CN111398461A - 一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，属于含量检测领域。它解决了现有的人体呼出气中的检测大多为定性检测，都是收集后统一测定，根据不同的峰图谱判断存在哪些物质，而无法定量的检测出醇类物质的含量等问题，一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，包括如下步骤：收集人体呼出的气体；将人体呼出的气体通入装有干燥剂的吸水装置中，除去呼出气中的水；在吸水装置后连接吸附装置，发生衍生化反应；用洗脱剂洗脱吸附装置；对洗脱后的溶液进行检测；所述的吸附装置内装填有固定相，所述的固定相上附着有衍生试剂，所述衍生试剂的化学式为R‑CO‑Cl。本发明具有灵敏度高，准确度高，且能够定量检测的优点。

Description

一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法
技术领域
本发明属于样品处理领域，特别涉及一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法。
背景技术
人体呼出气体是直接由肺呼出，最早由pauling等人在1971年采集了正常人的呼出气体，并检测到其中250种挥发性有机物。
人体呼出气体中的挥发性有机物与疾病的诊断息息相关，这些挥发性有机物中包含有醇类物质，若检测到呼出气中有醇类物质，可通过人体呼出气中的醇类物质的高低进行相关疾病影响的研究并为其提供一些技术支持，而呼出气中有醇类物质的含量则可以一定程度上代表该种疾病严重的程度，疾病的确诊需要后续的进一步的诊断。但是前期人体呼出气中醇类物质的检测，是一种非入侵式检测，对于早期疾病的预防具有重要的意义。
对于呼出气挥发性成分而言，样品成分复杂，一般的吸附过程是简单的物理吸附作用，采用含有某种填料的吸附剂将呼出气中的挥发性成分大部分吸附在填料上，不能选择性吸附。故现有的人体呼出气中的检测大多为定性检测，都是收集后统一测定，根据不同的峰图谱判断存在哪些物质，而无法定量的检测出醇类物质的含量。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中存在的上述问题，提供了一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法。
本发明的目的可通过下列技术方案来实现：一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S01：收集人体呼出的气体；
S02：将人体呼出的气体通入装有干燥剂的吸水装置中，除去呼出气中的水；
S03：在吸水装置后连接吸附装置，发生衍生化反应；
S04：用洗脱剂洗脱吸附装置；
S05:对洗脱后的溶液进行检测；
所述的吸附装置内装填有固定相，所述的固定相上附着有衍生试剂，所述衍生试剂的化学式为R-CO-Cl。
优选地，所述的衍生试剂为苯甲酰氯。
优选地，所述的干燥剂为200mg无水硫酸钠，且所述的无水硫酸钠经过500℃高温加热烘烤除水4小时，取出后过200目筛网。
优选地，所述的洗脱剂为乙腈，所述的乙腈为色谱纯的百灵威乙腈或者Honeywell乙腈。
优选地，步骤S03的反应温度在45-60℃。
优选地，所述的吸附装置为吸附柱，所述的吸附柱的制备方法如下：
(1)将衍生试剂用乙腈配置成含有衍生试剂的含量为3％的涂渍液；
(2)将固定相填料填充到空白吸附柱上；
(3)将涂渍液涂渍在装填固定相的吸附柱上，最后用氮气吹干，4℃密封冷藏保存；
制备过程在醇类检测要求小于等于0.1μg(以正丁醇计)的环境中进行。
优选地，固定相选自硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料中的一种或任意组合。
优选地，硅胶填料和C18填料的比例为1:1，或者硅胶填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1，或者C18填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1，或者硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1:1。
优选地，硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料的粒径在50-500目之间。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1、本发明针对气体中醇类物质的定量检测，通过本发明的吸附柱的制备方法，将本发明选用的衍生试剂涂渍于吸附柱的固定相上。该衍生试剂能与醇类发生衍生化反应(即亲核取代反应)生成新的酯类产物，该酯类产物的化学式为R-CO-O-R’。酯类产物分子结构变大，稳定性增强可采用质谱检测，提高检测灵敏度。
2、将本发明选用的衍生试剂涂渍于吸附柱的固定相上，能够选择性的吸收人体呼出气体中的醇类物质，再用洗脱剂洗脱，通过检测酯类产物的含量，来表示呼出气中醇类物质的含量。本发明可以定量的检测出人体呼出气中醇类物质的含量，且通过含有特定基团的衍生试剂(化学式为R-CO-Cl，其中R代表取代基，CO代表羰基基团)来进行衍生化反应，本发明的反应的选择性高。本发明的制得的吸附柱不会吸收呼出气中的其他物质，而只针对醇类物质，故最后定量检测更为精准。
3、本发明的衍生试剂选用苯甲酰氯，苯甲酰氯能够吸附在固定相上，且气态挥发性醇类物质与涂渍在固定相上的衍生试剂发生化学反应且具有持续性，生产的产物能够从固定相上洗脱下来。
4、本发明的固定相选自硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料中的一种或任意组合。且填料的粒径在50-500目之间。本发明的固定相能够很好的吸附衍生试剂，并有利于衍生试剂和醇类物质反应生成的产物被乙腈洗脱下来。
5.本发明步骤S03的反应温度在45-60℃之间。有利于气体中的醇类物质和衍生试剂进行充分的反应。
6.本发明吸附柱的制备过程在醇类检测要求小于等于0.1μg(以正丁醇计)的环境中进行。该环境下，可以视为空气中基本不存在醇类物质，目的是为了防止空气中本身的存在的醇类物质在涂渍过程中与衍生试剂反应，从而导致实验误差大，检测不精准。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。
吸水装置包括但不限于吸水柱，吸附装置包括但不限于吸附柱。
实施例1
使用的仪器：液相色谱串联质谱联用仪，配有电喷雾(ESI)离子源。固相萃取系统，氮气吹干仪等。
首先，用配置成含有苯甲酰氯为3％的涂渍液，在醇类检测要求小于等于0.1μg(以正丁醇计)的环境中进行，将涂渍液涂渍在含有固定相材料的空白吸附柱上，填充的固定相填料为200mg。涂渍方法采用直接涂渍法进行。涂渍前先用乙腈润洗空白吸附柱，负压固相萃取系统除去润洗的乙腈试剂，然后将3％的涂渍液直接涂渍在吸附柱上，涂渍饱和后采用负压固相萃取系统除去多余的涂渍液，制成能够进行选择性吸附呼出气醇类物质的选择性吸附柱，用氮气吹干吸附柱并在4℃下密封保存待用。
收集人体呼出的气体3L-10L于采样袋中，将收集得到的呼出气先通入装有无水硫酸钠的吸水柱中，然后再通入吸附柱中，呼出气中的醇类物质与涂渍在固定相上的苯甲酰氯反应生成产物，用乙腈洗脱，将洗脱后的溶液定容至2mL，并用LC-MS/MS定量检测。用外标工作曲线法准确定量，根据测定的峰面积结果带入标准工作曲线计算实际含量。
固定相可以选用硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料中的一种或任意组合。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

Claims (9)

1.一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S01：收集人体呼出的气体；
S02：将人体呼出的气体通入装有干燥剂的吸水装置中，除去呼出气中的水；
S03：在吸水装置后连接吸附装置，发生衍生化反应；
S04：用洗脱剂洗脱吸附装置；
S05:对洗脱后的溶液进行检测；
所述的吸附装置内装填有固定相，所述的固定相上附着有衍生试剂，所述衍生试剂的化学式为R-CO-Cl。
2.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，所述的衍生试剂为苯甲酰氯。
3.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，所述的干燥剂为200mg无水硫酸钠，且所述的无水硫酸钠经过500℃高温加热烘烤除水4小时，取出后过200目筛网。
4.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，所述的洗脱剂为乙腈，所述的乙腈为色谱纯的百灵威乙腈或者Honeywell乙腈。
5.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，步骤S03的反应温度在45-60℃。
6.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，所述的吸附装置为吸附柱，所述的吸附柱的制备方法如下：
(1)将衍生试剂用乙腈配置成含有衍生试剂的含量为3％的涂渍液；
(2)将固定相填料填充到空白吸附柱上；
(3)将涂渍液涂渍在装填固定相的吸附柱上，最后用氮气吹干，4℃密封冷藏保存；
制备过程在醇类检测要求小于等于0.1μg(以正丁醇计)的环境中进行。
7.根据权利要求1所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，固定相选自硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料中的一种或任意组合。
8.根据权利要求7所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，硅胶填料和C18填料的比例为1:1，或者硅胶填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1，或者C18填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1，或者硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料的比例为1:1:1。
9.根据权利要求7所述的一种检测人体呼出气中醇类物质的检测方法，其特征在于，硅胶填料、C18填料和弗洛里硅藻土填料的粒径在50-500目之间。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010041366A1 (en) * 1998-06-19 2001-11-15 Nathan Lewis Trace level detection of analytes using artificial olfactometry
CN109900776A (zh) * 2017-12-11 2019-06-18 中国科学院大连化学物理研究所 一种高灵敏在线检测呼出气中hcn的装置和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010041366A1 (en) * 1998-06-19 2001-11-15 Nathan Lewis Trace level detection of analytes using artificial olfactometry
CN109900776A (zh) * 2017-12-11 2019-06-18 中国科学院大连化学物理研究所 一种高灵敏在线检测呼出气中hcn的装置和应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
I. SANZ-VICENTE等: "Gas Chromatography with UV-Vis Molecular Absorption Spectrometry Detection: Increasing Sensitivity of the Determination of Alcohols and Phenols by Derivatization", 《CHROMATOGRAPHIA》 *
YUMEI LIN等: "Protocol for Collection and HPLC Analysis of Volatile Carbonyl Compounds in Breath", 《CLINICAL CHEMISTRY》 *
石李梁等: "柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人参中人参二醇", 《理化检验-化学分册》 *

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