CN111418649A - 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂 - Google Patents

一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂 Download PDF

Info

Publication number
CN111418649A
CN111418649A CN202010251932.9A CN202010251932A CN111418649A CN 111418649 A CN111418649 A CN 111418649A CN 202010251932 A CN202010251932 A CN 202010251932A CN 111418649 A CN111418649 A CN 111418649A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fruit
calcium propionate
grapes
preservative
novel
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010251932.9A
Other languages
English (en)
Inventor
许玲
孙晨旭
朱品宽
薛永军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
East China Normal University
Original Assignee
East China Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by East China Normal University filed Critical East China Normal University
Priority to CN202010251932.9A priority Critical patent/CN111418649A/zh
Publication of CN111418649A publication Critical patent/CN111418649A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
    • A23B7/14—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10
    • A23B7/153—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10 in the form of liquids or solids
    • A23B7/154—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G13/00—Protecting plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/02—Saturated carboxylic acids or thio analogues thereof; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
    • A23B7/14—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10
    • A23B7/153—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10 in the form of liquids or solids
    • A23B7/157—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明公开了一种葡萄贮藏病害采前控制的方法，所述方法如下：分别在葡萄花后幼果期、中果期、成熟期及采收前喷施终浓度为0.5％‑1.5％(w/v)的丙酸钙溶液，采摘后放入冰箱或冷库，保鲜期比未处理对照葡萄果实延长30天以上。本发明方法对葡萄常见的贮藏病害具有明显的抑制效果，同时根据实验室抑菌实验和田间实际应用表明能够显著降低葡萄早期的裂果率、抑制葡萄田间及采后贮藏过程中的发病率与脱粒率，并对果实品质有良好保持作用，本发明方法流程简单，无毒无污染，成本低廉，具有十分巨大的实际应用价值。

Description

一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂
技术领域
本发明属于果蔬采后病害(Postharvest disease)控制领域，具体涉及防腐剂丙酸钙、剂型制备、采前施用方法以及有效控制葡萄采后贮藏期病害发生的方法。
背景技术
葡萄因含水含糖量高、皮薄易损伤，极易受微生物侵染。病原真菌多从田间潜伏侵入，从而在采后贮藏期导致葡萄发病，引起葡萄腐烂和落粒。灰霉菌(Botrytis cinerea)、链格孢(Alternaria)、炭疽菌(Colletotrichum)、黑曲霉(Aspergillus)等属真菌是常见引起葡萄采后病害的病原，其中灰霉菌不仅在葡萄花期会造成葡萄减产，同时其较强的低温生长能力和抗药性使其成为葡萄采后贮藏期的优势病原，因而难以被控制，极易造成严重的损失。因此，有效减轻葡萄采后病害的发生，需要从田间防控入手。
化学防腐保鲜剂是控制葡萄采后病害延长贮运期的有效手段，但其均应用在葡萄果实的采后处理。葡萄的采后防腐保鲜剂包括SO2、二氧化氯类、生物提取物及复配的多种防腐保鲜剂等，一些防腐保鲜剂的使用需要对果实进行浸泡处理，易导致机械损伤与落粒，应用效果不佳。SO2片剂是葡萄广泛应用的防腐保鲜剂，由于在采后使用无法起到控制田间潜伏病害的效果，需要施用过量，才有可能产生防腐效果，但由于SO2具强氧化性，过量施用易在果实中残留，不仅易造成葡萄果柄与果皮漂白损伤影响风味品质，用量不当也对食用安全和环境存在潜在的威胁。如何减少葡萄采后处理的繁琐工作，并降低由于采后处理等造成的机械损伤和落粒，以及食品安全等问题，从采前田间进行源头有效防控至关重要。然而田间温度高，因此对处理方法的要求较为苛刻，因此需要稳定、对环境及人体无副作用的技术。
丙酸钙(Calcium propionate，CP)别名：初油酸钙，分子量186.22，为白色结晶或白色晶体粉末或颗粒，无臭或微带丙酸气味，对水和热稳定，易溶于水，39.9g/l00mL(20℃)，不溶于乙醇、醚类。作为食品保鲜试剂，也是世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)批准使用的安全可靠的有机物，通常用作食品添加剂，ADI不作限制性规定，丙酸钙常用于食品中，安全性较高，根据《食品添加剂使用卫生标准》(GB 2760-2011)在罐头中最大用量为5％。目前杀菌剂的品种作用机制比较单一，病原菌的繁殖速度较快，故抗性也产生较快，且污染大，高残留，威胁着人类的食品安全。而丙酸钙作为一种新型的、绿色的、对环境友好的有机盐，污染少，可降解，并且具有毒性低，抗药性差，安全性高等优点，通常用于食品和医药等领域，可同时对食品粮食等常见病原菌如黄曲霉及镰刀菌等具有显著的效果，但是将丙酸钙施用于田间，进而控制葡萄采后病害，延长贮藏保鲜期的控制方法未见报道。
发明内容
本发明克服现有技术的上述问题，提供了一种操作简单、稳定可靠、对食品安全、环保的方法，提高通过采前田间施用达到葡萄在低温过程中的保鲜作用的方法。本发明将新型防腐保鲜剂溶液施于田间不同发育期的葡萄果实，有效抑制包括灰霉病在内的葡萄贮藏期病害，减少葡萄腐烂与脱粒，保持葡萄品质的防腐保鲜，达到田间和贮藏期病害的有效双控，延长葡萄采后保鲜期。
本发明提供的一种新型防腐保鲜剂，其包含0.5％-1.5％(w/v)丙酸钙，pH为4.5～5.5，溶剂为水(包括自来水、蒸馏水等)。其中，所述新型防腐保鲜剂的主要成分为丙酸钙。本发明所述新型防腐保鲜剂为无色液体，长期低温保存可正常使用，由于成分均易溶于水，因此易于施用及清洗。
本发明中，优选地，所述丙酸钙的浓度为1.5％(w/v)。
本发明中，优选地，所述pH为5。
本发明中，可采用任何酸性试剂调节新型防腐保鲜剂的pH，其中酸性试剂为提供酸性环境，无抑菌作用。本发明所述新型防腐保鲜剂中，活性成分主要为丙酸钙，由所述丙酸钙起抑菌作用，酸性试剂用以协助提高丙酸钙的抑菌作用。优选地，采用浓度为1mol/L的HCl用以调节/维持新型防腐保鲜剂的弱酸性，HCl溶液增加量可根据实际情况微调，pH范围在4.5-5.5时，对新型防腐保鲜剂的作用无实质影响。
本发明还提供了一种新型防腐保鲜剂的配制方法，所述方法包括：
(1)称取12g丙酸钙于113ml的蒸馏水中，加入7ml的1mol/L的HCl溶液配成10％的母液，过滤除菌4℃保存待用，pH值范围为4.5-5.5；
(2)使用蒸馏水或自来水稀释丙酸钙母液至浓度为0.5％-1.5％(w/v)，由于自来水等酸碱度不定，根据实际情况滴加数滴1mol/L HCl酸性调节剂将pH值调整为4.5-5.5范围，可使用pH试纸或pH仪器进行验证。
本发明中，优选地，所述丙酸钙的浓度为1.5％(w/v)。
本发明中，优选地，所述pH为4.5-5.5；进一步优选地，所述pH为5。
本发明中，可采用任何酸性试剂调节新型防腐保鲜剂的pH，其中酸性试剂为提供酸性环境，无抑菌作用，但是可以协助提高活性成分丙酸钙发挥抑菌作用。优选地，采用浓度为1mol/L的HCl用以维持新型防腐保鲜剂的弱酸性，其中HCl无抑菌作用；HCl浓度可根据实际情况微调，pH值范围在4.5-5.5，对新型防腐保鲜剂的作用无实质影响。
本发明还提供了一种按上述方法得到的新型防腐保鲜剂。
本发明还提供了一种葡萄贮藏病害采前控制方法，通过采前田间施用达到葡萄在低温过程中的保鲜作用，所述方法包括：分别在花后幼果期、中果期、转色成熟期与采前3d选择晴朗天气，于早上9点前或下午3点后使用喷雾器将所述新型防腐保鲜剂均匀喷施葡萄果穗，直到果面形成液滴，自然风干。
其中，所述幼果期是指子房开始膨大生长的时期，果实生长期；优选地，为花后60d。
其中，所述中果期是指果实开始转色软化的过程，果实转色期；优选地，为花后90d。
其中，所述转色成熟期是指果实已经基本成熟；优选地，为花后120d。
其中，所述病害是指由真菌导致的病害。优选地，所述真菌包括灰霉菌、链格孢、炭疽菌、黑曲霉之任意的一种或多种。
其中，本发明选择晴朗天气施用新型防腐保鲜剂的目的是，晴朗天气葡萄易于风干，减少药液流失并避免局部过于潮湿。其中，本发明选择早上9点前或下午3点后施用新型防腐保鲜剂的目的是，避免中午高温作业同时，避开果实旺盛的生命活性时间段。
优选地，所述新型防腐保鲜剂的用量为，如喷施量为750-850L/ha，(即每公顷750-850L)。成本在每公顷120-180元、每亩8-12元。
在一具体实施方式中，所述葡萄贮藏病害采前控制的方法，包括：分别在花后60d(幼果期)、90d(中果期)、120d(转色成熟期)与采前3d选择晴朗天气，于早上9点前使用喷雾器将上述新型防腐保鲜剂药液均匀喷施葡萄果穗完毕，直接风干即可，该方法可有效降低葡萄田间及贮藏病害。
本发明还提供了一种降低裂果率的方法，所述方法包括：在花后60d(幼果期)选择晴朗天气，于早上9点前使用喷雾器将上述新型防腐保鲜剂药液均匀喷施葡萄果穗完毕，直接风干即可，该方法可有效降低葡萄转色期常见的裂果现象。所述方法优选用于葡萄果实。
本发明还提供了如上所述的新型防腐保鲜剂或如上所述方法制备得到的新型防腐保鲜剂在制备抗真菌剂、在制备降低裂果率试剂中的应用。所述新型防腐保鲜剂能够作为钙素使用，即抑菌防病，又能降低葡萄裂果现象，壮果防裂。
其中，所述真菌包括灰霉菌、链格孢、炭疽菌、黑曲霉之任意的一种或多种。
本发明还提供了如上所述的新型防腐保鲜剂或如上所述方法制备得到的新型防腐保鲜剂在葡萄贮藏病害采前控制或制备用于葡萄贮藏病害采前控制试剂中的应用。
本发明比较了不同pH值及浓度对丙酸钙杀菌效果的影响，通过杀菌效果的好坏和植物的最适pH值最终确定了丙酸钙的作用浓度和pH及杀菌流程，在葡萄采收前分4个时期(幼果期、中果期、成熟期、采收前)将含丙酸钙的新型防腐保鲜剂均匀喷施于葡萄果穗上，采后不添加其它防腐保鲜措施，直接在冰箱或冷库中冷藏(2-4℃)，以实现葡萄采后病害(包括灰霉菌、链格孢、炭疽菌、黑曲霉等属真菌)的控制，并防止采后葡萄脱粒、腐烂和品质劣变，达到长期低温保鲜效果，对果实品质有良好保持作用，保鲜期比未处理对照葡萄果实延长30天以上。
本发明的有益效果在于：使用本发明所述新型防腐保鲜剂用于采前处理，(1)可以有效降低葡萄在低温90d的发病率(腐烂率)及脱粒率；(2)补充钙元素，降低葡萄转色早期的裂果率；(3)能够全程防控葡萄在田间及采后的病害，作用时期长；(3)采前喷雾处理，能够减少采后繁重的工作量，避免采后二次损伤；(4)相比其它化学试剂和农药，对操作人员无安全隐患，更环保，不会影响食用，无毒无污染，无腐蚀作用，更安全；(5)所需成分价格低廉，配制过程简便，处理方式简单，易于施用及清洗，具有十分巨大的实际应用价值。
附图说明
图1.不同浓度及不同pH值丙酸钙对植物病原菌灰霉菌的抑菌效果。其中，a为pH＝7时丙酸钙浓度梯度对灰霉菌的抑菌效果；b为pH＝6时丙酸钙浓度梯度对灰霉菌的抑菌效果；c为PH＝5时丙酸钙浓度梯度对灰霉菌的抑菌效果。
图2.丙酸钙对多种植物病原菌的抑菌广谱性。其中，a为丙酸钙(pH＝5)对灰霉菌抑制浓度梯度；b为丙酸钙(pH＝5)对禾谷镰刀菌抑制浓度梯度；c为丙酸钙(pH＝5)对胶孢炭疽菌抑制浓度梯度；d为丙酸钙(pH＝5)对链格孢菌抑制浓度梯度；e为处理后3d菌落整体图片。
图3.丙酸钙抑制灰霉菌侵染葡萄。其中，a为不同处理组葡萄果实病斑面积；b为不同处理组葡萄发病率；c为不同处理组处理6d的实验结果图。
图4.丙酸钙对葡萄的田间施用对田间病害控制的影响。其中a为新型防腐保鲜剂对阳光玫瑰葡萄的田间发病成熟期的图示；b为新型防腐保鲜剂在花后60d喷施后对果穗裂果率的影响；c为新型防腐保鲜剂在花后60d喷施后对果粒裂果率的影响；d为新型防腐保鲜剂喷施后对不同时期的果穗发病率的影响；e为新型防腐保鲜剂喷施后不同时期的果粒发病率的影响。
图5丙酸钙田间施用对葡萄采后低温贮藏效果的影响。a为含丙酸钙新型防腐保鲜剂在田间处理后对阳光玫瑰葡萄低温长期贮藏80d的影响；b为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的发病率的影响；c为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的脱粒率的影响；d为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的可溶性固形物的影响；e为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的可滴定酸的影响。
图6为丙酸钙对葡萄的田间施用对田间病害控制及采后低温贮藏效果的影响。a为含丙酸钙新型防腐保鲜剂在田间处理后对巨峰葡萄低温长期贮藏90d的影响；b为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的发病率的影响；c为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的脱粒率的影响；d为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的可溶性固形物的影响；e为含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间处理后对低温贮藏的各个时间段的可滴定酸的影响。
具体实施方式
结合以下具体实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。
实施例1：不同浓度及不同pH值丙酸钙处理对灰霉菌菌丝生长的影响
一、材料与方法
1、丙酸钙
丙酸钙为上海麦克林生化科技有限公司购买的成品，纯度≥99.5％(分析纯，AR)。
各个pH值丙酸钙10％母液的配制：
pH＝5丙酸钙母液：12g丙酸钙于113ml的蒸馏水中，加入7ml的1mol/L的HCl溶液配成10％的母液，使用pH试纸进行校准，过滤除菌4℃保存待用。
pH＝6丙酸钙母液：称取10g丙酸钙于100ml的蒸馏水中，加入2-4ml1mol/l的Hcl溶液调整PH值，使用pH试纸校准，过滤除菌4℃保存待用。
常规丙酸钙母液：称取10g丙酸钙于100ml的蒸馏水中，过滤除菌4℃保存待用。
2、菌株及培养
本实施例中，所用的灰霉菌为标准菌株(Botrytis cinerea.B05.10)，其他植物病原菌为常见病原菌(本发明中所采用的各菌株可以从发病植物上分离得到，也可以商业购买)，实验室4℃保存。
3、培养基
采用的培养基为马铃薯培养基(简称PDA)，PDA培养基配方：马铃薯(去皮)200g，葡萄糖20g，琼脂15g，自来水1000mL。配制方法：将马铃薯洗净去皮，称200g切成小块，加水煮烂(煮沸20-30分钟，能被玻璃棒戳破即可)，用八层纱布过滤于烧杯中，加15g琼脂，加入20g葡萄糖，搅拌均匀，充分溶解后，稍冷却，补足水至1000mL，使用1mol/l的HCl或NaOH溶液调pH值，分装后121℃灭菌20分钟，冷却后备用。
将保存灰霉菌接种到PDA固体平板培养基上，室温培养7d。分别用直径5mm的打孔器取PDA平板上菌落边缘菌块作为传代接种用菌饼。
4、采用生长速率法测定不同浓度及pH值的新型防腐保鲜剂对菌丝生长的影响：
(4.1)传代后，将灰霉菌在PDA平板上25℃培养2d左右，待用。
(4.2)含不同浓度及pH值的新型保鲜剂的制备方法
(4.2.1)按照上述配方配制3份PDA培养基，将其中一份不做调整，另外两份使用1mol/l的HCl或NaOH溶液分别调整成pH值为5、6。
(4.2.2)将3份PDA培养基加热溶化，冷却至45-50℃，备用；
组一：将pH＝5丙酸钙母液加入pH＝5的PDA配制成含0、0.3％、0.5％、1％和1.5％(质量百分比)浓度梯度丙酸钙的培养基(各培养基pH值为5)；
组二：将pH＝6丙酸钙母液加入pH＝6的PDA配制成含0、0.3％、0.5％、1％和1.5％(质量百分比)浓度梯度丙酸钙的培养基(各培养基pH值为6)；
组三：将常规丙酸钙母液(未调整的丙酸钙母液)与未调整pH的PDA配制成含0、0.3％、0.5％、1％和1.5％(质量百分比)浓度梯度丙酸钙的培养基(各培养基pH值为7)(未调整的丙酸钙母液为弱碱性，未调整的PDA培养基为弱酸性，因此混合后pH值稳定在7)；
将上述配制后的培养基分别倒入培养皿中冷却，其中，每组中分别以0.3％、0.5％、1％和1.5％为实验组，对照组即含0％(质量百分比)新型保鲜剂培养基中。
(4.3)以无菌操作手续，用打孔器在培养2d的各菌株菌丝边缘(生长状况尽量一致)打取圆形菌饼(直径0.6cm)。再用接种针挑至上述对照组和实验组平板中央，然后将培养皿倒置于培养箱(28℃)中培养。
(4.4)于处理后不同时间观察测定菌丝的生长情况，并采用十字交叉法测得菌斑直径并处理数据。
二、测定结果：
图1a中，在pH为7时，丙酸钙在培养基中质量百分比为0.3％即对灰霉菌表现出显著的抑制能力，同时与浓度成正比。
与图1中pH值为7相比，图1b中pH为6时，丙酸钙的抑菌能力更强，表明丙酸钙在微酸环境下的抑菌效果得到增强。
图1c中，pH为5，质量百分比浓度为0.4％的新型防腐保鲜剂的PDA培养基上，菌丝仅微量生长，但是质量百分比为0.5％以上时，则完全没有菌丝长出，并在7d后也没有菌丝长出，表明pH值为5时，丙酸钙已经达到了杀菌效果，效果强于pH值6和7。
以上表明，丙酸钙对灰霉菌具有显著的效果，在弱酸环境下，丙酸钙的抑菌能力增强，在上述pH值中，抑菌能力由7、6、5依次增强。
实施例2：低pH值新型防腐保鲜剂处理对多种植物病原菌的抑制作用
一、材料与方法
灰霉菌(Botrytis cinerea)、互隔交链孢霉(Alternaria alternata)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、亚洲镰刀菌(Fusarium graminearum)为本课题组实验室分离自葡萄果实等的常见致病真菌。
使用实施例1中制备的10％(w/v)的丙酸钙母液(pH值为5)与培养基调配成丙酸钙质量百分比分别为0、0.1％、0.2％、0.4％，pH值均为5的培养基。
其他，如所用培养基PDA、配制方法、菌种活化方式、新型防腐保鲜剂的抑制作用测定等如实施例1“材料与方法”一节所述。
二、测定结果
结果如图2a、图2b、图2c、图2d所示，在新型防腐保鲜剂中丙酸钙浓度分别为0.1％、0.2％时，已经具有显著的抑制作用，达到0.4％时，在6d内完全抑制了四种植物病原菌的生长，表明丙酸钙具有较强的抑菌广谱性，可以用于多种果蔬。
实施例3：含丙酸钙新型防腐保鲜剂控制葡萄灰霉菌病害的效果
一、材料与方法
果实：以阳光玫瑰葡萄(Vitis vinifera L.Muscat-shine)为实验材料。果实来源于上海马陆葡萄研究所。果实采收后立即运往华东师范大学生命科学学院。
病原菌：灰霉菌(B.cinerea)孢子悬液浓度为1x105(spores/ml)。
处理方法：每个葡萄果实刺伤后分别接种以下处理液20ul：A、含质量百分比0.5％的丙酸钙的新型防腐保鲜剂；B、含质量百分比1％的丙酸钙的新型防腐保鲜剂；C、含质量百分比1.5％的丙酸钙的新型防腐保鲜剂；D、蒸馏水(CK)(各种处理液的接种量均为20ul)。4h后，每个葡萄果实接种20ul浓度为1x105spores/ml的灰霉菌孢子悬液。果实处理后贮藏于室温下。6天后观察其发病率及病斑直径。
二、实验结果：
本实验例通过先将丙酸钙药液滴加刺伤果实表面，干燥后滴加灰霉菌孢子，且在适宜发病的环境下6d后观察实验结果，表明含丙酸钙的新型防腐保鲜剂活体防效较强，对葡萄具有显著的预防保护能力(见附图3c)。
结果参见附图3a，含质量百分比0.5％～1.5％的丙酸钙的新型防腐保鲜剂对葡萄果实釆后灰霉菌有显著的抑制效果，经丙酸钙处理后，葡萄的病斑面积显著降低。
附图3b，丙酸钙降低了葡萄的发病率，因此结果表明丙酸钙能够保护葡萄，降低灰霉菌的侵染能力，且防治效果与浓度成正比。
实施例4含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间施用对葡萄贮藏病害的控制
一、材料与方法：
(1.1)阳光玫瑰葡萄：
阳光玫瑰葡萄是近期新兴的葡萄品种，由于风味可口，性状优良，但由于通过品种认定时间较短，因此目前缺乏对该品种葡萄的研究。
(1.2)田间处理：
地点为上海马陆葡萄研究所内，选择阳光玫瑰葡萄树龄及长势一致，果穗无畸形病害的果树，使用含有质量百分比分别为0.5％、1％、1.5％的丙酸钙的新型防腐保鲜剂溶液(pH＝5)(配制方法同实施例1)，于花后60d、花后90d、花后120d、采前3d(花后145d)四个时间点均采用新型防腐保鲜剂进行处理，选择晴朗天气于早上9点前处理完毕；以完全不处理(CK)及蒸馏水(CK0)处理作为对照；以两株果树为一组，随机分组，每个实验组重复三次，每株果树至少统计20个果穗。
(1.3)发病率统计：
于花后60d、花后90d、花后120d、采前3d(花后145d)统计
果穗发病率：果穗发病率(％)＝发病果穗/总果穗
果粒发病率：果粒发病率(％)＝发病果粒/总果粒
(1.4)裂果率统计：
同时在花后60d第一次处理后的第15d，统计果实裂果率。以完全不处理(CK)及蒸馏水(CK0)处理作为对照，以两株果树为一组，随机分组，每个实验组重复三次，每组至少统计20个果穗。
果穗裂果率：果穗裂果率(％)＝出现裂果果穗/总果穗
果粒裂果率：果粒裂果率(％)＝裂果果粒/总果粒
二、实验结果：
在葡萄花后60d至90d，葡萄尚未成熟，很少发病，若出现缺钙情况，葡萄易发生裂果，因此农业上常补充钙素来避免裂果的发生。如图4b、图4c显示在花后60d经含丙酸钙的新型防腐保鲜剂处理15d后，裂果率显著降低，表明经本发明新型防腐保鲜剂处理后，葡萄吸收钙元素，降低了葡萄裂果现象，能够作为钙素使用，即抑菌防病，也能壮果防裂。
在花后90d及120d，果实接近成熟，易于发病。根据图4d、图4e所示，本发明含丙酸钙的新型防腐保鲜剂均显著抑制了葡萄的果粒发病率与果穗发病率，在花后145d即采前3d，葡萄完全成熟时，三种含不同浓度丙酸钙新型防腐保鲜剂均保证了70％的果穗完好及97％以上的果粒完好，三组实验组间没有显著性差异；而没有任何处理的对照组(CK)与水处理组(CK0)果粒发病率则达到了5％-6％，且70％以上果穗出现坏果；本实施例实验结果表明，本发明含有丙酸钙的新型防腐保鲜剂具有明显的抑制果粒发病率与果穗发病的效果。
实施例5含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间喷施对阳光玫瑰葡萄采后低温贮藏的影响
一、材料与方法：
将实施例4的阳光玫瑰葡萄于9月26日采收并迅速带回华东师范大学生命科学学院，放置在葡萄包装纸箱盒内，外包有聚乙烯塑料膜，每箱包含1kg葡萄，重复三次。放置在澳柯玛VC-880D冷藏柜(4℃、相对湿度65％)低温长期保存。分别于采收后的第0d、40d、60d和80d测定发病率、脱粒率、可溶性固形物、可滴定酸的含量。
二、实验结果：
阳光玫瑰葡萄经田间含丙酸钙新型防腐保鲜剂处理后，低温长期贮藏80d仍然具有显著的效果(附图5a)。
(2.1)果粒发病率测定
果粒发病率(％)＝发病果粒/总果粒数
结果如图5b所示，对于CK组及CK0组，处理40d时果粒发病率为15％-20％，60d时果粒发病率为30％-40％，80d时果粒发病率为55％-60％；三个实验组中，含不同浓度丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理都可以显著降低葡萄的果粒发病率，在80d发病率为10％左右(低于CK组及CK0组贮藏40d的发病率)，其中含质量百分比为l.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂的处理效果最为显著，表明经过田间处理后，丙酸钙能够在葡萄采后长期贮藏过程中抑制病害产生，防止因腐烂造成的采后损失，可以有效延长葡萄贮藏时间。
(2.2)脱粒率测定
脱粒率(％)＝脱落果粒/总果粒数
葡萄在采后贮藏过程中，随着自身衰老及微生物等原因会产生脱粒现象，从而导致伤口并降低商业价值。如图5c所示，三个实验组中，含不同浓度丙酸钙新型防腐保鲜剂处理都可以显著降低葡萄的脱落率，其中含质量百分比为l.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂的处理效果最为显著，表明丙酸钙在处理阳光玫瑰葡萄后，显著抑制葡萄发病率的同时，可以显著抑制葡萄的脱粒率，既有利于后续保藏，同时有利于提高其商业价值。
(2.3)可溶性固形物含量测定
使用手持式折光仪对榨取的葡萄果粒进行测定，每组20粒葡萄，重复三次。
可溶性固形物表示果实的甜度，代表果实的口感，反映葡萄的品质。测定结果如图5d所示，三个实验组中，含不同浓度的丙酸钙的新型防腐保鲜剂处理对可溶性固形物含量与对照组相比没有显著影响，表明本发明新型防腐保鲜剂不影响葡萄的正常品质。
(2.4)可滴定酸含量测定
取10g果肉，加入10ml煮沸冷却的蒸馏水研磨成匀浆，连果肉倒入100ml容量瓶中定容，取20ml滴加1-2滴酚酞试剂，使用标定过的0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液进行滴定，同时做空白实验。每个样品平行测定3次，结果取平均值。
计算公式如下：可滴定酸含量(％)＝C×(V1-V0)×Si×1000/(V2×W)
式中：C—氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L
V0—空白消耗的NaOH标准溶液体积，ml
V1—样品滴定时消耗的NaOH标准溶液体积，ml
V2—吸取样品的体积，ml
W—样品鲜重，g
Si—与1.00ml NaOH标准溶液相当的试样主体酸的质量，即折算系数
S苹果酸＝0.067，S柠檬酸＝0.064，S草酸＝0.045，S酒石酸＝0.075。
可滴定酸作为一种常见指标，代表着葡萄的风味。测定结果如图5e所示，三个实验组中，含不同浓度丙酸钙的新型防腐保鲜剂能够增强葡萄在低温贮藏过程中品质的稳定性，维持可滴定酸含量，降低葡萄可滴定酸成分流失。具体地，在处理的第0d、40d，三个实验组与对照组相比无显著性差异；在处理的第60d，三个实验组可滴定酸为0.205％-0.21％，而CK组及CK0组为0.195％-0.200％，差异显著(P<0.05)。同时以CK0组为例，可滴定酸含量由成熟期的0.21％降低至80d的0.183％，而含1.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理后的葡萄则由成熟期0.207％降低至80d的0.192％，降低幅度明显小于CK0组，表明经丙酸钙处理后，丙酸钙能够保持可滴定酸的稳定。
实施例6含丙酸钙新型防腐保鲜剂田间喷施对巨峰葡萄采后低温贮藏的影响
一、实验材料与方法：
田间处理同实施例4，采收方法同实施例5，品种为巨峰葡萄(Vitis viniferacv.Kyoho)。分别于采收后的第30d、60d和90d测定发病率、脱粒率、可溶性固形物、可滴定酸含量。
二、实验结果：
巨峰葡萄经田间含丙酸钙新型防腐保鲜剂处理后，低温贮藏90d仍然具有显著的效果(附图6a)。
(2.1)果粒发病率测定
发病率(％)＝发病果粒/总果粒数
如图6b所示，对于CK组及CK0组，在处理后30d时，果粒发病率为10％，60d时果粒发病率为22％-24％，90d时果粒发病率为29％-33％；三个实验组中，含不同浓度丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理都可以显著降低葡萄的发病率，在处理后80d时果粒发病率为7％(低于CK组及CK0组贮藏30d的发病率)；其中含质量百分比为l.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂的处理效果最为显著，表明经过田间处理后，丙酸钙能够在葡萄采后长期贮藏过程中抑制病害产生，防止因腐烂造成的采后损失，可以有效延长葡萄贮藏时间。
(2.2)脱粒率测定
脱粒率(％)＝脱落果粒/总果粒数
葡萄在采后贮藏过程中，随着自身衰老及微生物等原因会产生脱粒现象，从而导致伤口并降低商业价值。如图6c所示，在处理后30d时，各个组间的脱粒率无显著性差异。而在处理后60d与90d，三个含丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理的巨峰葡萄脱粒率显著低于CK组及CK0组(P<0.05)，不同浓度的丙酸钙溶液处理都可以显著降低葡萄的脱落率，其中含质量百分比为l.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂的处理效果最为显著。表明丙酸钙在处理巨峰葡萄后，显著抑制了葡萄发病率的同时，可以显著抑制葡萄的脱粒率，既有利于后续保藏，同时有利于提高其商业价值。
(2.3)可溶性固形物含量测定
使用手持式折光仪对榨取的葡萄果粒进行测定，每组20粒葡萄，重复三次。
可溶性固形物表示果实的甜度，代表果实的口感，反映葡萄的品质。测定结果如图6d所示，三个实验组中，含不同浓度的丙酸钙的新型防腐保鲜剂处理对可溶性固形物含量与对照组CK组及CK0组相比没有显著影响，表明本发明新型防腐保鲜剂不影响葡萄的正常品质。
(2.4)可滴定酸含量测定：
取10g果肉，加入10ml煮沸冷却的蒸馏水研磨成匀浆，连果肉倒入100ml容量瓶中定容，取20ml滴加1-2滴酚酞试剂，使用标定过的0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液进行滴定，同时做空白实验。每个样品平行测定3次，结果取平均值。计算过程同实施例5(2.4)
可滴定酸作为一种常见指标，代表着葡萄的风味。如图6e所示，三个实验组中，含不同浓度丙酸钙的新型防腐保鲜剂能够有效维持葡萄在低温贮藏过程中品质的稳定性，维持葡萄可滴定酸含量，降低葡萄可滴定酸成分的流失。丙酸钙能够显著维持可滴定酸，降低损失。具体地，以CK0组为例，可滴定酸含量由成熟期的0.285％降低至90d的0.243％，CK组由成熟期的0.288％降低0.239％，而含1.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理后的葡萄则由成熟期0.276％降低至90d的0.256％，含1％丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理后的葡萄则由成熟期0.274％降低至90d的0.262％，含0.5％丙酸钙的新型防腐保鲜剂实验组处理后的葡萄则由成熟期0.267％降低至0.250％，降低幅度幅度明显小于CK0组与CK组，表明经含丙酸钙的新型防腐保鲜剂处理后，能够保持葡萄可滴定酸含量的稳定。
本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。

Claims (15)

1.一种新型防腐保鲜剂，其特征在于，其包含0.5％-1.5％(w/v)丙酸钙，pH为4.5-5.5。
2.如权利要求1所述的新型防腐保鲜剂，其特征在于，其包含0.5％-1.5％(w/v)丙酸钙，使用1mol/L HCl作为酸性调节剂调节pH为4.5-5.5。
3.如权利要求1所述的新型防腐保鲜剂，其特征在于，所述新型防腐保鲜剂的pH为5。
4.如权利要求1所述的新型防腐保鲜剂的配制方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)称取12g丙酸钙于113ml蒸馏水中，加入7ml 1mol/L HCl酸性试剂调节pH，配成丙酸钙浓度为10％的母液，过滤除菌4℃保存待用，pH值范围为4.5-5.5；
(2)使用蒸馏水稀释丙酸钙母液至浓度为0.5％-1.5％(w/v)，滴加1mol/L HCl酸性调节剂将pH值调整为4.5-5.5范围，得到所述新型防腐保鲜剂。
5.一种葡萄贮藏病害采前控制方法，其特征在于，所述方法包括：分别在花后幼果期、中果期、转色成熟期与花后145d将如权利要求1～3之任一项所述的新型防腐保鲜剂或如权利要求4所述方法制备得到的所述新型防腐保鲜剂施于葡萄果穗。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述幼果期是指子房开始膨大生长的时期，果实生长期。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述中果期是指果实开始转色软化的过程，果实转色期。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述成熟期是指果实已经基本成熟。
9.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述幼果期为花后60d，所述中果期为花后90d，所述成熟期为花后120d。
10.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述病害是指由真菌导致的病害。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述真菌包括灰霉菌、链格孢、炭疽菌、黑曲霉之任意的一种或多种。
12.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括：分别在花后60d、90d、120d与采前3d(花后145d)，选择晴朗天气，于早上9点前或下午3点后使用喷雾器将所述新型防腐保鲜剂均匀喷施葡萄果穗完毕，施用量为750-850L/ha，直接风干即可。
13.一种降低裂果率的方法，其特征在于，所述方法包括：在幼果期选择晴朗天气，于早上9点前或下午3点后使用喷雾器将上述新型防腐保鲜剂药液均匀喷施葡萄果穗完毕，直接风干即可。
14.如权利要求1～3之任一项所述的新型防腐保鲜剂或如权利要求4所述方法制备得到的新型防腐保鲜剂在制备抗真菌剂、在制备降低裂果率试剂中的应用。
15.如权利要求1～3之任一项所述的新型防腐保鲜剂或如权利要求4所述方法制备得到的新型防腐保鲜剂在葡萄贮藏病害采前控制或制备用于葡萄贮藏病害采前控制试剂中的应用。
CN202010251932.9A 2020-04-01 2020-04-01 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂 Pending CN111418649A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010251932.9A CN111418649A (zh) 2020-04-01 2020-04-01 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010251932.9A CN111418649A (zh) 2020-04-01 2020-04-01 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111418649A true CN111418649A (zh) 2020-07-17

Family

ID=71550542

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010251932.9A Pending CN111418649A (zh) 2020-04-01 2020-04-01 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111418649A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116530513A (zh) * 2023-07-07 2023-08-04 中山大学 丙酸盐在防治柑橘黄单胞杆菌中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101341903A (zh) * 2008-08-22 2009-01-14 山东营养源食品科技有限公司 一种葡萄的保鲜方法
CN109042845A (zh) * 2018-07-26 2018-12-21 无为县辉琴农副产品销售部 延长葡萄保鲜期的保鲜贮藏方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101341903A (zh) * 2008-08-22 2009-01-14 山东营养源食品科技有限公司 一种葡萄的保鲜方法
CN109042845A (zh) * 2018-07-26 2018-12-21 无为县辉琴农副产品销售部 延长葡萄保鲜期的保鲜贮藏方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王馨悦，等: "钙处理对浆果品质影响的研究进展", 《食品与发酵工业》 *
王馨悦，等: "钙处理对浆果品质影响的研究进展", 《食品与发酵工业》, vol. 44, no. 3, 31 March 2018 (2018-03-31), pages 287 - 292 *
谭桢，等: "山梨酸和丙酸钙复合保鲜剂对延长苹果保鲜期的研究", 《中小企业管理与科技(上旬刊)》 *
谭桢，等: "山梨酸和丙酸钙复合保鲜剂对延长苹果保鲜期的研究", 《中小企业管理与科技(上旬刊)》, no. 2, 5 February 2013 (2013-02-05), pages 299 - 301 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116530513A (zh) * 2023-07-07 2023-08-04 中山大学 丙酸盐在防治柑橘黄单胞杆菌中的应用
CN116530513B (zh) * 2023-07-07 2023-09-15 中山大学 丙酸盐在防治柑橘黄单胞杆菌中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sophia et al. Effect of Aloe vera gel coating on postharvest quality and shelf-life of mango (Mangifera indica L.) fruits Var.'Ngowe'
Zhao et al. Effect of calcium chloride in combination with salicylic acid on post-harvest freshness of apples
Oz et al. The Effects of Calcium Chloride and 1‐Methylcyclopropene (1‐MCP) on the Shelf Life of Mulberries (M orus alba L.)
Khan et al. Preharvest sprays affecting shelf life and storage potential of fruits
Al-Obeed Jujube post-harvest fruit quality and storagability in response to agro-chemicals preharvest application
KR20130084551A (ko) 세리사이트가 함유된 비료를 이용하여 사과, 배 또는 감귤을 재배하는 방법
Jahanshahi et al. A novel edible coating for apple fruits
CN103704332A (zh) 新鲜果实的保鲜方法
WO2018047123A1 (en) Biological control of plant pathogenic microorganisms
Mei et al. Effects of chlorine dioxide on morphology and ultrastructure of Fusarium sulphureum and its virulence to potato tubers
Geransayeh et al. Effect of thymol treatment on decay, postharvest life and quality of strawberry (Fragaria ananassa) Fruit cv.‘Gaviota
Dutra et al. Use of hot water, combination of hot water and phosphite, and 1-MCP as post-harvest treatments for passion fruit (Passiflora edulis f. flavicarpa) reduces anthracnose and does not alter fruit quality
CN111418649A (zh) 一种葡萄采后病害的控制方法及防腐保鲜剂
CN105917991A (zh) 一种葡萄的保鲜方法
Ismail et al. Influence of some post-harvest treatments on guava fruits
Vyas et al. Chemical elicitors improve the shelf life of phalsa (Grewia asiatica L.) by inducing antioxidants and controlling microbes
Abd El-Gawad Influence of propolis extract and oxalic acid on preserving quality of guava fruits during postharvest cold storage
Tuai et al. Extending post-harvest quality of fresh fig (Ficus carica L.) fruit through manipulation of pre-and post-harvest practices: A review
CN104904714B (zh) 丁酸钠在制备用于防治由植物病原菌引起的植物病害的杀菌剂中的用途
Aljabary Maintenance of pomegranate fruit quality by coating with flaxseed, black seed oils, and chitosan during different storage periods
Faramitha et al. Application of Chitosan-Aloe vera Gel Based Coating on Postharvest Quality and Storability of Red Chili (Capsicum annuum L.)
AU2017323654B2 (en) Biological control of plant pathogenic microorganisms
Sharanaiahswamy et al. Study on effect of different organic based products as a post-harvest treatment on shelf life and quality of guava (Psidium guajava L) Cv. Lucknow-49
CN108739992B (zh) 一种番木瓜保鲜剂和番木瓜贮藏保鲜方法
Feng et al. Preharvest application of phellodendron bark extracts controls brown rot and maintains quality of peento-shaped peach

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200717