CN203754716U - 一种细胞分离柱及分离装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及一种细胞分离柱及分离装置。一种细胞分离装置，其特征在于，包含细胞分离柱，包含细胞分离柱柱体，所述细胞分离柱柱体为空心圆柱，其下方可拆卸安装有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜，所述上层滤膜的滤孔孔径大于下层滤膜的滤孔孔径，所述细胞分离柱可拆卸安装于废液收集管内，所述废液收集管内部包含分离柱卡口，卡口上还包含导气凹槽，导气凹槽将废液收集管内部与外部空气连通起来。可高效分离纯化性犯罪案件检材中的男性精细胞核与其他女性上皮细胞成分；废液收集管使精细胞核分离过程中废弃液处理问题得到人性化解决。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种精细胞核与上皮细胞成分的分离装置，尤其适用于法医实验室中分离性犯罪案件检材的男性和女性成分，具体是一种细胞分离柱及分离装置。
背景技术
性犯罪案件中有多种方法可以直接获得精细胞。一种是采用物理方法将犯罪者的精子细胞从受害人的上皮细胞中分离出来。用精子蛋白特异性抗体包被的磁粒或磁珠收集精子细胞(Marshall，2002)，然后洗去珠子上的女性上皮细胞。最后，纯化的精子进行DNA分型分析。这种方法适用于未被处理过的精子，不适用于放置时间较长的性犯罪案件检材。
另一种方法是临床上众所周知的激光捕获显微操作仪选择性捕获精子，
这种显微操作仪通常用于显微镜下分离肿瘤细胞和周围的正常组织。涂在载玻片上的性犯罪案件的精子细胞可被激光捕获显微操作仪收集，进行STR检测(Elliotet al.，2003)。当用显微镜观察精子细胞时，一小束激光被激活，蒙在载玻片上的塑料薄膜在特定的激光点熔化，这样就可以将目标细胞捕获。翻转载玻片后，精子细胞就这样被正上方的薄膜收集。收集膜随后被转移到管中并用于DNA提取和PCR扩增(法医DNA分型：STR遗传标记的生物学、方法学及遗传学侯一平，刘雅诚译)。但这种方法需要特定的仪器与专业的技术人员以及复杂的操作过程。
在法医实验室中广泛用于分离性犯罪案件检材的男性和女性成分的方法是差异分离法。差异分离法最早见于1985年(Gill et al.，1985)，这种分离方法的过程包括在样本中首先加入SDS、蛋白酶K的混合物，孵育破坏女性上皮细胞，随后用含SDS、蛋白酶K以及DTT的混合物裂解精细胞核。DTT可以破坏组成精子核膜蛋白的二硫键(Gill et al.，1985)。差异分离法的原理是没有DTT时精子细胞核不能被消化。但该方法在传统的操作过程中或多或少会存在样本的损失，对于精子含量较少的样本则存在着较高的局限性。
发明内容
为了克服现有方法在操作性和高效便捷上的不足，本实用新型提供一种细胞分离柱，该柱不仅能高效的分离检材中女性细胞成分和男性精细胞核，而且对于样本中的男性精细胞核有富集作用，有极低的样本损失。同时能去除样本中较大的细胞碎片以及分子量较小的杂质。
本实用新型发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
方案1：
一种细胞分离柱，其特征在于，包含细胞分离柱柱体，所述细胞分离柱柱体为空心圆柱，其下方可拆卸安装有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜，所述上层滤膜的滤孔孔径大于下层滤膜的滤孔孔径。
本实用新型进一步技术方案在于，所述上层滤膜与下层滤膜位于滤膜固定装置上，滤膜固定装置和细胞分离柱柱体螺纹连接，所述滤膜固定装置和细胞分离柱柱体的连接处还包含O形密封圈。
本实用新型进一步技术方案在于，所述滤膜固定装置的底部包含支撑底面，所述支撑底面上包含非也流出孔。
本实用新型进一步技术方案在于，所述所述上层滤膜与下层滤膜均可拆卸安装于滤膜固定装置上。
本实用新型进一步技术方案在于，所述Ｏ形密封圈外径小于滤膜固定装置内径。
方案2：
一种细胞分离装置，其特征在于，包含细胞分离柱，包含细胞分离柱柱体，所述细胞分离柱柱体为空心圆柱，其下方可拆卸安装有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜，所述上层滤膜的滤孔孔径大于下层滤膜的滤孔孔径，所述细胞分离柱可拆卸安装于废液收集管内，所述废液收集管内部包含分离柱卡口，卡口上还包含导气凹槽，导气凹槽将废液收集管内部与外部空气连通起来。
本实用新型进一步技术方案在于，所述细胞分离柱上方有凸台，所述废液收集管内部上方有能与凸台契合的安装凹口。
本实用新型进一步技术方案在于，所述废液收集管下方为倒圆台形。
本发明的优点在于：
1.可高效分离纯化性犯罪案件检材中的男性精细胞核与其他女性上皮细胞成分；
2.独特的可拆卸滤膜固定装置，方便样本的后处理；
3.独有的双层过滤分离设计，有效地分离大小碎片及杂质；
4.滤过式设计使得样本中男性DNA损失更少，女性成分去除更完全；
5.过滤的浓缩效应使本发明适用于精细胞含量少而女性细胞成分多的检材；
6.废液收集管使精细胞核分离过程中废弃液处理问题得到人性化解决。
附图说明
图1是本实用新型细胞分离柱废液收集管的主视图；
图2是本实用新型分离柱柱体的主视图；
图3是本实用新型分离柱滤膜固定装置的主视图；
图4是本实用新型分离柱滤膜固定装置的俯视图；
图5是本实用新型分离柱柱体与滤膜固定装置及O形密封圈、上下层滤膜组合的主视图；
图6是本实用新型分离柱组合的主视图；
附图中标号说明：
1.废液收集管，2.分离柱柱体，3.滤膜固定装置，4.Ｏ形密封圈，5.上层滤膜，6.下层滤膜，1-1.分离柱卡口，1-2.导气凹槽。
具体实施方式
请参阅图1本实用新型细胞分离柱废液收集管的主视图，开模具制作塑料材质的废液收集管1，废液收集管1下半部为倒圆台形，上端开口。
请参阅图2本实用新型细胞分离柱分离柱柱体的主视图，开模具制作塑料材质的分离柱柱体2。
请参阅图3与图4本实用新型分离柱滤膜固定装置的主视图与俯视图，开模具制作塑料材质的滤膜固定装置3，该装置内螺纹应与分离柱柱体2下部外螺纹紧密接合。
请参阅图5组合本实用新型发明分离柱柱体2与滤膜固定装置3及Ｏ形密封圈4、上层滤膜5、下层滤膜6。上层滤膜5孔径应大于下层滤膜6孔径，下层滤膜6孔径应小于精细胞核直径。
请参阅图6本实用新型发明分离柱组合后其下部外径应略小于废液收集管1的内径但能卡在分离柱卡口1-1上。分离柱凸阶以下高度应等于废液收集管1上的分离柱卡口1-1上缘至废液收集管1管口的高度。
基于分子筛原理的离心过滤与差异分离方法的组合。
为了有效分离纯化精细胞核，滤膜固定装置上固定放置二层孔径不同的滤膜，较大孔径的滤膜位于上层，用于过滤较大的细胞碎片及杂质；孔径较小的滤膜位于下层，用于收集和吸附精细胞核和滤过较小的杂质。
为了方便取出吸附精细胞核的滤膜，分离柱底部滤膜固定装置采用螺口设计，可以方便地取出滤膜进行下一步实验。
为了方便分离柱在离心后取出，在废液收集管中部设有分离柱卡口，与分离柱上的滤膜固定装置相匹配。且在卡口处设有导气凹槽，方便离心时滤出液进入废液收集管。
为了分离过程中没有废液溢出废液收集管，分离柱上端有一凸阶，与废液收集管上方开口相匹配。另外滤膜固定装置与分离柱柱体连接处有O形密封圈密封。
包括分离柱、废液收集管，废液收集管套在分离柱外侧，分离柱底部具有滤膜固定装置，其特征在于：置于废液收集管内的分离柱上可拆卸滤膜固定装置固定有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜。分离柱底部具有可拆卸的滤膜固定装置以及上层滤膜与下层滤膜。所述滤膜固定装置，其特征在于：与分离柱柱体以螺口接合，配合O形密封圈与上下层滤膜在离心过滤过程中有良好的密封性与滤过性。所述滤膜固定装置，其特征在于：底部不是中空，具有孔状结构用于支撑滤膜同时保证废液流出。所述上层滤膜与下层滤膜，其特征在于：两层滤膜具有不同孔径，较大孔径的滤膜位于较小孔径滤膜的上方，下层滤膜孔径略小于精细胞核直径。分离柱柱体与滤膜固定装置可通过手工分离并取出滤膜。O形密封圈外径小于滤膜固定装置内径，表面光滑可以与滤膜固定装置和分离柱柱体以及上下层滤膜紧密接合。废液收集管中部有一个用于阻止分离柱在离心过程中塞紧的卡口，卡口上有利于离心过程中空气流出的导气凹槽。所述细胞分离柱，其特征在于分离柱上部有一个凸阶，与废液收集管相匹配。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本领域的技术人员应该了解本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的范围内。
Claims (8)
1.一种细胞分离柱，其特征在于，包含细胞分离柱柱体，所述细胞分离柱柱体为空心圆柱，其下方可拆卸安装有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜，所述上层滤膜的滤孔孔径大于下层滤膜的滤孔孔径。
2.如权利要求1所述的一种细胞分离柱，其特征在于，所述上层滤膜与下层滤膜位于滤膜固定装置上，滤膜固定装置和细胞分离柱柱体螺纹连接，所述滤膜固定装置和细胞分离柱柱体的连接处还包含O形密封圈。
3.如权利要求2所述的一种细胞分离柱，其特征在于，所述滤膜固定装置的底部包含支撑底面，所述支撑底面上包含非也流出孔。
4.如权利要求2所述的一种细胞分离柱，其特征在于，所述所述上层滤膜与下层滤膜均可拆卸安装于滤膜固定装置上。
5.如权利要求2所述的一种细胞分离柱，其特征在于，所述O形密封圈外径小于滤膜固定装置内径。
6.一种细胞分离装置，其特征在于，包含细胞分离柱，包含细胞分离柱柱体，所述细胞分离柱柱体为空心圆柱，其下方可拆卸安装有用于分离纯化精细胞核的上层滤膜与下层滤膜，所述上层滤膜的滤孔孔径大于下层滤膜的滤孔孔径，所述细胞分离柱可拆卸安装于废液收集管内，所述废液收集管内部包含分离柱卡口，卡口上还包含导气凹槽，导气凹槽将废液收集管内部与外部空气连通起来。
7.如权利要求6所述的一种细胞分离装置，其特征在于，所述细胞分离柱上方有凸台，所述废液收集管内部上方有能与凸台契合的安装凹口。
8.如权利要求6所述的一种细胞分离装置，其特征在于，所述废液收集管下方为倒圆台形。
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| CN106124282A (zh) * | 2016-07-26 | 2016-11-16 | 广州海力特生物科技有限公司 | 一种叠层离心过滤分离提取外泌体的方法 |
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