CN111226688A - 一种防治金针菇黑腐病的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于金针菇生产的技术领域，具体的涉及一种防治金针菇黑腐病的方法。该种防治金针菇黑腐病的方法，包括以下步骤：(1)生产前期：对发菌车间、搔菌车间、出菇车间及搔菌设备进行严格消毒；(2)生产过程中：在生产过程中及时检查金针菇是否具有黑腐病；(3)病害发生后：及时清理菇根和发病的子实体，对切掉和摘除的发病子实体进行杀菌和隔离；加强出菇室通风、停止喷水、降低湿度，进而控制病害。该方法是一套贯穿整个金针菇生产的防治系统，可以有效地为金针菇生产挽回不必要的损失。

Description

一种防治金针菇黑腐病的方法
技术领域
本发明属于金针菇生产的技术领域，具体的涉及一种防治金针菇黑腐病的方法。
背景技术
金针菇学名毛柄金钱菌，又称毛柄小火菇、构菌、冬菇、朴菰、冻菌、金菇、智力菇等，其菌柄细长，似金针菜，故称金针菇。金针菇质地脆嫩，营养丰富，氨基酸含量高于一般菇类，尤其氨基酸含量特别高，能促进记忆、开发智力，特别有利于儿童的健康成长和智力发育，因此又有“增智菇”、“智力菇”之称。黑腐病在金针菇培养中是一个非常大的祸患，造成金针菇黑腐病的病原菌是托拉斯假单胞杆菌，该病通常有很高的传染性，稍不注意会引起大面积发病的情况；而且只要发生病害，只能通过清除染病栽培瓶的方式来处理，给企业造成巨大的损失，因此如何有效防治金针菇黑腐病是亟待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于针对金针菇黑腐病如何有效防治的问题而提供一种防治金针菇黑腐病的方法。该方法是一套贯穿整个金针菇生产的防治系统，可以有效地为金针菇生产挽回不必要的损失。
本发明的技术方案为：一种防治金针菇黑腐病的方法，包括以下步骤：
(1)生产前期：对发菌车间、搔菌车间、出菇车间及搔菌设备进行严格消毒；
(2)生产过程中：在生产过程中及时检查金针菇是否具有黑腐病，并采取防治措施；检查步骤如下：在搔菌后3～4天从栽培瓶中采集培养分离水，然后将该培养分离水涂布于专用检测培养基中，在26～28℃环境中培养72小时，观察菌落生长情况，当菌落出现最初呈绿色后期呈墨绿色，菌落呈不规则圆形的菌落特征，则认定为含有黑腐病原菌；其中专用检测培养基包括以下原料：PAF培养基、甘油、酒石酸钠、溴麝香草酚蓝和结晶紫；防治措施为：专用检测培养基检测出黑腐病原菌后，适当通风，降低空间湿度，开启臭氧发生器对培养料料面和空间进行杀菌处理；
(3)病害发生后：及时清理菇根和发病的子实体，对切掉和摘除的发病子实体进行杀菌和隔离；加强出菇室通风、停止喷水、降低湿度，进而控制病害。
所述步骤(1)中严格消毒的具体操作如下：发菌车间和出菇车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，然后开启臭氧发生器进行消毒，其中臭氧浓度为0.5g/m3，发菌车间和出菇车间每月维护时臭氧发生器开启24小时；搔菌车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，搔菌设备先用清水冲洗，再用高压气枪清洁，其中搔菌刀头采用喷洒酒精后点火进行火焰消毒，搔菌车间清扫完毕后开启紫外灯灭菌。
所述步骤(2)中的检查步骤具体如下：
a.采集检测样本：在搔菌后3～4天从栽培瓶中采集培养分离水作为检测样本，备用；搔菌时补充水分为无菌水。
b.制备专用检测培养基：专用检测培养基包括以下原料：PAF培养基、甘油、酒石酸钠、溴麝香草酚蓝和结晶紫；首先将所述甘油调和成质量体积浓度为10g/L的甘油水溶液；取1g溴麝香草酚蓝溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入500ml蒸馏水调和成浓度为0.2％的溴麝香草酚蓝溶液；取1g结晶紫溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入1000mL蒸馏水调和成浓度为0.1％的结晶紫溶液；然后将40g的PAF培养基加入至900mL甘油水溶液中；再依次加入2g的酒石酸钠、15mL的溴麝香草酚蓝溶液以及5mL的结晶紫溶液；最后用甘油水溶液定容至1000mL；
c.处理专用检测培养基：将步骤b所得的专用检测培养基在101kpa、121℃环境下高压灭菌35～40分钟；然后待冷却至80℃取出，放置于超净工作台上紫外灯杀菌不低于15分钟，冷却至40℃倒入平板，其中每个平板倒入15～20ml冷却备用；
d.涂布培养：将步骤a所采集的检测样本接入步骤c制备好的平板上在25～28℃环境中进行涂布培养72小时；
e.观察菌落：菌落出现最初呈绿色后期呈墨绿色，菌落呈不规则圆形的菌落特征，则认定为含有黑腐病原菌。
所述步骤(2)中的防治措施具体如下：专用检测培养基检测出黑腐病原菌后，出菇室通风0.5～1小时，将空间湿度降至80％～85％，开启臭氧发生器，臭氧浓度控制在0.5g/m3，维持一小时后关闭，间隔6小时后再次开启一小时，反复循环3次。开启臭氧发生器，既能够短时间内杀灭细菌，又不会对金针菇现蕾和子实体生长造成影响；同时臭氧能够很快分解还原为氧气，无污染、无残留，对人体无害。
所述步骤(3)病害发生后对切掉和摘除的发病子实体先高压灭菌2小时，然后量少则掩埋处理，量大则送入电厂做生物燃料焚烧处理；加强出菇室通风时间，在原有通风时间基础上增加1小时；停止喷雾化水；同时病害发生后在出菇房放入臭氧发生器，使之产生0.5g/m3浓度的臭氧，维持一小时后关闭，间隔4小时后再次开启一小时，反复循环5次。
所述防治金针菇黑腐病的方法，还包括对挖瓶车间和包装车间进行消毒，因为挖瓶车间和包装车间均含有大量病原菌，会传播到其他环境中，具体消毒操作如下：挖瓶车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，用硫磺熏蒸器对车间空气消毒；包装车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，开启紫外灯灭菌，开启时间为前一天工作结束至第二天工作开始。
所述防治金针菇黑腐病的方法，还包括对外围环境进行消毒，具体包括做好地面的清洁，垃圾桶及时清理，下水道避免积水；参观人员做好表面消毒：带一次性头套、脚套，表面衣服喷洒酒精喷雾，风淋并且走参观通道；参观人数尽量减少。
所述防治金针菇黑腐病的方法，在病害控制之前，降低出菇房湿度至80％，以逐渐较少病害发生和病原菌的积累。该湿度不仅抑制杂菌生长，而且也能保证金针菇的生长。
本发明的有益效果为：本发明所述防治金针菇黑腐病的方法是一套贯穿整个金针菇生产的防治系统，在生产前期进行全面无死角消毒，尽量减少病原菌存在、潜伏的可能性，尽量做到无菌操作；生产过程中可以快速检测到病原菌，仅需将搔菌后培养分离水接入专用检测培养基中涂布培养72小时便能够精准的检测到金针菇生产中是否含有病原菌，及时做好消毒防治工作，杜绝病原菌的聚集累积，减少发病的可能性；病害发生后及时彻底治理病原菌，有效控制病害。可见采用本发明所述防治方法可以为金针菇生产挽回不必要的损失。
附图说明
图1为实施例1对黑腐病的检测菌落特征图；
图2为对比例2对黑腐病的检测菌落特征图。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
所述防治金针菇黑腐病的方法，包括以下具体步骤：
(1)生产前期：对发菌车间、搔菌车间、出菇车间及搔菌设备进行严格消毒：发菌车间和出菇车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，然后开启臭氧发生器进行消毒，其中臭氧浓度为0.5g/m3，发菌车间和出菇车间每月维护时臭氧发生器开启24小时；搔菌车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，搔菌设备先用清水冲洗，再用高压气枪清洁，其中搔菌刀头采用喷洒酒精后点火进行火焰消毒，搔菌车间清扫完毕后开启紫外灯灭菌；
(2)生产过程中：在生产过程中及时检查金针菇是否具有黑腐病，如果检出病原菌进行防治，具体步骤具体如下：
a.采集检测样本：在搔菌后3～4天从栽培瓶中采集培养分离水作为检测样本，备用；搔菌时补充水分为无菌水；
b.制备专用检测培养基：专用检测培养基包括以下原料：PAF培养基、甘油、酒石酸钠、溴麝香草酚蓝和结晶紫；首先将所述甘油调和成质量体积浓度为10g/L的甘油水溶液；取1g溴麝香草酚蓝溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入500ml蒸馏水调和成浓度为0.2％的溴麝香草酚蓝溶液；取1g结晶紫溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入1000mL蒸馏水调和成浓度为0.1％的结晶紫溶液；然后将40g的PAF培养基加入至900mL甘油水溶液中；再依次加入2g的酒石酸钠、15mL的溴麝香草酚蓝溶液以及5mL的结晶紫溶液；最后用甘油水溶液定容至1000mL；
c.处理专用检测培养基：将步骤b所得的专用检测培养基在101kpa、121℃环境下高压灭菌35～40分钟；然后待冷却至80℃取出，放置于超净工作台上紫外灯杀菌不低于15分钟，冷却至40℃倒入平板，其中每个平板倒入15～20ml冷却备用；
d.涂布培养：将步骤a所采集的检测样本接入步骤c制备好的平板上在25～28℃环境中进行涂布培养72小时；
e.观察菌落：菌落出现最初呈绿色后期呈墨绿色，菌落呈不规则圆形的菌落特征，则认定为含有黑腐病原菌；
f.杀灭病原菌：专用检测培养基检测出黑腐病原菌后，出菇室通风45分钟，将空间湿度降至80％～85％，开启臭氧发生器，臭氧浓度控制在0.5g/m3，维持一小时后关闭，间隔6小时后再次开启一小时，反复循环3次。
(3)病害发生后：及时清理菇根和发病的子实体，对切掉和摘除的发病子实体先高压灭菌2小时，然后量少则掩埋处理，量大则送入电厂做生物燃料焚烧处理；加强出菇室通风时间，在原有通风时间基础上增加1小时；停止喷雾化水，降低湿度，进而控制病害。同时病害发生后在出菇房放入臭氧发生器，使之产生0.5g/m3浓度的臭氧，维持一小时后关闭，间隔4小时后再次开启一小时，反复循环5次。
所述防治金针菇黑腐病的方法，还包括对挖瓶车间和包装车间进行消毒，因为挖瓶车间和包装车间均含有大量病原菌，会传播到其他环境中，具体消毒操作如下：挖瓶车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，用硫磺熏蒸器对车间空气消毒；包装车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，开启紫外灯灭菌，开启时间为前一天工作结束至第二天工作开始。
所述防治金针菇黑腐病的方法，还包括对外围环境进行消毒，具体包括做好地面的清洁，垃圾桶及时清理，下水道避免积水；参观人员做好表面消毒：带一次性头套、脚套，表面衣服喷洒酒精喷雾，风淋并且走参观通道；参观人数尽量减少。
所述防治金针菇黑腐病的方法，在病害控制之前，降低出菇房湿度至80％，以逐渐较少病害发生和病原菌的积累。该湿度不仅抑制杂菌生长，而且也能保证金针菇的生长。
实施例2
未对搔菌车间水质做更改，使用普通自来水搔菌时喷洒料面；未对搔菌设备进行消毒，仅做简单清理，其余步骤与实施例1相同在此不做赘述。
实施例3
未对搔菌车间使用紫外灯杀菌，其余步骤与实施例1相同，在此不做赘述。
实施例4
未对挖瓶车间使用硫磺熏蒸器熏蒸，其余步骤与实施例1相同，在此不做赘述。
实施例5
未对发菌车间进行消毒及未开启臭氧发生器，其余步骤与实施例1相同，在此不做赘述。
实施例6
未对出菇车间进行上述的消毒步骤防护，其余步骤与实施例1相同，在此不做赘述。
对比例1
未在生产过程中使用上述防治方法，使用原方式进行生产。
对比例2
生产过程中检查金针菇是否具有黑腐病所采用的检测培养基配比如下：PAF培养基40g，甘油10g，质量体积百分比为0.2％的溴麝香草酚蓝溶液15mL，质量体积百分比为0.1％的结晶紫溶液5mL；其余步骤与实施例1相同，在此不做赘述。实践结果表明采用该对比例检测培养基不会对病原菌进行染色，无法达到对致病菌精准显色的目的，可见实施例1所采用的专用检测培养基其原料之间是相互协同配合，缺一不可。
病害防治效果分析如下：
实施例1-6以及对比例1分七个实验菇房，每个菇房15000瓶金针菇，调查病害发生率。
病害发生率＝发生病害的瓶数/总瓶数×100％。
表1
实施例/对比例 实验菇房病害发生瓶数 病害发生率％
实施例1 6 0.04％
实施例2 42 1.18％
实施例3 58 2.39％
实施例4 34 1.03％
实施例5 21 0.84％
实施例6 47 3.31％
对比例1 67 5.45％
结论：
菇房及搔菌车间是易感染杂菌的两个地方，是杂菌主要分布、潜伏地，重点做好消毒防治工作，及时清理病害菇，防止产生孢子，杜绝污染源。同时外部垃圾箱等易储存病原菌的设施摆放于工厂下风口。避免传播，减少杂菌污染率。

Claims (8)

1.一种防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)生产前期：对发菌车间、搔菌车间、出菇车间及搔菌设备进行严格消毒；
(2)生产过程中：在生产过程中及时检查金针菇是否具有黑腐病，并采取防治措施；检查步骤如下：在搔菌后3～4天从栽培瓶中采集培养分离水，然后将该培养分离水涂布于专用检测培养基中，在26～28℃环境中培养72小时，观察菌落生长情况，当菌落出现最初呈绿色后期呈墨绿色，菌落呈不规则圆形的菌落特征，则认定为含有黑腐病原菌；其中
专用检测培养基包括以下原料：PAF培养基、甘油、酒石酸钠、溴麝香草酚蓝和结晶紫；
防治措施为：专用检测培养基检测出黑腐病原菌后，适当通风，降低空间湿度，开启臭氧发生器对培养料料面和空间进行杀菌处理；
(3)病害发生后：及时清理菇根和发病的子实体，对切掉和摘除的发病子实体进行杀菌和隔离；加强出菇室通风、停止喷水、降低湿度，进而控制病害。
2.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，所述步骤(1)中严格消毒的具体操作如下：发菌车间和出菇车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，然后开启臭氧发生器进行消毒，其中臭氧浓度为0.5g/m3，发菌车间和出菇车间每月维护时臭氧发生器开启24小时；搔菌车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，搔菌设备先用清水冲洗，再用高压气枪清洁，其中搔菌刀头采用喷洒酒精后点火进行火焰消毒，搔菌车间清扫完毕后开启紫外灯灭菌。
3.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的检查步骤具体如下：
a.采集检测样本：在搔菌后3～4天从栽培瓶中采集培养分离水作为检测样本，备用；
b.制备专用检测培养基：专用检测培养基包括以下原料：PAF培养基、甘油、酒石酸钠、溴麝香草酚蓝和结晶紫；首先将所述甘油调和成质量体积浓度为10g/L的甘油水溶液；取1g溴麝香草酚蓝溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入500ml蒸馏水调和成浓度为0.2％的溴麝香草酚蓝溶液；取1g结晶紫溶解于1mL体积分数为70％的乙醇中，再加入1000mL蒸馏水调和成浓度为0.1％的结晶紫溶液；然后将40g的PAF培养基加入至900mL甘油水溶液中；再依次加入2g的酒石酸钠、15mL的溴麝香草酚蓝溶液以及5mL的结晶紫溶液；最后用甘油水溶液定容至1000mL；
c.处理专用检测培养基：将步骤b所得的专用检测培养基在101kpa、121℃环境下高压灭菌35～40分钟；然后待冷却至80℃取出，放置于超净工作台上紫外灯杀菌不低于15分钟，冷却至40℃倒入平板，其中每个平板倒入15～20ml冷却备用；
d.涂布培养：将步骤a所采集的检测样本接入步骤c制备好的平板上在25～28℃环境中进行涂布培养72小时；
e.观察菌落：菌落出现最初呈绿色后期呈墨绿色，菌落呈不规则圆形的菌落特征，则认定为含有黑腐病原菌。
4.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的防控措施具体具体操作如下：专用检测培养基检测出黑腐病原菌后，出菇室通风1～2小时，将空间湿度降至80％～85％，开启臭氧发生器，臭氧浓度控制在0.5g/m3，维持一小时后关闭，间隔6小时后再次开启一小时，反复循环3次。
5.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，所述步骤(3)病害发生后对切掉和摘除的发病子实体先高压灭菌2小时，然后量少则掩埋处理，量大则送入电厂做生物燃料焚烧处理；加强出菇室通风时间，在原有通风时间基础上增加1小时；停止喷雾化水；同时病害发生后在出菇房放入臭氧发生器，使之产生0.5g/m3浓度的臭氧，维持一小时后关闭，间隔4小时后再次开启一小时，反复循环5次。
6.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，还包括对挖瓶车间和包装车间进行消毒，具体消毒操作如下：挖瓶车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，用硫磺熏蒸器对车间空气消毒；包装车间的地面用84消毒液稀释50倍后喷洒消毒，开启紫外灯灭菌，开启时间为前一天工作结束至第二天工作开始。
7.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，还包括对外围环境进行消毒，具体包括做好地面的清洁，垃圾桶及时清理，下水道避免积水；参观人员做好表面消毒：带一次性头套、脚套，表面衣服喷洒酒精喷雾，风淋并且走参观通道；减少参观人数。
8.根据权利要求1所述防治金针菇黑腐病的方法，其特征在于，在病害控制之前，降低出菇房湿度至80％，以逐渐较少病害发生和病原菌的积累。
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