CN111225909A

CN111225909A - 新的化合物

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Publication number: CN111225909A
Application number: CN201880066621.6A
Authority: CN
Inventors: E.波拉斯德弗朗西斯科; M.J.雷缪南-布兰科; M.布罗特; B.德普雷斯; G.德奎雷斯; N.威兰德
Original assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd; Melinta Therapeutics Inc
Current assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd; Melinta Subsidiary Corp
Priority date: 2017-08-16
Filing date: 2018-08-15
Publication date: 2020-06-02
Also published as: EP3668854A1; EP3668854B1; AU2018318379B2; RU2020110521A; JP2020531577A; US20200170997A1; US11253499B2; KR20200041346A; CA3072292A1; AU2018318379A1; WO2019034702A1; BR112020003272A2

Abstract

本发明涉及式(I)的化合物及其治疗用途，例如治疗分枝杆菌感染或治疗分枝杆菌引起的疾病，如结核病。

Description

新的化合物

技术领域

本发明涉及新的化合物、包含其的组合物、以及其治疗用途，例如治疗分枝杆菌感染或治疗分枝杆菌引起的疾病，如结核病(也称为TB)。

背景技术

根据世界卫生组织2014年发布的报告，每年将近一千万人感染结核病(TB)，每年造成150万人死亡。尽管有可用的结核病治疗方法，但该疾病的发病率仍开始上升，这是由于结核分枝杆菌感染(结核病的结核分枝杆菌的致病菌因子，对许多一线治疗(例如异烟肼和利福平)产生耐药性。

乙硫异烟胺是异烟肼的结构类似物，经常被处方用于治疗多药耐药性结核病(MDRTB)，与异烟肼一样有效。然而，与乙硫异烟胺的使用有关的缺点是，为了在血液中获得可接受的药物浓度，需要高达1g/天，这与包括神经毒性和致命的肝毒性在内的严重副作用有关。因此，需要减少临床剂量和对乙硫异烟胺的暴露。

因此，本发明的一个目的是提供新颖的化合物，其可能能够增强用于治疗TB的药物的活性，特别是可通过EthA途径活化的药物，例如乙硫异烟胺。本发明另一个目的是提供用于治疗TB的新的化合物。

发明内容

在本发明第一方面，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐:

其中

n为1或2；

R¹为氢、氟、甲基或甲氧基；且

R²为苯基、吡啶基、C_3-6环烷基、哌啶-1-基或四氢吡喃基,

其中

苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基，且

环烷基、哌啶-1-基和四氢吡喃基任选取代有一个或两个氟。

在本发明第二方面，提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。特别是，其用于治疗结核病、分枝杆菌感染或分枝杆菌感染引起的疾病。

在本发明第三方面，提供了在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。

在本发明第四方面，提供了在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染引起的疾病的方法，包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐。

在本发明第五方面，提供了式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗分枝杆菌感染或分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。

在本发明第六方面，提供了药物组合物，其包含(a)式(I)的化合物或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的赋形剂。

在本发明第七方面，提供了(a)式(I)的化合物或药学上可接受的盐；和(b)至少一种其它抗分枝杆菌剂的组合。

发明详述

如上所述，本发明的一个方面涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐

其中

n为1或2；

R¹为氢、氟、甲基或甲氧基；且

R²为苯基、吡啶基、C_3-6环烷基、哌啶-1-基或四氢吡喃基,

其中

环烷基、哌啶-1-基和四氢吡喃基任选取代有一个或两个氟。

在一个实施方案中，本发明的化合物为式(I)的化合物。

当环烷基、哌啶-1-基和四氢吡喃基基团具有两个氟取代基时，它们可连接至相同的碳原子。

在一个实施方案中，n为1。

在一个实施方案中，R¹为H。

在一个实施方案中，R²为苯基、吡啶基、C_3-6环烷基、哌啶-1-基或四氢吡喃基,

其中苯基和吡啶基取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基,

环烷基为未取代的，且

哌啶-1-基和四氢吡喃基任选取代有一个或两个氟，其各自可连接至相同的碳原子。

在一个实施方案中，R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中苯基和吡啶基取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基，且

环烷基为未取代的。

在一个实施方案中，R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、任选取代有一个或多个氟的甲基，或取代有一个或多个氟的甲氧基，且

环烷基为未取代的。

在一个实施方案中，R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中苯基和吡啶基取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、任选取代有一个或多个氟的甲基，或取代有一个或多个氟的甲氧基，且

环烷基为未取代的。

在一个实施方案中，R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、三氟甲基、甲氧基或三氟甲氧基，且

环烷基为未取代的。

在一个实施方案中，特别是当R¹为氢时，R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯和氟，且

环烷基为未取代的。

其中苯基和吡啶基取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯和氟，且

环烷基为未取代的。

在一个实施方案中，R²为吡啶基，其任选取代有上述任一个实施方案中定义的任选取代基的任一个，或R²为未取代的C_3-6环烷基。

在一个实施方案中，R²为任选取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基或吡啶基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基。

在一个实施方案中，R²为任选取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基或吡啶基：氟、氯、甲基、甲氧基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、异丙氧基、-OCH₂CF₃。

在一个实施方案中，R²为取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基或吡啶基：氟、氯、甲基、甲氧基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、异丙氧基、-OCH₂CF₃。

在另一实施方案中，R²为吡啶基，其任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氟、氯、甲氧基、三氟甲基、异丙氧基、-OCH₂CF₃.

在另一实施方案中，R²为取代有1至3个独立选自以下的取代基的吡啶基：氟、氯、甲氧基、氰基、三氟甲基、异丙氧基、-OCH₂CF₃。在一个实施方案中，所述吡啶基仅取代有这些基团中之一。

在另一实施方案中，R²为任选取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基：氟、氯、甲基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基。

在另一实施方案中，R²为取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基：氟、氯、甲基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基。

在一个实施方案中，R¹为氟、甲基或甲氧基。

在一个实施方案中，当R¹为氟、甲基或甲氧基，R²为任选取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基。

在一个实施方案中，当R¹为氟、甲基或甲氧基时，R²为任选取代有一个氟的苯基。特别是，在该实施方案中，R²为取代有一个氟的苯基。

在上述实施方案每一个中，当说明每个基团可为任选取代的或取代有1至3个取代基时，各基团可以只取代有1或2个取代基。

特别是，当R²为吡啶基或苯基时，其任选取代有一个或两个选自以上定义的基团。

在所有上述实施方案中，优选地是R²，当被取代时，仅被一个取代基取代。

而且，当R²为取代有两个或三个基团的苯基或吡啶基时，这些基团优选独立选自氯和氟。

任何提到“吡啶基”时优选是指“2-吡啶基”或“3-吡啶基”。

可用于本发明的具体化合物包括:

4,4,4-三氟-1-[3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[3-(三氟甲基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

5,5,5-三氟-1-[3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]戊-1-酮；

1-(3-环丙基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-(3-环戊基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-(3-环己基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(5-氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3,5-二氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(4-氯-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[2-(三氟甲基)-4-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(4-氯苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[3-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3-氯苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(2,4-二氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(2-氯-4-氟-苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(6-甲氧基-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(5-氯-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-氟-2-(三氟甲基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3,4-二氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(4-氟-2-甲基-苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(2-氟-4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(2-氯-4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(6-氟-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3,4,5-三氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(4,4-二氟-1-哌啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(6-异丙氧基-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

1-(3-(4,4-二氟环己基)氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(4-氟苯基)-3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(4-氟苯基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4-(1-(4,4,4-三氟丁酰基)氮杂环丁烷-3-基)苄腈；和

4,4,4-三氟-1-(3-氟-3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮。

术语和定义

如本文所述，术语“C_3-6环烷基”是指包含3至6个碳原子的单环饱和环。因此，该术语包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

如本文所述，术语“氰基”是指–CN。

如本文所述，术语“C_1-3烷基”是指具有1至3个碳原子的直链或支链的链烷基。因此，术语“C_1-3烷基”包括甲基、乙基、正丙基和异丙基。

如本文所述，术语“C_1-3烷氧基”是指具有1至3个碳原子的直链或支链的链烷氧基。因此，术语“C_1-3烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基。

本文使用的术语"本发明的化合物"是指式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。术语"本发明的化合物"是指如上所定义的本发明的化合物的任一个。

而且，应理解短语如"式(I)的化合物或其药学上可接受的盐"或"本发明的化合物"预期包括式(I)的化合物、式(I)的化合物的药学上可接受的盐或溶剂合物、或它们的任何药学上可接受的组合。因此作为在此使用用于解释目的的非限制性实例，"式(I)的化合物或其药学上可接受的盐"包括作为溶剂合物的式(I)的化合物的药学上可接受的盐，且该短语还包括式(I)的化合物和式(I)的化合物的药学上可接受的盐的混合物。

应理解本文提及的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐包括作为游离碱或作为其药学上可接受的盐的式(I)的化合物。因此，在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物。在另一实施方案中，本发明可涉及式(I)的化合物的药学上可接受的盐。

术语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适用于与人和动物组织接触而没有过度毒性、刺激或其他问题或并发症，与合理的受益/风险比相称的那些化合物(包括盐)、材料、组合物和剂型。

药学上可接受的盐尤其包括，Berge，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中所述的那些，或P H Stahl和C G Wermuth，编辑，Handbook of Pharmaceutical Salts；Properties,Selection and Use,第2版Stahl/Wermuth:Wiley-VCH/VHCA,2011(参见http:// www.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-3906390519.html)中所列的那些。

合适的药学上可接受的盐可包括酸加成盐。这种盐可以通过与合适的酸反应形成，任选地在合适的溶剂如有机溶剂中反应，得到可以通过结晶和过滤分离的盐。

代表性的药学上可接受的酸加成盐包括但不限于：4-乙酰氨基苯甲酸盐、醋酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(besylate)、苯甲酸盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、丁酸盐、依地酸钙、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐(camsylate)、癸酸盐(decanoate)、己酸盐(hexanoate)、辛酸盐(octanoate)、肉桂酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、二葡萄糖酸盐、2,5-二羟基苯甲酸盐、双琥珀酸盐、十二烷基硫酸盐、依地酸盐(乙二胺四乙酸盐)、依托酸盐(月桂基硫酸盐)、乙烷-1,2-二磺酸盐(乙二磺酸盐)、乙磺酸盐(esylate)、甲酸盐、富马酸盐、半乳酸盐(粘酸盐)、龙胆酸盐(2,5-二羟基苯甲酸盐)、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、己基间苯二酚盐、马尿酸盐、海巴明(N,N'-二(去氢枞基)-乙二胺)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟萘甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(mesylate)、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘-1,5-二磺酸盐(萘二磺酸盐)、萘-2-磺酸盐(萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、对氨基苯磺酸盐、对氨基水杨酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、泛酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、苯基乙基巴比妥酸盐、磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、焦谷氨酸盐、丙酮酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、硬脂酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(8-氯茶碱)、硫氰酸盐、三乙基碘、十一酸盐、十一碳烯酸盐和戊酸盐。

如本文所述，术语“治疗有效量”是指与未接受该量的相应个体相比，导致对疾病、紊乱或副作用的改善的治疗、治愈、预防、或缓解，或降低疾病或紊乱的进展速度的任何量。

合适的“治疗有效量”将取决于许多因素，包括例如受试者的年龄和体重、需要治疗的确切病症及其严重程度、制剂的性质以及给药途径，并且将最终由主治医师决定。

化合物制备

本发明的化合物可以通过多种方法制备，包括标准化学方法。除非另有说明，否则任何先前定义的变量将继续具有先前定义的含义。说明性的一般合成方法在以下方案中列出，并且可以容易地适于制备本发明的其他化合物。可以根据实施例部分中公开的实验方法制备本发明的具体化合物。

用于合成式(I)化合物的一般程序在以下反应方案1-11中描述，并在实施例中说明。

式(I)的化合物的制备

式(I)的化合物，其中R¹和R²如本文之前所定义，可根据以下方案1制备：使用氯化氢或三氟乙酸将式(III)的氨基化合物进行BOC脱保护，然后将相应的式(II)的TFA盐或HCl盐与4,4,4-三氟丁酸或4,4,4-三氟丁酰基苯并三唑或5,5,5-三氟戊酰基苯并三唑偶联。

方案1

或者，式(I)的化合物可通过将相应的可商购的式(II)的游离氨基化合物与4,4,4-三氟丁酰基苯并三唑反应而制备。

式(IV)的化合物，其为式(I)的烷氧基吡啶化合物(其中R¹为H且R²为被任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基取代的吡啶基)可根据以下方案2制备：将相应的可商购的醇与式(V)的氟吡啶化合物反应。

方案2

式(VI)的化合物，其为式(I)的3-氟氮杂环丁烷化合物(其中R¹为F且R²为4-氟苯基)可根据方案3制备，通过使用N,N-二乙基氨基三氟化硫与相应的式(VII)的羟基氮杂环丁烷化合物进行脱氧氟化反应。

方案3

式(VIII)的化合物，其为式(I)的的4-甲基氮杂环丁烷化合物(其中R¹为甲基且R²为4-氟苯基)可根据方案4制备，通过将式(IX)的化合物与4,4,4-三氟丁酸偶联。式(IX)的化合物可通过使用氢化铝锂将式(X)的氰基化合物环化而制备。式(X)的化合物可通过以下制备：起始于2-(4-氟苯基)乙腈，将其与碘甲烷和叔丁醇钾反应，然后与多聚甲醛反应以得到式(XI)的中间体醇，其可最后与对甲苯磺酰氯在吡啶中反应以得到式(X)的化合物。

方案4

中间体的制备

式(XII)的氮杂环丁烷中间体(其中R¹为H且R²为4-或5-三氟吡啶-2-基)可根据方案5制备，将合适的吡啶与式(XIV)的亚磺酸盐中间体进行CH-活化反应，然后用三乙基硅烷对式(XIII)的化合物进行脱保护步骤。式(XIV)的磺酸盐中间体可通过用乙硫醇钠将式(XV)的化合物的吡啶基团断裂而制备。式(XV)的砜化合物可通过以下获得，将式(XVII)的酯化合物均裂为式(XVI)的硫基吡啶基底物，然后用氯化钌氧化。式(XVII)的化合物可通过以下获得，将式(XIX)的羧酸与草酰氯反应，然后使用2-巯基吡啶N-氧化物形成Barton酯中间体。式(XIX)的化合物可通过用氯甲酸苄基酯对相应的氨基化合物的保护步骤获得。

方案5

式(XX)的中间体(其中R²如本文之前定义且R¹为H)可根据以下方案6制备：使用作为催化剂的碘化镍(II)、二(三甲基甲硅烷基)氨基钠或二(三甲基甲硅烷基)氨基钾以及反式-2-氨基环己醇将可商购的式(XXI)的碘代氮杂环丁烷化合物与合适的硼酸进行交叉偶联反应。或者，式(XX)的中间体可通过可商购的式(XXI)的碘代氮杂环丁烷化合物与合适的卤代化合物的Negishi偶联反应制备。

方案6

式(XXII)的杂环烷基或二氟环烷基中间体(其中R¹为H且R²如上文对式(I)的化合物的定义)可根据方案7制备，使用氯化镍(II)将式(XXI)的碘代氮杂环丁烷化合物与合适的频哪醇硼烷化合物进行交叉偶联反应，然后是在氢气和钯/活性炭存在下式(XXIII)的中间体的还原步骤。

方案7

式(XXIV)的杂环烷基中间体(其中R¹为H且R²为4,4-二氟哌啶基)可根据方案8制备，通过在碳酸钾的存在下将式(XXI)的碘代氮杂环丁烷化合物用可商购的4,4-二氟哌啶进行取代反应。

方案8

式(XXV)的杂环烷基中间体(其中R¹为H且R²为哌啶)可根据方案9制备，通过在甲酸和三乙酰氧基硼氢化钠的存在下将可商购的N-Boc保护的氮杂环丁烷-4-酮和哌啶进行还原胺化反应。

方案9

式(XXVI)的中间体(其中R¹为OCH₃且R²为4-氟苯基)可根据方案10制备，使用氢化钠和碘甲烷对相应的式(XXVII)的醇进行烷基化反应。式(XXVII)的化合物可从可商购的N-Boc保护的氮杂环丁烷-3-酮和格氏试剂4-氟苯基有机镁溴化物制备。或者，式(XXVII)的化合物可通过有机锂衍生物(使用4-氟溴苯基和丁基锂在THF中制备)和可商购的N-Boc保护的氮杂环丁烷-3-酮的加成反应制备。

方案10

式(XXVIII)的中间体(其中n＝1或2)可根据以下方案11制备：通过在亚硫酰氯的存在下苯并三唑和4,4,4-三氟丁酸或5,5,5-三氟戊酸之间的反应。

方案11

使用方法

在一方面，本发明涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于治疗。

在一方面，本发明涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于治疗分枝杆菌感染。分枝杆菌感染为分枝杆菌感染引起的感染。

分枝杆菌可以是以下分枝杆菌种类之一：结核分枝杆菌复合体(Mycobacteriumtuberculosis complex)(MTC)、鸟分枝杆菌复合体(Mycobacterium avium complex)(MAC)、戈登分枝杆菌分支(Mycobacterium gordonae clade)、堪萨斯分枝杆菌分支(Mycobacterium kansasii clade)、龟分枝杆菌分支(Mycobacterium chelonae clade)、偶发分枝杆菌分支(Mycobacterium fortuitum clade)、副偶发分枝杆菌分支(Mycobacterium parafortuitum clade)或牝牛分枝杆菌分支(Mycobacterium vaccaeclade)。所述分枝杆菌还可以是溃疡分枝杆菌(Mycobacterium ulcerans)或麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)。

结核分枝杆菌复合体(MTC)的成员包括结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、非洲分枝杆菌(Mycobacterium africanum)、牛分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)、牛分枝杆菌BCG(Mycobacterium bovis BCG)、卡氏分枝杆菌(Mycobacteriumcanetti)、山羊分枝杆菌(Mycobacterium caprae)、田鼠分枝杆菌(Mycobacteriummicroti)和海豹分枝杆菌(Mycobacterium pinnipedii)。这些分枝杆菌是人类和动物结核病的病原体。结核分枝杆菌是人类结核病的主要原因。

在一个实施方案中，所述分枝杆菌是结核分枝杆菌复合体(MTC)的成员。

在一个实施方案中，所述感染是结核分枝杆菌感染。换句话说，分枝杆菌感染是由结核分枝杆菌导致的感染引起的。

在一个实施方案中，结核分枝杆菌具有多药耐药性。在另一实施方案中，该结核分枝杆菌对乙硫异烟胺有耐药性。

鸟分枝杆菌复合体(MAC)的成员包括鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)、鸟分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium paratuberculosis)、Mycobacterium aviumsilaticum、候米瑟氏鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium hominissuis)、哥伦比亚分枝杆菌(Mycobacterium columbiense)和Mycobacterium indicus pranii。

戈登分枝杆菌分支的成员包括亚洲分枝杆菌(Mycobacterium asiaticum)和戈登分枝杆菌(Mycobacterium gordonae)。

堪萨斯分枝杆菌分支的成员包括胃分枝杆菌(Mycobacterium gastri)和堪萨斯分枝杆菌(Mycobacterium kansasii)。

龟分枝杆菌分支的成员包括脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)、Mycobacterium bolletii和龟分枝杆菌(Mycobacterium chelonae)。

偶发分枝杆菌分支的成员包括波尼克分枝杆菌(Mycobacterium boenickei)、布里斯班分枝杆菌(Mycobacterium brisbanense)、Mycobacteriumcosmeticum、偶发分枝杆菌、偶发分枝杆菌解乙酰氨亚种(Mycobacterium fortuitum subspeciesacetamidolyticum)、休斯敦分枝杆菌(Mycobacterium houstonense)、玛格丽特分枝杆菌(Mycobacterium mageritense)、新奥尔良分枝杆菌(Mycobacterium neworleansense)、外来分枝杆菌(Mycobacterium peregrinum)、猪分枝杆菌(Mycobacterium porcinum)、塞内加尔分枝杆菌(Mycobacterium senegal ense)和败血分枝杆菌(Mycobacteriumsepticum)。

副偶发分枝杆菌分枝的成员包括南非分枝杆菌(Mycobacteriumaustroafricanum)、迪氏分枝杆菌(Mycobacterium diernhoferi)、腓特烈斯堡分枝杆菌(Mycobacterium frederiksbergense)、霍德勒分枝杆菌(Mycobacterium hodleri)、新金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)和副偶发分支杆菌(Mycobacteriumparafortuitum)。

因此，分枝杆菌感染可能是由以下分枝杆菌导致的感染引起的：结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、牛分枝杆菌BCG、卡氏分枝杆菌、山羊分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、海豹分枝杆菌、鸟分枝杆菌、鸟分枝杆菌副结核亚种、Mycobacterium avium silaticum、候米瑟氏鸟分枝杆菌、哥伦比亚分枝杆菌、Mycobacterium indicus pranii、亚洲分枝杆菌、戈登分枝杆菌、胃分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、Mycobacterium bolletii、龟分枝杆菌包括波尼克分枝杆菌、布里斯班分枝杆菌、Mycobacteriumcosmeticum、偶发分枝杆菌、偶发分枝杆菌解乙酰胺亚种、休斯敦分枝杆菌、马德里分枝杆菌、新奥尔良分枝杆菌、外来分枝杆菌、猪分枝杆菌、塞内加尔分枝杆菌、败血症分枝杆菌、南非分枝杆菌、迪氏分枝杆菌、腓特烈斯堡分枝杆菌、霍德勒分枝杆菌、新金色分枝杆菌、副偶发分枝杆菌、溃疡分枝杆菌和麻风分枝杆菌。

在另一方面，本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗由分枝杆菌感染引起的疾病，其中分枝杆菌选自上文所述的那些。由分枝杆菌感染引起的疾病包括但不限于结核病(例如，由结核分枝杆菌引起的结核病)、麻风病(例如，由麻风分枝杆菌引起的麻风病)、约内氏病(Johne's disease)(例如，由鸟分枝杆菌副结核亚种引起的约内氏病)、布路里溃疡或班兹达溃疡(Buruli或Bairnsdale ulcer)(例如，由溃疡分枝杆菌引起的布路里溃疡或班兹达溃疡)、克罗恩病(Crohn's disease)(例如，由鸟分枝杆菌副结核亚种引起的克罗恩病)、肺病或肺部感染、肺炎、粘液囊、滑膜、腱鞘、局部脓肿、淋巴结炎、皮肤和软组织感染、温德米尔夫人综合征(Lady Windermere syndrome)(例如，由鸟分枝杆菌复合体(MAC)引起的温德米尔夫人综合征)、MAC肺部疾病、播散性鸟分枝杆菌复合体(DMAC)、播散性鸟胞内分枝杆菌复合体(DMAIC)、热管肺(例如，由鸟分枝杆菌复合体引起的热管肺)、MAC乳腺炎、MAC化脓性肌炎或肉芽肿病。

在一个实施方案中，所述疾病是结核病。因此，本发明的一个方面涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，其用于治疗结核病。

在一个实施方案中，本发明涉及在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐。如本文所述，分枝杆菌感染为分枝杆菌感染引起的感染。分枝杆菌如上所述。

在一个实施方案中，分枝杆菌感染为结核分枝杆菌感染。

在另一实施方案中，本发明涉及在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染引起的疾病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，所述疾病为结核病。因此，本文还描述了在需要的哺乳动物中治疗结核病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，所述哺乳动物为人。

本领域技术人员将理解本文提及的治疗是指治疗已确诊的病症。然而，根据病症，本发明的化合物也可用于预防某些疾病。因此，在一个实施方案中，提供了疾病如TB的治疗或预防。在另一实施方案中，提供了疾病如TB的治疗。在另一实施方案中，提供了疾病如TB的预防。

在另一实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗分枝杆菌感染或治疗分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。

本文还描述了式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗结核病的药物中的用途。

在一个实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐(其用于治疗TB)，与硫代酰胺共同给药。在另一实施方案中，所述硫代酰胺为乙硫异烟胺。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。

因此，在一个实施方案中提供了用于治疗TB的药物组合物，其中所述组合物包含(a)式(I)的化合物；(b)硫代酰胺，例如乙硫异烟胺或丙硫异烟胺；和任选地(c)药学上可接受的赋形剂。

在另一实施方案中，本发明涉及在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，与硫代酰胺的组合，其中所述硫代酰胺可为乙硫异烟胺。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。如本文所述，分枝杆菌感染为分枝杆菌感染引起的感染。分枝杆菌如上所述。

在一个实施方案中，所述分枝杆菌感染为结核分枝杆菌感染。

在另一实施方案中，本发明涉及在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染引起的疾病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，与硫代酰胺的组合，其中所述硫代酰胺可为乙硫异烟胺。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。

在一个实施方案中，所述疾病为结核病。因此，本文还描述了在需要的哺乳动物中治疗结核病的方法，所述治疗包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，与硫代酰胺的组合，其中所述硫代酰胺可为乙硫异烟胺。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。

在另一实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，与硫代酰胺(例如，乙硫异烟胺)的组合，在制备用于治疗分枝杆菌感染或治疗分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。

本文还描述了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与硫代酰胺的组合(例如，乙硫异烟胺)在制备用于治疗结核病的药物中的用途。在一个供选实施方案中，所述硫代酰胺为丙硫异烟胺。

药物组合物

在施用于患者之前，式(I)的化合物及其药学上可接受的盐通常，但不必须，配制为药物组合物。因此，在另一方面提供了包含式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

药物组合物可通过任何合适的途径给药，例如通过口服(包括含服或舌下)、吸入、鼻内、局部(包括含服、舌下或经皮)或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)途径给药。特别是，本发明的药物组合物可通过口服或静脉内途径施用。

合适的药学上可接受的赋形剂包括以下类型的赋形剂：载体、稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、制粒剂、包衣剂、湿润剂、溶剂、共溶剂、悬浮剂、乳化剂、增甜剂、调味剂、掩味剂、着色剂、抗结块剂、润湿剂、螯合剂、增塑剂、粘度增加剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。

配制本发明化合物的合适的方法是本领域技术人员熟悉的，其描述于Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第21版，2006。

药物组合物可以以单位剂量形式存在，每单位剂量包含预定量的活性成分。优选的单位剂量组合物是包含日剂量或亚剂量或其适当分数的活性成分的那些。因此，这样的单位剂量可以每天多于一次给药。优选的单位剂量组合物是如上文所述包含每日剂量或亚剂量(用于一天给药多于一次)或其适当分数的活性成分的那些。

当本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗结核病时，它们可以单独使用或与其他治疗剂(例如其他抗分枝杆菌剂，例如抗结核病药剂和/或抗病毒剂，包括抗逆转录病毒剂)组合使用。

例如，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，与其它抗结核病药剂的组合。在一个实施方案中，所述组合包含两种、三种、四种、五种、六种或七种其它抗结核病药剂。例如，在多药耐药性结核病的治疗中，通常将四种或更多种药物的组合施用于患者。例如，在药物敏感性结核病的治疗中，通常将三种或四种药物的组合施用于患者。

其它抗结核病药剂为开发的、批准的或推荐用于治疗结核病的药剂，且可选自异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、莫西沙星、利福喷汀、氯法齐明、乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲、氨硫脲、利福布汀、二芳基喹啉如贝达喹啉(TMC207)或TBAJ-587、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、迪拉马尼(OPC-67683)、噁唑烷酮如利奈唑胺、特地唑胺、雷得唑来、sutezolid(PNU-100480)、泼斯唑来(AZD-5847)或TBI-223、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830、苯并噻嗪酮如BTZ043或PBTZ169、氮杂吲哚如TBA-7371、二硝基苯甲酰胺、或β-内酰胺如美罗培南、法罗培南、厄他培南、替比培南或β-内酰胺组合如AUGMENTIN(阿莫西林-克拉维酸)。

在一个实施方案中，所述抗结核病药剂可选自异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、莫西沙星、利福喷汀、氯法齐明、乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲、氨硫脲、贝达喹啉(TMC207)、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、迪拉马尼(OPC-67683)、噁唑烷酮如利奈唑胺、特地唑胺、雷得唑来、sutezolid(PNU-100480)、或泼斯唑来(AZD-5847)、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656A(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830和苯并噻嗪酮或二硝基苯甲酰胺。

根据本发明的组合还可包含抗病毒剂，包括抗逆转录病毒剂。

该抗逆转录病毒剂可选自齐多夫定(zidovudine)、去羟肌苷(didanosine)、拉米夫定(lamivudine)、扎西他滨(zalcitabine)、阿巴卡韦(abacavir)、司他夫定(stavudine)、阿德福韦(defovir)、阿德福韦二匹伏酯(adefovir dipivoxil)、福齐夫定(fozivudine)、todoxil、恩曲他滨(emtricitabine)、阿洛夫定(alovudine)、氨多索韦(amdoxovir)、艾夫他滨(elvucitabine)、奈韦拉平(nevirapine)、地拉韦啶(delavirdine)、依法韦伦(efavirenz)、洛韦胺(loviride)、immunocal、奥替普拉(oltipraz)、卡普韦林(capravirine)、lersivirine、GSK2248761、TMC-278、TMC-125、依曲韦林(etravirine)、沙奎那韦(saquinavir)、利托那韦(ritonavir)、茚地那韦(indinavir)、奈非那韦(nelfinavir)、安普那韦(amprenavir)、福沙那韦(fosamprenavir)、brecanavir、地瑞那韦(darunavir)、阿扎那韦(atazanavir)、替拉那韦(tipranavir)、帕利那韦(palinavir)、拉西那韦(lasinavir)、恩夫韦肽(enfuvirtide)、T-20、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、BMS-663068和BMS-626529、5-Helix、雷特格韦(raltegravir)、埃替格韦(elvitegravir)、GSK1349572、GSK1265744、vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、TAK779、马拉维若(maraviroc)、TAK449、去羟肌苷(didanosine)、替诺福韦(tenofovir)、洛匹那韦(lopinavir)和地瑞那韦(darunavir)。

本发明的化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)可以与可通过EthA途径活化的抗结核病药组合使用。本领域技术人员能够确定特定化合物是否可通过EthA途径被激活，例如，通过应用以下出版物中描述的方法：“Activation of the prodrugethionamide is regulated by mycobacteria”A.R.Baulard et al.,Journal ofBiological Chemistry,2000年，第28326-28331页。

更具体地，该抗结核病药剂可选自硫代酰胺家族，如乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲和氨硫脲。

在一个实施方案中，本发明的化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)与乙硫异烟胺组合使用。在该实施方案中，本发明的化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)已显示加强乙硫异烟胺的活性。

所述组合可以方便地以药物组合物或制剂的形式使用。因此，本文还考虑了药物组合物，其包含(a)本文所述的本发明化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)，以及(b)本文所述的一种或多种药学上可接受的载体，和(c)至少一种其他抗结核病药和(d)任选的抗病毒剂，包括抗逆转录病毒剂。

本发明的化合物(即式(I)的化合物或其药学上可接受的盐)和其他治疗剂可以一起或分开施用，并且当分开施用时，其可以以任何顺序分开或依次发生(通过相同或不同的施用途径)。将选择本发明的化合物(即式(I)化合物或其药学上可接受的盐)和其他治疗活性剂的量以及相对给药时间，以实现所需的联合治疗效果。

实施例

现在将通过以下非限制性实施例说明本发明。尽管下面描述了本发明的特定实施例，但是本领域技术人员将理解，可以进行各种改变和修改。以与其他制备类似的方式或通过其他制备的一般方法进行的制备可能包括常规参数的变化，例如时间、温度、处理条件、试剂量的细微变化等。

缩写

下表提供了本文使用的某些缩写和符号的定义。应当理解，该列表不是穷举的，但是对于本领域技术人员而言，本文以下未定义的那些缩写和符号的含义将是显而易见的。在描述本发明时，根据元素周期表识别化学元素。

anh 无水

aq. 水性

CDCl₃ 氘代氯仿

CD₂Cl₂ 氘代二氯甲烷

CyHex 环己烷

DCM 二氯甲烷

DIPEA 二异丙基乙基胺

DMA 二甲基乙酰胺

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO-d₆ 氘代二甲基亚砜

EDC.HCl N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐

Eq 当量

EtOAc 乙酸乙酯

HBTU N,N,N′,N′-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐

HPLC 高效液相色谱法

lnt. 中间体

LC 液相色谱法

LAH 氢化铝锂

M 摩尔浓度

MeOH 甲醇

EtOH 乙醇

MS 质谱分析

min 分钟

N 正常

NaH 氢化钠

NMR 核磁共振

p-TsOH·H₂O 对甲苯磺酸一水合物

quant. 定量

rt 室温

TFA 三氟乙酸

TEA 三乙胺

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

TMEDA 四甲基乙二胺

TMSCl 三甲基甲硅烷基氯

UPLC 超高效液相色谱法

记录了质子核磁共振(¹H NMR)谱，并报告了从内标四甲基硅烷(TMS)向低场的化学位移，以百万分之几(d)为单位。NMR数据的缩写如下：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，app＝表观，br＝宽峰。使用电喷雾(ES)电离技术获得质谱。所有温度均以摄氏度为单位。

在以下某些中间体和实施例中，起始原料是通过参考其他中间体或实施例编号来标识的。这并不表示来自任何特定中间体或实施例的实际材料必须在本文举例说明的后续步骤中使用，而是用作表示相关化合物名称的简略语。

中间体

中间体1：1-(苯并三唑-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮

将亚硫酰氯(SIGMA-ALDRICH，6.74mL，93mmol)和1H-苯并三唑(ALFA-AESAR，31.2g，262mmol)在DCM(150mL)中的溶液滴加至4,4,4-三氟丁酸(FLUOROCHEM，12g，85mmol)在DCM(150mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌12h。过滤掉沉淀且将滤液真空干燥以得到标题化合物(19.6g，94％)，其为灰白色固体。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.28(d，J＝8.3Hz，1H)，8.15(d，J＝8.4Hz，1H)，7.75-7.69(m，1H)，7.60-7.54(m，1H)，3.77(t，J＝7.8Hz，2H)，2.91-2.73(m，2H)。[ES+MS]m/z 244(MH⁺)。

中间体2：1-(苯并三唑-1-基)-5,5,5-三氟-戊-1-酮

中间体2使用类似于中间体1所述的方法制备，但将4,4,4-三氟丁酸用5,5,5-三氟戊酸(APOLLO，1.82ml，15.05mmol)替代。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.30-8.26(m，1H)，8.15-8.11(m，1H)，7.72-7.66(m，1H)，7.57-7.51(m，1H)，3.55(t，J＝7.2Hz，2H)，2.27-2.44(m，2H)，2.13-2.24(m，2H)。

中间体3：1-苄基氧基羰基氮杂环丁烷-3-甲酸

在0℃将氯甲酸苄基酯(ALFA-AESAR，7.93mL，55.5mmol)滴加至氮杂环丁烷-3-甲酸(FLUOROCHEM，4.32g，42.7mmol)和K₂CO₃(SIGMA-ALDRICH，13.6g，98.3mmol)在H₂O(50mL)中的溶液中。将反应温热至室温且搅拌过夜。该反应用EtOAc(50mL)洗涤且分层。然后水相用HCl(1N)酸化直到pH＝2且用EtOAc(x2)萃取，干燥，且浓缩以得到标题化合物(9.2g，91％)。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：10.03(s，1H)，7.43-7.27(m，5H)，5.12(s，2H)，4.31-4.15(m，4H)，3.51-3.41(m，1H)。[ES+MS]m/z 236(MH⁺)。

中间体4：氮杂环丁烷-1,3-二甲酸1-苄基酯O3-(2-硫酮基-1-吡啶基)酯

在0℃将中间体3(5.25g，22.3mmol)溶于DCM(60mL)。在氩气流下添加DMF(0.17mL，2.2mmol)，然后缓慢添加草酰氯(ACROS，2.9mL，33.4mmol)。将反应在0℃冷却，在铝箔中包裹，且避光。添加DCM(60mL)且将反应混合物冷却至0℃。添加DMAP(SIGMA-ALDRICH，272mg，2.2mmol)，然后分批添加2-巯基吡啶N-氧化物钠盐(SIGMA-ALDRICH，5g，33.4mmol)。将反应温热至室温且搅拌2h。一旦反应完成后，将反应烧瓶冷却至0℃且添加水(60mL)。分离各层(在铝箔中包裹的分液漏斗中)且有机物通过硅藻土垫过滤，同时用DCM洗涤(使用用铝箔覆盖的多孔玻璃漏斗和圆底烧瓶)。有机物在减压下在水浴中在不超过25℃浓缩同时避光(该水浴用铝箔覆盖)。烧瓶在铝箔中包裹且置于高真空以去除任何残留的DCM以得到标题化合物，将其用于下一步而不用纯化。[ES+MS]m/z 345(MH⁺)。

中间体5：3-(2-吡啶基硫基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄基酯

将中间体4(7.7g，22.3mmol)溶于EtOAc(60mL)且将烧瓶装配回流冷凝器。将反应用400W卤素灯照射直到Barton酯消耗(1h)(在20分钟照射后EtOAc通常回流且Barton酯通常在没有UV显象的情况下在TLC上显现为黄色点)。一旦反应完成后，添加水(60mL)且用EtOAc(x2)萃取，干燥且浓缩。残余物通过快速色谱法在硅胶上纯化，使用CyHex/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(4.1g，61％)。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.41-8.36(m，1H)，7.54-7.51(m，1H)，7.41-7.29(m，5H)，7.18-7.16(m，1H)，7.08-6.98(m，1H)，5.10(s，2H)，4.56-4.45(m，3H)，4.01-3.93(m，2H)。[ES+MS]m/z 301(MH⁺)。

中间体6：3-(2-吡啶基磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄基酯

在0℃向中间体5(4.04g，13.45mmol)在EtOAc/H₂O(30mL/30mL)中的溶液中添加三氯化钌水合物(SIGMA-ALDRICH，13.9mg，0.07mmol)，然后分批添加偏高碘酸钠(SIGMA-ALDRICH，17.3g，80.7mmol)。将反应在室温搅拌1h。一旦反应完成后，添加乙醚(50mL)且将反应搅拌30分钟。添加水(50mL)且分离各层。水相用EtOAc(x2)萃取且有机物用(无水)MgSO₄干燥且在减压下浓缩。残余物通过快速色谱法在硅胶上纯化，使用CyHex/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(4.4g，98％)，其为无色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.72-8.69(m，1H)，8.11-8.08(m，1H)，8.04-8.01(m，1H)，7.63-7.58(m，1H)，7.43-7.30(m，5H)，5.10(s，2H)，4.49-4.40(m，3H)，4.27(t，J＝9.0Hz，2H)。[ES+MS]m/z 333(MH⁺)。

中间体7：(1-苄基氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)磺酰基钠

在0℃在氩气氛将乙硫醇(SIGMA-ALDRICH，6.58mL，91.2mmol)缓慢添加至NaH60％(SIGMA-ALDRICH，1.56g，39.1mmol)在THF(20mL)中的悬浮液中。在0℃搅拌5分钟后，在0℃将反应混合物滴加至中间体6(4.33g，13.0mmol)的THF(10mL)溶液。将混合物在0℃搅拌2h，然后在室温搅拌10h。在真空去除溶剂后，残余物用H₂O(20mL)处理且将pH用HCl(1M)和碳酸氢钠(饱和溶液)调节至7。水层用乙醚洗涤以去除2-(乙基硫基)吡啶和乙硫醇。将水相浓缩且残余物通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度15分钟5％至50％ACN/H₂O(0.1％甲酸)，然后5分钟100％ACN以得到标题化合物(2.9g，80％)，其为无色油状物。[ES-MS]m/z 254(M-Na)。

中间体8：3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]氮杂环丁烷-1-甲酸苄基酯

在0℃向4-(三氟甲基)吡啶(Sigma ALDRICH，59μL，0.51mmol)、p-TsOH·H₂O(ACROS，97mg，0.51mmol)、中间体7(282.7mg，1.02mmol)和氯化锌(ACROS，104.2mg，0.76mmol)在H₂O(4mL)和碳酸二乙酯(6mL)中的溶液中缓慢添加叔丁基氢过氧化物(SigmaALDRICH，0.28ml，2.04mmol)且剧烈搅拌。5分钟后，将反应加热至90℃且搅拌1h。所得混合物用DCM和饱和K₂CO₃水溶液稀释。有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩，且残余物通过快速柱色谱法纯化，使用CyHex/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(46mg，27％)。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.89-8.79(m，1H)，7.50-7.25(m，7H)，5.13(s，2H)，4.41(t，J＝8.5Hz，2H)，4.34-4.19(m，2H)，4.07-3.98(m，1H)。[ES+MS]m/z 337(MH⁺)。

中间体9：3-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]氮杂环丁烷-1-甲酸苄基酯

中间体9使用类似于中间体8所述的方法制备，但将4-(三氟甲基)吡啶用3-(三氟甲基)吡啶(SIGMA-ALDRICH，0.68mmol)替代。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：9.03-8.87(m，1H)，8.01-7.82(m，1H)，7.48-7.26(m，6H)，5.15(s，2H)，4.42(t，J＝8.6Hz，2H)，4.33-4.21(m，2H)，4.08-3.97(m，1H)。[ES+MS]m/z 337(MH⁺)。

中间体10：2-(氮杂环丁烷-3-基)-4-(三氟甲基)吡啶

通过压力平衡滴液漏斗在氩气填充的气囊下向中间体8(53mg，0.16mmol)和10％Pd-C(ALFA-AESAR，10-20％重量)在MeOH(0.5mL)中的搅拌溶液中滴加纯的三乙基硅烷(SIGMA-ALDRICH，251.7μL，1.58mmol)。当反应完成后(1h，TLC)，混合物通过硅藻土过滤且将溶剂真空去除以得到标题化合物，将其用于下一步而不用进一步纯化。[ES+MS]m/z 203(MH⁺)。

中间体11：2-(氮杂环丁烷-3-基)-5-(三氟甲基)吡啶

中间体11使用类似于中间体10所述的方法制备，但将中间体8用中间体9(0.18mmol)替代。[ES+MS]m/z 203(MH+)。

中间体12：1-(苯并三唑-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮

将[4-(三氟甲氧基)苯基]硼酸(FLUOROCHEM，206mg，1.0mmol)、NiI₂(ALFA-AESAR，9.38mg，0.03mmol)、反式-2-氨基环己醇盐酸盐(SIGMA-ALDRICH，4.55mg，0.03mmol)和六甲基二硅基氨基钾(SIGMA-ALDRICH，199.5mg，1.00mmol)称重至微波瓶。然后将混合物加盖且置于氩气氛下。添加异丙醇(1.0mL)且将混合物在氮气下搅拌2h。快速添加在异丙醇溶液(0.25mL+0.25mL清洗液)中的3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(FLUOROCHEM，141.6mg，0.50mmol)。去除氩气氛且混合物在80℃加热30分钟。调节至室温后，将混合物用EtOH(5mL)稀释且通过硅藻土填料过滤。滤饼用EtOH(2x 5mL)清洗两次且将滤液真空浓缩以得到粗黄色油状物。残余物通过快速色谱法纯化，使用CyHex/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(102mg，61％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δppm：7.34(d，J＝8.6Hz，2H)，7.20(d，J＝8.6Hz，2H)，4.34(t，J＝8.5Hz，2H)，3.95(m，2H)，3.78-3.68(m，1H)，1.47(s，9H)。[ES+MS]m/z318(MH⁺)。

中间体13-33通过类似于中间体12所述的方法制备，但是将硼酸用表1中所述的替代。也指示了纯化步骤中的改变。

表1

a)通过制备型HPLC纯化(Varian，ACN/H₂O/HCOOH 0.1％10/90至100/0)

b)使用纯的DCM至DCM/MeOH 98/2的梯度纯化

中间体34：3-(4-氰基苯基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在26℃向3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(CNH TECHNOLOGIES，2g，7.067mmol)、(4-氰基苯基)硼酸(COMBIBLOCKS，2g，14.134mmol)在异丙醇(20mL)中的搅拌溶液中添加NiI₂(SIGMA-ALDRICH，132mg，0.424mmol)和反式-2-氨基环己醇盐酸盐(SIGMA-ALDRICH，64mg，0.424mmol)。反应混合物用氩气脱气10分钟，然后在26℃添加六甲基二硅基胺基钠(1M在THF中)(HYCHEM，14mL，14.134mmol)。在微波中将反应混合物加热至80℃保持1.5h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭且用EtOAc(3x 200mL)萃取。有机层用盐水溶液(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。粗化合物通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(1.1g，58％)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.65(d，J＝8.3Hz，2H)7.43(d，J＝8.1Hz，2H)4.40-4.33(m，2H)3.97-3.91(m，2H)3.82-3.73(m，1H)1.47(s，9H)。[ES+MS]m/z 203(M-57)。

中间体35：3-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在26℃向3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(CNH TECHNOLOGIES，2g，7.067mmol)和2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(OAKWOOD，2.37g，11.307mmol)在异丙醇(20mL)中的搅拌溶液中相继添加NiI₂(STREM，221mg，0.7067mmol)和(1R，2R)反式-2-氨基环己醇盐酸盐(COMBIBLOCKS，107mg，0.7067mmol)。反应混合物用氮气脱气15分钟且在26℃搅拌10分钟，然后在26℃添加六甲基二硅基胺基钠(1M在THF中)(HYCHEM，14mL，14.134mmol)。将反应混合物加热至80℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭且用EtOAc(3x 100mL)萃取。有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度以得到标题化合物(750mg，44％)，其为棕色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 5.54(br d，J＝1.3Hz，1H)，4.21-4.10(m，2H)，4.01(t，J＝8.7Hz，2H)，3.90-3.75(m，4H)，3.20-3.08(m，1H)，2.09(br t，J＝2.4Hz，2H)，1.43(s，9H)。[ES+MS]m/z 240(MH⁺)。

中间体36：3-(4,4-二氟环己-1-烯-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

中间体36通过类似于中间体35所述的方法制备，但将2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷用2-(4,4-二氟环己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(COMBIBLOCKS)替代。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：5.40(br d，J＝1.3Hz，1H)，4.03(t，J＝8.6Hz，2H)，3.84-3.78(m，2H)，3.23-3.12(m，1H)，2.63-2.46(m，2H)，2.30-2.21(m，2H)，2.12-1.98(m，2H)，1.44(s，9H)。

中间体37：3-(四氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在27℃向中间体35(750mg，3.138mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加10％Pd/C(HINDUSTAN，500mg)。在氢气氛(气囊压力)在相同温度将反应混合物搅拌4h。反应混合物通过硅藻土垫过滤且在减压下浓缩以得到标题化合物(700mg，92％)，其为棕色胶状物。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm：4.05-3.85(m，4H)，3.70-3.60(m，2H)，3.40-3.32(m，2H)，2.36-2.15(m，1H)，1.74-1.64(m，1H)，1.58-1.50(m，2H)，1.44(s，9H)，1.26-1.18(m，2H)。

中间体38：3-(4,4-二氟环己基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

中间体38通过类似于中间体37所述的方法制备，但将中间体35用中间体36替代。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：3.97(t，J＝8.6Hz，2H)，3.67-3.59(m，2H)，2.33-2.21(m，1H)，2.16-2.03(m，2H)，1.82-1.58(m，4H)，1.53-1.47(m，1H)，1.44(s，9H)，1.31-1.13(m，2H)。[ES+MS]m/z 275(M)。

中间体39：3-(3,5-二氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

将氯化锂(SIGMA-ALDRICH，316.3mg，7.46mmol)添加至装配有磁力搅拌棒和橡胶隔片的Schlenk管且用热风枪在真空加热10分钟且用氩气回填3次。称重锌粉(SIGMA-ALDRICH，487.9mg，7.46mmol)且在冷却至室温后添加至管。将锌粉再次在真空用热风枪加热10分钟且用氩气回填3次。冷却至室温后，添加THF(5mL)和碘(ALFA AESAR，23.7mg，0.09mmol)且在60℃在油浴中加热20分钟。在室温冷却后，添加3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(ACTIVATE SCIENTIFIC，647μL，3.73mmol)且将灰色反应混合物放回50℃的油浴保持22h。在室温冷却后，在0℃将Pd(PPh₃)₂Cl₂(ACROS，47.1mg，0.07mmol)和2-溴-3,5-二氟-吡啶(ENAMINE，133μL，1.24mmol)添加至Schlenk管。将混合物搅拌4.5h。然后黑色反应混合物通过添加饱和NH₄Cl水溶液淬灭且用EtOAc(x3)萃取。有机层用盐水洗涤，用(无水)MgSO₄干燥且真空浓缩。所得残余物通过快速色谱法纯化，使用DCM/MeOH的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(0.4g，79％)，其为黄色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.40(d，J＝2.4Hz，1H)，7.29-7.19(m，1H)，4.30-4.08(m，5H)，1.46(s，9H)。[ES+MS]m/z279(MH⁺)。

中间体40：3-(4-氯-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

中间体40通过类似于中间体39所述的方法制备，但将2-溴-3,5-二氟-吡啶用2-溴-4-氯-吡啶(FLUOROCHEM，1.25mmol)替代。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.53(d，J＝5.3Hz，1H)，7.27(d，J＝2.0Hz，1H)，7.27-7.22(m，1H)，4.29-4.24(m，2H)，4.13-4.08(m，2H)，3.89-3.81(m，1H)，1.46(s，9H)。[ES+MS]m/z 269，271(MH⁺)。

中间体41：3-[2-(三氟甲基)-4-吡啶基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

向装配磁力搅拌棒和聚四氟乙烯吹出隔膜的20mL螺口小瓶填充锌粉(SigmaALDRICH，163mg，2.50mmol)、XPhos-Pd-预催化剂(Angew.Chem.Int.Ed.2016，55，1849-1853.，43mg，5mmol％)、辛酸钠(FLUOROCHEM，83mg，0.5mmol)、氯化钠(VWR，116mg，2.00mmol)。将反应管抽真空且用氩气回填(3次)。然后添加4-溴-2-(三氟甲基)吡啶(APOLLO，123.7μL，1.00mmol)、3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(ACTIVATE SCIENTIFIC，260μL，1.50mmol)、TMEDA(SIGMA-ALDRICH，377μL，2.50mmol)、1-辛醇(LANCASTER，237μL，1.50mmol)和脱气的水(3.3mL)。在氩气流下将螺旋盖隔膜迅速用新的未刺破隔膜替换且将反应混合物在45℃搅拌36h。将试管冷却至室温且用EtOAc稀释。摇动反应混合物后，将内含物通过小的硅藻土垫过滤。将反应管和硅藻土垫用另外50mL EtOAc洗涤。将合并的滤液转移至分离漏斗且用0.3M HCl水溶液(x2)和0.3N NaOH水溶液(x2)洗涤。分离有机层，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法纯化，使用DCM/MeOH的线性梯度以得到标题化合物(100mg，15％)，其为黄色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.69(d，J＝5Hz，1H)，7.69-7.65(m，1H)，7.51-7.47(m，1H)，4.38(t，J＝8.7Hz，2H)，3.99-3.93(m，2H)，3.89-3.76(m，1H)，1.46(s，9H)。[ES+MS]m/z 303(MH⁺)。

中间体42：3-(5-氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

将锌粉(SIGMA-ALDRICH)缓慢添加至充分搅拌的2N HCl水溶液(FISHERSCIENTIFIC，6mL)中。将材料搅拌30分钟，然后将其过滤，用水、EtOH和乙醚洗涤。将材料在减压下干燥。

向装配磁力搅拌器的圆底烧瓶在氩气下填充锌粉(SIGMA-ALDRICH，138mg，根据上述制备预活化，2.1mmol)和DMA(0.5mL，无水)。然后缓慢添加1,2-二溴乙烷(ALFA-AESAR，14μL，0.158mmol)，然后缓慢添加TMSCl(SIGMA-ALDRICH，20μL，0.158mmol，0.15eq)。将反应混合物在室温搅拌30分钟。在65℃使用水浴经5分钟添加3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(ACTIVATE SCIENTIFIC，0.275mL，1.583mmol)在DMA(1mL，无水)中的溶液。将悬浮液在室温搅拌1h，此时将其用氩气脱气。停止搅拌且将悬浮液静置。向封闭管填充2-溴-5-氟-吡啶(ENAMINE，186mg，1.06mmol)、PdCl₂dppf·CH₂Cl₂(SIGMA-ALDRICH，25.8mg，0.032mmol，0.03)、Cul(SIGMA-ALDRICH，12.5mg，0.065mmol)和DMA(1mL，无水)。将溶液用氩气脱气。在氩气下将残余固体锌之上的澄清的锌试剂溶液倒入烧瓶。棕色溶液用氩气脱气，将管密封且加热至80℃保持17h。将盐水(5mL)添加至反应混合物，将其用EtOAc萃取。水层用EtOAc洗涤两次。有机层用盐水洗涤，用(无水)MgSO₄干燥且浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，使用DCM/MeOH的线性梯度以得到标题化合物(103mg，26％)，其为橙色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.47(d，J＝2.9Hz，1H)，7.43-7.36(m，1H)，7.25-7.21(m，1H)，4.29-4.23(m，2H)，4.12-4.07(m，2H)，3.92-3.84(m，1H)，1.46(s，9H)。[ES+MS]m/z 253(MH⁺)。

中间体43：3-(4,4-二氟-1-哌啶基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

将4,4-二氟哌啶盐酸盐(FLUOROCHEM，167mg，1.1mmol)、K₂CO₃(SIGMA-ALDRICH，390mg，2.8mmol)和3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(FLUOROCHEM，123μL，0.71mmol)在ACN(3mL)中的混合物在微波50装置(Anton Paar)中加热至120℃保持1.5h，然后加热至130℃保持1h。将所得溶液浓缩以得到残余物，将其用H₂O稀释，且用EtOAc萃取。有机萃取物用(无水)MgSO₄干燥且浓缩以得到标题化合物(200mg，定量)，其为黄色油状物，其用于下一步而不用进一步纯化。[ES+MS]m/z 277(MH⁺)。

中间体44：3-(哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在0℃向3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(ARK PHARMA，1g，5.841mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加哌啶(AVRA，744mg，8.762mmol)和甲酸(SIGMA-ALDRICH，催化量)。反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌4h。反应混合物用MeOH(10mL)稀释，然后在0℃分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(ALFA AESAR，2.47g，11.682mmol)。所得反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用水(100mL)稀释且用DCM(3x 100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(800mg，52％)，其为淡黄色液体。[ES+MS]m/z 241(MH⁺)。

中间体45：3-(4-氟苯基)-3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

方法A：在0℃向3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(ARKPHARMA，5g，29.207mmol)在THF(50mL)中的溶液中滴加(4-氟苯基)溴化镁(2M在THF中)(SIGMA-ALDRICH，29.2mL，58.414mmol)。反应混合物调节至27℃且搅拌2h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(50mL)淬灭且用EtOAc(2x 100mL)萃取。合并的有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(6.0g，80％)，其为淡黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.51-7.45(m，2H)，7.12-7.05(m，2H)，4.27-4.21(m，2H)，4.19-4.13(m，2H)，2.49(s，1H)，1.47(s，9H)。[ES+MS]m/z268(MH⁺)。

方法B：在-78℃向3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(OAKWOOD，1g，5.841mmol)、1-溴-4-氟苯(ALFA AESAR，1g，5.841mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加正丁基锂(2.5M在己烷中)(HYCHEM，2.3mL，5.841mmol)且在该温度搅拌2h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭且用EtOAc(3x 150mL)萃取。有机层用盐水(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(700mg，33.65％)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.52-7.45(m，2H)，7.12-7.03(m，2H)，4.27-4.13(m，4H)，2.87(br s，1H)，1.46(s，9H)。[ES+MS]m/z 212(M-57)。

中间体46：3-(4-氟苯基)-3-甲氧基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

在0℃向中间体45(1g，3.741mmol)在DMF(20mL)中的溶液中分批添加60％氢化钠(ALFA AESAR，300mg，7.482mmol)且在相同温度搅拌20分钟，然后在0℃滴加碘甲烷(SYMAXFINECHEMICALS，0.28mL，4.489mmol)。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌2h。反应混合物用冰冷却的水(50mL)淬灭且用EtOAc(2x 50mL)萃取。合并的有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(1.0g，95％)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.41-7.33(m，2H)，7.13-7.05(m，2H)，4.21-4.09(m，4H)，3.07(s，3H)1.45(s，9H)。[ES+MS]m/z 282(M-100)。

中间体47：2-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氟-吡啶二(2,2,2-三氟乙酸盐)

将中间体42(103.0mg，0.41mmol)溶于2mL DCM。添加TFA(SIGMA-ALDRICH，0.25mL，3.27mmol)且将反应混合物在室温搅拌1h。在减压下通过添加MeOH(10次)去除溶剂以去除过量TFA，得到标题化合物(155.2mg，100％)。[ES+MS]m/z 318(MH⁺)。

中间体48-72通过类似于中间体47所述的方法制备，但将中间体42用表2中所述的替代。

表2

a)反应混合物在室温搅拌过夜

b)粗物质用Amberlyst A21(5g)研磨20分钟且过滤

中间体73：3-(4-氯苯基)氮杂环丁烷盐酸盐

将中间体13(85.0mg，0.32mmol)溶于DCM(1mL)且添加HCl 4N在1,4-二噁烷(SIGMA-ALDRICH，1.59mL，6.35mmol)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌过夜。在减压下去除溶剂以得到标题化合物(90mg，定量)，将其用于下一步而不用进一步纯化。[ES+MS]m/z168(MH⁺)。

中间体74：3-(四氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷盐酸盐

中间体74通过类似于中间体73所述的方法制备，但将中间体13用中间体37替代。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：8.96-8.53(m，2H)，3.98-3.79(m，4H)，3.78-3.66(m，2H)，3.28-3.19(m，2H)，2.60-2.52(m，1H)，1.80-1.62(m，1H)，1.60-1.42(m，2H)，1.10-0.98(m，2H)。

中间体75：4-(氮杂环丁烷-3-基)苄腈盐酸盐

在0℃向中间体34(1.1g，4.258mmol)在EtOAc(8mL)中的溶液中添加HCl 4M在EtOAc(SYMAX，8mL)中的溶液。反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌2h。反应混合物在减压下浓缩，残余物用乙醚(50mL)洗涤且真空干燥以得到标题化合物(800mg)，其为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：9.45(br s，1H)，9.18(br s，1H)，7.88(d，J＝8.1Hz，2H)，7.65(d，J＝8.3Hz，2H)，4.34-4.20(m，3H)，4.13-4.01(m，2H)。[ES+MS]m/z 159(MH⁺)。

中间体76-79通过类似于中间体75所述的方法制备，但将中间体34用表3中所示的中间体替代。

表3

中间体80：2-(4-氟苯基)丙腈

在-78℃向2-(4-氟苯基)乙腈(MATRIX SCIENTIFIC，5g，36.998mmol)和碘甲烷(SYMAX FINE CHEMICALS，2.3mL，36.998mmol)在THF(100mL)中的搅拌溶液中滴加叔丁醇钾(1M在THF中)(HYCHEM，55.5mL，55.498mmol)。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭且用EtOAc(2x 200mL)萃取。合并的有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(3g，54％)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.37-7.29(m，2H)，7.10-7.03(m，2H)，3.89(q，J＝7.2Hz，1H)，1.63(d，J＝7.2Hz，3H)。

中间体81：2-(4-氟苯基)-3-羟基-2-甲基丙腈

在0℃向中间体80(1g，6.704mmol)和甲醛(FINAR，0.8g，26.816mmol)在吡啶(7mL)中的溶液中滴加40％苄基三甲基氢氧化铵在MeOH(ALFA AESAR，2.8mL，6.704mmol)中的溶液。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用1N HCl溶液(20mL)淬灭且用乙醚(2x 50mL)萃取。合并的有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且滤液在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(600mg，46％)，其为淡黄色稠液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.50-7.41(m，2H)，7.16-7.06(m，2H)，3.91-3.76(m，2H)，1.74(s，3H)。[ES+MS]m/z 180(MH⁺)。

中间体82：4-甲基苯磺酸2-氰基-2-(4-氟苯基)丙基酯

在0℃向中间体81(600mg，3.348mmol)在吡啶(10mL)中的溶液中添加对甲苯磺酰氯(AVRA，766mg，4.018mmol)。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用1N HCl溶液(20mL)淬灭且用EtOAc(2x 20mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩以得到标题化合物(800mg，65％)，其为淡黄色固体。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.74-7.67(m，2H)，7.40-7.29(m，4H)，7.09-7.00(m，2H)，4.14(s，2H)，2.45(s，3H)，1.75(s，3H)。[ES+MS]m/z 333(MH⁺)。

中间体83：3-(4-氟苯基)-3-甲基氮杂环丁烷

在0℃向中间体82(800mg，2.399mmol)在无水THF(10mL)中的溶液中滴加LAH(1M在THF中)(SIGMA-ALDRICH，3.6mL，3.599mmol)。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌4h。反应混合物用饱和氯化铵溶液(20mL)淬灭且用EtOAc(5x 20mL)萃取。合并的有机层用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩以得到标题化合物(500mg)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.74-7.68(m，2H)，7.15-6.89(m，2H)，4.40-4.32(m，2H)，3.99-4.05(m，2H)，1.78(s，3H)。[ES+MS]m/z166(MH⁺)。

中间体84：4,4,4-三氟-1-(3-(4-氟苯基)-3-羟基氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮

在0℃向中间体78(500mg，2.455mmol)、4,4,4-三氟丁酸(OAKWOOD，418mg，2.946mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加DMAP(AVRA，898mg，7.365mmol)和EDC.HCl(CHEMICALS，1.17g，6.138mmol)。反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用冰冷却的水(100mL)稀释且用EtOAc(3x 150mL)萃取。有机层用盐水(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且将滤液在减压下蒸发。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(400mg，52.6％)，其为淡黄色液体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：7.62-7.49(m，2H)，7.26-7.14(m，2H)，6.43(br s，1H)，4.44-4.38(m，1H)，4.29-4.24(m，1H)，4.13-3.96(m，2H)，2.49-2.34(m，4H)。[ES+MS]m/z292(MH⁺)。

实施例

实施例1：4,4,4-三氟-1-[3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮

添加悬浮于氯仿(1mL)和DMAP(SIGMA-ALDRICH，63.3mg，0.52mmol)中的3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷盐酸盐(ENAMINE，97mg，0.52mmol)。将反应混合物在室温搅拌5分钟且添加中间体1(120mg，0.49mmol，1eq)。在100℃将反应混合物暴露于微波照射达20分钟。反应混合物用Na₂CO₃饱和溶液(x3)洗涤，然后用HCl 1N溶液洗涤。有机层用盐水洗涤，用(无水)MgSO₄干燥。残余物通过快速色谱法在硅胶上纯化，使用CyHex/EtOAc(100/0至50/50)的线性梯度以得到标题化合物(80mg，59％)，其为无色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：7.36-3.31(m，2H)，7.09(t，J＝8.7Hz，2H)，4.55(t，J＝8.6Hz，1H)，4.40(t，J＝9.3Hz，1H)，4.15-4.10(m，1H)，4.05-3.99(m，1H)，3.89-3.84(m，1H)，2.59-2.44(m，2H)，2.44-2.36(m，2H)。[ES+MS]m/z 276(MH⁺)。

实施例2-35通过类似于实施例1所述的方法制备，但将3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷盐酸盐用表4中所述的替代。也指示了方案和纯化步骤中的修改。当实施例包含吡啶环时，该有机层不用酸性溶液洗涤。

表4

a)反应在没有DMAP情况下进行

b)在100℃15分钟

c)在硅胶上纯化(CyHex/EtOAc 90/10至50/50)

d)通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度15分钟10％至100％ACN/H₂O(0.1％甲酸)

e)通过制备型HPLC纯化(XBridge C18柱，5μ，30x 150mm)，梯度20分钟10％至50％ACN/H₂O(pH＝9，甲酸铵)

f)3eq DMAP

g)通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度30分钟10％至100％ACN/H₂O(0.1％甲酸)

h)在硅胶上纯化((DCM/MeOH 100/0至99/1)

i)2eq DMAP

j)通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度19分钟10％至100％ACN/H₂O(0.1％甲酸)

k)通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度35分钟10％至100％ACN/H₂O(0.1％甲酸)

l)通过制备型HPLC纯化(OmniSpher C18柱，10μ，41x 250mm)，梯度25分钟10％至100％ACN/H₂O(0.1％甲酸)

m)实施例3通过类似于实施例1所述的方法制备，但使用中间体2代替中间体1

实施例36：4,4,4-三氟-1-[3-(6-异丙氧基-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮

在0℃在氩气下向NaH(SIGMA-ALDRICH，15.2mg，0.634mmol)在(无水)THF(1.4mL)中的溶液中添加丙-2-醇(SIGMA-ALDRICH，0.048mL，0.634mmol)。10分钟后在室温添加实施例33(35mg，0.127mmol)且反应混合物在80℃回流加热过夜。该反应通过LCMS监测。将NaH(15.2mg，0.634mmol，5)在(无水)THF(1.40mL)和丙-2-醇(0.048mL，0.634mmol)中的新溶液在0℃在氩气下添加至反应混合物。反应混合物再次在回流80℃加热过夜。反应混合物用盐水/水(50/50)淬灭，然后用水淬灭。水层用EtOAc(x3)萃取。然后有机层用(无水)MgSO₄干燥，过滤且真空蒸发。残余物通过制备型HPLC纯化(XBridge C18柱，5μ，10x 150mm)，梯度20分钟0％至98％ACN/H₂O(pH＝3.8，甲酸铵)以得到标题化合物(10mg，25％)，其为黄色油状物。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.01(d，J＝2.6Hz，1H)，7.60-7.56(m，1H)，6.68(d，J＝8.6Hz，1H)，5.30-5.20(m，1H)，4.5(t，J＝8.4Hz，1H)，4.36(t，J＝9.2Hz，1H)，4.09-4.05(m，1H)，3.99-3.93(m，1H)，3.83-3.73(m，1H)，2.56-2.32(m，4H)，1.31(d，J＝6.2Hz，6H)。[ES+MS]m/z 317(MH⁺)。

实施例37：4,4,4-三氟-1-[3-[6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3-吡啶基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮

实施例37通过类似于实施例36所述的方法从实施例33(0.16mmol)制备，但将丙-2-醇用2,2,2-三氟乙醇(SIGMA-ALDRICH，0,81mmol)替代。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)δppm：8.05(d，J＝2.5Hz，1H)，7.72-7.68(m，1H)，6.90(d，J＝8.5Hz，1H)，4.78(q，J＝8.7Hz，2H)，4.52(t，J＝8.6Hz，1H)，4.38(t，J＝9.3Hz，1H)，4.11-4.06(m，1H)，4.01-3.95(m，1H)，3.87-3.77(m，1H)，2.56-2.33(m，4H)。[ES+MS]m/z 357(MH⁺)。

实施例38：4,4,4-三氟-1-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮

在27℃向4,4,4-三氟丁酸(OAKWOOD，337mg，2.3728mmol)在DCM(3.3mL)中的溶液中添加草酰氯(AVRA，251mg，1.977mmol)和催化量的DMF。将反应混合物在相同温度搅拌2h。在0℃向中间体74(350mg，1.977mmol)、饱和碳酸氢钠溶液(6.2mL)和EtOAc(3.3mL)的混合物添加上述反应混合物。反应混合物调节至27℃且在相同温度搅拌16h。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)且用EtOAc(3x 50mL)萃取。有机物用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用DCM/MeOH的线性梯度作为洗脱剂。所得化合物通过制备型HPLC纯化(X SELECT C18柱，5μ，19x 150mm)，梯度15分钟0％至15％ACN/NH₄HCO₃(aq.10mM)以得到标题化合物(95mg，18％)，其为白色胶状物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm：4.17-4.09(m，1H)，3.90-3.80(m，4H)，3.61-3.54(m，1H)，3.28-3.19(m，2H)，2.48-2.37(m，2H)，2.36-2.24(m，3H)，1.70-1.59(m，1H)，1.57-1.48(m，2H)，1.15-1.00(m，2H)。[ES+MS]m/z 266(MH⁺)。

实施例39：4,4,4-三氟-1-(3-(哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮

在0℃向中间体79(500mg，2.84mmol)、4,4,4-三氟丁酸(OAKWOOD，484mg，3.409mmol)在DMF(10mL)中的溶液中分批添加DMAP(AVRA，1.03g，8.522mmol)和EDC.HCl(VINSA，1.35g，7.102mmol)。所得反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用冰冷却的水(50mL)稀释且用EtOAc(3x 150mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液(150mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(120mg，15％)。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm：4.15-4.09(m，1H)，4.05-3.95(m，2H)，3.91-3.85(m，1H)，3.16-3.04(m，1H)，2.53-2.13(m，8H)，1.64-1.57(m，4H)，1.52-1.43(m，2H)。[ES+MS]m/z 265(MH⁺)。

实施例40-42通过类似于39所述的方法制备，将中间体77用表5中所示的中间体替代。也指示了纯化步骤中的改变。

表5

a)通过制备型HPLC纯化(X Bridge C18柱，5μ，19x 150mm)，梯度15分钟0％至10％ACN/NH₄HCO₃(aq.10mM)

b)使用石油醚/AcOEt的线性梯度纯化

实施例43：4-(1-(4,4,4-三氟丁酰基)氮杂环丁烷-3-基)苄腈

在0℃向中间体75(800mg，4.102mmol)在DMF(15mL)中的溶液中添加EDC.HCl(SILVARY，1.95g，10.256mmol)、4,4,4-三氟丁酸(OAKWOOD，699mg，4.923mmol)，然后在0℃添加DMAP(AVRA，1.5g，12.307mmol)。所得反应混合物调节至26℃且在相同温度搅拌16h。反应混合物用冰冷却的水(200mL)稀释且用EtOAc(3x 150mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂以得到标题化合物(500mg，42％)，其为无色胶状物。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm：7.71-7.65(m，2H)，7.45-7.39(m，2H)，4.64-4.42(m，2H)，4.20-4.05(m，2H)，3.94-3.87(m，1H)，2.58-2.43(m，2H)，2.41-2.34(m，2H)。[ES+MS]m/z 283(MH⁺)。

实施例44：4,4,4-三氟-1-(3-氟-3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮

在-78℃向中间体84(400mg，1.373mmol)在DCM(5mL)中的溶液中滴加DAST(ALFAAESAR，0.18mL，1.373mmol)在DCM(5mL)中的溶液且搅拌1h。反应混合物温度调节至26℃且在相同温度搅拌30分钟。反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭且用DCM(3x 100mL)萃取。有机层用盐水(100mL)洗涤，用(无水)Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱柱纯化，使用石油醚/EtOAc的线性梯度作为洗脱剂，且所得化合物进一步通过制备型HPLC纯化(Kromosil C18柱，10μ，21.2x 250mm)，梯度17分钟0％至30％ACN/NH₄HCO₃(aq.10mM)以得到标题化合物(61mg，14.8％)，其为无色胶状物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm：7.46-7.39(m，2H)，7.18-7.09(m，2H)，4.67-4.34(m，4H)，2.60-2.36(m，4H)。[ES+MS]m/z 294(MH⁺)。

生物活性

乙硫异烟胺(ETH)和实施例1-11的组合对结核分枝杆菌GFP菌株的生长抑制的测量

1.分枝杆菌重组菌株的构建。

菌株结核分枝杆菌H37Rv-GFP.通过转化整合质粒pNIP48获得表达绿色荧光蛋白(H37Rv-GFP)的结核分枝杆菌H37Rv的重组菌株(Abadie等人，2005；Cremer等人，2002)。在该源自Ms6分枝杆菌噬菌体的质粒中，将GFP基因在强分枝杆菌启动子pBlaF下克隆，并且GFP组成性地表达。该质粒还含有潮霉素耐药性基因。

菌株结核分枝杆菌W4-E1-GFP(突变株).结核分枝杆菌菌株E1是北京菌株W4的衍生物，该北京菌株W4在含乙硫异烟胺的琼脂平板(20μg/ml)上选择。该菌株在EthA中携带Gly343Ala突变。如上所述，使用pNIP48转化W4-E1菌株，得到荧光菌株W4-E1-GFP。

2.荧光分枝杆菌的生长和制备

保持在-80℃的细菌储备液用于接种在25cm2的组织培养瓶中的5ml的Middlebrook 7H9培养基，该培养基中添加了油酸-白蛋白-右旋糖-过氧化氢酶(OADC，Difco，Sparks MD，USA)和50mg ml^–1潮霉素(Invitrogen，Carlsbad，CA USA)。将烧瓶在37℃下温育而不摇动保持7天。然后将培养物用新鲜培养基稀释以达到OD₆₀₀为0.1。在培养瓶(75cm2)中装入50ml该稀释的培养物，将其在37℃下培养7天，不要摇晃。

3.微孔板的制备

将乙硫异烟胺(Sigma，E6005)在DMSO中稀释为0.1mg/mL和0.8mg/ml；将等分试样冷冻保存在-20℃下。将测试化合物重悬于DMSO中，最终浓度为10μM。将乙硫异烟胺和测试化合物转移到384孔小体积聚丙烯板(Corning，编号3672)中，并用于制备测定板。使用Echo550液体处理器(Labcyte)在黑色的Greiner 384孔透明底部聚苯乙烯板(Greiner，编号781091)中进行十次三倍连续的化合物稀释(通常在30至4.5e-3μM范围内)。补偿DMSO体积，以使所有孔中的浓度相等(0.3％)。

然后使用Echo将乙硫异烟胺转移到384孔板中。对于涉及H37Rv-GFP的测定，ETH的终浓度为0.1μg/ml，对于涉及W4-E1-GFP的测定，ETH的终浓度为0.8μg/ml。对于每个孔，测定板中DMSO的最终量保持<1％v/v。

测定板中的对照包括0.3％的DMSO(阴性对照)和1μg/ml的INH(阳性对照)。参照板包括利福平、INH和ETH，范围为30至1.8e-3μg/ml(15点，2x稀释)。

将要加入测定板的H37Rv-GFP或W4-E1-GFP的培养物在PBS(Gibco，14190)中洗涤两次，重悬于新鲜培养基(无潮霉素)中，并在37℃下生长5天。

最后，将培养物稀释至OD600nm为0.02(使用不添加潮霉素的新鲜培养基)，并将50μL转移至每个测定板。将测定板在37℃下孵育5天。在Victor3多标记读板仪(PerkinElmer)上获取荧光信号，使用exc＝485nm/em＝535nm。

结果

基本上根据以上所述的程序测试所有实施例化合物，发现具有以下报道的活性值。

EC50_H37Rv测量本发明的化合物增强乙硫异烟胺对H37Rv菌株的活性的能力，而EC50_突变体测量本发明的化合物增强乙硫异烟胺对TB菌株的活性的能力，该TB菌株对乙硫异烟胺具有耐药性。

<50nM＝+++++

≥50nM至<250nM＝++++

≥250nM至<500nM＝+++

≥500nM至<1.0μM(≥500nM至<1000nM)＝++

≥1.0μM至≤10μM(≥1000nM至≤10,000nM)＝+

特别是，发现实施例6、17、18、34和45具有的平均EC50_H37Rv≤10nM且平均EC50_突变体<75nM。

人巨噬细胞THP-1抑制测试(细胞内测试)中的结核分枝杆菌体外H37Rv

细胞内筛选是鉴定在人类巨噬细胞中有活性的新型抗结核病化合物的有价值的工具。这种离体测定可以代表模仿疾病的生理条件，并考虑到宿主细胞的有利作用(Sorrentino，F.等人(2016)Antimicrob.Agents Chemother.60(1)，640-645)

程序如Sorrentino，F.等人(2016)Antimicrob.Agents Chemother.60(1)，640-645(补充材料)所述进行，除了在将THP-1感染的细胞接种到384孔板之前，在洗涤步骤的最后一步用40μm细胞过滤器过滤感染的巨噬细胞以除去细胞团块并获得单细胞悬液。

基本上根据上述测定法(不存在乙硫异烟胺)测试实施例化合物。下表中提供了结果。

实施例编号	IC50(μM)
		1	+++++
2	+++++
		3	++++
4	++++
		7	++++
8	+
		9	++++
11	++++
		12	++++
13	++++
		14	+++
15	+++++
		16	+++
17	+++++
		18	+++++
19	++++
		20	++++
21	+++
		23	+++++
25	++++
		26	+
28	++++
		29	+++++
34	++++
		38	++++
41	+++++
		42	+++++

<50nM＝+++++

≥50nM至<250nM＝++++

≥250nM至<500nM＝+++

≥500nM至<1.0μM(≥500nM至<1000nM)＝++

≥1.0μM至≤10μM(≥1000nM至≤10,000nM)＝+。

Claims

1.式(I)的化合物或其药学上可接受的盐

其中

n为1或2；

R¹为氢、氟、甲基或甲氧基；且

R²为苯基、吡啶基、C_3-6环烷基、哌啶-1-基或四氢吡喃基,

其中

环烷基、哌啶-1-基和四氢吡喃基任选取代有一个或两个氟。

2.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1。

3.根据权利要求1或权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹为氢。

4.根据上述权利要求任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中

苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、任选取代有一个或多个氟的甲基、或取代有一个或多个氟的甲氧基，且

环烷基为未取代的。

5.根据上述权利要求任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中

苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯、氟、甲基、三氟甲基、甲氧基或三氟甲氧基，且

环烷基为未取代的。

6.根据上述权利要求任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²为苯基、吡啶基或C_3-6环烷基,

其中

苯基和吡啶基任选取代有1至3个独立选自以下的取代基：氯和氟，且

环烷基为未取代的。

7.根据权利要求1或2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹为氟、甲基或甲氧基。

8.根据权利要求8的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²为任选取代有1至3个独立选自以下的取代基的苯基：氯、氟、氰基、任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷基、或任选取代有一个或多个氟的C_1-3烷氧基。

9.根据权利要求8的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²为任选取代有一个氟的苯基。

10.根据上述权利要求任一项的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

4,4,4-三氟-1-[3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[3-(三氟甲基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

5,5,5-三氟-1-[3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]戊-1-酮；

1-(3-环丙基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-(3-环戊基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-(3-环己基氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(5-氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3,5-二氟-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(4-氯-2-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(4-氯苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[3-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-[4-(三氟甲氧基)苯基]氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3-氯苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(2,4-二氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

1-[3-(2-氯-4-氟-苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(6-甲氧基-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(5-氯-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(3,4-二氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(4-氟-2-甲基-苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(2-氟-4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(2-氯-4-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(6-氟-3-吡啶基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-[3-(3,4,5-三氟苯基)氮杂环丁烷-1-基]丁-1-酮；

1-[3-(4,4-二氟-1-哌啶基)氮杂环丁烷-1-基]-4,4,4-三氟-丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(四氢-2H-吡喃-4-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

1-(3-(4,4-二氟环己基)氮杂环丁烷-1-基)-4,4,4-三氟丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(4-氟苯基)-3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4,4,4-三氟-1-(3-(4-氟苯基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮；

4-(1-(4,4,4-三氟丁酰基)氮杂环丁烷-3-基)苄腈；和

4,4,4-三氟-1-(3-氟-3-(4-氟苯基)氮杂环丁烷-1-基)丁-1-酮。

11.根据权利要求1至10任一项的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。

12.根据权利要求1至10任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗分枝杆菌感染或用于治疗分枝杆菌感染引起的疾病。

13.根据权利要求12的用于所述用途的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述分枝杆菌感染为结核分枝杆菌感染。

14.根据权利要求1至10任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗结核病。

15.在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染的方法，包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的根据权利要求1至10任一项的化合物或其药学上可接受的盐。

16.在需要的哺乳动物中治疗分枝杆菌感染引起的疾病的方法，包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的根据权利要求1至10任一项的化合物或其药学上可接受的盐。

17.根据权利要求1至10的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗分枝杆菌感染或分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的用途。

18.药物组合物，其包含(a)根据权利要求1至10任一项的化合物或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的赋形剂。

19.一种组合，其为(a)根据权利要求1至10任一项的化合物或药学上可接受的盐和(b)至少一种其它抗分枝杆菌剂的组合。

20.根据权利要求19的组合，其中所述至少一种其它抗分枝杆菌剂为抗结核病药剂。

21.根据权利要求20的组合，其中所述抗结核病药剂选自异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、莫西沙星、利福喷汀、氯法齐明、乙硫异烟胺、丙硫异烟胺、戊氧苯硫脲、氨硫脲、利福布汀、二芳基喹啉如贝达喹啉(TMC207)或TBAJ-587、硝基咪唑并-噁嗪PA-824、迪拉马尼(OPC-67683)、噁唑烷酮如利奈唑胺、特地唑胺、雷得唑来、sutezolid(PNU-100480)、泼斯唑来(AZD-5847)或TBI-223、EMB类似物SQ109、OPC-167832、GSK3036656(也称为GSK070)、GSK2556286、GSK3211830、苯并噻嗪酮如BTZ043或PBTZ169、氮杂吲哚如TBA-7371、二硝基苯甲酰胺、或β-内酰胺如美罗培南、法罗培南、厄他培南、替比培南或β-内酰胺组合如AUGMENTIN(阿莫西林-克拉维酸)。

22.根据权利要求19至21任一项的组合，还包含抗病毒剂，包括抗逆转录病毒剂。

23.根据权利要求22的组合，其中所述抗逆转录病毒剂选自齐多夫定、去羟肌苷、拉米夫定、扎西他宾、阿巴卡韦、司他夫定、阿德福韦、阿德福韦二匹伏酯、福齐夫定、todoxil、恩曲他滨、阿洛夫定、氨多索韦、艾夫他滨、奈韦拉平、地拉韦定、依法韦仑、洛韦胺、immunocal、奥替普拉、卡普韦林、lersivirine、GSK2248761、TMC-278、TMC-125、依曲韦林、沙奎那韦、利托纳韦、茚地那韦、奈非纳韦、安普那韦、福沙那韦、brecanavir、地瑞那韦、阿扎那韦、替拉那韦、帕利那韦、拉西那韦、恩夫韦肽、T-20、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、BMS-663068和BMS-626529、5-Helix、雷特格韦、埃替格韦、GSK1349572、GSK1265744、vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、TAK779、马拉维若、TAK449、去羟肌苷、替诺福韦、洛匹那韦，或者地瑞那韦。