CN111433347B - 用于制备例如马苏里拉干酪的嗜热链球菌(st)细胞 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及保藏的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)(ST)菌株,其例如适于用于制造低褐变马苏里拉干酪的改善方法中。
Description
技术领域
本发明涉及保藏的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)(ST)菌株,其例如适于用于制造低褐变马苏里拉干酪的改善方法中。
背景技术
食品工业使用许多细菌,特别是乳酸菌,以改善例如食品的味道和质构。在乳品工业的情况下,乳酸菌被广泛使用,以便引起乳的酸化(通过发酵),而且以便例如质构化它们所掺入的产品。
用于制备马苏里拉干酪的起子培养物组合物/混合物通常包含乳酸菌(LAB)嗜热链球菌(ST)–它有时还可包含例如相关的乳杆菌属(Lactobacillus)菌株。
相对较高浓度的半乳糖可导致干酪加热期间的“褐变”,这在例如由嗜热链球菌(ST)生产用于例如比萨生产的马苏里拉干酪时经常被描述。
褐变现象被认为归因于半乳糖作为还原糖与氨基酸/肽反应的美拉德反应。
除了在比萨干酪生产期间的这个主要问题之外,过量的游离半乳糖还可能导致其他乳制品(例如软干酪)的后酸化问题和菌群失衡。
Mukherjee等(1994,J Dairy Sci 77:2839-2849)的文章描述了被称为的半乳糖非释放链球菌作为起子培养物在低褐变马苏里拉干酪制造中的用途。
Hassan等(International Journal of Food Microbiology 64(2001)199-203)的文章描述了一些嗜热链球菌(ST)菌株在胶囊生产中使用半乳糖的能力可通过去除还原糖源来减少马苏里拉干酪在烘焙期间的褐变。
WO2011/026863A1(科·汉森有限公司)和WO2011/092300A1(科·汉森有限公司)描述了在GalK(半乳糖激酶)基因中具有突变的嗜热链球菌(ST)菌株在发酵乳中产生较高粘度。这两个WO公开都没有描述上文讨论的马苏里拉干酪褐变相关问题。
WO2013/160413A1(科·汉森有限公司)描述了本文所讨论的嗜热链球菌(ST)CHCC14994菌株,该菌株以保藏号DSM 25838保藏于2012年4月3日。CHCC14994菌株被描述为被称为的“母菌株”,其适合作为起始菌株用于突变,以获得具有“glcK基因的DNA序列中的突变”的新型突变菌株。因此,CHCC14994/DSM25838菌株既没有被公开存在于/包含于起子培养物组合物中,也没有被公开用于目标食品或饲料产品(例如乳制品)的制造中。
发明内容
本发明要解决的问题是提供新型的保藏的嗜热链球菌(ST)菌株,其例如适合用于制造低褐变马苏里拉干酪的改善方法中。
解决方案涉及本文所讨论的新型的保藏的嗜热链球菌(ST)菌株。
如本文的工作实施例中所示,本文所讨论的保藏的ST菌株在大量乳糖存在下(如 在乳中)也能够显著降低半乳糖的释放。
如上文所述,现有技术描述了被称为的半乳糖非释放链球菌作为起子培养物在低褐变马苏里拉干酪制造中的用途。
因此,由于本文所保藏的菌株能够提供半乳糖释放的显著降低,因而它们可例如用于制造低褐变马苏里拉干酪的改善方法中。
如本领域技术人员在本上下文中所理解的,本文保藏的菌株也可用于制备其他基于乳(例如基于牛乳)的食品,例如软干酪或切达干酪(cheddar)。
本文所保藏的菌株是在本发明人的实验室中制备的相关亲本/母菌株的突变体——即它们是在它们各自相关的DNA序列中包含先前未描述的新型突变的非“天然”新型菌株。
简单地说,在若干轮诱变/选择之后获得本文所保藏的突变菌株,其中例如通过相关选择准则的新型组合进行选择——换句话说,保藏的菌株不是通过可被称为标准现有技术常规诱变/选择工作的工作获得的(参见例如本文的工作实施例)。
如在实施例1的表1中可以看出,通过使用本实施例中所述的用于从嗜热链球菌分离半乳糖超发酵突变体的特殊方法,有可能获得与参照ST CHCC4323细菌相比能够将乳中分泌的半乳糖量降低约50%的ST细菌(参见例如CHCC27912和CHCC29526)。
与参照ST CHCC4323细菌相比能够将乳中分泌的半乳糖的量降低至少20%的ST细菌在本文中可被称为ST Gal(++)细菌。
不限于理论,实施例1中所述的用于从嗜热链球菌分离半乳糖超发酵ST Gal(++)突变体的特殊方法可因以下事实而被认为是特殊的:半乳糖降低水平与本文称为的Gal(+)菌株相比显著提高。如实施例1中所述,与野生型CHCC4323相比,CHCC14993(CHCC4323的Gal(+)突变体)的半乳糖降低水平为17%,而CHCC14994(CHCC4323的Gal(++)突变体)的半乳糖降低水平为30%。与参照CHCC4323相比,CHCC29526(来自CHCC4459的Gal(++)突变体)的半乳糖降低水平甚至是52%。
通过使用新开发的、先前未描述的在M17-gal肉汤中传代培养的方法,因此有可能分离具有独特半乳糖降低能力的半乳糖超发酵突变体。
如以下所讨论的,在工作实施例中,将本发明的本文所保藏的菌株与以下被称为的参照菌株进行比较:
-ST菌株CHCC4323:它具有可被称为的GalK天然野生型序列(本文称为GalK(-)),并且可被看作对应于目前商业上相关使用的用于制备马苏里拉干酪的ST菌株的ST参照菌株;
-ST菌株4323-2(CHCC14993):它包含GalK(半乳糖激酶)基因中的突变(本文称为Gal(+)),并且可被视为对应于根据上文所讨论的WO2011/026863A1(科·汉森有限公司)和WO2011/092300A1(科·汉森有限公司)的描述制备的菌株的参照菌株。
相信上述参照菌株可被看作对应于本文相关描述的现有技术菌株(参见例如上文的现有技术讨论)的参照菌株。
如下文所讨论的,本文的工作实施例显示,本文所讨论的本发明保藏菌株在大量乳糖存在下(如在乳中)也能够将半乳糖的释放降低到与上述参照菌株相比显著改善的程度。
因此,本发明的第一方面关于嗜热链球菌(ST)细胞,其中所述细胞是至少一种选自由以下组成的组的细胞:
(a)以登记号DSM 32594保藏的嗜热链球菌细胞CHCC19097;
(b)以登记号DSM 32595保藏的嗜热链球菌细胞CHCC19100;
(c)以登记号DSM 32596保藏的嗜热链球菌细胞CHCC27912;
(d)以登记号DSM 32597保藏的嗜热链球菌细胞CHCC29526;
(e)以登记号DSM 32598保藏的嗜热链球菌细胞CHCC29530;
(f)以登记号DSM 32897保藏的嗜热链球菌细胞CHCC29525;
(g)以登记号DSM 32898保藏的嗜热链球菌细胞CHCC30963;和
(h)以登记号DSM 32900保藏的嗜热链球菌细胞CHCC30964。
对于本领域技术人员来说清楚的是,通过使用本文所讨论的保藏菌株作为起始材料,本领域技术人员可常规地通过常规诱变或再分离技术获得其保留本文所述的相关特征和优点的另外的突变体或衍生物。因此,术语“其突变体”或“保藏菌株的突变体”关于通过使用保藏菌株作为起始材料获得的突变菌株。
如上文所述,WO2013/160413A1(科·汉森有限公司)描述了本文所讨论的嗜热链球菌(ST)CHCC14994菌株,该菌株以保藏号DSM 25838于2012年4月3日被保藏。CHCC14994/DSM25838菌株既没有被公开存在/包含于起子培养物组合物中,也没有被公开用于制造目标食品或饲料产品(例如乳制品)中。
因此,本发明的第二方面关于获得第一方面的保藏细胞或以登记号DSM25838保藏的嗜热链球菌细胞CHCC14994的突变菌株的方法,其包括使用至少一种第一方面的保藏菌株或DSM 25838作为起始菌株,制备所述保藏菌株的突变体,以及分离新型突变菌株,其中所述突变菌株保留了所述保藏菌株的能够在乳糖存在下降低半乳糖释放的性质。
所获得的突变菌株涉及“能够在乳糖存在下降低半乳糖释放”的性质可如本文的工作实施例中所述进行测量——基于本文的描述,这是本领域技术人员的常规工作。
显然,根据第二方面的方法获得的突变菌株可用于例如制造如本文所讨论的食品或饲料产品的方法(例如,如本文所讨论的第四方面的方法)。
本发明的第三方面关于起子培养物组合物,其包含至少一种第一方面的嗜热链球菌(ST)细胞或以登记号DSM 25838保藏的嗜热链球菌细胞CHCC14994,其中所述起子培养物组合物具有浓度在104到1014cfu/克所述组合物范围内的第一方面或DSM 25838的活细胞。
如所理解的,第三方面的组合物可例如包含108cfu/克例如仅一种本文所述的保藏菌株,或者其可例如包含108cfu/克一种保藏菌株加上108cfu/克另一种保藏菌株,这将得到具有2×108cfu/克第一方面的活细胞的组合物。
此外,所述组合物可包含其他细胞,例如乳杆菌属(Lactobacillus)和/或乳球菌属(Lactococcus)细胞。
本发明的第四方面关于制造食品或饲料产品的方法,其包括将根据第三方面的起子培养物组合物添加到食品或饲料产品起始材料,以及将如此接种的起始材料保持在嗜热链球菌(ST)细胞是代谢活性的条件下。
以下仅通过实施例方式描述本发明的实施方案。
具体实施方式
保藏的菌株/细胞
嗜热链球菌细胞CHCC14994的样品已以保藏号DSM 25838保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心(Deutsche Sammlung vonMikroorganismen und Zellkulturen GmbH,Inhoffenstr.7B,D-38124Braunschweig)),保藏日期为2012年4月3日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约(Budapest Treaty on the International Recognition of the Deposit ofMicroorganisms for the Purposes of Patent Procedure)”的条件下作出的。
如上文所述,该保藏的菌株描述于WO2013/160413A1(科·汉森有限公司)中。
新型嗜热链球菌细胞CHCC19097的样品已以保藏号DSM 32594保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2017年8月22日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC19100的样品已以保藏号DSM 32595保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2017年8月22日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC27912的样品已以保藏号DSM 32596保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2017年8月22日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC29526的样品已以保藏号DSM 32597保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2017年8月22日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC29530的样品已以保藏号DSM 32598保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2017年8月22日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC29525的样品已以保藏号DSM 32897保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2018年8月16日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC30963的样品已以保藏号DSM 32898保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2018年8月16日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
新型嗜热链球菌细胞CHCC30964的样品已以保藏号DSM 32900保藏在DSMZ(德国布伦瑞克因霍芬大街7B(D-38124)的德国微生物保藏中心),保藏日期为2018年8月16日。保藏是在“国际承认用于专利程序目的的微生物保藏布达佩斯条约”的条件下作出的。
包含如本文所述的ST细胞的起子培养物
如本文所述的ST细胞可用作食品或饲料产品生产中的起子培养物。
通常,这样的起子培养物组合物包含浓缩形式的细菌,包括冷冻、干燥或冷冻干燥的浓缩物,所述浓缩物的活细胞浓度通常在104到1014cfu(菌落形成单位)/克组合物的范围内,包括至少104cfu/克组合物,诸如至少105cfu/g,例如至少106cfu/g,诸如至少107cfu/g,例如至少108cfu/g,诸如至少109cfu/g,例如至少1010cfu/g,诸如至少1011cfu/g。
所述组合物可含有冷冻保护剂和/或常规添加剂(包括营养素,诸如酵母提取物、糖和/或维生素)作为另外的组分。
由于在乳酸菌发酵过程的生产中应用乳酸菌的混合培养物是正常的,因此在某些实施方案中,所述组合物将包含属于相同物种或属于不同物种的多种菌株。
例如,可能优选地,所述组合物还包含其他细胞,诸如例如乳杆菌属细胞和/或乳球菌属细胞。
制造食品或饲料产品的方法
如上文所述,本发明的一个方面涉及制造食品或饲料产品的方法,其包括将如本文所述的起子培养物组合物添加到食品或饲料产品起始材料,以及将如此接种的起始材料保持在ST细胞为代谢活性的条件下。
有用的食品起始材料包括通常经过乳酸菌发酵步骤的任何材料,诸如乳(例如豆乳或牛乳,优选牛乳)、蔬菜材料、肉类产品、果汁、葡萄汁(must)、生面团和面糊。
作为典型的示例,通过该方法获得的发酵产品包括乳制品,诸如发酵乳、酸奶、干酪,包括新鲜干酪产品、软干酪产品、切达干酪、马苏里拉干酪、酪乳。
在优选的实施方案中,乳制品是软干酪、切达干酪、帕斯塔费拉塔(pasta filata)干酪或马苏里拉干酪——更优选地,乳制品是帕斯塔菲拉塔干酪、切达干酪或马苏里拉干酪——最优选地,乳制品是马苏里拉干酪或切达干酪(优选用于制备比萨)。
在另外的实施方案中,基质材料是用于动物饲料的起始材料,诸如青贮料,例如草、谷物材料、豌豆、苜蓿或甜菜叶,其中将细菌培养物接种于待青贮的饲料作物中以获得其保存,或接种于富含蛋白质的动物废产物例如屠宰下脚料和鱼下脚料中,目的也是为了动物饲养目的而保存该下脚。
实施例
实施例1:保藏的嗜热链球菌(ST)菌株-在大量乳糖存在下(如在乳中)也能够显著降低半乳糖的释放
参照菌株:
-ST菌株CHCC4323:它具有可被称为的GalK天然野生型序列(本文称为GalK(-)),并且可被看作对应于目前商业上相关使用的用于制备马苏里拉干酪的ST菌株的ST参照菌株;
-ST菌株4323-2(CHCC14993):它包含GalK(半乳糖激酶)基因中的突变(本文称为Gal(+)),并且可被视为对应于根据上文所讨论的WO2011/026863A1(科·汉森有限公司)和WO2011/092300A1(科·汉森有限公司)的描述制备的菌株的参照菌株。
本发明的保藏菌株:
CHCC14994:DSM 25838ST菌株-公开于WO2013/160413A1(科·汉森有限公司)中。
CHCC19097:如本文所述的新型DSM 32594ST菌株。
CHCC19100:如本文所述的新型DSM 32595ST菌株。
CHCC27912:如本文所述的新型DSM 32596ST菌株。
CHCC29526:如本文所述的新型DSM 32597ST菌株。
CHCC29530:如本文所述的新型DSM 32598ST菌株。
从嗜热链球菌分离半乳糖超发酵突变体:
在突变体分离之前,将菌株在具有2%半乳糖的M17琼脂板(M17-gal平板)上划线。野生型(wt)菌株在作为唯一碳水化合物源的半乳糖上不显著生长。
然后将过夜培养物涂板于M17-gal平板上,并且在37℃生长两天之后可分离几个菌落。在M17-gal平板上纯化几个突变体,并在含有2%半乳糖作为唯一碳水化合物的M17肉汤中再测试。
从纯化的半乳糖阳性突变体中,通过在M17-gal肉汤中传代培养分离第二代半乳糖超发酵突变体,其中每天从完全超生长的过夜培养物再接种1%;在37℃进行培育。
在稀释涂板后,从M17-gal板分离100个单菌落,并将其接种于具有M17-gal肉汤的微量滴定板中。用OD-读数器监测OD值,并且进一步纯化和表征如wt菌株在37℃培养16小时期间显示OD值更好增加的克隆。
从中分离半乳糖-高发酵突变体的wt嗜热链球菌菌株为:
CHCC9861
CHCC4459
CHCC4426
CHCC4323
CHCC7018
CHCC3050
显示出异常高的半乳糖发酵能力和降低的半乳糖向培养基中的分泌的半乳糖-高发酵突变体为(突变体/wt):
CHCC27912/CHCC9861
CHCC29526/CHCC4459
CHCC29530/CHCC4426
CHCC14994/CHCC4323
CHCC19100/CHCC7018
CHCC19097/CHCC3050
示例还包括典型的半乳糖阳性菌株,其作为第一代突变体从CHCC4323分离,命名为CHCC14993。CHCC14993显示在乳中17%的典型半乳糖降低(与wt CHCC4323相比,乳中半乳糖分泌的降低)。
乳发酵
将突变菌株从过夜培养物以1%接种于乳中,并在37℃下培育24小时。突变体的酸化活性与wt菌株类似。在发酵结束时,取样品以测量发酵乳中的半乳糖含量,并随即测量与半乳糖阴性参照菌株CHCC4323和参照菌株4323-2(CHCC14993)相比分泌的半乳糖的降低。
结果—发酵乳中的酸化和所分泌半乳糖的分析
所有测试的ST菌株均具有类似的酸化特征-即本发明的保藏ST菌株没有失去它们在乳中快速酸化的能力。
不同测试菌株分泌的半乳糖的量示于下表1中:
表1指示乳中半乳糖的量和与参照CHCC4323相比半乳糖的降低。典型的gal+突变体CHCC14993显示小于20%的半乳糖降低,而超发酵突变体显示高达52%的高得多的降低,这意味着当例如用新突变体生产比萨干酪时,游离半乳糖的量低得多,这使得烘焙期间的褐变减少。
菌株 | 半乳糖 | 半乳糖降低(%) |
CHCC4323 | 7.1 | 0 |
CHCC14993 | 5.9 | 17 |
CHCC27912 | 3.4 | 52 |
CHCC29526 | 3.4 | 52 |
CHCC29530 | 4.9 | 31 |
CHCC14994 | 5.0 | 30 |
CHCC19100 | 4.1 | 42 |
CHCC19097 | 5.1 | 28 |
表1.来自碳水化合物分析的两次测量的平均值。以mg/g显示结果。
结论
结果证实,本文的本发明保藏菌株在大量乳糖存在下(如在乳中)也能够将半乳糖的释放降低到与上述参照菌株相比显著改善的程度。
实施例2:保藏的嗜热链球菌(ST)菌株-在大量乳糖存在下(如在乳中)也能够显著降低半乳糖的释放
参照菌株:
与上文实施例1相同。
本发明的保藏菌株:
CHCC29525:如本文所述的新型DSM 32897菌株。
CHCC30963:如本文所述的新型DSM 32898菌株。
CHCC30964:如本文所述的新型DSM 32900菌株。
从嗜热链球菌分离半乳糖超发酵突变体:
在突变体分离之前,将菌株在具有2%半乳糖的M17琼脂平板(M17-gal板)上划线。野生型(wt)菌株在作为唯一碳水化合物源的半乳糖上不显著生长。
然后将过夜培养物涂板于M17-gal板上,并且在37℃生长两天之后可分离几个菌落。在M17-gal平板上纯化几个突变体,并在含有2%半乳糖作为唯一碳水化合物的M17肉汤中再测试。
从纯化的半乳糖阳性突变体中,通过在M17-gal肉汤中传代培养分离第二代半乳糖超发酵突变体,其中每天从完全超生长的过夜培养物再接种1%;在37℃进行培育。
在稀释涂板后,从M17-gal板分离100个单菌落,并将其接种于具有M17-gal肉汤的微量滴定板中。用OD-读数器监测OD值,并且进一步纯化和表征在如wt菌株在37℃培养16小时期间显示OD值较好增加的克隆。
从中分离半乳糖-高发酵突变体的wt嗜热链球菌菌株为:
CHCC4458
CHCC4459
显示出异常高的半乳糖发酵能力和降低的半乳糖向培养基中的分泌的半乳糖-高发酵突变体为(突变体/wt):
CHCC30963/CHCC4458
CHCC30964/CHCC4458
CHCC29525/CHCC4459
示例还包括典型的半乳糖阳性菌株,其作为第一代突变体从CHCC4323分离,命名为CHCC14993。CHCC14993显示乳中17%的典型半乳糖降低(与wt CHCC4323相比,乳中半乳糖分泌的降低)。
乳发酵
与上文实施例1相同。
结果—发酵乳中的酸化和所分泌半乳糖的分析
所有测试的ST菌株均具有类似的酸化特征-即本发明的保藏ST菌株没有失去它们在乳中快速酸化的能力。
不同测试菌株分泌的半乳糖的量示于下表2中:
表2指示乳中半乳糖的量和与参照CHCC4323相比半乳糖的降低。典型的gal+突变体CHCC14993显示小于20%的半乳糖降低,而超发酵突变体显示高达57%的高得多的降低,这意味着当例如用新突变体生产比萨干酪时,游离半乳糖的量低得多,这使得烘焙期间的褐变减少。
菌株 | 半乳糖 | 半乳糖降低(%) |
CHCC4323 | 7.0 | 0 |
CHCC14993 | 5.9 | 16 |
CHCC29525 | 3.0 | 57 |
CHCC30963 | 3.7 | 47 |
CHCC30964 | 4.8 | 31 |
表2.来自碳水化合物分析的两次测量的平均值。以mg/g显示结果。
结论
结果证实,本文的本发明保藏菌株在大量乳糖存在下(如在乳中)也能够将半乳糖的释放降低到与上述参照菌株相比显著改善的程度。
参考文献
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5.WO2013/160413A1(科·汉森有限公司)
Claims (10)
1.一种嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)(ST)细胞,其中所述细胞为至少一种选自由以下组成的组的细胞:
(a)以登记号DSM 32595保藏的嗜热链球菌细胞CHCC19100;
(b)以登记号DSM 32596保藏的嗜热链球菌细胞CHCC27912;
(c)以登记号DSM 32597保藏的嗜热链球菌细胞CHCC29526;
(d)以登记号DSM 32897保藏的嗜热链球菌细胞CHCC29525;和
(e)以登记号DSM 32898保藏的嗜热链球菌细胞CHCC30963。
2.一种起子培养物组合物,其包含至少一种权利要求1所述的嗜热链球菌(ST)细胞,其中所述起子培养物组合物具有浓度在104到1014cfu/克所述组合物范围的权利要求1的活细胞。
3.根据权利要求2所述的起子培养物组合物,其中所述活细胞的浓度在107到1014cfu/克所述组合物的范围。
4.一种制造食品或饲料产品的方法,其包括将根据权利要求2-3中任一项所述的起子培养物组合物添加到食品或饲料产品起始材料,以及将如此接种的起始材料保持在所述嗜热链球菌(ST)细胞为代谢活性的条件下。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述食品是乳制品。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述乳制品是发酵乳或干酪。
7.根据权利要求5所述的方法,其中所述乳制品是酸奶。
8.根据权利要求5所述的方法,其中所述乳制品是新鲜干酪产品、软干酪产品、切达干酪或马苏里拉干酪。
9.根据权利要求5所述的方法,其中所述乳制品是酪乳。
10.根据权利要求5所述的方法,其中所述乳制品是帕斯塔费拉塔干酪。
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