CN111568950A - 一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法，属于医药领域。它由如下重量份的原辅料组成：医用甘油15～40份、医用丙二醇25～50份、大麻二酚（CBD）0.05～0.5份、茶树精油0.1～1份、樟脑精油0.1～1份、除虫菊素0.01～0.2份、冰片0.2～0.5份、苯扎氯铵0.1～0.3份、纯化水15～30份。本发明滴耳液采用纯天然绿色植物提取物，天然、绿色、无任何毒副作用，可同时治疗宠物耳炎、耳螨，具有抗菌活性高、不良反应小等特点，且原料易得，成本低廉，适合市场推广。

Description

一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法
技术领域
本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法。背景技术
对于宠物来说，耳病是常见的疾病之一。分外耳炎、中耳炎、内耳炎。外耳炎以瘙痒症状为主，该病病程较长，且容易复发，虽然对宠物没有生命威胁，但是因为瘙痒会让宠物感到不适影响其生活和活动。病因有三种，分别为（1）机械性：外耳道有创伤，泥土、昆虫等异物入耳后，对耳道皮肤产生刺激，水进入耳道内湿润残留的耳垢，引发外耳炎。（2）细菌、真菌感染引起的。（3）寄生虫，寄生虫是引起外耳炎常见病因，如螨虫寄生并刺激外耳道。症状表现为患宠频频摇头，患耳下垂，表现不安，擦耳或抓耳，造成耳壳受伤、出血或血肿。发病初期，可见耳壳和外耳道充血、红肿。按压耳根部有痛感。耳道内有的积较多耳垢甚至成棒状硬物，有的耳道表面粘有渗出物。严重的病宠耳道肿胀明显，上皮溃烂，耳道流淡黄色浆液性至深色脓性耳漏。耳漏液粘连耳被毛，严重的可导致体温升高及耳道阻塞听力减弱，食欲减少。中耳炎多是一种因耳道或咽鼓管感染的蔓延引起的鼓室黏膜的炎症。宠物内耳炎是指内耳的炎症，通常严重的外耳炎和中耳炎都可造成内耳炎的发生。中耳炎与内耳炎通常同时发生或相继发生。常见的发生原因：（1）病原菌通常会经由血液途径感染犬只。（2）外耳炎蔓延感染或经穿孔的鼓膜直接感染。（3）经咽鼓管感染。症状表现为病宠摇头，向患侧转圈，共济，耳痛、耳聋，有耳漏。严重时炎症侵及面部神经和副交感神经，引起面部麻痹。干性角膜炎和鼻黏膜引起脑脊膜炎，可导致死亡。检耳镜检查可见鼓膜穿孔。经咽鼓管感染或血液感染者，可见鼓膜外突或变色，X光线检查，见鼓室积液或鼓室泡骨发生硬化性的，可怀疑是本病。
目前对宠物耳炎、耳螨的防治方法主要是通过使用抗生素、抗真菌剂、杀虫剂和肾上腺皮质激素等外用药剂进行耳道清洗来实现，必要时采用外科疗法。然而，很多宠物医师都是自己临床配制药物用于宠物耳炎、耳螨的治疗，临床效果大多不理想，大多数都存在治疗效果差、治愈率低、治疗周期长、治疗成本高、副作用大等缺点。
发明内容
针对上述存在的问题，本发明的目的在于提供一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法。该滴耳液可同时治疗宠物耳炎、耳螨，具有抗菌活性高、不良反应小等特点。
为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：
一种犬猫用滴耳液，按重量份计，包括以下组分：医用甘油15～40份、医用丙二醇25～50份、大麻二酚（CBD） 0.05～0.5份、茶树精油0.1～1份、樟脑精油0.1～1份、除虫菊素0.01～0.2份、冰片0.2～0.5份、苯扎氯铵0. 1～0.3份、纯化水15～30份。
进一步地，按重量份计，包括以下组分：医用甘油15～40份、丙二醇25～50份、大麻二酚（CBD） 0.05～0.5份、茶树精油0.1～1份、樟脑精油0.1～1份、除虫菊素0.01～0.2份、冰片0.2～0.5份、苯扎氯铵0. 1～0.3份、纯化水15～30份。
进一步地，除虫菊素通过以下方法制备得到：取除虫菊的花，粉碎至20目；按重量计，加入6倍量75%的乙醇溶液，置于密闭容器中浸泡12小时，然后回流提取3h，过滤，得第一提取液和第一滤渣，向第一滤渣中加入4倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第二提取液和第二滤渣，继续向第二滤渣中加入3倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第三提取液，合并三次提取液，浓缩蒸发溶剂，然后进行喷雾干燥，制得除虫菊素。
进一步地，茶树精油通过以下方法制备得到：取茶树叶和茶树嫩枝，于60℃烘干，然后粉碎过60目筛，得粉末，将粉末、8倍粉末重量的75％乙醇和3倍粉末重量的四氯化碳置于萃取罐中进行萃取，萃取时间为8h，得萃取液，将萃取液加热蒸馏，制得茶树精油。
进一步地，樟脑精油通过以下方法制备得到：选取树龄较长的樟木枝叶洗净，将清洗干净的樟木枝叶粉碎均匀至80目；用沸程为80℃的石油醚浸提，体积比为4∶1，循环浸提2次，每次浸提2小时；将萃取液减压浓缩回收石油醚，得到浓缩液，将浓缩液、经萃取后的原料和水以体积比1∶4投入蒸馏釜进行蒸馏，向蒸馏釜内通入蒸汽直接加热；蒸馏釜内的真空度为-0.06MPa，蒸馏温度为140℃；当蒸馏釜内温度达到100℃时，打开与蒸馏釜相连接的冷凝器，接通冷却水，通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在35℃；当蒸馏釜内温度上升至140℃时，开始计算蒸馏时间并通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在28-33℃，持续蒸馏2小时，然后再次通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在24-28℃左右，继续蒸馏2.2小时；将冷凝器冷却得到的油水混合物导入油水分离装置中，待油水充分分层后，收集油层，下层水层经蒸馏釜上端的复馏柱返回蒸馏釜重复蒸馏。将收集的油层进行膜过滤，所用膜材料为无机或有机膜，截留分子量300Da；膜过滤时控制压力为0.1-0.6MPa，控制温度为25-40℃，得到樟脑油产品。
进一步地，所述大麻二酚通过工业大麻花叶干燥粉碎后，通过超临界CO2流体提取，所得提取浸膏经脱蜡、脱色、层析分离得到含量大于99.9%的大麻二酚白色晶体。
进一步地，上述犬猫用大麻二酚滴耳液的制备方法包括如下步骤：
1）按重量份依次将大麻二酚、茶树精油、樟脑精油、除虫菊素加入医用甘油中，搅拌，溶解，混合均匀，形成溶液A。
2）医用丙二醇中加入纯净水，混合均匀。按重量份依次加入冰片、苯扎氯铵，形成溶液B。
3）将溶液B缓慢加入溶液A中，并不断搅拌，混合均匀即得。
采取上述方案所产生的有益效果为：
1、大麻二酚为工业大麻中的主要活性成份，具有超强的杀菌、消炎、止痒及止痛能力，能有效治疗宠物因细菌、真菌而引起的耳炎症状。
2、茶树精油具有杀菌消炎、收敛毛孔的作用，可加快宠物受损的皮肤组织恢复，缩短治疗时间。
3、除虫菊素为天然的植物提取物，见光易分解成水和二氧化碳，对宠物无任何副作用，除虫菊素含有多种杀虫物质，杀虫效果显著。
4、樟脑精油在皮肤上产生清凉的作用一定，有抑制细菌的效果。因而能减轻发炎的情况。且樟脑精油具有良好的抗蠕形螨的作用，对皮脂蠕形螨及毛囊蠕形螨均有杀灭作用。
5、本发明所制得犬猫用大麻二酚滴耳液采用纯天然绿色植物提取物，天然、绿色、无任何毒副作用，且原料易得，成本低廉，适合市场推广。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。
实施例1
一种犬猫用滴耳液，每100g包括以下组分：包括以下组分：医用甘油38g、医用丙二醇45g、大麻二酚（CBD）0.3g、茶树精油0.1g、樟脑精油0.2g、除虫菊素0.05g、冰片0.25g、苯扎氯铵0.1g、纯化水16g。
除虫菊素通过以下方法制备得到：取除虫菊的花，粉碎至20目；按重量计，加入6倍量75%的乙醇溶液，置于密闭容器中浸泡12小时，然后回流提取3h，过滤，得第一提取液和第一滤渣，向第一滤渣中加入4倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第二提取液和第二滤渣，继续向第二滤渣中加入3倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第三提取液，合并三次提取液，浓缩蒸发溶剂，然后进行喷雾干燥，制得除虫菊素。
茶树精油通过以下方法制备得到：取茶树叶和茶树嫩枝，于60℃烘干，然后粉碎过60目筛，得粉末，将粉末、8倍粉末重量的75％乙醇和3倍粉末重量的四氯化碳置于萃取罐中进行萃取，萃取时间为8h，得萃取液，将萃取液加热蒸馏，制得茶树精油。
樟脑精油通过以下方法制备得到：选取树龄较长的樟木枝叶洗净，将清洗干净的樟木枝叶粉碎均匀至80目；用沸程为80℃的石油醚浸提，体积比为4∶1，循环浸提2次，每次浸提2小时；将萃取液减压浓缩回收石油醚，得到浓缩液，将浓缩液、经萃取后的原料和水以体积比1∶4投入蒸馏釜进行蒸馏，向蒸馏釜内通入蒸汽直接加热；蒸馏釜内的真空度为-0.06MPa，蒸馏温度为140℃；当蒸馏釜内温度达到100℃时，打开与蒸馏釜相连接的冷凝器，接通冷却水，通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在35℃；当蒸馏釜内温度上升至140℃时，开始计算蒸馏时间并通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在28-33℃，持续蒸馏2小时，然后再次通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在24-28℃左右，继续蒸馏2.2小时；将冷凝器冷却得到的油水混合物导入油水分离装置中，待油水充分分层后，收集油层，下层水层经蒸馏釜上端的复馏柱返回蒸馏釜重复蒸馏。将收集的油层进行膜过滤，所用膜材料为无机或有机膜，截留分子量300Da；膜过滤时控制压力为0.1-0.6MPa，控制温度为25-40℃，得到樟脑油产品。
大麻二酚通过以下方法制备得到：将工业大麻花叶烘干至含水量小于8%以下，粉碎至80目。置于超临界CO2萃取釜中，萃取压力28MPa，萃取温度45℃，萃取2h，得到提取浸膏。按质量比3:1在所得浸膏中加入3倍量的乙醇加热至40℃，不断搅拌，待溶解完全后缓慢降温至-20℃，保持2h。快速冷过滤，滤饼冷乙醇洗涤2次，收集滤液浓缩回收乙醇，浓缩液按料胶比1:10在硅胶柱中层析分离，流动相采用正己烷和二氯甲烷混液，体积比5：1。收集含大麻二酚流出液，浓缩即得大麻二酚固体。
上述犬猫用大麻二酚滴耳液的制备方法包括如下步骤：
1）按重量份依次将大麻二酚、茶树精油、樟脑精油、除虫菊素加入医用甘油中，搅拌，溶解，混合均匀，形成溶液A。
2）医用丙二醇中加入纯净水，混合均匀。按重量份依次加入冰片、苯扎氯铵，形成溶液B。
3）将溶液B缓慢加入溶液A中，并不断搅拌，混合均匀即得。
实施例2
一种犬猫用滴耳液，每100g包括以下组分：包括以下组分：医用甘油38g、医用丙二醇45g、大麻二酚（CBD）0.5g、茶树精油0.15g、樟脑精油0.25g、除虫菊素0.1g、冰片0.25g、苯扎氯铵0.1g、纯化水15.65g。
除虫菊素通过以下方法制备得到：取除虫菊的花，粉碎至20目；按重量计，加入6倍量75%的乙醇溶液，置于密闭容器中浸泡12小时，然后回流提取3h，过滤，得第一提取液和第一滤渣，向第一滤渣中加入4倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第二提取液和第二滤渣，继续向第二滤渣中加入3倍重量的75％的乙醇，回流提取2h，过滤，得第三提取液，合并三次提取液，浓缩蒸发溶剂，然后进行喷雾干燥，制得除虫菊素。
茶树精油通过以下方法制备得到：取茶树叶和茶树嫩枝，于60℃烘干，然后粉碎过60目筛，得粉末，将粉末、8倍粉末重量的75％乙醇和3倍粉末重量的四氯化碳置于萃取罐中进行萃取，萃取时间为8h，得萃取液，将萃取液加热蒸馏，制得茶树精油。
樟脑精油通过以下方法制备得到：选取树龄较长的樟木枝叶洗净，将清洗干净的樟木枝叶粉碎均匀至80目；用沸程为80℃的石油醚浸提，体积比为4∶1，循环浸提2次，每次浸提2小时；将萃取液减压浓缩回收石油醚，得到浓缩液，将浓缩液、经萃取后的原料和水以体积比1∶4投入蒸馏釜进行蒸馏，向蒸馏釜内通入蒸汽直接加热；蒸馏釜内的真空度为-0.06MPa，蒸馏温度为140℃；当蒸馏釜内温度达到100℃时，打开与蒸馏釜相连接的冷凝器，接通冷却水，通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在35℃；当蒸馏釜内温度上升至140℃时，开始计算蒸馏时间并通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在28-33℃，持续蒸馏2小时，然后再次通过调节冷却水流量将冷凝器冷却水出水口的水温控制在24-28℃左右，继续蒸馏2.2小时；将冷凝器冷却得到的油水混合物导入油水分离装置中，待油水充分分层后，收集油层，下层水层经蒸馏釜上端的复馏柱返回蒸馏釜重复蒸馏。将收集的油层进行膜过滤，所用膜材料为无机或有机膜，截留分子量300Da；膜过滤时控制压力为0.1-0.6MPa，控制温度为25-40℃，得到樟脑油产品。
大麻二酚通过以下方法制备得到：将工业大麻花叶烘干至含水量小于8%以下，粉碎至80目。置于超临界CO2萃取釜中，萃取压力28MPa，萃取温度45℃，萃取2h，得到提取浸膏。按质量比3:1在所得浸膏中加入3倍量的乙醇加热至40℃，不断搅拌，待溶解完全后缓慢降温至-20℃，保持2h。快速冷过滤，滤饼冷乙醇洗涤2次，收集滤液浓缩回收乙醇，浓缩液按料胶比1:10在硅胶柱中层析分离，流动相采用正己烷和二氯甲烷混液，体积比5：1。收集含大麻二酚流出液，浓缩即得大麻二酚固体。
上述犬猫用大麻二酚滴耳液的制备方法包括如下步骤：
1）按重量份依次将大麻二酚、茶树精油、樟脑精油、除虫菊素加入医用甘油中，搅拌，溶解，混合均匀，形成溶液A。
2）医用丙二醇中加入纯净水，混合均匀。按重量份依次加入冰片、苯扎氯铵，形成溶液B。
3）将溶液B缓慢加入溶液A中，并不断搅拌，混合均匀即得。
稳定性试验
将实施例1、2制得的滴耳液分别分成4份，第一份置于室温阴凉通风环境中；第二份置于阳光直射环境中；第三份置于45℃恒温箱中；第四份置于-18℃冰箱中；放置三个月，分别观察其颜色、均匀性以及是否有霉败现象。结果显示，在高温、常温、低温环境下，所制得滴耳液基本无变化，色泽光亮，无变色；均匀性良好，无霉变；而在阳光直射环境下，滴耳液颜色略有加深。
实验结果表明，本发明制得的犬猫用大麻二酚滴耳液在常规环境中，稳定性良好。储存方式为避免长期放置在阳光直射处。
毒性试验
1、皮肤刺激试验
试验方法：将小白鼠背部脊柱两侧进行脱毛，脱毛范围约15cm2。洗净脱毛处，归笼观察24小时，每组小白鼠在脱毛区分别涂抹本发明实施例1-2制备的滴耳液0.8ml，另一组涂溶媒0.8ml，每日二次，连续一周。实验结束后，将小白鼠处死，心，肝，肾及脱毛皮肤做病理检验。
试验结果：上述用滴耳液的小白鼠躯干脱毛区，未见局部皮肤有水肿、充血、红斑、出血点及溃疡。用滴耳液的小白鼠毛发色泽、摄食、四肢活动等与涂溶媒组无明显差异，病理组织学检查，用滴耳液的小白鼠心、肝、肾及脱毛皮与涂溶媒组比较也无明显差异。结果提示，本发明犬猫用大麻二酚滴耳液无局部刺激作用，也未见全身毒性表现。
2、动物急性毒性试验
本发明滴耳液经预试验，不能测出LD50，故测定最大给药量。采用耳道给药途径，测得小白鼠的一日最大给药量为58.2g/kg（以生药计）。实验动物均连续观察一周，其外观体征、精神状态、饮食、饮水、粪便等均未见明显异常。实验结束时，动物健康存活，体重增加。
3、动物长期毒性试验
实验设计本发明药物高、中、低剂量组、基质对照组和空白对照组，采用耳道给药途径给予大鼠，给药剂量分别为9.2g/kg、6.9g/kg和4.6g/kg（以生药计），连续给药3个月，在给药过程中，各给药组及基质组大鼠的体重、饮食量、外观体征、行为活动、精神状态、毛色、粪便性状与空白对照组比较，无明显差异（P＞0.05），动物体重增长值和主要脏器系数与空白对照组比较差异不显著（P＞0.05），血液学和血液生化指标检查结果给药组个别指标与空白对照组比较无差异显著（P＞0.05），其他指标与空白对照比较差异不显著（P＞0 .05），给药期和恢复期组织学检查高剂量组动物主要脏器与空白对照组比较未见明显差异，未见迟缓性毒性出现。
通过以上实验，说明本发明犬猫用大麻二酚滴耳液临床用药是安全的。
宠物临床试验
试验宠物：试验30条犬及30只猫均是诊断为中耳炎，这些样本是2019年至2020年宠物医院收集的病例。
诊断标准：X射线检查可见鼓室积液，耳镜检查鼓膜穿孔，中耳脓液。
临床症状：宠物外耳道潮红、水肿、发痒，自耳道流出淡黄色浆液性分泌物，沾污耳下部被毛。表现不安，摇头晃脑，磨蹭搔抓耳朵。
试验分组及治疗方法：药物组(15条犬、15只猫)给予2滴本发明滴耳液，每天早晚各1次，连续给药一周；对照组(15条犬、15只猫)给予2滴医用甘油，每天早晚各1次，连续给药一周。
观察时间及指标：末次给药后连续观察3天，耳廓肿胀、行为表现、耳道分泌物、治愈率。
临床疗效：根据观察指标，每天记录犬、猫的耳廓肿胀、行为表现、耳道分泌物、治愈率，结果见表1，其中治愈率＝治愈条(只)数/试验条(只)数×100％。
表1药物组与对照组治疗后各项指标比较
Figure DEST_PATH_IMAGE002
从表1可以看出，药物组的治疗周期短，治愈率和治愈效果良好，对犬猫耳炎有着很好的治疗效果。
以上实施例仅是对本发明予以解释说明，并未对本发明的保护范围进行任何限制。对于本领域技术人员而言，凡未脱离本发明技术精神所做的同等实施方式或变更均在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法，其特征在于，包括以下组分：医用甘油15～40份、医用丙二醇25～50份、大麻二酚（CBD） 0.05～0.5份、茶树精油0.1～1份、樟脑精油0.1～1份、除虫菊素0.01～0.2份、冰片0.2～0.5份、苯扎氯铵0. 1～0.3份、纯化水15～30份。
2.根据权利要求1所述的一种犬猫用大麻二酚滴耳液及其制备方法，其特征在于，所述滴耳液制备方法包括如下步骤：
1）按重量份依次将大麻二酚、茶树精油、樟脑精油、除虫菊素加入医用甘油中，搅拌，溶解，混合均匀，形成溶液A；
2）医用丙二醇中加入纯净水，混合均匀；
按重量份依次加入冰片、苯扎氯铵，形成溶液B；
3）将溶液B缓慢加入溶液A中，并不断搅拌，混合均匀即得。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2022112511A1 (en) * 2020-11-26 2022-06-02 Alain Moussy Pharmaceutical composition for treatment of inner ear disorders through local administration in the tympanic area

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