CN111642465A - 一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，包括以下步骤：将作为底部饲养瓶的第一个饲养瓶的瓶盖顶端涂上胶水；将第二个饲养瓶的底部与第一个饲养瓶盖粘贴在一起；将第二个饲养瓶底部，与第一个饲养瓶的瓶盖一起，刺穿形成孔洞；在第二个饲养瓶内加入垫子；在第一个饲养瓶内加入水；将第二个饲养瓶置于第一个饲养瓶顶部；将第二个饲养瓶与底部的饲养瓶的瓶盖拧紧，连接；在第二个饲养瓶底部加入少量的湿的饲养土；在第二个饲养瓶的湿土上加入胡萝卜和幼虫；在第二个饲养瓶内继续加入湿土。幼虫自主选择其栖息位置；在第二个饲养瓶的瓶盖上穿刺透气孔；旋紧饲养瓶盖后，置于饲养环境中。本发明饲养成本低，可大批量饲养，维护成本低，简单高效。
Description
技术领域
本发明属于昆虫饲养技术领域，涉及一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法。
背景技术
阿尔泰蝠蛾Hepialus altaicola Wang，隶属于鳞翅目Lepidoptera蝙蝠蛾科Hepialidae蝠蛾属Hepialus，仅分布于新疆的阿尔泰山，为新疆特有种昆虫，是新疆产珍贵药材——新疆虫草(菌)Ophiocordyceps gracilis的寄主昆虫。新疆虫草为新疆传统的哈萨克民族药，其成分和主要功效与冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis近似(马赟等，2012)。
以往的饲养蝠蛾的方法，一般将胡萝卜Daucus carota切块进行饲养，接触土壤后容易 腐烂变质，要频繁更换，并且没有有效解决幼虫自相残杀、昆虫饲养器补水等问题，或者在 高海拔原生环境下进行，或者饲养方法繁琐，或者造价高，不易实现批量化饲养。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法。
其具体技术方案为：
一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，包括以下步骤：
第一步，将作为底部饲养瓶的第一个饲养瓶的瓶盖顶端涂上胶水。
第二步，将第二个饲养瓶的底部与第一个饲养瓶盖粘贴在一起。
第三步，将第二个饲养瓶底部，与第一个饲养瓶的瓶盖一起，多次刺穿形成密集的孔洞；
第四步，在第二个饲养瓶内加入与底部面积大小一致的隔土透气垫子。
隔土透气垫子以聚乙烯或者聚丙烯(塑料)等性质稳定、耐腐蚀的材质。
第五步，在第一个饲养瓶内加入2/3以上体积的水。
第六步，将第二个饲养瓶置于第一个饲养瓶顶部。
第七步，将第二个饲养瓶与底部的饲养瓶借助粘贴的瓶盖拧紧，连接。
第八步，在第二个饲养瓶底部加入厚度约为1-2cm的湿的饲养土。
第九步，在第二个饲养瓶的湿土上加入胡萝卜和幼虫。
第十步，在第二个饲养瓶内继续加入湿土。幼虫可依据自己的习性，自主选择其栖息位 置。
第十一步，在第二个饲养瓶的瓶盖上穿刺透气孔。
第十二步，旋紧饲养瓶盖后，置于饲养环境中。
进一步，步骤八中，所述饲养土为野外采集幼虫的原生地土壤，需在121℃下，经过高 温湿热灭菌30-40min，冷却后，使用前，加蒸馏水，调节至土壤含水量与野外采集时所测相 一致，为30-40％之间。
步骤五和步骤八中所使用的水为灭菌后的蒸馏水。
进一步，步骤九中，所用的胡萝卜为未使用农药，且清洗干净，无表皮损伤的完整的胡 萝卜根茎。
进一步，步骤十二中，饲养条件为：饲养温度为8-18℃，光周期为15-16L：8-9D，环境相对湿度为60-90％RH(相对湿度)。
进一步，步骤九中，对于低龄的幼虫可以待胡萝卜的须根长出后，再接入饲养瓶中，取 食胡萝卜的须根；对3龄以上的幼虫，单瓶单只饲养。
进一步，步骤九中，室内饲养当年长成的大龄幼虫，要给予0-4℃的低温诱导，诱导时 间一般为3个月左右。
进一步，需要观察昆虫或者更换饲料时，先将上面的饲养瓶拧下，打开盖子倒出上层的 饲养土，取出饲料，再倒出剩余的土壤，寻找昆虫，或者更换新的饲料。观察昆虫后或者更 换饲料后，重新饲养昆虫时，对于幼虫，直接放入土壤，由其自由钻洞寻找合适栖身位置； 对于蛹，在加完湿土后，在湿土上依据原来蛹室的形态和位置，仿制其人工蛹室，再将其放 入其内，并注意开一个人工蛹道直通土壤表面，寻找和观察昆虫时，注意动作轻柔。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明的饲养方法该方法可以借助下面饲养瓶中的水分蒸发，不断为上面饲养瓶中的土 壤补充水分，若饲养温度过低时，可以用吸水的纱布条等连接水面与上面的土壤，进一步增 强补水效果。另外，透过透明的饲养瓶壁可清楚地观察水位，依据水分蒸发情况，适时加水， 加水时拧开下面的饲养瓶，加入蒸馏水即可，方便、快捷。在选择饲料过程中，要求胡萝卜 尽量完整无损伤，一则可以避免胡萝卜伤口处染菌；二则可以使胡萝卜受水蒸气的诱导产生 一些须根，为低龄幼虫提供食物；三则可以使胡萝卜正常存活，在光照培养箱中发芽，生长， 延长食物的保存时间乃至可持续生长。这些都利于幼虫的取食，并降低更换食料的频次。一 般情况下，依据幼虫的食量，1-3个月更换一次即可，这大大降低了以往饲养方法中对胡萝 卜进行切块供给(每周一次)的更换频次。
该方法简单易操作，不用频繁加水，或者频繁更换胡萝卜等饲料，并可有效避免幼虫的 自相残杀，有利于幼虫的生长，化蛹和羽化等，便于观察其生物学特性，饲养成本低，可大 批量饲养，维护成本低，简单高效。能提供大量的供实验用的卵、幼虫、蛹和成虫等各期昆 虫。
附图说明
图1为本发明阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法的流程示意图，其中，图1A为第一步至第六 步，图1B为第七步至第十二步；
图2为饲养得到的各期阿尔泰蝠蛾幼虫，图中标尺代表2mm；
图3为饲养成功的阿尔泰蝠蛾幼虫蜕皮现象，其中，图3A为刚蜕皮的幼虫(左)及虫蜕腹面观(右)，新蜕幼虫头壳为近白色，质软；图3B为幼虫蜕皮时，头壳沿蜕裂线裂开； 图3C为虫蜕背面观，所示头壳及前胸等处裂开的痕迹；
图4为饲养成活的阿尔泰蝠蛾幼虫(上)和死亡幼虫(下)；
图5为阿尔泰蝠蛾新化的蛹，图5A腹面观，图5B背面观；
图6为剖开蛹室后的阿尔泰蝠蛾蛹(左侧)及其最后一次虫蜕(右侧)；
图7为阿尔泰蝠蛾的蛹的体重数据，采用非配对t检验(Unpaired t test，twotailed，5％ significance level)分析；
图8为阿尔泰蝠蛾的雄蛹(左图)和雌蛹(右图)的尾部腹面观；
图9为羽化前的阿尔泰蝠蛾的发育过程，其中，图9A和图9B中，随着蛹发育的进行， 蛹的颜色逐渐加深，体重逐渐减轻；图9C为羽化前，蛹的尾部末端变空；
图10为羽化后的阿尔泰蝠蛾展翅过程，其中，图10A，刚从蛹壳中爬出的成虫，翅主要折叠于胸部，未伸展；图10B，随后，成虫迅速爬往高处；图10C，成虫爬至高处，静置， 逐渐展翅；图10D-图10F，成虫翅，进一步伸展并逐渐硬化；
图11为羽化后的阿尔泰蝠蛾雌(下)雄(上)性成虫；
图12为羽化后雌性阿尔泰蝠蛾的产卵状态；
图13为阿尔泰蝠蛾卵的大小及变色情况；初产卵为白色(图13A)，随后颜色逐渐加深, 最后变为黑色(图13B)。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方案对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
参照图1，一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，包括以下步骤：
首先，图1A中为第一步至第六步，具体为：
第一步，将作为底部饲养瓶的第一个饲养瓶的瓶盖顶端涂上胶水。
第二步，将第二个饲养瓶的底部与第一个饲养瓶盖粘贴在一起。
第三步，将第二个饲养瓶底部，与第一个饲养瓶的瓶盖一起，多次刺穿形成密集的孔洞， 孔洞以越密集越好，以方便下方的水蒸气透过，对于大小和直径没有具体要求，但边缘不宜 过多，以免影响材质的强度。
第四步，在第二个饲养瓶内加入与底部面积大小一致的隔土透气垫子。
第五步，在第一个饲养瓶内加入2/3以上体积的水。
第六步，将第二个饲养瓶置于第一个饲养瓶顶部。
然后，图1B中为第七步至第十二步，具体为：
第七步，将第二个饲养瓶与底部的饲养瓶借助粘贴的瓶盖拧紧，连接。
第八步，在第二个饲养瓶底部加入厚度约为1-2cm的湿的饲养土。
第九步，在第二个饲养瓶的湿土上加入胡萝卜和幼虫。
第十步，在第二个饲养瓶内继续加入湿土。幼虫可依据自己的习性，自主选择其栖息位 置。
第十一步，在第二个饲养瓶的瓶盖上穿刺透气孔。透气孔以越密集越好，以方便下方的 水蒸气透过，对于大小和直径没有具体要求，但边缘不宜过多，以免影响材质的强度。
第十二步，旋紧饲养瓶盖后，置于饲养环境中。
步骤八中，所述饲养土为野外采集幼虫的原生地土壤，需在121℃下，经过高温湿热灭 菌30-40min，冷却后，使用前，加蒸馏水，调节至土壤含水量与野外采集时所测相一致， 为30-40％之间。
步骤五和步骤八中所使用的水为灭菌后的蒸馏水。
步骤九中，所用的胡萝卜为未使用农药，且清洗干净，无表皮损伤的完整的胡萝卜根茎。
步骤十二中，饲养条件为：饲养温度为8-18℃，光周期为15-16L：8-9D，环境相对湿度为60-90％RH(相对湿度)。
步骤九中，对于低龄的幼虫可以待胡萝卜的须根长出后，再接入饲养瓶中，因为低龄幼 虫口器较小，不方便取食较大的胡萝卜，但可以取食胡萝卜的须根；对3龄以上的幼虫，宜 单瓶单只饲养，以避免其自相残杀，并方便观察研究其生物学特性。
步骤九中，室内饲养当年长成的大龄幼虫，要给予0-4℃的低温诱导，诱导时间一般为3 个月左右。
需要观察昆虫或者更换饲料时，可先将上面的饲养瓶拧下，打开盖子倒出上层的饲养土， 取出饲料，再倒出剩余的土壤，寻找昆虫，或者更换新的饲料。观察昆虫后或者更换饲料后， 重新饲养昆虫时，对于幼虫，可以直接放入土壤，由其自由钻洞寻找合适栖身位置；对于蛹， 可在加完湿土后，在湿土上依据原来蛹室的形态和位置，仿制其人工蛹室，再将其放入其内， 并注意开一个人工蛹道直通土壤表面，以便成虫羽化后能籍此爬出土壤。寻找和观察昆虫时， 注意动作轻柔，因幼虫和初化蛹体壁较薄，容易受伤而影响其成活率。
目前依据幼虫的头壳宽度和幼虫体宽、体长等数据分析，幼虫有9个龄期(图2)。从卵 中孵化出来的幼虫为1龄幼虫，随着幼虫取食，身体不断生长，但由于其外骨骼(外表皮)伸缩性有限，故幼虫需要不断蜕皮以适应其不断长大的身体，幼虫每蜕一次皮，则虫龄增加一龄。蜕皮时(图3A-图3C)，外骨骼沿头壳蜕裂线裂开，新蜕幼虫头壳较软，白色，随后 颜色逐渐加深，并且，头壳逐渐变硬。饲养成功的幼虫(图4)，身体白色或偏黄，会逐渐 变得肥硕，并且可以看到明显的脂肪体充盈，但是对于染病的幼虫则会表现消瘦，脂肪体含 量少，甚至躯体变黑，直至死亡。
野外采集的越冬幼虫，一般可以直接化蛹，但是对于室内饲养当年长成的大龄幼虫，要 给予0-4℃的低温诱导，诱导时间一般为3个月左右，否则幼虫将滞育不长或者只蜕皮不生长， 不能正常化蛹。若非实验观察所需，尽量不要将化蛹前的幼虫或者蛹取出，因为末龄幼虫所 选择的化蛹地点相对易于其正常羽化，新化的蛹如图5A-图5B所示，新化的蛹通体白色，质 软，仅棘刺有色素沉着，后蛹壳颜色逐渐由白色变黄、棕黄、红棕、棕褐色，颜色逐渐加深， 同时体壁逐渐硬化，体壁柔软易损伤，稍有破损则易染病，影响羽化率。饲养发现，阿尔泰 蝠蛾的幼虫常在土中钻出纵横交错的虫道，末龄幼虫在虫道的基础上，爬出一个通向土壤表 面的孔洞，周边吐丝形成蛹道，其下为更宽的蛹室，蛹室内壁一般也有末龄幼虫吐的丝茧附 着(图6)，可见蛹室内壁有幼虫所吐的丝形成一层丝茧，末龄幼虫在蛹室内蜕最后一次皮， 化蛹。新化的蛹通体白色，质软，仅棘刺有色素沉着，随后，蛹壳颜色逐渐由白色变黄色、 棕黄色、红棕色，直至棕褐色，同时体壁逐渐硬化。蛹在蛹室内，头部朝上，尾端朝下，以 方便成虫羽化后能沿蛹道爬出蛹室。
需要观察昆虫或者更换饲料时，可先将上面的饲养瓶拧下，打开盖子倒出上层的饲养土， 取出饲料，再倒出剩余的土壤，寻找昆虫，或者更换新的饲料。观察昆虫后或者更换饲料后， 重新饲养昆虫时，对于幼虫，可以直接放入土壤，由其自由钻洞寻找合适栖身位置；对于蛹， 可在加完湿土后，在湿土上依据原来蛹室的形态和位置，仿制其人工蛹室，再将其放入其内， 并注意开一个人工蛹道直通土壤表面，以便成虫羽化后能籍此爬出土壤。寻找和观察昆虫时， 注意动作轻柔，因幼虫和初化蛹体壁较薄，容易受伤而影响其成活率。
由于阿尔泰蝠蛾成虫具有飞行的能力，不便静态观察，手持时，易造成成虫损伤；所以， 在饲养过程中，在研究雌雄配比上，一般以观察蛹的雌雄性为主。借助阿尔泰蝠蛾蛹的雌雄 性差异特征，可为成虫配对时的性别比例把握提供一定的依据，具体辨别特征如下。
雌性阿尔泰蝠蛾的蛹在体重上明显大于雄蛹，但是两者有一定分布范围的重叠性，不能 依据体重将雌雄蛹分开(图7)。如图8所示，腹节序号已在图中标出，我们观察到，阿尔泰 蝠蛾雌蛹的第9腹节向第8腹节延伸(图8，空心箭头所示)，雄蛹不具备该特征；阿尔泰蝠 蛾雄蛹的生殖孔两侧各有一球形突起(图8，实心箭头所示)，雌蛹不具备该特征。基于这 些特征鉴别阿尔泰蝠蛾蛹的雌雄性，后经解剖成虫的生殖器验证准确率为100％(n＝218)。
随着蛹发育的进行，蛹的颜色逐渐加深，体重逐渐减轻；羽化前，蛹的尾部末端变空 (图9)；随后，蛹的头部顶端裂开，成虫从裂口处爬。新羽化的阿尔泰蝠蛾成虫如图10A-图10F，每图时间间隔约为三十秒钟，身体柔软，翅芽紧贴于胸部背侧面，迅速攀爬至高处，将自身悬吊在空中，后翅芽缓慢展开，并铺于腹部背侧面，静待翅的硬化。一般雄性阿尔泰蝠蛾成虫小于雌性(图11)。
将羽化后的成虫转移至更大空间的饲养器具中，大空间饲养器和前述饲养器具基本原理 相同，不同的是，不需要提供胡萝卜等食物，因为成虫不取食也不饮水，但土壤的保湿依然 很重要，过干的土壤易导致成虫过快脱水死亡，影响交配并缩短其寿命。同时需在容器内图 层上插上一些小植物的茎干以方便成虫攀爬和交配，同时在土壤表面放置一些湿润的草根， 以方便成虫后续产卵。成虫翅膀硬化后，一般在傍晚时进行交配，交配后短时间内即可产卵， 产卵也主要在黄昏时间。雌蛾产卵迅速、相对集中(图12)，初产卵为白色(图13A和图 13B)，无粘性，后颜色逐渐加深，直至变为黑色。
在8-18℃，借助该饲养方法，幼虫的发育历期一般为1y,成虫期一般为5-10d，卵和蛹的 发育历期一般为20-40d。幼虫的单月成活率可以达到83％-90％(表1)，末龄幼虫的化蛹率可 达70％-73％(表2)，蛹的羽化率可以达到75％-85％(表3)。
表1阿尔泰蝠蛾幼虫的单月存活率
表2阿尔泰蝠蛾末龄幼虫的化蛹率
表3阿尔泰蝠蛾蛹的羽化率
所列食物为胡萝卜，但也可以是番薯Ipomoea batatas，南瓜Cucurbitamoschata，新疆 芍药Paeonia sinjiangensis，柳兰Chamaenerion angustifolium，新疆白鲜Dictamnus angustifolius，新疆藜芦Veratrum lobelianum，新疆猪牙花Erythroniumsibiricum，乌头 Aconitum leucostomum，阿尔泰牡丹草Gymnospermium altaicum，药用蒲公英Taraxacum officinale等的一种或者多种；此处饲养基质所列为原生地土壤，可以换成园土、细沙、木 屑、稻壳、椰子壳屑等；此处饲养器具所列为饲养瓶，可以换成花盆、餐盒、玻璃瓶、塑料 瓶等。
本发明所饲养的为阿尔泰蝠蛾，但是也可以用于碌曲蝠蛾、虫草蝠蛾、白蛾蝠蛾、白马 蝠蛾、美丽蝠蛾、东隅蝠蛾、贡嘎蝠蛾、甲郎蝠蛾、金沙蝠蛾、康定蝠蛾、康姬蝠蛾、察隅蝠蛾、察里蝠蛾、小金蝠蛾、拉脊蝠蛾、云南蝠蛾、玉树蝠蛾、蒲氏钩蝠蛾、棒蝠蛾、贵德 蝠蛾、斜脉蝠蛾、德钦蝠蛾、玉龙蝠蛾等昆虫的饲养。
另外，若在该饲养方法中，将采集自原产地饲养土不进行灭菌处理，直接作为饲养基质， 则可以在饲养大龄幼虫等过程中，不断得到受新疆虫草菌侵染的阿尔泰蝠蛾僵虫——新疆 虫草。应用不灭菌的原生地土壤，饲养三个月的新疆虫草生成率可以达到10-40％(n＝200)。 这也预示着该方法也可以用于新疆虫草的培育。预示着也可以用于冬虫夏草、拟细虫草等虫 草菌的培育。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，本发明的方 法稍作改变还可以用于培养新疆虫草，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术 范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。
Claims (8)
1.一种阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，将作为底部饲养瓶的第一个饲养瓶的瓶盖顶端涂上胶水；
第二步，将第二个饲养瓶的底部与第一个饲养瓶盖粘贴在一起；
第三步，将第二个饲养瓶底部，与第一个饲养瓶的瓶盖一起，多次刺穿形成密集的孔洞；
第四步，在第二个饲养瓶内加入与底部面积大小一致的隔土透气垫子；
第五步，在第一个饲养瓶内加入2/3以上体积的水；
第六步，将第二个饲养瓶置于第一个饲养瓶顶部；
第七步，将第二个饲养瓶与底部的饲养瓶借助粘贴的瓶盖拧紧，连接；
第八步，在第二个饲养瓶底部加入厚度为1-2cm湿的饲养土；
第九步，在第二个饲养瓶的湿土上加入胡萝卜和幼虫；
第十步，在第二个饲养瓶内继续加入湿土；幼虫依据自己的习性，自主选择其栖息位置；
第十一步，在第二个饲养瓶的瓶盖上穿刺透气孔；
第十二步，旋紧饲养瓶盖后，置于饲养环境中。
2.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤八中，所述饲养土为野外采集幼虫的原生地土壤，需在121℃下，经过高温湿热灭菌30-40min，冷却后，使用前，加蒸馏水，调节至土壤含水量与野外采集时所测相一致，为30-40%之间。
3.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤五和步骤八中所使用的水为灭菌后的蒸馏水。
4.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤九中，所用的胡萝卜为未使用农药，且清洗干净，无表皮损伤的完整的胡萝卜根茎。
5.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤十二中，饲养条件为：饲养温度为8-18℃，光周期为15-16L：8-9D，环境相对湿度为60-90%RH。
6.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤九中，对于低龄的幼虫待胡萝卜的须根长出后，再接入饲养瓶中，取食胡萝卜的须根；对3龄以上的幼虫，单瓶单只饲养。
7.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，步骤九中，室内饲养当年长成的大龄幼虫，要给予0-4℃的低温诱导，诱导时间为3个月。
8.根据权利要求1所述的阿尔泰蝠蛾幼虫的饲养方法，其特征在于，需要观察昆虫或者更换饲料时，先将上面的饲养瓶拧下，打开盖子倒出上层的饲养土，取出饲料，再倒出剩余的土壤，寻找昆虫，或者更换新的饲料；观察昆虫后或者更换饲料后，重新饲养昆虫时，对于幼虫，直接放入土壤，由其自由钻洞寻找合适栖身位置；对于蛹，在加完湿土后，在湿土上依据原来蛹室的形态和位置，仿制其人工蛹室，再将其放入其内，并注意开一个人工蛹道直通土壤表面，寻找和观察昆虫时，注意动作轻柔。
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