CN111548901A - 一种培养皿板及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种培养皿板及其使用方法，包括板体和板盖；板体为一中空结构，板体通过设置在其前面的板口进出水；板体左侧为凸出的长方体卡块，板体右侧为凹陷长方体卡槽；板体的上面是向上倾斜的斜形工作面；工作面上有与工作面垂直的多组支架；每组支架由四个长方体的凸起支架桩组成，板盖通过旋转方式盖在板体的板口上。细胞换液操作过程中，本发明可以缩短实验时间，减少细胞污染几率；提蛋白过程中，本发明可以缩短实验时间，减少蛋白稀释、降解和浪费；提RNA过程中，本发明可以缩短实验时间，减少RNA降解和浪费，减少中毒风险。同时，本发明的卡块和卡槽设计避免了培养皿板过长导致存放时占用空间，本发明的使用也很简便。

Description

一种培养皿板及其使用方法

技术领域：

本发明涉及细胞生物学实验器材技术领域，尤其涉及一种培养皿板及其使用方法。

背景技术：

在生物学的实验中经常会用到培养皿，它是一种圆形透明器皿，材质主要为塑料和玻璃，分承载皿和皿盖两部分，主要用于盛载液体培养基进行细胞培养。贴壁细胞可以黏附在承载皿的底部进行贴壁生长。在多种生物学实验的操作中，经常需要持移液枪对培养皿中的液体进行吸取移出。为了避免原有液体残留对后续移入液体的影响(如稀释)，实验人员会左手持承载皿倾斜一定角度，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处吸取液体。然而这种方法减少残留液体的量有限，并且还会带来一些副作用。举例如下：

细胞换液。在贴壁细胞换液吸取移出旧培养基的过程中，实验人员会左手持承载皿倾斜一定角度，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处吸取液体。由于左手需要接触敞开的承载皿，容易造成细胞污染。当在狭窄的超净台同时给多个皿换液时或换液过程中需要移动敞开的承载皿进行其他操作时，由于需要多次接触和移动培养皿，更容易造成细胞污染，并且浪费时间。

提蛋白。对贴壁生长在培养皿底部的细胞进行提蛋白时，需要将培养皿中的培养基吸出，并用PBS洗多次，吸弃PBS，然后加少量RIPA，用细胞刮子刮细胞，最后将含有蛋白的RIPA收集。整个过程为减少蛋白降解需要在冰板上操作，且尽量缩短实验时间。传统的冰板是水平的，在提蛋白的过程中，为了减少残留PBS对蛋白的稀释以及减少含有蛋白的RIPA的残留，需要左手持承载皿倾斜一定角度，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处多次吸取移出PBS或含有蛋白的RIPA。然而即使是这样，由于加入的RIPA极少，少许残留的PBS也会使含有蛋白的RIPA较大程度的稀释，少许含有蛋白的RIPA的残留也会使蛋白严重浪费。并且多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作会使承载皿底脱离水平的冰板，操作时间延长，降低低温效果，蛋白降解增多。

提RNA。对贴壁生长在培养皿底部的细胞进行提RNA时，需要将培养皿中的培养基吸出，并用PBS洗多次，吸弃PBS，然后加TRIZOL，并用移液枪吹打数次皿底充分裂解细胞，最后将含有RNA的TRIZOL收集。TRIZOL具有挥发毒性和腐蚀性，可通过吸入体内、接触皮肤等引起中毒，因此整个操作过程要在通风橱中小心进行，且尽量缩短实验时间。同时，为减少RNA的降解需要在冰板上操作，且尽量缩短实验时间。与提蛋白不同的是，少量残留的PBS对RNA的提取基本无影响；相同的是，为了减少RNA的损失以及操作的方便，需要多次左手持承载皿倾斜一定角度，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处吸取收集含有RNA的TRIZOL。然而即使是这样，由于TRIZOL粘稠度稍高，含有RNA的TRIZOL会大量残留而浪费RNA，并且多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作会使承载皿底脱离水平的冰板，操作时间延长，降低低温效果，RNA降解增多，中毒风险增加。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种培养皿板及其使用方法，以解决现有技术在贴壁细胞换液、提蛋白和提RNA的过程中因为液体残留问题而导致实验延长，细胞污染，蛋白稀释、降解和浪费，RNA降解和浪费，以及中毒风险增加的缺陷的问题。

本发明由如下技术方案实施：一种培养皿板，包括板体和板盖；所述板体为一中空结构，板体通过设置在其前面的板口进出水；所述板体左侧为凸出的长方体卡块，板体右侧为凹陷长方体卡槽；所述板体的上面是向上倾斜的斜形工作面；所述工作面上有与工作面垂直的多组支架；所述每组支架由四个长方体的凸起支架桩组成，所述板盖通过旋转方式盖在所述板体的板口上。

优选的，所述每组支架的四个支架桩以直线相互连接组成正方形。

优选的，所述板体和板盖均为塑料材质。

优选的，所述板体的长方体卡块与相同的板体的长方体卡槽拼接，所述板体的长方体卡槽与相同的板体的长方体卡块拼接。

优选的，所述支架内放置培养皿或者培养皿盖，所述支架的四个支架桩卡住培养皿或者培养皿盖。

优选的，所述支架至少为四组。

一种培养皿板的使用方法，其特征在于，包括细胞换液时、提取蛋白、提取RNA时的使用方法，具体为：

细胞换液时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动；将皿盖打开倒置于另一个培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主皿盖防止其移动；依次打开其他培养皿，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次将旧的培养液吸净，添加新的培养基，左手不需要反复多次接触和移动敞口的承载皿；

提取蛋白前，通过板体的板口将培养皿板中灌满蒸馏水，用板盖旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰；提蛋白时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于实验桌面上，依次打开其他培养皿；右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次进行提取蛋白操作；

细胞提RNA前，先通过板体的板口将培养皿板中灌满蒸馏水，用板盖旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰；提RNA时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于通风橱桌面上，依次打开其他培养皿，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次进行提取RNA操作。

本发明的优点：细胞换液操作过程中，本发明可以缩短实验时间，减少细胞污染几率；提蛋白过程中，本发明可以缩短实验时间，减少蛋白稀释、降解和浪费；提RNA过程中，本发明可以缩短实验时间，减少RNA降解和浪费，减少中毒风险。同时，本发明的卡块和卡槽设计避免了培养皿板过长导致存放时占用空间，本发明的使用也很简便。

附图说明：

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明的结构示意图(以含有4组支架的培养皿板为例)；

图2是本发明的机构示意图(以含有4组支架的培养皿板为例)；

图3是本发明的主视图(以含有4组支架的培养皿板为例)；

图4是本发明的俯视图(以含有4组支架的培养皿板为例)；

图5是本发明的左视图；

图6是本发明的右视图；

图中标记：1、板体，101、板口，102、卡块，103、卡槽，104、工作面，105、支架，106、支架桩，2、板盖。

具体实施方式：

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明的一种培养皿板，包括板体1和板盖2；板体1为一中空结构，板体1通过设置在其前面的板口101进出水；板体1左侧为凸出的长方体卡块102，板体1右侧为凹陷长方体卡槽103；板体1的上面是向上倾斜的斜形工作面104；工作面104上有与工作面104垂直的多组支架105；每组支架105由四个长方体的凸起支架桩106组成，板盖2通过旋转方式盖在板体1的板口101上。

其中，每组支架105的四个支架桩106以直线相互连接组成正方形。板体1和板盖2均为塑料材质。板体1的长方体卡块102与相同的板体1的长方体卡槽103拼接，板体1的长方体卡槽103与相同的板体1的长方体卡块102拼接。支架105内放置培养皿或者培养皿盖，支架105的四个支架桩106卡住培养皿或者培养皿盖。支架105至少为四组。

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细的说明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1(以含有4组支架的培养皿板为例)

本发明所述的细胞培养皿板材质为塑料，包括板体1和板盖2；所述板体为一中空结构，前面有板口101可以进出水；所述板体左侧为凸出长方体卡块102，右侧为凹陷长方体卡槽103，可以借此结构实现板的拼接；所述板体的上面是向上倾斜的斜形工作面104；所述工作面上有与工作面垂直的4组支架105；所述的每组支架由4个长方体方体凸起支架桩组成106。所述板盖2以通过旋转盖在所述板体1的板口101上。

实施例2(以含有4组支架的培养皿板为例)

细胞换液的整个操作过程在超净台中完成。细胞换液前，先将2个培养皿板与实验其他物品置于超净台中紫外照射30分钟消毒。换液时，将培养皿置于所述培养皿板工作面104的支架105上，支架桩106可以卡主承载皿防止其移动。将皿盖打开倒置于另一个培养皿板工作面104的支架105上，支架桩106可以卡主皿盖防止其移动。依次打开其他三个皿。由于工作面104是向上倾斜的，所以只需要右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次将旧的培养液吸净，添加新的培养基，而左手不需要反复多次接触和移动敞口的承载皿。因此，可以节约时间，降低污染几率。当在细胞换液的中途要移动敞开的承载皿进行其他操作时，可以通过直接移动培养皿板带动上面的承载皿或皿盖，不用单独移动每一个承载皿和皿盖，可以节约时间，降低污染几率。同时，本发明在所述培养皿板的左侧设计了卡块102，右侧设计了卡槽103，可以借此结构实现板的拼接及多个皿的换液和移动，也避免了培养皿板过长导致存放时占用空间。

实施例3(以含有4组支架的培养皿板为例)

提蛋白的整个操作过程在实验桌上完成。细胞提蛋白前，先通过本发明所述的板体1的板口101将培养皿板中灌满蒸馏水，用本发明所述板盖2旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰。提蛋白时，将培养皿置于所述培养皿板工作面104的支架105上，支架桩106可以卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于实验桌面上(提蛋白不需要无菌，培养皿也不需要回收利用)，依次打开其他三个皿。由于工作面104是向上倾斜的，所以只需要右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次将旧的培养液吸净，接着再用PBS洗多次，吸弃PBS。在用PBS洗每一个皿的时间内，其他皿残留的PBS都会向皿的最低处集中。在最后一遍用PBS洗完第四个皿后，第一个皿中残留的PBS大部分已经集中在皿的最低处。此时，右手持移液枪置于第一个倾斜承载皿的最低处将残留PBS吸净，然后向第一个皿中加少量RIPA进行刮蛋白。在用细胞刮子刮第一个皿的时间内，其他皿残留的PBS向皿的最低处集中。当第一个皿刮完后，右手持移液枪置于第二个倾斜承载皿的最低处将残留PBS吸净，然后向第二个皿中加少量RIPA进行刮蛋白。在用细胞刮子刮第二个皿的时间内，第一个皿中含有蛋白的RIPA和其他皿中残留的PBS向皿的最低处进一步集中。同样地，依次刮后面的皿。当所有的皿刮完后，从第一个皿的最低处开始收集含有蛋白的RIPA。因为在使用所述培养皿板后，整个操作过程中皿中的RIPA和皿中残留的PBS都会不断向皿的最低处集中，可以减少PBS残留而减少蛋白稀释；可见减少含有蛋白的RIPA的残留而减少蛋白的浪费；并且培养皿一直接触冰板，保持了低温效果，使蛋白降解减少；同时，在操作过程中避免了反复多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作，节约了实验操作的时间，减少蛋白降解。

实施例4(以含有4组支架的培养皿板为例)

提RNA的整个操作过程在通风橱中完成。细胞提RNA前，先通过本发明所述板体1的板口101将培养皿板中灌满蒸馏水，用本发明所述板盖2旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰。提RNA时，将培养皿置于所述培养皿板工作面104的支架105上，支架桩106可以卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于通风橱桌面上(提RNA不需要无菌，培养皿也不需要回收利用)，依次打开其他三个皿。由于工作面104是向上倾斜的，所以只需要右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次将旧的培养液吸净，接着再用PBS洗多次，吸弃PBS。在用PBS洗每一个皿的时间内，其他皿残留的PBS都会向皿的最低处集中。在最后一遍用PBS洗完第四个皿后，第一个皿中残留的PBS大部分已经集中在皿的最低处。此时，右手持移液枪置于第一个倾斜承载皿的最低处将残留PBS吸净，然后向第一个皿中加TRIZOL对皿底进行吹打，使细胞裂解完全。在用移液枪吹打第一个皿的时间内，其他皿残留的PBS向皿的最低处集中。当第一个皿吹打完后，右手持移液枪置于第二个倾斜承载皿的最低处将残留PBS吸净，然后向第二个皿中加TRIZOL对皿底进行吹打。在用移液枪吹打第二个皿的时间内，第一个皿中含有RNA的TRIZOL和其他皿中残留的PBS向皿的最低处进一步集中。同样地，依次吹打后面的皿。当所有的皿吹打完后，从第一个皿的最低处开始收集含有RNA的TRIZOL。与提蛋白不同的是，少量残留PBS对最终RNA浓度基本没有影响，所以使用所述培养皿板主要作用是减少含有RNA的TRIZOL的残留而减少RNA的浪费；并且培养皿一直接触冰板，保持了低温效果，使RNA降解减少；同时，在操作过程中避免了多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作，节约了实验操作的时间，减少RNA降解，减少中毒风险。

综上所述，本发明中培养皿上面的工作面是向上倾斜的，并设计有由支架桩组成的支架，细胞换液时可以将培养皿卡于所述培养皿板工作面的支架上，皿盖打开倒置并卡于另一个培养皿板工作面的支架上。左手不需要反复多次接触敞口的承载皿，只需要右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处吸出旧培养基，加上新培养基，可以节约时间，降低污染几率。当在细胞换液的中途要移动敞开的承载皿进行其他操作上时，可以通过直接移动培养皿板带动上面的承载皿或皿盖，不用单独移动每一个承载皿和皿盖，可以节约时间，降低污染几率。同时，本发明在左侧设计了卡块，右侧设计了卡槽，可以借此结构实现板的拼接及多个皿的换液和移动，也避免了培养皿板过长导致存放时占用空间。

在提蛋白前，可以通过所述培养皿板的板口将培养皿板灌满蒸馏水，置于-20℃冰箱使其结冰，为后续操作提供低温环境。因为在使用所述倾斜的培养皿板后，整个操作过程中皿中的RIPA和皿中残留的PBS都会不断向皿的最低处集中，可以减少PBS残留而减少蛋白稀释；可见减少含有蛋白的RIPA的残留而减少蛋白的浪费；并且培养皿一直接触冰板，保持了低温效果，使蛋白降解减少；同时，在操作过程中避免了反复多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作，节约了实验操作的时间，减少蛋白降解。

在提RNA前，可以通过所述培养皿板的板口将培养皿板灌满蒸馏水，置于-20℃冰箱使其结冰，为后续操作提供低温环境。与提蛋白不同的是，少量残留PBS对最终RNA浓度基本没有影响，所以使用所述倾斜的培养皿板主要作用是减少含有RNA的TRIZOL的残留而减少RNA的浪费；并且培养皿一直接触冰板，保持了低温效果，使RNA降解减少；同时，在操作过程中避免了多次左手持承载皿倾斜一定角度的操作，节约了实验操作的时间，减少RNA降解，减少中毒风险。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种培养皿板，其特征在于，包括板体(1)和板盖(2)；所述板体(1)为一中空结构，板体(1)通过设置在其前面的板口(101)进出水；所述板体(1)左侧为凸出的长方体卡块(102)，板体(1)右侧为凹陷长方体卡槽(103)；所述板体(1)的上面是向上倾斜的斜形工作面(104)；所述工作面(104)上有与工作面(104)垂直的多组支架(105)；所述每组支架(105)由四个长方体的凸起支架桩(106)组成，所述板盖(2)通过旋转方式盖在所述板体(1)的板口(101)上。

2.根据权利要求1所述的一种培养皿板，其特征在于，所述每组支架(105)的四个支架桩(106)以直线相互连接组成正方形。

3.根据权利要求1所述的一种培养皿板，其特征在于，所述板体(1)和板盖(2)均为塑料材质。

4.根据权利要求1所述的一种培养皿板，其特征在于，所述板体(1)的长方体卡块(102)与相同的板体(1)的长方体卡槽(103)拼接，所述板体(1)的长方体卡槽(103)与相同的板体(1)的长方体卡块(102)拼接。

5.根据权利要求1所述的一种培养皿板，其特征在于，所述支架(105)内放置培养皿或者培养皿盖，所述支架(105)的四个支架桩(106)卡住培养皿或者培养皿盖。

6.根据权利要求1所述的一种培养皿板，其特征在于，所述支架(105)至少为四组。

7.一种培养皿板的使用方法，其特征在于，包括细胞换液时、提取蛋白时、提取RNA时的使用方法，具体为：

细胞换液时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动；将皿盖打开倒置于另一个培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主皿盖防止其移动；依次打开其他培养皿，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次将旧的培养液吸净，添加新的培养基，左手不需要反复多次接触和移动敞口的承载皿；

提取蛋白前，通过板体的板口将培养皿板中灌满蒸馏水，用板盖旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰；提蛋白时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于实验桌面上，依次打开其他培养皿；右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次进行提取蛋白操作；

细胞提RNA前，先通过板体的板口将培养皿板中灌满蒸馏水，用板盖旋紧，置于-20℃冰箱使其结冰；提RNA时，将培养皿置于培养皿板工作面的支架上，支架桩卡主承载皿防止其移动，皿盖打开倒置于通风橱桌面上，依次打开其他培养皿，右手持移液枪置于倾斜承载皿的最低处依次进行提取RNA操作。

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