CN111172210A - 一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法及其产品 - Google Patents

一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法及其产品 Download PDF

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张晖
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Abstract

本发明公开了一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法及其产品，包括，酶催化醇解反应制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品；将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:3～6加入间歇反应器中，加入3～12wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应6～18小时，获得甘油一酯产品，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:0.5～1.5加入间歇反应器中，加入6～15wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应4～12小时，获得甘油二酯产品。本发明通过优化条件，分别制备得到富含花生四烯酸的甘油一酯或甘油二酯产品，同时，工艺简单，实施方便，易于推广。

Description

一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法及其产品
技术领域
本发明属于油脂加工技术领域，具体涉及到一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法及其产品。
背景技术
花生四烯酸(C20:4n-6)高度集中于动物的大脑和视网膜神经膜的磷脂双分子层，对光转导和神经元功能具有重要意义。成人能够从亚油酸(C18:2n-6)内源性合成花生四烯酸，然而，内源性合成花生四烯酸的能力是有限的，并且在个体之间广泛变化，对于一些婴儿，合成花生四烯酸的能力接近于零。因此，花生四烯酸是婴儿的必需脂肪酸，主要依赖于饮食供应。人乳被认为是婴儿的理想食品，含有少量花生四烯酸。人乳中花生四烯酸的全球平均值为0.47±0.13％，范围为0.24-1.0％，可满足婴儿的生长发育。然而，当不能进行母乳喂养时，婴儿配方奶粉被用作婴儿的母乳替代品。
大多数配方奶粉生产者通过采用向婴儿配方奶粉中添加富含花生四烯酸的油脂以补充婴儿所需的花生四烯酸，添加于婴儿配方奶粉中的花生四烯酸油脂的含量主要是基于人乳的组成，而花生四烯酸油脂的甘油三酯分子中含有较高的多不饱和脂肪酸，其分子组成与人乳完全不同，婴儿，特别是早产儿和新生儿的对这种花生四烯酸的生物利用率较低。考虑到花生四烯酸的重要生物学功能，有必要开发一种易于婴儿吸收的新型脂质，增加花生四烯酸的生物利用度。
目前，制备部分甘油酯(甘油二酯和甘油一酯)的方法主要包括脂肪酸和甘油的酯化，甘油解或甘油三酯的水解。其中，甘油解在工业中被广泛使用，通过将甘油三酯直接转化为甘油二酯或甘油一酯而不产生额外的脂肪酸。现有报道合成部分甘油酯的原料主要来自普通植物油，如豆油，菜籽油等，但含花生四烯酸的部分甘油酯的制备未见报道，且由于微生物油脂花生四烯酸含量在40％左右，通过现有技术获得的部分甘油酯中花生四烯酸含量相对较低。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，包括，酶催化醇解反应：将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1:2～9的比例加入间歇反应器中，加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为25～45℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应4～12小时，制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品，其中，中间酶解产品中甘油一酯和甘油二酯的含量在30％以上，甘油一酯的含量在3％以上；制备甘油一酯：采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:3～6加入间歇反应器中，加入3～12wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应6～18小时，获得甘油一酯产品，甘油一酯含量为65％以上，甘油一酯中花生四烯酸在60％以上；制备甘油二酯：采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:0.5～1.5加入间歇反应器中，加入6～15wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应4～12小时，获得甘油二酯产品,甘油二酯含量为55％以上，甘油二酯中花生四烯酸的含量在60％以上。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述富含花生四烯酸的微生物油脂来自于Mortierella真菌发酵，包括Mortierellaelongate、Mortierella alpine和Mortierella ramanniana其中的一种。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述酶催化醇解反应，其中，乙醇为无水乙醇。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述酶催化醇解反应，其中，所用脂肪酶为Lipozyme RM IM、Lipozyme TL IM和LipaseAY-30SD中的一种或几种。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述酶催化醇解反应，其中，制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品中花生四烯酸的含量在60％以上。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述制备甘油一酯，其中所用脂肪酶为Novozym 435。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述制备甘油二酯，其中所用脂肪酶为Novozym 435。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述制备甘油一酯，其中，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯中花生四烯酸在60％以上。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法的一种优选方案，其中：所述制备甘油二酯，其中，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油二酯中花生四烯酸的含量在60％以上。
本发明另一个目的是，克服现有技术中的不足，提供一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法制得的甘油酯产品。
作为本发明所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法制得的甘油酯产品的一种优选方案，其中：所述甘油酯产品，包括甘油一酯产品和甘油二酯产品。
本发明有益效果：
(1)本发明提供一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，首次通过两步酶法反应制备得到富含花生四烯酸的部分甘油酯产品，通过第一步酶催化醇解富集花生四烯酸制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品；去除乙醇及脂肪酸乙酯后，再通过酶催化的甘油解反应，通过优选工艺条件，分别制备得到富含花生四烯酸的甘油一酯或甘油二酯产品，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯和甘油二酯中的花生四烯酸在60％以上。当不采用本发明技术工艺及条件时，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量和甘油二酯产品中甘油二酯含量均较低，同时两种产品中的花生四烯酸的含量也较低。
(2)本发明通过两步酶法反应，分别制备得到富集花生四烯酸的甘油一酯或甘油二酯产品，通过各工艺条件协同作用，实现甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯和甘油二酯中的花生四烯酸在60％以上，花生四烯酸的含量高于同类工艺产品，同时所得产品可起到预消化作用，有助于提升花生四烯酸的消化吸收效率。
(3)本发明工艺简单，实施方便，易于推广。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例1
(1)将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1：3的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入12wt％的Lipozyme RM IM，在温度为25℃，搅拌速率为400rpm的条件下密封反应4小时，所得中间酶解产品的脂肪酸组成下表1所示。
表1中间酶解产品的脂肪酸组成
Figure BDA0002418541420000041
Figure BDA0002418541420000051
(2)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:3的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入3wt％的Novozym 435，在温度为70℃、搅拌速率为600rpm下反应18小时，所得甘油一酯产品的组成如下表2所示。
表2甘油一酯产品的组成
甘油酯组成 含量(％)
甘油三酯 7.8
甘油二酯 21.6
甘油一酯 70.6
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表3所示。
表3所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.1 0.1 0.1
C16:0 2.8 2.2 2.1
C18:0 4.1 3.1 2.5
C18:1 3.5 2.8 2.4
C18:2 2.9 2.1 1.7
C18:3 2.1 2.8 3.1
C20:3 10.8 12.5 13.3
C20:4 63.1 65.7 66.3
C24:0 10.6 8.7 8.5
(3)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:0.5的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入6wt％的Novozym 435，在温度为70℃、搅拌速率为800rpm下反应12小时，所得甘油二酯产品组成如下表所示。
表4甘油二酯产品的组成
Figure BDA0002418541420000052
Figure BDA0002418541420000061
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表5所示。
表5所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.1 0.1 0.1
C16:0 3.1 2.2 2.7
C18:0 3.7 2.9 3.1
C18:1 3.3 2.7 2.6
C18:2 2.9 2.2 2.3
C18:3 2 2.7 2.9
C20:3 10.5 11.8 12.2
C20:4 64.1 65.5 65.7
C24:0 10.3 9.3 8.4
实施例2
(1)将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1：6的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入8wt％的Lipozyme TL IM，在温度为35℃、搅拌速率为600rpm的条件下密封反应8小时，所得中间酶解产品的脂肪酸组成下表6所示。
表6中间酶解产品的脂肪酸组成
Figure BDA0002418541420000062
Figure BDA0002418541420000071
(2)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:5的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入8wt％的Novozym 435，在温度为50℃、搅拌速率为600rpm下反应12小时，所得甘油一酯产品的组成如下表7所示。
表7甘油一酯产品的组成
甘油酯组成 含量(％)
甘油三酯 9.4
甘油二酯 22.1
甘油一酯 68.5
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表8所示。
表8.所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.3 0.1 0.2
C16:0 3.1 2.6 2.5
C18:0 2.5 1.9 1.9
C18:1 2.1 1.7 1.5
C18:2 3.2 2.8 2.3
C18:3 1.6 1.2 1.1
C20:3 10.5 11.5 11.8
C20:4 65.3 67.4 68.3
C24:0 11.4 10.3 9.8
(3)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:1的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入12wt％的Novozym 435，在温度为50℃、搅拌速率为600rpm下反应8小时，所得甘油二酯产品组成如下表9所示。
表9甘油二酯产品的组成
Figure BDA0002418541420000072
Figure BDA0002418541420000081
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表10所示。
表10.所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.3 0.2 0.1
C16:0 2.9 2.5 2.5
C18:0 2.7 2 1.8
C18:1 2.3 1.7 1.6
C18:2 2.8 2.6 2.5
C18:3 1.5 1.1 0.7
C20:3 10.9 11.8 11.7
C20:4 64.6 67.9 68.8
C24:0 11.5 9.6 9.5
实施例3
(1)将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1：9的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入4wt％的Lipase AY-30SD，在温度为45℃、搅拌速率为800rpm的条件下密封反应12小时，所得中间酶解产品的脂肪酸组成下表11所示。
表11中间酶解产品的脂肪酸组成
Figure BDA0002418541420000082
(2)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:6的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入12wt％的Novozym 435，在温度为30℃、搅拌速率为400rm下反应6小时，所得甘油一酯产品的组成如下表12所示。
表12甘油一酯产品的组成
甘油酯组成 含量(％)
甘油三酯 8.5
甘油二酯 23.6
甘油一酯 67.9
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表13所示。
表13.所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.2 0.2 0.2
C16:0 2.5 1.5 1.4
C18:0 1.7 1.3 1.3
C18:1 2.6 1.7 1.5
C18:2 2.7 2.1 2.1
C18:3 2.5 1.4 1.2
C20:3 8.2 10.6 11.3
C20:4 63.2 66.3 66.5
C24:0 16.4 14.9 14.4
(3)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:1.5的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入15wt％的Novozym 435，在温度为30℃、搅拌速率为400rpm下反应6小时，所得甘油二酯产品组成如下表14所示。
表14甘油二酯产品的组成
Figure BDA0002418541420000091
Figure BDA0002418541420000101
所得产品甘油酯的脂肪酸组成如表15所示。
表15所得产品甘油酯的脂肪酸组成
脂肪酸 甘油三酯 甘油二酯 甘油一酯
C14:0 0.3 0.2 0.1
C16:0 2.2 1.6 1.6
C18:0 1.9 1.4 1.3
C18:1 2.2 1.8 1.6
C18:2 3.5 1.6 1.5
C18:3 2.2 1.5 1.4
C20:3 8.3 11.4 11.6
C20:4 63.6 65.9 66.5
C24:0 15.8 14.6 14.4
实施例4
(1)将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1：1的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入2wt％的Lipase AY-30SD，在温度为45℃、搅拌速率为800rpm的条件下密封反应12小时，所得中间酶解产品中甘油二酯含量为11.4％，甘油一酯含量为1.3％；
(2)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:6的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入12wt％的Novozym 435，在温度为70℃、搅拌速率为400rm下反应6小时，所得甘油一酯产品的中甘油一酯含量为48.3％，甘油一酯中花生四烯酸的含量为47.2％。
(3)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:1.5的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入10wt％的Novozym 435，在温度为50℃、搅拌速率为600rpm下反应6小时，所得甘油二酯产品中甘油二酯的含量为46.34％，甘油二酯中花生四烯酸的含量为48.5％。
实施例5
(1)将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1：9的比例混合，加入可密封的间歇式反应器中，并向其中加入16wt％的Lipase AY-30SD，在温度为30℃、搅拌速率为800rpm的条件下密封反应10小时，所得中间酶解产品中甘油二酯含量为34.2％，甘油一酯含量为8.3％；
(2)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:2的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入2wt％的Novozym 435，在温度为30℃、搅拌速率为400rm下反应6小时，所得甘油一酯产品的中甘油一酯含量为58.6％，甘油一酯中花生四烯酸的含量为66.7％。
(3)采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:1的比例在间歇反应器中混合，并向其中加入15wt％的Novozym 435，在温度为30℃、搅拌速率为400rpm下反应4小时，所得甘油二酯产品中甘油二酯的含量为60.23％，甘油二酯中花生四烯酸的含量为67.2％。
以上实施例1-3中，由于在第一步中通过醇解反应生成了一定量的甘油酯产品，在第二步反应中，因为存在甘油一酯和甘油二酯，在反应过程中可以起到协同乳化的作用，在添加入甘油搅拌之后，使反应体系变为油包水的微乳液体系，从而增大甘油与油脂的接触面积，增大脂肪酶发挥作用的比表面积，同时由于大量油水界面的存在，有利于脂肪酶打开活性中心的盖子，有利于脂肪酶发挥催化作用，因此在第二步酶催化反应中，反应速率更快，极大地提高了生产效率。
本发明首次通过两步酶法反应制备得到富含花生四烯酸的部分甘油酯产品，通过第一步酶催化醇解富集花生四烯酸制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品；去除乙醇及脂肪酸乙酯后，再通过酶催化的甘油解反应，通过优选工艺条件，分别制备得到富含花生四烯酸的甘油一酯或甘油二酯产品，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯和甘油二酯中的花生四烯酸在60％以上。发明人进一步研究发现，当不采用本发明技术工艺及条件时，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量和甘油二酯产品中甘油二酯含量均较低，同时两种产品中的花生四烯酸的含量也较低。本发明通过各工艺条件协同作用，实现甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯和甘油二酯中的花生四烯酸在60％以上。
本发明通过两步酶法反应，分别制备得到富集花生四烯酸的甘油一酯或甘油二酯产品，花生四烯酸的含量高于同类工艺产品，同时所得产品可起到预消化作用，有助于提升花生四烯酸的消化吸收效率。本发明工艺简单，实施方便，易于推广。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (10)

1.一种两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：包括，
酶催化醇解反应：将富含花生四烯酸的微生物油脂与乙醇按照摩尔比为1:2～9的比例加入间歇反应器中，加入4～12wt％的脂肪酶，在温度为25～45℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应4～12小时，制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品，其中，中间酶解产品中甘油一酯和甘油二酯的含量在30％以上，甘油一酯的含量在3％以上；
制备甘油一酯：采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:3～6加入间歇反应器中，加入3～12wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应6～18小时，获得甘油一酯产品，甘油一酯含量为65％以上，甘油一酯中花生四烯酸在60％以上；
制备甘油二酯：采用减压蒸馏及分子蒸馏分别去除中间酶解产品的乙醇和脂肪酸乙酯后，将中间酶解产品与甘油按照摩尔比为1:0.5～1.5加入间歇反应器中，加入6～15wt％的脂肪酶，在温度30～70℃，搅拌速率为400～800rpm的条件下反应4～12小时，获得甘油二酯产品,甘油二酯含量为55％以上，甘油二酯中花生四烯酸的含量在60％以上。
2.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述富含花生四烯酸的微生物油脂来自于Mortierella真菌发酵，包括Mortierella elongate、Mortierella alpine和Mortierella ramanniana其中的一种。
3.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述酶催化醇解反应，其中，乙醇为无水乙醇。
4.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述酶催化醇解反应，其中，所用脂肪酶为Lipozyme RMIM、Lipozyme TL IM和Lipase AY-30SD中的一种或几种。
5.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述酶催化醇解反应，其中，制备得到富含花生四烯酸的中间酶解产品中花生四烯酸的含量在60％以上。
6.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述制备甘油一酯，其中所用脂肪酶为Novozym 435。
7.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述制备甘油二酯，其中所用脂肪酶为Novozym 435。
8.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述制备甘油一酯，其中，甘油一酯产品中获得甘油一酯含量为65％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油一酯中花生四烯酸在60％以上。
9.如权利要求1所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法，其特征在于：所述制备甘油二酯，其中，甘油二酯产品中甘油二酯含量为55％以上，花生四烯酸的含量在60％以上，甘油二酯中花生四烯酸的含量在60％以上。
10.一种如权利要求1～9任一所述两步酶法制备富含花生四烯酸甘油酯的方法制得的甘油酯产品，其特征在于：所述甘油酯产品，包括甘油一酯产品和甘油二酯产品。
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