CN111449028B - 一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法 - Google Patents

一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法 Download PDF

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Abstract

一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,包括以下步骤:S1,成虫配对;S2,统一育卵;S3,孵化饲喂;S4,1~3龄幼虫清粪便,换饲料;S5,高龄幼虫分隔饲养;S6,准备化蛹环境;S7,集中育蛹,蛹化成虫。本发明通过各个时期采用不同的装置,在成虫配对和饲养幼虫时均采用一次性塑料杯子,一次性塑料杯子空间狭小有利于成虫配对,低龄幼虫个体小且爬行速度快,用杯子饲养可以防止幼虫的逃逸;对高龄幼虫采用分格饲养装置,既避免了因竞争造成的相互撕咬,也节省空间,可以同时饲养不同龄期的幼虫;本发明中草地贪夜蛾冬季实验室内饲养,有效提高存活率,养殖密度大,占地面积小,增加产量,操作方便,省时省工。

Description

一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体属于一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法。
背景技术
草地贪夜蛾是2019年入侵我国的重要害虫,对玉米、水稻、小麦等作物危害巨大,作为迁飞性害虫,目前已在我国南方定殖,同时境外虫源持续迁入,2020年发生态势严峻,防控任务更加艰巨。为有效防控草地贪夜蛾暴发成灾众多高校和科研院所对其展开了全方位的研究,由于草地贪夜蛾在我国的周年发生区主要在一月份日均温度10℃等温线以南的区域,包括海南、广东、广西、云南和福建等省的热带、南亚热带地区。因此,多数地区冬季研究时种群必须在实验室进行养殖。
发明内容
本发明的目的是提供一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,要解决现有技术草地贪夜蛾冬季饲养困难的技术问题;并解决现有技术大量人工饲养草地贪夜蛾,成虫率低的问题。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,成虫配对:将野外采集的成虫,每6头放进一只小型养虫笼中,透过纱笼观察成虫的双翅鳞片花纹,辨别雌雄,将一雌一雄挑出后,立即放到成虫饲养装置,每对雌雄成虫放进一个成虫饲养装置中,所述成虫饲养装置由一次性透明塑料杯制作而成,杯口用双层医用纱布封口,成虫饲养装置内装载有浸有百花蜂蜜水的医用棉花球,杯口朝上放入恒温培养箱内饲养,所述恒温培养箱内温度为25℃,日照时间12h,湿度60%,下述步骤S2~S5均在此条件下的恒温培养箱中操作;
S2,统一育卵:每对成虫在饲养2~3d后,开始产卵,首次产卵时间最长连续3d,首次产卵之后将雌雄成虫分开混合配对,将成虫饲养装置中产有卵块的纱布剪下来,放到育卵装置中,一同孵化,所述育卵装置为长23cm、宽15.5cm、高12.5cm的上部开口的透明塑料盒体,透明塑料盒体上部开口通过100目透气网密封;
S3,孵化饲喂:每d向安放卵块的育卵装置内均匀的喷洒水雾,卵粒在2-4d内孵化成幼虫,将新孵化的幼虫转移到已消毒的、新的幼虫饲养装置中,用新鲜、生的水果玉米粒饲喂;
S4,1~3龄幼虫清粪便,换饲料:根据1~3龄幼虫生长需要,将食物残渣和粪便中的幼虫用小毛刷轻轻挑出,并转接到新的新鲜玉米粒上,用小镊子将幼虫饲养装置中的饲喂过的玉米粒挑出,将部分不便用小毛刷挑出幼虫的玉米粒与新的玉米粒放到新的幼虫饲养装置中,饲养一天,幼虫自己转移到新鲜的玉米粒后,再将饲喂过的玉米粒从饲养杯中挑出,弃去,定期重复此步骤,直至幼虫蜕皮三次成为4龄幼虫;
S5,高龄幼虫分隔饲养:将4龄幼虫转移至分格饲养装置中,所述分格饲养装置为宽23cm,长37.8cm,高4.5cm的长方形分隔透明塑料盒,每饲养格宽4.2cm、长5.75cm,高4.5cm,每饲养格饲喂4龄幼虫3-6头,每格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每两天更换玉米块及清理粪便一次,4龄幼虫5-6d内发育成5龄幼虫,每饲养格最多饲养3头5龄幼虫,每饲养格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每d更换玉米块及清理粪便一次,5-7d内发育成6龄幼虫;
S6,准备化蛹环境:在6龄幼虫的饲养格内底部铺上一层厚度为2~3cm的蛭石,放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,每格饲养一头幼虫,或转移至大盒子同时饲养十几头,盒内放入一个完整的玉米,铺设⅓盒体高度的蛭石,模拟土壤,给高龄幼虫提供化蛹环境,4~9d内发育成蛹,此步骤中恒温培养箱内温度调高至26℃~28℃,夜晚时间调至10小时,湿度不变;
S7,集中育蛹,蛹化成虫:将所有分格饲养装置中的蛹,用勺子轻轻的转移到一个长25cm、宽14cm、高14cm、上部开口的小塑料箱中,箱中铺入⅔箱体高度厚的蛭石,用网袋套住,扎紧封口,静置放入上述S6中温度及夜晚时间调整后的恒温培养箱中,直至蛹化成虫,草地贪夜蛾冬季实验室内养殖完成。
进一步优选地,所述步骤S1中小型养虫笼为长32cm、直径28cm、水平放置的圆柱型养虫笼,圆柱型养虫笼两底面均设有拉链型开口,开口处纱面上设有长28cm的笼袖。
进一步地,所述步骤S1中成虫饲养装置制作方法为,取一次性透明塑料杯并用95%的酒精喷洒消毒,将一个医用棉球放入杯中,用双层医用纱布封口,将透明塑料杯倒置,一手拿杯,另一手通过用医用消毒针管穿过医用纱布向所述医用棉球中注入75%的百花蜂蜜水溶液,每个医用棉球注入2ml百花蜂蜜水溶液,所述透明塑料杯杯口直径7cm,杯高7.3cm,杯底直径4.6cm。
进一步地,所述步骤S2中混合配对方法为,将两个成虫饲养装置中的两对雌雄虫分别放到两个小型养虫笼中,再将两对雌雄分开与另外一对混合配对,混合配对后移动至成虫饲养装置中,每对雌雄成虫混合配对反复2、3次。
此外,所述步骤S3幼虫饲养装置制作方法为,在所述成虫饲养装置的基础上,在透明塑料杯底加上一层扎有若干个小孔的滤纸片,滤纸片直径大于杯底,周围留有呈放射状、4~5条条带,条带折叠立起贴在杯壁上,杯口用100目尼龙网代替双层医用纱布封口。
更加优选地,所述步骤S4中2~3龄幼虫清粪便,换饲料的具体步骤为,
S41、2龄幼虫清粪便,换饲料:将2龄幼虫挑出放到新的幼虫饲养装置中,平均每300头放进一个幼虫饲养装置中,每个幼虫饲养装置放入20~30粒新鲜玉米粒,每天上午用镊子将陈旧玉米粒夹出来放进新的、干净的杯子中,捏起滤纸片条带将滤纸片夹出,摊开其上的玉米残渣及粪便于白色纸板上,将少数混合在其中的幼虫用小毛刷挑出,转接到新的新鲜玉米粒上,每个新幼虫饲养装置加入新鲜的玉米粒为10-20粒,将先前的玉米粒及其上的幼虫与新的玉米粒放到一起于新的杯子中饲养一天,幼虫自动转移至新鲜玉米上,之后清理掉先前的玉米,饲养3-5d内发育成3龄幼虫;
S42、3龄幼虫清粪便,换饲料:将发育成3龄的幼虫重新挑出,放入新的幼虫饲养装置中饲养,把玉米分成两厘米厚的扇形玉米块,放到杯中作为饲料,每100头放入一个杯中,每两天按照S41中步骤更换一次玉米块,杯中玉米块数量保持在1~2块,3-5d内发育成四龄幼虫。
与现有技术相比本发明具有以下特点和有益效果:
本发明中草地贪夜蛾冬季实验室内饲养,有效提高存活率,增加产量;操作方便,省时省工,养殖密度大,占地面积小,具体地,在配对时将成虫多次混合配对,能充分刺激雌虫卵巢,有助于提高雌虫产卵质量,增加卵粒数量,且有助于子一代成活率和幼虫发育。
此外,在成虫配对和饲养幼虫时均采用一次性塑料杯子,一次性塑料杯子空间狭小有利于成虫配对,低龄幼虫个体小且爬行速度快,用杯子饲养可以防止幼虫的逃逸,并且有助于玉米粒的存放,减缓玉米的干枯速度,延长保鲜期。
一次性塑料杯子杯口用医用纱布吸水保水,可以持久、保持湿润的环境,医用纱布柔软多孔,同时表面粗糙可固定卵块,因此,草地贪夜蛾的成虫容易选择在杯盖的纱布上产卵,此外纱布的保湿能力可以给卵块提供湿润且柔软的孵育环境。
对高龄幼虫采用分格饲养装置,既避免了因竞争造成的相互撕咬,也节省空间,可以同时饲养不同龄期的幼虫,也有利于对比和观察。六龄幼虫时期是在为蛹期储备能量的关键时期,因此六龄幼虫饲养时在装置底部铺上三厘米厚的蛭石,提前准备好化蛹的条件,以便随时可能化蛹,能提高成蛹率。
附图说明
图1为本发明一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法养殖流程图。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创新特征、达成目的与功效易于明白了解,下面对本发明进一步说明。
在此记载的实施例为本发明的特定的具体实施方式,用于说明本发明的构思,均是解释性和示例性的,不应解释为对本发明实施方式及本发明范围的限制。除在此记载的实施例外,本领域技术人员还能够基于本申请权利要求书和说明书所公开的内容采用显而易见的其它技术方案,这些技术方案包括采用对在此记载的实施例的做出任何显而易见的替换和修改的技术方案。
一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,如图1所示,包括以下步骤:
S1,成虫配对:将野外采集的成虫,每6头放进一只小型养虫笼中,透过纱笼观察成虫的双翅鳞片花纹,辨别雌雄,将一雌一雄挑出后,立即放到成虫饲养装置,每对雌雄成虫放进一个成虫饲养装置中;小型养虫笼为长32cm、直径28cm、水平放置的圆柱型养虫笼,圆柱型养虫笼两底面均设有拉链型开口,开口为圆形拉链开口,开口处拉链环绕的纱面上设有长28cm的笼袖。成虫饲养装置制作方法为,取一次性透明塑料杯并用95%的酒精喷洒消毒,将一个医用棉球放入杯中,用双层医用纱布封口,将透明塑料杯倒置,一手拿杯,另一手通过用医用消毒针管穿过医用纱布向所述医用棉球中注入75%的百花蜂蜜水溶液,每个医用棉球注入2ml百花蜂蜜水溶液,所述透明塑料杯杯口直径7cm,杯高7.3cm,杯底直径4.6cm。恒温培养箱内温度为25℃,日照时间12h,湿度60%,下述步骤S2~S5均在此条件下的恒温培养箱中操作;
S2,统一育卵:每对成虫在饲养2~3d后,开始产卵,首次产卵时间最长连续3d,首次产卵之后将雌雄成虫分开混合配对,混合配对方法为,将两个成虫饲养装置中的两对雌雄虫分别放到两个小型养虫笼中,再将两对雌雄分开与另外一对混合配对,混合配对后移动至成虫饲养装置中,每对雌雄成虫混合配对反复2、3次,成虫多次混合配对能充分刺激雌虫卵巢,有助于提高雌虫产卵质量,增加卵粒数量,且有助于子一代成活率和幼虫发育。
之后将成虫饲养装置中产有卵块的纱布剪下来,放到育卵装置中,一同孵化,所述育卵装置为长23cm、宽15.5cm、高12.5cm的上部开口的透明塑料盒体,透明塑料盒体上部开口通过100目透气网密封;
S3,孵化饲喂:每d向安放卵块的育卵装置内均匀的喷洒水雾,卵粒在2-4d内孵化成幼虫,将新孵化的幼虫转移到新的幼虫饲养装置中,用新鲜、生的水果玉米粒饲喂;
幼虫饲养装置制作方法为,在所述成虫饲养装置的基础上,在透明塑料杯底加上一层扎有若干个小孔的滤纸片,滤纸片直径大于杯底,周围留有呈放射状、4~5条条带,条带折叠立起贴在杯壁上,杯口用100目尼龙网代替双层医用纱布封口。
S4,1~3龄幼虫清粪便,换饲料:根据1~3龄幼虫生长需要,将食物残渣和粪便中的幼虫用小毛刷轻轻挑出,并转接到新的新鲜玉米粒上,用小镊子将幼虫饲养装置中的玉米粒挑出,将部分不便用小毛刷挑出幼虫的被啃食过的玉米粒与新的玉米粒放到新的幼虫饲养装置中,饲养一天,幼虫自己转移到新鲜的玉米粒后,再将先前玉米粒从饲养杯中挑出,弃去,定期重复此步骤,直至幼虫蜕皮三次成为4龄幼虫;
1~3龄幼虫清粪便,换饲料的具体步骤为,
S41、一到二龄幼虫清粪便,换饲料:将幼虫挑出放到新的幼虫饲养装置中,平均每300头放进一个幼虫饲养装置中,每个幼虫饲养装置放入20~30粒新鲜玉米粒,每天上午用镊子将陈旧玉米粒夹出来放进新的、干净的杯子中,捏起滤纸片条带将滤纸片夹出,摊开其上的玉米残渣及粪便于白色纸板上,将少数混合在其中的幼虫用小毛刷挑出,转接到新的新鲜玉米粒上,每个新幼虫饲养装置加入新鲜的玉米粒为10-20粒,将部分不便用小毛刷挑出幼虫的被啃食过的玉米粒与新的玉米粒放到一起于新的杯子中饲养一天,3-5d内发育成3龄幼虫;
S42、3龄幼虫清粪便,换饲料:将发育成3龄的幼虫重新挑出,放入新的幼虫饲养装置中饲养,把玉米分成两厘米厚的扇形玉米块,放到杯中作为饲料,每100头放入一个杯中,每两天按照S41中步骤更换一次玉米块,杯中玉米块数量保持在1~2块,3-5d内发育成四龄幼虫。
S5,高龄幼虫分隔饲养:将4龄幼虫转移至分格饲养装置中,所述分格饲养装置为宽23cm,长37.8cm,高4.5cm的长方形分隔透明塑料盒,每饲养格宽4.2cm、长5.75cm,高4.5cm,每饲养格饲喂4龄幼虫3-6头,每饲养格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每两天更换玉米块及清理粪便一次,4龄幼虫5-6d内发育成5龄幼虫,每饲养格最多饲养3头5龄幼虫,每饲养格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每d更换玉米块及清理粪便一次,5-7d内发育成6龄幼虫;
S6,准备化蛹环境:在6龄幼虫的饲养格内底部铺上一层厚度为2~3cm的蛭石,放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,每饲养格一头,或转移至大盒子同时饲养十几头,盒内放入一个完整的玉米,铺设⅓盒体高度的蛭石,模拟土壤,给高龄幼虫提供化蛹环境,4~9d内发育成蛹,此步骤中恒温培养箱内温度调高至26℃~28℃,夜晚时间调至10小时,湿度不变;
S7,集中育蛹,蛹化成虫:将所有分格饲养装置中的蛹统一到一个长25cm、宽14cm、高14cm、上部开口的小塑料箱中,箱中铺入⅔箱体高度厚的蛭石,用网袋套住,扎紧封口,静置放入上述S6中温度及夜晚时间调整后的恒温培养箱中,直至蛹化成虫,草地贪夜蛾冬季实验室内养殖完成。
草地贪夜蛾冬季实验室内养殖改进过程如下:
先使用普通养虫笼,多头成虫一起饲养,但是饲养了一段时间后成虫的进食开始减少,并且迟迟不产卵,说明多头统一饲养不利于它们的配对,从而导致雌成虫迟迟不产卵,或产卵率极低,最终导致死亡,且孵化的幼虫存活率也很低。
之后将普通养虫笼改良至长32cm、直径28cm、水平放置的圆柱型小型养虫笼进行人工配对,最终得到一雌一雄放到一个成虫饲养装置中的产卵率最高且最快开始产卵;
在统一育卵方面,先前采用的装置缝隙过大,导致新孵出的一龄幼虫可以四处逃窜,最终只收集到一小部分的幼虫,之后我们对统一育卵的装置进行了改良,盒子加高且使用更加密集的网纱透气,具体为长23cm、宽15.5cm、高12.5cm的上部开口的透明塑料盒体,透明塑料盒体上部开口通过100目透气网密封;并且观察频次也增加,在卵块颜色逐渐加深过程中,观察频次逐渐增加,从每天两次增加到每天四次,以便于更早的发现并转移新孵出的一龄幼虫。
在幼虫饲养方面,开始全部使用玉米粒进行饲养,对稍高龄幼虫采用了玉米块饲喂,因为在饲养过程中发现幼虫在蜕皮时,会寻找有摩擦力的地方,而龄期越高的幼虫需要的摩擦力越大,带有穗轴的玉米块正好满足了这一需要。此外对4龄以上采用隔断培养,一是因为饲养杯对高龄幼虫来说不够透气;二是因为采用隔断培养节省空间和人力,并且能同时观察和饲养多个龄期的幼虫;三是由于高龄幼虫之间的竞争愈加激烈,通过多代培养发现高龄幼虫密集度高的情况下,很容易产生撕咬,两头或多头幼虫咬伤彼此,造成死亡;
对于6龄左右幼虫饲养时,在分割槽底部铺上蛭石,提前给6龄幼虫提供化蛹环境,原因是,幼虫发育到六龄时,消耗饲料速度快,但是在一段时间的疯狂进食之后,很大一部分的 6龄幼虫没有化蛹而死,之后在6龄幼虫饲养阶段,重新提供了新鲜的玉米芯和玉米叶,但是效果并改善不明显,化蛹的幼虫虽然数目多,但是化蛹不成功的机率很高,因此我们判断大多幼虫不化蛹即死亡是因为没有营造良好的化蛹环境,因此通过挑选,选中了蛭石来进行模拟土壤,提前为6龄幼虫营造好的化蛹环境,发现果然化蛹率提高并且化蛹速度变快,化蛹成功率也变高。
下面根据提供改进后的本发明饲养步骤的具体应用:
2019年6月底从贵州省黔西南地区采回来的草地贪夜蛾成虫,用小型养虫笼带回实验室,辨别雌雄,一雌一雄配对,放到配对饲养杯(一次性透明塑料杯)中,用浓度为75%的百花蜂蜜饲养,杯口用胶圈固定一块杯口直径大小的双层医用纱布,杯中放入棉花球,封好口后,将杯子倒置,向棉球中注入75%的百花蜂蜜水溶液,浸湿棉球,杯口朝上放入恒温箱内。恒温箱设置为温度28℃,湿度60%,光照时间12h。每天早晚用喷壶给杯口的纱布喷水两次,使之保持潮湿。2-3天后,开始产卵,一雌一雄第一次产卵最长连续三天。然后将每一对雌雄再分开混合配对,平均每头成虫配对2-3次,有助于提高雌虫产卵质量,增加卵粒数量,且有助于提高子一代成活率和幼虫发育健康。
大部分雌虫会在杯口的纱布上产卵,少数情况会产在蜂蜜棉球或杯壁上,将带有卵粒的纱布、棉球或杯子换成新的,将带有卵粒的部分剪下来,放入单独饲养箱(育卵装置)中,每天早中晚三次喷水雾,保持潮湿。卵粒紧密排列,卵块表面有雌虫腹部灰色绒毛状的分泌物覆盖形成的带状保护层,卵粒大部分成灰绿色,随着孵化时间,颜色逐渐加深,在即将孵化成幼虫时变成黑色。注意:水雾的水滴不能大,否则会将卵粒从杯壁上冲掉,又或者水滴固定在卵粒间,水分过大,卵粒死亡。
卵粒在2-4天就会孵化成幼虫,将幼虫转移到新的干净的幼虫饲养装置中,在杯底铺上一层滤纸,滤纸上扎满小孔有助于吸收水分,杯中放入新鲜的玉米粒,杯口用100目的网纱和胶圈固定住,放入恒温箱中,大约300头放入一个杯中。
由于个体发育快慢不一样,因此要经常观察,有些一龄幼虫2-3天就会发育成二龄幼虫,最晚5-6天,将发现的二龄幼虫挑出放到新的干净的幼虫饲养装置中,与一龄幼虫的装置一样,平均每300头放进一个杯子中,放入20-30粒新鲜玉米粒,每天上午更换杯中的饲料,向杯子里面加入新鲜的玉米粒10-20粒,以保持饲料的新鲜。并且每两天清理一次粪便,幼虫一般会蛀空玉米粒然后钻在里面取食,因此在清理粪便时,用镊子将玉米粒夹出来放进新的干净的杯子中,然后将杯底的滤纸片夹出,摊开其上的玉米残渣及粪便将少数混合在其中的幼虫用小毛刷挑出,转接到新的新鲜玉米粒上,将先前的玉米粒及其上的幼虫与新的玉米粒放到一起饲养一天,很快幼虫会自己转移到新鲜的玉米粒上,这时再将陈旧的玉米粒从饲养杯中挑出。
二龄幼虫3-5天发育成三龄幼虫,在此期间对玉米的啃噬速度不断加快,玉米残渣及粪便颗粒也逐渐变大,将发育成三龄的幼虫重新挑出,放入新的杯子中饲养,把玉米分成两厘米厚的扇形玉米块,放到杯中作为饲料,每100头放入一个杯中,每两天更换一次玉米块,因为三龄幼虫食量增长很快,并且在蜕皮时需要摩擦所以用玉米块饲养,不仅方便而且也更有助于虫体发育。
三龄幼虫发育成四龄幼虫需要3-5天,发育成四龄幼虫之后,将刚发育的四龄幼虫转移到分格饲养装置中饲养,每个隔断格中放入厚度为三厘米左右的扇形玉米块,每两天更换玉米块一次,平均每个隔断中接入4头四龄幼虫,每两天清理粪便一次。
四龄幼虫发育成五龄幼虫需要5-6天,当发育到五龄幼虫时,每隔断最多饲养三头,由于空间有限,而且五龄幼虫取食速度快、竞争更激烈,个体之间会发生撕咬,造成不必要的死伤。
五龄幼虫发育时间较长,平均要经历5-7天,进食非常多,平均每天要更换一次玉米块,虫体的切面直径不断增长,蜕皮成为六龄幼虫时,虫体直径可达5mm,蜕皮后体积会减小到原来的三分之二左右。
当发育为六龄幼虫时,此时为关键时期,因为此时的幼虫正在为化成蛹做准备,它们会加速进食,用小隔断每格一头虫,每格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,或者用一个大盒子同时饲养十几头,盒内放入一个完整的玉米,在盒子的底部铺上厚厚的一层蛭石,此时恒温箱的温度要适当升高一到两度,湿度不变,黑夜时间减少两个小时,从六龄到蛹需要4-6,最晚9天。把蛹统一放到一个放有三分之二蛭石的盒子中,用网袋套住,扎紧封口,静置放入恒温箱中。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,成虫配对:将野外采集的成虫,每6头放进一只小型养虫笼中,透过纱笼观察成虫的双翅鳞片花纹,辨别雌雄,将一雌一雄挑出后,立即放到成虫饲养装置,每对雌雄成虫放进一个成虫饲养装置中,所述成虫饲养装置由一次性透明塑料杯制作而成,杯口用双层医用纱布封口,成虫饲养装置内装载有浸有百花蜂蜜水的医用棉花球,杯口朝上放入恒温培养箱内饲养,所述恒温培养箱内温度为25℃,日照时间12h,湿度60%,下述步骤S2~S5均在此条件下的恒温培养箱中操作;所述步骤S1中小型养虫笼为长32cm、直径28cm、水平放置的圆柱型养虫笼,圆柱型养虫笼两底面均设有拉链型开口,开口处纱面上设有长28cm的笼袖;
S2,统一育卵:每对成虫在饲养2~3d后,开始产卵,首次产卵时间最长连续3d,首次产卵之后将雌雄成虫分开混合配对,将成虫饲养装置中产有卵块的纱布剪下来,放到育卵装置中,一同孵化,所述育卵装置为长23cm、宽15.5cm、高12.5cm的上部开口的透明塑料盒体,透明塑料盒体上部开口通过100目透气网密封;所述步骤S2中混合配对方法为,将两个成虫饲养装置中的两对雌雄虫分别放到两个小型养虫笼中,再将两对雌雄分开与另外一对混合配对,混合配对后移动至成虫饲养装置中,每对雌雄成虫混合配对反复2、3次;
S3,孵化饲喂:每d向安放卵块的育卵装置内均匀的喷洒水雾,卵粒在2-4d内孵化成幼虫,将新孵化的幼虫转移到已消毒的、新的幼虫饲养装置中,用新鲜、生的水果玉米粒饲喂;
S4,1~3龄幼虫清粪便,换饲料:根据1~3龄幼虫生长需要,将食物残渣和粪便中的幼虫用小毛刷轻轻挑出,并转接到新的新鲜玉米粒上,用小镊子将幼虫饲养装置中的饲喂过的玉米粒挑出,将部分不便用小毛刷挑出幼虫的被啃食过的玉米粒与新的玉米粒放到新的幼虫饲养装置中,饲养一天,幼虫自己转移到新鲜的玉米粒后,再将饲喂过的玉米粒从饲养杯中挑出,弃去,定期重复此步骤,直至幼虫蜕皮三次成为4龄幼虫;
S5,高龄幼虫分隔饲养:将4龄幼虫转移至分格饲养装置中,所述分格饲养装置为宽23cm,长37.8cm,高4.5cm的长方形分隔透明塑料盒,每饲养格宽4.2cm、长5.75cm,高4.5cm,每饲养格饲喂4龄幼虫3-6头,每格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每两天更换玉米块及清理粪便一次,4龄幼虫5-6d内发育成5龄幼虫,每饲养格最多饲养3头5龄幼虫,每饲养格放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,平均每d更换玉米块及清理粪便一次,5-7d内发育成6龄幼虫;
S6,准备化蛹环境:在6龄幼虫的饲养格内底部铺上一层厚度为2~3cm的蛭石,放入一块厚度为3厘米的扇形玉米块,每格饲养一头幼虫,或转移至大盒子同时饲养十几头,盒内放入一个完整的玉米,铺设⅓盒体高度的蛭石,模拟土壤,给高龄幼虫提供化蛹环境,4~9d内发育成蛹,此步骤中恒温培养箱内温度调高至26℃~28℃,夜晚时间调至10小时,湿度不变;
S7,集中育蛹,蛹化成虫:将所有分格饲养装置中的蛹,用勺子轻轻的转移到一个长25cm、宽14cm、高14cm、上部开口的小塑料箱中,箱中铺入⅔箱体高度厚的蛭石,用网袋套住,扎紧封口,静置放入上述S6中温度及夜晚时间调整后的恒温培养箱中,直至蛹化成虫,草地贪夜蛾冬季实验室内养殖完成。
2.如权利要求1所述的一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,其特征在于,所述步骤S1中成虫饲养装置制作方法为,取一次性透明塑料杯并用95%的酒精喷洒消毒,将一个医用棉球放入杯中,用双层医用纱布封口,将透明塑料杯倒置,一手拿杯,另一手通过用医用消毒针管穿过医用纱布向所述医用棉球中注入75%的百花蜂蜜水溶液,每个医用棉球注入2ml百花蜂蜜水溶液,所述透明塑料杯杯口直径7cm,杯高7.3cm,杯底直径4.6cm。
3.如权利要求1所述的一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,其特征在于,所述步骤S3幼虫饲养装置制作方法为,在所述成虫饲养装置的基础上,在透明塑料杯底加上一层扎有若干个小孔的滤纸片,滤纸片直径稍大于杯底,周围留有呈放射状、4~5条条带,条带折叠立起贴在杯壁上,杯口用100目尼龙网代替双层医用纱布封口。
4.如权利要求3所述的一种草地贪夜蛾冬季实验室内养殖方法,其特征在于,所述步骤S4中2~3龄幼虫清粪便,换饲料的具体步骤为,
S41、1~2龄幼虫清粪便,换饲料:将幼虫挑出放到新的幼虫饲养装置中,平均每300头放进一个幼虫饲养装置中,每个幼虫饲养装置放入20~30粒新鲜玉米粒,每天上午用镊子将陈旧玉米粒夹出来放进新的、干净的杯子中,捏起滤纸片条带将滤纸片夹出,摊开其上的玉米残渣及粪便于白色纸板上,将少数混合在其中的幼虫用小毛刷挑出,转接到新的新鲜玉米粒上,每个新幼虫饲养装置加入新鲜的玉米粒为10-20粒,将部分不便用小毛刷挑出幼虫的被啃食过的玉米粒与新的玉米粒放到一起于新的杯子中饲养一天,幼虫自动转移至新鲜玉米上,之后清理掉先前的玉米,饲养3-5d内发育成3龄幼虫;
S42、3龄幼虫清粪便,换饲料:将发育成3龄的幼虫重新挑出,放入新的幼虫饲养装置中饲养,把玉米分成两厘米厚的扇形玉米块,放到杯中作为饲料,每100头放入一个杯中,每两天按照S41中步骤更换一次玉米块,杯中玉米块数量保持在1~2块,3-5d内发育成4龄幼虫。
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