CN111246873B - 用于靶向人类神经的优化肽和其在图像引导外科手术、诊断和治疗递送中的用途 - Google Patents

用于靶向人类神经的优化肽和其在图像引导外科手术、诊断和治疗递送中的用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供了用于通过施用特异性结合人类神经元或人类神经的荧光标记肽来指导外科手术期间所述人类神经元或人类神经的保存的方法。本发明进一步提供了包括特异性结合人类神经元或人类神经的荧光标记肽的人类神经元或神经靶向分子和其组合物。

Description

用于靶向人类神经的优化肽和其在图像引导外科手术、诊断 和治疗递送中的用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2018年4月18日提交的美国临时申请第62/659,612号以及于2017年8月2日提交的美国临时申请第62/540,510号的优先权，所述两个申请通过引用以其整体并入本文。
联邦资助的研究或开发中的发明权利声明
本发明是在国立卫生研究院授予的EB008122和EB014929的政府支持下完成的。政府享有本发明的某些权利
背景技术
保存人类神经元和人类神经是任何外科手术中最重要的目标之一，因为神经元或神经的意外横断会导致明显的病态。通常通过细长的发白外观和与附近结构的关系或通过电生理学研究来识别神经。然而，在如创伤、肿瘤受累、炎症或感染等情况下，使用这些标准进行神经识别可能很困难。因此，需要一种可靠且结论性地识别神经元或神经的方法，所述方法克服了本领域的缺陷。
通过肌电图(EMG)监测来实现外科手术期间直接暴露之前对神经元或神经的识别，或者在直接暴露后不确定的情况下确认神经元或神经身份。然而，此技术具有不向手术外科医生提供视觉反馈的缺点。因此，即使通过意外或有目的的刺激已经在一个位置识别出了神经，手术外科医生也没有关于神经距刺激部位多远或神经从刺激部位移走的方向的视觉指导。更进一步，EMG仅追踪运动路径，而不追踪感觉纤维。如果神经元或神经传导或神经肌肉传递在记录部位的远端暂时被阻断，则EMG会失败。由于神经元或神经受压、外伤、局部麻醉剂或神经肌肉阻滞剂，很容易发生此类阻断。
神经元或神经标记主要取决于通过使用荧光染料对单个识别的轴突束的逆行或顺行追踪。然而，通过局部应用荧光示踪剂标记神经元或神经的方法具有几个缺点。首先，此技术一次只能标记一个神经元或神经纤维束，取决于已经注射染料的位置。其次，由于逆行轴突示踪剂通常在神经细胞体内积聚，因此此技术只能沿轴突束对荧光染料进行有限的标记。第三，逆行运输相对较慢(每天约数毫米)，并且因此标记通常长于一米的人类神经元或神经的时间较长，如在坐骨神经元或神经和其分枝的情况下。第四，将荧光染料应用于神经支配靶标，如直接肌肉内注射以标记运动神经元或神经通常会变得混乱，并且在注射部位残留有可变数量的示踪染料。由于神经元或神经的解剖取决于在遇到相邻结构之前对其的精确可视化，因此不希望有被荧光染料污染的外科手术部位。最后，荧光染料本身的直接注射可能会由于机械损伤或注射部位的染料和媒剂的局部浓度过高而损坏靶标器官或目标神经元或神经。
本领域中需要识别能够结合人类神经和神经元的肽，以促进外科手术程序和人类神经保护。
先前通过结合小鼠神经的能力，对神经归巢肽序列进行了识别，以用于实验室研究。然而，通过在向人类患者体内静脉内注射后结合人类神经的能力来识别本申请中描述的肽序列，并且与以前的序列相比，这些肽满足了能够更特异性和有效地结合人类神经的需求。本发明提供了选择性结合人类神经和/或神经元的肽序列，以及在外科手术中使用那些序列的方法，例如在此类过程期间保存神经和/或避免神经损伤。
发明内容
在某些实施例中，本文公开了靶向分子，其包括特异性结合人类神经元、人类神经或任一个的组分的肽。在一些实施例中，所述肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)，和/或其组合。
在一些实施例中，特异性结合人类神经元或神经或任一个的组分的所述人类神经元或神经靶向分子，其中所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)；EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)；PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和/或其组合。
在一些实施例中，靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)和SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ IDNO:1)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ IDNO:3)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQID NO:20)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ IDNO:23)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ IDNO:26)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ IDNO:27)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，所述货物是药物、荧光部分、光敏剂或其组合。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括药物。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的药物：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和/或其组合。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的药物：苯佐卡因；卡替卡因；金鸡卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特和曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；铂丙嗪；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和/或其组合。
在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子进一步包括荧光部分。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的荧光部分：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料，和/或其组合。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的荧光部分：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；稀土金属螯合物；其衍生物和/或其组合。
在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的荧光部分：5-羧基荧光素；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素；5(6)-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚衍生物；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM、荧光素、5,6-二羧基荧光素、5-(和6)-磺基荧光素、砜基荧光素、琥珀酰基荧光素、5-(和6)-羧基SNARF-1、羧基荧光素磺酸盐、羧基荧光素两性离子、羧基荧光素季铵盐、羧基荧光素膦酸酯、羧基荧光素GABA、羧基荧光素半胱氨酸Cy5、5'(6')-羧基荧光素、荧光素谷胱甘肽，和/或其组合。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括光敏剂。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的光敏剂：卟啉、二氢卟酚和染料。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括选自由以下组成的组的光敏剂：卟啉、原蛋白IX、嘌呤、维替泊芬、HPPH、替莫泊芬、亚甲蓝、光敏素、原蛋白、血卟啉、他拉泊芬、苯并卟啉衍生物单酸、5-氨基乙酰丙酸、镥泰克萨菲瑞、金属酞菁、金属萘酞菁磺基苯并卟啉、金属萘菁\、四磺酞菁锌、菌绿素、金属卟吩、氯衍生物、四(间-羟基苯基)二氢卟酚(mTHPC)、脱镁叶绿酸、二溴荧光素(DBF)、IR700DX、萘酞菁、卟啉衍生物和/或其组合。
在一些实施例中，提供了一种识别人类神经元或神经的方法，其包括使所述人类神经元或神经与靶向分子接触，所述靶向分子包括(a)特异性结合所述人类神经元或神经或任一个的组分的肽，和(b)荧光部分，其中所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWD FNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，和/或其组合。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)和SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ IDNO:1)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:2)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ IDNO:16)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQID NO:20)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ IDNO:23)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ IDNO:26)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ IDNO:27)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)。
在一些实施例中，所述荧光部分选自由以下组成的组：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料和/或其组合。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEP YYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，所述荧光部分选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；稀土金属螯合物；其衍生物和/或其组合。
在一些实施例中，所述荧光部分选自由以下组成的组：5-羧基荧光素(5-FAM)；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素(6-FAM)；5(6)-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚衍生物；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM、荧光素、5,6-二羧基荧光素、5-(和6)-磺基荧光素、砜基荧光素、琥珀酰基荧光素、5-(和6)-羧基SNARF-1、羧基荧光素磺酸盐、羧基荧光素两性离子、羧基荧光素季铵盐、羧基荧光素膦酸酯、羧基荧光素GABA、羧基荧光素半胱氨酸Cy5、5'(6')-羧基荧光素、荧光素谷胱甘肽和/或其组合。
在一些实施例中，提供了一种将药物递送到人类神经元或神经的方法，其包括使所述人类神经元或神经与人类神经元或神经靶向分子接触，所述神经靶向分子包括(a)特异性结合所述神经元或神经或任一个的组分的肽，或(b)药物，其中所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQ HPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ IDNO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，
5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，和/或其组合。
在一些实施例中，所述药物选自由以下组成的组：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和/或其组合。
在一些实施例中，所述药物选自由以下组成的组：苯佐卡因；卡替卡因；金鸡卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特和曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和/或其组合。
在一些实施例中，提供了一种将光敏剂递送到人类神经元或神经的方法，其包括使所述人类神经元或神经与人类神经元或神经靶向分子接触，所述神经靶向分子包括(a)特异性结合所述神经元或神经或任一个的组分的肽，或(b)光敏剂，其中所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，
5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，和/或其组合。
在一些实施例中，所述方法进一步包括将所述人类神经元或神经暴露于激活所述光敏剂的光源。
在一些实施例中，所述光敏剂选自由以下组成的组：卟啉、二氢卟酚和染料。
在一些实施例中，所述光敏剂选自由以下组成的组：卟啉、原蛋白IX、嘌呤、维替泊芬、HPPH、替莫泊芬、亚甲蓝、光敏素、原蛋白、血卟啉、他拉泊芬、苯并卟啉衍生物单酸、5-氨基乙酰丙酸、镥泰克萨菲瑞、金属酞菁、金属萘酞菁磺基苯并卟啉、金属萘菁\、四磺酞菁锌、菌绿素、金属卟吩、氯衍生物、四(间-羟基苯基)二氢卟酚(mTHPC)、脱镁叶绿酸、二溴荧光素(DBF)、IR700DX、萘酞菁、卟啉衍生物和/或其组合。
在一些实施例中，通过对人类受试者进行全身静脉内注射来施用所述人类神经元或神经靶向分子。
在一些实施例中，在外科手术之前，施用所述人类神经元或神经靶向分子。在一些实施例中，所述外科手术是癌症外科手术。在一些实施例中，所述外科手术是前列腺癌外科手术。
在一些实施例中，提供了一种药物组合物，其包括：(a)特异性结合人类神经元、人类神经或任一个的组分的肽，和(b)药学上可接受的赋形剂，其中所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，和/或其组合。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ IDNO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)和SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ IDNO:1)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:2)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ IDNO:16)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQID NO:20)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ IDNO:23)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ IDNO:26)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ IDNO:27)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)。
在所述组合物的一些实施例中所述肽包括SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽包括5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ IDNO:1)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:2)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP404；SEQ ID NO:16)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ IDNO:20)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ IDNO:25)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ IDNO:26)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽是SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)。
在所述组合物的一些实施例中，所述肽与货物结合。在一些实施例中，所述货物是药物、光敏剂或荧光部分。
附图说明
图1：在三只小鼠(左)和NP41(两只小鼠，右)中施用450nmols HNP401后，在活的野生型小鼠中暴露的坐骨神经的荧光图像。左和右坐骨神经两者均示出。FAM是连接每个肽序列的C末端赖氨酸的荧光素。图像是使用ZeissLumar获得的。
图2：来自图1的图像定量示出HNP 401与NP41具有类似的对比度(神经荧光强度/肌肉荧光强度)(6.2倍对6.7倍)，同时神经和邻近肌肉组织两者的标记强度更高。6条神经，共3只小鼠用于HNP401，并且2只小鼠(4条神经)用于NP41。Y轴＝图像J中计算的平均荧光强度(515nm发射)。
图3：在人类神经的切片上局部应用神经结合肽示出HNP401的高结合力。HNP401的曝光增益降低(30到10)，因为与其它标准相比，相同设置下的曝光因高信号而饱和。
图4：局部应用NP41、HNP401和HNP404之后，来自人类神经切片的荧光。将肽以100uM应用20分钟，随后在PBS中洗涤，并且在Nikon A1共聚焦显微镜上成像。所有图像经均等调整。
图5：用HNP401体内标记大鼠坐骨神经
图6：活大鼠中大鼠前列腺海绵体神经的荧光标记。HNP301是一种早期产生神经结合肽，与HNP401相比，在前列腺神经标记方面示出的对比度不高。
图7：用HNP401在体内标记前列腺神经血管束。活大鼠中自主神经束的HNP401标记。
图8：通过噬菌体展示识别的人类神经结合肽的筛选。100mM人类神经结合肽FAM-HNP401(A)、FAM-HNP402(B)、FAM-HNP403(C)在新鲜活的人类腓肠神经(上图)和人类颞肌(下图)的连续切片上的局部应用。为了比较，局部应用100mM羧基-FAM(D)和针对结合小鼠神经而筛选的肽NP41-FAM(E)。神经和肌肉染色的H和E(F)。在Lumar显微镜上以2倍曝光放大34倍采集的所有荧光图像，并且进行均等调整以进行比较。NTQTLAKAPEHT(NP41；来自美国专利第8,685,372号或国际专利公开第WO 2010121023A2号的SEQ ID NO:15)。
图9：FAM-HNP401和FAM-NP41在人类腓肠神经的结合和标记中的比较。将100mMHNP401-FAM局部应用在未固定的人类臂丛神经组织(A)和人类颞肌组织(D)的10mm切片上，在同一载玻片上保持相邻，并且在共聚焦显微镜上用488nm激发激光成像。为了比较，将NP41-FAM在与针对(A和D)所述相同的条件下应用于人类神经(B)和肌肉(C)。神经(C)和肌肉(F)的H和E染色。与NP41-FAM(n＝4)(G)相比，用HNP401-FAM(n＝4)处理的神经组织的神经束膜的信号强度。局部应用于人体组织切片的肽的神经与肌肉对比(n＝4)(H)。
图10：神经结合肽与人体和小鼠组织的差异性结合。人体组织：通过在人类腓肠神经切片上以最终浓度375mM(A)、100mM(B)、50mM(C)、10mM(D)和1mM(E)局部应用HNP401-FAM确定最佳剂量反应，用共聚焦显微镜在相同的参数下成像，并且均等调整以进行比较。**增亮2倍以供查看。在共聚焦显微镜下成像的FAM-NP41(F和G)和FAM-HNP401(H和I)在高浓度375mM时的神经和肌肉对比度，并且调整以进行直接比较。小鼠组织：用375mM(J)、100mM(K)FAM-NP41或375mM(L)、100mM(M)FAM-HNP401处理的周围肌肉的小鼠面神经(红色箭头)。在Lumar成像范围采集的底行图像具有相同的参数，并且具有可比性。与FAM-NP41相比，FAM-HNP401在小鼠组织中示出高的肌肉结合力，对比度差。
图11：IV注射后啮齿动物中神经结合肽的体内成像及药代动力学图。静脉注射450nmols FAM-HNP401(A)或FAM-NP41(B)的6个月大SKH1-Elite小鼠的坐骨神经的体内荧光图像，并且在注射后2小时在Lumar成像范围成像。在图像J中测量了坐骨神经的强度示出筛选用于结合人类神经的肽(HNP401)比筛选用于结合小鼠神经的肽(NP41)的结合增加了2.3倍(C)。然而，在小鼠大腿(D)中，两种肽的神经与周围肌肉的对比度是可比较的，针对FAM-HNP401为5.79±0.81，并且针对FAM-NP41为6.63±1.63。在100gm雄性Sprague Dawley大鼠中t.v.注射2μmol HNP401-FAM之后5小时，使用实时定制外科手术成像系统(E)和Lumar小动物显微镜(F)，对前列腺神经丛进行体内荧光成像。全身注射2μmol FAM-HNP401(G)之后5小时，对大鼠的坐骨神经进行成像。血液清除曲线示出了从五只SKH1-Elite雄性小鼠的等量抽血中获得的FAM信号。在采集血液之前，在1分钟、10分钟、20分钟、30分钟、1小时和2小时的时间点向每只小鼠i.v.注射100nmol FAM-HNP401(H)。
图12：HNP401结合人类神经(海绵体和中间前臂皮肤)在人类前列腺内的神经(上排，A和B)或来自中间前臂的皮肤人类神经(下排，B和F)的冷冻切片带的10μm切片上局部应用100μM FAM-HNP401或FAM-NP41之后，荧光成像。使用共聚焦显微镜对肽进行切片和应用之后，立即对神经成像。用双标记对神经的固定切片的神经丝抗体SMI312(红色)和DAPI染色核(蓝色)(C和G)进行免疫组织化学分析，并且在载玻片上进行对应的H和E染色(D和H)。
图13：HNP401结合人类海绵体神经。使用共聚焦显微镜，将100μM FAM-HNP401(A)或FAM-NP41(B)局部应用于来自前列腺的未固定新鲜活神经的冷冻切片带的10μm切片上。来自前列腺的神经的固定切片上的免疫荧光(C)神经丝抗体SMI312和载玻片上对应的H和E染色(D)。这些图像从与本文档的图5中所示的那些患者不同的患者获得。
图14：通过序列缺失确定HNP401的人类神经结合结构域。用100uM FAM标记的HNP401(A)，HNP401-N-2(B)，HNP401-N4(C)，HNP401-N6(D)，HNP401-N8(E)，HNP401-N4 C-2(F)，HNP401-N4 C-4(G)，HNP401-N4C-6(H)，HNP401-N4 C-8(I)局部处理的未固定人类腓肠神经的荧光图像的代表性图像。
图15：HNP401的缺失变体的神经结合的定量。每种HNP401变体的神经结合的定量示出于图7(n＝5)。
图16：啮齿动物的自主神经的体内荧光标记。低倍放大荧光图像示出小鼠中膀胱、输精管和尿道穿过前列腺，相邻的自主神经被FAM-NP41标记(A)。邻近尿道的自主神经的高倍白光反射图像(B)和对应的荧光灰度图像(C)。与小鼠中白光检测相比，通过荧光定量的自主神经检测(D)；绘制了各个神经分支的神经与肌肉对比度的反射/荧光图。线右边的值表示与反射光相比，荧光的可视化得到了改善。图像(E-G)与(A-C)类似，不同之处在于图像突出了大鼠前列腺对小鼠中自主神经的FAM-NP41依赖性标记，白光成像示出不可见神经(F)。还可使用临床级Zeiss Pentero外科手术显微镜，检测FAM-NP41标记的前列腺神经(H)。
图17：FAM-HNP401和FAM-NP41在人类腓肠神经的结合和标记中的比较。将100μMFAM-HNP401局部应用在未固定的人类腓肠神经组织(A)和人类颞肌组织(E)的10μm切片上，在同一载玻片上保持相邻，并且在共聚焦显微镜上用488nm激发激光成像。为了比较，将FAM-NP41在与针对(A和E)所述相同的条件下应用于人类神经(B)和肌肉(F)的连续切片。神经(C)和肌肉(G)的H和E染色。与FAM-NP41(n＝4)相比，用FAM-HNP401(n＝4)处理的神经组织的神经束膜的信号强度(D)。局部应用于人体组织切片的肽的神经与肌肉对比(n＝4)(H)。
图18：具有药代动力学的小鼠和大鼠中神经结合肽的体内成像。已经预先静脉内注射了450nmol FAM-HNP401[～48.4mg/kg](A)或FAM-NP41[～39mg/kg](B)的6个月大SKH1小鼠的坐骨神经的体内荧光图像。在图像J中测量和定量的坐骨神经的强度显示，与FAM-NP41相比，FAM-HNP401增加了2.3倍(C)。两种肽的神经与肌肉对比度是可比较的，针对FAM-HNP401为5.79±0.81，并且针对FAM-NP41为6.63±1.63。(D)。静脉内注射2μmol FAM-HNP401[～54mg/kg]之后5小时，大鼠坐骨神经的体内荧光图像(E)。静脉内注射2μmol FAM-HNP401之后5小时，用实时定制外科手术成像系统(F)和Lumar小动物显微镜(G)对大鼠前列腺神经进行成像。血液清除曲线示出了从五只SKH1-Elite雄性小鼠的等量抽血中获得的FAM信号(H)。在采集血液之前，在1分钟、10分钟、20分钟、30分钟、1小时和2小时的时间点向每只小鼠静脉内注射100nmol[～11mg/kg]FAM-HNP401。
图19：HNP401结合来自前列腺和中间前臂皮肤人类神经的新鲜活神经。在人类前列腺内的神经(上排，A和B)或来自中间前臂的皮肤人类神经(下排，E和F)的冷冻切片带的10μm切片上局部应用100μM FAM-HNP401或FAM-NP41之后，荧光成像。使用共聚焦显微镜对肽进行切片和应用之后，立即对神经成像。用双标记对神经的固定切片的神经丝抗体SMI312(红色)和DAPI染色核(蓝色)(C和G)进行免疫组织化学分析，并且在载玻片上进行对应的H和E染色(D和H)。
图20：比较截短的序列以确定结合效率。用100μM FAM标记的N-2(A)，N-4(B)，N-6(C)，N-8(D)，C-2(E)，C-4(F)，C-6(G)，C-8(H)或HNP401(I)局部处理的未固定人类腓肠神经的荧光图像的代表性图像。由于溶解度差，对于局部测试，C-6的终浓度为*73μM，并且C-8的终浓度为**80.6μM。比较归一化为FAM-HNP401的肽的信号强度，以测试结合是否改善(J)。确定FAM-HNP401和FAM-HNP401-N-2的归一化腓肠神经与颞肌的对比度(学生t测试，未配对，单尾，p＝0.011)(K)。
图21：食用染料有效淬灭FAM-NP41膀胱荧光。使用荧光读板仪测定来显示FAM-NP41荧光的剂量依赖性猝灭。赤藓红超蓝光(Santa Cruz Biotechnology，Inc.)是效率最高的淬灭剂，在染料与荧光素比率的2.5倍时淬灭率>～80％，并且在染料与荧光素比率的5倍时淬灭率>95％(A)。测试的其它食用染料包含诱惑红和日落黄。为了测试体内猝灭，我们通过直接向2小时前注射了150nmole FAM-NP41的小鼠iv注射，50mg/kg MW 879.76(每25gm小鼠～1.5μmol)。这代表FAM-NP41剂量约为10X染料。成像之后仍残留一些膀胱荧光，因此，将另外的染料(30μl，10mM赤藓红额外的蓝色)直接注入到膀胱中。示出了没有染料淬灭剂(B)，以及添加了赤藓红额外的蓝色(静脉内和膀胱内)(C)的小鼠膀胱的图像，将膀胱荧光猝灭到接近背景水平。如果此方法用于人类患者，则可能不需要染料，因为可以通过施用FAM-NP41开始患者的膀胱导管插入术，从而可以清除膀胱荧光。
图22：TAMRA-NP41标记大鼠的前列腺中的自主无髓鞘神经。活体雄性Sprague-Dawley大鼠的前列腺周围神经束(白色箭头)的荧光图像，在i.v.注射500nmol NP41-TAMRA后15分钟成像(A)。使用共聚焦成像，切除组织并冷冻未固定，以验证肽荧光信号(B)，并且用辣根过氧化物酶-二次和二氨基联苯胺染色检测到的针对TAMRA的抗体的免疫组织化学(C)。使用针对酪氨酸羟化酶的抗体染色来验证自主神经的存在(D)无主要阴性对照(E)。
图23：通过噬菌体展示识别的人类神经结合肽的筛选。100μM人类神经结合肽FAM-HNP401(A)、FAM-HNP402(B)、FAM-HNP403(C)在新鲜活的人类腓肠神经(上排)和人类颞肌(下排)的连续切片上的局部应用。为了比较，局部应用100M羧基-FAM(D)和针对结合小鼠神经而筛选的肽NP41-FAM(E)。神经和肌肉染色的H和E(F)。在Lumar显微镜上以2倍曝光放大34倍采集的所有荧光图像，并且进行均等调整以进行比较。
图24：通过噬菌体展示识别的人类神经结合肽的筛选。100μM人类神经结合肽FAM-HNP401(A)，FAM-HNP402(B)，FAM-HNP403(C)在来自两个不同患者的脖子的新鲜活的人类颈袢神经(上排)和人类耳大神经上(下排)的局部应用。为了比较，局部应用100μM羧基-FAM(D)和针对结合小鼠神经而筛选的肽NP41-FAM(E)。在Lumar显微镜上以2倍曝光放大34倍采集的所有荧光图像，并且进行均等调整以进行比较。
图25：神经结合肽与人体和小鼠组织的差异性结合。通过在人喉神经切片上以最终浓度375μM(A)、100μM(B)、50μM(C)、10μM(D)和1μM(E)局部应用FAM-HNP401确定最佳剂量反应，用共聚焦显微镜在相同的参数下成像，并且均等调整以进行比较。**增亮2倍以供查看。在共聚焦显微镜下成像的FAM-NP41(F和G)和FAM-HNP401(H和I)在高浓度375μM时的神经与肌肉对比度，并且调整以进行直接比较。用375μM(J)、100μM(K)FAM-NP41或375μM(L)、100μM(M)FAMHNP401处理的周围肌肉的小鼠面神经(红色箭头)。在Lumar成像范围采集的底行图像具有相同的参数，并且具有可比性。与FAMNP41相比，FAM-HNP401在小鼠组织中示出高的肌肉结合力，对比度差。低浓度FAM-HNP401(10μM)在人类神经上的高分辨率共聚焦图像显示肽与神经的非轴突结构组分的结合(N)。
图26：人类神经组织的自体荧光。在未固定的人类腓肠神经的10μm切片上局部应用100μM FAM-HNP401(A)或仅缓冲液(B)，然后使用共聚焦显微镜，在相同的采集参数下进行成像，以进行直接比较。使用图像J，将图像均等调整，然后16倍加亮(B)以进行查看。
图27：来自注射有神经结合肽的小鼠的尿液样品的质谱分析。从注射了FAM-HNP401的小鼠尿液中收集的半胱氨酸FAM的离子碎片峰表示肽已被代谢(A)。注射了FAM-NP41的小鼠获得了类似的结果(B)。然而，在尿液中可检测到注射有FAM-dNP41的小鼠，而肽是由d-氨基酸制成的(C)。
图28：来自大鼠的离体人血浆和脑脊髓液中肽的稳定性。在人血浆中于37℃下温育之后5分钟(A)和2小时(B)，以53.2mg/kg或2μmol的剂量检测到FAM-HNP401肽。加入等体积的1:1乙腈:含2％乙酸的水，以沉淀蛋白质物质，提取上清液，提取上清液，在20分钟内在9:1H2O+0.05％TFA:乙腈+0.05％TFA到1:9H2O+0.05％TFA:乙腈+0.05％TFA的梯度的C18反相柱上进行LC-MS分析。450nm的检测器通道显示FAM-HNP401。温育后2小时，与人血浆温育后5分钟，肽与x％的组合物保持完整。在人血浆中于37℃下温育之后5分钟(C)和2小时(D)，以53.2mg/kg或2μmol的剂量检测到FAM-NP41肽，然后用上述方法进行LC-MS分析。与我们之前的结果类似，FAM-NP41在温育后2小时仍保持完整，与人血浆温育后5分钟x％的组合物仍保持完整。还在温育之后2小时的大鼠脑脊髓液中测试FAM-HNP401(E)和FAM-NP41(F)，以证明肽在循环中的稳定性。
图29：FAM-HNP401结合从人类前列腺获得的新鲜活神经。将100μM FAM-HNP401(A)或FAM-NP41(B)局部应用在来自前列腺的未固定神经的10μm切片上，然后使用共聚焦显微镜成像。使用神经丝抗体SMI312(C)在来自前列腺的神经的固定切片上进行神经免疫荧光，并且进行对应的H和E染色(D)。这些图像从与图20所示的不同的患者获得。
图30：肽序列和其缩写表。
具体实施方式
I.介绍
在某些实施例中，本文公开了靶向分子，其包括特异性结合人类神经元、人类神经或任一个的组分的肽。在一些实施例中，所述肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，肽不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC(Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，肽不是SHSNTQTLAKAPEHTGC(NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，肽不是NTQTLAKAPEHT(NP41；SEQ ID NO:19)。
II.定义
在本说明书中，任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应当理解为包含所述范围内的任何整数的值，以及在适当时其分数(如，整数的十分之一和百分之一)，除非另有说明。而且，除非另外指出，否则本文所述的涉及任何物理特征的任何数值范围，如聚合物亚基、尺寸或厚度应当理解为包含所述范围内的任何整数。如本文所用，除非另外指出，否则术语“约”是指所指示的范围、值或结构的±20％。
应当理解，如本文所用，术语“一个”和“一种”是指所列举的组分中的“一个或多个”。替代方案(例如，“或”)的使用应当被理解为意指替代方案中的一个、两个或其任何组合。
另外，应当理解，本申请公开了衍生自本文所述的结构和取代基的各种组合的单个化合物或化合物组，其程度与设定每种化合物或化合物组单个阐述的程度相同。因此，特定结构或特定取代基的选择在本公开的范围内。
如本文所用，除非另有说明，否则以下术语具有赋予它们的含义。
中枢神经系统(CNS)由大脑和脊髓以及视网膜组成。
外周神经系统(PNS)延伸到CNS外部。PNS分为躯体神经系统和自主神经系统。
神经元是通过电和化学信号处理和传输信息的可电刺激细胞。
典型的神经元具有细胞体(通常称为体细胞)、树突和轴突。
神经是封闭的、类似电缆的神经轴突束。每个神经都是含有许多轴突的绳状结构。每个轴突都被一层称为神经内膜的组织所围绕。轴突被捆扎成组，称为束，并且每个束被包裹在一层称为神经束膜的组织中。神经元或神经被包裹在一层称为神经外膜的组织中。
如本文所用，术语“靶向分子”是指特异性结合目标靶标的任何试剂(例如，肽、蛋白质、核酸聚合物、适体或小分子)。在一些实施例中，靶向分子包括肽，在本文中也称为“靶向肽”。目标靶标可以是组织、细胞类型、细胞结构(例如细胞器)、蛋白质、肽、多糖或核酸聚合物。在一些实施例中，靶向分子是特异性结合受试者的一个或多个神经元或神经的任何试剂。在一些实施例中，靶向分子进一步包括货物(例如，药物、荧光标记或光敏剂)。
如本文所用，术语“适体”是指基于与靶分子的非Watson和Crick相互作用，以高亲和力特异性结合其它分子的能力，已经从随机池中选择的寡核苷酸(例如DNA、RNA或XNA)分子(参见，例如Cox和Ellington，《生物有机与医药化学(Bioorg.Med.Chem.)》9:2525-2531(2001)；Lee等人，《核酸研究(Nuc.Acids Res.)》32:D95-D100(2004))或短肽(例如，5-20个氨基酸)，其作为环嵌入稳定的蛋白质支架中而不是作为游离肽。可以选择结合核酸、蛋白质、小的有机化合物、维生素、无机化合物、细胞，并且甚至整个生物体的适体。在一些实施例中，靶向肽可以包括适体，或者靶向分子肽序列可以是肽适体的形式。
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，指氨基酸残基的聚合物。术语适用于天然存在的氨基酸聚合物以及其中一个或多个氨基酸残基是非天然存在的氨基酸(例如，氨基酸类似物)的氨基酸聚合物。术语涵盖任何长度的氨基酸链，包含全长蛋白质(即抗原)，其中氨基酸残基通过共价肽键连接。如本文所用，术语“肽”是指氨基酸残基的聚合物，其长度范围通常为2个到约50个残基。在某些实施例中，肽的长度范围为约2个、3个、4个、5个、7个、9个、10个或11个残基到约50个、45个、40个、45个、30个、25个、20个或15个残基。在某些实施例中，肽的长度范围为约8个、9个、10个、11个或12个残基到约15个、20个或25个残基。在本文提供氨基酸序列的情况下，也设想了序列的L-、D-或β-氨基酸版本以及逆向、倒位和逆向倒位同种型。肽还包含其中一个或多个氨基酸残基是对应的天然存在的氨基酸以及天然存在的氨基酸聚合物的人工化学类似物的氨基酸聚合物。此外，术语适用于通过肽键或通过其它修饰键连接的氨基酸(例如，在肽键被α-酯、/3-酯、硫代酰胺、膦酰胺、氨基甲酸酯、羟基化物等替换的情况下(参见例如Spatola，(1983)《化学生物化学氨基酸和蛋白质7(Chem.Biochem.Amino Acids and Proteins 7)》：267-357)，在酰胺被饱和胺替换的情况下(参见，例如，Skiles等人，美国专利第4,496,542号，其通过引用并入本文)和Kaltenbronn等人，(1990)Proc.中第969-970页，第1届美国肽研讨会，ESCOM科学出版社，荷兰等))。
术语“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸，以及以与天然存在的氨基酸类似的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的那些氨基酸，以及后来被修饰的那些氨基酸，例如羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和O-磷酸丝氨酸。氨基酸可以是L-或D-氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构的化合物，即与氢、羧基、氨基和R基团结合的碳，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜。此类类似物具有修饰的R基团(例如正亮氨酸)或修饰的肽主链，但是保留与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指具有与氨基酸的一般化学结构不同的结构，但是以与天然存在的氨基酸类似的方式起作用的化合物。
氨基酸在本文中可以用它们通常已知的三个字母符号或通过IUP AC-IUB生化命名委员会推荐的一个字母符号来指代。同样，核苷酸可以用它们普遍接受的单字母代码来指代。
本领域技术人员将认识到，改变、增加或缺失编码序列中的单个氨基酸或小百分比氨基酸的肽、多肽或蛋白质序列的个体取代、缺失或添加是“保守修饰的变体”，其中改变导致氨基酸被化学上类似的氨基酸取代。提供功能上类似的氨基酸的保守取代表是本领域众所周知的。此类保守修饰的变体是本发明的多态变体、种间同系物和等位基因的补充，并且不排除其。
以下八个基团各自含有彼此保守取代的氨基酸：1)丙氨酸(A)，甘氨酸(G)；2)天冬氨酸(D)，谷氨酸(E)；3)天冬酰胺(N)，谷氨酰胺(Q)；4)精氨酸(R)，赖氨酸(K)；5)异亮氨酸(I)，亮氨酸(L)，蛋氨酸(M)，缬氨酸(V)；6)苯丙氨酸(F)，酪氨酸(Y)，色氨酸(W)；7)丝氨酸(S)，苏氨酸(T)；和8)半胱氨酸(C)，蛋氨酸(M)(参见例如Creighton，《蛋白质(Proteins)》(1984))。
如本文所用，“序列同一性”是指如果必要，在比对序列并引入缺口以达到最大百分比序列同一性之后，在与另一个参考多肽序列中的氨基酸残基相同的单个序列中氨基酸残基的百分比，而不将任何保守取代视为序列同一性的一部分。序列同一性百分比值可以使用如Altschul等人(1997)《核酸研究(Nucl.Acids Res.)》25:3389-3402中定义的NCBIBLAST 2.0软件生成，并且将参数设置为默认值。
如本文所用，术语“标记”是指促进本文所公开的靶向分子的可视化和/或检测的分子。在一些实施例中，标记是荧光部分。
当指本文公开的靶向分子与靶标(例如，纯化蛋白、神经元或神经组织、神经元或神经、颅神经元或神经、中枢神经元或神经、有髓或无髓神经元或神经、或神经元或神经周围的结缔组织)之间的相互作用时，短语“特异性结合”是指在靶向分子与靶标之间形成高亲和力的键。进一步，术语是指靶向分子对非靶标的亲和力低。
“选择性结合”、“选择性”等是指与另一个分子相比，试剂与一个分子相互作用的偏好。优选地，本文公开的靶向分子与靶标之间的相互作用是特异性和选择性的。注意，在一些实施例中，将试剂设计为“特异性结合”和“选择性结合”两个不同的但类似的靶标，而不结合其它不希望的靶标。
术语“个人”、“患者”或“受试者”可互换使用。如本文所用，它们指任何哺乳动物(即，在分类学上动物分类：脊索动物：脊椎动物：哺乳动物内的任何目、科和属的物种)。在一些实施例中，哺乳动物是牛、马、绵羊、猪、猫、狗、山羊、小鼠、大鼠、兔、豚鼠、非人灵长类动物或人。术语均不要求或不限于以医护人员(例如，医生、注册护士、护士、医生助理、护理员或临终关怀工作者)的监督(例如，持续或间歇性)为特征的情况。
如本文所用，术语“施用(administer)”、“施用(administering)”、“施用(administration)”等是指可以用于使试剂或组合物递送到所需的生物作用部位的方法。这些方法包含但不限于肠胃外注射(例如，静脉内、皮下、腹膜内、肌内、血管内、鞘内、玻璃体内、输注或局部)。任选地与本文所述的试剂和方法一起使用的施用技术包含，例如，如Goodman和Gilman，《治疗学的药理学基础(The Pharmacological Basis ofTherapeutics)》，当前版本；Pergamon；和《雷明顿氏药物科学(Remington's,Pharmaceutical Sciences)》(当前版本)，Mack Publishing Co.，宾夕法尼亚州伊斯顿中所讨论的。在一些实施例中，施用是通过全身静脉内注射到人类患者中。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不废除本文所述的试剂的生物学活性或特性，并且相对无毒的材料(即，材料的毒性大大超过了材料的益处)。在一些情况下，可以向个体施用药学上可接受的材料，而不会引起明显的不良生物学作用或以有害的方式与含有所述材料的组合物的任何组分发生明显的相互作用。
如本文所用，术语“外科手术”是指可以用于通过物理干预来操纵、改变或引起效果的任何方法。这些方法包含但不限于开放外科手术、内窥镜外科手术、腹腔镜外科手术、微创外科手术、机器人外科手术、任何可能影响任何神经元或神经的手术，如脊柱外科手术期间牵开器的放置、心脏神经元或神经消融、硬膜外注射、鞘内注射、神经元或神经阻断、如神经元或神经刺激器等装置的植入以及泵的植入。在一些实施例中，外科手术的受试者是人类受试者或人类患者。
III.靶标
在某些实施例中，本文公开了特异性结合人类神经元或神经靶标的人类神经元和/或神经靶向分子。
在一些实施例中，靶标是人类神经元或神经。神经是任何人类神经(例如运动神经、感觉神经、交感神经和副交感神经、前列腺外周神经血管束、坐骨神经、颅神经，包含嗅觉神经、视神经、动眼神经、滑车神经、三叉神经、外展神经、面神经、前庭脉络神经、舌咽神经、迷走神经、副神经、舌下神经、脊神经、臂丛或腰神经丛)。神经元是任何神经元(例如，感觉神经元(传入神经元)、运动神经元(传出神经元)、中间神经元、单极神经元、双极神经元、多极神经元、篮状细胞、贝兹细胞、中棘神经元、浦肯野细胞、锥体细胞、Renshaw细胞、颗粒细胞、前角细胞)。在一些实施例中，人类神经元或神经是有髓的。在一些实施例中，神经元或神经是无髓的。在一些实施例中，人类神经元或神经被脱髓鞘。在一些实施例中，人类神经元或神经正在进行脱髓鞘。
在一些实施例中，神经元和/或神经靶标是人类神经元或神经的组分。人类神经元或神经的组分是神经元或神经的任何组分。在一些实施例中，靶标是神经元或神经内或周围的组织(例如，神经外膜、神经束膜或神经内膜)。在一些实施例中，靶标是髓磷脂的组分(例如，髓磷脂碱性蛋白(MBP)、髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白或蛋白脂蛋白)。在一些实施例中，靶标由许旺细胞表达(例如，MBP、神经胶质原纤维酸性蛋白、S-IOO或髓磷脂蛋白零)。在一些实施例中，靶标是神经元或神经组织的组分(例如弹性蛋白、原纤维蛋白、e-钙粘蛋白、细胞角蛋白、波形蛋白、胶原蛋白I、胶原蛋白III、胶原蛋白IV或胶原蛋白V)。在一些实施例中，靶标是在神经元或神经中表达的神经营养因子受体(例如，酪氨酸激酶受体TrkA、TrkB和TrkC，低亲和力神经元或神经生长受体或p75神经营养因子受体或GDNF家族受体α-1或-2)。在一些实施例中，靶标是在神经元或神经组织中表达的非神经营养因子受体，(例如上皮生长因子受体、转化生长因子β受体、血管内皮生长因子受体、内皮素A受体、内皮素B受体和整联蛋白受体)。
通过任何合适的方法实现确定神经元和/或神经靶向分子是否能够结合人类神经元或神经或其组分。在一些实施例中，确定神经元和/或神经靶向分子是否能够结合人类神经元或神经或其组分的方法涉及使本文公开的靶向分子(例如肽或适体)与测试剂接触，持续足以使靶向分子和测试剂形成结合复合物的一段时间。使用任何合适的方法检测结合复合物。合适的结合测定可以在体外或体内进行，并且包含但不限于噬菌体展示、双杂交筛选、共沉淀、交联和表达克隆(参见例如Bennet,J.P.和Yamamura,H.I.(1985)“神经递质、激素或药物受体结合方法(Neurotransmitter,Hormone or Drug Receptor BindingMethods)”，《神经递质受体结合(Neurotransmitter Receptor Binding)》(Yamamura,H.L等人编辑)，第61-89页。其它结合测定涉及使用质谱分析法或NMR技术来识别与目标靶标结合的分子。在此类测定中使用的靶向分子可以天然表达、克隆或合成。
在一些实施例中，靶向分子能够穿过血脑屏障，以便到达并结合目的人类神经元或神经。
IV.靶向分子肽和适体
在本公开中提供了结合人类运动/感觉神经和自主神经的肽，并且可以用于本发明的人类神经元或神经靶向分子中。在一些实施例中，靶向肽包括以下的氨基酸序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，本发明的肽包括约8个到约25个氨基酸(例如8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个或25个氨基酸)、约10个到约23个氨基酸或约15个到约21个氨基酸的氨基酸序列，其包括PYYVVKK的核心结合结构域(SEQ ID NO:40)。在一些实施例中，本发明的肽包括约13个到约25个氨基酸的氨基酸序列，其包括PYYVVKK的核心结合结构域(SEQ ID NO:40)和QVPWEE的N末端序列(SEQ ID NO:41)。在一些实施例中，本发明的肽包括PYY(SEQ ID NO:116)或PYYVV(SEQ ID NO:117)的氨基酸核心结合结构域和QVPWEE的N末端序列(SEQ ID NO:41)。在一些实施例中，本发明的肽包括PYY的氨基酸核心结合结构域(SEQ ID NO:116)和QVPWEE的N末端序列(SEQ ID NO:41)。在一些实施例中，本发明的肽包括PYYVV的氨基酸核心结合结构域(SEQ ID NO:117)和QVPWEE的N末端序列(SEQ ID NO:41)。
一个此类实施例是QVPWEEPYYVVKK的肽(SEQ ID NO:42)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQID NO:18)。在一些实施例中，肽不是NTQTLAKAPEHT(NP41；SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)和QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ IDNO:1)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:2)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ IDNO:16)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQID NO:20)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ IDNO:23)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ IDNO:26)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ IDNO:27)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)。
在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，靶向分子包括与本文公开的肽序列具有至少80％同源性的肽序列。在一些实施例中，靶向分子包括与本文公开的肽序列具有至少85％同源性的肽序列。在一些实施例中，靶向分子包括与本文公开的肽序列具有至少90％同源性的肽序列。在一些实施例中，靶向分子包括与本文公开的肽序列具有至少95％同源性的肽序列。在一些实施例中，靶向分子包括与本文公开的肽序列具有至少99％同源性的肽序列。
在一些实施例中，靶向分子包括与以下的肽序列具有至少75％、80％、85％、90％、95％、97％或99％同一性的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSSGG(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，靶向分子包括适体。
通过任何合适的方法合成本发明的肽和适体。例如，可以通过固相肽合成化学合成本发明的靶向肽和适体。在一些实施例中，本发明的肽在N末端被乙酰基化(“Ac”或“乙酰基”)，在C末端被酰胺化(“CONH2”或“NH2”)，或两者。例如，靶向肽可以包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:43)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:44),Ac-DLPD IIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:45)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTS QHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:46)，Ac-QVPWEEPYY VVKKSS(HNP401-N-2；SEQ IDNO:47)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:48)，Ac-PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:49)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:50)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:51)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:52)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:53)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:54)，Ac-SGQVPWEEPY YGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:55)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:14)，SGQVPWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP 401；SEQ ID NO:56)，WEYHYVDLNWTSQHPQ-CONH2(HNP 402；SEQ ID NO:57)，DLPDIIWDFNWETA-CONH2(HNP 403；SEQ ID NO:58)，SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:59)，WEYHYVDLNWTSQHPQGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:60)，DLPDIIWDFNWETAGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:61)，DTHAHAKPRVPAFKSV-CONH2(HNP 404；SEQ ID NO:62)，QVPWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:63)，QVPWEEPYYVVKKSSGG-CONH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:64)，PWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:65)，EEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:66)，PYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:67)，SGQVPWEEPYYVVKKGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:68)，SGQVPWEEPYYVVGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:69)，SGQVPWEEPYYGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQID NO:70)，SGQVPWEEPGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:71)，QVPWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-2；SEQ ID NO:72)，PWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-4；SEQ ID NO:73)，EEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-6；SEQ ID NO:74)，PYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-8；SEQ ID NO:75)，SGQVPWEEPYYVVKK-CONH2(HNP401-C-2；SEQ ID NO:76)，SGQVPWEEPYYVV-CONH2(HNP401-C-4；SEQ ID NO:77)，SGQVPWEEPYY-CONH2(HNP401-C-6；SEQID NO:78)，和SGQVPWEEP-CONH2(HNP401-C-8；SEQ ID NO:79)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401；SEQ ID NO:80)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQ-CONH2(HNP402；SEQ ID NO:81)，Ac-DLPDIIWDFNWETA-CONH2(HNP403；SEQ ID NO:82)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:83)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:84)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP403；SEQ IDNO:85)，Ac-DTHAHAKPRVPAFKSV-CONH2(HNP 404；SEQ ID NO:86)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:87)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGG-CONH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:88)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:89)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:90)，Ac-PYYVVKKSSGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:91)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:92)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:93)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:94)，Ac-SGQVPWEEPGGC-CONH2(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:95)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-2；SEQ ID NO:96)，Ac-PWEEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-4；SEQ ID NO:97)，Ac-EEPYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-6；SEQ ID NO:98)，Ac-PYYVVKKSS-CONH2(HNP401-N-8；SEQID NO:99)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKK-CONH2(HNP401-C-2；SEQ ID NO:100)，Ac-SGQVPWEEPYYVV-CONH2(HNP401-C-4；SEQ ID NO:101)，Ac-SGQVPWEEPYY-CONH2(HNP401-C-6；SEQ ID NO:102)或Ac-SGQVPWEEP-CONH2(HNP401-C-8；SEQ ID NO:103)。固相合成的技术描述于例如Barany和(1963)《固相肽合成(Solid-Phase Peptide Synthesis)》；《肽：分析、合成、生物学(The Peptides:Analysis,Synthesis,Biology)》中第3-284页；《肽合成的特殊方法：第2卷(Vol.2:Special Methods in Peptide Synthesis)》，A部分；Merrifield等人(1963)《美国化学协会期刊(J.Am.Chem.Soc)》85:2149-2156，和Stewart等人(1984)《固相肽合成(Solid Phase Peptide Synthesis)》，第2版，皮尔斯化学公司，Rockford,111。
V.货物
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，靶向肽包括以下的氨基酸序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ IDNO:20)，QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ IDNO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，肽不是NTQTLAKAPEHT(NP41；SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，肽或适体直接结合到货物。在一些实施例中，肽或适体间接(例如，通过连接子)结合到货物。在一些实施例中，肽或适体在其N末端、其C末端或在肽或适体的内部位置(例如，内部氨基酸)处结合到货物。在一些实施例中，两个、三个、四个或更多个肽或适体直接或间接结合到货物。在某些实施例中，货物是药物、荧光部分、光敏剂或其组合。在一些实施例中，货物是药物。在一些实施例中，货物是荧光部分或荧光染料。在一些实施例中，货物包括荧光部分或荧光染料。在一些实施例中，货物是光敏剂。在一些实施例中，肽或适体结合到两个或更多个货物部分。两个或更多个货物部分可以是相同的部分或不同的部分，或来自相同类别的货物部分(例如，两种药物)或来自不同类别的货物部分(例如，一种药物和一种荧光部分)。
荧光染料的常见类别包含但不限于氧杂蒽，如，罗丹明、对甲氨基酚和荧光素和其衍生物；比马内斯；香豆素和其衍生物，如，伞形酮和氨甲基香豆素；芳香胺，如，丹磺酰基；方酸染料；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃、聚甲炔、氧杂苯并蒽、呫吨、吡喃盐、卡波斯蒂基、二萘嵌苯、吖啶酮、喹吖啶酮、红荧烯、蒽、晕苯、烯菲、芘、丁二烯、二苯乙烯、镧系金属螯合物、稀土金属螯合物和此类染料的衍生物。在例如美国专利第4,452,720号；美国专利第5,227,487号和美国专利第5,543,295号中讨论了荧光染料。
在一些实施例中，荧光部分或染料选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚甲炔；氧杂苯并蒽；吡喃盐；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；稀土金属螯合物；FITC；Cy3；EGFP；青色荧光蛋白(CFP)；EGFP；5-FAM；6-FAM；FAM；荧光素、IAEDANS、EDANS和BODIPY FL；TRITC；Cy5；Cy3；YFP；6-FAM；LC红色640；Alexa Fluor 546；荧光素；四甲基罗丹明；Dabcyl；BODIPY FL；QSY 7、QSY 9、QSY 21和BBQ-650染料。
在一些实施例中，货物包括荧光素染料。典型的荧光素染料包含但不限于5-羧基荧光素、5-异硫氰酸荧光素、5(6)-羧基荧光素、5,6-二羧基荧光素、5-(和6)-磺基荧光素、砜基荧光素、琥珀酰荧光素、5-(和6)-羧基SNARF-1、羧基荧光素磺酸盐、羧基荧光素两性离子、羧基荧光素季铵盐、羧基荧光素膦酸酯、羧基荧光素GABA羧基荧光素-cys-Cy5、5'(6')-羧基荧光素、荧光素谷胱甘肽和6-羧基荧光素；其它荧光素染料的实例可以在例如美国专利第6,008,379号、美国专利第5,750,409号、美国专利第5,066,580号和美国专利第4,439,356号中找到。货物可以包含罗丹明染料，如例如5-(和6)-羧基罗丹明110、四甲基罗丹明-6-异硫氰酸盐、5-羧基四甲基罗丹明、5-羧基对甲氨基酚衍生物、四甲基和四乙基罗丹明、二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明、二萘基罗丹明、罗丹明101磺酰氯(以TEXAS 的商品名出售)和其它罗丹明染料。其它罗丹明染料可以在例如美国专利第6,080,852号；美国专利第6,025,505号；美国专利第5,936,087号；美国专利第5,750,409号中找到。在一些实施例中，货物部分包含花青染料，如例如，Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7。
在一些实施例中，货物部分包括荧光团。荧光团是可商购的，并且任何已知和/或可商购的荧光团可以用作货物。在一些实施例中，荧光团显示绿色荧光(如例如494nm/519nm)、橙色荧光(如例如554nm/570nm)、红色荧光(如例如590nm/617nm)或远红色荧光(如例如651nm/672nm)激发/发射光谱。在一些实施例中，荧光团是具有处于约350nm到约775nm范围内的激发和发射光谱的荧光团。在一些实施例中，激发和发射光谱为约346nm/446nm、约494nm/519nm、约554nm/570nm、约555nm/572nm、约590nm/617nm、约651nm/672nm、约679nm/702nm或约749nm/775nm。在一些实施例中，荧光团可以包含但不限于AlexaFluor 3、AlexaFluor 5、AlexaFluor 350、AlexaFluor 405、AlexaFluor 430、AlexaFluor 488、AlexaFluor 500、AlexaFluor 514、AlexaFluor 532、AlexaFluor 546、AlexaFluor 555、AlexaFluor 568、AlexaFluor 594、AlexaFluor 610、AlexaFluor 633、AlexaFluor 647、AlexaFluor 660、AlexaFluor 680、AlexaFluor 700和AlexaFluor 750(分子探针AlexaFluor染料，可购自生命技术公司(Life Technologies,Inc.)(美国))。在一些实施例中，荧光团可以包含但不限于Cy染料，包含Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5和Cy7(可购自通用电气生命科学(GE Life Sciences)或Lumiprobes)。在一些实施例中，荧光团可以包含但不限于DyLight 350、DyLight 405、DyLight 488、DyLight 550、DyLight 594、DyLight633、DyLight 650、DyLight 680、DyLight 750和DyLight 800(可购自赛默飞世尔科技公司(Thermo Scientific)(美国))。在一些实施例中，荧光团可以包含但不限于FluoProbes390、FluoProbes 488、FluoProbes 532、FluoProbes 547H、FluoProbes 594、FluoProbes647H、FluoProbes 682、FluoProbes 752和FluoProbes 782、AMCA、DEAC(7-二乙基氨基香豆素-3-羧酸)；7-羟基-4-甲基香豆素-3；7-羟基香豆素-3；MCA(7-甲氧基香豆素-4-乙酸)；7-甲氧基香豆素-3；AMF(4'-(氨甲基)荧光素)；5-DTAF(5-(4,6-二氯三嗪基)氨基荧光素)；6-DTAF(6-(4,6-二氯三嗪基)氨基荧光素)；FAM；6-FAM(6-羧基荧光素)；5(6)-FAM尸胺；5-FAM尸胺；5(6)-FAM乙二胺；5-FAM乙二胺；5-FITC(FITC异构体I；荧光素-5-异硫氰酸酯)；5-FITC尸胺；荧光素-5-马来酰亚胺；5-IAF(5-碘乙酰胺基荧光素)；6-JOE(6-羧基-4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基荧光素)；5-CRl l0(5-羧基罗丹明110)；6-CRl l0(6-羧基罗丹明110)；5-CR6G(5-羧基罗丹明6G)；6-CR6G(6-羧基罗丹明6G)；5(6)-羧基罗丹明6G尸胺；5(6)-羧基罗丹明6G乙二胺；5-ROX(5-羧基-X-罗丹明)；6-ROX(6-羧基-X-罗丹明)；5-TAMRA(5-羧基四甲基罗丹明)；6-TAMRA(6-羧基四甲基罗丹明)；5-TAMRA尸胺；6-TAMRA尸胺；5-TAMRA乙二胺；6-TAMRA乙二胺；5-TMR C6马来酰亚胺；6-TMR C6马来酰亚胺；TR C2马来酰亚胺；TR尸胺；5-TRITC；G异构体(四甲基罗丹明-5-异硫氰酸酯)；6-TRITC；R异构体(四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯)；丹酰尸胺(5-二甲基氨基萘-l-(N-(5-氨基戊基))磺酰胺)；EDANS C2马来酰亚胺；荧光胺；NBD；和吡咯亚甲基和其衍生物。
在一些实施例中，货物包括对环境敏感的荧光染料或荧光团。对环境敏感的荧光染料或荧光团的实例包含5,6-羧基-二乙基对甲氨基酚(pH敏感)、花菁(膜电位敏感)和尼罗红羧酸(脂质敏感)。
在一些实施例中，货物包括光敏剂。光敏剂是在光诱导的消融治疗中有用的任何试剂或化合物。当暴露于特定波长的光下时，此类试剂与分子氧反应产生单线态氧，其具有高度的细胞毒性。因此，包括光敏剂的本发明的靶向分子可以用于局部损伤神经。在某些实施例中，光敏剂是卟啉、二氢卟酚或染料。光敏剂的实例包含卟啉、原蛋白IX、嘌呤、维替泊芬、HPPH、替莫泊芬、亚甲蓝、光敏素、原蛋白、血卟啉、他拉泊芬、苯并卟啉衍生物单酸、5-氨基乙酰丙酸、镥泰克萨菲瑞、金属酞菁、金属萘酞菁磺基苯并卟啉、金属萘菁、四磺酞菁锌、菌绿素、金属卟吩、氯衍生物、四(间-羟基苯基)二氢卟酚(mTHPC)、脱镁叶绿酸、二溴荧光素(DBF)、IR700DX、萘酞菁和卟啉衍生物。在一些实施例中，光敏剂通过马来酰亚胺介导的缀合缀合到人类神经元或神经靶向分子的C末端半胱氨酸残基。优选地，本发明的光敏剂被波长介于400nm到700nm之间的光活化。仍更优选地，本发明中的光敏剂在627nm和660nm处被活化。可以识别最佳的光剂量，以最大程度地杀死神经，对相邻组织的伤害最小。
VI.药物
在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子进一步包括药物。作用于神经元或神经(或其组分)的所有药物都涵盖在术语“药物”内。本文给出的药物的具体实例是说明性的，并不意味着限制与本文公开的靶向分子一起使用的药物。在一些实施例中，肽或适体直接结合到药物。在一些实施例中，肽或适体间接(例如，通过连接子)结合药物。在一些实施例中，两个或更多个肽或适体直接或间接结合到药物。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ IDNO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)，QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKK SSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
在一些实施例中，药物选自以下药物：诱导细胞死亡(凋亡或坏死)，抑制细胞死亡(凋亡或坏死)，抑制神经元或神经信号的传递(即，电化学冲动)，抑制神经递质的释放，激动GABA受体的活性，部分或完全抑制神经元的复极化，破坏离子通道的传导或其组合。
在一些实施例中，药物是抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂或其组合。
在一些实施例中，药物是美其敏、苯海拉明、乘晕宁、氯雷他定、奎硫平、美吡拉敏、吡哌咯生、安他唑啉、卡比沙明、抗敏安、克立马丁、苯吡胺、马来酸氯苯吡胺、扑尔敏、右旋氯苯吡胺、溴苯那敏、苯丙烯啶、赛克利嗪、氯环嗪、羟嗪、异丙嗪、阿利马嗪、异丁嗪、赛庚啶、阿扎他定、酮替芬、奥沙米特、盐酸美克洛嗪、盐酸异丙嗪、桂利嗪、双羟萘酸羟嗪、盐酸倍他司汀、阿普唑仑、溴西泮、溴替唑仑、利眠宁、氯硝西泮、氯氮、安定、艾司唑仑、氟硝安定、氟胺安定、氯普唑他、氯羟去甲安定、氯甲西泮、咪达唑仑、尼美西泮、硝基安定、去甲羟基安定、环丙安定、羟基安定、三唑仑、氯硝西泮、安定、氯羟去甲安定、速尿灵、布美他尼、依他尼酸、加巴喷丁、普瑞巴林、蝇蕈醇、巴氯芬、阿米替林、去甲替林、三甲丙咪嗪、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、吡咯糖、后马托品、莨菪碱、阿托品、苯坐卡因、卡替卡因、辛可卡因、环美卡因、利多卡因、丙胺卡因、丙氧卡因、丙美卡因、丁卡因、妥卡尼、美索卡因、立痛定、奥卡西平、苯妥英、丙戊酸、丙戊酸钠、桂利嗪、氟桂利嗪、尼莫地平、促甲状腺激素释放激素、氨磷汀(也称为WR-2721或)；氨基甲酸酯化合物(例如，2-苯基-1,2-乙二醇单碳酸酯和二氨基甲酸酯)；LY450139(羟基戊基单苯并己内酰胺)；L685458(lS-苄基-4R[1-[l-S-氨基甲酰基-2-苯乙基氨基甲酰基)-lS-3-甲基丁基氨基甲酰基]-2R-羟基-5-苯基戊基}氨基甲酸叔丁酯)；LY411575(N2-[(2S)-2-(3,5-二氟苯基)-2-羟基乙酰基]-N1[(7S)-5-甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-二苯并[bid]阿齐平-7基]-L-丙氨酰胺)；MK-0752；塔伦氟比；BMS-299897(2-[(R)-1-[[(4-氯苯基)磺酰基](2,5-二氟苯基)氨基]乙基]-5-氟苯丙酸；CNQX(6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮)；NBQX(2,3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰基-苯并[f]喹喔啉-2,3-二酮)；DNQX(6,7-二硝基喹喔啉-2,3-二酮)；尿酸；2,3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰基苯并[fj喹喔啉；1-氨基金刚烷；右美沙芬；右啡烷；伊博加因；氯胺酮；一氧化二氮；苯环利定；利鲁唑；丹参胺；美金刚；二唑西平；阿替加奈尔；瑞克西米德；7-氯基脲酸酯；DCKA(5,7-二氯基脲酸)；犬尿酸；1-氨基环丙烷甲酸(ACPC)；AP7(2-氨基-7-膦基庚酸)；APV(R-2-氨基-5-膦基戊酸酯)；CPPene(3-[(R)-2-羧基哌嗪-4-基]-丙-2-烯-1-膦酸)；(+)-(1S,2S)-1-(4-羟基-苯基)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶子基)-1-丙醇；(1S,2S)-1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-(4-羟基-4-苯基哌啶基)-1-丙醇；(3R,4S)-3-(4-(4-氟苯基)-4-羟基哌啶-1-基-)-色满-4；7-二醇；(IR*,2R*)-1-(4-羟基-3-甲基苯基)-2-(4-(4-氟-苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-丙-1-醇甲磺酸酯)；LY389795((-)-2-硫杂-4-氨基双环己烷-4,6-二羧酸酯)；LY379268((-)-2-氧杂-4-氨基双环己烷-4,6-二羧酸酯)；LY354740((+)-2-氨基双环己烷-2,6-二羧酸酯)；DCG-IV((2S,2'R,3'R)-2-(2',31-二羧基环丙基)甘氨酸)；2R,4R-APDC(2R,4R-4-氨基吡咯烷-2,4-二羧酸酯)；(S)-3C4HPG((S)-3-羧基-4-羟基苯基甘氨酸)；(S)-4C3HPG((S)-4-羧基-3-羟基苯基甘氨酸)；L-CCG-1((2S,1'S,2'S)-2-(羧基环丙基)甘氨酸)；ACPT-1((1S,3R,4S)-1-氨基环戊烷-1,3,4-三羧酸)；L-AP4(L-(+)-2-氨基-4-膦酰基丁酸)；(S)-3,4-DCPG((S)-3,4-二羧苯基甘氨酸)；(RS)-3,4-DCPG((RS)-3,4-二羧苯基甘氨酸)；(RS)-4-膦酰基苯基甘氨酸((RS)PPG)；AMN082(,N'-双(二苯甲基)-1,2-乙二胺二盐酸盐)；DCG-IV((2S,2'R,3'R)-2-(2',3'-二羧基环丙基)甘氨酸)；AMN082；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；氨基糖苷类抗生素(例如，庆大霉素和丁胺卡那霉素)；大环内酯类抗生素(例如，红霉素)；糖肽抗生素(例如，万古霉素)；水杨酸；尼古丁；象牙烯宁-14-羧酸乙酯；西帕替林(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-(2,3,5-三氯苯基)-嘧啶-4-胺)；阿米洛利(3,5-二氨基-N-(氨基亚氨基甲基)-6-氯吡嗪羧酰胺盐酸盐)；卡马西平(5H-二苯并[b,f]阿氮平-5-甲酰胺)；TTX(八氢-12-(羟甲基)-2-亚氨基-5,9:7,10a-二甲基邻-10aH-[1,3]二氧辛基[6,5-d]嘧啶-4,7,10,11,12-戊甲苯)；RS100642(1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-乙基氨基丙烷盐酸盐)；美西律((1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-氨基丙烷盐酸盐))；QX-314(N-(2,6-二甲基苯基氨基甲酰基甲基)三乙基溴化铵)；苯妥英钠(5,5-二苯基咪唑烷-2,4-二酮)；拉莫三嗪(6-(2,3-二氯苯基)-1,2,4-三嗪-3,5-二胺)；4030W92(2,4-二氨基-5-(2,3-二氯苯基)-6-氟甲基嘧啶)；BW1003C87(5-(2,3,5-三氯苯基)对嘧啶-2,4-1.1乙磺酸酯)；QX-222(2-[(2,6-二甲基苯基)氨基]-N,N,N-三甲基-2-氧杂氯化铵)；氨溴索(反式-4-[[(2-氨基-3,5-二溴苯基)甲基]氨基]环己醇盐酸盐)；R56865(N-[1-(4-(4-氟苯氧基)丁基]-4-哌啶基-N-甲基-2-苯并噻唑胺)；鲁贝唑；阿吗灵((17R,21alpha)-ajmalan-17,21-二醇)；普鲁卡因酰胺(4-氨-N-(2-二乙基氨基乙基-苯甲酰胺盐酸盐)；氟卡尼特；利鲁唑；曲美诺龙放线菌素；地塞米松；普罗嗪；普氯哌嗪；三甲苯甲酰胺；三乙基哌嗪；多拉西酮；格拉司琼；恩丹西酮；托烷司琼；和哌替司琼；氟哌利多；氯苯甲嗪；奋乃静；硫乙拉嗪；多潘立酮；丙啶醇；氟哌啶醇；氯丙嗪；异丙嗪；丙氯哌嗪；甲氧氯普胺；屈拉比诺；萘比隆；sativex；莨菪碱；地塞米松；三甲基苯甲胺；艾美特罗；异丙酚；麝香酚；萘啶-羧酰胺基；放线菌素；17-N-羧酰胺基酰胺-17-氨苄青霉素；安吖啶；氨基蝶呤；蒽环类；抗肿瘤药；抗瘤酮；5-氮杂胞苷；硫唑嘌呤；BL22；苯达莫司汀；比利考达；博来霉素；硼替佐米；溴化他汀；白消安；凯里霉素；喜树碱；卡培他滨；卡铂；瘤可宁；顺铂；克拉屈滨；氯法拉滨；阿糖胞苷；达卡巴嗪；达沙替尼；柔红霉素；地西他滨；二氯乙酸；圆皮海绵内酯；多西他赛；阿霉素；表柔比星；埃博霉素；艾日布林；雌莫司汀；依托泊苷；依喜替康；脱胰岛素；铁氨酚；氟尿苷；氟达拉滨；氟尿嘧啶；磷雌酚；福莫司汀；吉西他滨；羟基脲；IT-101；伊达比星；异环磷酰胺；咪喹莫特；伊立替康；伊洛富芬；依沙比酮；拉尼基达；拉帕替尼；来那度胺；洛莫司汀；鲁托替康；磷酰胺；马索罗酚；氮芥；美法仑；巯基嘌呤；丝裂霉素；米托坦；米托蒽醌；奈拉滨；尼洛替尼；奥利美生；奥沙利铂；PAC-I；甲氨蝶呤(Amethopterin)；环磷酰胺(/>)；沙利度胺(THALID)；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；胍血生；匹克生琼；普卡霉素；甲苄肼；蛋白酶体抑制剂(如硼替佐米)；雷替曲塞；蝴蝶霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)铵；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；N-乙酰半胱氨酸；维生素E；维生素C；维生素A；叶黄素；谷胱甘肽硒；褪黑激素；多酚；类胡萝卜素；辅酶Q-IO；依布硒(2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮(也称为PZ 51或DR3305)；L-蛋氨酸；氮杂烯基氮酮；L-(+)-麦角硫氨酸；CAPE(咖啡酸苯乙基酯)；二甲基硫脲；二甲基亚砜；二氟丁醚钠；己酮可可碱；MCI-186；氨溴索；U-83836E；MitoQ(甲磺酸对甲醌)；艾地苯醌(2-(10-羟基癸基)-5,6-二甲氧基-3-甲基-环己-2,5-二烯-1,4-二酮)；去铁胺；羟基苄基乙二胺；富勒烯醇-1，吡咯烷二硫代氨基甲酸酯；乙酰肉碱；硫辛酸；二苯乙烯；查尔酮；黄酮；异黄酮；拉瓦农；花青素；儿茶素；异烟酰胺；双嘧达莫；ZM 336372；喜树碱；香豆酚；去甲二氢愈创木酸；七叶亭；SRT-1720；SRT-1460；SRT-2183；氨基胍；1-氨基-2-羟基胍对甲苯磺酸盐；GED；溴隐亭甲磺酸盐；地塞米松；SDMA；ADMA；L-NMMA；L-NMEA；D-MMA；L-NIL；L-NNA；L-NPA；L-NAME；L-VNIO；氯化二苯撑碘鎓；2-乙基-2-硫代伪脲；氟哌啶醇；L-NIO；MEG；SMT；SMTC；7-Ni；nNOS抑制剂；1,3-PBITU；L-硫瓜氨酸；TRIM；MTR-105；BBS-I；BBS-2；ONO-1714；GW273629；GW 274150；PPA250；AR-R17477；AR-R18512；螺喹唑酮；1400W；S-NC；NTG；SNP；毒胡萝卜素；VEGF；缓激肽；ATP；1-磷酸鞘氨醇；雌激素；血管生成素；乙酰胆碱；SIN-I；GEA 3162；GEA；GEA 5024；GEA 5538；SNAP；莫斯多明；CNO-4；CNO-5；DEA/NO；IPA/NO；SPER/NO；SULFI/NO；OXI/NO；DETA/NO；尼可地尔；米诺地尔，左色满卡林；莱马卡林；克罗卡林；L-735,334；瑞替加滨；氟吡汀；BMS-204352；DMP-543；利诺吡丁；XE991；4-AP；3,4-DAP；E-4031；DIDS；Way 123,398；CGS-12066A；多非利特；索他洛尔；蜂毒明肽；胺碘酮；阿齐米利；溴苄胺；氯非铵；泰地米尔；伊布利特；司美替利；尼非卡兰；淀粉样毒素；ATP；ADP；UTP；UDP；UDP-葡萄糖；腺苷；2-MESATP；2-MESADP；ABMEATP；DATPAS；ATPrS；BZ-ATP；MRS2703；丹佛索四钠；MRS2365；MRS 2690；PSB0474；A-317491；RO-3(罗氏)；苏拉明；PPADS；PPNDS；DIDS；5-磷酸吡哆醛；5-(3-溴苯基)-1,3-二氢-2H-苯并呋喃-[3,2-e]-1,4-二氮杂-2-酮；烟碱蓝；淡蓝色；伊维菌素；A-438079；A-740003；NF023；NF449；NFI 10；NF157；MRS 2179；NF279；MRS 2211；MRS 2279；MRS 2500四钠盐；TNP-ATP；四甲基吡嗪；Ip5I；jQγ-羧甲基ATP；βγ-氯代磷酸亚甲基ATP；KN-62；菠菜啡；米诺环素；SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)IH-咪唑)；PD169316(4-(4-氟苯基)-2-(4-硝基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑)；SB 202190(4-(4-氟苯基)-2-(4-羟基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；RWJ 67657(4-[4-(4-氟苯基)-1-(3-苯基丙基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]-3-丁炔-1-醇)；SB 220025(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)；D-JNKI-I((D)-hJIPi75-i57-DPro-DPro-(D)-HIV-TAT57-48)；AM-111(Auris)；SP600125(蒽[1,9-cd]吡唑-6(2H)-酮)；JNK抑制剂I((L)-HIV-TAT48-57-PP-JBD20)；JNK抑制剂III((L)-HIV-TAT47-57-gaba-c-Junδ33-57)；AS601245(1,3-苯并噻唑-2-基(2-[[2-(3-吡啶基)乙基]氨基]-4嘧啶基)乙腈)；JNK抑制剂VI(H2N-RPKRPTTLNLF-NH2)；JNK抑制剂VIII(N-(4-氨基-5-氰基-6-乙氧基吡啶-2-基)-2-(2,5-二甲氧基苯基)乙酰胺)；JNK抑制剂IX(N-(3-氰基-4,5,6,7-四氢-1-苯并噻吩-2-基)-1-萘酰胺)；地美洛尔(3,3'-亚甲基双(4-羟基香豆素))；SC-236(4-[5-(4-氯苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基对苯磺酰胺)；CEP-1347(Cephalon)；CEP-11004(Cephalon)；包括至少一部分Bcl-2多肽的人工蛋白质；重组FNK；V5(也称为Bax抑制剂肽V5)；Bax通道阻滞剂((±)-1-(3,6-二溴咔唑-9-基)-3-哌嗪-1-基-丙-2-醇)；Bax抑制肽P5(也称为Bax抑制剂肽P5)；Kp7-6；FAIM(S)(Fas细胞凋亡抑制分子-短)；FAIM(L)(Fas细胞凋亡抑制分子-长)；Fas:Fc；FAP-I；NOK2；F2051；F1926；F2928；ZB4；Fas M3 mAb；EGF；740Y-P；SC 3036(KKHTDDGYMPMSPGVA)；PI 3-激酶激活剂(Santa Cruz Biotechnology,Inc.)；Pam3Cys((S)-(2,3-双(棕榈酰氧基)-(2RS)-丙基)-N-棕榈酰-(R)-Cys-(S)-Ser(S)-Lys4-OH，三盐酸盐)；Actl(NF-kB激活剂1)；抗DcB抗体；乙酰基-11-酮基-b-乳香酸；穿心莲内酯；咖啡酸；苯乙基酯(CAPE)；胶质毒素；异海洛因；NEMO-结合域结合肽(DRQIKIWFQNRRMKWKKTALDWSWLQTE)；NF-kB活化抑制剂(6-氨基-4-(4-苯氧基苯基乙基氨基)喹唑啉)；NF-kB活化抑制剂II(4-甲基-N1-(3-苯丙基)苯-1,2-二胺)；NF-kB活化抑制剂III(3-氯-4-硝基-N-(5-硝基-2-噻唑基)-苯甲酰胺)；NF-kB活化抑制剂IV((E)-2-氟-4'-甲氧基苯乙烯)；NF-kB活化抑制剂V(5-羟基-(2,6-二异丙基苯基)-IH-异吲哚-1,3-二酮)；NF-kB SN50(AAV ALLP AVLLALL AP VQRKRQKLMP)；冬凌草甲素；爬山虎内酯；PPM-18(2-苯甲酰基氨基-1,4-萘醌)；Rol06-9920；柳氮磺吡啶；TIRAP抑制剂肽(RQIKiWFNRRMKWKKLQLRD AAPGGAIVS)；醉茄素A；汉黄芩素；BAY11-7082((E)3-[(4-甲基苯基)磺酰基]-2-丙烯腈)；BAY 11-7085((E)3-[(4-叔丁基苯基)磺酰基]-2-丙烯腈)；(E)-辣椒素；硫代苹果酸(ATM或AuTM)；乙二胺；次氧化物；IKK抑制剂III(BMS-345541)；IKK抑制剂VII；IKK抑制剂X；IKK抑制剂II；IKK-2抑制剂IV；IKK-2抑制剂V；IKK-2抑制剂VI；IKK-2抑制剂(SC-514)；IkB激酶抑制剂肽；IKK-3抑制剂IX；ARRY-797(Array BioPharma)；SB-220025(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)；SB-239063(反式-4-[4-(4-氟苯基)-5-(2-甲氧基-4-嘧啶基)-1H-咪唑-1-基J环己醇)；SB-202190(4-(4-氟苯基)-2-(4-羟基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；JX-401(-[2-甲氧基-4-(甲硫基)苯甲酰基]-4-(苯甲基)哌啶)；PD-169316(4-(4-氟苯基)-2-(4-硝基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑)；SKF-86002(6-(4-氟苯基)-2,3-二氢-5-(4-吡啶基)咪唑并[2,1-b]噻唑二盐酸盐)；SB-200646(N-(1-甲基-1H-吲哚-5-基)-N'-3-吡啶基脲)；CMPD-1(2'-氟-N-(4-羟苯基)-[1,1'-联苯]-4-丁酰胺)；EO-1428((2-甲基苯基)-[4-[(2-氨基-4-溴苯基)氨基]-2-氯代苯基]甲酮)；SB-253080(4-[5-(4-氟苯基)-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-1H-1咪唑-4-基]吡啶)；SD-169(1H-吲哚-5-甲酰胺)；SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；TZP-101(Tranzyme Pharma)；TZP-102(Tranzyme Pharma)；GHRP-6(生长激素释放肽6)；GHRP-2(生长激素释放肽2)；EX-1314(Elixir Pharmaceuticals)；MK-677(Merck)；L-692,429(丁酰胺，3-氨基-3-甲基-N-(2,3,4,5-四氢-2-氧代-1-((2'-(1H-四唑-5-基)(1,1'-联苯基)-4-基)甲基)-1H-1-苯并氮杂-3-基)-,(R)-)；EP1572(Aib-DTrp-DgTrp-CHO)；地尔硫卓；地尔硫卓的代谢产物；BRE(脑和生殖器官表达蛋白)；维拉帕米；尼莫地平；地尔硫卓；ω-芋螺毒素；GVIA；氨氯地平；非洛地平；拉西地平；米贝地尔；NPPB(5-硝基-2-(3-苯基丙基氨基)苯甲酸)；氟硝嗪；促红细胞生成素；管道；血红素；巴西木素；z-VAD-FMK(苄氧羰基-Val-Ala-Asp(OMe)-氟甲基酮)；z-LEHD-FMK(苄氧羰基-Leu-Glu(OMe)-His-Asp(OMe)-氟甲基酮)；B-D-FMK(boc-天冬氨酰(Ome)-氟甲基酮)；Ac-LEHD-CHO(N-乙酰基-Leu-Glu-His-Asp-CHO)；Ac-IETD-CHO(N-乙酰基-Ile-Glu-Thr-Asp-CHO)；z-IETD-FMK(苄氧羰基-Ile-Glu(OMe)-Thr-Asp(OMe)-氟甲基酮)；FAM-LEHD-FMK(苄氧羰基Leu-Glu-His-Asp-氟甲基酮)；FAM-LETD-FMK(苄氧羰基Leu-Glu-Thr-Asp-氟甲基酮)；Q-VD-OPH(喹啉-VaI-ASp-CH2-O-Ph)；XIAP；cIAP-1；cIAP-2；ML-IAP；ILP-2；NAIP；存活素；布鲁斯；IAPL-3；弗罗林；亮肽；PD-150606(3-(4-碘苯基)-2-巯基-(Z)-2-丙酸)；MDL-28170(Z-Val-Phe-CHO)；钙蛋白酶素；乙酰-钙抑素；MG 132(N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸-N-[(1S)-1-甲酰基-3-甲基丁基]-L-亮氨酰胺)；MYODUR；BN82270(Ipsen)；BN 2204(Ipsen)；AHLi-11(Quark Pharmaceuticals)，mdm2蛋白，菲丝菌素-α(1-(4-甲基苯基)-2-(4,5,6,7-四氢-2-亚氨基-3(2H)-苯并噻唑基)乙酮)；反式-二苯乙烯；顺式-二苯乙烯；白藜芦醇；苦味酚；土大黄苷；脱氧土大黄苷；紫铆因；查耳酮；异液态素；紫铆因；4,2',4'-三羟基查耳酮；3,4,2',4',6'-五羟基查耳酮；黄酮；莫林；非瑟定；木犀草素；槲皮素；山奈酚；芹菜素；棉酚素；杨梅素；6-羟基芹菜素；5-羟基黄酮；5,7,3',4',5'-五羟基黄酮；3,7,3',4',5'-五羟基黄酮；3,6,3',4'-四羟基黄酮；7,3',4',5'-四羟基黄酮；3,6,2',4'-四羟基黄酮；7,4'-二羟基黄酮；7,8,3',4'-四羟基黄酮；3,6,2',3'-四羟基黄酮；4'-羟基黄酮；5-羟基黄酮；5,4'-二羟基黄酮；5,7-二羟基黄酮；黄豆苷元；金雀异黄素；柚皮苷；黄烷酮；3,5,7,3',4'-五羟基黄酮；盐酸壬酸；氯化氰；氯化翠雀碱；(-)-表儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4^；(-)-儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',40)；(-)-加儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4',5O(+)-儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4^；(+)-表儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',41J；日扁柏素(b-硫磺普林；2-羟基-4-异丙基-2,4,6-环庚三烯-1-酮)；L-(+)-麦角硫氨酸((S)-a-羧基-2,3-二氢-N,N,N-三甲基-2-硫代-1H-咪唑4-乙胺内盐)；咖啡酸苯基酯；MCI-186(3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)；HBED(N,N'-二-(2-羟基苄基^乙二胺-HN'-二乙酸《H2O)；氨溴索(反式-4-(2-氨基-3,5-二溴苄氨基)环己烷-HCl；和U-83836E((-)-2-((4-(2,6-二-1-吡咯烷基-4-嘧啶基)-1-哌嗪基)甲基)-3,4-二氢-2,5,7,8-四甲基-2H-1-苯并吡喃-6-醇*2HCl)；/5-1-5-甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖；/S-D-I'-5-甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖呋喃糖苷；/3-1'-4,5-二甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖；/3-D-1'-4,5-二甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖呋喃糖苷；1-萘基PP 1(1-(1,1-二甲基乙基)-3-(1-萘基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；熏草菌素A(5-[[(2,5-二羟基苯基)甲基][(2-羟基苯基)甲基]氨基]-2-羟基苯甲酸)；MNS(3,4-亚甲基二氧基-b-硝基苯乙烯)；PP 1(1-(1,1-二甲基乙基)-1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；PP2(3-(4-氯苯基)1-(1,1-二甲基乙基)-IH-吡唑并[3,4-d]对嘧啶-4-胺)；KX1-004(Kinex)；KX1-005(Kinex)；KX1-136(Kinex)；KX1-174(Kinex)；KX1-141(Kinex)；KX2-328(Kinex)；KXl-306(Kinex)；KX1-329(Kinex)；KX2-391(Kinex)；KX2-377(Kinex)；ZD4190(Astra Zeneca；N-(4-溴-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-胺)；AP22408(Ariad Pharmaceuticals)；AP23236(Ariad Pharmaceuticals)；AP23451(Ariad Pharmaceuticals)；AP23464(AriadPharmaceuticals)；AZD0530(Astra Zeneca)；AZM475271(M475271；Astra Zeneca)；达沙替尼(N-(2-氯-6-甲基苯甲基)-2-(6-(4-(2-羟乙基)-哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基氨基)噻唑-5-甲酰胺)；GN963(反式-4-(6,7-二甲氧基喹喔啉-2基氨基)环己醇硫酸盐)；博舒替尼(4-((2,4-二氯-5-甲氧基苯基)氨基)-6-甲氧基-7-(3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙氧基)-3-喹啉甲腈)；或其组合。
VII.荧光部分
在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子进一步包括荧光部分(例如，荧光蛋白、肽或荧光染料分子)。所有荧光部分都涵盖在术语“荧光部分”内。本文给出的荧光部分的具体实例是说明性的，并不意味着限制与本文公开的靶向分子一起使用的荧光部分。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ IDNO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(HNP401-C-2；SEQID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)，QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ IDNO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，肽不是NTQTLAKAPEHT(NP41；SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，肽或适体直接结合到荧光部分。在一些实施例中，肽或适体间接(例如，通过连接子)结合到荧光部分。在一些实施例中，肽或适体在其N末端、其C末端或在肽或适体的内部位置(例如，内部氨基酸)处结合到荧光部分。在一些实施例中，两个或更多个肽或适体直接或间接结合到单个荧光部分。
荧光染料的实例包含但不限于氧杂蒽(例如，罗丹明、对甲氨基酚和荧光素和其衍生物)；比马内斯；香豆素和其衍生物(例如，伞形酮和氨甲基香豆素)；芳香胺(例如，丹磺酰基；方酸染料)；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚甲炔；氧杂苯并蒽；呫吨；吡喃盐；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；稀土金属螯合物；和此类染料的衍生物。
在一些实施例中，荧光部分是荧光素染料。荧光素染料的实例包含但不限于5-羧基荧光素、5-异硫氰酸荧光素和6-羧基荧光素、5,6-二羧基荧光素、5-(和6)-磺基荧光素、砜基荧光素、琥珀酰基荧光素、5-(和6)-羧基SNARF-1、羧基荧光素磺酸盐、羧基荧光素两性离子、碳氧荧光素季铵盐、羧基荧光素膦酸酯、羧基荧光素GABA、5'(6')-羧基荧光素、羧基荧光素-cys-Cy5和荧光素谷胱甘肽。
在一些实施例中，荧光部分是罗丹明染料。罗丹明染料的实例包含但不限于四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯、5-羧基四甲基罗丹明、5-羧基对甲氨基酚衍生物、羧基罗丹明110、四甲基和四乙基罗丹明、二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明、二萘基罗丹明、罗丹明101磺酰氯(以TEXAS的商品名出售)。
在一些实施例中，荧光部分是花青染料。花青染料的实例包含但不限于Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7。
在一些实施例中，荧光部分是肽。在一些实施例中，荧光部分是绿色荧光蛋白(GFP)。在一些实施例中，荧光部分是GFP的衍生物(例如，EBFP、EBFP2、石青、mKalamal、ECFP、天蓝、CyPet、YFP、黄水晶、Venus、YPet)。
通过任何合适的方法检测荧光标记。例如，可以通过用适当波长的光激发荧光染料并且检测所得荧光来检测荧光标记，例如通过显微镜、目测、通过照相胶卷，通过使用电子检测器，如电荷耦合装置(CCD)、光电倍增管等。
在一些实施例中，荧光部分缀合到高分子量分子，如水溶性聚合物，包含但不限于葡聚糖、PEG、血清白蛋白或聚(酰胺基胺)树状聚合物。
根据本发明的示例性靶向分子包含：5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:105)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP402；SEQID NO:106)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:107)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:108)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:109)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:110)，Ac-PYYVVKKSSGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:111)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKK GGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:112)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:113)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:114)和Ac-SGQVPWEEPGGC-5FAM(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:115)。
VIII.连接子
在一些实施例中，将货物(例如，荧光部分、光敏剂或药物)直接连接到人类神经元或神经靶向分子，例如在靶向肽的末端。替代性地，在一些实施例中，将货物(例如，荧光部分或药物)间接连接到本文公开的靶向分子(例如，通过连接子)。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子3的HNP40；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ IDNO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)和Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ IDNO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
如本文所用，“连接子”是能够结合(例如，共价地)本文所公开的靶向分子的任何分子。连接子包含但不限于直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子(例如D-或L-氨基酸)、亲脂性残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子和聚醚连接子(例如PEG)。例如，聚(乙二醇)连接子可从俄亥俄州Powell的Quanta Biodesign获得。这些连接子任选地具有酰胺键、巯基键或杂功能键。
在一些实施例中，连接子通过共价键结合到本文公开的靶向分子。在一些实施例中，共价键包括醚键、硫醚键、胺键、酰胺键、碳-碳键、碳-氮键、碳-氧键或碳-硫键。
在一些实施例中，连接子是柔性的。在一些实施例中，连接子是刚性的。
在一些实施例中，连接子包括线性结构。在一些实施例中，连接子包括非线性结构。在一些实施例中，连接子包括分支结构。在一些实施例中，连接子包括环状结构。
在一些实施例中，连接子是烷基。在一些实施例中，连接子是杂烷基。
在一些实施例中，连接子是亚烷基。在一些实施例中，连接子是亚烯基。在一些实施例中，连接子是亚炔基。在一些实施例中，连接子是杂亚烷基。
“烷基”是指脂肪族烃基。烷基部分可以是饱和烷基或不饱和烷基。取决于结构，烷基可以是单自由基或双自由基的(即亚烷基)。
“烷基”部分可以具有1个到10个碳原子(当本文中出现时，如“1到10”的数值范围是指给定范围内的每个整数；例如，“1个到10个碳原子”是指烷基可以由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等组成，至多并包含10个碳原子，但是本定义也涵盖未指定数字范围的术语“烷基”的出现。烷基也可以是具有1个到6个碳原子的“低级烷基”。本文描述的化合物的烷基可以称为“Ci-C4烷基”或类似的名称。仅作为实例，“C1-C4烷基”表示在烷基链中存在一个到四个碳原子，即，烷基链选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基包含但绝不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、乙烯基、丙烯基、丁烯基等。
在一些实施例中，连接子包括环结构(例如，芳香基)。如本文所用，术语“环”是指任何共价闭合的结构。环包含例如碳环(例如芳香基和环烷基)、杂环(例如杂芳香基和非芳香族杂环)、芳香族(例如芳香基和杂芳香基)和非芳香族(例如环烷基和非芳香族杂环)。环可以任选地被取代。环可以是单环或多环的。
如本文所用，术语“芳香基”是指芳香族环，其中形成环的原子中的每一个是碳原子。芳香基环可以由五个、六个、七个、八个、九个或九个以上的碳原子形成。芳香基可以任选地被取代。芳香基的实例包含但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、芴基和茚基。取决于结构，芳香基可以是单自由基或双自由基的(即亚芳香基)。
术语“环烷基”是指单环或多环非芳香族自由基，其中形成环的原子(即骨架原子)中的每一个是碳原子。环烷基可以是饱和的或部分不饱和的。环烷基包含具有3个到10个环原子的基团。环烷基包含但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
在一些实施例中，环是环烷烃。在一些实施例中，环是环烯烃。
在一些实施例中，环是芳香族环。术语“芳香族的”是指具有含有4n+2个π电子的离域π电子系统的平面环，其中n是整数。芳香族环可以由五个、六个、七个、八个、九个或九个以上的原子形成。芳香族可以任选地被取代。术语“芳香族”包含碳环芳香基(例如，苯基)和杂环芳香基(或“杂芳香基”或“杂芳香族”)基团(例如，吡啶)两者。术语包含单环或稠环多环(即，共享相邻碳原子对的环)基团。
在一些实施例中，环是杂环。术语“杂环”是指含有一个到四个各自选自O、S和N的杂原子的杂芳香族和杂脂环基团，其中每个杂环基在其环系统中具有4个到10个原子，并且前提是所述基团的环不含两个相邻的O或S原子。非芳香族杂环基包含在其环系统中仅具有3个原子的基团，但是芳香族杂环基在其环系统中必须具有至少5个原子。杂环基包含苯并稠合的环系统。3元杂环基的实例是吖丙啶基。4元杂环基的实例是氮杂环丁烷基(azetidinyl)(衍生自氮杂环丁烷)。5元杂环基的实例是噻唑基。6元杂环基的实例是吡啶基，并且10元杂环基的实例是喹啉基。非芳香族杂环基的实例是吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、噻吨基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、氧杂庚基、二氮杂基、硫氮杂基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二恶烷基、1,3-二氧杂戊基、吡唑啉基、二噻吩基、二硫代丙氨酰基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、3H-吲哚基和喹啉基。芳香族杂环基的实例是吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异恶唑基、噻唑基、恶唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、肉桂基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基，异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、恶二唑基、噻二唑基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和吡啶基。在可能的情况下，前述基团可以是C连接的或N连接的。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N连接)或吡咯-3-基(C连接)。进一步，衍生自咪唑的基团可以是咪唑-1-基或咪唑-3-基(两者N连接)或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基(全部C连接)。杂环基包含苯并稠合的环系统和被一个或两个氧代(＝0)部分，如吡咯烷-2-酮取代的环系统。取决于结构，杂环基可以是单自由基或双自由基的(即，杂环基)。
在一些实施例中，环是稠合的。术语“稠合的”是指其中两个或更多个环共享一个或多个键的结构。在一些实施例中，环是二聚体。在一些实施例中，环是三聚体。在一些实施例中，环被取代。
术语“碳环”或“碳环”是指环，其中形成环的原子中的每一个是碳原子。碳环包含芳香基和环烷基。因此，术语将碳环与杂环(“杂环”)区分开，其中环主链含有至少一个与碳不同的原子(即杂原子)。杂环包含杂芳基和杂环烷基。碳环和杂环可以被任选地取代。
在一些实施例中，连接子被取代。术语“被任选地取代的”或“被取代的”是指所提及的基团可以被选自以下的一个或多个另外的基团单独和独立地取代：Ci-Ce烷基、C3-Cg环烷基、芳香基、杂芳基、C2-C6杂脂环族、羟基、Ci-C6烷氧基、芳氧基、Ci-C6烷硫基、芳硫基、Ci-C6烷基亚砜、芳基亚砜、Ci-C6烷基砜、芳基砜、氰基、卤基、C2-C8酰基、C2-C8酰氧基、硝基、Ci-C6卤烷基、Ci-C6氟代烷基和氨基，包含Ci-C6烷氨基和其保护的衍生物。举例来说，任选的取代基可以是LSRS，其中每个Ls独立地选自键、-O-、-C(＝O)-、-S-、-S(＝O)-、-S(O)2-、-NH-、-NHC(O)-、-C(O)NH-、S(O)2NH-、-NHS(O)2-、-OC(O)NH-、-NHC(O)O-、-(CpC6烷基)-或(C2-C6烯基)-；并且每个Rs独立地选自H、(Ci-C4烷基)、(C3-C8环烷基)、杂芳基、芳香基和Ci-C6杂烷基。任选地取代的非芳香族基团可以被一个或多个氧代(＝0)取代。可以形成上述取代基的保护性衍生物的保护基是本领域技术人员已知的。
在一些实施例中，具有与一个分子(例如，靶向分子)上的基团具有反应性的一个官能团以及在另一个分子上(例如，荧光部分或药物)具有反应性的另一个基团的双官能团连接子用于形成所需的缀合物。替代性地，在一些实施例中，进行衍生化以提供官能团。因此，例如，还已知在肽上产生游离巯基的方法(参见美国专利第4,659,839号)。连接子可以替代性地包括异双官能团交联剂，其包括两个或更多个不同的反应性基团，所述反应性基团形成可以与靶向分子相互作用的杂环。例如，如半胱氨酸等异双官能团交联剂可以包括胺反应性基团，并且硫醇反应性基团可以与衍生的靶向分子上的醛相互作用。适用于异双官能团交联剂的反应性基团的额外组合包含，例如，胺-和巯基反应性基团；羰基和巯基反应性基团；胺和光反应性基团；巯基和光反应性基团；羰基和光反应性基团；羧酸根和光反应性基团；精氨酸和光反应性基团。异双官能团交联剂的实例包含4-(2-吡啶基二硫代)丁酸N-琥珀酰亚胺基(SPDB)和环己烷-1-羧酸马来酰亚胺基甲基酯(MCC)。
在一些实施例中，由一个或多个氨基酸组成的肽连接子用于连接靶向分子和荧光部分或药物。通常，肽连接子除了连接分子或保持它们之间的某最小距离或其它空间关系外，将不具有特定的生物活性。然而，可以选择连接子的组成氨基酸以影响分子的某些性质，如折叠、净电荷或疏水性。在一些实施例中，肽连接子相对较短，通常少于约10个氨基酸，优选地少于约8个氨基酸，并且更优选地少于5个氨基酸。非限制性说明性实例包含甘氨酸和甘氨酸-丝氨酸连接子，其可以被添加到靶向肽的C末端。在一些实施例中，肽连接子是甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-半胱氨酸(GGGC)连接子、甘氨酸-甘氨酸-半胱氨酸(GGC)连接子、甘氨酸-甘氨酸(GG)连接子或半胱氨酸(C)连接子。在一些实施例中，将GGGC、GGC、GG或C连接子添加到靶向肽的C末端。
IX.进一步修饰
在一些实施例中，本发明的人类神经元或神经靶向分子任选地缀合高分子量分子，所述高分子量分子增加标记的多价和亲和力。在一些实施例中，高分子量分子是水溶性聚合物。合适的水溶性聚合物的实例包含但不限于肽、糖、聚(乙烯基)、聚(醚)、聚(胺)、聚(羧酸)等。在一些实施例中，水溶性聚合物是葡聚糖、聚乙二醇(PEG)、聚氧化烯、聚唾液酸、淀粉或羟乙基淀粉。使用任何合适的方法将肽缀合到水溶性聚合物(参见，Hermanson G.，《生物缀合技术(Bioconjugate Techniques)第2版，学术出版社有限公司，2008)。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ IDNO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYY VVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ IDNO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)和Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，本发明的靶向分子缀合到具有神经营养特性的因子(例如，神经营养蛋白，如神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子-3(NT-3)、神经营养因子-4(NT-4)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)以及具有神经营养特性的非蛋白质小分子)。
在一些实施例中，本发明的靶向分子被修饰以增加溶解度。增加溶解度的肽修饰包含添加一个或多个亲水性氨基酸、PEG部分或两者。在一些实施例中，PEG部分是8-氨基-3,6-二氧杂辛酸(AEEA)；12-氨基-4,7,10-三氧十二烷酸；或15-氨基-4,7,10,13-四氧杂萘-癸酸。在一些实施例中，可以将约一个到十个(例如，一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个)亲水性氨基酸添加到靶向分子的N末端、C末端、内部位置或其任何组合，以增加溶解度。亲水性氨基酸包含D、E、H、K、N、Q、R、S、T和G。在一些实施例中，靶向分子在N末端或C末端处包括K、KK、G或GG。
X.多域靶向分子
在某些实施例中，本文提供的人类神经元或神经靶向分子是包括两个或更多个神经元或神经靶向肽的多域神经元或神经靶向分子，其中第一肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQID NO:2)或DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)；QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)，QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，第一肽包括WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，第一肽包括DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，第一肽包括QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，第一肽包括QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，第一肽包括PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，第一肽包括EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，第一肽包括PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，第一肽包括SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，第一肽包括Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，第一肽包括DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，第一肽包括5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。
多域靶向分子内的两个或更多个神经元或神经靶向肽可以是相同的神经元或神经靶向肽，或者优选地是不同的神经元或神经靶向肽。在一些实施例中，多域靶向分子包括第二肽，所述第二肽包括：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ IDNO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQ ID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQ ID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，第一神经元或神经靶向分子选自由以下组成的组：QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，第二肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQ ID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQ ID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽包括QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽是QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，第二肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，和SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQ ID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQ ID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽包括QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽是QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，第二肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ IDNO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQ ID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQ ID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽包括SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽是SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，第二肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQ ID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽包括5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，第一神经元或神经靶向肽是5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，第二肽选自由以下组成的组：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHP Q(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYY VVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)，5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)，SHSSEFPRSWDMETN(HNP301；SEQ ID NO:29)；SHSMLPSVLD(HNP303；SEQ ID NO:30)；SHSTMKTLSL(HNP305；SEQ ID NO:31)；VAPTKAPLHSPS(NP121；SEQ ID NO:32)，NNLKTGTSAPTG(NP122；SEQ ID NO:33)，HKTAQWPFIAFR(NP123；SEQ ID NO:34)，RLTNAPAYQAPA(NP124；SEQID NO:35)，MQNPLNGKPGR(NP125；SEQ ID NO:36)，THYSRSLTDGTR(NP126；SEQ ID NO:37)，YPSPNRPPNLTN(NP127；SEQ ID NO:38)或NTQTLAKAPEHTG(NP117；SEQ ID NO:39)。
在一些实施例中，多域靶向分子内的神经元或神经靶向肽彼此直接结合。在一些实施例中，多域靶向分子内的神经元或神经靶向肽例如通过连接子或货物彼此间接结合。在一些实施例中，靶向肽以线性方式布置。在一些实施例中，多域靶向分子的靶向肽被布置在分支的结构中。在一些实施例中，多域靶向分子包括两个、三个、四个、五个或更多个神经元或神经靶向肽。
XI.标记方法
在某些实施例中，本文公开了通过使神经元或神经与本文所述的人类神经元或神经靶向分子接触来标记神经元或神经(或任一个的组分)的方法。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)；QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)和QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQID NO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDL NWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，将第一人类神经元或神经靶向分子与第二人类神经元或神经靶向分子组合(同时、同时地或连续)施用。在另外的实施例中，第一靶向分子、第二靶向分子或两者包括货物。在又另外的实施例中，第一靶向分子的货物、第二靶向分子的货物或两者都是荧光部分，其可以是相同的荧光部分或不同的荧光部分。
在一些实施例中，将人类神经元或神经靶向分子与荧光部分(例如，荧光部分不与靶向分子、“游离”荧光部分缀合)组合(同时、同时地或连续)施用。在一些实施例中，荧光部分是荧光素，例如羧基荧光素。
在一些实施例中，接触在体内发生。在一些实施例中，接触在体外发生。
在一些实施例中，对神经元或神经(或其组分)进行标记，用于在外科手术期间进行识别。在一些实施例中，外科手术是癌症外科手术。在一些实施例中，癌症选自由以下组成的组：前列腺癌、肝癌(HCC)、结肠直肠癌、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、头颈癌、甲状腺癌、睾丸癌、尿路上皮癌、肺癌、黑素瘤、睾丸生殖细胞肿瘤、间皮瘤和食道癌。在一些实施例中，癌症是前列腺癌。在一些实施例中，方法包括向将要进行外科手术的受试者施用本文公开的靶向分子。在一些实施例中，方法包括向正在进行外科手术的受试者施用本文公开的靶向分子。在一些实施例中，向患者全身施用本文公开的靶向分子。在一些实施例中，向患者局部施用本文公开的靶向分子。
XII.药物递送
在某些实施例中，本文公开了靶向药物递送的方法。在一些实施例中，本文公开的人类神经元或神经靶向分子将药物递送到特定靶标。在一些实施例中，本文公开的靶向分子将药物递送到神经元或神经。在一些实施例中，所述人类神经元或神经靶向分子进一步包括货物。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ IDNO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ IDNO:20)和QVPWEEPYYVVKK SSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
在一些实施例中，药物是减轻疼痛(疼痛的感知或疼痛刺激剂的活性)的试剂。在一些实施例中，药物是麻醉剂。在一些实施例中，药物是苯佐卡因；卡替卡因；金鸡卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特和曲美卡因；或其组合。
在一些实施例中，药物是调节神经元或神经死亡(例如，通过细胞凋亡或坏死)的试剂。在一些实施例中，药物是细胞毒性剂。在一些实施例中，药物是甲氨蝶呤(Amethopterin)；环磷酰胺/>沙利度胺紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克生琼；普卡霉素；前卡巴嗪；蛋白酶体抑制剂(如硼替佐米)；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；tbioTEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；或其组合。在一些实施例中，药物是促凋亡剂。在一些实施例中，药物是抗凋亡剂。在一些实施例中，药物选自米诺环素；SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；PD 169316(4-(4-氟苯基)-2-(4-硝基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑)；SB 202190(4-(4-氟苯基)-2-(4-羟基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；RWJ 67657(4-[4-(4-氟苯基)-1-(3-苯基丙基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]-3-丁炔-1-醇)；SB 220025(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)；D-JNKI-1((D)-hJIP 175_i 57-DPrO-DPrO-(D)-HIV-TAT57-48)；AM-111(Auris)；SP600125(蒽[1,9-cd]吡唑-6(2H)-酮)；JNK抑制剂I((L)-HIV-T AT48-57-PP-JBD20)；JNK抑制剂III((L)-HIV-TAT47-57-gaba-c-Junδ33-57)；AS601245(1,3-苯并噻唑-2-基(2-[[2-(3-吡啶基)乙基]氨基]-4嘧啶基)乙腈)；JNK抑制剂VI(H2N-RPKRPTTLNLF-NH2)；JNK抑制剂VIII(N-(4-氨基-5-氰基-6-乙氧基吡啶-2-基)-2-(2,5-二甲氧基苯基)乙酰胺)；JNK抑制剂IX(N-(3-氰基-4,5,6,7-四氢-1-苯并噻吩-2-基)-1-萘酰胺)；地美洛尔(3,3'-亚甲基双(4-羟基香豆素))；SC-236(4-[5-(4-氯苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯-磺酰胺)；CEP-1347(Cephalon)；CEP-11004(Cephalon)；包括至少一部分Bcl-2多肽的人工蛋白质；重组FNK；V5(也称为Bax抑制剂肽V5)；Bax通道阻滞剂((±)-1-(3,6-二溴咔唑-9-基)-3-哌嗪-1-基-丙-2-醇)；Bax抑制肽P5(也称为Bax抑制剂肽P5)；Kp7-6；FAIM(S)(Fas细胞凋亡抑制分子-短)；FAIM(L)(Fas细胞凋亡抑制分子-长)；Fas：Fc；FAP-1；N0K2；F2051；Fl 926；F2928；ZB4；Fas M3 mAb；EGF；740Y-P；SC 3036(KKHTDDGYMPMSPGVA)；PI 3-激酶激活剂(圣克鲁斯生物技术有限公司)；Pam3Cys((S)-(2,3-双(对苯二甲酰氧基)-(2RS)-丙基)-N-棕榈酰-(R)-Cys-(S)-Ser(S)-Lys4-OH，三盐酸盐)；Actl(NF-kB激活剂1)；抗DcB抗体；乙酰基-11-酮基-b-乳香酸；穿心莲内酯；咖啡酸苯乙基酯(CAPE)；胶质毒素；异海洛因；NEMO结合域结合肽(DRQIKIWFQNRRMKWKKTALDWSWLQTE)；NF-kB活化抑制剂(6-氨基-4-(4-苯氧基苯基乙基氨基)喹唑啉)；NF-kB活化抑制剂II(4-甲基-N1-(3-苯丙基)苯-1,2-二胺)；NF-kB活化抑制剂III(3-氯-4-硝基-N-(5-硝基-2-噻唑基)-苯甲酰胺)；NF-kB活化抑制剂IV((E)-2-氟-4'-甲氧基苯乙烯)；NF-kB活化抑制剂V(5-羟基-(2,6-二异丙基苯基)-1H-异吲哚-1,3-二酮)；NF-kB SN50(AA VALLP A VLLALLAP VQRKRQKLMP)；冬凌草甲素；爬山虎内酯；PPM-18(2-苯甲酰基氨基-1,4-萘醌)；Rol06-9920；柳氮磺吡啶；TIRAP抑制剂肽(RQIKIWFNRRMKWKKLQLRDAAPGG AIVS)；醉茄素A；汉黄芩素；BAY11-7082((E)3-[(4-甲基苯基)磺酰基]-2-丙烯腈)；BAY 11-7085((E)3-[(4-叔丁基苯基)磺酰基]-2-丙烯腈)；(E)-辣椒素；硫代苹果酸(ATM或AuTM)；吴茱萸碱；次氧化物；IKK抑制剂III(BMS-345541)；IKK抑制剂VII；IKK抑制剂X；IKK抑制剂II；IKK-2抑制剂IV；IKK-2抑制剂V；IKK-2抑制剂VI；IKK-2抑制剂(SC-514)；IkB激酶抑制剂肽；IKK-3抑制剂LX；ARRY-797(Array BioPharma)；SB-220025(5-(2-氨基-4-嘧啶基)-4-(4-氟苯基)-1-(4-哌啶基)咪唑)；SB-239063(反式-4-[4-(4-氟苯基)-5-(2-甲氧基-4-嘧啶基)-1H-咪唑-1-基]环己醇)；SB-202190(4-(4-氟苯基)-2-(4-羟基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；JX-401(-[2-甲氧基-4-(甲硫基)苯甲酰基]-4-(苯甲基)哌啶)；PD-169316(4-(4-氟苯基)-2-(4-硝基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑)；SKF-86002(6-(4-氟苯基)-2,3-二氢-5-(4-吡啶基)咪唑并[2,1-b]噻唑二盐酸盐)；SB-200646(N-(1-甲基-1H-吲哚-5-基)-N'-3-吡啶基脲)；CMPD-I(2'-氟-N-(4-羟基苯基)-[1,1'-联苯]-4-丁酰胺)；EO-1428((2-甲基苯基)-[4-[(2-氨基-4-溴苯基)氨基]-2-氯苯基]甲酮)；SB-253080(4-[5-(4-氟苯基)-2-[4-(甲基磺酰基)苯基]-1H-咪唑-4-基]吡啶)；SD-169(1H-吲哚-5-甲酰胺)；SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)1H-咪唑)；TZP-101(Tranzyme Pharma)；TZP-102(Tranzyme Pharma)；GHRP-6(生长激素释放肽6)；GHRP-2(生长激素释放肽2)；EX-1314(Elixir Pharmaceuticals)；MK-677(Merck)；L-692,429(丁酰胺，3-氨基-3-甲基-N-(2,3,4,5-四氢-2-氧代-l-((2'-(1H-四唑-5-基)(1,1'-联苯基)-4-基)甲基)-1H-1-苯并庚因-3-基)-,(R)-)；EP1572(/>)；地尔硫卓；地尔硫卓的代谢产物；BRE(脑和生殖器官表达蛋白)；维拉帕米；尼莫地平；地尔硫卓；ω-芋螺毒素；GVIA；氨氯地平；非洛地平；拉西地平；米贝地尔；NPPB(5-硝基-2-(3-苯基丙基氨基)苯甲酸)；氟硝嗪；促红细胞生成素；胡椒碱；血红素；巴西木素；z-V AD-FMK(苄氧羰基-Val-Ala-Asp(OMe)-氟甲基酮)；z-LEHD-FMK(苄氧羰基-Leu-Glu(OMe)-His-Asp(OMe)-氟甲基酮)；B-D-FMK(boc-天冬氨酰(Ome)-氟甲基酮)；Ac-LEHD-CHO(N-乙酰基-Leu-Glu-His-Asp-CHO)；Ac-IETD-CHO(N-乙酰基-Ile-Glu-Thr-Asp-CHO)；z-IETD-FMK(苄氧羰基-Ile-Glu(OMe)-Thr-Asp(OMe)-氟甲基酮)；FAM-LEHD-FMK(苄氧羰基Leu-Glu-His-Asp-氟甲基酮)；FAM-LETD-FMK(苄氧羰基Leu-Glu-Thr-Asp-氟甲基酮)；Q-VD-OPH(喹啉-VaI-ASp-CH2-O-Ph)；XIAP；cIAP-1；cIAP-2；ML-IAP；ILP-2；NAIP；存活素；Brace；IAPL-3；弗罗林；亮肽；PD-150606(3-(4-碘苯基)-2-巯基-(Z)-2-丙酸)；MDL-28170(Z-Val-Phe-CHO)；钙蛋白酶素；乙酰-钙抑素；MG 132(N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-亮氨酰-N-[(1S)-1-甲酰基-3-甲基丁基]-L-亮氨酰胺)；MYODUR；BN 82270(伊普森)；BN 2204(伊普森)；AHLi-11(QuarkPharmaceuticals)，mdm2蛋白，菲丝菌素-α(1-(4-甲基苯基)-2-(4,5,6,7-四氢-2-亚氨基-3(2H)-苯并噻唑基)乙酮)；反式二苯乙烯；顺二苯乙烯；白藜芦醇；苦味酚；雷帕丁；脱氧透明质酸；紫铆因；查耳酮；异液态素；紫铆因；4,2',4'-三羟基查耳酮；3,4,2',4',6'-五羟基查耳酮；黄酮；莫林；非瑟定；木犀草素；槲皮素；山奈酚；芹菜素；棉酚素；杨梅素；6-羟基芹菜素；5-羟基黄酮；5,7,3',4',5'-五羟基黄酮；3,7,3',4',5'-五羟基黄酮；3,6,3',4'-四羟基黄酮；7,3',4',5'-四羟基黄酮；3,6,2',4'-四羟基黄酮；7,4'-二羟基黄酮；7,8,3',4'-四羟基黄酮；3,6,2',3'-四羟基黄酮；4'-羟基黄酮；5-羟基黄酮；5,4'-二羟基黄酮；5,7-二羟基黄酮；黄豆苷元；金雀异黄素；柚皮苷；黄烷酮；3,5,7,3',4'-五羟基黄烷酮；盐酸壬酸；氯化氰；氯化翠雀碱；(-)-表儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4^；(-)-儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4)；(-)-加儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4',5)(+)-儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',4^；(+)-表儿茶素(羟基位点：3,5,7,3',40；日扁柏素(b-硫磺菌素；2-羟基-4-异丙基-2,4,6-环庚三烯-1-酮)；L-(+)-麦角硫氨酸((S)-a-羧基-2,3-二氢-N,N,N-三甲基-2-硫代-1H-尼硝唑4-乙胺内盐)；咖啡酸苯基酯；MCI-186(3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)；HBED(N,N'-二-(2-羟基苄基)乙二胺-N,N'-二乙酸*H2O)；氨溴索(反式-4-(2-氨基-3,5-二溴苄氨基)环己烷-HCl；和U-83836E((-)-2-((4-(2,6-二-1-吡咯烷基-4-嘧啶基)-1-哌嗪基)甲基)-3,4-二氢-2,5,7,8-四甲基-2H-1-苯并吡喃-6-醇》2HCl)；β-1-5-甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖；/3-D-1'-5-甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖呋喃糖苷；/3-1'-4,5-二甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖；/3-D-1'-4,5-二甲基-烟酰胺-2'-脱氧核糖呋喃糖苷；1-萘基PPl(1-(1,1-二甲基乙基)-3-(1-萘基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；熏草菌素A(5-[[(2,5-二羟基苯基)甲基][(2-羟基苯基)甲基1]氨基]-2-羟基苯甲酸)；MNS(3,4-亚甲二氧基-b-硝基苯乙烯)；PPl(1-(1,1-二甲基乙基)-1-(4-甲基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；PP2(3-(4-氯苯基)1-(1,1-二甲基乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；KX1-004(Kinex)；KX1-005(Kinex)；KX1-136(Kinex)；KX1-174(Kinex)；KX1-141(Kinex)；KX2-328(Kinex)；KX1-306(Kinex)；KX1-329(Kinex)；KX2-391(Kinex)；KX2-377(Kinex)；ZD4190(Astra Zeneca；N-(4-溴-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)乙氧基)喹唑啉-4-胺)；AP22408(Ariad Pharmaceuticals)；AP23236(Ariad Pharmaceuticals)；AP23451(AriadPharmaceuticals)；AP23464(Ariad Pharmaceuticals)；AZD0530(Astra Zeneca)；AZM475271(M475271；Astra Zeneca)；达沙替尼(N-(2-氯-6-甲基苯甲基)-2-(6-(4-(2-羟乙基)-哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基氨基)噻唑-5-甲酰胺)；GN963(反式-4-(6,7-二甲氧基喹喔啉-2基氨基)环己醇硫酸盐)；博舒替尼(4-((2,4-二氯-5-甲氧基苯基)氨基)-6-甲氧基-7-(3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙氧基)-3-喹啉甲腈)；或其组合。
在一些实施例中，药物是减少不希望的神经元或神经冲动的试剂。在一些实施例中，药物减轻运动障碍或辅助运动的一种或多种症状。在一些实施例中，药物是卡马西平、奥卡西平、苯妥英钠、丙戊酸、丙戊酸钠、肉桂碱、氟硝利嗪或尼莫地平、或其组合。
在一些实施例中，药物是促进神经元或神经组织再生的试剂。在一些实施例中，药物是生长因子。在一些实施例中，药物选自脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；或其组合。
XIII.光诱导神经消融的方法
本公开提供了将光敏剂递送到人类神经元或神经的方法，其包括：使人类神经元或神经与人类神经元或神经靶向分子接触，所述神经靶向分子包括(a)特异性结合神经元或神经或任一个的组分的肽，和(b)光敏剂。在一些实施例中，方法进一步包括将人类神经元或神经与激活光敏剂的光源一起暴露，其中活化的光敏剂诱导消融或杀死人类神经元或神经。在暴露于特定波长的光后，光敏剂与分子氧反应产生单线态氧，所述单线态氧具有细胞毒性。在某些实施例中，光敏剂是卟啉、二氢卟酚或染料。光敏剂的实例包含卟啉、原蛋白IX、嘌呤、维替泊芬、HPPH、替莫泊芬、亚甲蓝、光敏素、原蛋白、血卟啉、他拉泊芬、苯并卟啉衍生物单酸、5-氨基乙酰丙酸、镥泰克萨菲瑞、金属酞菁、金属萘酞菁磺基苯并卟啉、金属萘菁、四磺酞菁锌、菌绿素、金属卟吩、氯衍生物、四(间-羟基苯基)二氢卟酚(mTHPC)、脱镁叶绿酸、二溴荧光素(DBF)、IR700DX、萘酞菁和卟啉衍生物。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括包括以下的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ IDNO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ IDNO:124)或5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，肽包括：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)或DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，肽包括：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)或QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，肽包括SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，肽包括WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，肽包括DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)。在一些实施例中，肽包括Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，肽包括Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，肽包括QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，肽包括QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，肽包括Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，肽包括PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ IDNO:22)。在一些实施例中，肽包括Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQID NO:8)。在一些实施例中，肽包括EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，肽包括Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，肽包括PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，肽包括Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，肽包括SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，肽包括SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，肽包括Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，肽包括SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，肽包括Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，肽包括SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，肽包括5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，肽包括Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，肽包括DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
包括如本文所公开的光敏剂的人类神经元或神经靶向分子可以用于受试者的局部神经杀死的方法中。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于治疗受试者的慢性疼痛(例如背痛、颈痛或关节痛)。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于治疗受试者的前列腺癌。自主神经可以通过光诱导的局部自主神经消融来促进前列腺癌的生长和转移。因此，局部自主神经可能是前列腺癌治疗的活靶标。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于通过光诱导的肾血管中交感神经的消融来治疗受试者的肾血管性高血压。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于治疗过度出汗。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于治疗心律不齐。在一些实施例中，包括光敏剂的人类神经元或神经靶向分子用于治疗病理性肌肉痉挛(例如，Meige综合征、半面部痉挛、斜颈)。
XIV.药物组合物
在某些实施例中，本文公开了包括本文公开的人类神经元或神经靶向分子的药物组合物。本文的药物组合物使用一种或多种生理上可接受的载剂调制，所述载剂包含赋形剂和助剂，其有助于将活性剂加工成可药用的制剂。适当的调配物取决于所选择的施用途径。药物组合物的概述见于例如，《雷明顿：药学的科学与实践(Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy)》，第十九版，(宾夕法尼亚州，伊斯顿：Mack PublishingCompany，1995)；Hoover,John E.，《雷明顿药物科学(Remington's PharmaceuticalSciences)》，Mack Publishing Co.，宾夕法尼亚州，伊斯顿，1975；Liberman,H.A.和Lachman,L.编辑，《药物剂型(Pharmaceutical Dosage Forms)》，Marcel Decker，纽约，纽约，1980；和《药物剂型和药物递送系统(Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems)》，第七版，(Lippincott Williams&Wilkins,1999)。在一些实施例中，人类神经元或神经靶向分子包括选自由以下组成的组的肽序列：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)，DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP 404；SEQ ID NO:16)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ ID NO:4)，Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)，Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ IDNO:8)，Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)，Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)，Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)，Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ IDNO:13)，Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)；QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)，PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)；EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)，PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)，SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)，SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)，PWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:118)，EEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:119)，PYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:120)，SGQVPWEEPYYVVKKGG(具有GG连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:121)，SGQVPWEEPYYVVGG(具有GG连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:122)，SGQVPWEEPYYGG(具有GG连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:123)，SGQVPWEEPGG(具有GG连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:124)和5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)和DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括选自由以下组成的组的肽：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ IDNO:11)，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)，SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)，QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ IDNO:20)和QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP 401；SEQ ID NO:1)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP 402；SEQ ID NO:2)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DLPDIIWDFNWETA(HNP 403；SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401；SEQ IDNO:4)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC(具有GGC连接子的HNP402；SEQ ID NO:5)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC(具有GGC连接子的HNP403；SEQ ID NO:6)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-2；SEQ ID NO:20)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽QVPWEEPYYVVKKSSGG(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:21)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PWEEPYYVVKKSS(HNP401-N-4；SEQ ID NO:22)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-4；SEQ ID NO:8)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽EEPYYVVKKSS(HNP401-N-6；SEQ ID NO:23)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-EEPYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-6；SEQ ID NO:9)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽PYYVVKKSS(HNP401-N-8；SEQ ID NO:24)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-PYYVVKKSSGGC(具有GGC连接子的HNP401-N-8；SEQ ID NO:10)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVVKK(HNP401-C-2；SEQ ID NO:25)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-2；SEQ ID NO:11)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYYVV(HNP401-C-4；SEQ ID NO:26)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-4；SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEPYY(HNP401-C-6；SEQ ID NO:27)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPYYGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-6；SEQ ID NO:13)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽SGQVPWEEP(HNP401-C-8；SEQ ID NO:28)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2(具有GG连接子的HNP401-N-2；SEQ ID NO:104)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽Ac-SGQVPWEEPGGC(具有GGC连接子的HNP401-C-8；SEQ ID NO:14)。在一些实施例中，所述靶向分子包括所述肽DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP404；SEQ ID NO:16)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是Ac-SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的Ac-NP41；SEQ ID NO:17)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是SHSNTQTLAKAPEHTGC的肽(具有GC连接子的NP41；SEQ ID NO:18)。在一些实施例中，所述靶向分子包括不是NTQTLAKAPEHT的肽(SEQ ID NO:19)。
在某些实施例中，本文公开的药物组合物进一步包括一种或多种药学上可接受的稀释剂、一种或多种赋形剂或一种或多种载剂。在一些实施例中，药物组合物包含其它医学或药学试剂、载剂、佐剂，如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。另外，药物组合物还含有其它治疗上有价值的物质。
在某些实施例中，本文公开的人类神经元或神经靶向分子通过药物递送媒剂或载剂递送到受试者。在一些实施例中，递送媒剂由天然或合成材料或两者制成。在一些实施例中，递送媒剂是纳米颗粒、微粒、聚合物胶束、纳米胶囊、树状聚合物、大PEG、纳米凝胶、脂质体、富勒烯、纳米结构脂质载剂、纳米壳、量子点、基于蛋白质的纳米载剂(例如白蛋白、弹性蛋白、醇溶蛋白、豆蛋白、玉米蛋白、大豆蛋白、牛奶蛋白、乳清基纳米载剂)、有机纳米载剂(例如明胶、右旋糖酐、瓜尔胶、壳聚糖、胶原蛋白)、多糖基载剂(例如右旋糖酐、壳聚糖、果胶)、脂质乳液或其组合。
在某些实施例中，通过任何合适的施用途径向受试者施用本文公开的药物组合物，包含但不限于肠胃外(静脉内、皮下、腹膜内、肌内、血管内、鞘内、玻璃体内、输注或局部)施用。
适用于肌内、皮下或静脉内注射的调配物包含生理上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散液、混悬液或乳剂，以及用于重建为无菌注射液或分散液的无菌粉末。合适的水性和非水性载剂、稀释剂、溶剂或媒剂的实例包含水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油、克列莫菲等)、其合适的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯，如油酸乙酯。例如通过使用如卵磷脂等包衣、在分散体的情况下通过维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持合适流动性。适用于皮下注射的调配物还含有任选的添加剂，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。
对于静脉内注射，将活性剂任选地调配成水溶液，优选地生理上相容的缓冲液，如汉克氏溶液、林格氏溶液或生理盐水缓冲液。
肠胃外注射任选地涉及推注或连续输注。用于注射的调配物任选地以单位剂量形式存在于，例如添加有防腐剂的安瓿或多剂量容器中。在一些实施例中，本文所述的药物组合物为适用于肠胃外注射的形式，其为油性或水性媒剂中的无菌悬浮液、溶液或乳液，并且含有配制剂，如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。用于肠胃外施用的药物调配物包含水溶形式的活性剂的水溶液。另外，任选地将悬浮液制备成适当的油性注射悬浮液。
在一些实施例中，本文所述的药物组合物为适用于单次施用精确剂量的单位剂型。在单位剂型中，将调配物分为含有适当量的本文公开的活性剂的单位剂量。在一些实施例中，单位剂量为含有离散量的调配物的包装形式。非限制性实例是包装的片剂或胶囊剂，以及在小瓶或安瓿中的粉末。在一些实施例中，水性悬浮液组合物包装在单剂量不可重新封闭容器中。替代性地，使用多剂量可重新封闭的容器，在这种情况下，通常在组合物中包含防腐剂。仅作为实例，用于肠胃外注射的调配物以单位剂型存在，其包含但不限于安瓿，或在多剂量容器中，添加了防腐剂。
在一些实施例中，通过对人类患者进行全身静脉内注射来施用人类神经元或神经靶向分子。
实例
实例1：用于靶向人类神经的优化肽和其在图像引导外科手术、诊断和治疗递送中的用途
概要
使用噬菌体显示屏识别结合人类神经的肽，并且因此可以用于荧光辅助外科手术期间神经的全身体内标记。具体而言，通过选择结合到新鲜切除或冷冻的人类神经，处理了在gIII的N末端上表达16个随机氨基酸序列的m13噬菌体文库(Creative Biolabs)。同时，筛选了新设计的NP41 X12+4文库。每个文库经过最多6个结合和洗涤循环进行处理。另外，通过预先吸收文库和任何高亲和力的结合物，再选择已选择的噬菌体，以针对低亲和力的肌肉和脂肪组织进行反选择，然后再选择阳性结合神经的组织。单个噬菌体的测序产生了这些独特的序列，所述独特的序列被高度富集，并且因此相对于克隆库具有更高的亲和力：来自X16文库的SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)和来自NP41-X12+4文库的DTHAHAKPRVPAFKSV(HNP404；SEQ ID NO:16)。通过固相合成，将衍生自选定噬菌体的序列的氨基酸序列化学合成为肽，并且通过GGC连接子在C末端用荧光素(FAM)或Cy5进行标记，以在体外结合人类神经并且进行体内标记啮齿动物的神经。示出了对人类神经的新鲜切片和体内标记的小鼠坐骨神经的强烈标记。有用的标记发生在静脉内施用之后2-6小时之间，并且可以使用定制的荧光解剖显微镜，来自CRI的Maestro成像仪或Zeiss Lumar进行可视化。
保留外周神经是任何外科手术中最重要的目标之一，因为外科手术期间外周神经的意外横断会导致患者大量发病。而且，横断之后神经的生长比几乎任何其它组织都缓慢而不完全。通常，通过外周神经与附近结构的相对恒定关系以及其细长发白闪光结构的典型外观来识别外周神经。然而，在许多情况下，使用这些标准来识别外周神经可能很困难：例如，在肿瘤受累的情况下，在炎症/感染的情况下，在先前手术的外科手术区域中或在将神经包裹在骨骼中时。
当前用于神经标记的方法主要取决于通过使用荧光染料对单个识别的轴突束的逆行或顺行追踪。将荧光染料应用于神经支配靶标，并且以逆行方式行进以标记神经支配的神经纤维，或者直接应用于所识别的神经，并且顺行和逆行标记神经纤维。这项技术的缺点是，一次只能标记一个神经纤维束，这取决于已经注射了染料的位置。第二个缺点是荧光染料沿轴突束的积累有限，因为逆行轴突示踪剂通常在神经细胞体中积累，而用这些荧光染料标记的轴突受到限制。此技术的第三个缺点是，逆行运输相对较慢(每天约数毫米)，并且因此标记通常长于一米的人类神经的时间较长，(如在坐骨神经和其分枝的情况下)。更进一步，将荧光染料应用于神经支配靶标，如直接肌肉内注射以标记运动神经通常会变得混乱，并且在注射部位残留有可变数量的示踪染料。由于神经的解剖取决于在遇到相邻结构之前对其的精确可视化，因此不希望有被荧光染料污染的外科手术部位。最后，荧光染料本身的直接注射可能会由于机械损伤或注射部位的染料和媒剂的局部浓度过高而损坏靶标器官或目标神经。
此文献中描述的全身注射荧光标记的肽以标记神经的方法解决了上述荧光示踪剂的所有缺点。首先，由于肽是全身递送的，体内所有外周神经都具有被标记的潜力。这与目前的方法一次只标记一条神经相反。其次，选择此处描述的肽因其结合神经的能力，因此与相邻的非神经结构相比，神经纤维清晰可见。这与大多数当前荧光染料优先积累到神经细胞体而不是轴突过程相反。第三，此处描述的肽与神经的结合非常迅速，并且使用这种技术可以在几小时内完成对外周神经的可视化。这与顺行或逆行示踪剂的标记速度相对较慢相反。最后，由于肽是通过静脉内注射全身应用的，因此注射部位神经的损伤不是问题。
先前已经描述了使用小鼠外周神经衍生的神经归巢肽序列，用于实验室研究(美国专利第8,685,372号，2014年4月1日)。然而，由于神经标记的预期最终临床应用是在人类患者中，因此寻求识别结合人类神经的独特肽序列。通过结合人类神经的能力来识别本申请中描述的肽序列。通过全身静脉内注射到人类患者后结合人类神经的能力来识别这些肽序列，并且因此，与针对啮齿动物神经选择的序列相比，这些肽更可能结合人类神经。
当前的神经标记方法涉及荧光示踪染料(快速蓝、罗丹明-异硫氰酸盐、氟红宝石、氟翡翠)、碳花青染料(DiI、DiAsp、DiO、DiA)、荧光金、荧光标记的乳胶珠、荧光标记的植物凝集素和细菌毒素(小麦胚芽凝集素、花生凝集素、伴刀豆球蛋白A、菜豆-白细胞凝集素(PHA-L)、大豆凝集素、荆豆凝集素、蓖麻凝集素(I和II)、破伤风毒素片段C、霍乱毒素B和荧光标记的葡聚糖缀合物。
方法：
实验细节：
使用在gIII的N末端表达16个随机氨基酸序列的m13噬菌体文库(CreativeBiolabs)或内部表达NP41的衍生物的文库来识别与人类神经组织结合的肽。
肽的选择
从接受神经切除手术的患者中获取人类外周神经并且进行均质化。将噬菌体文库混合物与已经与高蛋白结合6孔板结合的一种或多种神经匀浆一起温育。温育后，将混合物离心，并且用PBS洗涤沉淀物，或用PBS洗涤板。将沉淀物重新均质并铺板，以进行滴定和重新扩增，或用低pH缓冲液从板上释放。对在每一轮结合的噬菌体进行测序，并且记录重复。未识别到重复，直到选择的第4轮。
在第5轮之后识别了来自X16文库的SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)和DTHAHAKPRVPAFKSV(SEQ ID NO:16)，表1。
表1：识别的肽
名称 重复序列 重复序列的数量 SEQ ID NO:
HNP 401 SGQVPWEEPYYVVKKSS >10 1
HNP 402 WEYHYVDLNWTSQHPQ >10 2
HNP 403 DLPDIIWDFNWETA 7 3
HNP 404 DTHAHAKPRVPAFKSV 3 16
肽的体内测试
将150纳摩尔或450纳摩尔荧光素标记的合成肽静脉内注射到小鼠中。在等待2小时以冲洗掉非特异性结合之后，麻醉小鼠，并且在后腿的背侧表面上切开皮肤以暴露坐骨神经。使用Metamorph软件，通过解剖显微镜获得明场和荧光图像(图1)。用图像J对神经和邻近的非神经组织的荧光进行定量(图2)。肽也局部应用于人类神经切片。在切片之前，将神经在OTC中新鲜冷冻。以300uM的浓度局部应用肽，示出了HNP401、HNP402、HNP404和先前报道的神经结合肽NP41的图像(图3)。还示出了变体HNP301(SEFPRSWDMETN)和NP124的图像。NP713也经过测试，并且尚未在出版物中进行报道。NP713是具有序列NTHPHTTSRVPSQIAR的NP41的衍生物，在针对小鼠组织的7轮选择之后富集，并且在针对人体组织的4轮选择之后也被发现。与野生型噬菌体相比，NP713噬菌体的结合显示神经:肌肉比高4.8倍。FAM-NP713与NP41表现出类似的神经:肌肉对比(此处未示出数据)。还示出了NP-41和NP713以及非肽缀合的羧基荧光素的所有D-氨基酸对照。HNP401表现出最高的神经特异性对比，大部分标记发生在神经束膜中。为了进一步证明HNP401的选择性结合，以较低的浓度100μM对HNP401、NP41和HNP404进行了测试(图4)。然后测试HNP401在体内标记大鼠坐骨神经和大鼠前列腺海绵体神经。图5示出了大鼠坐骨神经的体内标记。图6和7示出了与白光可视化相比的大鼠前列腺海绵体神经的体内标记。
先前描述了通过结合小鼠神经的能力识别的神经归巢肽序列，用于实验室研究。由于本文件中描述的肽序列是通过全身静脉内注射到人类患者后结合人类神经的能力来识别的，因此，与针对啮齿动物神经选择的序列相比，这些肽更可能结合人类神经。
荧光标记的人类神经结合肽通过静脉内注射全身应用。在等待很短的时间冲洗掉非特异性结合后，可以使用适当的激发和发射滤光片在外科手术区域内观察外周神经。
人类神经结合肽也可能与可能具有神经营养或神经保护特性的因子缀合。通过静脉内注射全身应用后，肽营养/神经保护因子缀合物可能会促进周围和脊髓两者中受损神经的修复/再生。
与神经保护/神经营养因子缀合的人类神经结合肽也可以与损伤归巢肽缀合，以进一步改善这些因子向损伤神经的局部递送，潜在地促进对损伤/修复/再生的抵抗力。
应用与用途：
荧光标记的神经结合肽可以用于在外科手术期间物理接触之前帮助外科医生可视化神经，从而潜在地损坏它们。这在前列腺外科手术期间尤为重要，因为控制雄性勃起的海绵体神经非常靠近前列腺，但是实际上通常是看不见的。
神经结合肽-神经营养/神经保护因子缀合物可以用于促进受损神经的修复/再生。
可以将神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗局部疼痛
参考文献：
1.Whitney M、Crisp J、Nguyen L、Friedman B、Gross L、Steinbach P、Tsien R、Nguyen Q.，“荧光肽在小鼠外科手术期间突出外周神经(Fluorescentpeptides highlightperipheral nerves during surgery in mice)”.《自然生物技术(NatureBiotechnology)》2011；29:352-356
2.Wu AP、Whitney MA、Crisp JL、Friedman B、Tsien RY、Nguyen QT.“使用新型荧光标记探针改善面神经识别(Improved facial nerve identification with novelfluorescently labeled probe)”.《喉镜(The Laryngoscope)》2011；121:805-810
3.Kobbert C.、Apps,R.、Bechmann,I.、Laciego,J.L.、Mey,J.、Thanos,S.“神经解剖学追踪中的当前概念(Currents concepts in neuroanatomical tracing)”.《神经生物学进展(Progress in Neurobiology)》62(2000)327-351。
4.Richmond,F.J.R.、Gladdy R.、Creasy,J.L.、Ktamura S.、Smits,E.、ThomsonD.B.“七种逆行示踪剂对猫运动神经元多标记研究的疗效比较(Efficacy of sevenretrograde tracers,compared in multiple-labelling studies of felinemotoneurones)”.《神经科学方法杂志(Journal of Neuroscience Methods)》53(1994)35-46.2
5.Marangos,N.、Illing R.、Kruger J.、Laszig R.“使用荧光轴突示踪剂在体内可视化耳蜗神经和细胞核(In vivo visualization of the cochlear nerve and nucleiwith fluorescent axonal tracers)”.《听力研究(Hearing Research)162(2001)48-52。
6.O'Malley,M、Wittkopf,J.、Cutler J.、Labadie,R、Hackett,T、Haynes,D.“面神经的荧光逆行轴突追踪(Fluorescent retrograde axonal tracing of the facialnerve)”.《喉镜(The Laryngoscope)》116(2006)1792-1797。
实例2：用于靶向人类神经的优化肽和其在图像引导外科手术、诊断和治疗递送中的用途
概要
噬菌体显示屏用于识别结合人类神经的肽，并且因此可以用于荧光辅助外科手术期间神经的全身体内标记。具体而言，通过选择结合到新鲜切除或冷冻的人类神经，处理了在gIII的N末端上表达16个随机氨基酸序列的m13噬菌体文库(Creative Biolabs)。文库经过最多6个结合和洗涤循环进行处理。另外，通过预先吸收文库和任何高亲和力的结合物，再选择已选择的噬菌体，以针对低亲和力的肌肉和脂肪组织进行反选择，然后再选择阳性结合神经的组织。单个噬菌体的测序产生了这些独特的序列，所述独特的序列被高度富集，并且因此相对于克隆库具有更高的亲和力：SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO:1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP402；SEQ ID NO:2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQ ID NO:3)。通过固相合成，将衍生自选定噬菌体的序列的氨基酸序列化学合成为肽，并且用荧光素或Cy5进行标记，以在体外结合人类神经并且进行体内标记啮齿动物的神经。示出了对人类外周神经(运动、感觉、自主神经)的新鲜切片以及体内标记的小鼠和大鼠坐骨神经的强烈标记。有用的标记发生在静脉内施用之后2-6小时之间，并且可以使用定制的荧光解剖显微镜，来自CRI的Maestro成像仪或Zeiss Lumar解剖显微镜进行可视化。
结果
神经的识别和保护在头部和颈部的外科手术中至关重要。
外周神经的识别对外科手术期间的保护至关重要，因为意外切断或损伤可以导致显著的患者发病率，包含慢性疼痛、麻木或永久性瘫痪1。神经识别在头部和颈部的外科手术期间尤其重要。例如，已经报道在急性手术后期间，面神经功能障碍高达40％，并且腮腺切除术后1个月30％2,3。类似地，已经报道前庭神经鞘瘤外科手术后1年，面神经功能障碍高达30％4。临时和永久声带静止是甲状腺外科手术、颈椎前路进入脊柱、食管切除术和颈动脉内膜切除手术的主要外科手术并发症5。虽然面神经的过程通常遵循定义的解剖标志，大量患者之间的变异已经被记录为临时的面神经的各个分支，包含分支的总数变异、个别分支的起源和分支之间的联系6-9。即使在同一患者内，左和右面神经可能显示过程和分裂的差异10。类似的变化已经证明了喉返神经11,12。在发生肿瘤侵袭、炎症、创伤或重复外科手术的情况下，神经识别可能甚至更具挑战性。最后，随着时间的推移，退化的神经变得越来越小，越来越细，甚至比变性的神经更难识别，这在重建外科手术期间至关重要。因此，任何改善神经与非神经组织之间视觉确定性的方法都将代表外科手术技术的重大进步。
在包含前列腺癌外科手术的其它外科手术期间，神经的识别和保护至关重要。
前列腺癌是美国男性中最常见的实体器官恶性肿瘤。对于患有局部前列腺癌的男性，外科手术实现出色的癌症控制。这种癌症治疗常常以勃起功能、泌尿控制和整体生活质量为代价。在根治性前列腺切除术期间保护自主神经血管束是手术的重要方面。近20年来，已经认识到了保护沿前列腺的后外侧方面的自主神经以保持勃起功能的重要性。然而，自主神经纤维本身很少可见。取而代之的是，外科医生会保留已经示出具有最高密度的自主神经的血管复合物或神经血管束。这些自主神经的精确位置和分布是可变的13-18因为即使在最有经验的医生中，勃起功能障碍和尿失禁也是常见的14。性功能预后的改善与外科医生经验的增加以及避免这些神经受到挤压或牵引损伤有关。显著的解剖变化以及外科医生经验和体型的差异为改善外科手术质量，同时最大程度减少不良后果创造了机会。在肿瘤侵袭、炎症、外伤或重复外科手术的情况下，神经识别和保护将代表额外的挑战。最后，越来越多地使用机器人辅助外科手术，因其固有的缺乏触觉反馈19，进一步提高外科医生对视觉信息的依赖。因此，任何改善神经与非神经组织之间视觉确定性的方法都将代表重大进步。
外科手术期间很难识别出小神经。
稀薄或埋藏的神经特别难以区分，并且因此最有可能在外科手术期间受损。直接暴露之前运动神经的识别目前依赖于肌电图(EMG)监测20-22，其中刺激电极被插入和远端肌肉抽搐被监控。EMG不是一种成像技术，因此即使在一个位置中已经识别出一条神经，也没有关于神经距刺激部位多远以及神经所在方向的视觉指导。更进一步，EMG仅识别运动通路，不识别感觉纤维，如三叉神经或耳蜗前庭神经的前两个分裂，也不识别交感神经束，如周围前列腺神经血管束23-25，其中，根治性前列腺切除术后的神经损伤导致显著尿失禁和勃起功能障碍26。电极插入本身可能会损伤神经。最后，如果轴突或神经肌肉传递被神经压迫、创伤、肿瘤侵袭、局部麻醉剂或神经肌肉阻滞剂暂时阻断到记录部位的远端，则EMG失败。在没有外源探针分子的情况下，存在一些潜在的体内神经可视化技术，如光学相干断层扫描27或激光共聚焦显微镜28。然而，神经几乎没有内在的对比度来将它们与其它组织区分开，并且这些技术不能轻易地在指导外科手术所必需的视场上产生实时的实时图像。变性神经对癌症切除、创伤性或治疗性截肢之后的重建外科手术期间的识别很重要，它也不含髓磷脂，并且因此不会从这些试剂中受益。
改善外科手术期间神经可视化的竞争策略。
由于这些原因，人们对开发标记试剂以改善外科手术期间神经可视化非常感兴趣。人们一直关注神经标记，这取决于通过使用荧光染料29-32或霍乱毒素的B亚基(CTb488)，对单个轴突束进行逆行或顺行跟踪33。将荧光染料应用于神经支配靶标，并且以逆行方式行进以标记神经支配的神经纤维，或者直接应用于所识别的神经，并且顺行和逆行标记神经纤维。局部注射的缺点是一次只能标记一个神经纤维束。顺行和逆行运输相对较慢，并且可能需要几天才能走完几毫米，而大多数示踪剂却留在了注射位置。由于神经的解剖取决于对相邻结构的精确可视化，因此不希望被过量荧光染料严重污染的外科手术部位。最后，荧光染料的直接注射可能会由于机械损伤或注射部位的染料和媒剂的局部浓度过高而损坏靶标器官或目标神经。
最近，对使用血管染料，如吲哚菁绿(ICG)标记神经的血管供应(即血管神经)感兴趣34,35。此技术的一个局限在于，小神经(如对前列腺外科手术很重要的海绵体神经)的血管神经比例较小，与相邻组织相比，对比度和强度受到限制。
人们还一直关注靶向髓磷脂的试剂，包含二苯乙烯基苯(DSB)衍生物36、香豆素衍生物和抗神经节苷脂抗体37。DSB和香豆素衍生物是具有固有荧光的小分子，而抗神经节苷脂抗体缀合到用于成像的荧光染料36-43。虽然这些分子有望用于外周神经成像，但是如海绵体神经等非髓鞘神经(自主神经和髓鞘最少)可能几乎没有结合，从而限制了它们在这些重要外科手术中的应用。退化的神经也将存在有限的髓磷脂，并且因此不会被这些试剂标记。
此文献中描述的全身注射荧光标记的肽以标记神经的方法解决了上述其它神经靶向技术的所有缺点。首先，由于肽是全身递送的，体内所有外周神经都具有被标记的潜力。这与目前的方法一次只标记一条神经相反。其次，选择此处描述的肽因其结合神经的能力，因此与相邻的非神经结构相比，神经纤维清晰可见。这与大多数当前荧光染料优先积累到神经细胞体而不是轴突过程相反。第三，此处描述的肽与神经的结合非常迅速，并且使用这种技术可以在几小时内完成对外周神经的可视化。这与顺行或逆行示踪剂的标记速度相对较慢相反。最后，由于肽是通过静脉内注射全身应用的，因此注射部位神经的损伤不是问题。
先前已经描述了使用小鼠外周神经衍生的用于实验室研究的神经归巢肽序列(美国专利8,685,372，2014年4月1日，用于靶向神经元或神经的肽和适体US20120148499和WO2010121023A2)。然而，由于神经标记的预期最终临床应用是在人类患者中，因此寻求识别结合人类神经的独特肽序列。通过结合人类神经的能力来识别本申请中描述的肽序列。通过全身静脉内注射到人类患者后结合人类神经的能力来识别这些肽序列，并且因此，与针对啮齿动物神经选择的肽序列相比，这些肽序列更可能结合人类神经。
当前的神经标记方法涉及荧光示踪染料(快速蓝、罗丹明-异硫氰酸盐、氟红宝石、氟翡翠)、碳花青染料(DiI、DiAsp、DiO、DiA)、荧光金、荧光标记的乳胶珠、荧光标记的植物凝集素和细菌毒素(小麦胚芽凝集素、花生凝集素、伴刀豆球蛋白A、菜豆-白细胞凝集素(PHA-L)、大豆凝集素、荆豆凝集素、蓖麻凝集素(I和II)、破伤风毒素片段C、霍乱毒素B和荧光标记的葡聚糖缀合物。
将荧光染料应用于神经支配靶标，并且以逆行方式行进以标记神经支配的神经纤维，或者直接应用于所识别的神经，并且顺行和逆行标记神经纤维。如上所述，局部注射的缺点是一次只能标记一个神经纤维束。顺行和逆行运输相对较慢，并且可能需要几天才能走完几毫米，而大多数示踪剂却留在了注射位置。由于神经的解剖取决于对相邻结构的精确可视化，因此不希望被过量荧光染料严重污染的外科手术部位。最后，荧光染料的直接注射可能会由于机械损伤或注射部位的染料和媒剂的局部浓度过高而损坏靶标器官或目标神经。
最近，对使用血管染料，如吲哚菁绿(ICG)标记神经的血管供应(即血管神经)感兴趣34,35。此技术的一个局限在于，小神经(如对前列腺外科手术很重要的海绵体神经)的血管神经比例较小，与相邻组织相比，对比度和强度受到限制。
人们还一直关注靶向髓磷脂的试剂，包含二苯乙烯基苯(DSB)衍生物36、香豆素衍生物和抗神经节苷脂抗体37。DSB和香豆素衍生物是具有固有荧光的小分子，而抗神经节苷脂抗体缀合到用于成像的荧光染料36-43。虽然这些分子有望用于外周神经成像，但是如海绵体神经等非髓鞘神经(自主神经和髓鞘最少)可能几乎没有结合，从而限制了它们在这些重要外科手术中的应用。退化的神经也将存在有限的髓磷脂，并且因此不会被这些试剂标记。
先前描述了通过结合小鼠神经的能力识别的神经归巢肽序列，用于实验室研究。由于本文件中描述的肽序列是通过全身静脉内注射到人类患者后结合人类神经的能力来识别的，因此，与针对啮齿动物神经选择的序列相比，这些肽更可能结合人类神经。
荧光标记的人类神经结合肽通过静脉内注射全身应用。在等待很短的时间冲洗掉非特异性结合后，可以使用适当的激发和发射滤光片在外科手术区域内观察外周神经。
人类神经结合肽也可能与可能具有神经营养或神经保护特性的因子缀合。通过静脉内注射全身应用后，肽营养/神经保护因子缀合物可能会促进周围和脊髓两者中受损神经的修复/再生。
与神经保护/神经营养因子缀合的人类神经结合肽也可以与损伤归巢肽缀合，以进一步改善这些因子向损伤神经的局部递送，潜在地促进对损伤/修复/再生的抵抗力。
方法
实验细节：
使用在gIII的N末端表达16个随机氨基酸序列的m13噬菌体文库(CreativeBiolabs)或内部表达NP41的衍生物的文库来识别与人类神经组织结合的肽。NTQTLAKAPEHT(NP-41；SEQ ID NO:15；参见美国专利第8,685,372号或国际专利公开第WO 2010121023A2号；两者均通过引用整体并入本文)。
肽的选择：
从接受神经切除手术的患者中获取人类外周神经并且进行均质化。将噬菌体文库混合物与已经与高蛋白结合6孔板结合的一种或多种神经匀浆一起温育。温育后，将混合物离心，并且用PBS洗涤沉淀物，或用PBS洗涤板。将沉淀物重新均质并铺板，以进行滴定和重新扩增，或用低pH缓冲液从板上释放。对在每一轮结合的噬菌体进行测序，并且记录重复。未识别到重复，直到选择的第4轮。
识别了以下肽：在第5轮之后识别了来自X16文库的SGQVPWEEPYYVVKKSS(HNP401；SEQ ID NO: 1)，WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP402；SEQ ID NO: 2)，DLPDIIWDFNWETA(HNP403；SEQID NO: 3)和DTHAHAKPRVPAFKSV(SEQ ID NO: 16)。参见肽表2.
表2：识别的肽
名称 重复序列 重复序列的数量 SEQ ID NO:
HNP 401 SGQVPWEEPYYVVKKSS >10 1
HNP 402 WEYHYVDLNWTSQHPQ >10 2
HNP 403 DLPDIIWDFNWETA 7 3
结合人类神经的肽的展示：
为了确定噬菌体选择的肽与人类神经结合的亲和力，将它们通过固相合成进行化学合成，并且通过GGC连接子在C末端用荧光素标记。将肽局部应用于切片的人类腓肠神经和人类颞肌，以确定神经与肌肉的对比。HNP401表现出人类从未有过的最高结合和亮点(图8)。另外示出了在人类神经上筛选的其它肽和对照的数据，包含在人类神经上筛选的游离羧基荧光素和NP41。为了确认HNP401对额外神经类型的结合和对比，在面部臂丛神经上，将HNP401和NP41两者在神经和肌肉中的结合进行了比较(图9)。为了量化与人类神经对肌肉的差异结合，测量了来自特定神经和人类颞肌的神经束膜的ROI的荧光信号强度，所述特定神经和人类颞肌已经通过局部应用荧光素标记的神经结合肽进行了相同的处理。与FAM-NP41相比(126.17±61.03)，FAM-HNP401示出以10.9倍的荧光信号强度(1374.44±425.96)，与人类腓肠神经的选择性结合(图9G)，p＝0.009，学生t测试，非配对)。FAM-HNP401的神经肌肉对比度为3.03±0.57，并且FAM-NP41的神经肌肉对比度为2.28±0.96(图9H)，p＝0.236，学生t测试，非配对)。剂量依赖性测试显示，与在浓度高达375uM时检测的NP41相比，HNP401具有明显的神经结合，低至10uM(图10A-E)，HNP401的神经人类结合增加(图10F-I)。另外，在离体组织上局部测试FAM-HNP401，以用周围的肌肉标记小鼠面神经(图10，J-M)。共聚焦成像还表明HNP401-FAM结合神经外膜、神经束膜和神经内膜，但是不结合轴突(图10N)。
注射了450nmol FAM-HNP401(图11A)或FAM-NP41(图11B)的小鼠的坐骨神经的体内荧光成像显示，与(NP41)(图11C)相比，具有HNP401的神经对比具有2.3倍荧光强度，但是针对FAM-HNP401的类似神经与非神经对比为5.79±0.81，并且针对FAM-NP41为6.63±1.63(图11D)。FAM-HNP401在注射后3小时成像时，还以2μmole的剂量突出大鼠前列腺神经(图11E-F)和大鼠坐骨神经(图11G)，或替代性地，使用探针注射之后10分钟成像的0.5μmoleHNP401的较低剂量。i.v.注射100nmol之后，FAM-HNP401的血液清除显示出30分钟的半衰期，与FAM-NP41类似(图11H)。
然后，从两个人类患者切除的前列腺中分离地测试FAM-HNP401和FAM-NP41与自主神经的局部结合(图12和13)。FAM-HNP401(图12A)示出与相同浓度的FAM-NP41(图12B)相比，人类自主神经的荧光信号显著更高。使用抗神经丝抗体SMI312(红色)和DAPI(蓝色)，将标记的纤维确认为神经，以显示核标记(图12C)。还进行了H和E染色，以确认将组织标记为神经(图12D)。使用来自另一位患者的组织的HNP401的前列腺神经结合示出在图13中。从人类臂分离的外周感觉前臂皮肤神经获得类似的染色(图12E-H)。
HNP401的缺失变体的合成与神经结合
为了优化HNP401序列，从C或N末端系统缺失2个氨基酸(表3)，随后对人类神经切片进行结合分析。从C末端缺失氨基酸降低了结合功效和溶解性。从N末端去除2个氨基酸改善神经结合，N-2的平均信号强度为1498.73(+/-517.63)，并且HNP401的平均信号强度为744.63(+/-130.18)[学生t测试，未配对，单尾，p＝0.07](图14和15)。
表3.神经结合肽列表
独特的肽 肽序列 SEQ ID NO:
HNP401(具有GGC连接子) Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC 4
HNP402(具有GGC连接子) Ac-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC 5
HNP403(具有GGC连接子) Ac-DLPDIIWDFNWETAGGC 6
HNP401-N-2(具有GGC连接子) Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC 7
HNP401-N-4(具有GGC连接子) Ac-PWEEPYYVVKKSSGGC 8
HNP401-N-6(具有GGC连接子) Ac-EEPYYVVKKSSGGC 9
HNP401-N-8(具有GGC连接子) Ac-PYYVVKKSSGGC 10
HNP401-C-2(具有GGC连接子) Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC 11
HNP401-C-4(具有GGC连接子) Ac-SGQVPWEEPYYVVGGC 12
HNP401-C-6(具有GGC连接子) Ac-SGQVPWEEPYYGGC 13
HNP401-C-8(具有GGC连接子) Ac-SGQVPWEEPGGC 14
应用与用途：
荧光标记的人类神经结合肽可以用于在外科手术期间物理接触之前帮助外科医生可视化神经，从而潜在地损坏它们。当神经小、变性、被癌症侵袭、创伤或感染而受伤时，这一点尤其重要。例如，在前列腺外科手术期间，控制雄性勃起的海绵体神经非常靠近前列腺，但是不能使用手术室中的常规光(白光反射)确定地识别。
人类神经结合肽-神经营养/神经保护因子缀合物可以用于促进受损神经的修复/再生。
可以将人类神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗慢性疼痛。
可以将人类神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗过度出汗。
可以将人类神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗肾血管性高血压。
可以将人类神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗心律不齐。
可以将人类神经结合肽与光敏染料缀合，以潜在地与光诱导的神经杀伤一起使用，以治疗病理性肌肉痉挛(Meige综合征、面肌痉挛、斜颈)。
参考文献：
1.Burke S和Shorten GD.“外科手术之后疼痛没有消失时(When pain aftersurgery doesn't go away)”.《生化学会会刊(Biochem Soc Trans.)》2009；37:318-22。
2.Gaillard C、Perie S、Susini B和St Guily JL.“腮腺切除术之后面神经功能障碍：局部因素的作用(Facial nerve dysfunction after parotidectomy:the role oflocal factors)”.《喉镜(The Laryngoscope)》2005；115:287-91。
3.Witt RL.“比较腮腺和甲状腺外科手术之后立即发生的面神经功能障碍和声带不动的长期结果(Comparing the long-term outcome of immediate postoperativefacial nerve dysfunction and vocal fold immobility after parotid and thyroidsurgery)”.《语音杂志(J Voice)》2006；20:461-5。
4.Darrouzet V、Martel J、Enée V、Bébéar J和Guérin J.，“前庭神经鞘瘤外科手术结果：17年间我们在400例的多学科经验(Vestibular schwannoma surgery outcomes:our multidisciplinary experience in 400cases over 17years)”.《喉镜(Laryngoscope)》2004；114:681-8。
5.Rosenthal L、Benninger M和Deeb R.“声带固定性：20年病因学的纵向分析(Vocal fold immobility:a longitudinal analysis of etiology over 20years)”.《喉镜(Laryngoscope)》2007；117:1864-70。
6.Nason RW、Binahmed A、Torchia MG和Thliversis J.“边缘下颌神经的解剖结构和功能的临床观察(Clinical observations of the anatomy and function of themarginal mandibular nerve)”.《国际口腔颌面外科杂志(Int J Oral MaxillofacSurg.)》2007；36:712-5。
7.Woltmann M、Faveri R和Sgrott EA.“面神经下颌骨下颌支的解剖外科研究，用于下颌下手术方法(Anatomosurgical study of the marginal mandibular branch ofthe facial nerve for submandibular surgical approach)”.《巴西牙科杂志(BrazDent J.)》2006；17:71-4。
8.Lineaweaver W、Rhoton A和Habal M.“面神经的显微解剖(Microsurgicalanatomy of the facial nerve)”.《颅面外科杂志(J Craniofac Surg)》1997；8:6-10。
9.Gosain A、Sewall S和Yousif N.“面神经的颞支：我们如何可靠地预测其路径？(The temporal branch of the facial nerve:how reliably can we predict itspath？)”.《整形和重建外科手术(Plast Reconstr Surg)》1997；99:1224-33。
10.Tzafetta K和Terzis J.“面神经论文集：第一部分显微解剖学(Essays onthe facial nerve:Part I.Microanatomy)”《整形和重建外科手术(Plast ReconstrSurg)》2010；125:879-89。
11.Haller J、Iwanik M和Shen F.“喉返神经的临床相关解剖(ClinicallyRelevant Anatomy of Recurrent Laryngeal Nerve)”.《脊柱(Spine)》(Phila Pa1976)2011；Epub提前发行。
12.Ebraheim N、Lu J、Skie M、Heck B和Yeasting R.“下颈椎前路入路时喉返神经的脆弱性(Vulnerability of the recurrent laryngeal nerve in the anteriorapproach to the lower cervical spine)”.《脊柱(Spine)》(Phila Pa 1976)1997；15:2664-7。
13.Walsh P.“解剖型根治性前列腺切除术：外科手术技术的发展(Anatomicradical prostatectomy:evolution of the surgical technique)”.《泌尿外科杂志(JUrology)》1998；160:2418-24。
14.Tewari A、Peabody J、Fischer M、Sarle R、Vallancien G、Delmas V、HassanM、Bansal A、Hemal A、Guillonneau B和Menon M.“在腹腔镜和机器人根治性前列腺切除术期间有助于神经保护的手术和解剖学研究(An operative and anatomic study to helpin nerve sparing during laparoscopic and robotic radical prostatectomy)”.《欧洲泌尿外科(Eur Urology)》2003；43:444-454。
15.Costello A、Brooks M和Cole O“神经血管束和海绵体神经的解剖学研究(Anatomical studies of the neurovascular bundle and cavernosal nerves)”.《英国国际泌尿外科杂志(British Journal of Urology International)》2004；94:1071-6。
16.Kalyana CN、Rupesh R、Ashok A和Craig DZ.“保留神经的外科手术显著影响根治性前列腺切除术之后的长期尿失禁(Nerve-Sparing Surgery SignificantlyAffects Long-Term Continence After Radical Prostatectomy)”.《泌尿外科(Urology)》2007；70:1127-30。
17.Gallina A、Briganti A、Suardi N、Capitanio U、Abdollah F、Zanni G、Salonia A、Rigatti P和Montorsi F.“外科手术和勃起功能障碍(Surgery and erectiledysfunction)”.《档案，尤其泌尿外科(Archives Esp Urology)》2010；63:640-8。
18.Zhao L、Meeks J和Nadler R.“泌尿外科手术中的机器人技术(Robotics inurologic surgery)”.《密涅瓦性尿路症和新尿路症(Minerva Urol Nefrol.)》2009；61:331-9。
19.van der Meijden O and Schijven M.“触觉反馈在传统和机器人辅助的微创外科手术和虚拟现实训练中的价值：当前综述(The value of haptic feedback inconventional and robot-assisted minimal invasive surgery and virtual realitytraining:a current review)”.《手术内窥镜和其它介入技术(Surg Endosc.)》2009；23:1180-90。
20.Gantz B.“术中面神经监测(Intraoperative facial nerve monitoring)”.《美国耳科学杂志(The American Journal of Otology)》1985年；11月：增刊：58-61。
21.Miller M和Spiegel J.“甲状腺切除术期间喉返神经的识别和监测(Identification and monitoring of the recurrent laryngeal nerve duringthyroidectomy)”.《北美外科肿瘤学临床(Surgical Oncology Clinics of NorthAmerica)》2008；17:121-44,viii-ix。
22.WE D、JL R和J T.“使用微喉电极对喉返神经进行定位(Recurrent laryngealnerve localization using a microlaryngeal electrode)”.《耳鼻喉头颈外科(Otolaryngology Head and Neck Surgery)》1979；87:330-333。
23.J W、AL B、AJ C、JA E、M G、B G、M M、F M、RP M、B R和A V.“对目前与根治性前列腺切除术的最佳癌症控制和尿失禁和勃起的保存有关的外科解剖学知识的关键分析(Acritical analysis of the current knowledge of surgical anatomy related tooptimization of cancer control and preservation of continence and erection incandidates for radical prostatectomy)”.《欧洲泌尿外科(European Urology)》2010；57:179-92。
24.J W、M G和H H.“前列腺癌的最佳手术治疗的解剖学基本原理(Basicprinciples of anatomy for optimal surgical treatment of prostate cancer)”.《世界泌尿外科杂志(World Journal of Urology)》2007；25:31-8。
25.HR K、TY T、L S、J V、MJ H和P D.“神经保留技术对会阴前列腺切除术之后患者自我评估结果的影响(Impact of nerve sparing technique on patient self-assessed outcomes after radical perineal prostatectomy)”.《泌尿外科杂志(Journal of Urology)》2007；178:488-92。
26.Kubler HR、Tseng TY、Sun L、Vieweg J、Harris MJ和Dahm P.“神经保留技术对会阴前列腺切除术之后患者自我评估结果的影响(Impact of nerve sparingtechnique on patient self-assessed outcomes after radical perinealprostatectomy)”.《泌尿外科杂志(J Urol.)》2007；178:488-92；讨论492。
27.Chitchian S、Weldon T、Fiddy M和Fried N.“组合图像处理算法改善前列腺神经的光学相干断层扫描(Combined image-processing algorithms for improvedoptical coherence tomography of prostate nerves)”.《生物医学光学杂志(J BiomedOpt.)》2010；15:046014。
28.Zhivov A、Blum M、Guthoff R和Stachs O.“体内共聚焦激光扫描显微镜实时绘制上皮下神经丛(Real-time mapping of the subepithelial nerve plexus by invivo confocal laser scanning microscopy)”.《英国眼科学杂志(Br J Ophthalmol)》2010；94:1133-5。
29.M OM、J W、J C、R L、T H和D H.“面神经的荧光逆行轴突描记(Fluorescentretrograde axonal tracing of the facial nerve)”.《喉镜(Laryngoscope)》2006；116:1792-1797。
30.Marangos N、Illing R、Krüger J和Laszig R.“使用荧光轴突示踪剂在体内可视化耳蜗神经和细胞核(In vivo visualization of the cochlear nerve and nucleiwith fluorescent axonal tracers)”.《听力研究(Hearing Research)》2001；162:48-52
31.C K、R A、I B、JL L、J M和S T.“神经解剖学追踪的最新概念(Currentconcepts in neuroanatomical tracing)”.《神经生物学进展(Progress inNeurobiology)》2000；62:327-351。
32.FJR R、R G、JL C、S K、E S和DB T.“七种逆行示踪剂对猫运动神经元多标记研究的疗效比较(Efficacy of seven retrograde tracers,compared in multiple-labelling studies of feline motoneurones)”.《神经科学方法杂志(Journal ofNeuroscience Methods)》1994；53:35-46。
33.Boyette LB、Reardon MA、Mirelman AJ、Kirkley TD、Lysiak JJ、Tuttle JB和Steers WD.“体内海绵状神经的光纤成像(Fiberoptic imaging of cavernous nerves invivo)”.《泌尿外科杂志(J Urol.)》2007；178:2694-700。
34.Wagner OJ、Louie BE、Vallieres E、Aye RW和Farivar AS.“近红外荧光成像可以在机器人胸腺切除术期间帮助识别对侧神经(Near-infrared fluorescence imagingcan help identify the contralateral phrenic nerve during roboticthymectomy)”.《胸外科年鉴(Ann Thorac Surg.)》2012；94:622-5。
35.Chen SC、Wang MC、Wang WH、Lee CC、Yang TF、Lin CF、Wang JT、Liao CH、Chang CC、Chen MH、Shih YH和Hsu SP.“乳突切除术期间面神经的荧光辅助可视化：一种预防医源性面部瘫痪的新技术(Fluorescence-assisted visualization of facial nerveduring mastoidectomy:A novel technique for preventing iatrogenic facialparalysis)”.《耳鼻喉(Auris Nasus Larynx.)》2015；42:113-8。
36.Gibbs-Strauss SL、Nasr KA、Fish KM、Khullar O、Ashitate Y、Siclovan TM、Johnson BF、Barnhardt NE、Tan Hehir CA和Frangioni JV.“用于图像引导外科手术的神经荧光造影剂(Nerve-highlighting fluorescent contrast agents for image-guidedsurgery)”.《分子成像(Mol Imaging)》2011；10:91-101。
37.Massaad CA、Zhang G、Pillai L、Azhdarinia A、Liu W和Sheikh KA.“荧光标记的抗神经节苷脂抗体可选择性地识别活体动物的外周神经(Fluorescently-taggedanti-ganglioside antibody selectively identifies peripheral nerve in livinganimals)”.《科学报告(Sci Rep.)》2015；5:15766。
38.Gibbs SL、Xie Y、Goodwill HL、Nasr KA、Ashitate Y、Madigan VJ、SiclovanTM、Zavodszky M、Tan Hehir CA和Frangioni JV.“神经高亮荧光团的构效关系(Structure-activity relationship of nerve-highlighting fluorophores)”.《公共科学图书馆·综合(PLoS One)》2013；8:e73493。
39.Cotero VE、Kimm SY、Siclovan TM、Zhang R、Kim EM、Matsumoto K、Gondo T、Scardino PT、Yazdanfar S、Laudone VP和Tan Hehir CA.“通过髓磷脂结合荧光团和双模式腹腔镜成像改善术中神经的可视化(Improved Intraoperative Visualization ofNerves through a Myelin-Binding Fluorophore and Dual-Mode LaparoscopicImaging)”.《公共科学图书馆·综合(PLoS One)》2015；10:e0130276。
40.Cotero VE、Siclovan T、Zhang R、Carter RL、Bajaj A、LaPlante NE、Kim E、Gray D、Staudinger VP、Yazdanfar S和Tan Hehir CA.“术中通过髓鞘选择性造影剂对外周和中枢神经进行荧光成像(Intraoperative fluorescence imaging of peripheraland central nerves through a myelin-selective contrast agent)”.《分子成像生物学(Mol Imaging Biol.)》2012；14:708-17。
41.Gray D、Kim E、Cotero V、Staudinger P、Yazdanfar S和Hehir CT.“用于术中神经可视化的紧凑型荧光和白光成像系统(Compact Fluorescence and White LightImaging System for Intraoperative Visualization of Nerves)”.《Proc SPIE IntSoc Opt Eng.》2012；8207。
42.Hackman KM、Doddapaneni BS、Barth CW、Wierzbicki IH、Alani AW和GibbsSL.“聚合物胶束作为神经突显荧光探针递送的载剂(Polymeric Micelles as Carriersfor Nerve-Highlighting Fluorescent Probe Delivery)”.《摩尔制药(Mol Pharm.)》2015；12:4386-94。
43.Wang C、Wu C、Popescu DC、Zhu J、Macklin WB、Miller RH和Wang Y.“髓鞘形成的纵向近红外成像(Longitudinal near-infrared imaging of myelination)”.《神经科学杂志(J Neurosci.)》2011；31:2382-90。
实例3：用于荧光引导手术发生的成像的神经靶向探针
摘要
许多外科手术的基本目标是神经保护，因为无意的伤害可能导致患者发病，包含麻木、疼痛、局部瘫痪和失禁。外科手术期间的神经识别目前依赖于多个参数，包含解剖结构、质地、颜色以及与周围结构的关系，以区分神经与非神经组织。使用当前手术室中的标准白光照明，可以感觉不到神经与相邻组织之间的视觉差异。先前开发了一种神经靶向探针FAM-NP41，所述探针在全身施用后，结合并突出啮齿动物的运动和感觉神经。在此表明，FAM-NP41可以突出活体小鼠和大鼠中前列腺内的自主神经，直径最小为50μm的神经中具有明显的神经与非神经对比。
为了将这种方法转化为人类患者潜在的临床用途，噬菌体展示用于识别选择性结合人类神经的新型肽(HNP401)。FAM-HNP401可以结合并突出多条人类外周神经，包含小腿腓肠神经、上臂内侧前臂神经以及包含围绕人类前列腺的海绵体神经的自主神经。通过从全长肽中连续缺失氨基酸来识别HNP401的结合结构域。HNP401或优化的变体可以翻译用于临床环境中，以在手术发生中识别人类神经，从而改善可视化效果，并且潜在地减少外科手术中神经损伤的发生率。
介绍
外科手术的基本目标是保护神经功能，以使患者发病率最小化。外科手术期间当前的神经识别利用不可量化的标准，如解剖结构、质地、颜色以及与周围结构的关系。在发生创伤、肿瘤侵袭或感染的情况下，使用上述标准进行神经识别可能更具挑战性。使用白光反射，可以感觉不到神经与邻近组织之间的视觉差异，尤其是小神经，例如前列腺内的自主神经。对这些稀薄或埋藏的神经的无意伤害是外科手术中最病态但无意造成的后果之一，这可能导致功能丧失、麻木和外科手术引起的神经性疼痛[1]。例如，可以以良好局部控制对局限性前列腺癌进行根治性前列腺切除术(RP)[2，3]。然而，即使是保护神经的根治性前列腺切除术，也具有由于对自主神经或自主神经血管束的无意损伤，而导致勃起功能障碍和/或尿失禁的巨大风险[4，5]。沿前列腺的后外侧方面的自主神经血管束的保护是RP期间功能保存的重要方面。自主神经纤维本身很少被可视化，但是假定它们的位置沿血管结构跟踪。这些自主神经的确切位置和分布因患者而异，这使得使用解剖学位置作为唯一的避免方法复杂化[6-8]，并且即使在最有经验的手中也可能发生损伤。最近的研究表明，仅7％的RP患者在前列腺切除术之后的第一年重新获得了完整勃起功能的外科手术前状态[9]，并且16％在前列腺切除术之后2年重新获得了基线勃起功能[10]。
改善前列腺中神经结构的可视化的工具具有降低根治性前列腺切除术发病率的巨大潜力，以及在许多其它保留神经的外科手术中的应用，包含癌症切除、创伤和重建手术。神经成像剂的全身施用可以通过一次探针施用来标记所有相关的神经。先前，已报道的方法通过将荧光染料直接应用于神经支配位点而依赖于单个轴突束的逆行或顺行追踪[11，12]。已经在各种临床前模型中研究了苯乙烯基吡啶染料[13-15]、氨基苯乙烯基染料[16-18]、恶嗪4[19，20]和抗神经节苷脂抗体[21]，以检测运动、感觉和自主神经。
先前通过噬菌体展示识别了一种肽序列，即神经肽41(NP41)，所述肽序列优先结合并突出外周神经组织，从而增强了全身注射之后，活小鼠的运动神经和感觉神经的可视化[22-24]。此肽对神经的亲和力相对较低，并且血液清除较快(与抗体相比)，因此可以在全身注射之后数小时使其可视化，在24小时内几乎完全洗掉[22]。NP41还通过与神经纤维中的结构层粘连蛋白结合，而突出了退化神经[24，25]。现在，我们已经将此肽用于小鼠和大鼠两者的前列腺中的自主神经的手术中识别。为了允许神经可视化方法的临床翻译用于涉及人类患者的外科手术中，我们现在已经使用噬菌体展示来识别新型肽HNP401，当用荧光团标记时，所述肽选择性结合并突出人类神经。荧光标记的HNP401可以结合并突出人类感觉和运动神经，如腓肠、内侧前臂皮肤、喉、颈肛门、大耳神经和植物神经，例如前列腺内和周围的那些神经。
结果
为了可视化小鼠的前列腺内的自主神经，静脉注射与荧光素缀合的NP41肽(FAM-NP41)，然后在外科手术切除之后对前列腺和周围组织进行成像。迅速在膀胱中积累的染料的强烈荧光阻碍了前列腺内神经的可视化。为了增强可视化效果，在成像之前，将膀胱尿液通过外科手术引流并缝合。在实验持续期间，由于小鼠还活着，因此尿道是一种解剖学上独特的结构，从不排空尿液，从而导致带有代谢肽染料的尿液通过尿道不断通过膀胱。为了帮助将来的研究，我们已经证明了使用荧光淬灭染料(直接注射到膀胱中和通过口服施用两者)来减少高膀胱荧光，作为膀胱的外科引流的替代性方法(图21)。FAM-NP41的注射剂量范围为150-600nmoles(～16到66mg/kg)，剂量为600nmoles(～30nmol/g)示出最佳的自主神经对比度(图16A-16G)。低倍荧光图像示出一条与尿道相邻的神经纤维突出(图16A)。在使用白光反射的高放大图像中，神经极其模糊(图16B)，但是在FAM-NP41标记下，神经变得清晰可见(图16C)。为了量化神经检测，总共向10只小鼠注射了600nmoles的FAM-NP41，并且使用荧光和白光反射两者，测量神经和相邻非神经组织的信号强度。线右边的值表示与反射光相比，荧光的可视化得到了改善。与白光反射的1.086±0.07(n＝12)相比，荧光引导下的平均神经与非神经信号强度为1.256±0.14(n＝12，p<0.001)(图16D)。
由于小鼠的前列腺神经非常小并且难以成像(即需要高剂量的FAM-NP41)，因此我们将研究扩展到了大鼠的前列腺内的自主神经的可视化。为了可视化雄性Sprague Dawley大鼠的自主神经，以12nmol/g的剂量静脉内注射FAM-NP41，随后进行成像。与20克小鼠中使用的600nmol相比，这是相对于重量低2.5X的剂量。静脉内施用之后2到6小时出现有用的标记，使用定制的荧光解剖显微镜使所述标记可视化。FAM-NP41神经突出使穿过大鼠前列腺中部的神经纤维可视化(图16E)。更高的放大成像显示FAM-NP41还突出了围绕神经血管束的自主神经分支(图16G)，所述自主神经分支在前列腺的脂肪囊内传播。使用白光反射成像看不到这些分支神经(图16F)。为了定量选择大鼠中的自主神经的标记，用荧光和白光反射两者，对前列腺内的神经成像。与白光反射的1.083±0.01(n＝3)相比，荧光的平均神经与非神经信号强度为1.275±0.02(n＝3)。为了显示适用于外科手术内成像，我们显示使用临床等级的Zeiss Pentero成像系统在活大鼠中观察到了类似的神经对比(图16H)。批准用于临床的Zeiss Pentero示波器将FAM-NP41(黄色)的荧光图像叠加在白光图像上，并且实时收集数据(图16H)。外科手术操作期间的记录显示，前列腺内的荧光纤维清楚地表现为神经，可使用NP41-FAM荧光导引进行检测(数据未示出)。为了确认荧光标记的结构确实是神经，实时使用了荧光外科手术指导来选择性地解剖出被认为是神经的荧光纤维(图22：A)。然后，将解剖的荧光纤维垂直放置，并且在OCT嵌入化合物中快速冷冻。使用荧光对垂直横截面进行成像，以显示怀疑的神经纤维集中在载玻片上(图22：B)。使用双重荧光组织化学分析，用抗荧光团抗体(图22：C)或酪氨酸羟化酶(图22：D)，对纤维进行荧光标记，从而证实了纤维是神经，所述酪氨酸羟化酶是已知的无髓自主神经标记。在不存在一抗的情况下，未检测到免疫染色(图22：E)。
为了能够翻译神经照明肽以用于人类患者，使用了在gIII的N末端上表达16个随机氨基酸序列的m13噬菌体文库进行噬菌体展示，以识别人类神经结合肽(CreativeBiolabs)。使用迭代选择轮来选择噬菌体，以与人类腓肠神经结合，而对肌肉和脂肪的选择为负。对肌肉和脂肪的反选择是通过在选择与人类神经结合之前，预先吸收这些组织的文库来完成的。在每一轮选择之后，对个体噬菌体进行测序，并且在5轮和6轮之后，三个特定序列SGQVPWEEPYYVVKKS(HNP401；SEQ ID NO:1)和WEYHYVDLNWTSQHPQ(HNP402；SEQ ID NO:2)DLPDIIWDFNWETAG(HNP403；SEQ ID NO:3)高度富集。
为了测试所选噬菌体展示肽与人类神经结合的亲和力，通过固相合成化学合成了它们，并且在C末端用荧光素标记。肽局部应用于外科手术收获的人类腓肠神经和颞肌，以确定用于选择的肽和对照的神经与肌肉对比度(图23)。还对来自多个患者组织的各种神经进行了包含游离染料(羧基荧光素)的对照测试，以确认肽染料缀合物对结合人类神经的特异性(图24)。游离的非反应性染料对照，如羧基荧光素，显示出较弱的非特异性结合，并且对局部应用无效。FAM-HNP401产生最高的对比度，并且显示当局部应用于人类腓肠神经时，优于先前报道的啮齿动物神经结合肽FAM-NP41[22](图17)。为了量化与神经和肌肉的差异结合，测量了来自选定神经和人类颞肌的神经束膜的ROI的荧光信号强度。与FAM-NP41相比(126.17±61.03)，FAM-HNP401示出以10.9倍的荧光信号强度(1374.44±425.96)，与人类腓肠神经的选择性结合(图17D)，p＝0.009，学生t测试，非配对)。FAM-HNP401的神经肌肉对比度为3.03±0.57，并且FAM-NP41的神经肌肉对比度为2.28±0.96(附图17H)，p＝0.236，学生t测试，非配对)。
还在离体组织上局部测试了FAM-HNP401，以标记其表现不如FAM-NP41的周围肌肉的小鼠面神经(图25：J-M)。为了比较，示出了用FAM-NP41和FAM-HNP401，对人类喉神经与周围肌肉的离体组织标记(图25：F-I)。与局部应用FAM-HNP401之后获得的信号强度相比，未经肽染料缀合物处理的人类神经的自发荧光可忽略不计(图26)。与FAM-NP41相比，FAM-HNP401在体内与小鼠坐骨神经的结合的信号强度也高2.3X倍(图18A-C)。两种肽的神经与周围肌肉的对比是可比的(图18D)。当注射后3小时成像时，FAM-HNP401还以2μmole(～54mg/kg)的剂量突出大鼠坐骨神经(图18E)和前列腺神经(图18F)。用注射器将膀胱排干并缝合，以避免前列腺周围的溢出和污染。通过质谱分析收集的尿液，并且检测到附着染料的肽的预期片段，表明膀胱中的肽被部分代谢(图27)。探针注入之后10分钟，使用0.5μmol(13.4mg/kg)FAM-HNP401的剂量以更高的放大倍率成像时，可以轻松地看到前列腺内和与血管束相邻的自主神经。(图18G)。FAM-HNP401的血液清除显示出30分钟的半衰期，与FAM-NP41类似(图18H)。使用50-100μM(图25：A-E)和低浓度(10μM)高分辨率共聚焦成像检测到最佳的神经对比，示出FAM-HNP401以较高的亲和力结合神经束膜、神经外膜和神经内膜，却被从轴突排除(图25：N)。来自人类神经的FAM-HNP401信号到100μM饱和，而来自FAM-NP41的信号甚至在375μM时仍继续增加，但是信号强度仍远低于相同浓度下应用的HNP401(图25：F和H)。通过在质谱分析之前，在人血清中温育肽染料缀合物来确定FAM-HNP401在人血浆中5分钟和2小时的稳定性。为了分析，在将固定体积的分析物注入到LC-MS中之后，确定450nm下的曲线下面积和FAM-HNP401的对应质量(图28：A-B)。为了比较，我们还测试了FAM-NP41在人血浆中的稳定性(图28：C-D)。5分钟和2小时的峰面积积分表明FAM-HNP401和FAM-NP41两者在人血清中均稳定。提取离子电流的面积用于确定肽定量。没有观察到肽-FAM缀合物的降解，通过离子电流分析，在与人血浆温育5分钟和2小时时检测到相同的浓度。类似地测试了肽，并且显示在暴露2小时后，在大鼠脑脊髓液中稳定(图28：E-F)。
测试了FAM-HNP401和FAM-NP41与从两个人类患者的前列腺分离的自主神经的结合(图19和29)。FAM-HNP401(图19A和29A)示出与FAM-NP41(图19B和29B)相比，在自主(海绵体)神经中明显更高的荧光信号。由于只有2例患者样品可测试，因为在根治性前列腺切除术期间，仅在严重包膜浸润的情况下进行神经切除，因此无法进行定量。使用抗神经丝抗体SMI312(红色)和DAPI(蓝色)，将标记的纤维确认为神经，以显示核标记(图19C)。H和E染色还通过组织学证实标记组织为神经(图19D)。由于在神经束的此区域中缺少神经丝纤维，因此SMI312不会对神经束膜染色。SMI312染色示出，由于支持轴突的神经丝结构染色，分离出的组织为神经。对于从人类手臂分离出的另一条感觉神经(前臂皮肤)，使用FAM-HNP401进行了类似的染色，示出HNP401的广泛神经结合活性(图19E-H)。
为了优化并试图确定HNP401的核心结合结构域，进行了从C或N末端的两个氨基酸的系统性缺失(参见，例如图30)，随后在人类腓肠神经切片上进行了结合分析(图20)。在每种情况下，将神经结合和信号强度归一化为亲本FAM-HNP401肽(图20J)。允许去除C末端丝氨酸(C-2)，但是去除赖氨酸(C-4)后，溶解度和结合显著降低，对于HNP401-C-4的神经结合，归一化的平均信号强度为0.49±0.11(图20F)。从N末端缺失氨基酸的耐受性很好。去除N末端丝氨酸和甘氨酸将神经选择性结合提高约2倍，而HNP401-N-2的归一化的平均信号强度为2.02±0.65(图20A和20J，p＝0.026，学生t测试，未配对，单尾)。HNP401-N-4在其N末端具有非极性氨基酸，其减小了结合到归一化的平均信号强度0.56±0.18(图20B)。去除非极性氨基酸、色氨酸和脯氨酸，将一些结合强度恢复到FAM-HNP401的水平，HNP401-N-6(图20C)和HNP401-N-8(图20D)的归一化的平均神经信号强度为1.0±0.34和0.98±0.31。恢复的结合效率可能归因于当肽的N末端存在非常疏水的残基时，溶解度提高，从而最小化了微聚集。HNP-401的C和N末端缺失研究表明，核心结合结构域可能包含PYYVVKK，其N末端残基QVPWEE有助于与HNP401-N-2检测到的结合增强。HNP401-N-2的归一化神经到颞肌的对比度相对于FAM-HNP401增加了3倍(图20K，p＝0.011，学生的t测试，未配对，单尾)。
讨论
长期以来，各种示踪物质已经被用来绘制神经系统的连通性图，尽管大多数示踪物质都依赖于局部应用之后的顺行或逆行追踪[11，12，26，27]。示踪剂的运输相对较慢，随着染料从注射部位移开，形成对比[26,27]。通过使用这些方法标记暴露于外科手术的大区域可能是不切实际的，因为必须识别并独立标记多个神经束。有用啮齿动物的亲脂性染料追踪逆行性神经血管束和主要盆腔神经节的报道[4，28]。最近，已经在各种临床前模型中研究了苯乙烯基吡啶染料[13-15]、氨基苯乙烯基染料[16-18]、恶嗪4[19，20]和抗神经节苷脂抗体[21]，以检测运动、感觉和自主神经。单独的染料没有针对神经靶向的选择性机制，但是通常在髓磷脂中积累。已知髓磷脂以低丰度存在或在自主神经中缺失，这可能限制使用游离染料突出这些细但关键的神经[29，30]。游离染料的局部和硬膜外应用已经用于在动物模型中局部标记神经，然而，随着组织去除和视野改变，这些方法在人类外科手术期间的灵活性可能受到限制。[20，31]。抗神经节苷脂抗体具有特异性靶向，但是具有长期血液半衰期，这将可能需要在外科手术之前注射多天，并且可能会更容易引起免疫应答[32，33]。通过单次注射肽染料缀合物来标记体内的所有神经，全身注射荧光标记的肽以标记神经克服了这些示踪剂的主要缺点。我们先前曾报道NP41结合啮齿动物的运动神经和感觉神经，并且现在证明了其在啮齿动物模型中识别精细自主神经的潜在应用。我们发现，与通过白光反射获得的对比度相比，使用荧光成像可将神经信号转换为非神经信号平均增加17％。鉴于这些神经的无髓本质和其超细结构，这是一项重大成就。然而，与肌肉相比，将NP41局部应用于人离体提供的对比度很小。为了增强对人类神经的突出，现在已经识别出HNP401，这是一种新型肽，其结合人类运动/感觉和自主神经并突出。
我们希望FAM-HNP-401或优化的类似物能够使神经可视化方法的临床翻译用于涉及人类患者的外科手术中。荧光标记的HNP401可以结合并突出前列腺内和周围的人类腓肠、中间前臂皮肤、喉和自主神经。与羧基荧光素的染料对照相比，FAM-HNP401显示出高信号强度和神经束的可重复标记。羧基荧光素在局部人类神经切片上显示出低信号和非特异性结合神经。如FITC-异硫氰酸酯等染料不能用作对照，因为它们将与未固定的组织中通过横截面暴露的蛋白质的所有亲核侧链反应。此外，尽管FITC-葡聚糖已在临床上使用，但是它不是我们实验的可行对照，因为它标记了包含神经横断面内深处的微血管的脉管系统，并且是神经损伤和神经性疼痛的标志物[34]。另外，它的大尺寸影响染料的药代动力学特性。与我们先前识别的FAM-NP41肽染料缀合物相比，FAM-HNP401始终能提供10倍以上的结合人类神经信号。对于需要较短曝光时间的实时成像，较高的信号强度是一个优势。HNP401还显示了人离体组织中局部切片上神经与肌肉的3倍对比。FAM-HNP401在小鼠中的血液清除特征类似于NP41[22]。FAM-HNP401结合有髓和无髓神经。标记神经丝的SMI312抗体未与FAM-HNP401染色共定位，表明FAM-HMP401不结合轴突，但是优先结合神经束膜，并且因此不太可能影响神经传导。正是这种染色模式使我们相信HNP401-FAM结合神经束膜中的一个或多个结构蛋白。C末端的极性氨基酸似乎需要溶解度和结合两者，因为去除会导致肽的溶解度大大降低或对神经的结合亲和力降低。N末端上2个氨基酸的去除增加了神经结合，但是进一步的缺失对溶解度和结合两者均产生负面影响。连接像短PEG等增溶基团可以恢复与截短变体的结合。
在我们的初步研究中，神经突出肽HNP401已经与相当短波长的荧光素衍生物偶联，以使其与具有Cy5/Cy7比例激活性细胞穿透肽的双神经/肿瘤成像兼容，所述细胞穿透肽目前处于II期临床测试以检测癌症(NCT03113825)。在连接到HNP-401之后，更长波长的IR或接近IR的染料，如吲哚菁绿(ICG)、IRdye800可能会使神经在外科手术暴露的组织中的表面下方更深处成像。游离恶嗪4最近还被用于在临床前模型中突出神经，并且可以通过与靶向肽，如HNP401偶联来增强靶向作用。尽管我们首选的应用方法是全身的，但是局部应用是一些手术的一种选择。在动物模型中，此类将染料局部应用到裸露的表面上，随后洗涤以去除未结合的染料已经被用于使神经成像。[20]。染料，如4-二-2-asp也已经局部应用到神经，但是由于其与神经末梢的线粒体结合，因此具有对神经有毒的缺点。[35]。抗体可以静脉内或局部应用，并且具有一些优势，包含高亲和力和限定的结合靶标，然而，据抗神经节苷脂抗体报道，它们需要较长的循环时间才能积累和清除，以形成最佳的神经对比。
在体内啮齿动物研究中，我们发现可以以150nmoles FAM-NP41的剂量在小鼠中标记外周运动神经和感觉神经，这很容易适应人类剂量[36，37]。自主神经标记在小鼠中需要明显更高的剂量(600nmol)，因此可能需要更高亲和力的肽，如HNP401，或改良的变体，才能推进临床给药。有趣的是，虽然要求较高的剂量在啮齿动物中可视化非常小的自主神经(小至50μm)但是显著较大的人类前列腺神经的标记(～750μm)可以以显著降低的剂量来实现。与较低剂量可以突出较大神经的结论一致，我们能够以40％剂量NP41可视化大鼠前列腺中的神经。NP41和HNP401都不会永久或共价结合神经束，因为它们在24小时之后都会被洗净而几乎没有残留信号。包含层粘连蛋白421、211的结构蛋白已经被识别为NP41的结合靶标[25]。尽管尚未确定HNP401的结合靶标，但是影像数据显示类似于NP41的非轴突结合模式，表明它也可以结合神经结构蛋白。与亲脂性染料相比，HNP401的一个重要特性是它不需要髓磷脂的存在，而且我们已经证明它可以结合并突出前列腺内的神经血管束以及海绵体神经。这些神经在泌尿外科应用中很重要，并且髓鞘水平不高[29，30]。我们预计在这种情况下保存神经代表了神经成像技术的最迫切的临床需求之一[38]。FAM-HNP401突出这些神经的能力代表了优于竞争性神经结合试剂的显著优势，而竞争性神经结合试剂对髓磷脂具有选择性[39]，并且掺入到轴突中[21]。
方法
探针合成
FAM-NP41如先前所述合成[22]。使用Prelude肽合成仪和标准Fmoc固相肽合成生成具有以下序列的肽：乙酰-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-CONH2[HNP401]，乙酰-WEYHYVDLNWTSQHPQGGC-CONH2[HNP402]，乙酰-DLPDIIWDFNWETAGGC-CONH2[HNP403]，每个肽具有C末端“GGC”连接子。在DMSO中的N-甲基吗啉的存在下，使用5-荧光素-马来酰亚胺[Anaspec]，将羧基荧光素缀合到C末端半胱氨酸。使用Phenomenex 5um C18 Luna在Agilent LCMS上纯化肽，质量和纯度>95％，通过LC-MS确认。使用与上述相同的构型和方法合成和纯化如(参见，例如图30)中所列的截短的HNP401肽。
动物
将体重为20-30克的野生型雄性SKH1小鼠(Charles River，Wilmington，MA)用于测试肽染料缀合物。体重为100到250克的雄性Sprague-Dawley大鼠用于体内测试染料缀合物，并且基于动物大小调整剂量。加利福尼亚大学圣地亚哥分校的机构动物护理和使用委员会批准了动物使用协议(协议编号S05536)。
体内成像
腹膜内注射氯胺酮(80mg/kg)和咪达唑仑(40mg/kg)麻醉后，经眼眶后向小鼠施用FAM-NP41或其变体。在2-4小时的冲洗时间之后，将动物用氯胺酮(50mg/ml)和甲苯噻嗪(20mg/ml)麻醉。膀胱和前列腺通过中线腹部切口暴露。使用定制的外科手术成像系统，对沿前列腺中的海绵体血管的自主神经进行成像和记录。此系统是对Olympus MVX10示波器的改进，能够实现高分辨率荧光，RGB反射率和实时覆盖，并且视野的变焦范围为0.6到5.7cm。图像J用于每种测试的肽染料缀合物的神经对比的定量分析。从记录的文件中选择前列腺中的自主神经的图像，并且在选择ROI和进行测量之前，将其放大300-400％。使用多边形选择工具，在反射和荧光图像两者的相同位置，手动选择神经和相邻的非神经组织ROI。将所选择的区域内的像素强度的平均值和标准偏差与神经(平均值＝In，SD＝σn)和邻近的背景组织(平均值＝Ib，SD＝σb)进行比较。用公式|In–Ib|/(σn 2+σm 2)0.5减去背景之后，计算神经与非神经对比度。为了使雄性大鼠的前列腺中的神经成像，将肽染料缀合物经眼眶后注射。以13mgs/kg的浓度注射FAM-HNP401，随后在15分钟之后成像，替代性地使用52mgs/kg的剂量在3小时之后成像。根据IACUC协议，在氯胺酮-甲苯噻嗪混合物下进行活体动物外科手术。使用无菌技术暴露前列腺；用小注射器将膀胱引流并缝合。成像之前，用无菌盐水冲洗外科手术区域。使用Mann-Whitney测试分析小鼠和大鼠两者的数据，以比较白光反射率与荧光之间的神经强度和神经与非神经对比。
共聚焦成像参数
图17的共聚焦数据是用488nm激光线，在玻璃上以10X放大的10μm切片，0.45NA空气物镜采集的。对于2k乘2k大小的图像，增益设置为50，功率设置为激光功率的0.5％，像素驻留时间值为1.2μs，孔径为1.2μm，以及像素大小为0.26。我们使用奈奎斯特(Nyquist)功能并且获取图像作为图块以获取最大分辨率。
图19A和19B的数据是用488nm激光线，在玻璃上以10X放大的10μm切片，0.45NA空气物镜采集的。对于2k乘2k大小的图像，增益设置为40，功率设置为激光功率的3％，像素驻留时间值为1.2μs，孔径为1.2μm，以及像素大小为0.26μm/px。
图19E和19F的数据是用488nm激光线，在玻璃上以10X放大的10μm切片，0.45NA空气物镜采集的。对于2k乘2k大小的图像，增益设置为40，功率设置为激光功率的1％，像素驻留时间值为1.2μs，孔径为1.2μm，以及像素大小为0.3μm/px。
SMI312神经丝抗体和Dapi染色在10X放大，0.45NA空气物镜，NA增益为50，功率设置为405nm激光线的激光功率的5％，以及增益为100，功率设置为640nm激光线的激光功率的50％下成像。我们使用的像素驻留时间为3.2μs，孔径为1.2μm，以及图像尺寸为2k乘2k每图块，因此像素尺寸为0.29μm/px。
图26的数据是用488nm激光线，在玻璃上以10X放大的10μm切片，0.45NA空气物镜采集的。对于2k乘2k大小的图像，增益设置为40，功率设置为激光功率的3％，像素驻留时间值为2.4μs，孔径为1.2μm，以及像素大小为0.3μm/px。
FAM-HNP401在人类神经组织上的剂量反应数据集(图25：A-E)是用488nm激光线，在玻璃上以10X放大的10μm切片，0.45NA空气物镜采集的。对于2k乘2k大小的图像，增益设置为40，功率设置为激光功率的3％，像素驻留时间值为1.2μs，孔径为1.1μm，以及像素大小为0.3μm/px。
图29的数据是用488nm激光线，在玻璃上以25X放大的10μm切片，1.10NA水浸透镜采集的。对于2k乘2k大小的平铺图像，增益设置为40，功率设置为激光功率的3％，像素驻留时间值为2.2μs，孔径为1.2μm，以及像素大小为0.11μm/px。
噬菌体展示
使用在gIII的N末端上表达16个随机氨基酸的定制的合成m13噬菌体文库(～109)进行噬菌体展示(Creative Biolabs)。噬菌体文库通过选择与新鲜切除或冷冻的人类神经的结合进行处理，类似于识别结合小鼠神经的NP41的描述[22]。文库经过最多6个结合和洗涤循环进行处理。在阳性选择之前，通过预吸收具有这些组织的文库，对噬菌体进行高亲和力肌肉和脂肪组织结合剂反选择。为了进行阳性选择，将噬菌体文库直接与人类腓肠神经组织混合，并且在4℃下温育2小时。温育后，将组织噬菌体混合物离心，并且用PBS洗涤。然后将具有结合的噬菌体的组织沉淀物均质化，与TG1细菌混合并铺在LB琼脂平板上。计数菌落以确定滴度，随后选择单个菌落用于DNA制备和测序。在每一轮选择之后，将噬菌体合并，并且扩增以进行迭代选择。对在每一轮结合的噬菌体进行测序，并且记录重复。在5轮和6轮选择之后，识别结果中所示的重复噬菌体。
在组织切片上的局部应用和成像
根据Quyen Nguyen博士的IRB协议编号130837，获得了人类腓肠神经、前臂神经和喉神经以及颞肌。从接受神经切除手术的患者中获取人类外周神经(通常为腓肠神经)。来自两名患者的前列腺的人类神经是根据Moores Cancer Center Biorepository IRB协议编号090401获取的。将组织切片，并且固定在载玻片或Cryojane胶带上。在应用肽溶液之前，将组织切片在加湿器室中放置30分钟。在局部应用之前，将肽在.5X HBSS中稀释到适当浓度。将50μl已知浓度(1μM到375μM)的肽溶液涂在胶带或载玻片上10μm的神经切片上，并且在加湿器室中温育30分钟。与肽一起温育之后，将神经切片用0.5X HBSS洗涤两次，并且再用1X PBS洗涤一次。应用盖玻片，并且在尼康A1共聚焦显微镜的Zeiss Lumar解剖镜上，立即对载玻片成像。对于共聚焦成像，用488nm激光激发515(25)和10X空气物镜和0.26m/像素尺寸，对10μm厚度的组织切片进行成像。对于免疫组织化学，用0.4μm/像素的20X空气物镜采集共聚焦图像。
图像分析
图像J用于分析和比较使用共聚焦显微镜和Lumar解剖镜获得的图像。对于比较探针的每个实验组，我们保持采集参数相同，以便直接比较获得的数据。在实验期间，很明显，FAM-HNP401在我们的局部应用实验中信号最亮。给定实验组的所有原始图像文件都以16位tiff图像同时加载到图像J中。然后，我们对用FAM-HNP401处理的组织的图像进行平整。一旦设置了这些级别，就可以使用图像J在一个步骤中将设置传播到所有图像。将最亮的图像设置为组中所有其它图像的基准，以避免在传播级别时饱和。为了量化图像，绘制了感兴趣区域(ROI)，并且在图像J中测量了信号计数。对于图5，即使FAM-HNP401-N-2最亮，为了保持一致性，我们选择FAM-HNP401进行平整并归一化信号计数。
来自大鼠前列腺中自主神经的免疫荧光
在基于奥林巴斯解剖显微镜的定制外科手术荧光成像系统上，对可视化的TAMRA-NP41进行体内静脉内注射之后(对于100gm大鼠，0.5μ摩尔或11.3mg/kg)，从雄性大鼠的前列腺取出可疑的无髓神经组织。使用Leica低温恒温器产生5μm组织的冷冻切片，并且安装在Cryojane胶带上。将组织切片用1X PBS中的4％低聚甲醛固定10分钟，随后用1X PBS冲洗。应用在PBS的10％山羊血清中1:2000稀释的抗TAMRA单克隆抗体[ThermofisherScientific Cat.No.MA1-041](或抗酪氨酸羟化酶的多克隆抗体[Cell SignalingTechnologies Prod.No.2792S])；每个切片20μl，并且在室温下温育过夜，随后用1X PBS洗涤。将PBS的10％山羊血清中1:500稀释的生物素化抗小鼠二抗应用于切片，持续2小时，随后进行1X PBS洗涤。应用载体RTU(抗生物素蛋白生物素复合物)或Alexa 405链霉抗生物素蛋白，持续1小时，随后用1X PBS洗涤。用1X PBS将组织湿法固定在载玻片上。在0.4μm/像素的分辨率下，以20×空气物镜获得共聚焦图像。
神经丝的免疫荧光
从前列腺切除术中获得新鲜的活人类神经组织，并且冷冻在OCT块中。将10μm组织的冷冻切片安装在玻璃True Bond载玻片上。将疏水性隔离笔应用到每个切片周围的玻璃上。使用1X PBS中制备的2％多聚甲醛固定组织切片，并且用1X PBS洗涤4次。将100μl封闭缓冲液(0.01％Triton X溶液，在10％正常山羊血清中的1％BSA[Life technologies50062Z])应用于每个组织切片30分钟。然后，将组织用1X PBS洗涤4次，并且将1:1000稀释的神经丝抗体SMI312抗体[Biolegend Cat.No.837904]应用于组织，在4℃下温育过夜。用PBST洗涤组织6次。在4℃下，将1:1000稀释的抗小鼠二抗Alexafluor 555应用于切片上，持续2小时，然后用1X PBS洗涤。在盖玻片打滑和成像之前，添加了具有DAPI的Prolong Gold防褪色试剂[Life Technologies P36931]。
H和E染色协议
将组织切片在1:1 10％的甲醛缓冲液和200标准乙醇中固定1分钟。然后将载玻片用水洗涤，并且浸入苏木精染色2分钟。然后用蒸馏水洗涤载玻片，并且浸入上蓝溶液中30秒。用蒸馏水洗涤载玻片，并且浸入曙红溶液中1分钟，然后用蒸馏水洗涤。依次将载玻片浸入50％、95％和100％乙醇中以除去水。在用非二甲苯固定溶液固定盖玻片之前，将载玻片风干并浸入citrisolv中，并且使用20X放大的明场在Hamamatsu Nanozoomer上成像。
HNP401-FAM的血液清除
在100μl无菌水中，使五个8周龄雄性SKH小鼠静脉内注射100nmol[对于25gm小鼠，10.75mg/kg]FAM-HNP401。在抽血之前，将小鼠用1:1的氯胺酮:咪达唑仑混合物麻醉。注射之后1分钟、10分钟、20分钟、30分钟、1小时和2小时进行尾刺，以收集5μl全血，将其溶于100μl Agilent ICP-MS调谐缓冲液中。离心样品，并且使用Tecan荧光读板仪分析等体积的上清液。
参考文献
[1]Borsook D、Kussman BD、George E、Becerra LR、Burke DW.“外科手术引起的神经性疼痛：理解围手术期的过程(Surgically induced neuropathic pain:understanding the perioperative process)”.《外科学年鉴(Annals of surgery)》2013；257:403-12。
[2]D'Amico AV、Whittington R、Malkowicz SB、Schultz D、Blank K、BroderickGA等人“根治性前列腺切除术、外部束放射疗法或间质放射疗法治疗局部前列腺癌之后的生化结果(Biochemical outcome after radical prostatectomy,external beamradiation therapy,or interstitial radiation therapy for clinically localizedprostate cancer)”.《美国医学会杂志(Jama.)》1998；280:969-74。
[3]Walsh PC.“局限性前列腺癌的根治性前列腺切除术提供持久的癌症控制和卓越的生活质量：结构性辩论(Radical prostatectomy for localized prostate cancerprovides durable cancer control with excellent quality of life:a structureddebate)”.《泌尿外科杂志(The Journal of urology)》2000；163:1802-7。
[4]Yamashita S、Kato R、Kobayashi K、Hisasue Si、Arai Y、Tsukamoto T.“保留神经的根治性前列腺切除术后神经损伤相关的勃起功能障碍：一种新型的实验解剖模型(Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radicalprostatectomy:A novel experimental dissection model)”.《国际泌尿外科杂志(International journal of urology)》2009；16:905-11。
[5]Stanford JL、Feng Z、Hamilton AS、Gilliland FD、Stephenson RA、Eley JW等人“用于临床上局部前列腺癌的根治性前列腺切除术之后的尿液和性功能：前列腺癌结果研究(Urinary and sexual function after radical prostatectomy for clinicallylocalized prostate cancer:the Prostate Cancer Outcomes Study)”.《美国医学会杂志(Jama.)》2000；283:354-60。
[6]Walsh PC.“解剖型根治性前列腺切除术：外科手术技术的发展(Anatomicradical prostatectomy:evolution of the surgical technique)”.《泌尿外科杂志(TheJournal of urology)》1998；160:2418-24。
[7]Tewari A、Peabody JO、Fischer M、Sarle R、Vallancien G、Delmas V等人“在腹腔镜和机器人根治性前列腺切除术期间有助于神经保护的手术和解剖学研究(Anoperative and anatomic study to help in nerve sparing during laparoscopic androbotic radical prostatectomy)”.《欧洲泌尿外科(European urology)》2003；43:444-54。
[8]Nandipati KC、Raina R、Agarwal A、Zippe CD.“保留神经的外科手术显著影响根治性前列腺切除术之后的长期尿失禁(Nerve-sparing surgery significantlyaffects long-term continence after radical prostatectomy)”.《泌尿外科(Urology)》2007；70:1127-30。
[9]Koehler N、Holze S、Gansera L、Rebmann U、Roth S、Scholz HJ等人“根治性前列腺切除术之后的勃起功能障碍：神经保护状态和外科手术方式的影响(Erectiledysfunction after radical prostatectomy:the impact of nerve-sparing statusand surgical approach)”.《国际阳痿研究杂志(International journal of impotenceresearch)》2012；24:155-60。
[10]Nelson CJ、Scardino PT、Eastham JA、Mulhall JP.“返回基线：从患者角度看，根治性前列腺切除术之后勃起功能恢复(Back to Baseline:Erectile FunctionRecovery after Radical Prostatectomy from the Patients'Perspective)”.《性医学杂志(The journal of sexual medicine)》2013。
[11]O'Malley MR、Wittkopf JE、Cutler JL、Labadie RF、Hackett TA、HaynesDS.“面神经的荧光逆行轴突追踪(Fluorescent retrograde axonal tracing of thefacial nerve)”.《喉镜(The Laryngoscope)》2006；116:1792-7。
[12]Marangos N、Illing R-B、J、Laszig R.“使用荧光轴突示踪剂在体内可视化耳蜗神经和细胞核(In vivo visualization of the cochlear nerve，nucleiwith fluorescent axonal tracers)”.《听力研究(Hearing Research)》2001；162:48-52。
[13]De Proost I、Pintelon I、Brouns I、Timmermans J-P、Adriaensen D.“苯乙烯基吡啶鎓染料对离体气道整体壁平滑肌层中感觉受体的选择性可视化(Selectivevisualisation of sensory receptors in the smooth muscle layer of ex-vivoairway whole-mounts by styryl pyridinium dyes)”.《细胞和组织研究(Cell andtissue research)》2007；329:421-31。
[14]Naskar R、Wissing M、Thanos S.“青光眼大鼠模型视网膜中早期神经元变性和伴随的小胶质细胞反应的检测(Detection of early neuron degeneration andaccompanying microglial responses in the retina of a rat model of glaucoma)”.《眼科研究与视力学(Investigative ophthalmology&visual science)》2002；43:2962-8。
[15]Papworth GD、Delaney PM、Bussau LJ、Vo LT、King RG.“大鼠输精管和结肠微血管和神经的体内光纤共聚焦成像(In vivo fibre optic confocal imaging ofmicrovasculature and nerves in the rat vas deferens and colon)”.《解剖学杂志(Journal of anatomy)》1998；192:489-95。
[16]Gibbs-Strauss SL、Nasr KA、Fish KM、Khullar O、Ashitate Y、Siclovan TM等人“用于图像引导外科手术的神经荧光造影剂(Nerve-highlighting fluorescentcontrast agents for image-guided surgery)”.《分子成像(Molecular imaging)》2011；10:7290-2010。
[17]Cotero VE、Kimm SY、Siclovan TM、Zhang R、Kim EM、Matsumoto K等人“通过髓磷脂结合荧光团和双模式腹腔镜成像改善术中神经的可视化(Improvedintraoperative visualization of nerves through a myelin-binding fluorophoreand dual-mode laparoscopic imaging)”.《公共科学图书馆·综合(PloS one)》2015；10:e0130276。
[18]Stankoff B、Wang Y、Bottlaender M、Aigrot M-S、Dolle F、Wu C等人“通过正电子发射层析的CNS髓鞘的成像(Imaging of CNS myelin by positron-emissiontomography)”.《美国国家科学院院刊(Proceedings of the National Academy ofSciences)》2006；103:9304-9。
[19]Park MH、Hyun H、Ashitate Y、Wada H、Park G、Lee JH等人“原型神经特异性近红外荧光团(Prototype nerve-specific near-infrared fluorophores)”.2014。
[20]Barth CW、Gibbs SL.“直接施用神经特异性造影剂以改善保留神经的根治性前列腺切除术(Direct Administration of Nerve-Specific Contrast to ImproveNerve Sparing Radical Prostatectomy)”.《治疗诊断学(Theranostics)》2017；7:573-93。
[21]Massaad CA、Zhang G、Pillai L、Azhdarinia A、Liu W、Sheikh KA.“荧光标记的抗神经节苷脂抗体可选择性地识别活体动物的外周神经(Fluorescently-taggedanti-ganglioside antibody selectively identifies peripheral nerve in livinganimals)”.《科学报告(Scientific reports)》2015；5:15766。
[22]Whitney MA、Crisp JL、Nguyen LT、Friedman B、Gross LA、Steinbach P等人“荧光肽在小鼠外科手术期间突出外周神经(Fluorescent peptides highlightperipheral nerves during surgery in mice)”.《自然生物技术(Naturebiotechnology)》2011；29:352-6。
[23]Wu AP、Whitney MA、Crisp JL、Friedman B、Tsien RY、Nguyen QT.“使用新型荧光标记探针改善面神经识别(Improved facial nerve identification with novelfluorescently labeled probe)”.《喉镜(The Laryngoscope)》2011；121:805-10。
[24]Hussain T、Mastrodimos MB、Raju SC、Glasgow HL、Whitney M、Friedman B等人“荧光标记的肽增加了外科手术期间面神经分支退化的识别并改善了功能结果(Fluorescently labeled peptide increases identification of degenerated facialnerve branches during surgery and improves functional outcome)”.《公共科学图书馆·综合(PloS one)》2015；10:e0119600。
[25]Glasgow HL、Whitney MA、Gross LA、Friedman B、Adams SR、Crisp JL等人“外周神经突出肽的层粘连蛋白靶向能够实现退化的神经可视化(Laminin targeting ofa peripheral nerve-highlighting peptide enables degenerated nervevisualization)”.《美国国家科学院院刊(Proceedings of the National Academy ofSciences)》2016；113:12774-9。
[26]C、Apps R、Bechmann I、Lanciego JL、Mey J、Thanos S.“神经解剖学追踪中的当前概念(Current concepts in neuroanatomical tracing)”.《神经生物学进展(Progress in neurobiology)》2000；62:327-51。
[27]Richmond FJR、Gladdy R、Creasy JL、Kitamura S、Smits E、Thomson DB.“七种逆行示踪剂对猫运动神经元多标记研究的疗效比较(Efficacy of seven retrogradetracers,compared in multiple-labelling studies of feline motoneurones)”.《神经科学方法杂志(Journal of neuroscience methods)》1994；53:35-46。
[28]Davila HH、Mamcarz M、Nadelhaft I、Salup R、Lockhart J、Carrion RE.“阴茎注射之后大鼠中荧光示踪剂对神经血管束和主要骨盆神经节的可视化(Visualizationof the neurovascular bundles and major pelvic ganglion with fluorescenttracers after penile injection in the rat)”.《英国国际泌尿学杂志(BJUinternational)》2008；101:1048-51。
[29]Schaumburg HH、Zotova E、Cannella B、Raine CS、Arezzo J、Tar M等人“小鼠海绵体神经的结构和功能研究：自主神经病的系列时空研究模型系统(Structural andfunctional investigations of the murine cavernosal nerve:a model system forserial spatio-temporal study of autonomic neuropathy)”.《英国国际泌尿学杂志(BJU international)》2007；99:916-24。
[30]Karam I、Droupy S、Abd-Alsamad I、Korbage A、Uhl J-F、G等人“男性人尿道神经的精确位置和性质：三维重建的组织学和免疫组化研究(The preciselocation and nature of the nerves to the male human urethra:histological andimmunohistochemical studies with three-dimensional reconstruction)”.《欧洲泌尿外科(European urology)》2005；48:858-64。
[31]Liu W、Gu R、Zhu Q、Xiao C、Huang L、Zhuang X等人“硬膜外施用神经突出荧光团后脊髓的快速荧光成像(Rapid fluorescence imaging of spinal cord followingepidural administration of a nerve-highlighting fluorophore)”.《治疗诊断学(Theranostics)》2017；7:1863-74。
[32]Descotes J.《单克隆抗体的免疫毒性(Immunotoxicity of monoclonalantibodies)》第2版：Taylor和Francis，第104-11页。
[33]Chames P、Van Regenmortel M、Weiss E、Baty D.“治疗性抗体：成功、局限和对未来的希望(Therapeutic antibodies:successes,limitations and hopes for thefuture)”.《英国药理学杂志(British journal of pharmacology)》2009；157:220-33。
[34]Lim TKY、Shi XQ、Johnson JM、Rone MB、Antel JP、David S等人“外周神经损伤导致持续的血管功能障碍和神经内膜缺氧，导致神经性疼痛的发生(Peripheral nerveinjury induces persistent vascular dysfunction and endoneurial hypoxia,contributing to the genesis of neuropathic pain)”.《神经科学杂志(Journal ofNeuroscience)》2015；35:3346-59。
[35]Marques MJ、Santo Neto H.“通过共聚焦荧光显微镜对神经肌肉接头成像：在整个肌肉中可见单个终板，神经末梢有重要的细胞内染色(Imaging neuromuscularjunctions by confocal fluorescence microscopy:individual endplates seen inwhole muscles with vital intracellular staining of the nerve terminals)”.《解剖学杂志(The Journal of Anatomy)》1998；192:425-30。
[36]Cherrick GR、Stein SW、Leevy CM、Davidson CS.“吲哚菁绿：对其物理性质、血浆衰变和肝脏提取的观察(Indocyanine green:observations on its physicalproperties,plasma decay,and hepatic extraction)”.《临床研究杂志(Journal ofClinical Investigation)》1960；39:592。
[37]Marshall MV、Rasmussen JC、Tan IC、Aldrich MB、Adams KE、Wang X等人“人体内吲哚菁绿的近红外荧光成像：综述与更新(Near-infrared fluorescence imaging inhumans with indocyanine green:a review and update)”.《开放外科肿瘤学杂志(Opensurgical oncology journal)》(在线)2010；2:12。
[38]Guillonneau B.“腹腔镜根治性前列腺切除术期间神经和血管的保存(Neurological and vascular preservation during laparoscopic radicalprostatectomy)”.《泌尿外科杂志：法国泌尿外科协会杂志和法国泌尿外科协会杂志(Progres en urologie:journal de l'Association francaise d'urologie et de laSociete francaise d'urologie)》2009；19:S180-2。
[39]Wang C、Wu C、Zhu J、Miller RH、Wang Y.“髓鞘形成成像中基于香豆素的分子探针的设计、合成和评价(Design,synthesis,and evaluation of coumarin-basedmolecular probes for imaging of myelination)”.《药物化学杂志(Journal ofmedicinal chemistry)》2011；54:2331-40。
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Claims (252)

1.一种人类神经靶向分子，所述靶向分子包括人类神经靶向肽，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)或其从N末端或C末端缺失2个氨基酸的变体。
2.根据权利要求1所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)。
3.根据权利要求1所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)的肽序列从N末端缺失2个氨基酸后的序列。
4.根据权利要求1所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)的肽序列从C末端缺失2个氨基酸后的序列。
5.一种人类神经靶向分子，其包括：(i)人类神经靶向肽，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)或其从N末端或C末端缺失2个氨基酸的变体；和(ii)选自由以下组成的组的货物：药物、荧光部分和光敏染料。
6.一种人类神经靶向分子，其包括：(i)人类神经靶向肽，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)；和(ii)选自由以下组成的组的货物：药物、荧光部分和光敏染料。
7.一种人类神经靶向分子，其包括：(i)人类神经靶向肽，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)的肽序列从N末端缺失2个氨基酸后的序列；和(ii)选自由以下组成的组的货物：药物、荧光部分和光敏染料。
8.一种人类神经靶向分子，其包括：(i)人类神经靶向肽，其中所述人类神经靶向肽的序列是SGQVPWEEPYYVVKKSS(SEQ ID NO:1)的肽序列从C末端缺失2个氨基酸后的序列；和(ii)选自由以下组成的组的货物：药物、荧光部分和光敏染料。
9.根据权利要求5所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述药物。
10.根据权利要求6所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述药物。
11.根据权利要求7所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述药物。
12.根据权利要求8所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述药物。
13.根据权利要求9所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和其组合。
14.根据权利要求10所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和其组合。
15.根据权利要求11所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和其组合。
16.根据权利要求12所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：抗组胺药、GABA受体调节剂、神经递质再摄取抑制剂、局部麻醉剂、抗胆碱能药、钠通道阻滞剂、钙通道阻滞剂、促甲状腺激素释放激素、γ-分泌酶抑制剂、AMPA受体激动剂或拮抗剂、NMDA受体激动剂或拮抗剂、mGlu受体激动剂或拮抗剂、生长因子、止吐剂、皮质类固醇；细胞毒性剂；抗氧化剂、铁螯合剂、线粒体调节剂、去乙酰化酶调节剂、一氧化氮(NO)和/或一氧化氮合酶(NOS)调节剂、钾通道激动剂或拮抗剂、嘌呤受体激动剂或拮抗剂和其组合。
17.根据权利要求9所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：苯佐卡因；卡替卡因；辛可卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特；曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；铂丙嗪；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和其组合。
18.根据权利要求10所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：苯佐卡因；卡替卡因；辛可卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特；曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；铂丙嗪；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和其组合。
19.根据权利要求11所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：苯佐卡因；卡替卡因；辛可卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特；曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；铂丙嗪；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和其组合。
20.根据权利要求12所述的人类神经靶向分子，其中所述药物选自由以下组成的组：苯佐卡因；卡替卡因；辛可卡因；环甲卡因；利多卡因；丙胺卡因；普西卡因；普鲁卡因；丁卡因；托卡尼特；曲美卡因；甲氨蝶呤；环磷酰胺；沙利度胺；紫杉醇；培美曲塞；喷司他丁；哌泊溴烷；匹克酮；普卡霉素；铂丙嗪；甲基苄肼；雷替曲塞；瑞贝卡霉素；鲁比替康；SN-38；盐孢酰胺A；沙铂；链脲佐菌素；苦马豆素；塔里基达；紫杉烷；替加氟尿嘧啶；替莫唑胺；睾丸内酯；硫代TEPA；噻鸟嘌呤；拓扑替康；特拉贝丁；维甲酸；三硝酸四硝酸盐；三(2-氯乙基)胺；曲沙他滨；尿嘧啶芥末；缬沙星；长春碱；长春新碱；长春瑞滨；伏立诺他；左苏喹达；卡马西平；奥卡西平；苯妥英；丙戊酸；丙戊酸钠；桂那利嗪；氟硝嗪；尼莫地平；脑源性神经营养因子(BDNF)；睫状神经营养因子(CNTF)；胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)；神经营养因子-3；神经营养因子-4；成纤维细胞生长因子(FGF)受体；胰岛素样生长因子(IGF)；和其组合。
21.根据权利要求5所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述荧光部分。
22.根据权利要求6所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述荧光部分。
23.根据权利要求7所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述荧光部分。
24.根据权利要求8所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述荧光部分。
25.根据权利要求21所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料和其组合。
26.根据权利要求22所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料和其组合。
27.根据权利要求23所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料和其组合。
28.根据权利要求24所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：荧光蛋白、荧光肽、荧光染料和其组合。
29.根据权利要求21所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；和稀土金属螯合物。
30.根据权利要求22所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；和稀土金属螯合物。
31.根据权利要求23所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；和稀土金属螯合物。
32.根据权利要求24所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：氧杂蒽；比曼；香豆素；芳香胺；苯并呋喃；荧光花青；咔唑；二氰基亚甲基吡喃；聚次甲基；恶二苯并蒽；吡喃鎓；卡波斯蒂基；二萘嵌苯；吖啶酮；喹吖啶酮；红荧烯；蒽；晕苯；烯菲；芘；丁二烯；二苯乙烯；卟啉；酞菁；镧系金属螯合物；和稀土金属螯合物。
33.根据权利要求21所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：5-羧基荧光素；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM和荧光素。
34.根据权利要求22所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：5-羧基荧光素；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM和荧光素。
35.根据权利要求23所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：5-羧基荧光素；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM和荧光素。
36.根据权利要求24所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分选自由以下组成的组：5-羧基荧光素；5-异硫氰酸荧光素；6-羧基荧光素；四甲基罗丹明-6-异硫氰酸酯；5-羧基四甲基罗丹明；5-羧基对甲氨基酚；四甲基和四乙基罗丹明；二苯基二甲基和二苯基二乙基罗丹明；二萘罗丹明；罗丹明101磺酰氯；Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy 7、吲哚菁绿、IR800CW、青色荧光蛋白(CFP)、EGFP、6-FAM、FAM和荧光素。
37.根据权利要求5所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述光敏染料。
38.根据权利要求6所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述光敏染料。
39.根据权利要求7所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述光敏染料。
40.根据权利要求8所述的人类神经靶向分子，其中所述货物包括所述光敏染料。
41.根据权利要求9所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
42.根据权利要求10所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
43.根据权利要求11所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
44.根据权利要求12所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
45.根据权利要求13所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
46.根据权利要求14所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
47.根据权利要求15所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
48.根据权利要求16所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
49.根据权利要求17所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
50.根据权利要求18所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
51.根据权利要求19所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
52.根据权利要求20所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的末端。
53.根据权利要求21所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
54.根据权利要求22所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
55.根据权利要求23所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
56.根据权利要求24所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
57.根据权利要求25所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
58.根据权利要求26所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
59.根据权利要求27所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
60.根据权利要求28所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
61.根据权利要求29所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
62.根据权利要求30所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
63.根据权利要求31所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
64.根据权利要求32所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
65.根据权利要求33所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
66.根据权利要求34所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
67.根据权利要求35所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
68.根据权利要求36所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的末端。
69.根据权利要求37所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的末端。
70.根据权利要求38所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的末端。
71.根据权利要求39所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的末端。
72.根据权利要求40所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的末端。
73.根据权利要求9所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
74.根据权利要求10所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
75.根据权利要求11所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
76.根据权利要求12所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
77.根据权利要求13所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
78.根据权利要求14所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
79.根据权利要求15所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
80.根据权利要求16所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
81.根据权利要求17所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
82.根据权利要求18所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
83.根据权利要求19所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
84.根据权利要求20所述的人类神经靶向分子，其中所述药物连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
85.根据权利要求21所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
86.根据权利要求22所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
87.根据权利要求23所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
88.根据权利要求24所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
89.根据权利要求25所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
90.根据权利要求26所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
91.根据权利要求27所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
92.根据权利要求28所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
93.根据权利要求29所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
94.根据权利要求30所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
95.根据权利要求31所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
96.根据权利要求32所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
97.根据权利要求33所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
98.根据权利要求34所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
99.根据权利要求35所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
100.根据权利要求36所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
101.根据权利要求37所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
102.根据权利要求38所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
103.根据权利要求39所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
104.根据权利要求40所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料连接到所述人类神经靶向肽的C末端。
105.根据权利要求9-20、41-52和73-84中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括连接子。
106.根据权利要求21-36、53-68和85-100中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括连接子。
107.根据权利要求37-40、69-72和101-104中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括连接子。
108.根据权利要求9-20、41-52和73-84中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述药物通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
109.根据权利要求105所述的人类神经靶向分子，其中所述药物通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
110.根据权利要求21-36、53-68和85-100中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
111.根据权利要求106所述的人类神经靶向分子，其中所述荧光部分通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
112.根据权利要求37-40、69-72和101-104中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
113.根据权利要求107所述的人类神经靶向分子，其中所述光敏染料通过连接子连接到所述人类神经靶向肽。
114.根据权利要求105所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
115.根据权利要求108所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
116.根据权利要求109所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
117.根据权利要求106所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
118.根据权利要求110所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
119.根据权利要求111所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
120.根据权利要求107所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
121.根据权利要求112所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
122.根据权利要求113所述的人类神经靶向分子，其中所述连接子是直链或支链碳连接子、杂环碳连接子、氨基酸连接子、亲脂残基、肽连接子、肽核酸连接子、腙连接子、SPDB二硫化物、磺基-SPDB、马来酰亚胺基甲基环己烷-1-羧酸酯(MCC)、氨基己酸连接子、聚醚连接子或聚乙二醇连接子。
123.根据权利要求114所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
124.根据权利要求115所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
125.根据权利要求116所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
126.根据权利要求117所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
127.根据权利要求118所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
128.根据权利要求119所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
129.根据权利要求120所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
130.根据权利要求121所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
131.根据权利要求122所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子具有小于5个氨基酸。
132.根据权利要求114所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
133.根据权利要求115所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
134.根据权利要求116所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
135.根据权利要求123所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
136.根据权利要求124所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
137.根据权利要求125所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
138.根据权利要求117所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
139.根据权利要求118所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
140.根据权利要求119所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
141.根据权利要求126所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
142.根据权利要求127所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
143.根据权利要求128所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
144.根据权利要求120所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
145.根据权利要求121所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
146.根据权利要求122所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
147.根据权利要求129所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
148.根据权利要求130所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
149.根据权利要求131所述的人类神经靶向分子，其中所述肽连接子是甘氨酸连接子。
150.根据权利要求123所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
151.根据权利要求124所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
152.根据权利要求125所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
153.根据权利要求126所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
154.根据权利要求127所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
155.根据权利要求128所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
156.根据权利要求129所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
157.根据权利要求130所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
158.根据权利要求131所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；QVPWEEPYYVVKKSSGG；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
159.根据权利要求150所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
160.根据权利要求151所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
161.根据权利要求152所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
162.根据权利要求153所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
163.根据权利要求154所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
164.根据权利要求155所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
165.根据权利要求156所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
166.根据权利要求157所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
167.根据权利要求158所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：QVPWEEPYYVVKKSSGG。
168.根据权利要求150所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
169.根据权利要求151所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
170.根据权利要求152所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
171.根据权利要求153所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
172.根据权利要求154所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
173.根据权利要求155所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
174.根据权利要求156所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
175.根据权利要求157所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
176.根据权利要求158所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和肽连接子的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC。
177.一种人类神经靶向分子，其包括人类神经靶向肽和荧光部分，其中所述人类神经靶向肽和荧光部分的序列是：5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2，Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM，Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM，或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC-5FAM。
178.根据权利要求177所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向肽和荧光部分的序列是：5FAM-QVPWEEPYYVVKKSSGG-NH2。
179.一种人类神经靶向分子，其包括人类神经靶向肽和荧光部分，其中所述人类神经靶向肽和荧光部分的序列是：Ac-SGQVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM；Ac-QVPWEEPYYVVKKSSGGC-5FAM；或Ac-SGQVPWEEPYYVVKKGGC-5FAM。
180.一种用于在识别人类神经的方法中使用的药剂，所述药剂包含根据权利要求21-36、53-68、85-100、106、110-111、117-119、126-128、138-143、153-155、162-164、171-173和177-179中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括荧光部分，并且其中所述方法包括使所述人类神经与所述人类神经靶向分子接触。
181.一种用于在将药物递送到人类神经的方法中使用的药剂，所述药剂包含根据权利要求9-20、41-52、73-84、105、108-109、114-116、123-125、132-137、150-152、159-161和168-170中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括药物，并且其中所述方法包括使所述人类神经与所述人类神经靶向分子接触。
182.一种用于在将光敏染料递送到人类神经的方法中使用的药剂，所述药剂包含根据权利要求37-40、69-72、101-104、107、112-113、120-122、129-131、144-149、156-158、165-167和174-176中任一项所述的人类神经靶向分子，其中所述人类神经靶向分子还包括光敏染料，并且其中所述方法包括使所述人类神经与所述人类神经靶向分子接触。
183.根据权利要求182所述的药剂，其中所述方法进一步包括将所述人类神经暴露于激活所述光敏染料的光源，其中所述人类神经由所述激活的光敏染料烧蚀。
184.根据权利要求180所述的药剂，其中所述人类神经靶向分子通过人类受试者的全身静脉内注射来施用。
185.根据权利要求181所述的药剂，其中所述人类神经靶向分子通过人类受试者的全身静脉内注射来施用。
186.根据权利要求182所述的药剂，其中所述人类神经靶向分子通过人类受试者的全身静脉内注射来施用。
187.根据权利要求183所述的药剂，其中所述人类神经靶向分子通过人类受试者的全身静脉内注射来施用。
188.根据权利要求180所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
189.根据权利要求181所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
190.根据权利要求182所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
191.根据权利要求183所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
192.根据权利要求184所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
193.根据权利要求185所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
194.根据权利要求186所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
195.根据权利要求187所述的药剂，其中在外科手术之前，将所述人类神经靶向分子施用于所述人类受试者。
196.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
197.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
198.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
199.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
200.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
201.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
202.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
203.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是外伤外科手术。
204.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
205.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
206.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
207.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
208.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
209.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
210.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
211.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是重建外科手术。
212.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
213.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
214.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
215.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
216.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
217.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
218.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
219.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是头部和颈部外科手术。
220.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
221.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
222.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
223.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
224.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
225.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
226.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
227.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是脊柱外科手术。
228.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
229.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
230.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
231.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
232.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
233.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
234.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
235.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺外科手术。
236.根据权利要求188所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
237.根据权利要求189所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
238.根据权利要求190所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
239.根据权利要求191所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
240.根据权利要求192所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
241.根据权利要求193所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
242.根据权利要求194所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
243.根据权利要求195所述的药剂，其中所述外科手术是癌症外科手术。
244.根据权利要求236所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
245.根据权利要求237所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
246.根据权利要求238所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
247.根据权利要求239所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
248.根据权利要求240所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
249.根据权利要求241所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
250.根据权利要求242所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
251.根据权利要求243所述的药剂，其中所述外科手术是前列腺癌外科手术。
252.一种药物组合物，其包括：(a)根据权利要求1-104和111-179中任一项所述的人类神经靶向分子，和(b)药学上可接受的赋形剂。
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3153142A1 (en) * 2019-10-10 2021-04-15 Brett J. Berman Methods and systems using peptides for targeting and mapping human nerves in image guided surgery, diagnostics and therapeutic delivery
WO2022120177A1 (en) * 2020-12-04 2022-06-09 Alume Biosciences, Inc. Nerve targeting peptides and methods of use
CN116916971A (zh) 2021-01-14 2023-10-20 阿鲁莫生物科学公司 用于外科操作中输尿管可视化的方法和组合物
CN113274511B (zh) * 2021-04-27 2023-02-03 中南大学湘雅医院 一种神经损伤诊断显像剂及其制备方法

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4452720A (en) 1980-06-04 1984-06-05 Teijin Limited Fluorescent composition having the ability to change wavelengths of light, shaped article of said composition as a light wavelength converting element and device for converting optical energy to electrical energy using said element
US4439356A (en) 1981-03-03 1984-03-27 Syva Company Unsymmetrical fluorescein derivatives
US4496542A (en) 1981-03-30 1985-01-29 Usv Pharmaceutical Corporation N-substituted-amido-amino acids
US4659839A (en) 1984-10-10 1987-04-21 Mallinckrodt, Inc. Coupling agents for radiolabeled antibody fragments
US5330900A (en) 1987-12-31 1994-07-19 Tropix, Inc. Chemiluminescent 3-(substituted adamant-2'-ylidene) 1,2-dioxetanes
US5066580A (en) 1988-08-31 1991-11-19 Becton Dickinson And Company Xanthene dyes that emit to the red of fluorescein
US5227487A (en) 1990-04-16 1993-07-13 Molecular Probes, Inc. Certain tricyclic and pentacyclic-hetero nitrogen rhodol dyes
US5750409A (en) 1991-11-18 1998-05-12 Boehringer Mannheim Gmbh Pentacyclic compounds and their use as absorption or fluorescent dyes
US5847162A (en) 1996-06-27 1998-12-08 The Perkin Elmer Corporation 4, 7-Dichlororhodamine dyes
US6080852A (en) 1996-06-27 2000-06-27 The Perkin-Elmer Corporation 4,7-dichlororhodamine dyes
US6008379A (en) 1997-10-01 1999-12-28 The Perkin-Elmer Corporation Aromatic-substituted xanthene dyes
US5936087A (en) 1997-11-25 1999-08-10 The Perkin-Elmer Corporation Dibenzorhodamine dyes
US8685372B2 (en) * 2009-04-15 2014-04-01 The Regents Of The University Of California Peptides and aptamers for targeting of neuron or nerves
US20120055055A1 (en) 2010-09-02 2012-03-08 Illumin8 Outdoor Media, LLC Systems and Method for Outdoor Media Signage
AU2013243953A1 (en) * 2012-04-02 2014-10-30 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US10231626B2 (en) 2013-03-15 2019-03-19 The Regents Of The University Of California Imaging system and method for fluorescence guided surgery
EP2959913A1 (en) * 2014-06-23 2015-12-30 Universite D'angers Use of a neurofilament peptide for targeting neural stem cells
CN107249647A (zh) * 2014-12-15 2017-10-13 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 具有增强的神经结合选择性的环状肽、与所述环状肽结合的纳米颗粒和此二者用于实时体内神经组织成像的用途

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Fluorescent peptides highlight peripheral nerves during surgery in mice;Michael A Whitney et al.;《Nat Biotechnol》;20110206;352-356 *
Fluorescently labeled peptide increases identification of degenerated facial nerve branches during surgery and improves functional outcome;Timon Hussain et al.;《PLoS One》;20150309;e0119600 *
Nerve-targeted probes for fluorescence-guided intraoperative imaging;Dina V Hingorani et al.;《Theranostics》;20180730;4226-4237 *
Timon Hussain et al..Fluorescently labeled peptide increases identification of degenerated facial nerve branches during surgery and improves functional outcome.《PLoS One》.2015,e0119600. *

Also Published As

Publication number Publication date
KR20200033954A (ko) 2020-03-30
IL272397A (en) 2020-03-31
US20200239522A1 (en) 2020-07-30
IL309994A (en) 2024-03-01
US11802138B2 (en) 2023-10-31
US20210087229A1 (en) 2021-03-25
US11299515B2 (en) 2022-04-12
US20210363186A1 (en) 2021-11-25
JP7282087B2 (ja) 2023-05-26
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