CN111323281A - 一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 - Google Patents
一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111323281A CN111323281A CN202010250609.XA CN202010250609A CN111323281A CN 111323281 A CN111323281 A CN 111323281A CN 202010250609 A CN202010250609 A CN 202010250609A CN 111323281 A CN111323281 A CN 111323281A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- filter screen
- centrifuge
- excrement
- extracting
- intestinal mucosa
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 title claims abstract description 31
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 title claims abstract description 28
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims abstract description 41
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 41
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims abstract description 28
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 34
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 31
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 abstract description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000010794 food waste Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/40—Concentrating samples
- G01N1/4077—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
- G01N2001/386—Other diluting or mixing processes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/40—Concentrating samples
- G01N1/4077—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids
- G01N2001/4083—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids sedimentation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/40—Concentrating samples
- G01N1/4077—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids
- G01N2001/4088—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids filtration
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明公开了一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法，包括粪便采集盒，此粪便采集盒包括容器组件和采集组件，容器组件包括盒体和盖设在盒体上的盒盖，采集组件包括一个以上的滤珠和滤网，滤网安装在盒体中，滤珠放置在滤网上，此种粪便脱落肠粘膜样品提取方法包括如下步骤：采集粪便装入粪便采集盒，在粪便采集盒中加入中性固定液，将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀；将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中，震荡后收集过滤液装入离心瓶；对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀，本方法提供了确切的粪便中提取肠道黏膜的方法，提高后续分子检测结果准确性，排除了由于样品中黏膜量不足或者质量不佳导致的检测误差。
Description
技术领域
本发明涉及粪便取样的技术领域，尤其涉及一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法。
背景技术
探索适合大肠肿瘤的筛查方法是一个亟待解决问题，目前使用分子标记进行大肠癌的筛查是一个研究热点，但是在进行粪便黏膜收集过程中，由于粪便中成分复杂，收集的黏膜由于含有大量杂质或者收集的样本中根本没有肠黏膜，因此使检测中出现“假阴性”结果，导致患者漏诊而延误诊断。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述现有进行粪便黏膜收集过程中存在的由于粪便中成分复杂，收集的黏膜由于含有大量杂质或者收集的样本中根本没有肠黏膜的问题，提出了本发明。
因此，本发明目的是提供一种用于粪便脱落肠粘膜样品提取的粪便采集盒及提取方法，其提供了确切的粪便中提取肠道黏膜的方法，提高后续分子检测结果准确性，排除了由于样品中黏膜量不足或者质量不佳导致的检测误差。
为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：此种粪便脱落肠粘膜样品提取方法包括如下步骤：
采集粪便装入粪便采集盒，在粪便采集盒中加入中性固定液，将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀；
将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中，震荡后收集过滤液装入离心瓶；
对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：所述粪便采集盒中安装有若干层用于过滤的过滤网。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：所述过滤网上均放置有若干用于挤压粪便的瓷珠。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：装入粪便采集盒的粪便为1～150g，加入粪便采集盒的中性固定液为300～750ml。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：所述粪便采集盒在震荡器中以150rpm的振动频率震荡20min，震荡后收集粪便采集盒中的过滤液装入离心瓶。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：收集装入离心瓶的过滤液为250ml。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：对离心瓶中的过滤液离心四次后获取最终沉淀。
作为本发明所述粪便脱落肠粘膜样品提取方法的一种优选方案，其中：对离心瓶中的过滤液的过滤方法如下：
将装有250ml过滤液的离心瓶放入离心机，在4℃、4000rpm条件下离心 20min，保留50ml上清液弃掉其余上清液，用移液器轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至50ml离心管中；将50ml离心管放入离心机，在4℃、 5000rpm条件下离心20min，保留20ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至20ml离心管中；将20ml离心管放入离心机，在4℃、5000rpm条件下离心20min，保留5ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至5ml离心管中；将5ml离心管放入离心机，在4℃、12000rpm条件下离心1min，弃掉所有上清液，获取最终沉淀。
一种用于粪便脱落肠粘膜样品提取的粪便采集盒，包括：容器组件和采集组件，所述容器组件包括盒体和盖设在盒体上的盒盖，所述采集组件包括一个以上的滤珠和滤网，所述滤网包括上层滤网、中层滤网和下层滤网，所述上层滤网、中层滤网和下层滤网在盒体内从上至下依次设置，且所述上层滤网为150 目，所述中层滤网为200目，所述下层滤网为300目，所述滤珠放置在上层滤网、中层滤网和下层滤网上。
作为本发明所述粪便采集盒的一种优选方案，其中：所述滤珠的直径为 2～8mm，且滤珠的重量为0.5～0.7g，上层滤网上有5～50颗滤珠，中层滤网和下层滤网上均有5～10颗滤珠。
本发明的有益效果：本方法提供了确切的粪便中提取肠道黏膜的方法，提高后续分子检测结果准确性，排除了由于样品中黏膜量不足或者质量不佳导致的检测误差。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为本发明中粪便采集盒的整体结构示意图。
图2为本发明中粪便采集盒的剖视结构示意图。
图3为本发明粪便采集盒中排液口及排液阀的结构示意图。
图4为本发明中粪便采集盒的主视结构示意图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
再其次，本发明结合示意图进行详细描述，在详述本发明实施例时，为便于说明，表示器件结构的剖面图会不依一般比例作局部放大，而且所述示意图只是示例，其在此不应限制本发明保护的范围。此外，在实际制作中应包含长度、宽度及深度的三维空间尺寸。
实施例1
参照图1，为本发明第一个实施例，提供了一种用于粪便脱落肠粘膜样品提取的粪便采集盒及提取方法，本发明的粪便采集盒包括容器组件和采集组件，容器组件100包括盒体101和盖设在盒体101上的盒盖102。采集组件200 包括一个以上的滤珠201和滤网202，滤网202包括上层滤网202a、中层滤网 202b和下层滤网202c，上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c在盒体 101内从上至下依次设置，且上层滤网202a为150目，中层滤网202b为200 目，下层滤网202c为300目，滤珠201放置在上层滤网202a、中层滤网202b 和下层滤网202c上。本发明中，上层滤网201、中层滤网202和下层滤网203 均为不锈钢制造。本发明中，滤珠201的直径为2～8mm，且滤珠201的重量为 0.5～0.7g，上层滤网202a上有30颗滤珠201，中层滤网202b和下层滤网202c 上均有5～50颗滤珠201。上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c上均含有5～30颗滤珠201，滤珠201的直径大于上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c的孔径。本发明中加入了滤珠201，滤珠201的目的首先是为了使其互相碰撞，达到挤压粪便目的，其次滤珠201撞击滤网202可以防止滤网堵塞。本发明的盒体101的侧壁上开设有排液口101a，排液口101a上安装有排液阀101b，排液口101a的内壁开设有内螺纹，排液阀101b的外壁开设有外螺纹。排液阀101b用于打开或关闭排液口101a，打开排液口101a时，把滤液排出盒体101。
此种粪便脱落肠粘膜样品提取方法包括如下步骤：
采集粪便装入粪便采集盒，在粪便采集盒中加入中性固定液，中性固定液可采用生理盐水或者PBS溶液，将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀。
将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中，震荡后收集过滤液装入离心瓶；
对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀。
基于上述步骤，具体的，采集粪便后将粪便采集盒在震荡器中以150rpm的振动频率震荡20min，震荡后收集粪便采集盒中的250ml过滤液装入离心瓶，对离心瓶中的过滤液离心四次后获取最终沉淀，具体的过滤方法如下：
将装有250ml过滤液的离心瓶放入离心机，在4℃、4000rpm条件下离心 20min，保留50ml上清液弃掉其余上清液，用移液器轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至50ml离心管中；将50ml离心管放入离心机，在4℃、 5000rpm条件下离心20min，保留20ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至20ml离心管中；将20ml离心管放入离心机，在4℃、5000rpm条件下离心20min，保留5ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至5ml离心管中；将5ml离心管放入离心机，在4℃、12000rpm条件下离心1min，弃掉所有上清液，获取最终沉淀。
粪便中成分非常复杂，有食物残渣、肠道细菌、肠道黏膜等等，而肠道黏膜含量较少，在分离过程中可能会丢失，导致最后的提取物中没有黏膜；在第一次过滤后，经过离心后会将液体分为三层，第一层上清和第三层沉渣，肠黏膜位于第二层，我们首先倒掉部分上清后，把需要的黏膜通过移液器吹入上清液中取出，然后再进行三次洗涤、离心，提取出高质量的黏膜；为了保证获取黏膜的质量，最终获取的沉淀石蜡包埋和HE染色，确保进行检测的样品中含有待测黏膜。
实施例2
为本发明的第二个实施例，该实施例不同于第一个实施例的是：粪便采集盒的盒体101底部放置有活性炭包300。
具体的，本发明的粪便采集盒包括容器组件和采集组件，容器组件100包括盒体101和盖设在盒体101上的盒盖102。采集组件200包括一个以上的滤珠201和滤网202，滤网202包括上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c，上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c在盒体101内从上至下依次设置，且上层滤网202a为150目，中层滤网202b为200目，下层滤网202c为300 目，滤珠201放置在上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c上。本发明中，上层滤网201、中层滤网202和下层滤网203均为不锈钢制造。本发明中，滤珠201的直径为2～8mm，且滤珠201的重量为0.5～0.7g，上层滤网202a 上有30颗滤珠201，中层滤网202b和下层滤网202c上均有5～50颗滤珠201。上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c上均含有5～30颗滤珠201，滤珠201的直径大于上层滤网202a、中层滤网202b和下层滤网202c的孔径。本发明中加入了滤珠201，滤珠201的目的首先是为了使其互相碰撞，达到挤压粪便目的，其次滤珠201撞击滤网202可以防止滤网堵塞。本发明的盒体101 的侧壁上开设有排液口101a，排液口101a上安装有排液阀101b，排液口101a 的内壁开设有内螺纹，排液阀101b的外壁开设有外螺纹。排液阀101b用于打开或关闭排液口101a，打开排液口101a时，把滤液排出盒体101。
本发明中，盒体101底部放置有活性炭包300，且活性炭包300的质量为 2～30g，本实施例中，活性炭包300为10g。活性炭包300主要是为了吸附粪便中的色素和异味，本发明不限于采用活性炭包300。
此种粪便脱落肠粘膜样品提取方法包括如下步骤：
采集粪便装入粪便采集盒，在粪便采集盒中加入中性固定液，中性固定液可采用生理盐水或者PBS溶液，将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀。
将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中，震荡后收集过滤液装入离心瓶；
对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀。
基于上述步骤，具体的，采集粪便后将粪便采集盒在震荡器中以150rpm的振动频率震荡20min，震荡后收集粪便采集盒中的250ml过滤液装入离心瓶，对离心瓶中的过滤液离心四次后获取最终沉淀，具体的过滤方法如下：
将装有250ml过滤液的离心瓶放入离心机，在4℃、4000rpm条件下离心20min，保留50ml上清液弃掉其余上清液，用移液器轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至50ml离心管中；将50ml离心管放入离心机，在4℃、 5000rpm条件下离心20min，保留20ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至20ml离心管中；将20ml离心管放入离心机，在4℃、5000rpm条件下离心20min，保留5ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至5ml离心管中；将5ml离心管放入离心机，在4℃、12000rpm条件下离心1min，弃掉所有上清液，获取最终沉淀。
采用本专利方法进行粪便脱落肠粘膜样品的提取，加入粪便采集盒的中性固定液为500ml，且本实施例中中性固定液采用生理盐水。
结果见表1，从表1中可以看出，粪便重量在100g以下时，粪液收集量在 60％-80％，粪便重量超过100g后，粪液收集的量变少。粪便重量在50-100g之间时，DNA的OD值较好，在1.6-1.8之间，定量在3.2-56ug/ml之间。
表1：粪便量和最终获取的提取液的量
在本试验中，首先我们验证了通过中性固定液淘洗收集的最终提取液的量，发现如果粪便超过100g，这样收集的最终提取液反倒少于粪便量低于100g 的最终提取液，可能原因是当粪便量超过100g后加入500ml中性固定液其洗涤效率可能降低，需要增加中性固定液的量以达到充分洗涤的目的。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：包括如下步骤：
采集粪便装入粪便采集盒，在粪便采集盒中加入中性固定液，将粪便采集盒中的粪便与中性固定液摇匀；
将加入了粪便的粪便采集盒放置在震荡器中，震荡后收集过滤液装入离心瓶；
对离心瓶中的过滤液进行离心获取沉淀。
2.如权利要求1所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：所述粪便采集盒中安装有若干层用于过滤的过滤网。
3.如权利要求2所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：所述过滤网上均放置有若干用于挤压粪便的瓷珠。
4.如权利要求3所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：装入粪便采集盒的粪便为1～150g，加入粪便采集盒的中性固定液为300～750ml。
5.如权利要求1或4所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：所述粪便采集盒在震荡器中以150rpm的振动频率震荡20min，震荡后收集粪便采集盒中的过滤液装入离心瓶。
6.如权利要求5所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：收集装入离心瓶的过滤液为250ml。
7.如权利要求1或6所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：对离心瓶中的过滤液离心四次后获取最终沉淀。
8.如权利要求7所述的粪便脱落肠粘膜样品提取方法，其特征在于：对离心瓶中的过滤液的过滤方法如下：
将装有250ml过滤液的离心瓶放入离心机，在4℃、4000rpm条件下离心20min，保留50ml上清液弃掉其余上清液，用移液器轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至50ml离心管中；
将50ml离心管放入离心机，在4℃、5000rpm条件下离心20min，保留20ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至20ml离心管中；
将20ml离心管放入离心机，在4℃、5000rpm条件下离心20min，保留5ml上清液弃掉其余上清液，轻轻吹浮沉淀表面，将包含有沉淀的液体移至5ml离心管中；
将5ml离心管放入离心机，在4℃、12000rpm条件下离心1min，弃掉所有上清液，获取最终沉淀。
9.一种基于权利要求1～8任一项所述用于粪便脱落肠粘膜样品提取的粪便采集盒，其特征在于：包括：
容器组件(100)，所述容器组件(100)包括盒体(101)和盖设在盒体(101)上的盒盖(102)；
采集组件(200)，所述采集组件(200)包括一个以上的滤珠(201)和滤网(202)，所述滤网(202)包括上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c)，所述上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c)在盒体(101)内从上至下依次设置，且所述上层滤网(202a)为150目，所述中层滤网(202b)为200目，所述下层滤网(202c)为300目，所述滤珠(201)放置在上层滤网(202a)、中层滤网(202b)和下层滤网(202c)上。
10.如权利要求9所述的粪便采集盒，其特征在于：所述滤珠(201)的直径为2～8mm，且滤珠(201)的重量为0.5～0.7g，上层滤网(202a)上有5～50颗滤珠(201)，中层滤网(202b)和下层滤网(202c)上均有5～30颗滤珠(201)。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010250609.XA CN111323281A (zh) | 2020-04-01 | 2020-04-01 | 一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010250609.XA CN111323281A (zh) | 2020-04-01 | 2020-04-01 | 一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111323281A true CN111323281A (zh) | 2020-06-23 |
Family
ID=71171897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010250609.XA Pending CN111323281A (zh) | 2020-04-01 | 2020-04-01 | 一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111323281A (zh) |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101907526A (zh) * | 2010-05-28 | 2010-12-08 | 金黑鹰 | 肠粘膜收集器 |
| CN204468728U (zh) * | 2015-02-06 | 2015-07-15 | 孙逢美 | 一种手摇式药片粉碎器 |
| CN104807669A (zh) * | 2015-05-21 | 2015-07-29 | 广西壮族自治区疾病预防控制中心 | 一种粪便肝吸虫卵采集分离设备及方法 |
| CN205205136U (zh) * | 2015-10-20 | 2016-05-04 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种粪便处理收集装置 |
| CN105571887A (zh) * | 2014-10-08 | 2016-05-11 | 孙开胜 | 一次性粪便或排泄物标本采集和处理装置 |
| CN107473815A (zh) * | 2017-08-14 | 2017-12-15 | 侯飞燕 | 一种土壤修复工程用化肥结块砂磨机 |
| CN207126780U (zh) * | 2017-08-09 | 2018-03-23 | 王诚 | 一种方便使用的粪便分析筛 |
| CN108812551A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-11-16 | 赤峰市农牧科学研究院 | 一种动物胃肠道线虫幼虫孵化与收集方法 |
| CN108940516A (zh) * | 2018-06-19 | 2018-12-07 | 金寨县金银山农业科技开发有限公司 | 一种药材加工生产用卧式粉碎机 |
-
2020
- 2020-04-01 CN CN202010250609.XA patent/CN111323281A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101907526A (zh) * | 2010-05-28 | 2010-12-08 | 金黑鹰 | 肠粘膜收集器 |
| CN105571887A (zh) * | 2014-10-08 | 2016-05-11 | 孙开胜 | 一次性粪便或排泄物标本采集和处理装置 |
| CN204468728U (zh) * | 2015-02-06 | 2015-07-15 | 孙逢美 | 一种手摇式药片粉碎器 |
| CN104807669A (zh) * | 2015-05-21 | 2015-07-29 | 广西壮族自治区疾病预防控制中心 | 一种粪便肝吸虫卵采集分离设备及方法 |
| CN205205136U (zh) * | 2015-10-20 | 2016-05-04 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种粪便处理收集装置 |
| CN207126780U (zh) * | 2017-08-09 | 2018-03-23 | 王诚 | 一种方便使用的粪便分析筛 |
| CN107473815A (zh) * | 2017-08-14 | 2017-12-15 | 侯飞燕 | 一种土壤修复工程用化肥结块砂磨机 |
| CN108812551A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-11-16 | 赤峰市农牧科学研究院 | 一种动物胃肠道线虫幼虫孵化与收集方法 |
| CN108940516A (zh) * | 2018-06-19 | 2018-12-07 | 金寨县金银山农业科技开发有限公司 | 一种药材加工生产用卧式粉碎机 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 邓超 等: "一种新型大量分布肠黏膜提取方法在结直肠癌筛查中的应用", 《中华胃肠外科杂志》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101312788B (zh) | 处理流体的方法和流体处理装置 | |
| CN111346729A (zh) | 一种海洋微塑料高效分离装置及其分离方法 | |
| CN106124266B (zh) | 一种液基细胞制片方法 | |
| CN1839740A (zh) | 用于真空吸尘器的灰尘分离设备 | |
| CN105624024B (zh) | 腔道内容物中微生物分离装置 | |
| CN206325684U (zh) | 种子浮力分选箱 | |
| CN208016627U (zh) | 一种新型实验动物代谢笼盖 | |
| CN111323281A (zh) | 一种粪便脱落肠粘膜样品提取方法 | |
| CN109365139B (zh) | 一种沉积物中不同赋存状态微塑料的连续浮选方法 | |
| CN216654947U (zh) | 一种土壤或沉积物中微塑料的分离和废液回收装置 | |
| CN215856071U (zh) | 一种用于分离细胞外囊泡的离心管和提取细胞外囊泡的试剂盒 | |
| CN204311058U (zh) | 腔道内容物中微生物分离装置 | |
| CN108176132B (zh) | 活体浮游生物检测用高泥沙水除泥沙、净化系统及相应方法 | |
| US20080145932A1 (en) | Method and apparatus for cell recovery | |
| CN209652314U (zh) | 一种免疫结合与过滤一体的肿瘤细胞吸附装置 | |
| CN203754716U (zh) | 一种细胞分离柱及分离装置 | |
| CN209628418U (zh) | 一种松材线虫快速分离收集的装置 | |
| CN108728432A (zh) | 植物组织中高效提纯病毒双链rna基因组的方法及其应用 | |
| JP3406258B2 (ja) | 緩速濾過装置 | |
| CN109699579A (zh) | 一种松材线虫快速分离收集的装置及方法 | |
| CN114459869A (zh) | 一种海产品中微塑料提取分离装置 | |
| CN2442988Y (zh) | 污水处理混凝沉降罐 | |
| CN210277762U (zh) | 一种消化内科用检查辅助架 | |
| CN208146226U (zh) | 一种化学试剂离心设备 | |
| CN215593059U (zh) | 一种核酸萃取柱装置 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200623 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |