CN111163767A - 治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症的治疗方案 - Google Patents

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Abstract

本文提供了治疗患有PNH的受试者的方法，包括向所述受试者施用治疗有效量的补体C5(C5)抑制剂、补体C3(C3)抑制剂或补体因子B(CFB)抑制剂与治疗有效量的式I或式II的小分子补体因子D(CFD)抑制剂或其药学上可接受的盐的组合。

Description

治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症的治疗方案
相关申请声明
本申请要求2017年8月2日提交的美国临时申请No.62/540,451和2017年12月1日提交的美国临时申请No.62/593,669的权益。出于所有目的，这些申请的每一个的全部内容通过引用并入本文。
技术领域
本发明属于用于治疗补体介导的紊乱阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的治疗方案领域。
背景技术
补体系统是先天免疫系统的一部分，其不能适应宿主生命过程中的变化，但会被适应性免疫系统招募和使用。例如，它有助于或补充抗体和吞噬细胞清除病原体的能力。这种复杂的调节途径可以对病原生物做出快速反应，同时保护宿主细胞免受破坏。超过三十种蛋白质和蛋白质片段组成补体系统。这些蛋白质通过调理作用(增强抗原的吞噬作用)、趋化作用(吸引巨噬细胞和嗜中性粒细胞)、细胞裂解(破坏外来细胞的膜)和凝集作用(将病原体聚类和结合在一起)起作用。
补体系统具有三种途径：经典途径、旁路途径和凝集素途径。补体因子D在补体级联的旁路途径的激活中起着早期和中心作用。旁路补体途径的激活通过C3中硫酯键的自发水解产生C3(H2O)来启动，C3(H2O)与因子B结合形成C3(H2O)B复合物。补体因子D用于裂解C3(H2O)B复合物中的因子B，形成Ba和Bb。Bb片段保持与C3(H2O)结合，形成旁路途径C3转化酶C3(H2O)Bb。另外，由任何C3转化酶生成的C3b也与因子B结合形成C3bB，因子D对其裂解生成后期旁路途径C3转化酶C3bBb。旁路途径C3转化酶的后一种形式可以在所有三个定义的补体途径中提供重要的下游扩增，最终导致补体级联途径中其他因子的募集和组装，包括C5向C5a和C5b的裂解。C5b参与将因子C6、C7、C8和C9组装成膜攻击复合物，后者可以通过裂解细胞破坏致病细胞。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种克隆性造血干细胞(HSC)疾病，表现为溶血性贫血、血栓形成和平滑肌肌张力障碍，在某些情况下还会出现骨髓衰竭。PNH由一个或多个HSC克隆中PIGA(编码磷脂酰肌醇N-乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶亚基A)的体细胞突变引起。PIGA的基因产物是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚的生物合成所必需的；因此，PIGA突变导致缺乏GPI锚定的蛋白质，诸如补体衰变加速因子(也称为CD55)和CD59糖蛋白(CD59)，它们都是补体抑制剂。CD55和CD59的缺失使PNH红细胞在液相中正常缓慢的AP激活(“敲除(tickover)”)后易受破坏性C3转化酶和其细胞膜上末端复合物的组装的影响，从而导致血管内溶血，这导致血栓形成和许多与PNH相关的发病率和死亡率。
依库丽单抗(Eculizumab，SOLARIS，Alexion Pharmaceuticals,Inc.)是一种单克隆抗体补体抑制剂，是唯一获准用于PNH的疗法。作为末端成分C5的抑制剂，依库丽单抗阻断溶血性末端复合物(也称为膜攻击复合物，MAC)的组装。依库丽单抗的C5阻断可防止补体介导的PNH血管内溶血。然而，依库丽单抗治疗导致补体C3片段在PNH膜上的沉积增加，这可导致脾脏和肝脏中的调理性红细胞的血管外吞噬消除(A.M.Risitano et al,Blood,2009,113:4094)以及血管内溶血的不完全抑制(M.J.Harder et al,Blood,2017,129:970)，因此导致在相当一部分受试者中观察到持续的贫血和输血依赖性。由于持续的血管外溶血，施用依库丽单抗的大约30％的患者继续患有严重的贫血。
在血管内和血管外，对溶血作用欠佳的抑制仍然是治疗PNH的主要问题。本发明的目的是提供充分抑制PNH红细胞的血管内和血管外溶血的改进的方法和治疗。本发明的另一个目的是抑制或减少C3片段在PNH红细胞上的沉积。本发明的另一个目的是提高补体抑制剂治疗PNH的疗效。
发明内容
本文提供了治疗患有PNH的受试者的方法，包括向受试者组合施用治疗有效量的补体C5(C5)抑制剂、补体C3(C3)抑制剂或补体因子B(CFB)抑制剂与治疗有效量的小分子补体因子D(CFD)抑制剂。通过将本文所述的CFD抑制剂与C5抑制剂、C3抑制剂或CFB抑制剂组合或在施用C5抑制剂、C3抑制剂或CFB抑制剂后包括CFD抑制剂，可以获得对与PNH相关的血管内溶血的抑制的显著改善。此外，通过在治疗方案中包括CFD抑制剂，实现了对上游C3转化酶组装和C3片段沉积的抑制，所述上游C3转化酶组装和C3片段沉积有助于与单独临床使用C5抑制剂例如依库丽单抗相关的血管外溶血。另外，通过将本文所述的CFD抑制剂与C3抑制剂或CFB抑制剂组合或在施用C3抑制剂或CFB抑制剂后包括CFD抑制剂，可以获得对有助于与PNH相关的血管外溶血的上游C3转化酶组装和C3片段沉积的抑制的显著改善。
令人惊奇地发现，与C5抑制剂或C3抑制剂组合使用本文所述的CFD抑制剂协同地增强了对溶血的抑制。通过在治疗方案中包括本文所述的CFD抑制剂，为患有PNH的受试者提供改善的治疗方案，所述患者仅用C5抑制剂或C3抑制剂治疗经历不完全的血管内溶血抑制。因此，在治疗方案中包括本文所述的CFD抑制剂作为有效的挽救疗法发挥作用，并极大地扩展了C5和/或C3抑制剂的治疗效果。
还发现将本文所述的CFD抑制剂与C5抑制剂组合使用协同增强溶血的抑制，包括与PNH中血管外溶血相关的C3片段沉积诱导的溶血，这是与标准护理C5抑制剂治疗(例如依库丽单抗)的临床使用相关的主要并发症。例如，C5抑制剂依库丽单抗的临床使用与通过C3片段沉积引起的血管外溶血的发展有关，并且在某些亚群中与对血管内溶血的不完全抑制有关。如以下实施例所示，使用本文所述的CFD抑制剂抑制了C3片段在PNH红细胞上的膜沉积。通过结合本文所述的CFD抑制剂与例如依库丽单抗，可以抑制MAC组装和C3片段在PNH红细胞上的沉积。因此，本文所述的CFD抑制剂和C5抑制剂例如依库丽单抗的组合提供了治疗C5抑制剂的欠佳应答和/或经受血管外溶血的PNH受试者的改善的治疗方法。
据信，使用本文所述的CFD抑制剂降低了沉积的C3b簇的密度，由此C5与C3b簇的结合更容易被C5抑制剂例如依库丽单抗抑制。尽管依库丽单抗与C5结合并阻断CD59的上游补体的末端途径，但依库丽单抗不能解决由于PNH红细胞缺乏CD55的补体旁路途径C3片段的沉积。结果，PNH红细胞积聚C3片段，并通过调理作用易于血管外溶血。相反，包含本文所述的CFD抑制剂抑制补体末端途径的活化以及调理，以协同方式补充C5抑制剂的作用。
因此，一方面，本发明提供一种治疗患有PNH受试者的方法，该方法包括向该受试者组合施用治疗有效量的C5抑制剂、C3抑制剂、CFB抑制剂或补充组分的泛抑制剂与治疗有效量的本文所述的CFD抑制剂。
本文描述了用于本发明的因子D抑制剂。一方面，可以使用式I的CFD抑制剂：
Figure BDA0002421569820000041
或其药学上可接受的盐、N-氧化物、同位素衍生物或前药，任选地于药学上可接受的载体中形成组合物；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
在一个实施方案中，式1的化合物选自：
Figure BDA0002421569820000051
Figure BDA0002421569820000061
在替代方面，可以施用式II的CFD抑制剂：
Figure BDA0002421569820000062
或其药学上可接受的盐、N-氧化物、同位素衍生物或前药，任选地于药学上可接受的载体的中形成组合物；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
在一个实施方案中，式II的化合物选自：
Figure BDA0002421569820000063
Figure BDA0002421569820000071
一方面，本文提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向该受试者组合或交替施用治疗有效量的C5抑制剂与治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂或其药学上可接受的盐。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。用于本文所述方法的其他C5抑制剂包括但不限于：重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000072
(Adienne Pharma and Biotech)；coversin(Akari Therapeutics)；Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)；ARC-1905(Ophthotech)；RA101348(RaPharmaceuticals)；RA101495(Ra Pharmaceuticals)；SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)；ARC 1005(Novo Nordisk)；用于C5的SOMAmer(SomaLogic)；SSL7；MEDI7814(Medlmmune)；金精三羧酸(Aurin Biotech)；金精三羧酸衍生物(Auxin Biotech)；RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)；ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)；ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)；TT30(Alexion Pharmaceuticals)；ABP9S9(Amgen)；抗C5siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)；Erdigna(Adienne Pharma)；avacincaptad
Figure BDA0002421569820000081
(Ophthotech)；SOBI005(Swedish Orphan Biovitrum)；ISU305(ISUABXIS)；和REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗，并且CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。在一个实施方案中，受试者在补体受体1基因(CR1)中具有遗传多态性。在一个实施方案中，CR1多态性是HinriIII H/L或L/L基因型(参见，例如，Rondelli et al.,Polymorphism of the complement receptor 1 gene correlates with thehematologic response to eculizumab in patients with paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,Haematologica.2014Feb；99(2):262-266，通过引用并入本文)。
一方面，本文提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向该受试者施用选自式I或式II的CFD抑制剂或其药学上可接受的盐，其中该受试者在施用所述CFD抑制剂时已经或正在接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且正在经历血管外溶血或残余血管内溶血。接受C5抑制剂、发展为血管外溶血的受试者可以保持或变得贫血，即，其血红蛋白水平小于约12g/dL，更特别地小于约10g/dL，同时保持例如正常或轻微升高的乳酸脱氢酶(LDH)水平，例如LDH水平低于约250U/L。相比之下，接受C5抑制剂、经受不完全抑制或残留血管内溶血的受试者仍然贫血，并且还可能具有升高的LDH水平，例如LDH水平为正常上限(ULN)的1.0倍或更高。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在另一个实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗，并且CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。在一个实施方案中，受试者在施用CFD抑制剂之前已经接受了C5治疗方案至少3个月。
在本发明的一个方面，本文提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向该受试者施用有效量的选自式I或式II的化合物的CFD抑制剂或其药学上可接受的盐，其中在施用CFD抑制剂时，该受试者已经或目前正在接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中该受试者的Hgb水平小于约12g/dL。在一个实施方案中，受试者的Hgb小于约10g/dL。在一个实施方案中，该受试者的Hgb小于约8g/dL。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，该受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经接受了两次或更多次输血。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受了C5治疗方案至少3个月。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在另一个实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗，并且CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。在一个实施方案中，受试者在施用CFD抑制剂之前已经接受C5治疗方案至少3个月。
在本发明的一个方面，本文提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向该受试者施用有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中在施用CFD抑制剂时，受试者已经或目前正在接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中受试者的Hgb水平低于约12g/dL，LDH水平大于1.0X ULN。在一个实施方案中，受试者的Hgb小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的Hgb小于约8g/dL。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于1.0×ULN。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月中已经接受了两次或更多次输血。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在另一个实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗，并且CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。在一个实施方案中，受试者在施用CFD抑制剂之前已经接受C5治疗方案至少3个月。
在本发明的一个方面，本文提供一种治疗患有PNH受试者的方法，包括向该受试者施用有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中在施用CFD抑制剂时，受试者已经或目前正在接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中受试者的Hgb水平低于约12g/dL，LDH水平小于约0.25×ULN。在一个实施方案中，受试者的Hgb小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的Hgb小于约8g/dL。在一个实施方案中，受试者的LDH水平在正常范围内。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月中已经接受了两次或更多次输血。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在另一个实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗，并且CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。在一个实施方案中，受试者在施用CFD抑制剂之前已经接受C5治疗方案至少3个月。
本文还提供一种治疗患有PNH受试者的方法，包括向该受试者组合施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与C3抑制剂。如下文进一步描述，组合使用选自式I或式II的CFD抑制剂与补体C3抑制剂还提供了对PNH红细胞溶血的协同抑制。这些协同作用在PNH的治疗中提供了增加的治疗功效，同时减少了治疗功效所必需的抑制量。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂选自坎普他汀(compstatin)或坎普他汀类似物或衍生物。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物4(1MeW)/APL-1。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物CP-40/AMY-101。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物Peg-CP-40。4(lMeW)/APL-1、CP40/AMY-101和Peg-CP-40描述于Risitano,Ricklin et al.,Peptide inhibitors of C3activation as a novel strategy of complement inhibition for the treatment ofparoxysmal nocturnal hemoglobinuria,Blood.2014Mar 27；123(13):2094-101，通过引用并入本文。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是AMY-201(Amyndas Pharmaceuticals)。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是APL-2(Apellis Pharmaceuticals)。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是ATA(金精三羧酸)(Aurin Biotech，美国专利申请公开US20130035392，通过引用并入本文)。在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
本文还提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向该受试者组合施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与补体因子B抑制剂。通过靶向补体抑制的多种机制，据信组合使用选自式I或式II的化合物的CFD抑制剂与因子B抑制剂提供对PNH红细胞溶血的改善抑制，使PNH治疗中的治疗功效提高，同时减少治疗功效所必需的抑制量。在一个特定的实施方案中，CFB抑制剂是LNP023(Novartis)。在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂选自WO2013/192345中描述的抑制剂，其通过引用并入本文。在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂是
Figure BDA0002421569820000121
在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂选自国际申请号PCT/US17/39587中描述的抑制剂，其以引用方式并入本文。在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在另一方面，本文提供一种治疗患有PNH的受试者的方法，方法包括向该受试者组合施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与补充组分的泛抑制剂。在一个实施方案中，抑制剂是FUT-175。在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在本发明的一个方面，本文提供了本文所述的药学上可接受的组合或组合物，包含选自式I或式II或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂和C3或C5抑制剂。在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在本发明的一个方面，本文提供了本文所述的药学上可接受的组合或组合物，包含式I或式II或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂和CFB抑制剂。在一个实施方案中，CFB抑制剂是如PCT/US/17/39587中所述的化合物，其通过引用并入本文。在一个实施方案中，CFB抑制剂是：
Figure BDA0002421569820000131
在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在另一方面，本发明提供了本文所述的药学上可接受的组合或组合物，包含式I或式II或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂和补充组分的泛抑制剂。在一个实施方案中，泛抑制剂是FUT-175。在一个实施方案中，CFD抑制剂选自化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
附图说明
图1A至图1B是三维表面图，显示化合物1和依库丽单抗的组合协同抑制补体介导的PNH红细胞溶血。每个表面图均具有不同且一致的正峰，并且如实施例1中所述，具有大的协同作用量。在x轴上测量依库丽单抗的浓度(μg/mL)，在y轴上测量化合物1的浓度(μM)。z轴代表测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。正的表面峰表明抑制作用比预期的大，因此具有协同作用，而负的表面峰表明抑制作用比预期的小，因此具有拮抗作用。
图2A至图2B是三维表面图，显示化合物1和坎普他汀的组合协同抑制补体介导的PNH红细胞溶血。每个表面图具有不同且一致的正峰，并且如实施例2中所述，具有大的协同作用量。在x轴上测量坎普他汀的浓度(μM)，并且在y轴上测量化合物1的浓度(μM)。z轴代表测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。正的表面峰表明抑制作用比预期的大，因此具有协同作用，而负的表面峰表明抑制作用比预期的小，因此具有拮抗作用。
图3A至图3D是三维表面图，显示化合物1和坎普他汀的组合协同抑制CAP活性，如使用兔红细胞的溶血法所测。每个表面图具有不同且一致的正峰，并且如实施例6中所述，具有大的协同作用量。在x轴上测量坎普他汀的浓度(μM)，在y轴上测量化合物1的浓度(μM)。z轴代表测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。正的表面峰表明抑制作用比预期的大，因此具有协同作用，而负的表面峰表明抑制作用比预期的小，因此具有拮抗作用。
图4A至图4C是三维表面图，显示化合物1和抗C5(针对人C5的鼠单克隆抗体，同种型IgG1K，产品编号A217，来自San Diego，CA的Quidel)的组合是CAP活性的中度协同抑制剂，如使用基于Wieslab ELISA的功能分析测定。每个表面图具有不同的正峰和如实施例7中所述的协同作用量。在x轴上测量抗C5的浓度(μg/mL)，在y轴上测量化合物1的浓度(μM)。z轴代表测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。正表面峰表明抑制作用大于预期值，因此具有协同作用。
图5A至图5C是三维表面图，表明化合物1和FUT-175的组合是CAP活性的中度协同抑制剂，如使用兔红细胞溶血法测定。每个表面图具有不同的正峰，和如实施例8所述的协同作用量。在x轴上测量FUT-175的浓度(μM)，并且在y轴上测量化合物1的浓度(μM)。z轴代表测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。正的表面峰表明抑制作用比预期的大，因此具有协同作用，而负的表面峰表明抑制作用比预期的小，因此具有拮抗作用。
图6A至图6L是在血清和增加化合物1浓度的情况下C3片段在兔红细胞上沉积的流式细胞术分析。如实施例11所述，用抗人C3c抗体检测细胞表面C3片段。x轴是用抗C3c抗体染色呈阳性的细胞数，y轴是以计数为单位测量的强度。
图6M是剂量-响应曲线，显示了如实施例11中所讨论的在化合物1和坎普他汀浓度增加的情况下C3片段阳性细胞的百分比。x轴是以μM为单位测量的化合物浓度，y轴是以百分比为单位测量的C3片段阳性细胞。
图7A至图7L是如实施例12中所述的在各种浓度的化合物1处理下，在人工PNH细胞上的C3片段沉积的流式细胞术分析。点图显示了在用抗人CD59(y轴)抗体和抗人C3c(x轴)抗体标记后红细胞的分布。
图7M是剂量-响应曲线，显示了如实施例12中所讨论的，在增加化合物1和坎普他汀的浓度的情况下C3片段阳性细胞的百分比。x轴是以μM为单位测量的化合物浓度，y轴是以百分比为单位测量的C3片段阳性细胞。
图8是用于流式细胞术分析完整和片段化的PNH红细胞上的C3片段沉积的代表性关键。左上象限对在完整的PNH红细胞上C3片段沉积为阴性。左下象限对在片段化的PNH红细胞上的C3片段沉积为阴性。右上象限对在完整的PNH红细胞上C3片段沉积呈阳性。右下象限对在片段化的PNH红细胞上C3片段沉积呈阳性。x轴是C3调和酶的增加量，y轴是散射强度。
图9是在包括无血清、渗透裂解、热灭活的血清和血清的各种条件下对C3片段在PNH红细胞上沉积的评估。点状图显示了用抗CD47(阳性)抗体和抗人CD59(阴性)抗体和抗人C3c(C3片段沉积)抗体标记后的红细胞分布。x轴是C3转化酶的增加量，y轴是散射强度。
图10是对在单独增加化合物1的浓度C3片段在PNH红细胞上沉积的评估。点状图显示了用抗CD47(阳性)抗体和抗人CD59(阴性)抗体和抗人C3c(C3片段沉积)抗体标记后的红细胞分布。x轴是C3转化酶的增加量，y轴是散射强度。
图11是单独使用依库丽单抗、单独使用化合物1以及使用依库丽单抗和化合物1的组合对C3片段在PNH红细胞上红细胞上沉积的评估。点状图显示了用抗CD47(阳性)抗体和抗人CD59(阴性)抗体和抗人C3c(C3片段沉积)抗体标记后的红细胞分布。x轴是C3转化酶的增加量，y轴是散射强度。
图12是柱状图，显示在生理条件下，升高单独的化合物1、单独的依库珠单抗以及依库丽单抗和化合物1的组合的水平对PNH红细胞溶血的抑制作用。x轴是化合物剂量，y轴是溶血抑制百分比。
图13A是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1和静脉注射依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的观察到的乳酸脱氢酶水平。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以U/L为单位测量的血液中乳酸脱氢酶的浓度。
图13B是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1和静脉注射依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的乳酸脱氢酶水平相对于基线的变化。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以U/L为单位测量的血液中乳酸脱氢酶浓度相对于基线的变化。
图14A是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉注射的依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的观察到的血红蛋白的水平。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以g/dL为单位测量的血液中血红蛋白的浓度。
图14B是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的血红蛋白水平相对于基线的变化。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以g/dL为单位测量的血液中血红蛋白浓度相对于基线的变化。
图15A是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的观察到的网织红细胞水平。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以109/L为单位测量的血液中网织红细胞浓度相对于基线的变化。
图15B是线形图，显示在多个时间点从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗的组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的网织红细胞水平相对于基线的变化。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第1周、第2周和第4周。y轴是以109/L测得的血液中网织红细胞相对于基线的数量变化。
图16A是线图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的观察到的PNHIII型红细胞百分比。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第2周和第4周。y轴是血液中的PNH III型红细胞的百分比。
图16B是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的PNH III型红细胞百分比相对于基线的变化。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第2周和第4周。y轴是PNH III型红细胞相对于血液的基线的百分比的变化。
图17A是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的观察到的C3片段沉积百分比。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第2周和第4周。y轴是血液中C3片段沉积的百分比。
图17B是线形图，显示在多个时间点在从用100mg化合物1与静脉内依库丽单抗组合处理的两个PNH受试者收集的血液中发现的C3片段沉积的百分比相对于基线的变化。x轴包括具体的时间点第1天(基线)、第2周和第4周。y轴是血液中C3片段沉积的百分比相对于基线的变化。
具体实施方式
补体的功能障碍或过度活化与许多疾病有关，包括阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)，表现为溶血性贫血、血栓形成和平滑肌肌张力障碍的克隆性造血干细胞(HSC)疾病，以及在某些情况下的骨髓衰竭。目前，唯一批准的PNH治疗方法是C5单克隆抗体依库丽单抗(SolirisTM,Alexion Pharmaceuticals,Inc.)。本文提供了改进的治疗方案，包括选自式I或式II的CFD抑制剂与C5抑制剂、C3抑制剂、CFB抑制剂或泛补体抑制剂或其组合。
定义
术语“一个”和“一种”不表示数量限制，而是表示存在至少一个所引用的项目。术语“或”是指“和/或”。除非另有说明，否则数值范围的列举仅旨在用作分别指代落入该范围内的每个单独值的简写方法，并且每个单独值都被并入说明书中，就如同在本文中单独列举一样。所有范围的端点都包含在该范围内并且可以独立组合。除非本文另外指出或与上下文明显矛盾，否则本文描述的所有方法可以以合适的顺序执行。除非另外声明，否则使用示例或示例性语言(例如，“诸如”)仅是为了更好地说明本发明，而不是对本发明的范围构成限制。除非另有定义，否则本文所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常所理解的含义相同的含义。
处理的“受试者”通常是人类受试者，但是应当理解，本文所述的方法对于其他动物例如哺乳动物和脊椎动物物种是有效的。更具体地，术语“受试者”可以包括用于测定的动物，例如用于临床前测试的那些动物，包括但不限于小鼠，大鼠，猴子，狗，猪和兔子；以及驯养的猪类(猪(pig，hog))，反刍动物，马，家禽、猫科动物，牛科动物，鼠科动物，犬科动物等。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内适用于与受试者(例如人受试者)接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应等，具有合理的益处/风险比，并且对于它们的预期用途有效的那些盐，以及在可能的情况下本公开主题的化合物的两性离子形式。
因此，术语“盐”是指本公开主题的化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可以在化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过将纯化的游离碱形式的化合物与合适的有机或无机酸分别反应，并分离由此形成的盐来制备。药学上可接受的碱加成盐可以与金属或胺形成，例如碱金属和碱土金属的氢氧化物或有机胺。用作阳离子的金属的实例包括但不限于钠、钾、镁、钙等。合适的胺的实例包括但不限于N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺和普鲁卡因。
盐可以由无机酸硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物，诸如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氢溴酸、氢溴酸、亚磷酸等。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘甲酸甲磺酸盐、葡糖庚糖酸盐、乳糖醛酸盐、月桂基磺酸盐和羟乙磺酸盐等。盐也可以由有机酸制备，诸如脂族单羧酸和二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸、链烷二酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等。代表性的盐包括乙酸盐、丙酸盐、辛酸盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。药学上可接受的盐可以包括基于碱金属和碱土金属的阳离子，诸如钠、锂、钾、钙、镁等，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。还考虑了氨基酸的盐，诸如藻酸盐、葡萄糖酸盐、半乳糖醛酸盐等。参见，例如，Beige et al.,J.Pharm.Sci.,1977,66,1-19，其通过引用并入本文。
“药物组合物”是包含至少一种活性剂和至少一种其他物质诸如药学上可接受的载体或药学上可接受的赋形剂的组合物。
“药学上可接受的赋形剂”是指可用于制备药物组合物的赋形剂，该药物组合物通常是安全的、无毒的，并且在生物学上或其他方面都不是不适合施用于宿主(通常是人)的。在一个实施方案中，使用了兽用可接受的赋形剂。
如本文所用，术语“前药”是指当施用于宿主时在体内转化为母体药物的化合物。如本文所用，术语“母体药物”是指可用于治疗本文所述的任何病症，或者控制或改善与宿主通常是人中本文所述的任何生理或病理病症有关的潜在原因或症状的任何本文所述的化合物。前药可用于实现任何所需的效果，包括增强母体药物的性能或改善母体药物的药理或药代动力学性能。存在的前药策略在调节体内产生母体药物的条件提供了选择，所有这些被视为包含在本文中。前药策略的非限制性实例包括可去除基团的共价连接或基团的可去除部分，例如但不限于酰化、磷酸化、膦酰化、氨基磷酸酯衍生物、酰胺化、还原、氧化、酯化、烷基化、其他羧基衍生物、亚砜或砜衍生物、羰基化或酸酐等。
在整个说明书和权利要求书中，除非另有说明，否则给定的化学式或名称应涵盖所有的旋光和立体异构体以及存在此类异构体和混合物的外消旋混合物。
在一个实施方案中，式I或式II的化合物包括期望的原子的同位素取代，量高于同位素的自然丰度，即富集。同位素是原子序数相同但质量数不同的原子，即质子数相同但中子数不同。作为一般示例而非限制，可以在所描述的结构中的任何地方使用氢的同位素，例如氘(2H)和氚(3H)。替代地或另外，可以使用碳的同位素，例如13C和14C。优选的同位素取代是分子上一个或多个位置上氘替换氢以改善药物的性能。氘可以结合在代谢期间键断裂的位置(α-氘动力学同位素效应)或紧接或位于键断裂的部位的附近(β-氘动力学同位素效应)。
由于更高的代谢稳定性，诸如例如体内半衰期的增加或剂量要求的减少，用同位素如氘替换可以提供某些治疗优势。在代谢分解位点将氢用氘替换可降低该键处的代谢速率或消除该键的代谢。在化合物的可能存在氢原子的任何位置，氢原子可以是氢的任何同位素，包括氕(1H)、氘(2H)和氚(3H)。因此，除非上下文另外明确指出，否则本文中提及的化合物涵盖所有潜在的同位素形式。
术语“同位素标记的”类似物是指为“氘代类似物”、“13C标记类似物”或“氘代/13C标记的类似物”的类似物。术语“氘代的类似物”是指本文所述的化合物，其中H-同位素即氢/氕(1H)被H-同位素即氘(2H)替换。氘取代可以是部分或完全的。部分氘取代是指至少一个氢被至少一个氘替换。在某些实施方案中，同位素是在任何感兴趣的位置富集90％、95％或99％或更高的同位素。在一些实施方案中，氘在所需位置富集90％、95％或99％。
在上面、下面和这里的描述中，每当使用涉及式I、式II或具体化合物例如化合物1的任何术语时，应理解药学上可接受的盐、前药或组合物被认为包括在内，除非另有说明或与文本不一致。
如本文所预期并且出于本文所公开范围的目的，本文所描述的所有范围包括在所识别的范围内出现的任何和所有数值。例如，如本文所预期的，范围1至10或1至10之间将包括数值1、2、3、4、5、6、7、8、9、10以及其分数。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)
PNH是由骨髓干细胞中PIGA中的体细胞突变引起的。因为干细胞会产生所有成熟的血液成分，包括红细胞、白细胞和血小板，所以源自异常干细胞的细胞也会携带PIGA突变。带有PIGA突变的细胞缺乏称为GPI锚定蛋白的一类蛋白，这些蛋白对于将蛋白锚定在细胞膜中很重要。在PIGA突变的细胞中无法通过GPI锚点附着到细胞膜上的两个重要蛋白是CD59糖蛋白(CD59)和衰变加速因子(DAF，也称为CD55)。这些蛋白质对于调节补体系统很重要，它们在细胞表面的缺失会导致其易于破坏。血管外和血管内红细胞的破坏(溶血)与PNH有关。
在血管内溶血中，红细胞在循环中溶解并将血红蛋白释放到血浆中(血红蛋白血)。测量血管内溶血的一种方法是测量乳酸脱氢酶(LDH)水平的测试。经历血管内溶血的PNH患者的LDH水平升高。在血管外溶血中，红细胞被巨噬细胞吞噬。血管外溶血可通过红细胞的持续丢失(通过血红蛋白和输血依赖性，即在指定时间段内所需的输血次数，进行监测)来间接追踪。在患有PNH的受试者中，使用依库丽单抗治疗期间网织红细胞计数经常保持升高，这是由于C3片段沉积在PNH红细胞上导致某些血管外溶血的持续存在。另外，血管外溶血将导致未缀合的胆红素向肝细胞的呈递增加。如果肝细胞吸收和缀合这种胆红素的能力不堪重负，则未缀合的胆红素将在血浆中积聚，导致总胆红素和间接胆红素增加。
对PNH唯一批准的治疗方法是依库丽单抗，依库丽单抗是一种与C5结合并阻止C5a和C5b生成的单克隆抗体抑制剂。虽然这可以防止补体介导的血管内溶血，但依库丽单抗会导致补体C3片段在PNH细胞上的沉积增加，这可能导致血管外溶血。依库丽单抗无法治疗血管外溶血，因此，即使使用依库丽单抗治疗可预防血管内溶血，受试者仍可经历血管外溶血。由于不完全抑制血管内溶血或血管外溶血，许多受试者(“部分反应者”或“欠佳反应者”)继续患有贫血。
D因子抑制剂
用于本发明的D因子抑制剂选自式I或式II：
Figure BDA0002421569820000221
或其药学上可接受的组合物、盐、N-氧化物、同位素类似物或前药；其中X、R1、R2、R3、R4和R5如上所定义。
a.在式I或式II中任一项的一个实施方案中，R1是氢。
b.在式I或式II中任一项的一个实施方案中，R1是C1-C3烷基。
c.在式I或式II中任一项的一个实施方案中，R1是甲基。
d.在式I或式II中任一项的一个实施方案中，R1是乙基。
e.在式I或式II中任一项的一个实施方案中，R1是卤素。
f.实施方案a-e中任一项，其中X是N。
g.实施方案a-e中任一项，其中X是CH。
h.实施方案a-g中任一项，其中R2是C1-C3烷基。
i.实施方案a-g中任一项，其中R2是氢。
j.实施方案a-g中任一项，其中R2是甲基。
k.实施方案a-g中任一项，其中R2是乙基。
1.实施方案a-k中任一项，其中R3是氢。
m.实施方案a-k中任一项，其中R3是甲基。
n.实施方案a-k中任一项，其中R3是乙基。
o.实施方案a-k中任一项，其中R3是氟。
p.实施方案a-o中任一项，其中R4是C1-C3烷基。
q.实施方案a-o中任一项，其中R4是甲基。
r.实施方案a-o中任一项，其中R4是卤素。
s.实施方案a-r中任一项，其中R5是氰基。
t.实施方案a-r中任一项，其中R5是C1-C3烷基。
u.实施方案a-r中任一项，其中R5是甲基。
v.实施方案a-r中任一项，其中R5是卤素。
可以使用WO 2017/035353和WO 2015/130838中公开的方法合成式I和式II的化合物。
式I和式II的化合物的非限制性实例在下表1中提供。
表1
Figure BDA0002421569820000231
Figure BDA0002421569820000241
Figure BDA0002421569820000251
Figure BDA0002421569820000261
Figure BDA0002421569820000271
用于本发明的示例性CFD抑制剂是例如化合物1。化合物1是有效的D因子抑制剂，其对人CFD的结合亲和力为KD＝0.54nM，并且抑制了CFD对B因子的催化活性，IC50＝17nM。它还在体外强烈地抑制AP活性，显示对兔红细胞溶血的IC50为27nM，对PNH红细胞溶血的IC50为14nM，通过Wieslab分析为26nM。
化合物1的制备方法如下：
Figure BDA0002421569820000281
之前已经描述了D因子抑制剂((2S,4R)-1-(2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-lH-吲唑-1-基)乙酰基)-N-(6-溴吡啶-2-基))-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺(化合物1)，参见美国专利申请公开2015/0239895和2017/0066783。化合物1可以通过本领域技术人员已知的方法合成。在步骤1中，在碱存在下使用四(三苯基膦)钯(0)将2-(3-乙酰基-5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酸叔丁基酯(S1)偶联到2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)嘧啶，提供2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-1H-吲唑-1-基)乙酸叔丁基酯(S2)。在步骤2中，用三氟乙酸水解2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-1H-吲唑-1-基)乙酸叔丁基酯(S2)，提供2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-1H-吲唑-1-基)乙酸(S3)。在步骤3中，使用HATU将2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-1H-吲唑-1-基)乙酸(S3)和(2S,4R)-N-(6-溴吡啶-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺(S4)偶联以提供(2S,4R)1-(2-(3-乙酰基-5-(2-甲基嘧啶-5-基)-1H-吲唑-1-基)乙酰基)-N-(6-溴吡啶-2-基)-4-氟吡咯烷-2-甲酰胺(1)。
C5抑制剂
本文提供了用于治疗受试者的PNH的方法，其包括向该受试者组合或交替施用有效量的C5抑制剂和有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂。
C5抑制剂是本领域已知的。在一个实施方案中，C5抑制剂是靶向C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗(SolirisTM Alexion Pharmaceuticals，NewHaven，CT，参见例如美国专利号9,352,035)。
在一些实施方案中，C5抑制剂可以是但不限于：重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000291
(单克隆抗体，Adienne Pharma and Biotech，Bergamo，Italy；参见美国专利号7,999,081)；coversin(小动物蛋白，Volution Tmmuno-pharmaceuticals，Geneva，Switzerland；参见例如Penabad et al.Lupus,2012,23(12):1324-6)；LFG316(单克隆抗体，Novartis，Basel，Switzerland，和Morphosys，Planegg，Germany；参见美国专利号8,241,628和8,883,158)；ARC-1905(聚乙二醇化的RNA适配体，Ophthotech，NJ and NewYork，NY；参见Keefe et al.,Nature Reviews Drug Discovery,9,537-550)；RA101348和RA101495(大环肽，Ra Pharmaceuticals，Cambridge，MA)；SOBI002(亲合体，SwedishOrphan Biovitrum，Stockholm，Sweden)；ALN-CC5(Si-RNA，Alnylam Pharmaceuticals，Cambridge，MA)；ARC 1005(适配体，Novo Nordisk，Bagsvaerd，Denmark)；SOMAmers(适配体，SomaLogic，Boulder,Co)；SSL7(细菌蛋白毒素，参见例如Laursen etal.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,107(8):3681-6)；MEDI7814(单克隆抗体，Medlmmune，Gaithersburg，MD)；金精三羧酸；金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech，Vancouver，BC，参见美国专利申请公布2013/003592)；RG6107(抗C5回收抗体，Roche Pharmaceuticals，Basel，Switzerland)；ALXN1210和ALXN5500(单克隆抗体，Alexion Pharmaceuticals，New Haven，CT)；TT30(融合蛋白，Alexion Pharmaceuticals，New Haven，CT)；REGN3918(单克隆抗体，Regeneron，Tarrytown，NY)；ABP959(依库丽单抗生物仿制药，Amgen，Thousand Oaks，CA)；或它们的组合。
在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000301
Figure BDA0002421569820000302
是由Adienne Pharma and Biotech开发的完全人类重组抗体C5。在美国专利号7,999,081中描述了
Figure BDA0002421569820000303
在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin。Coversin是从Ornithodoros moubata壁虱(tick)的唾液中发现的蛋白衍生而来的重组蛋白，现今由Akari Therapeutics开发为重组蛋白。Coversin描述于Penabad et al.Lupus 2012,23(12):1324-6中。
在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316。Tesidolumab是由Novartis和Morphosys开发的单克隆抗体。Tesidolumab描述于美国专利号8,241,628和8,883,158中。
在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905。ARC-1905是由Ophthotech开发的聚乙二醇化的RNA适配体。ARC-1905描述于Keefe et al.Nature Reviews Drug Discovery,9:537-550中。
在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348。RA101348是由Ra Pharmaceuticals开发的大环肽。
在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495。RA101495是由Ra Pharmaceuticals开发的大环肽。
在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002。SOBI002是由Swedish OrphanBiovitrum开发的亲合体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005。ARC1005是由Novo Nordisk开发的适配体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是C5的SOMAmers。SOMAmers是由SomaLogic开发的适配体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。SSL7是一种细菌蛋白毒素，描述于Laursenet al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,107(8):3681-6中。
在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814。MEDI7814是由MedImmune开发的单克隆抗体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物。这些金精衍生物由Aurin Biotech开发，并进一步描述于美国专利申请公开号2013/003592中)。
在一个实施方案中，CS抑制剂是RG6107/SKY59。RG6107/SKY59是由RochePharmaceuticals开发的抗C5回收抗体。
在一实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500。ALXN1210和ALXNSS00是由Alexion Pharmaceuticals开发的单克隆抗体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30。TT30是由Alexion Pharmaceuticals开发的融合蛋白。
在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959。ABP959是由Amgen开发的依库丽单抗生物仿制药单克隆抗体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA。抗C5 siRNA由AlnylamPharmaceuticals开发。
在一个实施方案中，C5抑制剂是
Figure BDA0002421569820000311
Figure BDA0002421569820000312
是由Adienne Pharma开发的抗体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000313
Avacincaptadpegol是由Opthotech开发的适配体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005。SOBI005是由Swedish OrphanBiovitrum开发的蛋白质。
在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305。ISU305是由ISU ABXIS开发的单克隆抗体。
在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918。REGN3918是由Regeneron开发的单克隆抗体。
C3抑制剂
本文提供了用于治疗受试者的PNH的方法，该方法包括向受试者组合或交替施用有效量的C3抑制剂与有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂。
C3抑制剂是本领域已知的。在一个实施方案中，化合物1与坎普他汀和/或坎普他汀类似物组合或交替施用。坎普他汀和坎普他汀类似物是已知的，并且发现它们是有用的C3抑制剂，参见美国专利号9,056,076；8,168,584；9,421,240；9,291,622；8,580,735；9371365；9,169,307；8,946,145；7,989,589；7,888,323；6,319,897；和美国专利申请公开号2016/0060297；2016/0015810；2016/0215022；2016/0215020；2016/0194359；2014/0371133；2014/0323407；2014/0050739；2013/0324482；和2015/0158915。在一个实施方案中，坎普他汀类似物具有氨基酸序列ICWQDWGHHCRT(SEQ.ID.NO.1)。在另一个实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物。在一个实施方案中，坎普他汀类似物是序列Ac-ICV(1-mW)QDWGAHRCT(SEQ.ID.NO.2)的4(1MeW)/APL-1，其中Ac是乙酰基并且1-mW是1-甲基色氨酸。在另一个实施方案中，坎普他汀类似物是Cp40/AMY-101，其具有氨基酸序列yICV(lmW)QDW-Sar-AHRC-mI(SEQ.ID.NO.3)，其中y是D-酪氨酸，lmW是1-甲基色氨酸，Sar是肌氨酸，m1是N-甲基异亮氨酸。在又一个实施方案中，坎普他汀类似物是PEG-Cp40，具有氨基酸序列PEG-yICV(ImW)QDW-Sar-AHRC-ml(SEQ.ID.NO.4)，其中PEG是聚乙二醇(40kDa)，y是D-酪氨酸，lmW是1-甲基色氨酸，Sar是肌氨酸，并且mI是N-甲基异亮氨酸。在又一个实施方案中，坎普他汀类似物是4(1MeW)POT-4。4(lMeW)POT-4由Potentia开发。在另一个实施方案中，坎普他汀类似物是AMY-201。AMY-201由Amyndas Pharmaceuticals开发。
在一些实施方案中，化合物1可以与C3抑制剂组合，所述C3抑制剂包括但不限于：H17(单克隆抗体，EluSys Therapeutics，Pine Brook，NJ)；mirococept(基于CR1的蛋白质)；sCR1(基于CR1的蛋白质，Celldex，Hampton，NJ)；TT32(基于CR-1的蛋白质，AlexionPharmaceuticals，New Haven，CT)；HC-1496(重组肽)；CB 2782(酶，CatalystBiosciences，South San Francisco，CA)；APL-2(聚乙二醇化的合成环肽，ApellisPharmaceuticals，Crestwood，KY)；或它们的组合。
在一个实施方案中，C3抑制剂是H17。H17是由EluSys Therapeutics正在开发的人源化单克隆抗体。H17描述于Paixao-Cavalcante et al.J.Immunol.2014,192(10):4844-4851中。
在一实施方案中，C3抑制剂是mirococept。Mirococept是由InflazymePharmaceuticals开发的基于CR1的蛋白质。
在一个实施方案中，C3抑制剂是sCR1。sCR1是由Celldex开发的CR1蛋白的可溶解形式。
在一个实施方案中，C3抑制剂是TT32。TT32是由Alexion Pharmaceuticals开发的基于CR-1的蛋白质。
在一个实施方案中，C3抑制剂是HC-1496。HC-1496是由InCode开发的重组肽。
在一个实施方案中，C3抑制剂是CB2782。CB2782是源自人膜型丝氨酸蛋白酶1(MTSP-1)的新型蛋白酶，其由Catalyst Biosciences开发。
在一个实施方案中，C3抑制剂是APL-2。APL-2是由Apellis Pharmaceuticals开发的APL-1的聚乙二醇化版本。
CFB抑制剂
本文提供了用于治疗PNH的方法，包括组合或交替施用化合物1与CFB抑制剂。CFB抑制剂是本领域已知的。在一些实施方案中，化合物1可与CFB抑制剂组合，所述CFB抑制剂包括但不限于：抗FB SiRNA(Alnylam Pharmaceuticals，Cambridge，MA)；TA106(单克隆抗体，Alexion Pharmaceuticals，New Haven，CT)；LNP023(小分子，Novartis,Basel,Switzerland)；SOMAmers(适配体，SomaLogic，Boulder，CO)；bikaciomab(NovelmedTherapeutics，Cleveland，OH)；complin(参见Kadam et al.,J.Immunol.2010,DOI:10.409/jimmunol.10000200)；Ionis-FB-LRx(偶联配体的反义药物，IonisPharmaceuticals，Carlsbad，CA)；或它们的组合。在另一个实施方案中，可以与本文所述的化合物1组合的CFB抑制剂包括PCT/US17/39587中公开的那些。在另一个实施方案中，可以与本文所述的化合物1组合的CFB抑制剂包括在PCT/US17/014458中公开的那些。在另一个实施方案中，可以与本文所述的化合物1组合的CFB抑制剂包括美国专利申请公开号2016/0024079(转让给Novartis AG)中公开的那些。在一个实施方案中，CFB抑制剂是
Figure BDA0002421569820000341
在一个实施方案中，CFB抑制剂是抗FB siRNA。抗FB siRNA由AlnylamPharmaceuticals开发。
在一个实施方案中，CFB抑制剂是TA106。TA106是由Alexion Pharmaceuticals开发的单克隆抗体。
在一个实施方案中，CFB抑制剂是LNP023。LNP023是由Novartis开发的CFB小分子抑制剂。LNP023和相关的抑制剂描述于Maibaum et al.Nat.Chem.Biol.2016,12:1105-1110中。
在一个实施方案中，CFB抑制剂是complin。Complin是肽抑制剂，描述于Kadam etal.J.Immunol.2010 184(12):7116-24中。
在一个实施方案中，CFB抑制剂是Ionis-FB-LRx。Ionis-FB-L LRx是由IonisPharmaceuticals开发的偶联配体的反义药物。
补体成分的泛抑制剂
本文提供了用于治疗PNH的方法，包括组合或交替施用化合物1与补体的泛抑制剂。补体的泛抑制剂是本领域已知的。在一个实施方案中，该抑制剂是FUT-175。
治疗方法
本发明提供了用PNH治疗受试者的方法，包括向受试者组合或交替施用C5、C3和/或泛补体抑制剂与选自本文所述的式I或式II或其药学上可接受盐的CFD抑制剂，包括但不限于化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者组合施用治疗有效量的C5抑制剂与治疗有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000351
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(MedImmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(AdiennePharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000361
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者交替施用治疗有效量的C5抑制剂与治疗有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000371
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000372
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者组合或交替施用治疗有效量的C5抑制剂与治疗有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者具有补体受体1基因(CR1)的遗传多态性。在一个实施方案中，CR1多态性是HindIII/L基因型。在一个实施方案中，CR1多态性是HindIIIL/L基因型。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000381
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(AkariTherapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000391
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且正在经历残余血管内溶血。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约12g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8g/dL。在一个实施方案中，所述受试者的LDH水平大于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约250U/L。在一个实施方案中，所述受试者的LDH水平大于约500U/L。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了四次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000411
(Adienne Pharmaand Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish Orphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000412
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案并正在经历细管外溶血。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约12g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8g/dL。在一个实施方案中，所述受试者的LDH水平小于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于约250U/L。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了四次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000431
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000432
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中在施用CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约12.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约500U/L。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了四次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂也继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000451
(Adienne Pharmaand Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish Orphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000461
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中在施用CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约12.0g/dL，LDH水平大于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8.0g/dL。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了四次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂还继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000471
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000481
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中在施用CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约12.0g/dL，LDH水平大于约500U/L。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8.0g/dL。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂还继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000491
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(AurinBiotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000501
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中在施用CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约12.0g/dL，LDH水平小于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10.0g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8.0g/dL。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了四次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂还继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000511
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish OrphanBiovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000521
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中在施用CFD抑制剂时所述受试者的直接Coombs测试呈阳性。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约12g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8g/dL。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约500U/L。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂还继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微抗体，例如
Figure BDA0002421569820000531
(Adienne Pharma and Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish Orphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(NovoNordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(RochePharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(AlexionPharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000541
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(Swedish Orphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
在一个方面，提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂，其中所述受试者在施用CFD抑制剂时已经接受包括施用C5抑制剂的治疗方案，并且其中所述受试者在施用CFD抑制剂时显示出C3片段沉积。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。在一个实施方案中，受试者的血红蛋白水平小于约8g/dL。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于正常的上限。在一个实施方案中，受试者的LDH水平小于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约250U/L。在一个实施方案中，受试者的LDH水平大于约500U/L。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者是输血依赖性的。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂时，受试者在之前的十二个月内已经接受了一次或多次输血。在一个实施方案中，受试者在之前的六个月内已经进行了两次或更多次输血。在一个具体的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。在另一个特定的实施方案中，在施用CFD抑制剂后，C5抑制剂还继续施用。在一个特定的实施方案中，C5抑制剂是针对C5的单克隆抗体。在一个实施方案中，C5抑制剂是依库丽单抗。在一个实施方案中，C5抑制剂是重组人微型抗体，例如
Figure BDA0002421569820000561
(Adienne Pharma andBiotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是coversin(Akari Therapeutics)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Tesidolumab/LFG316(Novartis/Morphosys)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC-1905(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101348(RaPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RA101495(Ra Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI002(Swedish Orphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ARC1005(Novo Nordisk)。在一个实施方案中，C5抑制剂是用于C5的SOMAmer(SomaLogic)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SSL7。在一个实施方案中，C5抑制剂是MEDI7814(Medlmmune)。在一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸(Aurin Biotech)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是金精三羧酸衍生物(Aurin Biotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是RG6107/SKY59(Roche Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN1210(Alexion Pharmaceuticals)。在另一个实施方案中，C5抑制剂是ALXN5500(Alexion Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是TT30(AlexionPharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ABP959(Amgen)。在一个实施方案中，C5抑制剂是抗C5 siRNA(Alnylam Pharmaceuticals)。在一个实施方案中，C5抑制剂是Erdigna(Adienne Pharma)。在一个实施方案中，C5抑制剂是avacincaptad
Figure BDA0002421569820000562
(Ophthotech)。在一个实施方案中，C5抑制剂是SOBI005(SwedishOrphan Biovitrum)。在一个实施方案中，C5抑制剂是ISU305(ISU ABXIS)。在一个实施方案中，C5抑制剂是REGN3918(Regeneron)。在一个实施方案中，在施用CFD抑制剂之前，受试者已经接受C5治疗方案至少3个月。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物1。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物2。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物3。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物4。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物5。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物6。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物7。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物8。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物9。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物10。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物11。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物12。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物13。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物14。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物15。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物16。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物17。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物18。在一个实施方案中，CFD抑制剂为化合物19。抑制剂是化合物20。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物21。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物22。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物23。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物24。在一个实施方案中，CFD抑制剂是化合物25。在一个实施方案中，每天3次施用100mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用150mg的化合物1。在一个实施方案中，每天3次施用200mg的化合物1。
相应地，在本发明的一个实施方案中，本文提供了治疗患有PNH的受试者的方法，包括：
a.向受试者施用有效量的C5抑制剂；
b.监测受试者血管外溶血的发展；和
c.在血管外溶血发展后，向受试者施用有效量的选自式I或式II的化合物。在接受C5抑制剂的同时发展血管外溶血时施用本文所述的CFD抑制剂的能力提供了有效的治疗剂转换策略，扩展了C5抑制剂的有效性，并为显示对C5抑制剂次优反应的患有PNH的受试者提供了其他的治疗选择。确定血管外溶血的存在是本领域众所周知的。例如，患有血管外溶血的PNH受试者可能经历持续降低的血红蛋白水平，而在施用C5抑制剂后LDH水平恢复正常。通过在接受C5抑制剂例如依库丽单抗的同时监测受试者的血红蛋白和LDH水平，可以检测到血管外溶血的发展，并且向受试者施用选自式I和式II的CFD抑制剂。在一实施方案中，经历血管外溶血的受试者也经历血管内溶血。
在本发明的另一个实施方案中，本文提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括
a.向受试者施用治疗有效量的C5抑制剂；
b.监测受试者的不完全抑制血管内溶血或残余血管内溶血的证据；和，
c.在发现不完全抑制血管内溶血或残余血管内溶血的证据后，向受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂。在接受C5抑制剂的同时发生残余血管内溶血时施用本文所述的CFD抑制剂的能力提供了有效的协同治疗方案，扩展了C5抑制剂的有效性，并为显示对C5抑制剂次优反应的患有PNH的受试者提供了其他的治疗选择。确定残余血管内溶血的存在是本领域众所周知的。例如，遭受残余或复发性血管内溶血的PNH受试者可能具有随时间升高的LDH水平，例如LDH大于或等于1.5×ULN(正常的上限)。同样地，具有残余血管内溶血的PNH受试者的血清中血红蛋白水平可能下降。在一个实施方案中，当接受C5抑制剂的PNH受试者的血清血红蛋白水平低于约7g/dL时，进一步向其施用本文所述的CFD抑制剂。在一个实施方案中，当接受C5抑制剂的PNH受试者的血清血红蛋白水平低于约8g/dL时，进一步向其施用本文所述的CFD抑制剂。在一个实施方案中，当接受C5抑制剂的PNH受试者的血清血红蛋白水平低于约9g/dL时，进一步向其施用本文所述的CFD抑制剂。在一个实施方案中，当接受C5抑制剂的PNH受试者的血清血红蛋白水平低于约10g/dL时，进一步向其施用本文所述的CFD抑制剂。在一个实施方案中，当接受C5抑制剂的PNH受试者的血清血红蛋白水平低于约15g/dL、14g/dL、13g/dL、12g/dL或11g/dL时，进一步向其施用本文所述的CFD抑制剂。在一个替代实施方案中，在约6个月的时间段内以输血方式接受4个单位血液后，向PNH受试者施用CFD抑制剂。在一个实施方案中，如果在用C5抑制剂治疗后受试者的血红蛋白水平低于约10g/dL且LDH水平为约140个单位每升(U/L)至280U/L，则向受试者施用CFD抑制剂。在一个替代实施方案中，如果在用C5抑制剂治疗后受试者的血红蛋白水平低于约15g/dL、14g/dL、13g/dL、12g/dL或11g/dL并且LDH水平为约140个单位/升(U/L)至280U/L，则向受试者施用CFD抑制剂。在一个实施方案中，如果受试者在用C5抑制剂治疗后6个月内具有约4个单位的输血依赖性并且LDH水平为约140个单位/升(U/L)至280U/L，则向受试者施用CFD抑制剂。
在一个替代实施方案中，提供了一种方法，其中向LDH水平高于或等于LDH的1.5xULN(正常的上限)的患有PNH的受试者施用治疗有效量的C5抑制剂，该受试者的LDH水平降低，但是如低血红蛋白水平和/或高输血依赖性所指示，受试者仍然持续贫血，向受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的化合物或其药学上可接受的盐的CFD抑制剂。
测量血红蛋白水平的方法涉及本领域技术人员已知的标准临床化学方案。可商购的血红蛋白测定的一个非限制性实例涉及血红蛋白与Triton和氢氧化钠反应形成在400nm可测量的比色产物。该测定法可以测量0.9mg/dl至200mg/dl的血红蛋白水平。另外，可商购的血红蛋白仪可以通过分光光度分析来测量血红蛋白水平。男性的正常血红蛋白水平为约13.5g/dL至约17.5g/dL，女性为约12.0g/dL至约15.5g/dL。如果患者的血红蛋白水平降至约10.0g/dL以下，则认为该患者贫血。
测量乳酸脱氢酶(LDH)水平的方法涉及本领域技术人员已知的标准临床化学方案。可商购的测定法的一个非限制性实例涉及游离LDH与NAD反应以形成NADH，然后形成的NADH与化学探针相互作用以形成可在450nm处测量的比色产物。该测定法可测量1U/L至100U/L的LDH水平。正常的LDH水平被认为小于约250U/L，而当LDH水平大于250U/L时就被认为是升高了。当大于约500U/L时，LDH水平被认为是高度升高了。
直接Coombs测试是用于检测结合到红细胞表面的抗体或补体蛋白的临床血液测试，这是本领域技术人员已知的。在典型的方案中，采集血液样本并清洗红细胞(RBC)以去除患者自身的血浆。然后将RBC与抗人球蛋白(“Coombs试剂”)一起温育。如果发生RBC的凝集，则直接的Coombs测试为阳性，表明存在结合到RBC表面的抗体或补体蛋白。
通过流式细胞术使用血液测量C3片段的沉积，这对于本领域技术人员而言是已知的。在典型的方案中，从依库丽单抗治疗的PNH患者或健康个体中采集血液样本。通过离心收集红细胞，用PBS洗涤数次，直到上清液保持澄清。在FC缓冲液中稀释反应混合物后，使用FITC偶联的抗C3c、PE偶联的抗CD47和APC偶联的抗CD59通过流式细胞术测量在PNH红细胞膜上的C3片段沉积。通过抗CD47(阳性)和抗CD59(阴性)染色鉴定完整的PNH红细胞和片段化的PNH红细胞。通过抗C3c染色评估C3片段沉积。
本文还提供了治疗患有PNH的受试者的方法，包括向受试者组合施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与C3抑制剂。如下文进一步描述，使用选自式I或式II的CFD抑制剂与补体C3抑制剂的组合还提供了对PNH红细胞溶血的协同抑制。这些协同作用在PNH的治疗中提供了增加的治疗功效，同时减少了治疗功效所必需的抑制剂的量。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂选自坎普他汀或坎普他汀类似物或衍生物。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物4(1MeW)APL-1。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物CP-40。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是坎普他汀类似物Peg-CP-40。4(1MeW)APL-1、CP40/AMY-101和Peg-CP-40描述于Risitano,Ricklin et al.,Peptide inhibitors of C3 activation as anovel strategy of complement inhibition for the treatment of paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,Blood.2014 Mar 27；123(13):2094-101，通过引用并入本文。在一个特定的实施方案中，C3抑制剂是AMY-201(Amyndas Pharmaceuticals)。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是APL-2(Apellis Pharmaceuticals)。在一个具体的实施方案中，C3抑制剂是ATA(金精三羧酸)(Aurin Biotech，美国专利申请公开US20130035392，通过引用并入本文)。
本文还提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，包括向受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与补体因子B抑制剂的组合。通过靶向补体抑制的多种机制，据信式I或式II与B因子抑制剂组合的使用提供提高的对PNH红细胞溶血的抑制，从而在PNH的治疗中增加治疗功效，同时减少治疗功效所必需的抑制剂的量。在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂是LNP023(Novartis)。在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂选自WO2013/192345中描述的抑制剂，其通过引用并入本文。在一个具体的实施方案中，CFB抑制剂是
Figure BDA0002421569820000611
在一个具体的实施方案中，所述CFB抑制剂选自国际申请号PCT/US17/39587中描述的抑制剂，其通过引用并入本文。
在另一方面，本文提供了一种治疗患有PNH的受试者的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的CFD抑制剂与补充组分的泛抑制剂的组合。在一实施方案中，抑制剂是FUT-175。
在特定的实施方案中，化合物1可以每天一次、每天两次或每天三次施用。在一些实施方案中，化合物1可以100mg、150mg或200mg的剂量施用。在一个实施方案中，化合物1以100mg的剂量每天施用3次。在一个实施方案中，化合物1以150mg剂量每天3次施用。在一个实施方案中，化合物1以200mg的剂量每天施用3次。在特定的实施方案中，100mg的化合物1与C5抑制剂组合或交替施用，每天3次。在特定的实施方案中，150mg的化合物1与C5抑制剂组合或交替施用，每天3次。在特定的实施方案中，200mg的化合物1与C5抑制剂组合或交替施用，每天3次。在特定的实施方案中，100mg的化合物1与依库丽单抗组合或交替施用，每天3次。在特定的实施方案中，150mg的化合物1与依库丽单抗组合或交替施用，每天3次。在特定的实施方案中，200mg的化合物1与依库丽单抗组合或交替施用，每天3次。
药物组合物和剂型
本文所述的CFD抑制剂或其盐、等渗类似物或前药可以以有效量施用于宿主，以使用任何可获得所需治疗结果的合适方法来治疗本文所述的任何疾病。所施用的活性化合物的量和时间当然取决于所治疗的宿主、监督医学专家的指导、暴露的时间进程、施用方式、具体活性化合物的药代动力学特性和处方医师的判断。因此，由于宿主之间的差异，下面给出的剂量是一个指导原则，医师可以滴定该化合物的剂量，以获得医师认为适合宿主的治疗。在考虑所需的治疗程度时，医师可以平衡各种因素，例如宿主的年龄和体重、既往疾病的存在以及其他疾病的存在。
药物组合物可以配制成任何药学上有用的形式，例如气雾剂、乳膏、凝胶、丸剂、注射或输注溶液、胶囊、片剂、糖浆、透皮贴剂、皮下贴剂、干粉、吸入制剂、在医疗设备中、栓剂、口腔或舌下制剂、肠胃外制剂或眼药水。将某些剂型(例如片剂和胶囊剂)细分为适当尺寸的单位剂量，其包含适当量的活性成分，例如达到所需目的的有效量。
本文所述的任何活性化合物的治疗有效剂量将由卫生保健从业者根据受试者的状况、体型和年龄以及递送途径来确定。在一个非限制性实施方案中，约0.1mg/kg至约200mg/kg的剂量具有治疗功效，其中所有重量均基于活性化合物的重量计算，包括使用盐的情况。在一个实施方案中，剂量为约或大于0.1mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg、125mg/kg、150mg/kg、175mg/kg或200mg/kg。在一些实施方案中，所述剂量可以是提供高达约10nM、50nM、100nM、200nM、300nM、400nM、500nM、600nM、700nM、800nM、900nM、1μM、5μM、10μM、20μM、30μM或40μM的活性化合物的血清浓度所需的化合物的量。
在某些实施方案中，药物组合物为单位剂型，包含约0.1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg或约200mg至约600mg活性化合物和任选地约0.1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg或约200mg至约600mg单位剂型的其他活性剂。实例包括具有至少5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、50mg、100mg、200mg、250mg、300mg、400mg、500mg、600mg、700mg或750mg活性化合物或其盐的剂型。药物组合物还可包含达到期望结果的摩尔比的活性化合物和其他活性剂。
本文公开的或如本文所述使用的化合物可以以含有常规药学上可接受的载体的剂量单位制剂经口、局部、肠胃外、通过吸入或喷雾、经舌下、经植入物(包括眼用植入物)、经皮、经颊施用、经直肠、作为眼药水、注射剂(包括经眼注射剂)、静脉内、肌内、吸入、主动脉内、颅内、皮下、腹膜内、皮下、经鼻、舌下或直肠或其他方式施用。对于眼部递送，化合物可以根据需要例如通过玻璃体内、基质内、前房内、腱下、视网膜下、球后、球周、眼上、结膜、结膜下、巩膜上、眼周、经巩膜、球后、眼后巩膜、角膜周或泪管注射，或通过粘液、粘蛋白或粘膜屏障施用，以即释或控释方式或通过眼部装置施用。
根据目前公开的方法，口服施用可以是任何期望的形式，例如固体、凝胶或液体，包括溶液、悬浮液或乳液。在一些实施方案中，化合物或盐作为脂质体悬浮液通过吸入、静脉内或肌内施用。当通过吸入施用时，活性化合物或盐可以是具有任何所需粒径的多个固体颗粒或液滴的形式，例如，约0.01μm、0.1μm或0.5μm至约5μm、10μm、20μm或更大的微米，任选地为约1μm至约2μm。例如，当通过口服或静脉内途径施用时，本发明中公开的化合物已显示出良好的药代动力学和药效学性质。
药物制剂可以在任何药学上可接受的载体中包含本文所述的活性化合物或其药学上可接受的盐。如果需要溶液，则水有时可能是为水溶性化合物或盐选择的载体。关于水溶性化合物或盐，有机媒介物，诸如甘油、丙二醇、聚乙二醇或其混合物，可能是合适的。在后一种情况下，有机媒介物可以包含大量的水。然后可以以本领域技术人员已知的合适方式将任一情况下的溶液灭菌，并通过0.22μm过滤器过滤进行说明。灭菌后，可将溶液分配到适当的容器中，例如去热原的玻璃小瓶。分配任选地通过无菌方法完成。然后可以将灭菌的瓶盖放在小瓶上，并且如果需要，可以冻干小瓶中的内容物。
载体包括赋形剂和稀释剂，并且必须具有足够高的纯度和足够低的毒性，以使其适于施用于所治疗的受试者。载体可以是惰性的，也可以具有自身的药用价值。与化合物结合使用的载体的量足以为施用每单位剂量化合物提供实际量的材料。
载体的种类包括但不限于粘合剂、缓冲剂、着色剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂、调味剂、助流剂、润滑剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂、压片剂和湿润剂。一些载体可能被列为一种以上的类别，例如，植物油在某些配方中可用作润滑剂，而在其它配方中可用作稀释剂。示例性的药学上可接受的载体包括糖、淀粉、纤维素、黄芪粉、麦芽、明胶；滑石粉和植物油。药物组合物中可以包含任选的活性剂，其基本上不干扰本发明化合物的活性。
另外，在这类媒介物中可以存在辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂、生物缓冲物质、表面活性剂等。生物缓冲液可以是任何药理学可接受的溶液，并且可以为制剂提供所需的pH，即生理上可接受的范围内的pH。缓冲溶液的实例包括盐水、磷酸盐缓冲盐水、Tris缓冲盐水、Hank氏缓冲盐水等。
取决于预期的施用方式，药物组合物可以是固体、半固体或液体剂型的形式，诸如例如片剂、栓剂、丸剂、胶囊剂、散剂、液体剂、混悬剂、乳膏剂、软膏剂、洗剂等，优选为适合单次施用精确剂量的单位剂型。该组合物将包括有效量的所选药物与药学上可接受的载体的组合，并且此外可以包括其他药剂、佐剂、稀释剂、缓冲剂等。
因此，本公开的组合物可以以药物制剂的形式施用，药物制剂包括适合于口服(包括颊和舌下)、直肠、鼻、局部、肺、阴道或肠胃外(包括肌肉内、动脉内、鞘内、皮下和静脉内)施用，或以适合通过吸入或吹入法施用的形式。优选的施用方式是静脉内或口服，采用方便的每日剂量方案，该方案可以根据患病程度进行调整。
对于固体组合物，常规的无毒固体载体包括，例如，药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石粉、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。可以例如通过将本文所述的活性化合物和任选的药物佐剂溶解、分散等在赋形剂中来制备液体药学上可施用的组合物，赋形剂诸如例如水、盐水、右旋糖水溶液、甘油、乙醇等，从而形成溶液或悬浮液。如果需要，要施用的药物组合物还可以包含少量的无毒辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等，例如乙酸钠、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸酯等。制备这种剂型的实际方法对本领域技术人员是已知的或显而易见的；例如参见上面引用的Remington's Pharmaceutical Sciences(雷明顿制药科学)。
在又一个实施方案中使用渗透增强剂赋形剂，所述赋形剂包括聚合物，诸如：聚阳离子(壳聚糖及其季铵衍生物，聚-L-精氨酸，胺化明胶)；聚阴离子(N-羧甲基壳聚糖，聚丙烯酸)；和硫醇化聚合物(羧甲基纤维素-半胱氨酸，聚卡波非-半胱氨酸，壳聚糖-硫代丁基胺，壳聚糖-巯基乙酸，壳聚糖-谷胱甘肽偶联物)。
对于口服施用，组合物通常将采取片剂、胶囊剂、软胶囊剂的形式，或者可以是水溶液或非水溶液、悬浮液或糖浆剂。片剂和胶囊剂是优选的口服施用形式。口服的片剂和胶囊剂可以包括一种或多种常用的载体，诸如乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，诸如硬脂酸镁。通常，本公开的组合物可以与口服、无毒、药学上可接受的惰性载体组合，载体诸如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸氢钙、硫酸钙、甘露醇、山梨糖醇等。此外，当需要或必要时，也可以将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖诸如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶诸如阿拉伯胶、黄芪胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
当使用液体悬浮液时，可以将活性剂与任何口服的、无毒的、药学上可接受的惰性载体诸如乙醇、甘油、水等组合，以及与乳化剂和悬浮剂组合。如果需要，也可以添加调味剂、着色剂和/或甜味剂。用于掺入本文口服制剂的其他任选组分包括但不限于防腐剂、助悬剂、增稠剂等。
肠胃外制剂可以常规形式制备，例如液体溶液或悬浮液，适合于在注射前溶解或悬浮在液体中的固体形式，或乳液。优选地，根据本领域已知的技术，使用合适的载体、分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制无菌的可注射悬浮液。无菌注射制剂也可以是无菌注射溶液或在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的悬浮液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂是水、Ringer氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发油、脂肪酯或多元醇通常用作溶剂或悬浮介质。另外，肠胃外施用可涉及使用缓慢释放或持续释放系统，从而维持恒定的剂量水平。
肠胃外施用包括关节内、静脉内、肌内、真皮内、腹膜内和皮下途径，并且包括含有可以使制剂与预期的接受者的血液等渗的抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和溶质的水性和非水性等渗无菌注射溶液，以及可以包括悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂的水性和非水性无菌悬浮液。经由某些肠胃外途径的施用可以涉及通过由无菌注射器或某种其他机械装置诸如连续输注系统推动的针或导管将本公开的制剂引入受试者的体内。可以使用本领域公认的用于肠胃外施用的针筒、注射器、泵或任何其他装置来施用本公开提供的制剂。
除了活性化合物或其盐之外，药物制剂还可包含其他添加剂，诸如pH调节添加剂。特别地，有用的pH调节剂包括酸诸如盐酸，碱或缓冲剂诸如乳酸钠、乙酸钠、磷酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠或葡萄糖酸钠。此外，所述制剂可以含有抗微生物防腐剂。有用的抗微生物防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和苯甲醇。当将制剂置于设计用于多剂量使用的小瓶中时，通常使用抗微生物防腐剂。本文所述的药物制剂可以使用本领域众所周知的技术冻干。
对于口服施用，药物组合物可以采取溶液悬浮液、片剂、丸剂、胶囊剂、散剂等形式。含有各种赋形剂(诸如柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸钙)的片剂可以与各种崩解剂诸如淀粉(例如土豆或木薯淀粉)和某些络合硅酸盐以及粘合剂(诸如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯胶)一起使用。另外，润滑剂诸如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石粉通常对于压片目的是非常有用的。相似类型的固体组合物可以用作软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂。在这方面的材料还包括乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。当需要口服施用水性混悬剂和/或酏剂时，可以将本发明公开的主题的化合物与各种甜味剂、调味剂、着色剂、乳化剂和/或助悬剂以及诸如水、乙醇、丙二醇、甘油及其各种类似的组合的稀释剂组合。
在本文公开的主题的另一个实施方案中，提供了在密封容器中以单位剂量形式包含本文所述的活性化合物或其盐的可注射的、稳定的无菌制剂。该化合物或盐以冻干物的形式提供，其能够用合适的药学上可接受的载体重构以形成适于将其注射入宿主的液体制剂。当化合物或盐基本上不溶于水时，可以以足够数量使用足够量的生理上可接受的乳化剂以将化合物或盐乳化在水性载体中。特别有用的乳化剂包括磷脂酰胆碱和卵磷脂。
本文提供的其他实施方案包括本文公开的活性化合物的脂质体制剂。形成脂质体悬浮液的技术在本领域中是众所周知的。当化合物1是水溶性盐时，使用常规脂质体技术，可以将其掺入脂质囊泡中。在这种情况下，由于活性化合物的水溶性，活性化合物可基本上夹带在脂质体的亲水中心或核心内。所使用的脂质层可以具有任何常规组成，并且可以含有胆固醇或可以不含胆固醇。当感兴趣的活性化合物是水不溶性的时，再次采用常规脂质体形成技术，该盐可以基本上夹带在形成脂质体结构的疏水性脂质双层中。在任一种情况下，所产生的脂质体可以例如通过使用标准的超声处理和均质化技术来减小尺寸。可以冻干包含本文公开的活性化合物的脂质体制剂以产生冻干物，其可以用药学上可接受的载体诸如水重构以再生脂质体悬浮液。
还提供了适合通过吸入以气雾剂形式施用的药物制剂。这些制剂包含本文所述的所需化合物或其盐的溶液或悬浮液，或该化合物或盐的多个固体颗粒。可以将所需制剂置于小室中并雾化。可以通过压缩空气或通过超声能实现雾化以形成包含该化合物或盐的多个液滴或固体颗粒。液滴或固体颗粒可以例如具有在约0.5μm至约10μm的范围内的粒径，并且任选地在约0.5μm至约5μm的范围内。在一个实施方案中，固体颗粒通过使用可降解的聚合物提供控释。可以以本领域已知的任何适当方式例如通过微粉化，通过处理该固体化合物或其盐来获得固体颗粒。任选地，固体颗粒或液滴的尺寸可以为约1μm至约2μm。在这方面，可使用商用喷雾器来实现该目的。化合物可以以美国专利号5,628,984中所述的方式经由可吸入颗粒的气雾剂悬浮液施用，该专利的公开内容通过引用整体并入本文。
还提供了药物制剂，其提供了本文所述化合物的控释，包括通过使用可降解的聚合物，如本领域已知的。
实施例
实施例1.通过PNH红细胞的CAP介导的溶血测定评估化合物1与依库丽单抗组合的抑制活性
化合物1和人源化单克隆抗体依库丽单抗的抑制活性经由来自受试者的PNH红细胞的CAP介导的溶血测定评估(描述于实施例3)。独立进行两次PNH红细胞的CAP介导的溶血测定，然后通过Prichard和Shipman的方法进行分析(描述于实施例4)。表2显示了每个实验的CAP活性的抑制。表3显示了每个实验的分析结果以及总结信息。图1A至图1B显示了在Prichard和Shipman的分析方法中使用的三维表面图。
表2.化合物1和依库丽单抗的CAP活性抑制
Figure BDA0002421569820000691
Figure BDA0002421569820000701
a测量的依库丽单抗的浓度，单位为μg/m
表3.经由Prichard和Shipman方法分析化合物1和依库丽单抗的CAP抑制活性
Figure BDA0002421569820000702
如通过Prichard和Shipman的方法所评估的，化合物1和依库丽单抗显示出对CAP活性的强协同抑制作用，这表现为实质性的协同作用(306+57μM*μgmL*％抑制，表2)和在两个独立实验的表面图上观察到的明显且一致的正峰(图1A至图1B)。
实施例2.通过PNH红细胞的CAP介导的溶血测定评估化合物1与坎普他汀组合的抑制活性
化合物1和补体C3抑制剂坎普他汀的抑制活性经由来自受试者的PNH红细胞的CAP介导的溶血测定评估(实施例3中所述)。独立进行两次PNH红细胞的CAP介导的溶血测定，然后通过Prichard和Shipman的方法(描述于实施例4)并通过Chou和Talalay的方法(描述于实施例5)进行分析。表4显示了每个实验的CAP活性的抑制。表5显示了每个实验的分析结果。图2A至图2B显示了在Prichard和Shipman的分析方法中使用的三维表面图。
表4.使用PNH红细胞的CAP介导的溶血测定测量化合物1和坎普他汀对CAP活性的抑制
Figure BDA0002421569820000711
Figure BDA0002421569820000721
表5.化合物1和坎普他汀的CAP抑制活性分析
Figure BDA0002421569820000722
Figure BDA0002421569820000731
如通过Prichard和Shipman的方法所评估的，化合物1和坎普他汀显示出对CAP活性的强协同抑制，表现为实质性的协同作用量(324+2μM2·％抑制，表4)以及在两个独立实验的表面图上观察到的明显且一致的正峰(图2A至图2B)。没有观察到拮抗相互作用。
当用Chou和Talalay的方法分析时，相互作用的特征是协同的。当以50％、75％和90％抑制水平评估时，化合物1和坎普他汀表现出协同相互作用(表4)。具体地，在所有三个固定的组合比率下，在所有三个抑制水平下确定的CI值均落在协同区间内(介于0.7和0.85之间)。
实施例3.来自PNH受试者A的红细胞的CAP介导的溶血测定使用来自PNH受试者A的红细胞和ABO血型相容的血清(NHS-AB，最终测定浓度为20％)的CAP介导的溶血测定进行化合物1与依库丽单抗的组合研究(结果描述于实施例1)和化合物1与坎普他汀的组合研究(结果描述于实施例2中)。PNH受试者的血液学特征如表6所示。
表6.受试者A的特征
Figure BDA0002421569820000732
Figure BDA0002421569820000741
将化合物1和坎普他汀在DMSO中制成15mM储备液。依库丽单抗获得为在缓冲盐溶液中的10mg/mL储备液。来自ABO血型AB型的个体供体的补体保存的正常人血清(NHS)(NHS-AB)购自BioreclamationlVT(Westbury，NY)。从Calement Technology Inc.(Tyler，TX)获得pH 7.3的不含Ca++和Mg++(GVB0)的明胶佛罗那缓冲液(GVB)和100mM MgCl2+100mM EGTA(MgEGTA)。
通过将GVB0和100mM MgEGTA以9：1的比例混合来制备GVB0·MgEGTA。在血液收集的五天内使用PNH红细胞；在测定之前，通过在800×g和4℃下离心3分钟收集细胞，然后将细胞重悬于新鲜的冷GVB0·MgEGTA中，得到密度为5×108个细胞/mL。
对于CAP介导的溶血测定，分别在七点二倍稀释系列中以二甲亚砜(DMSO)中50×最终测定浓度制备化合物1和坎普他汀，并在七点二倍稀释系列中以GVB0·MgEGTA中25×最终测定浓度制备依库丽单抗；为每种测试化合物制备GVB0·MgEGTA、不含化合物的第八份样品。在一式两份的孔中测试化合物1与依库丽单抗或坎普他汀的64种可能的成对组合中的每一种。将适当稀释的化合物1(1μL)、坎普他汀(1μL)和依库丽单抗(2μL)添加到聚丙烯V型底微升板的孔中。将50μL的NHS-AB添加到每个孔中。混合板并在室温下温育5分钟。然后将24μL含化合物的NHS-AB转移至V型底微孔板的一式两份的孔中，每个孔均包含76μLGVB0·MgEGTA。然后向每个孔中添加20μL PNH红细胞，并将板密封、混合并在37℃下温育30分钟，再振摇15分钟。下列对照均一式四份：ACH-0141和依库丽单抗1μL DMSO+120μLGVB0·MgEGTA(代表背景信号)；1μL DMSO+100uL GVB0·MgEGTA+20μL PNH细胞(无血清，代表0％CAP介导的裂解)；1μL DMSO+76μL GVB0·MgEGTA+24μL NHS-AB+20μL PNH细胞(无化合物，代表100％CAP介导的裂解)；1μL DMSO+76μL GVB0·MgEGTA+24μL热灭活的NHS-AB+20μL Er(热灭活的血清，代表0％CAP介导的裂解和血清背景对照)；和1μL DMSO+100μL H2O+20μL PNH细胞(渗透裂解，代表最大裂解)。对于具有坎普他汀的化合物1，包括相似的对照，不同之处在于，使用2μL DMSO而不是1μL。温育后，通过在800×g和4℃下离心3分钟去除PNH细胞，将每孔的100μL上清液转移到平底透明微量滴定板中，并在Molecular DevicesSpectramax Plus读板仪中测量上清液的A405。
虽然大多数PNH受试者的细胞仅在通过轻度酸化活化CAP的血清中显示溶血，但在中性pH值下，受试者A的红细胞在20％ABO血型相容血清中易受CAP介导的溶血影响。分别进行两个独立实验用于评估化合物1分别与依库丽单抗和坎普他汀的成对组合。在没有抑制剂的对照孔中观察到的溶血范围为63％至74％。
化合物1和坎普他汀在组合的测试浓度范围的高端达到了完全抑制，但是在两个实验中，依库丽单抗在其最大测试浓度为400μg/mL时仅获得了34％和38％的抑制。
经由两种方法分析了组合相互作用。因此，可以独立于抑制行为进行的Prichard和Shipman的三维表面绘图方法(描述于实施例4)适用于化合物1与依库丽单抗的组合和化合物1与坎普他汀的组合。Chou和Talalay的中位效应图法(描述于实施例5中)要求每种化合物分别符合标准抑制剂分析要求，因此不适用于化合物1和依库丽单抗的组合，但适用于化合物1和坎普他汀的组合。
实例4.经由Prichard和Shipman的三维表面绘图方法进行的抑制分析
通过Prichard和Shipman的方法分析抑制(Prichard,M.N.and C.Shipman,Jr.AThree-Dimensional Model to Analyze Drug-Drug Interactions.Antiviral Research1990,14:181-205)。使用从MacSynergy II电子表格(University of Alabama，Birmingham，AL)改编的Excel电子表格程序生成和分析每个实验的三维表面图。每个表面图的X轴和Y轴代表两种测试化合物的浓度，Z轴代表所测得的抑制与理论上确定的加和抑制之间的差。对于加和关系，表面图类似于Z＝0处的水平面，而正表面峰表示抑制大于预期值，因此是协同作用，负表面峰表示抑制小于预期值，因此是拮抗作用。
协同作用和拮抗作用量单独计算为分别在Z＝0平面上方和下方的峰的总量。使用95％的置信限度确定量以确保显著性。对于量在-25μM2·％和25μM2·％抑制之间，将化合物归类为加和。对于量在25μM2·％至50μM2·％抑制之间，化合物被认为是略微协同的，对于量在50μM2·％至100μM2·％抑制之间，是中等协同的，而对量大于100μM2·％抑制，是强协同的。类似地，对于-25μM2·％至-50μM2·％抑制之间的量，化合物被认为是略微拮抗的，对于-50μM2·％至-100μM2·％抑制之间的量，是中等拮抗的，而对小于-100μM2·％抑制的量，是强拮抗的。
实施例5.经由Chou和Talalay的中位效应方程分析抑制
通过Chou和Talalay的方法分析抑制(Chou,T.-C.and P.Talalay.Analysis ofCombined Drug Effects:A New Look at a Very Old Problem.TrendsPharmacol.Sci.1983,4:450-454；Chou,T.C.Theoretical basis,experimental design,and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combinationstudies.Pharmacological Reviews 2006,58:621-681)。使用Chou和Talalay的中值效应方程式的分析通过CompuSyn软件(ComboSyn，Inc，Paramus，NJ)进行。使用恒定比例的组合进行每个实验的分析，其中化合物1和第二化合物的比率随着总浓度的变化而保持恒定。在每个实验中分析了三个恒定的比率，大致以两种化合物各自的IC50值之比为中心，上下浮动两倍。在每个恒定比率的组合中，分析被限制在五个总浓度，以两倍的稀释度隔开，并以组合的IC50值为中心，以排除将近0％或100％抑制的极端数据点固有的不准确度。在抑制值分别为50％、75％和90％时确定组合指数(CI)值。对于0.9至1.1之间的CI值，认为相互作用具有加和作用。对于0.85至0.9之间的CI值，认为相互作用是略微协同的，对于0.7至0.85之间的CI值，则是中等协同的，对于0.3至0.7之间的CI，则是协同的，对于0.1至0.3之间的CI，则是强协同的。对于1.1至1.2之间的CI值，认为相互作用是略微拮抗的，对于1.2至1.45之间的CI值，则是中等拮抗的，对于1.45至3.3之间的CI值，则是拮抗的，对于3.3至10之间CI值，则是强拮抗的。
实施例6.化合物1与坎普他汀组合的抑制活性
使用兔红细胞的CAP介导的溶血测定分析化合物1与肽C3抑制剂的组合对CAP活性的抑制活性。通过以下两种分析方法确定该组合是加和的、协同的还是拮抗的：Prichard和Shipman的三维表面绘图方法(描述于实施例4中)和Chou和Talalay的中值效应绘图法(描述于实施例5中)。
CAP介导的溶血试验(描述于实施例9中)独立进行四次，然后通过两种方法进行分析。对每个实验的CAP活性的抑制示于表7，对每个实验的分析结果示于表8。在Prichard和Shipman的分析方法中使用的三维表面图示于图3A至图3D中。
表7.使用CAP介导的溶血测定测量化合物1和坎普他汀的CAP活性抑制
Figure BDA0002421569820000771
Figure BDA0002421569820000781
Figure BDA0002421569820000791
表8.化合物1和坎普他汀的CAP抑制活性分析
Figure BDA0002421569820000792
Figure BDA0002421569820000801
a CI值从总结结果中排除。
如通过Prichard和Shipman的方法所评估的，化合物1和坎普他汀显示出对CAP活性的强烈协同抑制，如通过实质性协同作用量(149±125μM2·％抑制，表8)以及在来自所有四个独立实验的表面图上观察到的明显且一致的正峰所表明的(图3A至图3D)。不希望受限于任何一种理论，尽管在这四个实验中负量的分散且不一致的外观可能是实验假象，但在这四个实验中的拮抗作用量也表明存在轻微的拮抗关系(-27±22μM2·％抑制，表8)。
当通过Chou和Talalay的方法进行分析时，相互作用被表征为加和的(协同作用至轻微拮抗作用)。分析是对四个实验中的三个实验进行的，实验1由于在规定浓度范围内数据点太少而从平均CI值中排除。化合物1和坎普他汀主要表现出加和相互作用，尤其是在50％抑制水平下评估时(在0.0050的摩尔比下，CI＝1.0±0.1，表8)。在75％和90％抑制水平下观察到协同作用。
实施例7.化合物1与抗C5组合的抑制活性
使用CAP Wieslab测定分析化合物1与补体C5的单克隆抗体抑制剂的组合针对CAP活性的抑制活性(描述于实施例10中)。无法使用CAP介导的溶血测定是因为该抗体先前在溶血测定中显示出不足以用于组合实验的活性。通过以下两种分析方法确定该组合是加和的、协同的还是拮抗的：Prichard和Shipman的三维表面绘图方法(描述于实施例4中)和Chou和Talalay的中值效应绘图法(描述于实施例5中)。
CAP Wieslab测定(描述于实施例10中)进行了独立的三次，然后通过两种方法进行分析。对每个实验的CAP活性的抑制示于表9，并且对每个实验的分析结果示于表10。在Prichard和Shipman的分析方法中使用的三维表面图示于图4A至图4C。
表9.使用CAP Wieslab测定测量化合物1和抗C5的CAP活性抑制
Figure BDA0002421569820000811
Figure BDA0002421569820000821
a 抗C5的浓度，单位μg/mL。
表10.化合物1和抗C5的CAP抑制活性的分析
Figure BDA0002421569820000822
Figure BDA0002421569820000831
a 实验1中化合物1与抗C5的摩尔比为0.16、0.32和0.64。
如通过Prichard和Shipman的方法所评估的，化合物1和抗CS显示出对CAP活性的协同抑制，如协同量(81±51μM/g/mL·％抑制，表10)和明显在来自三个实验的表面图上的明显的正峰所示(图4A至图4C)。没有观察到拮抗相互作用。
当通过Chou和Talaly的方法表征时，相互作用被表征为加和的(与加性协同)。化合物1和抗CS主要表现出加和相互作用，尤其是在50％抑制水平下评估时(CI＝0.98±0.05，摩尔比为0.45，表10)。在75％和90％的抑制水平下观察到了加和至协同的相互作用。
实施例8.化合物1与FUT-175组合的抑制活性
使用CAP介导的溶血测定分析化合物1与广谱补体抑制剂FUT-175的组合对CAP活性的抑制活性。通过以下两种分析方法确定该组合是加和的、协同的还是拮抗的：Prichard和Shipman的三维表面绘图方法(描述于实施例4中)和Chou和Talalay的中值效应绘图法(描述于实施例5中)。
CAP介导的溶血测定(描述于实施例9中)独立进行了三次，然后通过两种分析方法进行了分析。对每个实验的CAP活性的抑制示于表11，并且对每个实验的分析结果示于表12。在Prichard和Shipman的分析方法中使用的三维表面图示于图5A至图5C。
表11.使用CAP介导的溶血测定测量的化合物1和FUT-175的CAP活性抑制
Figure BDA0002421569820000841
Figure BDA0002421569820000851
表12.化合物1和FUT-175的CAP抑制活性的分析
Figure BDA0002421569820000852
Figure BDA0002421569820000861
如通过Prichard和Shipman的方法所评估的，化合物1和FUT-175显示出对CAP活性的协同抑制，如协同量(78±40μM2·％抑制，表12)和明显在来自三个实验的表面图的明显的正峰所表明的(图5A至图5C)。通过观察到的拮抗作用量(-47±22μM2·％抑制，表12)也表明了轻微的拮抗作用，尽管不遵循任何一种理论，但分散和不一致的外观可能已经是实验假象。
化合物1和FUT-175通过Chou和Talalay的方法主要表现出加和相互作用，特别是在50％抑制水平下评估时(CI＝1.0±0.1，摩尔比为0.0038，表12)。在75％和90％的抑制水平下观察到协同至轻微拮抗作用。
实施例9.CAP介导的溶血测定
通过1H-NMR、HPLC和质谱对化合物1进行了充分表征。坎普他汀获自TocrisBioscience(Bristol，UK)。对人C5的鼠单克隆抗体，同种型IgG1K，以产品编号A217获自Quidel(San Diego，CA)。FUT-175(nafamostat)获自Calbiochem EMD Millipore(Billerica，MA)。
将化合物1、FUT-175和坎普他汀制成DMSO中的10mM储备液。抗C5(对人C5的鼠单克隆抗体，同种型IgG1K，产品编号A217，得自Quidel，San Diego，CA)获得为在缓冲盐水中的1.1mg/mL储备液。从Complement Technology Inc.(Tyler，TX)获得不含Ca++和Mg++(GVB0)的明胶佛罗那缓冲液(GVB)、100mM MgCl2+100mM EGTA(MgEGTA)、正常人血清(NHS)和5×108/mL兔红细胞(Er)。
通过将GVB0和100mM MgEGTA以9：1的比例混合来制备GVB0·MgEGTA。购买后两周内使用Er细胞；在每次测定之前，通过在800×g和4℃下离心3分钟收集细胞，并用等体积的新鲜冷GVB0·MgEGTA代替缓冲液。
分别在七点二倍稀释系列中以DMSO中100×最终测定浓度制备化合物1和第二测试化合物，为每种测试化合物制备仅含DMSO的第八份样品。在一式两份或一式三份的孔中测试不同浓度下化合物的64种可能组合。将1.2μL的化合物1和第二测试化合物各自以适当的稀释度添加至聚丙烯V型底微量滴定板的孔中。向每个孔中加入50μLGVB0·MgEGTA，然后在GVB0·MgEGTA中添加50μL20％NHS。将板密封，在微量滴定板振荡器上混合，并在37℃下孵育15分钟。然后将20μL Er添加到每个孔中，并且将板密封、混合并在37℃下温育30分钟，并在15分钟下再振摇。以下每个对照一式四份：2.4μL DMSO+120μL GVB0·MgEGTA(代表背景信号)；2.4μL DMSO+100μL GVB0·MgEGTA+20μL Er(无血清，代表0％CAP介导的裂解)；2.4μl DMSO+50μL GVB0·MgEGTA+50μL20％NHS+20μL Er(无化合物，代表100％CAP介导的裂解)；和2.4μl，DMSO+100μl H2O+20μL Er(渗透裂解，代表最大裂解)。
温育后，通过在800×g和4℃下离心3分钟去除Er细胞，将每孔100μL上清液转移到平底透明微量滴定板中，并在Molecular Devices Spectramax Plus读板仪中测量上清液的A405。
实施例10.CAP介导的Wieslab测定
补体系统旁路途径Wieslab试剂盒(COMPL AP330)购自Euro Diagnostica(Malnrt，Sweden)。如制造商所述进行用于CAP介导的TCC生产的Wieslab测定。分别在七点二倍的稀释系列中以DMSO中100×最终测定浓度制备化合物1。在Wieslab试剂盒随附的Diluent AP试剂中，在七点二倍稀释系列以22×最终测定浓度制备抗C5。在一式两份的孔中测试不同浓度下的抑制剂的64种组合的每一种。将适当稀释度的1.25μL化合物1加入微量滴定孔中。将在稀释剂AP中以1/18×稀释的125μL NHS加入每个孔中，然后加入适当稀释度的6μL抗C5并混合。将100μL转移至CAP Wieslab板的孔中。阳性和阴性对照孔一式四份，分别是没有抑制剂和没有血清。将板在37℃下温育60分钟。将孔排空，用洗涤溶液洗涤3次，并与100μL碱性磷酸酶标记的检测抗体在室温下温育30分钟。将孔排空，用洗涤溶液洗涤3次，并与100μL碱性磷酸酶底物在室温下温育30分钟。在Molecular Devices SpectramaxPlus读板仪中测量每个孔中的A405。
实施例11.化合物1对C3片段在兔红细胞上沉积的抑制
兔红细胞、C5耗尽的正常人血清(C5-Dpl NHS)、不含Ca++和Mg++的明胶佛罗那缓冲液(GVB)(GVB0)、100mM MgCl2+100mM EGTA(MgEGTA)获自Complement Technology Inc.(Tyler，TX)。通过将GVB0和100mM MgEGTA以9：1的比例混合来制备GVB0·MgEGTA。FITC缀合的抗C3c抗体(目录号：ab4212)和Alexa
Figure BDA0002421569820000891
647缀合的抗人CD59抗体(目录号：ab187769)购自Abeam(Cambridge，MA)。
为了评估C3片段在兔红细胞上的沉积，在不存在或存在浓度为0.0003μM至10μM的化合物1的情况下，以100μL的体积进行反应，其中该体积含有在GVB0·MgEGTA缓冲液中终浓度为20％的C5耗尽的正常人血清(C5-Dpl NHS)和终密度为5×107/mL的兔红细胞。将反应在37℃下温育15分钟，通过加入终浓度为20mM的EDTA淬灭反应。用FITC缀合的抗C3c抗体以1：200的稀释度对细胞染色，并用BD Accuri C6细胞仪(BD Biosciences，San Jose，CA)通过流式细胞术评估C3片段在兔红细胞表面的沉积。前向和侧向散射参数用于门控完整的红细胞。对照包括用FITC缀合的抗体同位素对照标记的细胞。使用非线性回归分析(PrismSoftware，GraphPad，La Jollla，CA)通过将实验数据(抑制剂浓度增加的C3片段阳性细胞％)与四参数S形剂量反应方程进行曲线拟合，确定每个实验的IC50值。
使用流式细胞仪和识别C3b和iC3b的C3片段的抗C3c抗体，评估在存在或不存在化合物1或坎普他汀的情况下，在与20％的C5耗尽的正常人血清温育后C3片段在兔红细胞上的沉积。化合物1对C3片段沉积的作用的代表性点状图显示在图6A至图6L中，化合物1和坎普他汀的剂量反应曲线如图6M所示。如预期的那样，在不存在血清的情况下，～0％的细胞被抗C3c抗体染色呈阳性，而在有血清的情况下，～100％的细胞被抗C3c抗体染色呈阳性，表明C3片段沉积。此外，加入EDTA可以消除血清中的C3片段沉积，表明补体介导过程的本质。当反应中包括化合物1或坎普他汀时，用抗C3c抗体染色呈阳性的细胞百分比随任一种抑制剂浓度的增加而降低。化合物1的IC50值(0.096±0.021μM)来自两个独立的实验，而坎普他汀的IC50值(1.4μM)来自一个实验(表13)。
表13.C3片段在兔红细胞上沉积的抑制
化合物 IC<sub>50</sub>(μM)
化合物1 0.096±0.021(N＝2)
坎普他汀 1.4(N＝1)
实施例12.化合物1对C3片段在人造PNH细胞上沉积的抑制
正常的人O型红细胞购自BioreclamationlVT(Westbury，NY)。2-氨基-乙基异硫脲溴化铵(AET)购自Sigma Aldrich。C5耗尽的正常人血清(C5-Dpl NHS)、不含Ca++和Mg++的明胶佛罗那缓冲液(GVB)(GVB0)、100mM MgCl2+100mM EGTA(MgEGTA)从获自ComplementTechnology Inc.(Tyler，TX)。通过将GVB0和100mM MgEGTA以9：1的比例混合来制备GVB0·MgEGTA。FITC缀合的抗C3c抗体(目录号：ab4212)和Alexa
Figure BDA0002421569820000901
647缀合的抗人CDS9抗体(目录号：ab 187769)购自Abeam(Cambridge，MA)。
如Sirchia等人(Sirchia,G,S.Ferrone,and F.Mercuriali,The Action of TwoSulfhydryl Compounds on Normal Human Red Cells.Relationship to Red Cells ofParoxysmal Nocturnal Hemoglobinuria.Blood,1965.25:p.502-10)所述，通过与8％的AET溶液(wt/vol)在37℃下反应9分钟，从新鲜的正常人红细胞(O型)制备人造PNH细胞。AET处理后，将人造PNH红细胞离心，吸出上清液，并用磷酸盐缓冲盐水(PBS)彻底洗涤细胞3次，然后再用GVB0缓冲液(pH8.0)洗涤3次。洗涤后，将细胞重新悬浮在GVB0·MgEGTA缓冲液(pH6.4)中至血细胞比容为1×109/mL，并在4℃保持不超过2天。通过用HCl将GVB0·MgEGTA缓冲液的pH调节至6.4来制备GVB0·MgEGTA缓冲液(pH 6.4)。
为了评估C3片段在人造PNH红细胞上的沉积，在不存在或存在浓度范围为0.0003μM至10μM的化合物1的情况下，在100μL体积中进行反应，该体积含有在GVB0·MgEGTA缓冲液中终浓度为32％的酸化C5-Dpl NHS和终密度为5×107/mL的人造PNH红细胞。注意，在将血清与化合物混合之后以及在添加人造PNH红细胞之前发生血清酸化。将反应在37℃下温育30分钟，通过加入终浓度为20mM的EDTA将反应淬灭。用FITC缀合的抗C3c抗体和
Figure BDA0002421569820000913
Figure BDA0002421569820000912
缀合的抗人CD59抗体以1：200的稀释度对细胞染色。用BD Accuri C6细胞仪(BDBiosciences，San Jose，CA)通过流式细胞术评估C3片段在红细胞表面上的沉积。前向和侧向散射参数用于门控完整的红细胞。对照包括用FITC缀合和
Figure BDA0002421569820000914
647缀合的同种型对照染色的细胞。使用非线性回归分析(Prism Software，GraphPad，La Jolla，CA)通过将实验数据(抑制剂浓度增加时C3片段阳性细胞％)与四参数S形剂量反应方程进行曲线拟合，确定每个实验的IC50值。
通过流式细胞术，评估在化合物1或坎普他汀的处理下，用32％的C5耗尽的正常人血清温育后，C3片段在人工PNH细胞上的沉积。
图7A至图7L显示了化合物1和坎普他汀对C3片段沉积的抑制作用的代表性点图，图7M显示了两种抑制剂的剂量反应曲线。如所预测的，在AET处理后，所有红细胞(人造PNH细胞)均为CD59阴性，而未处理的红细胞为CD59阳性(数据未显示)。
如预期的那样，在无血清的情况下，～0％的细胞被抗C3c抗体染色呈阳性，而在有血清的情况下，～27％的细胞被抗C3c抗体染色呈阳性，表明C3片段沉积。此外，加入EDTA可以消除血清中的C3片段沉积，表明补体介导过程的本质。当反应中包含化合物1或坎普他汀时，用抗C3c抗体染色呈阳性的细胞百分比随化合物浓度的增加而降低，显示出对C3片段沉积的抑制作用。化合物1和坎普他汀的IC50值分别为0.027±0.0047μM和2.2±0.031μM。IC50值来自两个独立的实验(表14)。
表14.C3片段在人造PNH细胞上沉积的抑制
Figure BDA0002421569820000911
Figure BDA0002421569820000921
实施例13.在生理条件下抑制C3片段在PNH细胞上的沉积
用化合物1单独和与依库丽单抗组合评估来自PNH受试者A的血清介导的C3片段在红细胞上的沉积。生理条件定义为将血清与抑制剂预温育5分钟，72％ABO血型相容血清、PNH受试者A的5×107/mL红细胞、GVB++缓冲液，37℃下1小时，EDTA终止。离心后从上清液的A405评估溶血。在将反应混合物在FC缓冲液(PBS+15mM EDTA，1％BSA)中稀释后，使用FITC缀合的抗C3c(Abeam Ab4212，1：200)、PE缀合的抗CD47(R&D Systems FAB4670P，1:50)和APC缀合的抗CD59抗体通过流式细胞术评估C3片段在完整细胞和片段化细胞上的沉积(AbeamAb 187769，稀释度为1：200)。在室温下温育30分钟后，将样品在FC缓冲液中稀释至最终1:20，并通过流式细胞术(BD Accuri C6)以Fsc-H>20000的阈值进行检查。通过抗CD47(阳性)和抗CD59(阴性)染色鉴定完整的PNH红细胞和片段化的PNH红细胞。完整细胞和片段化细胞以尺寸相互区分(FSC-A)；通过抗C3c染色评估C3片段沉积。
实施例14.化合物1在对依库丽单抗单一疗法反应不足的患有阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的受试者中的2期开放标签研究
推荐的依库丽单抗用于PNH的剂量方案
对于18岁及以上的患者，依库丽单抗治疗包括：
·前4周每周600mg，然后；
·一周后第五剂量900mg，然后
·此后每2周900mg。
对于小于18岁的患者，根据体重施用依库丽单抗。
Figure BDA0002421569820000922
Figure BDA0002421569820000931
依库丽单抗通过静脉输注在35分钟内施用于成人，经由重力输注、注射器式泵或输液泵在1至4小时内施用于小儿患者。
临床研究中化合物1的剂量方案
化合物1的起始剂量基于组分配。第1组的剂量为100mg，每天3次(TID)。第2组剂量为150mg TID。第3组的剂量为200mg TID。第4组剂量将接受第1至3组确定的最佳剂量。
在24周内，每天口服3次(TID)化合物1，同时患者继续以上述通常剂量和时间表接受依库丽单抗治疗。化合物1在早晨给药，第二剂量约在8小时后，第三剂量在第二剂量后约8小时。在用餐或点心吃完后约15至30分钟服用所有剂量。
这项研究将包括多达12位受试者，他们将接受24周的每日口服治疗，其中按受试者的常规剂量和时间表施用化合物1加静脉施用(IV)依库丽单抗。这之后将是一个长期的扩展阶段。
在以下一个最高剂量水平给药随后的一组受试者之前，每个剂量水平至少需要4周的治疗。前三组将每组包括2名受试者，以确定第四组中其余6名受试者的最佳化合物1剂量。
完成治疗24周后，受试者将进入该研究的长期扩展阶段，接受与24周治疗阶段结束时相同的化合物1剂量加依库丽单抗。
在第1周、第2周、第4周、第8周和第12周，然后每4周，直到第24周，受试者将返回临床进行安全性、PK和其他评估。
研究人群将包括患有RBC输血依赖性贫血(定义为在筛选前12周内接受至少一次RBC输血)和接受稳定剂量的依库丽单抗的成人PNH受试者(在进入前已接受批准或更高剂量的依库丽单抗至少24周，进入后不改变剂量或时间表至少12周)。
首次剂量水平为100mg TID的2名受试者已经完成，并在4周内收集数据。收集的数据包括乳酸脱氢酶(LDH)水平、血红蛋白水平、网织红细胞、PNH红细胞(III型)百分比、C3片段沉积百分比和胆红素水平及其与基线的变化。
乳酸脱氢酶是一种药效学标志物，从第1天、第1周、第2周和第4周抽取的血液中测得(图13A、图13B和表15)。血液中高水平的LDH可能表示溶血。
表15.乳酸脱氢酶水平和从基线的变化
LDH(U/L) 访问 003-001 003-002
观察到的 第1天 357 210
观察到的 第1周 274 158
观察到的 第2周 252 170
观察到的 第4周 271 179
LDH(U/L) 访问 003-001 003-002
CFB 第1天 0 0
CFB 第1周 -83 -52
CFB 第2周 -105 -40
CFB 第4周 -86 -31
游离血红蛋白是一种药效学标志物，从第1天、第1周、第2周和第4周抽取的血液测得(图14A、图14B和表16)。血红蛋白水平低是溶血性贫血的迹象。
表16.血红蛋白水平和从基线的变化
Figure BDA0002421569820000941
Figure BDA0002421569820000951
网织红细胞计数是一种药效学标志物，从第1天，第1周，第2周和第4周抽取的血液测量(图15A、图15B和表17)。网织红细胞计数测量血液样品中未成熟红细胞的数量。患有PNH的人的网织红细胞计数可能升高，因为他们的骨髓正在产生大量新的红细胞。
表17.网织红细胞计数和与基线的变化
网织红细胞(10<sup>9</sup>/L) 访问 003-001 003-002
观察到的 第1天 159 250
观察到的 第1周 120 144
观察到的 第2周 125 165
观察到的 第4周 95 132
网织红细胞(10<sup>9</sup>/L) 访问 003-001 003-002
CFB 第1天 0 0
CFB 第1周 -39 -106
CFB 第2周 -34 -85
CFB 第4周 -64 -118
对PNH III型红细胞的百分比的测量是通过流式细胞术测量的药效学标志物，其提供有关细胞尺寸、形状和细胞类型百分比的信息。该测定确定红细胞表面是否缺失了CD55和CD59。这些蛋白质有助于保护正常细胞免于溶血。PNH III型细胞对补体系统和溶血极为敏感。从在第一天、第二周和第四周抽取的血浆中测量PNH III型细胞百分比(图16A、图16B和表18)。
表18.PNH红细胞(III型)百分比和与基线的变化
Figure BDA0002421569820000952
Figure BDA0002421569820000961
对C3片段沉积百分数的测量是通过在第1天、第2周、第4周收集的受试者血浆样品的流式细胞术测量的药效学标志物(图17A、图17B和表19)。由于红细胞上不存在CD55导致不受控制的C3活化可能导致红细胞的调理，从而导致临床上有意义的血管外溶血。
表19.C3片段沉积百分比和与基线的变化
C3片段沉积(％) 访问 003-001 003-002
观察到的 第1天 2.60 4.20
观察到的 第2周 2.10 1.10
观察到的 第4周 2.10 1.10
C3片段沉积(％) 访问 003-001 003-002
CFB 第1天 0.00 0.00
CFB 第2周 -0.50 -3.10
CFB 第4周 -0.50 -3.10
已经参考本发明的实施方案描述了本说明书。然而，本领域普通技术人员将理解，在不脱离如所附权利要求书所阐述的本发明的范围的情况下，可以进行各种修改和改变。因此，本说明书应被认为是说明性的而不是限制性的，并且所有这样的修改旨在被包括在本发明的范围内。

Claims (64)

1.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者组合施用治疗有效量的补体5(C5)抑制剂和治疗有效量的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中所述CFD抑制剂选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000011
或其药学上可接受的盐；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000012
Figure FDA0002421569810000021
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000031
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000041
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂是依库丽单抗。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂选自：重组人微抗体，coversin，Tesidolumab/LFG316，ARC-1905，RA101348，RA101495，SOBI002，ARC1005，用于C5的SOMAmer，SSL7，MEDI7814，金精三羧酸，金精三羧酸衍生物，RG6107/SKY59，ALXN1210，ALXN5500，TT30，ABP959，抗-C5 siRNA，Erdigna，avacincaptadpegol/
Figure FDA0002421569810000043
SOBI005，ISU305和REGN3918。
7.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000042
或其药学上可接受的盐的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基；
其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者已经或正在接受包括施用补体5(C5)抑制剂的治疗方案；和
其中所述受试者正在经历血管外溶血。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000051
Figure FDA0002421569810000061
9.根据权利要求7所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000062
Figure FDA0002421569810000071
10.根据权利要求7所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000072
11.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂是依库丽单抗。
12.根据权利要求7至10中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂选自：重组人微抗体，coversin，Tesidolumab/LFG316，ARC-1905，RA101348，RA101495，SOBI002，ARC1005，用于C5的SOMAmer，SSL7，MEDI7814，金精三羧酸，金精三羧酸衍生物，RG6107/SKY59，ALXN1210，ALXN5500，TT30，ABP959，抗-C5 siRNA，Erdigna，avacincaptad pegol/
Figure FDA0002421569810000081
SOBI005，ISU305和REGN3918。
13.根据权利要求7至12中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。
14.根据权利要求7至13中任一项所述的方法，其中所述受试者的LDH水平在正常范围内。
15.根据权利要求7至14中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的LDH水平小于250U/L。
16.根据权利要求7至15中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前的十二个月内所述受试者已经接受了一次或多次输血。
17.根据权利要求7至16中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前，所述受试者已经接受了C5治疗方案至少三个月。
18.根据权利要求7至17中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，还继续施用所述C5抑制剂。
19.根据权利要求7至17中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。
20.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000091
或其药学上可接受的盐的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基；
其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者已经或正在接受包括施用补体5(C5)抑制剂的治疗方案；和其中所述受试者正在经历残余血管内溶血。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000092
Figure FDA0002421569810000101
22.根据权利要求20所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000111
23.根据权利要求20所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000121
24.根据权利要求20至23中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂是依库丽单抗。
25.根据权利要求20至23中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂选自：重组人微抗体，coversin，Tesidolumab/LFG316，ARC-1905，RA101348，RA101495，SOBI002，ARC1005，用于C5的SOMAmer，SSL7，MEDI7814，金精三羧酸，金精三羧酸衍生物，RG6107/SKY59，ALXN1210，ALXN5500，TT30，ABP959，抗-C5 siRNA，Erdigna，avacincaptad pegol/
Figure FDA0002421569810000122
SOBI005，ISU305和REGN3918。
26.根据权利要求20至25中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。
27.根据权利要求20至26中任一项所述的方法，其中所述受试者的LDH水平大于正常的上水平。
28.根据权利要求20至27中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的LDH水平大于250U/L。
29.根据权利要求20至28中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前的十二个月内所述受试者已经接受了一次或多次输血。
30.根据权利要求20至29中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前，所述受试者已经接受了C5治疗方案至少三个月。
31.根据权利要求20至30中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，还继续施用所述C5抑制剂。
32.根据权利要求20至30中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。
33.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000131
或其药学上可接受的盐的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基；
其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者已经或正在接受包括施用补体5(C5)抑制剂的治疗方案；和其中所述受试者的血红蛋白水平小于约10g/dL。
34.根据权利要求33所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000141
Figure FDA0002421569810000151
35.根据权利要求33所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000152
Figure FDA0002421569810000161
36.根据权利要求33所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000162
37.根据权利要求33至36中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂是依库丽单抗。
38.根据权利要求33至36中任一项所述的方法，其中所述C5抑制剂选自：重组人微抗体，coversin，Tesidolumab/LFG316，ARC-1905，RA101348，RA101495，SOBI002，ARC1005，用于C5的SOMAmer，SSL7，MEDI7814，金精三羧酸，金精三羧酸衍生物，RG6107/SKYS9，ALXN1210，ALXNSS00，TT30，ABP959，抗-C5 siRNA，Erdigna，avacincaptad pegol/
Figure FDA0002421569810000163
SOBI005，ISU305和REGN3918。
39.根据权利要求33至38中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的血红蛋白水平小于约8g/dL。
40.根据权利要求33至39中任一项所述的方法，其中所述受试者的LDH水平大于正常的上水平。
41.根据权利要求33至39中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的LDH水平大于约250U/L。
42.根据权利要求33至39中任一项所述的方法，其中所述受试者的LDH水平在正常范围内。
43.根据权利要求33至39中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂时所述受试者的LDH水平小于约250U/L。
44.根据权利要求33至43中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前的十二个月内所述受试者已经接受了一次或多次输血。
45.根据权利要求33至44中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂之前，所述受试者已经接受了C5治疗方案至少三个月。
46.根据权利要求33至45中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，还继续施用所述C5抑制剂。
47.根据权利要求33至45中任一项所述的方法，其中在施用所述CFD抑制剂后，不再施用C5抑制剂。
48.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者组合施用治疗有效量的补体3(C3)抑制剂与治疗有效量的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中所述CFD抑制剂选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000171
或其药学上可接受的盐；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
49.根据权利要求48所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000181
Figure FDA0002421569810000191
50.根据权利要求48所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000192
Figure FDA0002421569810000201
51.根据权利要求48所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000202
52.根据权利要求48至51中任一项所述的方法，其中所述C3抑制剂选自：坎普他汀，4(lMeW)/APL-l，Cp40/AMY-101，PEG-Cp40，4(lMeW)POT-4和AMY-201。
53.根据权利要求48至51中任一项所述的方法，其中所述C3抑制剂选自：H17，mirocept，sCRl，TT32，HC-1496，CB-2782和APL-2。
54.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者组合施用治疗有效量的补体因子B(CFB)抑制剂和治疗有效量的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中所述CFD抑制剂选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000211
或其药学上可接受的盐；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
55.根据权利要求54所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000221
Figure FDA0002421569810000231
56.根据权利要求54所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000232
Figure FDA0002421569810000241
57.根据权利要求54所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000242
58.根据权利要求54至57中任一项所述的方法，其中所述CFB抑制剂选自：抗-FBsiKNA，TA106，LNP106，LNP023，complin和Ionis-FB-LRx。
59.根据权利要求54至57中任一项所述的方法，其中所述CFB抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000243
60.一种在有需要的受试者中治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的方法，所述方法包括向所述受试者组合施用治疗有效量的补体成分的泛抑制剂和治疗有效量的补体因子D(CFD)抑制剂；
其中所述CFD抑制剂选自式I或式II的化合物：
Figure FDA0002421569810000251
或其药学上可接受的盐；
其中：
X选自N和CH；
R1选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R2选自氢和C1-C3烷基；
R3选自氢、C1-C3烷基和卤素；
R4选自氢、C1-C3烷基和卤素；和
R5选自氢、C1-C3烷基、卤素和氰基。
61.根据权利要求60所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000252
Figure FDA0002421569810000261
62.根据权利要求60所述的方法，其中所述CFD抑制剂选自下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000271
63.根据权利要求60所述的方法，其中所述CFD抑制剂是下式的化合物：
Figure FDA0002421569810000281
64.根据权利要求60至64中任一项所述的方法，其中所述补体成分的泛抑制剂为FUT-175。
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