量和百分比，筛选失败的主要原因和中止的主要原因。对于所有登记的受试者，人口统计变量(例如，年龄、性别)、基线特征、主要和次要诊断以及先前和伴随疗法通过描述性统计数据或分类表进行概述。

亚组分析

为了确定应答率在各个亚组间是否一致，在以下分类变量的每个类别内估算主要终点的应答率的估算值(在标称95% CI内)：

• 年龄类别(<65岁 vs. ≥65岁)

• 性别(女性 vs. 男性)

• 种族(白人 vs. 非白人)

• 疾病阶段(III vs. IVM1a vs. IVM1b vs IVM1c)

• 脑转移(是 vs. 否)

• ECOG状态(0 vs. 1)

• PD-L1状态(阳性 vs. 阴性)

• BRAF野生型 vs. BRAF突变体(未先前治疗) vs. BRAF突变体(先前治疗)

产生森林图，其提供了上面列出的亚组类别间治疗效果的估算的点估算值和CI。从分析中排除了参与者少于10个的任何指定亚组。

本文引用的所有参考文献都通过引用并入，其并入程度如同每一个别出版物、数据库条目(例如，Genbank或GeneID条目)、专利申请或专利均具体指示通过引用并入一样。申请人遵循37 C.F.R. §1.57(b)(1)意欲这个陈述涉及各个和每一个别出版物、数据库条目(例如Genbank或GeneID条目)、专利申请或专利，其中各自均遵照37 C.F.R. §1.57(b)(2)明确鉴定，即使此类引用不直接接近通过引用并入的专用表述。本文中参考文献的引用并非意欲承认该参考文献是相关现有技术，也不意欲其构成关于这些参考文献或文件的内容或日期的任何承认。

Claims (43)

1.治疗人患者中的癌症的方法，其包括每近似六周向所述患者施用约400 mg的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：

(a) 包含如SEQ ID NO:1、2和3中所示的氨基酸序列的轻链互补决定区(CDR)和包含如SEQ ID NO:6、7和8中所示的氨基酸序列的重链CDR；或

(b) 包含如SEQ ID NO:11、12和13中所示的氨基酸序列的轻链CDR和包含如SEQ IDNO:14、15和16中所示的氨基酸序列的重链CDR。

2.权利要求1的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：

(a) 包含如SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:9的变体中所示的氨基酸序列的重链可变区，和

(b) 轻链可变区，其包含：

(i) 如SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:4的变体中所示的氨基酸序列，

(ii) 如SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:22的变体中所示的氨基酸序列，或

(iii) 如SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:23的变体中所示的氨基酸序列。

3.权利要求1或2的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含可变重链区和轻链可变区，所述可变重链区包含如SEQ ID NO:9中所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列。

4.权利要求1或2的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是单克隆抗体，其包含：

(a) 包含如SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:10的变体中所示的氨基酸序列的重链，和

(b) 包含如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:5的变体、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:24的变体、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:25的变体中所示的氨基酸序列的轻链。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是包含重链和轻链的单克隆抗体，所述重链包含如SEQ ID NO:10中所示的氨基酸序列，且所述轻链包含如SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症选自：黑色素瘤、非小细胞肺癌、头颈癌、尿路上皮癌、乳腺癌、胃肠道癌、多发性骨髓瘤、肝细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、肾癌、霍奇金淋巴瘤、间皮瘤、卵巢癌、小细胞肺癌、食道癌、肛门癌、胆道癌、结肠直肠癌、宫颈癌、甲状腺癌或唾液腺癌。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述患者患有具有高突变负荷的肿瘤。

8.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述患者具有微卫星不稳定性-高(MSI-H)或错配修复缺陷的实体瘤。

9.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是不可切除或转移性黑色素瘤。

10.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是转移性非小细胞肺癌(NSCLC)。

11.权利要求10的方法，其中所述患者患有具有高PD-L1表达的肿瘤[(肿瘤比例评分(TPS) ≥50%)]，且先前未用含铂化疗治疗。

12.权利要求10的方法，其中所述患者患有具有PD-L1表达的肿瘤(TPS ≥1%)，且先前用含铂化疗治疗。

13.权利要求11-12中任一项的方法，其中所述患者的肿瘤没有EGFR或ALK基因组畸变。

14.权利要求10-13中任一项的方法，其中所述方法进一步包括向所述患者施用培美曲塞和卡铂。

15.权利要求14的方法，其中所述患者具有非鳞状非小细胞肺癌，且所述培美曲塞约每21天以500 mg/m²的量施用于所述患者。

16.权利要求14或权利要求15的方法，其进一步包括在向所述患者施用培美曲塞之前约7天开始，并继续直至向所述患者施用最后一剂培美曲塞后约21天，向所述患者每天一次施用约400 μg至约1000 μg的叶酸。

17.权利要求14-16中任一项的方法，其进一步包括在第一次施用培美曲塞之前约1周和约每三个周期的培美曲塞施用，向所述患者施用约1 mg维生素B₁₂。

18.权利要求14-17中任一项的方法，其进一步包括在培美曲塞施用前一天、培美曲塞施用当天和培美曲塞施用后一天向所述患者一天两次施用地塞米松。

19.权利要求10的方法，其中所述NSCLC是鳞状的，且所述患者还用卡铂-紫杉醇或nab-紫杉醇治疗。

20.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。

21.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是(1)难治性经典霍奇金淋巴瘤(cHL)，或(2)cHL，且所述患者在3线或更多线针对cHL的疗法之后已经复发。

22.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是局部晚期或转移性尿路上皮癌。

23.权利要求22的方法，其中所述患者的肿瘤表达PD-L1 [组合阳性评分>10]。

24.权利要求22的方法，其中所述患者不适合进行含铂化疗或在含铂化疗期间或之后或在用含铂化疗的新辅助或辅助治疗的12个月内具有疾病进展。

25.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是局部晚期或转移性胃癌或胃食管连接腺癌。

26.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是宫颈癌。

27.权利要求26的方法，其中所述宫颈癌是复发性或转移性宫颈癌，并且所述患者在化疗时或化疗后具有疾病进展。

28.权利要求25、26或27的方法，其中所述患者的肿瘤表达PD-L1 [组合阳性评分(CPS)≥1]。

29.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是原发性纵隔大B-细胞淋巴瘤(PMBCL)。

30.权利要求29的方法，其中所述患者具有难治性PMBCL或在2线或更多线先前疗法之后已经复发。

31.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是切除的高危III期黑色素瘤。

32.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是肝细胞癌。

33.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是肾细胞癌(RCC)。

34.权利要求32的方法，其中所述癌症是晚期透明细胞RCC。

35.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述癌症是复发性、局部晚期或转移性默克尔细胞癌(MCC)。

36.权利要求1-35中任一项的方法，其中通过静脉内或皮下施用向所述患者施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段。

37.权利要求1-36中任一项的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段是派姆单抗。

38.组合物，其包含约400 mg的派姆单抗和药学上可接受的载体。

39.权利要求38的组合物，其进一步包含10 mM组氨酸，pH 5.5，7%蔗糖，和0.02%聚山梨醇酯80。

40.用于治疗具有癌症的患者的试剂盒，所述试剂盒包含：

(a) 约400 mg的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，和

(b) 用于在权利要求1-36中任一项的方法中使用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段的说明书。

41.权利要求40的试剂盒，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

42.权利要求38-39中任一项的组合物或权利要求40-41中任一项的试剂盒用于治疗患有癌症的个体的用途。

43.权利要求42的用途，其中所述癌症是黑色素瘤、肺癌、头颈癌、膀胱癌、乳腺癌、胃肠道癌、多发性骨髓瘤、肝细胞癌、淋巴瘤、肾癌、间皮瘤、卵巢癌、食道癌、肛门癌、胆道癌、结肠直肠癌、宫颈癌、甲状腺癌或唾液腺癌。

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