CN111494342A - 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法 - Google Patents

一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111494342A
CN111494342A CN202010512561.5A CN202010512561A CN111494342A CN 111494342 A CN111494342 A CN 111494342A CN 202010512561 A CN202010512561 A CN 202010512561A CN 111494342 A CN111494342 A CN 111494342A
Authority
CN
China
Prior art keywords
peg
solution
tboc
preparation
ptx
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010512561.5A
Other languages
English (en)
Inventor
蒲玉梅
王育新
范磊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NANJING STOMATOLOGICAL HOSPITAL
Original Assignee
NANJING STOMATOLOGICAL HOSPITAL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NANJING STOMATOLOGICAL HOSPITAL filed Critical NANJING STOMATOLOGICAL HOSPITAL
Priority to CN202010512561.5A priority Critical patent/CN111494342A/zh
Publication of CN111494342A publication Critical patent/CN111494342A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：S1、制备tBoc‑PEG‑S‑S‑OH；S2、通过移除Boc保护及与PCL‑COOH混合反应生成NH2‑PEG‑S‑S‑PCL；S3、制备FA‑PEG‑S‑S‑PCL；S4、将FA‑PEG‑S‑S‑PCL和PTX混合于DMF中制备FA‑PEG‑S‑S‑PCL@PTX，该制备方法可以有效地降低同类产品的成本，解决紫杉醇水溶性差和载药量低的难题，易于产业化推广。

Description

一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法
技术领域
本发明涉及医药领域，更具体地说，涉及一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法。
背景技术
癌症是目前造成人类死亡的第一大疾病，目前已形成以手术为主，放疗、化疗等多学科综合序列治疗的模式。紫杉醇(PTX)是一种一线化疗药物，因为其抗肿瘤效果强，因而在临床中得到广泛的运用，但是紫杉醇(PTX)本身没有靶向性，容易导致中性粒细胞减少、神经病变和心脏毒性等药物毒性反应，从而限制了其临床应用。
在过去的几十年里，各种纳米级药物递送系统不断发展，例如无机载体、胶束、聚合物囊泡和外泌体等，这些纳米级的载体会通过肿瘤组织的EPR效应而富集，其中聚合物囊泡因其有多个链接点、合成简便等优点而成为研究的重点。除了被动靶向之外，主动靶向也得到了越来越多医药工作者的青睐。研究表明，部分肿瘤细胞表面表达较多的叶酸(FA)受体，在正常细胞中低表达甚至不表达；同时，由于叶酸具有价格低廉、生物安全性好以及易发生反应的优点而得到广泛使用。
刺激响应性纳米聚合物已被广泛研究并运用到药物递送系统中，当药物蓄积至肿瘤组织中后，可通过不同的刺激使其释放，发挥效能，从而达到控释的效果。例如，在肿瘤细胞中富含高浓度的谷胱甘肽(GSH)，而谷胱甘肽(GSH)在血浆中含量较低，通过它的还原性可切断聚合物中的二硫键，破坏囊泡结构，从而使药物释放。
但是目前的负载紫杉醇纳米粒子的制备过程比较繁琐，而且成品率较低，成本高，难以产业化推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，旨在解决现有技术中成品率较低，成本高，难以产业化的问题。
为实现此目的，本发明提供了一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备tBoc-PEG-S-S-OH：将tBoc-PEG和CDI分别溶解在不同的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中制成tBoc-PEG溶液和CDI溶液，然后将tBoc-PEG溶液滴加到CDI溶液中形成混合溶液，在室温下搅拌，再将混合溶液滴加到溶于DMF的-OH-(CH2)2-S-S-(CH2)2-OH溶液中，经过反应得到tBoc-PEG-S-S-OH，所得溶液用分子量为3500Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体tBoc-PEG-S-S-OH；
S2、制备NH2-PEG-S-S-PCL：将固体tBoc-PEG-S-S-OH和CDI分别溶解在不同的DMF中，制成tBoc-PEG-S-S-OH溶液和CDI溶液，然后将tBoc-PEG-S-S-OH溶液滴加到CDI溶液中，在室温下搅拌，将混合物滴加到溶解于DMF中的PCL-COOH溶液中，再搅拌后在所得溶液中加入盐酸，经过反应后得到NH2-PEG-S-S-PCL，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体NH2-PEG-S-S-PCL；
S3、制备FA-PEG-S-S-PCL：将NH2-PEG-S-S-PCL和FA混合在DMF中，依次加入EDCI和NHS，室温下搅拌，再次加入FA后继续搅拌，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体FA-PEG-S-S-PCL；
S4、制备FA-PEG-S-S-PCL@PTX：将FA-PEG-S-S-PCL和PTX混合于DMF中，搅拌后在超声波振动环境下滴加到蒸馏水中，通过离心去除沉淀，将所得溶液与缓冲溶液透析，最终通过冻干生成负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX。
优选的，所述搅拌时间均为12-24小时。
优选的，所述缓冲溶液为磷酸盐溶液。
优选的，所述磷酸盐溶液的PH值为7.2。
本发明的另一个目的在于提供由上述制备方法制备的负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX。
本发明的再一个目的在于提供由上述制备方法或由上述制备方法制备得到的负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX在制备抗肿瘤药物中的应用。
相比于现有技术，本发明的优点在于：
本发明提供的一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，所制备的FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子(NPs)为较为规则的圆形，粒径比较均匀，且成品率高；同时可以有效地降低同类产品的成本，解决紫杉醇水溶性差、载药量低的难题，易于产业化推广。
附图说明
图1为本发明的靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备示意图；
图2为本发明的纳米粒子透射电镜图与动态光散射图；
图3为不同GSH浓度下PTX的释放性能示意图；
图4为HSC3细胞摄取靶向和非靶向纳米粒子共聚焦显微镜图；
图5为FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子的抑瘤效果图；
图6为实验组与对照组病理切片与血细胞分析的对比图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的作用原理是：首先，tBoc-NH-PEG经轻微修饰后合成tBoc-PEG-S-S-OH，再通过移除Boc保护及与PCL-COOH混合反应生成NH2-PEG-S-S-PCL，然后将氨基基团替换成叶酸基团生成FA-PEG-S-S-PCL；第二，FA-PEG-S-S-PCL在DMF溶液中能够自发的与PTX(紫杉醇)发生自组装形成纳米粒子；第三，所制备的FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子在肿瘤细胞外低谷胱甘肽环境下性质保持稳定，几乎不会释放PTX，从而减少化疗药物的毒副作用；第四，FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子能够通过结合叶酸受体主动靶向口腔癌细胞，使PTX在肿瘤细胞内大量蓄积，从而定点杀伤肿瘤细胞。
实施例1
本实施例提供了一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其步骤如下：
S1：制备tBoc-PEG-S-S-OH：根据先前的研究，tBoc-PEG-S-S-OH经轻微修饰后合成，简而言之，分别将5g(1mmol)的tBoc-PEG和0.81g(5mmol)的CDI溶解在15ml和5ml的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中制备成溶液，然后滴加tBoc-PEG溶液到CDI溶液中，在室温下(25℃左右)搅拌24小时，将上述混合物滴加到溶于5mlDMF的-OH-(CH2)2-S-S-(CH2)2-OH溶液(1.15g(7.5mmol))中，然后，它们继续反应12小时，所得溶液用分子量为3500Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体tBoc-PEG-S-S-OH；
S2：制备NH2-PEG-S-S-PCL：将固体tBoc-PEG-S-S-OH(3.8g(0.76mmol))溶于10mlDMF中，将CDI(0.16g(1mmol))溶于3ml DMF中，滴加tBoc-PEG-S-S-OH于CDI溶液中，室温下搅拌24小时，获得的混合物滴加于溶解在5mlDMF中的PCL-COOH(1.5g(0.76mmol))，再搅拌24小时，为了获得NH2-PEG-S-S-PCL，将上述溶液添加到30ml盐酸中，混合物在室温下反应24小时从而移除Boc保护，得所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体NH2-PEG-S-S-PCL；
S3：制备FA-PEG-S-S-PCL：将NH2-PEG-S-S-PCL(0.7g(0.1mmol))和FA(0.044g(0.1mmol))混合在10ml DMF中，然后依次加入EDCI(0.019g(0.1mmol))和NHS(0.015g(0.1mmol))，室温下搅拌24小时，然后再加入FA，继续搅拌24小时，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到白色固体FA-PEG-S-S-PCL；
S4：制备FA-PEG-S-S-PCL@PTX：将FA-PEG-S-S-PCL(100mg)和PTX(20mg)混合于5mlDMF中，搅拌24小时，在超声振动下滴加到20ml蒸馏水中，通过离心机，离心去除沉淀，然后，将得到的溶液与磷酸盐缓冲溶液(PBS)(PH＝7.2)透析72小时，通过冻干生成负载紫杉醇的纳米粒子(FA-PEG-S-S-PCL@PTX)。
实施例2
本实施例提供了一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其步骤如下：
S1：制备tBoc-PEG-S-S-OH：根据先前的研究，tBoc-PEG-S-S-OH经轻微修饰后合成，简而言之，分别将4g(1mmol)的tBoc-PEG和0.65g(5mmol)的CDI溶解在12ml和4ml的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中制备成溶液，然后滴加tBoc-PEG溶液到CDI溶液中，在室温下(大概25℃)搅拌24小时，将上述混合物滴加到溶于4mlDMF的-OH-(CH2)2-S-S-(CH2)2-OH溶液(0.92g(7.5mmol))中，然后，它们继续反应12小时。所得溶液用分子量为3500Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体tBoc-PEG-S-S-OH；
S2：制备NH2-PEG-S-S-PCL：将固体tBoc-PEG-S-S-OH(3.0g(0.76mmol))溶于8mlDMF中，将CDI(0.13g(1mmol))溶于2.5ml DMF中，滴加tBoc-PEG-S-S-OH于CDI溶液中，室温下搅拌24小时，获得的混合物滴加于溶解在4mlDMF中的PCL-COOH(1.52g(0.76mmol))，再搅拌24小时，为了获得NH2-PEG-S-S-PCL，将上述溶液添加到24ml盐酸中，混合物在室温下反应24小时从而移除Boc保护，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体NH2-PEG-S-S-PCL；
S3：制备FA-PEG-S-S-PCL：将NH2-PEG-S-S-PCL(0.7g(0.1mmol))和FA(0.044g(0.1mmol))混合在10ml DMF中，然后依次加入EDCI(0.019g(0.1mmol))和NHS(0.015g(0.1mmol))，室温下搅拌24小时，然后再加入FA，继续搅拌24小时，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体FA-PEG-S-S-PCL；
S4：制备FA-PEG-S-S-PCL@PTX：将FA-PEG-S-S-PCL(80mg)和PTX(16mg)混合于4mlDMF中，搅拌24小时，在超声振动下滴加到20ml蒸馏水中，通过离心机(德国贺利氏公司)离心去除沉淀，然后，将得到的溶液与磷酸盐缓冲溶液(PBS)(PH＝7.2)透析72小时，最后通过冻干生成负载紫杉醇的纳米粒子(FA-PEG-S-S-PCL@PTX)。
实施例3
本实施例提供了一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其步骤如下：
S1：制备tBoc-PEG-S-S-OH：根据先前的研究，tBoc-PEG-S-S-OH经轻微修饰后合成，简而言之，分别将2.5g(1mmol)的tBoc-PEG和0.4g(5mmol)的CDI溶解在7.5ml和2.5ml的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中制备成溶液，然后滴加tBoc-PEG溶液到CDI溶液中，在室温下(大概25℃)搅拌24小时，将上述混合物滴加到溶于2.5mlDMF的-OH-(CH2)2-S-S-(CH2)2-OH溶液(0.6g(7.5mmol))中，然后，它们继续反应12小时，所得溶液用分子量为3500Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体tBoc-PEG-S-S-OH；
S2：制备NH2-PEG-S-S-PCL：将固体tBoc-PEG-S-S-OH(2g(0.76mmol))溶于10mlDMF中，将CDI(0.8g(1mmol))溶于1.5ml DMF中，滴加tBoc-PEG-S-S-OH于CDI溶液中，室温下搅拌24小时，获得的混合物滴加于溶解在2.5ml DMF中的PCL-COOH(0.75g(0.76mmol))，再搅拌24小时，为了获得NH2-PEG-S-S-PCL，将上述溶液添加到15ml盐酸中，混合物在室温下反应24小时从而移除Boc保护，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，最后，通过冻干得到白色固体NH2-PEG-S-S-PCL；
S3：制备FA-PEG-S-S-PCL：将NH2-PEG-S-S-PCL(0.7g(0.1mmol))和FA(0.044g(0.1mmol))混合在10ml DMF中，然后依次加入EDCI(0.019g(0.1mmol))和NHS(0.015g(0.1mmol))，室温下搅拌24小时，然后再加入FA，继续搅拌24小时，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，最后通过冻干得到白色固体FA-PEG-S-S-PCL；
S4：制备FA-PEG-S-S-PCL@PTX：将FA-PEG-S-S-PCL(50mg)和PTX(10mg)混合于2.5ml DMF中，搅拌24小时，在超声振动下滴加到20ml蒸馏水中，通过离心机(德国贺利氏公司)离心去除沉淀，然后，将得到的溶液与磷酸盐缓冲溶液(PBS)(PH＝7.2)透析72小时，最后通过冻干生成负载紫杉醇的纳米粒子(FA-PEG-S-S-PCL@PTX)。
如图1所示，为本发明提出的一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法示意图。所制备的FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子平均尺寸为30±4nm，在肿瘤细胞外低谷胱甘肽环境中性质稳定，几乎无生物毒性。它能够通过被动靶向先行渗透入肿瘤基质内并蓄积，然后主动靶向叶酸受体高表达肿瘤细胞并被主动摄取，当其进入肿瘤细胞内高谷胱甘肽浓度环境中，二硫键被还原从而断裂，纳米粒子负载的PTX大量释放，从而实现肿瘤部位定点释放和杀伤。与游离的PTX相比，治疗效果更好，且能够克服游离PTX的非靶向性，降低PTX的全身毒副反应，为癌症患者提供了新的一种创伤小、副作用低的治疗手段。
图2是本发明的FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子的透射电镜图与动态光散射图，可见所制备的FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子为较为规则的圆形，粒径比较均匀，尺寸约为30±4nm，与动态光散射测试的结果相一致。
为了证实PTX的释放可能是由还原反应引发，对FA-PEG-SS-PCL@PTX NPs中PTX的释放模式进行研究。将1ml FA-PEG-S-S-PCL@PTX(1.0mg/ml)溶液置入一个透析袋中(截留分子量为3.5kDa)，再将透析袋浸入到45ml不同浓度的GSH(2uM或者20uM)释放溶剂中持续震荡，在预定的时间点，收集1ml释放溶剂，用1ml相应浓度的新鲜GSH溶液置换，采用高效液相色谱法对释放的PTX进行分析。如图3所示，可见FA-PEG-S-S-PCL@PTX纳米粒子在低谷胱甘肽环境下性质保持稳定，几乎不会释放PTX，而在高谷胱甘肽浓度环境中，纳米粒子负载的PTX大量释放，从而实现PTX的定点释放和精准杀伤。
在细胞摄取实验中，将HSC3细胞(舌鳞癌细胞)在共焦培养皿中培养24小时，密度为5.0×104细胞/孔，再将FA-PEG-S-S-PCL@488、PEG-S-S-PCL@488加入孔中，孵育2小时后，将细胞洗涤三次，然后用4％多聚甲醛溶液固定3分钟，用PBS(磷酸缓冲盐溶液)进一步洗涤细胞三次，然后用Cy5将细胞核复染30分钟，最后用PBS洗涤固定的单层细胞三次，并通过共聚焦激光扫描显微镜观察。如图4所示，可见叶酸受体的主动靶向作用可使纳米粒子大量蓄积在肿瘤细胞中。
为了验证该靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子(FA-PEG-S-S-PCL@PTX)的抗肿瘤效果，进行了相关实验。对荷瘤小鼠给予标记，分笼饲养，分别标记为：对照组(PBS组)6只，靶向药组(FA-PEG-S-S-PCL@PTX组)6只、非靶向药组(PEG-S-S-PCL@PTX组)6只、纯药组(PTX组)6只，并且在第0、3、6、9、12、15、18天给药，每次给药5mg/kg 100ul，对照组给予相同剂量的PBS，每次给药前测量小鼠的体重及瘤径，第18天处死小鼠，测量瘤重。其中，
肿瘤体积(V)＝1/2×长径×短径2；
瘤体积抑制率＝(1-试验组平均瘤体积/对照组平均瘤体积)×100％；
瘤重抑制率＝(1-试验组平均瘤重/对照组平均瘤重)×100％；
如图5所示，可见，实验组的抑瘤效果显著优于对照组，其中靶向药组(FA-PEG-S-S-PCL@PTX组)的抑瘤效果显著优于其它组”。
另外，考虑到生物安全性，分别在第1、第7和第21天对小鼠眼球采血进行血细胞分析，测出白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)及血小板(PLT)的数值，在第21天将各组处死后的小鼠心肝脾肺肾及肿瘤组织取下，用4％多聚甲醛固定，脱水，石蜡包埋，4um厚度连续切片，应用苏木素和伊红染色，最后，使用光学显微镜观察。如图6所示，可见实验组与对照组的病理切片与血细胞数值并无明显差异，证明该纳米粒子生物相容性好，毒副作用小。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式；但本发明的保护范围并不局限于此。任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备tBoc-PEG-S-S-OH：将tBoc-PEG和CDI分别溶解在不同的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中制成tBoc-PEG溶液和CDI溶液，然后将tBoc-PEG溶液滴加到CDI溶液中形成混合溶液，在室温下搅拌，再将混合溶液滴加到溶于DMF的-OH-(CH2)2-S-S-(CH2)2-OH溶液中，经过反应得到tBoc-PEG-S-S-OH，所得溶液用分子量为3500Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体tBoc-PEG-S-S-OH；
S2、制备NH2-PEG-S-S-PCL：将固体tBoc-PEG-S-S-OH和CDI分别溶解在不同的DMF中，制成tBoc-PEG-S-S-OH溶液和CDI溶液，然后将tBoc-PEG-S-S-OH溶液滴加到CDI溶液中，在室温下搅拌，将混合物滴加到溶解于DMF中的PCL-COOH溶液中，再搅拌后在所得溶液中加入盐酸，经过反应后得到NH2-PEG-S-S-PCL，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体NH2-PEG-S-S-PCL；
S3、制备FA-PEG-S-S-PCL：将NH2-PEG-S-S-PCL和FA混合在DMF中，依次加入EDCI和NHS，室温下搅拌，再次加入FA后继续搅拌，所得溶液用分子量为5000Da的透析膜在去离子水中透析，通过冻干得到固体FA-PEG-S-S-PCL；
S4、制备FA-PEG-S-S-PCL@PTX：将FA-PEG-S-S-PCL和PTX混合于DMF中，搅拌后在超声波振动的环境下滴加到蒸馏水中，通过离心去除沉淀，将所得溶液与缓冲溶液透析，最终通过冻干生成负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX。
2.根据权利要求1所述的靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述搅拌时间均为12-24小时。
3.根据权利要求1所述的靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述缓冲溶液为磷酸盐溶液。
4.根据权利要求3所述的靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述磷酸盐溶液的PH值为7.2。
5.由权利要求1-4任一项所述的制备方法制备得到的负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX。
6.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法或权利要求5所述的负载紫杉醇的纳米粒子FA-PEG-S-S-PCL@PTX在制备抗肿瘤药物中的应用。
CN202010512561.5A 2020-06-08 2020-06-08 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法 Pending CN111494342A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010512561.5A CN111494342A (zh) 2020-06-08 2020-06-08 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010512561.5A CN111494342A (zh) 2020-06-08 2020-06-08 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111494342A true CN111494342A (zh) 2020-08-07

Family

ID=71878794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010512561.5A Pending CN111494342A (zh) 2020-06-08 2020-06-08 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111494342A (zh)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LEI FAN等: ""Glutathione-sensitive and folate-targeted nanoparticles loaded with paclitaxel to enhance oral squamous cell carcinoma therapy"", 《JOURNAL OF MATERIALS CHEMISTRY B》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10874609B2 (en) ß-cyclodextrin-based star-shaped polymer, a preparation method therefor and an integrated unimolecular micelle system for diagnosis and treatment thereof
CN108542885B (zh) 抗肿瘤药物及其制备方法
CN101327328B (zh) 一种树状聚合物靶向纳米粒子及其制备和应用
JP6230443B2 (ja) 近赤外色素結合ヒアルロン酸誘導体およびそれを有する光イメージング用造影剤
JP4920056B2 (ja) 癌標的性に優れたタンパク質複合体及びその製造方法
CN108409756B (zh) 一种基于喜树碱类的异二聚体多功能前药及其制备方法和应用
CN109288813B (zh) 含硒紫杉醇二聚体前药聚合物纳米粒及其制备方法
CN106267149A (zh) 一种ros响应的脑卒中智能药物载体及其制备方法
CN107106505A (zh) 药物组合物、其制备和用途
CN108339124B (zh) 一种双级脑靶向聚合物胶束递药系统的制备方法和应用
CN102973512B (zh) 负载阿霉素并具有叶酸受体靶向功能的白蛋白纳米粒子制剂及其制备方法
CN101708335A (zh) pH敏感树枝状聚合物药物载体
CN114081953B (zh) 一种前药树状聚合物纳米载体及其制备方法与应用
CN108686226B (zh) 以碱基为载体的纳米药物输送体系
CN111135314A (zh) 一种用于胃癌早期诊断和治疗的纳米复合物及其制备方法
CN112675312A (zh) 一种脑靶向纳米递释系统及其制备方法
CN111592605A (zh) 透明质酸-胱胺-油酸聚合物及在药物传递中的应用
CN108888773B (zh) 自组装球形药物纳米制剂及其制备方法与用途
CN109954144B (zh) 基于改性聚β-氨基酯材料的双级pH响应纳米粒及其制备方法
CN111494342A (zh) 一种靶向叶酸受体的负载紫杉醇的纳米粒子的制备方法
KR101323102B1 (ko) 글리콜키토산-담즙산 복합체에 항암제가 봉입된 나노입자 및 그 제조방법
CN113616806A (zh) 一种铂-艾考糊精-聚己内酯大分子化合物、纳米载药系统及其应用
KR101127402B1 (ko) 페길화된 양친성 고분자 나노 입자 및 이를 이용한 암의 진단 및 치료
EP1232188B1 (fr) Cyclodextrines substituees par des groupements fluoroalkyles, leur preparation et leur utilisation
KR101562369B1 (ko) 폴리히스티딘과 인지질의 결합체를 함유한 pH 감응형 지질펩타이드 및 그의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20200807