CN111393235A - 一种高磷缓释菌肥及其制法 - Google Patents

Abstract

一种高磷缓释菌肥及其制法，属于复配菌肥技术领域，本质上是将胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和白腐真菌的菌液与腐植酸或/和禽畜粪便吸附搅拌后，通过造粒、干燥制得菌肥颗粒，其特征是，混合菌液中活菌数为2‑50×10⁸CFU/g，杂菌率≤10％。本发明利用生物解磷菌肥将土壤中被固定的难溶磷转化为能够被植株利用的有效磷，提高土壤中磷肥的利用率，可提高磷肥利用率，减少土壤中磷肥施入量；另外，本发明通过菌和菌复合，可以提高有效活菌数，降低杂菌率。

Description

一种高磷缓释菌肥及其制法

技术领域

本发明属于复合菌肥技术领域，具体是一种高磷缓释菌肥的制法。

背景技术

微生物肥料生产成本低，应用效果好，不污染环境，施用后不仅增产，而且能够提高农产品质量和减少化肥的使用量，因此在我国农业持续发展中占有重要地位。我国人口日益增加，人民生活水平不断提高，对农产品的数量和质量提出了更高的要求，由于我国耕地不断减少，化肥施用量大，生产成本高且化肥会造成环境的不断恶化。因此，微生物费用的综合利用显示了它在农业领域的应用优势和非常良好的应用前景。

微生物肥料适用对象广，可应用的作物一般包括各种豆科作物、粮食作物、经济作物、蔬菜瓜果。

土壤中磷的包括有机态和无机态两种形式，有机磷约占土壤全磷的1/3～1/2，主要以核酸、磷脂和植素形态存在。无机磷约占全磷的40％-75％，除少量可溶性磷盐外，大部分为不溶性磷盐，这些形态的无机磷化物很难被植物利用，根据现有技术提示，土壤中能被植物直接吸收利用的有效态磷仅占全磷的2％-3％。

发明内容

本发明提供一种高磷缓释菌肥及其制法，其利用生物解磷菌肥将土壤中被固定的难溶磷转化为能够被植株利用的有效磷，提高土壤中磷肥的利用率，可提高磷肥利用率，减少土壤中磷肥施入量；另外，本发明通过菌和菌复合，可以提高有效活菌数，降低杂菌率。

本发明具体采用的技术方案是：

一种高磷缓释菌肥，本质上是将胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和白腐真菌的菌液与腐植酸或/和禽畜粪便吸附搅拌后，通过造粒、干燥制得菌肥颗粒，其特征是，混合菌液中活菌数为2-50×10⁸CFU/g，杂菌率≤10％。

其中，所述白腐真菌White-rot fungi，保藏编号：CICC40299，保藏单位：中国工业微生物菌种保藏中心。

其中，所述胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌是市售菌株，例如以市售斜面培养物形式。

本发明创造性的将白腐真菌与解磷菌(胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌)进行复配，其优点是：1)它配合分解载体或土壤中的例如木素等成分，为解磷菌提供充足养分，从而使其更快称为优势菌种，降低杂菌分数；2)前期白腐真菌比其他杂菌更有生长优势。

根据相关国家标准，复配菌肥杂菌分数低于15％即为符合国家标准，而本发明的杂菌分数明显低于国家标准。

一种高磷缓释菌肥的制法，其特征是，包括如下步骤：

1)巨大芽孢杆菌菌液制备：

1.1)配置培养基，所述的培养基各组分的组成是：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，琼脂15.0g，MnSO₄·H₂O 5mg，蒸馏水1.0L；

1.2)培养条件：pH7.0、培养温度：30℃；

1.3)通过一级斜面培养、二级克氏瓶培养、三级发酵培养，得巨大芽孢杆菌菌液，备用；

2)混合菌液制备：

2.1)配置培养基，所述的培养基各组分的组成是：葡萄糖20-50g，琼脂20-50g，硫酸锰0.01～0.05g，氯化钠0.01～0.05g，对氨基苯甲酸0.8～1.2g，蒸馏水1000g；

2.2)取培养基30～50ml，加入培养皿，然后进行灭菌处理；

2.3)取胶质芽孢杆菌和白腐真菌的菌株，混合置于培养皿中，在10～40℃下恒温培养24～72h，待培养液发生浑浊时，用无菌吸管吸取1～3ml，置于另外一个培养皿中；

2.4)重复步骤2.3)4～7次，得到目的菌占绝对优势的微生物混合培养物；

2.5)微生物扩大培养，得混合菌悬浮液；

3)载体制备：

3.1)腐殖酸或/和禽畜粪便干燥，粉碎，然后过150-200目筛；

3.2)按照加入高岭土粉、云母粉或钾长石粉，混合均匀，高岭土粉、云母粉或钾长石粉添加量为腐殖酸或/和禽畜粪便重量的1/8-1/6；

4)取步骤3)的载体100Kg，加入巨大芽孢杆菌菌液制备2.5～5Kg，混合菌液5～10Kg，搅拌均匀，造粒、烘干、包装得菌肥。

其中，高岭土粉、云母粉或钾长石粉的粒度为300-1000目。

本发明的优点是：

1)本发明对作物叶绿素质量分数和根系活力，经申请人试验，最高可提升叶绿素质量分数20％；

2)本发明可有效地将土壤中被固定的磷释放出来成为有效磷而被植株更好地利用；

3)本发明能够提高作物果实的产量，具申请人测算，在某些作物施用，能够增产15-21％。

具体实施方式

1，菌株来源：

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，来源于中国科学院大学，其菌株说明书记载：该巨大芽孢杆菌特征特性：革兰氏阳性，接触酶阳性，生长在葡萄糖洋菜上的细胞含有复红不着色的小球，7％NaCl中生长，在沙氏葡萄糖培养液或洋菜中生长，水解淀粉和酪素。在培养基上生长丰富、不扩展、有光泽；生长后期一般带黄色；长时间培养，生长物和培养基可变成褐色或黑色。酪素消解迅速，同化硝酸盐，但在培养基中不积累亚硝酸盐。

该菌株16SrDNA序列GenBank号HM776218。

胶质芽孢杆菌采购自北纳生物公司。

其说明书记载：种属Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 1998

分离基物：油松土壤

白腐真菌采购自上海一研生物。

2，施肥对照试验

1)茄子品种为‘布利塔’长茄；

2)试验土壤理化性质：pH为6.59，容重为0.99g·cm^-1，总孔隙度为54.03％，碱解氮(N)197.87mg·kg^-1，有效磷(P₂O₅)174.10mg·kg^-1，速效钾(K₂O)314.26mg·kg^-1。

3)栽培方法：温室播种育苗，苗期正常管理；选择幼苗形态基本一致的5片真叶期的健壮植株定植于大棚中。采取垄作，平均株行距为30cm×60cm，每小区定植40株，其中20株用于生长过程中相关指标的测定；

4)施肥量取四个水平，即：不施加本发明的菌肥(对照试验)、0.5Kg/亩(试验一)、1Kg/亩(试验二)、2Kg/亩(试验三)。在试验过程中，在初花期、结果盛期和采收末期，分别检测叶片中叶绿素质量分数、植株的根系活力数据取平均值。在结果盛期测定植株根系周围土壤中的有效磷质量分数。

5)叶绿素质量分数、根系活力试验

	叶绿素，mg.g<sup>-1</sup>	根系活力，μg.g<sup>-1</sup>
			对照试验	7.35±0.03	30.00±1.13
试验一	8.21±0.18	32.46±0.89
			试验二	9.82±0.04	39.28±0.15
试验三	9.73±0.43	39.20±0.19

试验一、二叶绿素质量分数和根系活力显著提高，试验三不再提高，表明磷肥到一定施加量，参数区域稳定。

6)有效磷质量分数

	有效磷质量分数，mg.kg-1
		对照试验	182.00±3.97
试验一	196.30±4.51
		试验二	214.00±4.59
试验三	217.00±3.33

7)产量

对照试验茄子产量平均每株为0.5Kg，试验一为0.61Kg，试验二为0.68Kg，试验三为0.67Kg。

可见，本发明的菌肥明显提高了作物产量。

Claims (5)

1.一种高磷缓释菌肥，本质上是将胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和白腐真菌的菌液与腐植酸或/和禽畜粪便吸附搅拌后，通过造粒、干燥制得菌肥颗粒，其特征是，混合菌液中活菌数为2-50×108CFU/g，杂菌率≤10％。

2.根据权利要求1所述的高磷缓释菌肥，其特征是，所述白腐真菌，保藏编号：CICC40299，保藏单位：中国工业微生物菌种保藏中心。

3.根据权利要求1所述的高磷缓释菌肥，其特征是，所述胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌是市售菌株。

4.一种高磷缓释菌肥的制法，其特征是，包括如下步骤：

1)巨大芽孢杆菌菌液制备：

1.1)配置培养基，所述的培养基各组分的组成是：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，琼脂15.0g，MnSO₄·H₂O 5mg，蒸馏水1.0L；

1.2)培养条件：pH7.0、培养温度：30℃；

1.3)通过一级斜面培养、二级克氏瓶培养、三级发酵培养，得巨大芽孢杆菌菌液，备用；

2)混合菌液制备：

2.1)配置培养基，所述的培养基各组分的组成是：葡萄糖20-50g，琼脂20-50g，硫酸锰0.01～0.05g，氯化钠0.01～0.05g，对氨基苯甲酸0.8～1.2g，蒸馏水1000g；

2.2)取培养基30～50ml，加入培养皿，然后进行灭菌处理；

2.3)取胶质芽孢杆菌和白腐真菌的菌株，混合置于培养皿中，在10～40℃下恒温培养24～72h，待培养液发生浑浊时，用无菌吸管吸取1～3ml，置于另外一个培养皿中；

2.4)重复步骤2.3)4～7次，得到目的菌占绝对优势的微生物混合培养物；

2.5)微生物扩大培养，得混合菌悬浮液；

3)载体制备：

3.1)腐殖酸或/和禽畜粪便干燥，粉碎，然后过150-200目筛；

3.2)按照加入高岭土粉、云母粉或钾长石粉，混合均匀，高岭土粉、云母粉或钾长石粉添加量为腐殖酸或/和禽畜粪便重量的1/8-1/6；

4)取步骤3)的载体100Kg，加入巨大芽孢杆菌菌液制备2.5～5Kg，混合菌液5～10Kg，搅拌均匀，造粒、烘干、包装得菌肥。

5.根据权利要求4所述的高磷缓释菌肥的制法，高岭土粉、云母粉或钾长石粉的粒度为300-1000目。