CN111557946A - N-乙酰-d-氨基葡萄糖的新用途及相关产品 - Google Patents

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Abstract

本发明提供N‑乙酰‑D‑氨基葡萄糖或其药物可接受的盐在制备防治肠易激综合征的微生态制剂或制备双歧杆菌活性改善剂的应用。本发明提出了N‑乙酰‑D‑氨基葡萄糖的新用途，开拓了N‑乙酰‑D‑氨基葡萄糖的应用领域，对引起肠易激综合征的多个因素产生好的效果，可以有效防、治肠易激综合征，明显改善症状，无毒副作用。

Description

N-乙酰-D-氨基葡萄糖的新用途及相关产品
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体涉及N-乙酰-D-氨基葡萄糖的新用途及相关产品。
背景技术
肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)是一种临床上常见的胃肠道功能紊乱性疾病，以腹痛、腹部不适，伴有排便习惯及大便性状改变为主要特征，症状持续存在或间歇发作。肠易激综合征依据粪便的性状分为IBS便秘型(IBS-C)、IBS腹泻型(IBS-D)、混合型IBS(IBS-M)、不确定型IBS(IBS-U)，其中腹泻型肠易激综合征(Diarrhoea-predominant IBS,IBS-D)是最常见的IBS亚型，以反复发作的腹痛、腹泻为主要表现。该病症状迁延反复，常伴有焦虑、抑郁等精神心理异常，不同程度影响了患者生活质量，也给患者和社会带来较大经济上的负担。
目前IBS-D的发病机制尚未探明，目前认为，心理社会应激、肠道微生态改变、胃肠动力紊乱、脑-肠轴功能失调、内脏高敏感性、黏膜低度炎症、肠屏障受损、遗传因素等参与其中。单一因素难以全面解释IBS-D发病及症状特点，各个因素在发病中的地位也不尽相同，使这一疾病在发病特征、临床表现、治疗反应等方面具有明显的异质性。目前治疗IBS-D的常用药有阿洛司琼和利福昔明等等。阿洛司琼是5-HT3受体拮抗剂，其严重不良反应为缺血性肠炎。利福昔明，作为抗菌药，在使用过程中，出现耐药的情况也是常见的。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供N-乙酰-D-氨基葡萄糖的新用途及相关产品。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供N-乙酰-D-氨基葡萄糖或其药物可接受的盐在制备防治肠易激综合征的微生态制剂或制备双歧杆菌活性改善剂的应用。
本发明第二方面提供一种用于防治肠易激综合征的微生态制剂，包括N-乙酰-D-氨基葡萄糖和益生菌。
本发明第三方面提供一种体外改善双歧杆菌活性的方法，所述方法至少包括以下步骤：N-乙酰-D-氨基葡萄糖添加到含有双歧杆菌的培养物中，在适合双歧杆菌生长的培养条件下进行培养。
如上所述，本发明的N-乙酰-D-氨基葡萄糖的新用途及相关产品，具有以下有益效果：
本发明提出了N-乙酰-D-氨基葡萄糖的新用途，开拓了N-乙酰-D-氨基葡萄糖的应用领域，可改善双歧杆菌活性，对引起肠易激综合征的多个因素产生好的效果，可以有效防、治肠易激综合征，明显改善症状，无毒副作用。使用本发明提出的制剂可以改善IBS-D患者的肠道微生态，治疗后患者肠道菌群多样性增加，益生菌增加，抑制了致病菌及机会致病菌，纠正肠道菌群失衡，使肠道微生态恢复稳态，，且使肠道的功能恢复正常，达到治疗IBS-D的效果。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围；在本发明说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规技术。
本发明一实施例提供N-乙酰-D-氨基葡萄糖或其药物可接受的盐在制备防治肠易激综合征的微生态制剂或制备双歧杆菌活性改善剂的应用。
所述N-乙酰-D-氨基葡萄糖为防治肠易激综合征的微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂的有效成分或有效成分之一。
可选的，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，还包括药学上可接受的载体或辅料。
“药学上可接受的”是指当分子本体和组合物适当地给予动物或人时，它们不会产生不利的、过敏的或其它不良反应。
“药学上可接受的载体或辅料”应当与所述有效成分相容，即能与其共混而不会在通常情况下大幅度降低药物的效果。可作为药学上可接受的载体或辅料的一些物质的具体例子是糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，如甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素；西黄蓍胶粉末；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，如Tween；润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等。这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。
在一种实施方式中，所述辅料包括填充物，所述填充物包括菊粉、赤藓糖醇、低聚果糖、蔓越莓水果粉、低聚木糖、低聚半乳糖中的一种或多种。
进一步的，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中还包括益生菌，所述益生菌的菌属选自以下菌属中的一种或多种：乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)，芽孢杆菌属(Bacillus)，乳球菌属(Lactococcus)，丙酸杆菌属(Propionibacterium)和肠球菌属(Enterococcus)。
所述双歧杆菌活性改善剂用于对体外不利条件下生长后的双歧杆菌的复苏生长增殖或促进活化。
可选的，所述不利环境是指能够使双歧杆菌形成球形体的环境或温度小于30摄氏度的有氧环境。
例如温度可以为4摄氏度。
在存在有害物质的环境或低营养环境中，所述双歧杆菌能形成球形体，本发明的双歧杆菌活性改善剂具有使双歧杆菌球形体促复苏生长增殖的功能。所述有害物质是指不利于双歧杆菌生长的物质。例如头孢呋辛钠。
可选的，所述双歧杆菌选自青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)。
所述微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂中，N-乙酰-D-氨基葡萄糖或其药物可接受盐的含量为5wt％-90wt％。
可选的，所述微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂的剂型选自胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、冻干粉中的任一种。
所述微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂可以为肠溶制剂。
例如可以将微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂制成N-乙酰-D-氨基葡萄糖含量为50-350mg/胶囊的胶囊，且为肠溶胶囊。或者微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂制成N-乙酰-D-氨基葡萄糖含量为50-350mg/片的片剂，且为肠溶片。
在一种实施方式中，所述益生菌包括鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)中的任一种或多种。
在一种实施方式中，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，以益生菌的总量为基准计，所述益生菌中鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的重量份数比例为(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)。
进一步的，以所述微生态制剂的总量为基准计，所述微生态制剂中益生菌活菌数量为1×109～1×1010CFU/g。
本发明一实施例提供用于防治肠易激综合征的微生态制剂，包括N-乙酰-D-氨基葡萄糖和益生菌。
进一步的，所述益生菌的菌属选自以下菌属中的一种或多种：乳杆菌属、双歧杆菌属，芽孢杆菌属，乳球菌属，丙酸杆菌属和肠球菌属。
在一种实施方式中，所述益生菌包括鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌中的任一种或多种。
在一种实施方式中，以益生菌的总量为基准计，所述益生菌中鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的重量份数比例为(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)。
可选的，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，还包括药学上可接受的载体或辅料。
本发明一实施例提供的体外改善双歧杆菌活性的方法，至少包括以下步骤：N-乙酰-D-氨基葡萄糖添加到含有双歧杆菌的培养物中，在适合双歧杆菌生长的培养条件下进行培养。
所述双歧杆菌为不利条件下生长后的双歧杆菌。
可选的，所述不利环境是指能够使双歧杆菌形成球形体的环境或温度小于30摄氏度的有氧环境。
实施例1N-乙酰-D-氨基葡萄糖促进双歧杆菌球形体复苏
1.1实验材料
菌种：青春型双歧杆菌BAC30，所述青春型双歧杆菌BAC30从分离普唯尔益生菌冻干粉中分离、鉴定获得。普唯尔益生菌冻干粉配料：菊粉、赤藓糖醇、低聚果糖、蔓越莓水果粉、低聚木糖、鼠李糖乳杆菌LRa05、嗜酸乳杆菌LA85、保加利亚乳杆菌LB42、青春双歧杆菌BAC30、婴儿双歧杆菌BI45。
培养基：双歧杆菌BS培养基，青岛海博生物。低营养培养基，将培养过一次双歧杆菌BS培养基平板中培养基表层菌落挑取完后收集，10磅高压后作再次利用。
试剂：头孢呋辛钠药敏纸片，3mg/ml头孢呋辛钠溶液浸制烘干备用；
N-乙酰-D-氨基葡萄糖，市售。
C液：KH2PO4，4.5g；Na2HPO4·12H2O，15g；L-半胱氨酸盐酸盐，0.5g；吐温-80，
0.5g；琼脂，1g；去离子水1000ml。10磅高压，备用。
仪器：奥林巴斯多功能显微镜，BX41，日本Olympus公司；数码相机，A620，日本佳能公司；厌氧缸，自制(气体条件800ml/L N2，100ml/L H2,100ml/LCO2)。
1.2实验方法
1.2.1头孢呋辛钠作用下双歧杆菌球形体的制备
以K-B法进行药敏试验，先均匀涂布双歧杆菌菌悬液，浓度为3×109个/ml，体积50μL。然后加贴抗菌药物纸片，37℃厌氧培养48h后在抑菌环边缘挑取菌落，镜检为球形体菌体形态后用C液制得菌悬液即为头孢呋辛钠作用下的双歧杆菌球形体悬液。
1.2.2低营养条件下双歧杆菌球形体的制备
双歧杆菌BS培养基作再次利用，经10磅高压灭菌后倒平板备用。将1×103个/ml双歧杆菌菌悬液(C液作稀释液)50μL均匀涂布于再利用BS培养基上，37℃厌氧培养48h。长出的菌落镜检为球形体菌体形态后，用C液制得的菌悬液即为低营养条件下双歧杆菌球形体悬液。
1.2.3N-乙酰-D-氨基葡萄糖在双歧杆菌球形体复苏过程中的作用观察
实验组：将头孢呋辛钠作用下形成的双歧杆菌球形体和低营养条件作用下形成的双歧杆菌球形体分别用C液稀释至2×103个/ml，然后取该浓度菌悬液30μL于平板培养基中央，同时取5％N-乙酰-D-氨基葡萄糖溶液30μL滴于平板培养基中央的菌悬液中，L棒涂布均匀，置厌氧条件系统中37℃培养48小时
对照组：将实验组中的5％N-乙酰-D-氨基葡萄糖溶液改为等量C液，其余皆相同。
每组均涂布6块平板。培养完成后将各组培养后的每块平板菌落计数。并分别进行菌落直径和菌落凸起高度测量。用SPSS19.0统计分析。
1.2.4双歧杆菌球形体复苏前后形态特征及表面特征观察：常规细菌涂片，革兰氏染色，多功能显微镜镜检。
1.3实验结果：见表1、表2
表1 N-乙酰-D-氨基葡萄糖对因药致球形体后的双歧杆菌菌落生长影响结果
Figure BDA0002564979510000061
与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
表2 N-乙酰-D-氨基葡萄糖对因低营养条件下致球形体后的双歧杆菌菌落生长影响结果
Figure BDA0002564979510000062
与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
上述实验表明，在体外实验中，N-乙酰-D-氨基葡萄糖对肠道益生菌的双歧杆菌，例如对青春双歧杆菌BAC30在环境不利条件下(因药物致敏或因营养环境差改变生长状态)形成的球形体生存形态，有很好的促复苏作用，具有促复苏生长增殖的功能。
实施例2N-乙酰-D-氨基葡萄糖对置于低温有氧中双歧杆菌的活化作用
2.1实验材料
仪器：同实施例1
菌株：青春双歧杆菌BAC30，所述青春双歧杆菌BAC30从分离普唯尔益生菌冻干粉中分离、鉴定获得。普唯尔益生菌冻干粉配料：菊粉、赤藓糖醇、低聚果糖、蔓越莓水果粉、低聚木糖、鼠李糖乳杆菌LRa05、嗜酸乳杆菌LA85、保加利亚乳杆菌LB42、青春双歧杆菌BAC30、婴儿双歧杆菌BI45。
培养基及其配制：双歧杆菌BS培养基，青岛海博生物。
药品试剂及其配制：
N-乙酰-D-氨基葡萄糖(GlcNAc)，市售，用蒸馏水配成0.2％、1％、2％的溶液，无菌超滤备用；
C液：KH2PO4，4.5g；Na2HPO4·12H2O，15g；L-半胱氨酸盐酸盐，0.5g；吐温-80，0.5g；加去离子水1000ml溶解，调pH值7.2后分装，经10磅高压、20min灭菌消毒后备用；
革兰氏染料等，市售，常规配制。
2.2实验方法：
2.2.1实验分组及各组双歧杆菌的活化
挑取放在8摄氏度冰箱保存8天的BS平板上的双歧杆菌菌落，用C液制成细菌悬液，1×108/ml，稀释成1×104/ml，4ml等分成4管即4组，高剂量GlcNAc组，加入等体积的2％的GlcNAc溶液，即双歧杆菌菌液中GlcNAc终浓度为1％，中剂量GlcNAc组加入1％的等体积GlcNAc溶液，即双歧杆菌菌液中GlcNAc终浓度为0.5％，低剂量GlcNAc组，加入等体积的0.2％的GlcNAc溶液，即双歧杆菌菌液中GlcNAc终浓度为0.1％，对照组加入等体积的生理盐水。将各组菌悬液吸取60μL，涂布平板。每组涂布3块平板，放入厌氧系统中37℃培养72h后观测其菌落形态，并用菌落计数器计数。
2.2.2各组细菌活化后形态的观察
将以上各组活化培养后的双歧杆菌菌落，涂片，革兰染色，多功能显微镜观察形态；同时挑取菌落制得细菌悬液，涂布扫描专用玻片，甲醇固定15min，蒸馏水漂洗，待干后，镜检。
2.2.3各组细菌活化结果比较
将各组细菌活化培养后的平板菌落计数，以3块平板的平均值代表本组的活化细菌菌落总数，根据每块平板涂布细菌浓度及体积计算，接种的细菌总量，按照公式(活化细菌菌落数/接种的细菌总量)×100％＝活化率，计算每组的活化率。以SPSS19.0软件统计。
2.3试验结果：
2.3.1各组细菌活化培养结果
N-乙酰-D-氨基葡萄糖高、中、低剂量组和空白对照组细菌经过72h厌氧培养后，菌落表面光滑、凸起，边缘整齐，呈奶油色、瓷白色，质地柔软。空白对照组菌落直径较小，约0.5mm，而加N-乙酰-D-氨基葡萄糖后有所升高，低剂量组菌落直径约1mm，中、高剂量组菌落尤为明显，直径约1.5mm，与正常传代培养菌落直径相当。其活化后的菌落总数也随着N-乙酰-D-氨基葡萄糖浓度的增高呈递增关系，详见表3。
表3 N-乙酰-D-氨基葡萄糖提高双歧杆菌活化率结果
Figure BDA0002564979510000071
Figure BDA0002564979510000081
与空白对照组相比，*P<0.05，**P<0.01。
2.3.2各组细菌活化培养后革兰氏染色结果比较
将各组细菌活化培养后的菌落涂片，革兰氏染色，可见空白对照菌体短而细，加N-乙酰-D-氨基葡萄糖后其菌体变长变粗，恢复了正常生长形态。
上述实验表明，N-乙酰-D-氨基葡萄糖对冰箱中低温、有氧环境下久置的双歧杆菌，例如青春双歧杆菌BAC30在转种后有很好的活化作用，具有促进生长增殖的作用。
实施例3含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的微生态制剂在细菌潜生体相关的IBS模型大鼠中的治疗效果
3.1实验材料：实验用动物：清洁级SD大鼠120只，雌雄各半，体重250±20g。雌雄各半，全价营养颗粒饲料，自由饮水。室温24±2℃，相对湿度45％～60﹪,12h 1次明暗交替。
药物：匹维溴铵，得舒特品牌，市售；N-乙酰-D-氨基葡萄糖，市售；普唯尔益生菌冻干粉(配料：菊粉、赤藓糖醇、低聚果糖、蔓越莓水果粉、低聚木糖、鼠李糖乳杆菌LRa05、嗜酸乳杆菌LA85、保加利亚乳杆菌LB42、青春双歧杆菌BAC30、婴儿双歧杆菌BI45)，2g/条，市售。
含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的普唯尔益生菌冻干粉，在普唯尔原配方的基础上，加入N-乙酰-D-氨基葡萄糖(其中N-乙酰-D-氨基葡萄糖的含量为13wt％)。
所用仪器：生物机能实验系统，BL-410，四川泰盟公司；肌张力传感器，JH-2C，中国北京航天医学工程研究所；恒温平滑肌槽，DW-5A,广东汕头教育医学仪器厂。
3.2实验方法：
3.2.1造模方法：用刘俊康(刘俊康，陈杰，吴小兰等，细菌潜生体相关的IBS动物模型建立实验研究[J].胃肠病学和肝病学杂志，2007，16(3)，243-246)的方法，建立细菌潜生体相关的(腹泻型)肠易激综合征动物模型。具体为：头孢呋辛钠诱导CGC，联合川椒灌胃联合刺激。选取正常喂养大鼠腹腔注射头孢呋辛钠(10mg/ml)1ml/次，1次/日，连续3日。同时检测大鼠粪便CGC及肠道CGC定植，停药7天后，进行川椒浸液灌胃刺激，2次/日，连续3天，3日川椒浸液灌胃总量(ml)：大鼠体重(g)＝1:8。随后，连续监测粪便含水量和排便次数。
选择造模成功的大鼠50只，进行后续实验。
3.2.2动物的处理：
实验期间每日观察大鼠进食、饮水、活动等一般情况，称量体重，观察粪便性状，记录排便次数，测量粪便含水量。
3.2.3粪便含水量测定：
按照Barone F.C(Barone F.C.,Deegan J.F.,Price W.J,etal.Cold-restraintstress increases rat fecal pellet output and colonic transit[J]Am J Physiol,1990,258(21):G329-G337)的方法进行。将实验大鼠放在加有隔板的特制鼠笼中单独喂养，持续观察，排便后立即将粪便收集在预先用电子天平称重的培养皿中，并密封。收集12h标本，称重，记为湿重(Ww)。标本置60℃烤箱烘干，反复称重至恒重，记为干重(Wd)。计算粪便含水量(％)＝(Ww-Wd)/Ww×100％。
3.2.4给药：将造模成功大鼠随机分配成5组，雌雄各半。分别为A、B、C、D、E组(A:模型对照组、B:N-乙酰-D-氨基葡萄糖组、C:普唯尔益生菌组、D:含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的普唯尔益生菌组、E:匹维溴铵组(阳性对照))，每组10只。
评估造模成功后，每日灌胃一次，共1周。按药理实验方法学计算给药剂量，以成人与大鼠用药剂量的体重比计算给药量。所用溶剂为水。且水温<37℃。
N-乙酰-D-氨基葡萄糖按27mg/kg/d。普唯尔益生菌按180mg/kg/d。含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的普唯尔益生菌冻干粉，按207mg/kg/d(其中N-乙酰-D-氨基葡萄糖的含量为13wt％)。匹维溴铵13.5mg/kg/d。模型对照组及空白对照组灌等体积的生理盐水。
3.3实验结果
IBS模型组大鼠进食减少，活动量减少，毛色发暗，耸毛，体重减轻但无统计学意义。排便增加，且以稀便为主。匹维溴铵组排便次数比模型组减少，且有硬便，也有软便，后者略多。体重略有增加。N-乙酰-D-氨基葡萄糖组，与模型组比较，排便减少明显，硬便较软便多，动物毛色光亮，体重略有增加。普唯尔益生菌冻干粉组大鼠，进食大，活动量大，毛色光亮，粪便以成形为主。含N-乙酰-D-氨基葡萄糖益生菌冻干粉组进食大，活动量大，毛色光亮，粪便外形比较正常。总的看来，N-乙酰-D-氨基葡萄糖组、普唯尔益生菌组、含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的普唯尔益生菌组、匹维溴铵组比模型组大鼠排便次数要少，粪便含水量要低，模型组大鼠机体功能最差。含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的普唯尔益生菌组比单独使用N-乙酰-D-氨基葡萄糖或单独使用普唯尔益生菌组大鼠排便次数要少，粪便含水量要低，整体各项机能趋于正常。
各实验组大鼠粪便标本含水量的平均值，排便次数检测结果。用SPSS19.0统计分析。见表4：
表4各组动物粪便含水量变化及排便次数检测结果
Figure BDA0002564979510000101
**表示与A组(模型组)比较，P<0.01；##表示与B组(N-乙酰-D-氨基葡萄糖组)比较，P<0.01；△△表示与C组(普唯尔益生菌组)比较，P<0.01
结果表明，B、C、D、E组分别与A组比较，造模后7天内比造模前粪便含水量净增(％)、造模后7天内，每12h排便次数比较，均有显著性差异(P<0.01)，表明治疗比不治疗效果要好；D组与B组比较，差异显著(P<0.01)；D组与C组比较，差异显著，P<0.01，说明N-乙酰-D-氨基葡萄糖与普唯尔益生菌冻干粉联合使用比单独使用N-乙酰-D-氨基葡萄糖，或者单独使用普唯尔益生菌，效果要好。
结果表明，在IBS条件下，肠道环境变差(不利于益生菌正常的生长增殖、细菌常出现潜生体生长生存形态，肠道菌群正常的功能受损)、肠道菌群失调，益生菌减少而有害菌增多。在这种情况下，大量补充相关的功能益生菌并在N-乙酰-D-氨基葡萄糖作用下，促进补充的相关功能益生菌在肠道的复苏、活化、生长增殖，进而从肠道环境和肠道菌群两方面改善肠道微生态，进而改善IBS病症，起到重要的作用。
本发明通过证明包含N-乙酰-D-氨基葡萄糖和相关功能益生菌制备的组合体微生态制剂，在IBS患者，尤其在IBS-D患者的药效学实验中，起到了很好的效果。因此，可期待N-乙酰-D-氨基葡萄糖与相关功能益生菌组合制备的微生态制剂对防、治IBS的效果。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (12)

1.N-乙酰-D-氨基葡萄糖或其药物可接受的盐在制备防治肠易激综合征的微生态制剂或制备双歧杆菌活性改善剂的应用。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述N-乙酰-D-氨基葡萄糖为防治肠易激综合征的微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂的有效成分或有效成分之一；
2)所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，还包括药学上可接受的载体或辅料；
3)所述防治肠易激综合征的微生态制剂中还包括益生菌，所述益生菌的菌属选自以下菌属中的一种或多种：乳杆菌属、双歧杆菌属，芽孢杆菌属，乳球菌属，丙酸杆菌属和肠球菌属；
4)所述双歧杆菌活性改善剂用于对体外不利条件下生长后的双歧杆菌的复苏生长增殖或促进活化；
5)所述微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂中，N-乙酰-D-氨基葡萄糖或其药物可接受盐的含量为5wt％-90wt％；
6)所述微生态制剂或双歧杆菌活性改善剂的剂型选自胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、肠溶制剂中的任一种。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述益生菌包括鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌中的任一种或多种。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，以益生菌的总量为基准计，所述益生菌中鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的重量份数比例为(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)。
5.如权利要求2所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)特征4)中，所述双歧杆菌选自青春双歧杆菌；
2)以所述微生态制剂的总量为基准计，所述微生态制剂中益生菌活菌数量为1×109～1×1010CFU/g。
3)所述不利环境是指能够使双歧杆菌形成球形体的环境或温度小于30摄氏度的有氧环境。
6.一种用于防治肠易激综合征的微生态制剂，包括N-乙酰-D-氨基葡萄糖和益生菌。
7.如权利要求6所述的防治肠易激综合征的微生态制剂，所述益生菌的菌属选自以下菌属中的一种或多种：乳杆菌属、双歧杆菌属，芽孢杆菌属，乳球菌属，丙酸杆菌属和肠球菌属。
8.如权利要求7所述的防治肠易激综合征的微生态制剂，其特征在于，所述益生菌包括鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌中的任一种或多种。
9.如权利要求8所述的防治肠易激综合征的微生态制剂，其特征在于，以益生菌的总量为基准计，所述益生菌中鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的重量份数比例为(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)：(0.01～1)。
10.如权利要求6所述的防治肠易激综合征的微生态制剂，其特征在于，所述防治肠易激综合征的微生态制剂中，还包括药学上可接受的载体或辅料。
11.一种体外改善双歧杆菌活性的方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：N-乙酰-D-氨基葡萄糖添加到含有双歧杆菌的培养物中，在适合双歧杆菌生长的培养条件下进行培养。
12.如权利要求11所述的改善双歧杆菌活性的方法，其特征在于，所述双歧杆菌为不利条件下生长后的双歧杆菌。
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