CN111316899B - 一种金铁锁水培快速生根成苗方法 - Google Patents

Abstract

一种金铁锁水培快速生根成苗方法，该方法包括选取两年生金铁锁在种子采收期所有种子采收完后，取其绿色带叶的5～8cm长的茎段，每个茎段保留3对芽点和3对叶，多菌灵消毒处理后，人工气候箱条件下，水培生根培养液中培养，水培生根培养液为浓度0.5～1ppm的IBA溶液，人工气候箱设置的培养条件为：①温度22℃，湿度60％，光照强度15000lx，16h；②温度16℃，湿度60％，光照强度0lx，8h。该方法具有生根快速、根系量大、健壮，成苗率高，成本低的优点，解决了金铁锁种子育苗存在的出苗势较差、出苗期长、成苗率底等问题，为今后金铁锁的产业化快速繁殖提供了技术支撑。

Description

一种金铁锁水培快速生根成苗方法

技术领域

本发明属于药用植物繁育技术领域，具体涉及金铁锁水培快速生根成苗方法。

背景技术

金铁锁(Psammosilene tunicoides)为石竹科单种属多年生草本植物，又名独定子、昆明沙参、蜈蚣七、对叶七、金丝矮陀陀等。金铁锁具有重要的药用价值，民间以其干燥根入药，具有散瘀、止痛、祛风湿、消炎等功效，主治跌打损伤、风湿痛、胃痛、创伤出血、痈疽疮疥等；现作为云南白药、金骨莲胶囊、百宝丹、痛血康胶囊等多种中成药的原药材。金铁锁野生资源分布区域狭窄及数量少，加之人为大量的采挖而导致野生资源分布数量急剧的减少，目前已被列为国家二级保护植物。为满足金铁锁药材市场的需求，人工栽培已成为金铁锁扩大市场需求量的必经之路。

目前，金铁锁人工栽培繁殖方式主要为种子繁殖，金铁锁种子采收期通常在每年9月。但金铁锁的种子繁殖主要存在以下问题：一是，因金铁锁的花序为无限花序，存在种子成熟期不同的问题，以至于每粒种子的成熟度不一致，且人们在采收种子期间多数未能做到分期采收，导致其中有些种子为瘪粒，整体降低了金铁锁种子的质量及出苗率；二是，种子播种后出苗势较差，出苗期长达一个月，出苗不整齐。三是，金铁锁是多年生植物，种子成熟后易脱落，每年都有种子掉在田间自然发芽出苗，导致田间金铁锁根茎商品年限不确定。因此，若能找到一种替代种子育苗的方法，既能起到节约金铁锁繁殖材料、又能保证成苗率，将此方法在生产上加以广泛应用，必能起到事半功倍的效果。有关金铁锁组培生根成苗的方法报道也相对较多，但也存在周期长、成本高的缺陷。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种金铁锁水培快速生根成苗方法，以达到金铁锁快速生根成苗、在保证成苗率的基础上节约金铁锁栽培材料的目的。

本发明所提供的一种金铁锁水培快速生根成苗方法，包括：选取适宜的金铁锁茎段，将其在多菌灵溶液中浸泡消毒处理后，插入盛有水培生根培养液的敞口容器中，将敞口容器置于在人工气候箱内培养至金铁锁茎段生根。

所述适宜的金铁锁茎段为选择两年生金铁锁在其种子采收期所有种子采收完后，取其绿色带叶枝茎，切成长5～8cm的茎段，每个茎段保留3对芽点和3对叶。

将切好的茎段放入50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液中浸泡1～2小时，进行消毒处理。

所述水培生根培养液为浓度0.5～1ppm的IBA溶液。

优选地，所述水培生根培养液为浓度1ppm的IBA溶液。

人工气候箱的培养条件设置为：①温度22℃，湿度60％，光照强度15000lx，16h；②温度16℃，湿度60％，光照强度0lx，8h。

优选地，敞口容器内放置有带孔的泡沫板漂浮在水培生根培养液上，消毒后的茎段插入泡沫板的孔内。

优选地，茎段下部插入水培生根培养液中的长度为0.3～1.0cm。

优选地，每7天更换一次水培生根培养液。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明方法具有生根快速、根系量大、健壮，繁殖材料易得，操作简便，生根率高，成苗率高，成本低，移栽时对根系损伤小等优势。

本发明方法可以使金铁锁繁殖材料不受季节限制地进行循环水培生根，提高了金铁锁人工繁殖的效率，适宜在大规模的生产中应用，从而满足金铁锁市场的需求。

采用本发明方法。其生根率达95％，成苗率80％以上，与组培生根方法相比，本发明的生根率提高5.56％；组培生根方法培养条件要求苛刻，需在无菌条件下，使用试剂多，成本高，而本发明方法简便，仅需要一种IBA溶液，在简单的人工培养箱培养即可，大幅度降低了生根培养成本。

本发明方法培育的生根苗根系健壮、每株苗根系量大，种苗适应性强，与种子直播和组培生根法相比，本发明培育的生根苗的成苗率达到最高，其成苗率比组培生根法的成苗率提高28.18％，比种子直播的成苗率提高130.57％。

具体实施方式

以下结合实施例进一步说明本发明的实质性内容。

实施例1

(1)选取不同时期的茎段作为试验材料：①一年生金铁锁在种子采收期所有种子采收完后，取其5～8cm的绿色带叶茎段(简称：一年生茎段)；②两年生金铁锁在种子采收期所有种子采收完后，取其5～8cm的绿色带叶茎段；③两年生金铁锁在营养生长期的5～8cm的绿色带叶茎段(简称：两年生幼嫩茎)。

(2)50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液消毒的浸泡茎段时间：①0.5小时；②1小时；③1.5小时；④2小时。

实验结果表明：

(1)“一年生茎段”和“两年生幼嫩茎”在50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液浸泡1～2小时，茎段下端易腐烂，而两年生金铁锁在种子采收期所有种子采收完后，取其5～8cm的绿色带叶茎段无此现象，因此，宜选取两年生金铁锁在种子采收期所有种子采收完后的绿色带叶茎段作为金铁锁水培生根材料。

(2)50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液消毒的浸泡时间1～2小时的茎段被霉菌等侵染率低，因此，浸泡时间以1～2小时为宜。

实施例2

一、材料与方法

(1)选择两年生金铁锁在其种子采收期的所有种子采收完后，取其茎长10cm以上的绿色带叶枝茎，再切成：①长5～8cm的茎段，每个茎段保留3对芽点和3对叶；②长5～8cm的茎段，每个茎段保留3对芽点，无叶；③长2～2.5cm的茎段，每个茎段保留1对芽点和1对叶；④长2～2.5cm的茎段，每个茎段保留1对芽点，无叶。每种茎段120个。

(2)将切好的各个规格的茎段分别放入50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液中浸泡1小时消毒后(整个茎段包括茎段上的叶和芽全部淹没在所述的多菌灵溶液中)；将每种茎段分为40个的3份，分别插入放有不同浓度的水培生根培养液的培养槽中，所述水培生根培养液为IBA溶液(吲哚丁酸溶液)，其浓度分别为：0.1ppm、0.5ppm、1ppm；培养槽中放置有带孔的泡沫板漂浮在水培生根培养液上，茎段下切口浸泡入水培生根培养液中的长度为0.5cm；最后将插有茎段的培养槽放入人工气候箱中进行生根培养，人工气候箱的培养条件设置为：①温度22℃，湿度60％，光照强度15000lx，16h；②温度16℃，湿度60％，光照强度0lx，8h。当根系长到2～3cm后按常规移栽到苗盘基质中在温室大棚进行统一管理并观察记录成活率，所述苗盘基质为草炭土与珍珠岩按草炭土∶珍珠岩体积比＝5:1混合。定期观察生根情况并每7天更换一次水培生根培养液。

20天后出现大量的根系，注意有些叶腋处会长出花枝或营养枝，应及时掐断掉以促进生根。

水培生根培养液的制备：(1)IBA母液(0.2mg/ml)500ml的制备：用分析天平称取吲哚丁酸100mg，用少量酒精溶解，完全溶解后加蒸馏水定容于500ml的容量瓶中，充分摇匀后放入棕色玻璃瓶中于4℃冰箱密封保存待用；(2)试验用IBA溶液(0.1ppm、0.5ppm、1ppm)1000ml的制备：用移液管分别量取IBA母液(0.2mg/ml)0.5ml、2.5ml、5ml放入1000ml的容量瓶中用蒸馏水定容，充分摇匀。

二、结果分析

表1实施例2不同茎段及水培生根液浓度处理对金铁锁生根的原始数据

平均生根数＝∑(各重复生根数/各重复生根茎段数)/重复数3。如处理3：平均生根数＝(468/38+420/40+530/36)/3＝12.51(条/茎段)，即处理3：每个生根茎段平均生根12.51条，表明其根系发达、根系量大，有利于成苗。

生根率(％)＝∑(各重复生根茎段数/各重复茎段数)/重复数3×100％。如处理3：生根率(％)＝(38/40+40/40+36/40)/3×100％＝95％。

表2实施例2不同茎段及水培生根液浓度处理对金铁锁生根的影响

通过表1的实验原始数据得到实验结果(表2)可得出，采用所述的3对芽点和3对叶的茎段在1ppm的IBA溶液中生根培养的金铁锁生根率最高。

对以上有实验结果的7个处理(处理1、2、3、5、7、8、9)的生根时间、平均生根数、生根率进行方差分析，结果见下表3。生根时间、平均生根数、生根率的处理间均达极显著性水平。从生根时间来看，处理3的平均生根时间为20d，在P>0.05水平上与其他6个处理呈显著差异，在P>0.01水平上与处理5、7、8、9呈极显著差异；从平均生根数和生根率来看，处理3的平均生根数及生根率分别为12.51条、95％，均在P>0.01水平上与其他各处理呈极显著差异。因此，处理3(带3对芽点和3对叶的茎段用浓度1ppm的IBA溶液生根培养)为最佳的处理方案。

表3实施例2各处理方差分析表

实施例3

将本发明方法与金铁锁常规的种子育苗方法和组培育苗方法作比较：

一、材料与方法

(一)通过采用本发明方法，将长5～8cm、保留3对芽点和3对叶的茎段(120个)放入50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液中浸泡1小时消毒后，插入放有水培生根培养液(1ppm的IBA溶液)的培养槽中，茎段下切口浸泡入培养液中的长度为0.5cm；最后放入人工气候箱：①温度22℃，湿度60％，光照强度15000lx，16h；②温度16℃，湿度60％，光照强度0lx，8h中进行生根培养；定期观察生根情况并每7天更换一次生根培养液。将生根后根长≥2cm的苗移栽于苗盘基质中(苗盘基质同实施例2)在温室大棚进行统一管理，观察其成活率。

(二)种子直播(对照1)，采用常规的田间种子育苗方法(试验设置3次重复，每重复取100粒种子)，观察生根时间及统计成苗率。

(三)组培生根方法(对照2)，金铁锁初期增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L，pH值为5.8，将初期增殖的无菌茎芽剪成带1对腋芽的茎段接入生根培养基(1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L，pH值为5.8)中培养，培养室温度为23℃±2℃、湿度30～40％、光照强度为2000lx、光照时间10h/d，试验设置3次重复，每个重复40个茎段，10天后观察生根情况。将生根后根长≥2cm的苗移栽于苗盘基质中(苗盘基质同实施例2)在温室大棚进行统一管理，观察其成苗率。

二、结果分析

表4实施例3不同育苗方法对金铁锁生根成苗的原始数据

成苗数为生根的茎段移栽后成活的苗数或种子直播后成活的苗数。

本发明方法成苗率(％)＝(总成苗数/总生根的茎段数)×100％。

种子直播法成苗率(％)＝(总成苗数/总播种量)×100％。

组培生根法成苗率(％)＝(总成苗数/总生根的茎段数)×100％。

表5实施例3不同育苗方法对金铁锁生根成苗的影响

本发明方法生根的茎段和组培生根法生根的茎段都移栽。

通过表5对比结果，从生根时间、生根率及成苗率综合分析可得出，采用本发明方法生根速度快，生根率比组培生根方法提高5.56％，组培生根方法培养条件要求苛刻，需在无菌条件下，使用试剂多，成本高，而本发明方法简便，仅需要一种IBA溶液，在平均20天的短时间内，简单的人工培养箱条件即可培养出大量生根苗，大幅度降低了生根培养成本，并且，本发明方法培育的生根苗根系量大、根系发达、健壮，适应性强，因此，成苗率达到最高，其成苗率比组培生根法成苗率提高28.18％，比种子直播的成苗率提高130.57％。

Claims (6)

1.一种金铁锁水培快速生根成苗方法，包括：选取适宜的金铁锁茎段，将其在多菌灵溶液中浸泡消毒处理后，插入盛有水培生根培养液的敞口容器中，将敞口容器置于人工气候箱内培养至金铁锁茎段生根；

所述适宜的金铁锁茎段为选择两年生金铁锁在其种子采收期所有种子采收完后，取其绿色带叶枝茎，切成长5～8cm的茎段，每个茎段保留3对芽点和3对叶；

所述水培生根培养液为浓度0.5～1ppm的IBA溶液；

人工气候箱的培养条件设置为：①温度22℃，湿度60％，光照强度15000lx，16h；②温度16℃，湿度60％，光照强度0lx，8h。

2.根据权利要求1所述的金铁锁水培快速生根成苗方法，其特征在于：将切好的茎段放入50％多菌灵可湿性粉剂1000倍液中浸泡1～2小时，进行消毒处理。

3.根据权利要求1所述的金铁锁水培快速生根成苗方法，其特征在于：所述水培生根培养液为浓度1ppm的IBA溶液。

4.根据权利要求1所述的金铁锁水培快速生根成苗方法，其特征在于：敞口容器内放置有带孔的泡沫板漂浮在水培生根培养液上，消毒后的茎段插入泡沫板的孔内。

5.根据权利要求4所述的金铁锁水培快速生根成苗方法，其特征在于：茎段下部插入水培生根培养液中的长度为0.3～1.0cm。

6.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的金铁锁水培快速生根成苗方法，其特征在于：每7天更换一次水培生根培养液。