CN111183807A - 利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，属于种植技术领域。用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于:枝条切取时的位置选择在黄瓜侧芽枝条或主蔓顶端枝条的茎节处。具体包括基质的选用与处理；扦插枝条的选择与切取；扦插后环境条件的管理及成活后及时进行移栽。本发明利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，简便易行，发根及繁殖速度快，成活率达到98％以上，可以高效地保持母本植株的优良性状，在瓜类作物利用扦插繁殖克隆苗方面有良好的市场前景与可行性。
Description
一、技术领域
本发明属于种植技术领域，主要涉及植物无性繁殖方法，具体涉及一种利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法。
二、背景技术
黄瓜(Cucumis sativus L.，2n＝2x＝14)属于葫芦科(Cucurbitaceae)甜瓜属(Cucumis)物种，是世界性的重要蔬菜作物。在黄瓜的育种工作中，常常需要引进种植来自全世界不同生态区的育种材料，由于生态条件的差异，不同材料在其它地区种植往往不能正常在生育期内开花结实，获得种子，这直接导致一些珍贵的育种材料不能得到高效的利用，因此如何进行材料的繁殖保存至关重要。在其它作物中，利用组织培养进行克隆苗的繁殖保存较为常用，然而，由于黄瓜的组培再生能力弱，在其它作物中常用的基于组织培养进行克隆苗的繁殖在黄瓜中利用起来相对复杂。本专利在多年尝试研究的基础上，发明了利用扦插快速繁殖保存黄瓜材料的方法。
通过文献检索，发现在利用扦插繁殖上，前人有一个相关的专利申请：“微型黄瓜侧枝扦插方法”(申请号：201210217030.9)发明了利用侧枝扦插黄瓜的方法，但该方法对培养的基质类型、扦插方法等没有明确描述，且最终成活率仅在80％。文献“黄瓜侧蔓扦插技术及其枯萎病抗性鉴定”(刘峻蓉和钱春桃，蔬菜，2017.2，16-20)，作者研究了河沙、花泥和清水扦插黄瓜的效果，比较了生长调节剂NAA、ABT对扦插生根的影响，筛选出最合适的扦插方法，其生根率也仅为68.3％，这对于有效地繁殖保存珍贵材料存在较大的风险。
文献“黄瓜扦插繁殖技术的初步研究”(李晓丽等，江苏农业科学，2009，03，107，202-203)，作者研究了水、河沙、河沙:土＝2:1三种基质，以及切口类型及插穗长度对扦插效果的影响，发现河沙中扦插效果较好，同时插穗长度在15-20cm时较为适宜，也发现斜切比平切效果要好，最高的成活率为87％。该成活率对于生产应用仍不够高。另外还有少量的文献也报道了黄瓜侧枝扦插的方法，但对于扦插基质的配方均较为复杂，不适合大面积生产应用，且没有明确的成活数据。
以上已有的有关黄瓜扦插繁殖方法均存在成活率偏低的问题，有的还利用多种生长调节剂及化学试剂进行处理，操作繁琐，不利于黄瓜珍贵材料保存，也不适合于生产上的快速应用。
三、发明内容
技术问题
本发明是针对目前黄瓜珍贵材料保存较难，前人利用扦插繁殖成活率偏低的问题，提供了一种利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法。
技术方案
本发明是通过以下技术方案实现的：利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于:枝条切取时的位置选择在黄瓜侧芽枝条或主蔓顶端枝条的茎节处。具体的是枝条切取时的位置选择在黄瓜侧芽枝条或主蔓顶端枝条的茎节处，即叶原基生长所在的位置，切面上看到丰富的节的维管束切口。包括以下步骤：
(1)扦插基质的选择与准备：利用蛭石作为基质，使用前先高温灭菌，装于育苗容器中，基质厚度在10cm，浇透水备用；
(2)侧芽的选择与切取：选用生长旺盛的幼嫩侧芽枝条或主蔓顶端枝条，长度为8-12cm，包含一至两个伸长的节间，利用锋利的刀片在茎节处快速切下，要求切面平整，切面上能看到丰富的维管束；
(3)扦插：切下的侧芽枝条或主蔓顶端枝条插入步骤(1)中准备好的容器基质中，枝条插入深度在3-4cm，然后将育苗容器置于2cm深度水的托盘中，用塑料薄膜保湿；
(4)扦插后环境参数控制：
a.前3天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,湿度在95％以上；
b.第4天至第7天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,湿度在80-90％；
c.第8天后环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,薄膜完全揭开；
d.扦插后第10天插穗萌发大量不定根，将枝条连同基质移栽于育苗营养土中，方法同常规黄瓜苗期栽培方法。
步聚(3)中用全透光的薄膜保湿,步骤(4)b是通过揭开薄膜一角逐渐降低湿度的。
步聚(2)侧芽的选择与切取：对于有侧枝的黄瓜品种，直接选取幼嫩且旺盛生长侧枝；对于没在侧枝的品种，先取用主蔓顶端枝条进行扦插，由于去除了顶端优势，黄瓜会在一周长出侧枝，再利用以上方法切取新侧枝扦插利用,如果是花打顶的侧枝，先打掉花打顶的芽，待新侧枝长出后再扦插。
有益效果
本发明是针对目前黄瓜珍贵材料保存较难，前人利用扦插繁殖成活率偏低的问题，提供了一种利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法。
本专利提出利用透气保湿性能更佳的蛭石作为扦插基质，扦插前对蛭石进行高温灭菌，避免插穗伤口的感染；提出更合适的扦插发育时期；插穗切口选择在侧根原基的发生处，即黄瓜的枝条的茎节处，而不是随便切取，这在保证黄瓜扦穗快速生根至关重要。这些关键技术保证扦插的成活率在98％以上。
本发明利用特定的基质及培养条件，黄瓜扦插成活率在98％以上，远远高于现有的技术所达到的成活率。本发明方法操作过程、方法非常简捷高效，仅利用蛭石和清水，通过控制环境光温湿条件即可完成。
通过本发明方式，第10天开始，将长好根系的枝条移栽于营养土中，浇透水，正常苗期管理，苗子长大后与母体植株一样。每株植株可至少繁殖10株以上。
四、附图说明
图1为茎节处切口的扦插苗
五、具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。实施例所描述的仅用于说明本发明，而不限制权利要求书中所描述的本发明。
实施例1(以河沙和水扦插作为对照，切口位置以茎节间作为对照)
利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，包括以下步骤：
(1)扦插时间：5月份。
(2)扦插材料：欧洲型水果黄瓜‘戴多星’，华北密刺型黄瓜‘长春密刺’；华南型黄瓜‘二早子’。
(3)基质准备：
a.蛭石为基质：将蛭石在高温高压灭菌锅中灭菌20分钟，装于底部有透水孔的10cm以上高度的育苗容器或育苗盘中，基质高度10cm，浇透水。
b.河沙为基质：将河沙在高温高压灭菌锅中灭菌20分钟，装于底部有透水孔的10cm以上高度的育苗容器或育苗盘中，河沙高度10cm，浇透水。
c.以水为基质：将灭菌水装于10cm以上高度的容器中，待用。
(4)插穗准备：选取旺盛生长的侧枝，长度约为10cm，带两个伸长节间，分成两种切口选择方式：
a.利用锋利刀片在茎节的位置快速切下，以保持切面光滑平整，切面上能看到丰富的维管束截面。
b.利用锋利刀片在节间位置切取。
(5)扦插：将切取的侧枝及时插入准备好的三种基质中，插入深度在3-4cm，每个扦插的侧枝间距约6-8cm。
(6)扦插后管理：将扦插好的育苗容器置于装有2cm深度水的托盘中，用全透光的保湿薄膜覆盖。
a.前3天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux。湿度在95％以上。
b.第4天至第7天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux。揭开薄膜一角逐渐降低湿度，湿度在80-90％。
c.第8天后环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux。薄膜完全揭开，湿度降低至外界环境条件。此时，可在育苗盆底部看到长出的白色幼根。
d.第10天开始，将长好根系的枝条移栽于营养土中，浇透水，正常苗期管理，
苗子长大后与母体植株一样。通过这种方式，每株植株可至少繁殖10株以上。
(7)由结果表1-3可知，黄瓜枝条切取时切口的位置对于扦插的生根成活有显著的影响，切口在茎节位置的处理，其生根率、根数、平均根长及移栽后成活率均显著高于切口在茎节间的处理。同时，不同的扦插基质对结果有显著的影响，以蛭石为基质的处理，黄瓜三个不同基因型材料的生根率、平均根长及移栽后成活率均显著高于河沙和清水扦插结果。综合以上结果，我们提出，选取切口在茎节处，蛭石为基质，并利用本发明提出的环境控制条件，可以保证黄瓜侧枝扦插的成活率在98％以上，可有效快速地用于黄瓜种苗的繁殖与利用。
表1不同扦插方法对欧洲温室型水果黄瓜‘戴多星’扦插苗根系生长的影响
表2不同扦插方法对华北密刺型黄瓜‘长春密刺’扦插苗根系生长的影响
表3不同扦插方法对华北密刺型黄瓜‘二早子’扦插苗根系生长的影响
Claims (5)
1.利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于:枝条切取时的位置选择在黄瓜侧芽枝条或主蔓顶端枝条的茎节处。
2.根据权利要求1所述的利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于，枝条切取时的位置选择在黄瓜侧芽枝条或主蔓顶端枝条的茎节处，即是叶原基生长所在的位置，切面上看到丰富的节的维管束切口。
3.根据权利要求1或2所述的利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)扦插基质的选择与准备：利用蛭石作为基质，使用前先高温灭菌，装于育苗容器中，基质厚度在10cm，浇透水备用；
(2)侧芽的选择与切取：选用生长旺盛的幼嫩侧芽枝条或主蔓顶端枝条，长度为8-12cm，包含一至两个伸长的节间，利用锋利的刀片在茎节处快速切下，要求切面平整，切面上能看到丰富的维管束；
(3)扦插：切下的侧芽枝条或主蔓顶端枝条插入步骤(1)中准备好的容器基质中，枝条插入深度在3-4cm，然后将育苗容器置于2cm深度水的托盘中，用塑料薄膜保湿；
(4)扦插后环境参数控制：
a.前3天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,湿度在95％以上；
b.第4天至第7天环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,湿度在80-90％；
c.第8天后环境条件：日夜温度为25-28℃/18-20℃，光周期为12h/12h，光照强度为12000Lux,薄膜完全揭开；
(5)扦插后第10天插穗萌发大量不定根，将枝条连同基质移栽于育苗营养土中，方法同常规黄瓜苗期栽培方法。
4.根据权利要求3所述的利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于，步聚(3)中用全透光的薄膜保湿,步骤(4)b是通过揭开薄膜一角逐渐降低湿度的。
5.根据权利要求3所述的利用黄瓜侧芽扦插繁殖克隆苗的方法，其特征在于，步聚(2)侧芽的选择与切取：对于有侧枝的黄瓜品种，直接选取幼嫩且旺盛生长侧枝；对于没在侧枝的品种，先取用主蔓顶端枝条进行扦插，由于去除了顶端优势，黄瓜会在一周长出侧枝，再利用以上方法切取新侧枝扦插利用,如果是花打顶的侧枝，先打掉花打顶的芽，待新侧枝长出后再扦插。
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