CN111484490A - 适合大规模生产b-raf激酶二聚体抑制剂的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种大规模生产B‑RAF激酶二聚体抑制剂1‑((1S,1aS,6bS)‑5‑((7‑氧代‑5,6,7,8‑四氢‑1,8‑二氮杂萘‑4‑基)氧基)‑1a,6b‑二氢‑1H‑环丙并[b]苯并呋喃‑1‑基)‑3‑(2,4,5‑三氟苯基)脲(以下有时称为化合物1)的方法。所述方法避免了使用昂贵的柱层析操作就能将杂质或副产物控制在0.05％或更低。因此，所述方法极大地降低了成本并且适合大规模生成。

Description

适合大规模生产B-RAF激酶二聚体抑制剂的方法

技术领域

本发明涉及一种大规模生产B-RAF激酶二聚体抑制剂1-((1S,1aS,6bS)-5-((7-氧代-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a,6b-二氢-1H-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2,4,5-三氟苯基)脲(以下有时称为化合物1)的方法。所述方法避免了使用昂贵的柱层析操作就能将杂质或副产物控制在0.05％或更低。因此，所述方法极大地降低了成本并且适合大规模生成。

背景技术

PCT专利申请WO 2014/206343 A1中公开了第二代B-RAF抑制剂，其中包括1-((1S,1aS,6bS)-5-((7-氧代-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a,6b-二氢-1H-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2,4,5-三氟苯基)脲。化合物1的结构如下所示:

作为第二代B-RAF抑制剂，化合物1对丝氨酸/苏氨酸激酶的RAF家族，特别是BRAF/CRAF二聚体具有强效抑制作用。该化合物对MAK通道上有突变(包括B-RAF突变和K-RAS/N-RAS突变)的癌症具有靶向治疗作用，是分子靶向治疗剂。相比于第一代B-RAF抑制剂，例如威罗菲尼(vemurafenib)和达拉非尼(dabrafenib)，化合物1得到了改进。

WO 2014/206343 A1中公开了，通过将1a,6b-二氢-1H-环丙并[b]苯并呋喃-1-羰酰叠氮化合物(即WO 2014/206343 A1公开的中间体I)与取代的苯胺反应，得到B-RAF激酶二聚体抑制剂(脲化合物)。但是在WO 2014/206343 A1公开的合成路线(例如参见WO 2014/206343 A1第34页由化合物10和苯胺反应合成式I化合物或者具体地第51页步骤K)中，中间体I与取代的苯胺反应过程中十分容易生成二聚体杂质-1。

该杂质来源于反应体系中的水分，即使严格控制水分的含量该杂质仍然显著存在。由于该杂质的溶解度非常差，即使通过重结晶的操作也不能将该杂质控制到0.5％以下。而且，该杂质与最终产物化合物1的极性相似，只能通过柱层析才能出去。尽管可以通过严格或多次的柱层析操作才可能将该杂质控制在容许限度以下，但是柱层析操作仅适用于合成少量(毫克级到克级)的制备，这样导致了制备成本增加并且不利于对该化合物的大规模生成。

因此，有必要开发合成化合物1的新合成方法，该方法避免了使用昂贵的柱层析操作就能将杂质或副产物控制在0.05％或更低，并且能够极大地降低了成本以及适合大规模生产。

发明内容

本申请公开的方法特别适用于以高质量、高产率可再现的、商业规模的方式制备B-RAF激酶二聚体抑制剂，特别是化合物1。

第一方面，本发明提供了一种式I化合物的合成方法，所述方法包括：对式Ia的胺与式Ib的受保护的氨基甲酰化合物进行缩合反应，得到式I化合物或其可药用盐，

其中，

R¹和R²，相同或不同，各自独立选自氢、卤素、烷基、烯基、环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、炔基、-CN、-NR⁶R⁷、-OR⁶、-COR⁶、-CO₂R⁶、-CONR⁶R⁷、-C(＝NR⁶)NR⁷R⁸、-NR⁶COR⁷、-NR⁶CONR⁷R⁸、-NR⁶CO₂R⁷、-SO₂R⁶、-NR⁶SO₂NR⁷R⁸、-NR⁶SO₂R⁷和-NR⁶SO₂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基和杂环基独立地任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

R⁵选自烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基环，其各自任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

LG为离去保护基；

R⁶、R⁷和R⁸，相同或不同，各自选自H、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；或(R⁶和R⁷)和/或(R⁷和R⁸)与它们所连接的原子一起，各自形成选自杂环基和杂芳基环的环，所述环任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

R⁹选自卤素、卤代烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、炔基、氧代、-烷基-NR^aR^b、-CN、-OR^a、-NR^aR^b、-COR^a、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-C(＝NR^a)NR^bR^c、硝基、-NR^aCOR^b、-NR^aCONR^aR^b、-NR^aCO₂R^b、-SO₂R^a、-SO₂芳基、-NR^aSO₂NR^bR^c、NR^aSO₂R^b和-NR^aSO₂芳基，其中所述环烷基、芳基、杂芳基或杂环基各自独立地任选被一个、两个或三个选自卤素、烷基和卤代烷基的取代基取代，其中R^a、R^b和R^c独立地选自H、卤代烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，或(R^a和R^b)和/或(R^b和R^c)与它们所连接的原子一起，形成选自杂环基和杂芳基环的环，所述杂环基环任选被卤素和烷基取代，所述杂芳基环任选被卤素和烷基取代。

在一实施方案中，式Ia的胺与式Ib的受保护的氨基甲酰化合物的缩合反应在有机溶剂中进行。在一实施方案中，使式Ia的胺于有机溶剂中的溶液与式Ib的受保护的氨基甲酰化合物进行缩合反应。在另一实施方案中，使式Ib的受保护的氨基甲酰化合物于有机溶剂中的溶液与式Ia的胺进行缩合反应。

在一实施方案中，所述缩合反应在无水条件下进行。在一实施方案中，将式Ib的受保护的氨基甲酰化合物加至式Ia的胺于有机溶剂中的溶液中进行缩合反应。

在一实施方案中，所述有机溶剂通常选自非极性溶剂、极性质子溶剂和极性非质子溶剂，或者它们的混合物。合适的极性非质子溶剂包括但不限于N-甲基吡咯烷酮、N-甲基吗啉、甲基异丁基酮、甲基乙基酮、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和二甲基亚砜。合适的极性质子溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇和乙酸。合适的非极性溶剂包括但不限于二噁烷、甲苯、己烷、环己烷和乙醚。

在进一步实施方案中，所述有机溶剂为极性非质子溶剂。在更进一步实施方案中，所述有机溶剂为N-甲基吡咯烷酮、N-甲基吗啉、甲基异丁基酮、甲基乙基酮、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和二甲基亚砜，或者两者或多者的混合物。在甚至更进一步实施方案中，所述有机溶剂为N-甲基吗啉、二甲基亚砜或两者的混合物。

在一实施方案中，对所述有机溶剂的量没有具体限制，条件是能充分溶解所述式Ia的胺。

在一实施方案中，所述缩合反应在真空中进行。在进一步实施方案中，所述缩合反应在低至约-0.10MPa的真空进行。

在一实施方案中，所述缩合反应在约10至50℃的温度或者在约15至25℃的温度进行。在进一步实施方案中，所述缩合反应在约20±5℃的温度进行。

在一实施方案中，所述缩合反应进行至少约0.5小时，至少约1小时，至少约2小时，至少约3小时，至少约4小时。在进一步实施方案中，所述缩合反应进行约3小时。

在一实施方案中，所述缩合反应的产物中杂质-1的含量小于约0.05％(经HPLC检测)。

在一实施方案中，R¹和R²均为氢。

在一实施方案中，R⁵为芳基，其任选取代有1或2或3个取代基R⁹。在进一步实施方案中，R⁵为苯基，其任选取代有1或2或3个卤素。在更进一步实施方案中，R⁵为2,4,5-三氟苯基。

在一实施方案中，式I化合物为1-((1S,1aS,6bS)-5-((7-氧代-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a,6b-二氢-1H-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2,4,5-三氟苯基)脲或其可药用盐。

尽管对离去保护基没有具体限定，但是在一实施方案中，LG为烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或-OR^a，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代，以及其中R^a为烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基，其任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代。在进一步实施方案中，LG为-OR^a，其中R^a为苯基，所述苯基任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代。在更进一步实施方案中，LG为未取代的苯氧基。

在更进一步实施方案中，式Ib化合物为

在一实施方案中，式Ia化合物是通过使式Ia-2化合物在有机溶剂中在酸的存在下反应而生成的，

在进一步实施方案中，所述有机溶剂为选自非极性溶剂、极性质子溶剂和极性非质子溶剂，或者它们的混合物。合适的极性非质子溶剂包括但不限于N-甲基吡咯烷酮、N-甲基吗啉、甲基异丁基酮、甲基乙基酮、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和二甲基亚砜。合适的极性质子溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇和乙酸。合适的非极性溶剂包括但不限于二噁烷、甲苯、己烷、环己烷和乙醚。在更进一步实施方案中，所述溶剂为乙醇或二氯甲烷。

在进一步实施方案中，所述酸为无机酸，例如选自盐酸、磷酸、氢溴酸、硫酸、亚硫酸和硝酸等；以及有机酸，例如选自苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、枸橼酸、乳酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、2-羟基乙磺酸、苯甲酸、水杨酸、硬脂酸、链烷酸(诸如乙酸和与HOOC-(CH₂)_n-COOH，其中n选自0-4)等。

对所述反应温度没有具体限制，通常在室温进行。

在一实施方案中，式Ia-2化合物是通过使式Ia-1化合物在(Boc)₂O/t-BuOH中在催化剂的存在下反应而生成的，

由式Ia-1化合物生成式Ia-2的反应通常在约70-100℃的温度进行，优选在约85±5℃进行。

尽管在式Ia-1的酰基叠氮和叔丁醇发生Curtis重排反应的过程中也会生成杂质-1，但是由于杂质-1和式Ia-2的氨基甲酸叔丁酯的溶解性和极性都相差很大，因此在该步反应中可以选择硅胶垫过滤的办法就可将杂质-1除去，从而顺利得到不含杂质的式Ia的中间体胺。在一实施方案中，杂质-1可以在从式Ia-1的酰基叠氮生成式Ia-2的氨基甲酸叔丁酯之后除去。在另一实施方案中个，杂质-1可以在由式Ia-2的氨基甲酸叔丁酯生成式Ia的胺之后除去，这样更进一步降低成本，也更加便利。除去杂质-1的方法包括常规的方法，例如硅胶垫或硅藻土过滤等适合工业化的操作。

在一实施方案中，所述催化剂为DMAP。

第二方面，本发明涉及式Ia化合物

或其可药用盐，其中R¹和R²如以上所定义。在一实施方案中，所述式Ia化合物为

或其可药用盐。在进一步实施方案中，所述式Ia化合物为

具体实施方式

定义和一般术语

除非另有说明，本发明使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的具有相同含义。本发明涉及的所有专利和公开出版物通过引用方式整体并入本发明。尽管在本发明的实践或者测试中可以使用与本发明所述相似或者相同的任何方法和物质，但是本发明中描述的是优选的方法、设备和物质。

“烷基”是指选自包含1-18个，诸如1-12个，进一步诸如1-10个，更进一步诸如1-6个碳原子的直链及支链饱和烃基的烃基。烷基的实例可选自甲基、乙基、1-丙基或正丙基("n-Pr")、2-丙基或异丙基("i-Pr")、1-丁基或正丁基("n-Bu")、2-甲基-1-丙基或异丁基("i-Bu")、1-甲基丙基或仲丁基("s-Bu")以及1,1-二甲基乙基或叔丁基("t-Bu")。烷基的其它实例可选自1-戊基(正戊基、-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)、3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)、3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)、2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)、1-己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)、3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃))、2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)、3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)和3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃。

“烯基”是指选自包含至少一个C＝C双键和2-18个诸如2-6个碳原子的直链及支链烃基的烃基。烯基的实例可选自乙烯基(ethenyl)或乙烯基(vinyl)(-CH＝CH₂)、丙-1-烯基(-CH＝CHCH₃)、丙-2-烯基(-CH₂CH＝CH₂)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。

“炔基”是指选自包含至少一个C≡C三键和2-18个诸如2-6个碳原子的直链及支链烃基的烃基。炔基的实例包括乙炔基(-C≡CH)、1-丙炔基(-C≡CCH₃)、2-丙炔基(炔丙基，-CH₂C≡CH)、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基。

“环烷基”是指选自饱和的环状烃基，所述环状烃基包括单环和多环(例如，二环和三环)基团。例如环烷基可包含3-12个，诸如3-8个，进一步诸如3-6个、3-5个或3-4个碳原子。进一步举例而言，环烷基可选自包含3-12个，诸如3-8个、3-6个碳原子的单环。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一基和环十二基。二环环烷基的实例包括具有7-12个碳原子的二环环烷基，其排列成选自[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]和[6,6]环系统的二环，或排列成选自二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷的桥接二环。二环环烷基的其它实例包括排列成选自[5,6]和[6,6]环系统的二环的那些，诸如

其中波浪线表示连接点。所述环可为饱和的或具有至少一个双键(即部分不饱和的)，但不完全共轭，且如本申请对芳族定义的那样是非芳族的。

“芳基”是指选自以下的基团：

-5元或6元碳环芳族环，例如，苯基；

-二环环系统，诸如7-12元二环环系统，其中至少一个环为碳环和芳族环，例如选自萘和1,2,3,4-四氢喹啉；以及

-三环环系统，诸如10-15元三环环系统，其中至少一个环为碳环和芳族环，例如芴。

“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br或I。

“杂芳基”是指选自以下的基团：

-5-7元芳族单环，其包含至少一个选自N、O和S的杂原子，例如1-4个，或者在一些实施方案中为1-3个，剩余环原子为碳；

-8-12元二环，其包含至少一个选自N、O和S的杂原子，例如1-4个，或者在一些实施方案中为1-3个，或者在其它实施方案中为1个或2个，剩余环原子为碳，且其中至少一个环为芳族的且芳族环中存在至少一个杂原子；以及

-11-14元三环，其包含至少一个选自N、O和S的杂原子，例如1-4个，或者在一些实施方案中为1-3个，或者在其它实施方案中为1个或2个，剩余环原子为碳，且其中至少一个环为芳族的且芳族环中存在至少一个杂原子。

例如，所述杂芳基包括稠合至5-7元环烷基环的5-7元杂环芳族环。对于其中只有一个环包含至少一个杂原子的上述稠合二环杂芳基环系统来说，连接的位点可在杂芳环或在环烷基环。

当杂芳基中S和O原子的总数超过1时，所述杂原子彼此不相邻。在一些实施方案中，杂芳基中S和O原子的总数至多为2。在一些实施方案中，芳族杂环中S和O原子的总数至多为1。

杂芳基的实例包括，但不限于，(从指定为优先次序1的连接位置开始编号)，吡啶基(诸如2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、噌啉基、吡嗪基、2,4-嘧啶基、3,5-嘧啶基、咪唑基(例如，2,4-咪唑基)、咪唑并吡啶基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、四唑基、噻吩基、三嗪基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、酞嗪基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、三唑基、喹啉基、异喹啉基、吡唑基、吡咯并吡啶基(诸如1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)、吡唑并吡啶基(诸如1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)、苯并噁唑基(诸如苯并[d]噁唑-6-基)、蝶啶基、嘌呤基、1-氧杂-2,3-二唑基、1-氧杂-2,4-二唑基、1-氧杂-2,5-二唑基、1-氧杂-3,4-二唑基、1-硫杂-2,3-二唑基、1-硫杂-2,4-二唑基、1-硫杂-2,5-二唑基、1-硫杂-3,4-二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基、呋喃并吡啶基、苯并噻唑基(诸如苯并[d]噻唑-6-基)、吲唑基(诸如1H-吲唑-5-基)和5,6,7,8-四氢异喹啉基。

“杂环的”或“杂环”或“杂环基”是指选自4-12元单环、二环和三环饱和及部分不饱和环的环，所述环除了至少一个(诸如1-4个、再诸如1-3个或者再诸如1个或2个)选自氧、硫和氮的杂原子之外还包含至少一个碳原子。本申请中“杂环”还指与5-、6-和/或7-元环烷基，碳环芳族环或杂芳族环稠合的5-7-元杂环，其包含至少一个选自N、O和S的杂原子，条件是当杂环与碳环芳族环或杂芳族环稠合时，连接的位点在杂环，而当杂环与环烷基稠合时，连接的位点可在环烷基或杂环。本申请中“杂环”还指包含至少一个选自N、O和S的杂原子的脂族螺环，条件是连接的位点在杂环。所述环可为饱和的或具有至少一个双键(即部分不饱和的)。所述杂环可取代有氧代。杂环中连接的位点可为碳或杂原子。杂环不是本申请所定义的杂芳基。

杂环的实例包括，但不限于，(从指定为优先次序1的连接位置开始编号)，1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、2,4-咪唑烷基、2,3-吡唑烷基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2,5-哌嗪基、吡喃基、2-吗啉基、3-吗啉基、氧杂环丙基、氮杂环丙基、硫杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、1,2-二硫杂环丁基、1,3-二硫杂环丁基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、硫吗啉基、氧硫杂环己基、哌嗪基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚基、氧杂环庚基、硫杂环庚基、1,4-氧硫杂环己基、1,4-二氧杂环庚基、1,4-氧硫杂环庚基、1,4-氧氮杂环庚基、1,4-二硫杂环庚基、1,4-硫氮杂环庚基和1,4-二氮杂环庚基、1,4-二噻烷基、1,4-氮硫杂环己基、氧氮杂

基、二氮杂

基、硫氮杂

基、二氢噻吩基、二氢吡喃基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二氧杂环戊基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫杂环戊基、吡唑烷基、咪唑啉基、嘧啶酮基、1,1-二氧代-硫吗啉基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3-氮杂二环[4.1.0]环庚基和氮杂二环[2.2.2]环己基。经取代的杂环还包括取代有一个或多个氧代部分的环系统，诸如哌啶基N-氧化物、吗啉基-N-氧化物、1-氧代-1-硫吗啉基和1,1-二氧代-1-硫吗啉基。

除非另有说明，否则本申请所用的术语“约”表示数量(例如，温度、pH、体积等)可在±10％内变化，优选在±5％内变化。

以下合成方法和具体实施例进一步描述了本发明，但是它们不应被解释成以任何方式限定或限制本发明的范围。

实施例

以下实施例是示例性的。尽管已经做出努力以确保关于所使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是应该考虑一些实验误差和偏差。除非另有说明，否则温度为摄氏度。试剂购自商业供应商，诸如Sigma-Aldrich、Alfa Aesar或TCI，除非另有说明，否则无需进一步纯化即可使用。

除非另有说明，否则下述反应在氮气或氩气的正压力下或在无水溶剂中用干燥管进行；反应烧瓶配有橡胶隔片，用于通过注射器引入底物和试剂；将玻璃器皿烘箱干燥和/或加热干燥。

除非另有说明，否则柱色谱纯化在具有硅胶柱的Biotage系统(制造商：DyaxCorporation)上或在二氧化硅SepPak柱(Waters)上进行，或者在使用预填充硅胶管柱的Teledyne Isco Combiflash纯化系统上进行。

在400MHz操作的Varian仪器上记录¹H NMR谱。

在以下实施例中，可以使用以下缩写：

AcOH 乙酸

ACN 乙腈

API 活性药物成分

Aq 水性或水溶液

Brine 饱和氯化钠水溶液

Bn 苄基

BnBr 苄基溴

CH₂Cl₂ 二氯甲烷

DMA N,N-二甲基乙酰胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

Dppf 1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁

DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯

DCM 二氯甲烷

DIEA或DIPEA N,N-二异丙基乙基胺

DMAP 4-N,N-二甲基氨基吡啶

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

Et₂O或ether 乙醚

g 克

H或hr 小时

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐

HCl 盐酸

HPLC 高效液相色谱

HPMCAS 乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素

IPA或i-PrOH 2-丙醇或异丙醇

mg 毫克

mL 毫升

Mmol 毫摩尔

MeCN 乙腈

MeOH 甲醇

Min 分钟

ms或MS 质谱

Na₂SO₄ 硫酸钠

PE 石油醚

PPA 多聚磷酸

Rt 保留时间

Rt或rt 室温

TBAF 四丁基氟化铵

TBSCl 叔丁基二甲基氯硅烷

TEA 三乙醇胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱

TMSCl 三甲基氯硅烷

μL 微升

实施例1

步骤1：INTQ-1的合成

将1,4-二噁烷(1.5体积)添加至2L的4颈圆底烧瓶中，将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次。然后将Pd(OAc)₂(2wt％,0.50kg)和XantPhos(9wt％,2.25kg)添加至烧瓶中，将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次。在氮气气氛下将混合物在室温搅拌0.5～1小时。将NaOH(12.25kg,1.6当量)、H₂O(1体积,25L)和1,4-二噁烷(8体积,200L)添加至20L反应器中。搅拌混合物直至澄清，然后将SM3(26.75kg,1.2当量)添加至混合物中。在氮气气氛下将催化剂溶液转移到上述反应器中。然后将SM1(25.00kg,1.0当量)逐滴添加至反应器中。将体系加热至65±5℃并保持在65±5℃至少5小时。HPLC用于监测反应直至SM1的含量不超过1.0％。将反应混合物冷却至30±5℃，然后过滤，滤饼用1,4-二噁烷(1.0体积)洗涤。将H₂O(4体积)添加至滤液中并浓缩至5体积。然后将H₂O(2体积)添加至残余物中并浓缩至5体积。将残余物冷却至室温并过滤。将滤饼用H₂O(2体积)洗涤。然后将滤饼用IPA(2体积)在25±5℃浆化3小时。过滤混合物，滤饼用IPA(0.5体积)洗涤。将固体在减压下在烘箱中干燥。

步骤2和3：INTQ-3的合成

将THF(25体积)和INTQ-1(16.00kg,1.0当量)添加至反应器中。搅拌混合物并冷却至-80～-70℃。然后在-80～-70℃向混合物中逐滴添加n-BuLi(正己烷溶液,2.5M,51.20kg,2.5当量)。在-80～-70℃反应1-2小时后，通过TLC监测反应。然后在-80～-70℃将DMF(9.92kg,1.8当量)的THF(1.4体积)溶液逐滴添加至反应体系中。在-80～-70℃反应1-2小时后，通过TLC监测反应。在-80～-70℃将AcOH于THF(1.4体积)中的溶液逐滴添加至混合物中，以将PH值调节至6～7。然后在-80～-70℃将TEA(8.00kg,1.05当量)添加至反应中。向反应混合物中逐滴添加甲基三苯基亚正膦基乙酸酯(26.4kg,1.05当量)在DCM(19体积)中的溶液。将混合物在-80～-70℃搅拌10小时，然后通过TLC监测反应。将H₂O(10.5体积)和柠檬酸(32.00kg,2.1当量)加入另一反应器中。搅拌混合物使其溶解并冷却至0～5℃。将温度冷却至-20℃并将溶液转移到上述3L的4颈圆底烧瓶中。然后将混合物在20℃以下搅拌1小时，确认pH值在4～7之间。分离有机层并用25％NaCl(17体积)洗涤。然后将有机相浓缩至5体积并将EtOAc(17体积)加入混合物中并浓缩至5体积。将EtOAc(17体积)加入混合物中并浓缩至5体积。该溶液直接用于下一步骤。

步骤4：INTQ-4的合成

将INTQ-3于EtOAc的溶液加入反应器中。搅拌溶液并冷却至-5～5℃。在-5～5℃将HCl加入混合物中保持2小时。然后将混合物加热至20～30℃。在反应5小时后，每2小时使用HPLC监测反应，直至INTQ-3的含量小于0.5％。将反应混合物浓缩至10体积并冷却至0～5℃。将残余物在0～5℃搅拌1小时。过滤混合物，将滤饼加入H₂O(15体积)中。将混合物在20～30℃搅拌2小时。过滤混合物，滤饼用H₂O(3体积)洗涤。然后将滤液转移到另一个反应器中并将Na₂CO₃加入混合物中以将PH值调节至8～9。然后过滤混合物，滤饼用H₂O(4体积)洗涤。在真空烘箱中干燥后，得到20.73kg(产率：69.0％，纯度：95.0％)的INTQ-4。

步骤5：INTQ-5的合成

将INTQ-4(10.40kg,1.0当量)、Pd/C(15％wt,1.25kg)和THF(11体积)加入反应器中。搅拌混合物并加热至30～35℃。加入氢气至10atm的压力。在反应15小时后，每2小时使用HPLC监测反应，直至INTQ-4的含量小于0.5％。将反应混合物冷却至20-30℃并通过硅藻土(0.2wt)过滤。将滤饼用THF(2体积)洗涤。将滤液浓缩至3体积并将EtOH(6体积)添加至混合物中。将溶液浓缩至3体积并将EtOH(6体积)加入混合物中。将混合物浓缩至3体积并直接用于下一步骤。

步骤6：BGB-INTQ-6的合成

将INTQ-5(来自前一步骤)于EtOH(3体积)中的溶液、EtOH(7体积)和Et₃N(22％wt,2.29kg)加入反应器中。将溶液加热至70～80℃。反应15小时后，每隔2小时用HPLC监测反应，直至INTQ-5的含量小于1.0％。将反应混合物冷却至30～40℃并浓缩至5体积。将混合物冷却至-5～0℃并搅拌2小时。过滤混合物，滤饼用EtOH(1体积)洗涤。在45±5℃的烘箱中干燥后，得到7.58kg(产率：87.1％，纯度：99.5％)的INTQ-6。

步骤7：INTQ-7的合成

将氢氧化钾(49.9Kg,1.7当量)添加至4-甲氧基苯酚(65Kg,1.0当量)于DMSO(65L,1体积)中的溶液中。将系统加热至120℃。逐滴添加溴乙醛二乙缩醛(123.8Kg,1.2当量)，同时保持温度在120～140℃。通过HPLC监测反应完成后将反应混合物冷却至20～40℃。将正庚烷(2体积)和水(2体积)加入到反应混合物中。将混合物通过硅藻土(0.2wt)过滤，并将滤饼用正庚烷(0.5体积)洗涤。将滤液静置至少30分钟。分离有机层，水层用正庚烷(2体积)萃取。将合并的有机层用2N NaOH水溶液(2体积)洗涤。将有机层用15％NaCl水溶液(2体积)洗涤两次。将有机层浓缩至3体积。添加甲苯(3体积)并继续浓缩至3体积。INTQ-7的甲苯溶液直接用于下一步骤。

步骤8：INTQ-8的合成

将Amberlyst-15(3.8Kg,0.1wt)添加至甲苯(760L,20体积)中。在N₂保护下将系统加热至110℃。逐滴添加INTQ-7(38Kg/批,3批,1.0当量)于甲苯中的溶液，同时保持温度在105～110℃。反应1小时后，将反应体系在105～110℃的恒定压力下浓缩至17体积。将甲苯(3倍体积)加入系统中。通过HPLC监测反应完成后将反应混合物冷却至20～40℃。将混合物通过硅藻土(0.1wt)过滤，滤饼用甲苯(0.5体积)洗涤。滤液用2N NaOH水溶液(2体积)洗涤。有机层用20％NaCl水溶液(2体积)洗涤两次。将有机层浓缩至2体积。将粗产物在110℃以下蒸馏，得到INTQ-8，其为灰白色固体(43Kg,收率＝61.2％,纯度≥98.0％)。

步骤9：INTQ-9的合成

将1-十二烷硫醇(147.0Kg,3.5当量)添加至INTQ-8(43Kg,1.0当量)于NMP(260L,6体积)中的溶液中。将体系加热至75±5℃。分批加入乙醇钠(69.0Kg,3.5当量)，同时保持温度低于120℃。将反应混合物加热至130±5℃。每小时对混合物取样用于HPLC，直至在130±5℃反应16小时后PH-BEI-BGB-3289-INTQ-8的含量≤3.0％。将反应混合物冷却至60±5℃，然后向混合物中加入8体积水。将反应混合物冷却至25±5℃，然后向混合物中加入3体积石油醚。将混合物搅拌至少30分钟并静置至少30分钟，分离。有机相是临时存储的。用6N HCl将水相调节至pH＝1～2。分别用5体积和3体积乙酸乙酯萃取水相。将残余物水溶液与临时有机相合并，然后加入4体积乙醇和4体积石油醚。将混合物搅拌至少30分钟并静置至少30分钟，然后分离。用6N HCl将水相调节至pH＝1～2。用5倍体积乙酸乙酯萃取水相。合并乙酸乙酯的有机相，并在低于50℃的压力下浓缩至3体积。向残余物中加入5体积正庚烷，并用5％NaOH将混合物调节至PH＝9～10。将混合物搅拌至少30分钟并静置至少30分钟，分离。用6N HCl将水相调节至pH＝1～2。分别用5体积和3体积乙酸乙酯萃取水相。然后合并乙酸乙酯的有机相，用6体积10％H₂O₂和浓HCl(0.15wt)洗涤。然后用6体积5％H₂O₂和浓HCl(0.15wt)洗涤有机相。用4体积5％Na₂SO₃洗涤有机层。用3体积盐水洗涤有机层三次。将有机层浓缩至3体积。添加二氯甲烷(5体积)并继续浓缩至无明显级分(fraction)。INTQ-9的粗产物直接用于下一步骤。

步骤10：INTQ-10的合成

将Et₃N(48.2Kg,2.0当量)添加至低于40℃的INTQ-9(32Kg,1.0当量)于二氯甲烷(10体积)中的溶液中。将混合物冷却至-5±5℃。逐滴添加于二氯甲烷(1体积)中的TMSCl(1.3当量)，同时保持温度在-5±5℃。每小时对混合物取样用于气相色谱，直至在-5±5℃反应1小时后INTQ-9的含量≤2.0％。将混合物在低于40℃的压力下浓缩至3体积。向残余物中加入15体积的正己烷，并将混合物搅拌至少30分钟。过滤混合物，在低于40℃的压力下浓缩滤液至没有明显的级分。将粗产物在120℃以下蒸馏，得到INTQ-10，其为浅黄色油状物(40Kg,收率＝81.4％,纯度≥97.5％)。

步骤11：INTQ-11的合成

将于二氯甲烷(5体积)中的INTQ-10(20Kg/批,2批,1.0当量)与CuI(0.1wt)在25±5℃浆化2～3小时。在N₂气氛下，在20～30℃，将三氟甲磺酸亚铜(I)(与甲苯的2:1络合物，0.11％wt)和(S,S)-2,2-双(4-苯基-2-噁唑啉-2-基)丙烷(0.15％wt)于二氯甲烷(4体积)中搅拌2～3小时。通过小孔过滤器加入INTQ-10于二氯甲烷中的溶液，在20～30℃在15～25小时内缓慢逐滴添加重氮乙酸乙酯(2.0当量)于二氯甲烷(10体积)中的溶液。将混合物在20～30℃搅拌30～60分钟，在20～30℃用4体积0.05N乙二胺四乙酸二钠二水合物洗涤混合物三次。用3体积25％NaCl水溶液洗涤有机部分两次。将有机部分在低于35℃的真空下浓缩，直至系统不超过3体积。INTQ-11的粗产物直接用于下一步骤。

步骤12和13：INTQ-13的合成

步骤12：将INTQ-11的粗产物溶于甲醇(3体积)中，将38％HCl/EtOH(0.1体积)添加至混合物中并在20～30℃搅拌2～3小时。向混合物中逐滴添加Et₃N以调节PH＝7。将混合物在压力下浓缩至2体积。加入乙酸乙酯(2体积)并继续在压力下浓缩至2体积。加入正庚烷(2体积)并继续在压力下浓缩至2体积。加入二氯甲烷(2体积)使该物质完全溶解。通过硅胶色谱法纯化残余物(用EtOAc:PE＝1:5洗脱，总共约100体积)，得到INTQ-12，其为黄色固体。

步骤13：将INTQ-12加入EtOAc(1.5体积)和正庚烷(20体积)中，将混合物加热至75～85℃直至澄清。将澄清溶液在75～85℃搅拌1小时，然后逐渐冷却至15～20℃。过滤混合物并用正庚烷(2体积)洗涤，得到产物。将湿产物在55±5℃干燥至少16小时，得到INTQ-13，其为浅黄色至灰白色固体。

步骤14和15：INTQ-15的合成

步骤14：将INTQ-13(16Kg,1.0当量)和INTQ-6(12.7Kg,1.05当量)添加至DMF(5体积)中。将体系加热至55±5℃。添加碳酸铯(29.6Kg,1.25当量)。将反应混合物加热至110±5℃。每小时对混合物取样用于HPLC，直至在110±5℃反应2小时后INTQ-13的含量≤0.5％。将反应混合物冷却至30±5℃，然后用乙酸(5wt)在30±5℃调节至pH＝6。在25±5℃将水(30体积)添加至混合物中。将混合物搅拌1～2小时并过滤，得到湿产物。将湿产物与水(5体积)再浆化。滤饼直接用于下一步骤。

步骤15：将INTQ-14的湿产物添加至1N NaOH(10体积)和THF(20体积)的混合物中。将体系在25±5℃搅拌。每小时取样用于HPLC，直至在25±5℃反应4小时后INTQ-14的含量≤0.5％。用4N HCl在25±5℃将体系调节至pH＝4～5并搅拌1小时。在低于50℃的压力下将体系浓缩至8体积，然后过滤，得到湿产物。将湿产物与THF(10体积)再浆化。将混合物搅拌1～2小时并过滤，得到湿产物。将湿产物在55±5℃干燥至少30小时，得到INTQ-15，其为浅棕色至灰白色固体。

根据下述方案1，从中间体INTQ-15合成化合物1：

方案1

步骤16和17和18：INTQ-18的合成

将反应器抽真空至≤-0.08MPa，然后充入惰性氮气。将1,4-二噁烷(10.0体积)，INTQ-15(3.6Kg,1.0当量)添加至反应器中。将混合物在低于50℃浓缩至6.0～6.5体积，并对混合物取样以获得水的含量。将Et₃N(1.1当量)加入反应器中。将混合物加热至30±5℃，并将DPPA(1.1当量)逐滴添加至反应器中。在30±5℃反应2小时后，将混合物取样用于HPLC分析，直至INTQ-15的含量≤1.0％。获得了INTQ-16的溶液。

将反应器抽真空至≤-0.08MPa，然后充入惰性氮气。将t-BuOH(20.0体积)、(Boc)₂O(0.5当量)和DMAP(0.02当量)加入反应器中。将混合物加热至85±5℃，搅拌2～3小时，并对混合物中的水含量进行取样。标准是KF≤0.01％。将INTQ-16的溶液在85±5℃滴加到上述t-BuOH体系的反应器中(持续至少3小时)。在85±5℃反应2小时后，将混合物取样用于HPLC分析，直至INTQ-16的含量≤1.0％。然后将混合物冷却至低于50℃，并在50℃以下浓缩至3.0～4.0体积。

将DCM(10.0体积×2)加入到残余物中，并将混合物在50℃以下浓缩至3.0～4.0体积。将DCM(10.0体积)加入到残余物中。然后将1wt％NaOH水溶液(20.0体积)加入反应器中并在25±5℃搅拌至少1小时。将混合物通过硅藻土过滤，然后分离。用水(5.0体积)洗涤有机相并分离。用25wt％盐水(5.0体积)进一步洗涤有机相，用硅胶垫过滤分离以除去部分杂质，其中包括杂质-1。将有机相在40℃以下浓缩至6.0～7.0体积。加入DCM至7.0体积。然后将混合物冷却至不超过15℃，并在不高于15℃的温度将盐酸(1.2体积)逐滴添加至反应器中。在15±5℃反应3小时后，将混合物取样用于HPLC分析，直至INTQ-17的含量≤4.0％。将混合物加热至25±5℃，向反应器中添加水(3.0体积)。

INTQ-16:¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.48(s,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),7.34(d,J＝2.4Hz,1H),7.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.00(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.25(d,J＝5.6Hz,1H),5.42(d,J＝5.2Hz,1H),3.56(dd,J＝5.2,2.8Hz,1H),2.92(t,J＝7.6Hz,2H),2.54(d,J＝8.0Hz,2H),1.51(d,J＝3.2Hz,1H).MS:M/e 364(M+1)⁺.

INTQ-17:¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.49(s,1H),7.94(d,J＝6.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.18(s,1H),6.96–6.83(m,2H),6.22(d,J＝5.6Hz,1H),4.86(d,J＝5.6Hz,1H),2.92(t,J＝7.6Hz,2H),2.86(d,J＝4.8Hz,1H),2.54(t,J＝7.6Hz,2H),2.12(s,1H),1.39(s,9H).MS:M/e 410(M+1)⁺.

pH调节过程：将4wt％NaOH水溶液逐滴添加至反应器中以将pH值调节至2.7～3.1。如果pH>3.1，则加入盐酸(0.2体积)，然后将4wt％NaOH水溶液逐滴添加至反应器中，以将pH值调节到2.7～3.1(精密pH试纸，范围2.7～4.7)；分离混合物，收集乳液相作为水相。将混合物通过硅藻土过滤，并将所得水相用DCM(2.0体积)洗涤一次。向反应器中的剩余水相中加入DCM(6.0体积)和EtOH(5.0体积)。将10.0wt％Na₂CO₃溶液逐滴添加至反应中，以在25±5℃将pH值调节至8～9。将混合物搅拌10～15分钟并静置10～15分钟。分离混合物，水相用DCM(4.0体积)萃取2次。合并有机相，用水(2.0体积)洗涤，分离，有机相用25wt％盐水(5.0体积)洗涤一次。将有机相在45℃以下浓缩至3.0～4.0体积，然后将正庚烷(4.0体积)加入到残余物中。将混合物在45℃以下浓缩至3.0～4.0体积，然后将正庚烷(4.0体积)加入到残余物中。将混合物在45℃以下浓缩至3.0～4.0体积。将残余物冷却至25±5℃，然后离心，用正庚烷(2.0体积)洗涤固体。将滤饼转移到真空烘箱中，在45±5℃(箱温)干燥4小时后，将混合物取样用于干燥失重(LOD)，直至LOD≤1.0％。报道了INTQ-18(2.25kg)的纯度。将产品包装在双LDPE塑料袋中并在2～30℃储存。

INTQ-18:¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.87(s,3H),8.05(d,J＝6.0Hz,1H),7.33(t,J＝1.2Hz,1H),7.07–6.95(m,2H),6.34(d,J＝6.0Hz,1H),5.24(d,J＝6.0Hz,1H),3.32(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.59(t,J＝7.6Hz,2H),2.46(s,1H).MS:M/e 310(M+1)⁺.

步骤19：INTQ-19的合成

将反应器抽真空至≤-0.08MPa，然后充入惰性氮气。将THF(6.0体积)、H₂O(3.0体积)、2,4,5-三氟苯胺(1.0当量)、NaHCO₃(1.2当量)加入反应器中。将混合物冷却至0℃，在0±5℃缓慢添加氯甲酸苯酯。将混合物搅拌至少2小时。对混合物取样用于LCMS，直至2,4,5-三氟苯胺≤0.2％。然后添加EA(15.0体积)。用H₂O(5.0体积)洗涤有机相，然后用5wt％HCl水溶液(5.0体积)洗涤2次，用饱和NaCl(5.0体积)洗涤2次。将有机相在低于45℃浓缩至10.0体积。将正庚烷(10.0体积)加入残余物中。将混合物浓缩至10.0体积，然后将正庚烷(10.0体积)加入到残余物中。将混合物浓缩至10.0体积并离心，用正庚烷(2.0体积)洗涤固体。将滤饼取样用于LCMS分析，其中INTQ-19的标准>99％。然后将滤饼转移到真空烘箱中并在35±5℃(箱温)干燥10小时后取样LOD，直至LOD≤2.0％。报道了INTQ-19的纯度。将产品包装在双LDPE塑料袋中并在2-30℃储存。

INTQ-19:¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.20(s,1H),7.82(dt,J＝12.0,8.0Hz,1H),7.66(td,J＝10.8,7.6Hz,1H),7.44(t,J＝7.6Hz,2H),7.33–7.20(m,3H).

步骤20：化合物1的合成

将反应器抽真空至≤-0.08MPa，然后充入惰性氮气。将DMSO(9.0体积)、INTQ-18(1.63Kg,1.0当量)和N-甲基吗啉(NMM,1.0当量)加入反应器中。将混合物在20±5℃搅拌至少0.5小时。将INTQ-19(1.27Kg,0.9当量)在20±5℃加入反应器中。在20±5℃反应3小时后，将混合物取样用于HPLC分析，直至INTQ-19的含量≤0.3％。反应完成后，将化合物1的混合物通过微量过滤器逐滴添加至0.5％盐酸溶液中，该溶液也在20±5℃通过微米过滤器(30.0体积)缓慢过滤。将混合物搅拌至少4小时并离心。滤饼用纯净水(5.0体积×2)洗涤。

浆化操作：将DMSO(9.0体积)和0.5％盐酸通过微米过滤器(30.0体积)加入反应器中，并将滤饼加入反应器中，并将混合物在20±5℃搅拌至少4小时，然后离心。将滤饼用纯净水(5.0体积×2)洗涤。将滤饼取样用于HPLC分析，化合物1的标准≥98.0％。如果化合物1<98.0％，则重复“浆化操作”。将纯净水(40.0体积)和滤饼加入反应器中，并将混合物在20±5℃搅拌至少4小时，然后离心。将滤饼用纯净水(5.0体积×2)洗涤。然后将滤饼在45±5℃真空干燥至少8小时，直至LOD≤3.0％。如果溶剂残留物不符合标准，则通过浆化除去残余溶剂：将纯净水(40.0体积)和产物加入反应器中，并将混合物在20±5℃搅拌至少4小时，然后离心。将滤饼用纯净水(5.0体积×2)洗涤。将滤饼在45±5℃真空干燥至少8小时，直至LOD≤3.0％。对滤饼取样以获得溶剂残余物。如果溶剂残留物不符合标准，则重复“通过浆化除去残余溶剂”的操作，直到溶剂残留物符合标准。取样物质进行HPLC分析，化合物1的标准≥98.0％(2.02kg)，并且没有发现杂质-1，即杂质-1的含量小于0.05％。

化合物1:¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.47(s,1H),8.54(s,1H),8.23–8.07(m,1H),7.96(d,J＝5.6Hz,1H),7.65–7.51(m,1H),7.23(s,1H),7.01(d,J＝2.0Hz,1H),6.96–6.87(m,2H),6.25(d,J＝5.6Hz,1H),4.98(d,J＝6.0Hz,1H),2.97(dd,J＝5.6,1.6Hz,1H),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),2.54(t,J＝7.6Hz,2H),2.26(s,1H).

实施例2

以与实施例1步骤19类似的方式合成中间体INTQ-20，然后与中间体INTQ-18进行缩合反应以合成化合物1。

但是INTQ-20不稳定，生成INTQ-20的产物中大部分是副产物杂质-2，以及副产物杂质-3(可能是分离中间体INTQ-20时，所采用的LCMS流动相中的甲醇参与反应的结果)。

尽管对合成路线进行了优化，即对中间体INTQ-20反应液和中间体INTQ-18直接进行一锅法反应，但是产物中仍含有很大量的杂质-2。

实施例3

以与实施例1步骤19类似的方式合成中间体INTQ-21，然后与中间体INTQ-18进行缩合反应以合成化合物1。

但是，使中间体INTQ-21与中间体INTQ-18进行缩合反应时，在室温反应时没有检测到化合物1的生成，即使在100℃反应，也没有检测到化合物1的生成。

实施例4

以与实施例1步骤19类似的方式合成中间体INTQ-22，然后与中间体INTQ-18进行缩合反应以合成化合物1。

但是，中间体INTQ-22的合成中没有成功地分离出INTQ-22，主要是杂质-2(可能是对硝基苯酚基团很容易被离去，所以在生成活性酯时，所生成活性酯很容易和其它的三氟苯胺分子生成杂质-2)和对硝基苯酚。

以上实施例和实施方案的描述是示例性的，而非限制由权利要求书所限定的本发明。在不脱离如权利要求中所阐述的本发明的情况时，可以使用上述特征的多种变化和组合。所有这些变化都包括在本发明的范围内。引用的所有参考文献都通过引用整体并入本申请。

Claims (20)

1.一种制备式I化合物的方法，所述方法包括：对式Ia的胺与式Ib的受保护的氨基甲酰化合物进行缩合反应，得到式I化合物或其可药用盐，

其中，

R¹和R²，相同或不同，各自独立选自氢、卤素、烷基、烯基、环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、炔基、-CN、-NR⁶R⁷、-OR⁶、-COR⁶、-CO₂R⁶、-CONR⁶R⁷、-C(＝NR⁶)NR⁷R⁸、-NR⁶COR⁷、-NR⁶CONR⁷R⁸、-NR⁶CO₂R⁷、-SO₂R⁶、-NR⁶SO₂NR⁷R⁸、-NR⁶SO₂R⁷和-NR⁶SO₂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基和杂环基独立地任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

R⁵选自烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基环，其各自任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

LG为离去保护基；

R⁶、R⁷和R⁸，相同或不同，各自选自H、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；或(R⁶和R⁷)和/或(R⁷和R⁸)与它们所连接的原子一起，各自形成选自杂环基和杂芳基环的环，所述环任选取代有1或2或3个取代基R⁹；

R⁹选自卤素、卤代烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、炔基、氧代、-烷基-NR^aR^b、-CN、-OR^a、-NR^aR^b、-COR^a、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-C(＝NR^a)NR^bR^c、硝基、-NR^aCOR^b、-NR^aCONR^aR^b、-NR^aCO₂R^b、-SO₂R^a、-SO₂芳基、-NR^aSO₂NR^bR^c、NR^aSO₂R^b和-NR^aSO₂芳基，其中所述环烷基、芳基、杂芳基或杂环基各自独立地任选被一个、两个或三个选自卤素、烷基和卤代烷基的取代基取代，其中R^a、R^b和R^c独立地选自H、卤代烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，或(R^a和R^b)和/或(R^b和R^c)与它们所连接的原子一起，形成选自杂环基和杂芳基环的环，所述杂环基环任选被卤素和烷基取代，所述杂芳基环任选被卤素和烷基取代。

2.权利要求1的方法，其中式Ia的胺与式Ib的受保护的氨基甲酰化合物的缩合反应在有机溶剂中进行。

3.权利要求1的方法，其中所述有机溶剂通常选自非极性溶剂、极性质子溶剂和极性非质子溶剂，或者它们的混合物。

4.权利要求3的方法，其中所述极性非质子溶剂选自N-甲基吡咯烷酮、N-甲基吗啉、甲基异丁基酮、甲基乙基酮、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和二甲基亚砜；所述极性质子溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇和乙酸；以及所述非极性溶剂选自二噁烷、甲苯、己烷、环己烷和乙醚。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述缩合反应在真空中进行。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述缩合反应在约10至50℃的温度或者在约15至25℃的温度进行。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述缩合反应进行至少约0.5小时，至少约1小时，至少约2小时，至少约3小时，至少约4小时。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中R¹和R²均为氢。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中R⁵为芳基，其任选取代有1或2或3个取代基R⁹；优选地，R⁵为苯基，其任选取代有1或2或3个卤素；更优选地，R⁵为2,4,5-三氟苯基。

10.权利要求1-9中任一项的方法，其中LG为烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或-OR^a，其中烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代，以及其中R^a为烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基，其任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代。

11.权利要求10的方法，其中LG为-OR^a，其中R^a为苯基，所述苯基任选被卤素、硝基、-CN、羟基或烷氧基中的一个或多个取代。

12.权利要求11的方法，其中LG为未取代的苯氧基。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中式Ia化合物是通过使式Ia-2化合物在有机溶剂中在酸的存在下反应而生成的，

14.权利要求13的方法，其中所述有机溶剂为选自非极性溶剂、极性质子溶剂和极性非质子溶剂，或者它们的混合物。

15.权利要求14的方法，其中所述酸为无机酸或有机酸。

16.权利要求13-15中任一项的方法，其中所述式Ia-2化合物是通过使式Ia-1化合物在(Boc)₂O/t-BuOH中在催化剂的存在下反应而生成的，

17.权利要求9的方法，其中式Ib化合物为

18.权利要求1-17中任一项的方法，其中式I化合物为1-((1S,1aS,6bS)-5-((7-氧代-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-4-基)氧基)-1a,6b-二氢-1H-环丙并[b]苯并呋喃-1-基)-3-(2,4,5-三氟苯基)脲或其可药用盐。

19.权利要求18的方法，其中所述缩合反应的产物中杂质-1的含量小于约0.05％(经HPLC检测)。

20.式Ia化合物

或其可药用盐，其中R¹和R²如权利要求1所定义。