CN111150887A - 一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了供一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs‑CIP的制备方法，具体为：将壳聚糖溶液与丝素蛋白溶液混合，加入包载盐酸环丙沙星的壳聚糖载药微球CMs‑CIP，混合均匀，加入交联剂，冷藏过夜后冷冻干燥，即得所述抗菌复合支架CS/SF/CMs‑CIP。该抗菌复合支架是一种治疗海水浸泡伤的优越材料；其呈均匀的多孔网状结构，能吸收伤口渗出液，使伤口保持合适的水分环境，增加伤口与外界氧气的接触面积，促进伤口愈；其还可缓释CIP，避免了爆释引起的副作用，且释放出的CIP具有广谱抗菌性，能抵御伤口感染。

Description

一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP 及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医学工程材料技术领域，尤其涉及一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP及其制备方法。
背景技术
皮肤作为人体最大的器官，可以抵御紫外线照射、化学物质腐蚀和外来生物入侵。但是，皮肤一旦遭受创伤和烧伤往往会导致组织坏死，破坏防御功能，再加上伤口感染，不仅会阻碍伤口愈合还会使伤口恶化。海上作业人员受伤后，其伤口会经常受到海水浸泡，由于海水的温度低，钠含量高，渗透压高，微生物数量多，因此会使伤口加重。严重的伤口感染与细菌血症和脓毒症的发生有关，甚至可能导致全身的炎症反应。传统的医用支架对海水浸泡伤的治疗效果不佳。而且，目前对于海水浸泡伤的防治研究较少。
用于海战伤的理想创面支架应具有良好的吸水性，可以有效地吸收伤口的渗出液，减少渗液对健康组织的浸润，起到保护周围组织的作用，这就要求支架基质不仅具有良好的生物相容性，还应是疏松多孔的。另外，所制备的支架还要具备抗菌性能，以抵御伤口的细菌感染。近些年来，也有学者研制出一些组织工程支架用于海水浸泡伤的治疗，但也存在一些缺陷。例如(Shen X R,Chen X L,Xie H X,et al.Beneficial effects of a novelshark-skin collagen dressing for the promotion of seawater immersion woundhealing[J].Military Medical Research,2017,4(1):33.)报道的将鲨鱼皮肤胶原蛋白海绵附着于抗海水浸泡的聚氨酯(SSCS+PU)的敷料在促进创面愈合和抗海水浸泡方面具有显著的作用，但其抗菌性能尚未得到证实。还有(Xie H,Chen X,Shen X,et al.Preparationof chitosan-collagen-alginate composite dressing and its promoting effects onwound healing[J].International journal of biological macromolecules,2018,107:93-104)报道的具有防止海水浸泡作用的复合敷料：胶原蛋白-壳聚糖-海藻酸盐(CCA)具有良好的吸水性能和力学性能，但也未设法实现该复合辅料的抗菌性。
盐酸环丙沙星(CIP)是一种广谱杀菌剂，能作用于细菌DNA螺旋酶的a亚基，抑制DNA的合成和复制，导致细菌死亡。因此CIP被加载到支架中来实现其抗菌性能。载体与抗生素的物理结合可以起到抗菌作用，但容易引起药物在体内的爆释放和引发炎症反应，造成器官损伤。为了避免这种情况，研究人员倾向于使用微球给药来达到药物缓释的效果。当药物嵌入到微球中，可以降低药物的毒性和副作用，提高生物利用度，达到理想的药物释放效果。
随着组织工程支架的快速发展，天然高分子材料具有重要的临床应用价值。壳聚糖、丝素蛋白、海藻酸钠、胶原蛋白等近几十年来广泛出现，均具有良好的生物相容性和生物降解性，在治疗皮肤伤口中发挥了重要作用。丝素蛋白(SF)具有独特的分子结构、优良的机械性能、极好的吸湿保湿性和抗微生物的性能。壳聚糖微球(CMs)作为药物载体，能显著延长药物在体内的滞留时间，减少吞噬作用，提高疗效。而壳聚糖(CS)是一种具有抗凝、创面愈合和抗菌活性的医用材料。一般来说，CS/SF生物聚合物体系由于具有良好的生物相容性和较低的成本而具有明显的优势。其多孔的海绵结构一方面有利于细胞的植入和粘附，另一方面有利于营养物质的运输和代谢物的排出。
为构建理想的用于海水浸泡伤的组织工程材料，本发明将载有CIP的壳聚糖微球CMs-CIP与经京尼平交联得到的CS/SF共混制得兼具良好生物相容性、力学性能、药物缓释和抗菌性能的CS/SF/CMs-CIP复合支架。
发明内容
为解决上述现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP及其制备方法。
为实现其目的，本发明采取的技术方案包括以下两方面：
第一方面，本发明提供一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP，其制备方法为：将壳聚糖溶液与丝素蛋白溶液混合，加入包载盐酸环丙沙星的壳聚糖载药微球CMs-CIP，混合均匀，加入交联剂，冷藏过夜后冷冻干燥，即得所述抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP。
本发明以壳聚糖和丝素制备支架基质CS/SF，CS/SF基质呈均匀多孔网状结构，能很好地吸收伤口的渗出液，为伤口保持合适的水分环境，并增加伤口与外界氧气的接触面积，促进伤口愈合。同时，本发明将包载盐酸环丙沙星的壳聚糖载药微球CMs-CIP负载到CS/SF基质中，能赋予支架抗菌性能，并使微球中的药物被缓释释放。本发明的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP兼具良好的生物相容性、力学性能、吸水性、药物缓释性和抗菌性，能有效吸收伤口的渗出液，减少渗出液对健康组织的浸润，还能抵御伤口感染，防止伤口恶化，是一种理想的海战伤创面支架。
优选地，所述壳聚糖溶液与所述丝素蛋白溶液的体积比为1:1。以该体积比的壳聚糖溶液和丝素蛋白溶液制得的CS/SF基质的吸水性能最优。
优选地，所述壳聚糖载药微球CMs-CIP的添加量为5～15mg/mL，最优选为10mg/mL。
优选地，所述交联剂为京尼平水溶液，其添加量为0.01mL/mL。所述京尼平水溶液中，京尼平的含量为70～140mg/mL，优选为100mg/mL。以京尼平交联制备CS/SF支架能有效地提高支架的酶降解稳定性，从而延长支架的使用周期，减少支架的更换次数。
优选地，所述冷藏过夜的温度为-20℃。
优选地，所述壳聚糖溶液的溶剂为醋酸水溶液。
优选地，所述壳聚糖溶液的制备方法为：将2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，即得所述壳聚糖溶液。
优选地，所述丝素蛋白溶液的制备方法为：称取清洗干燥后的蚕茧1.8～2.5g，加入到0.5L氯化钙/乙醇水溶液中溶解，将所得的溶液透析后，在室温下进行离心，所得上清液即为所述丝素蛋白溶液。制得的丝素蛋白溶液保存于4℃的环境中，备用。优选地，所述离心的转速为5000rpm，时间为10min。优选地，所述氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇和无水氯化钙配置而成，配置方法为：将无水氯化钙溶于水中，然后加入无水乙醇，即得所述氯化钙/乙醇水溶液。制备所述丝素蛋白溶液时，若所述氯化钙的浓度较低或温度较低，会使丝素的溶胀作用较弱，溶解速率较低，当氯化钙的浓度进一步提高时，丝素吸附氯化钙时相对缺少水合物，溶剂化作用减弱反使溶解率下降。
优选地，所述蚕茧的清洗、干燥方法为：将3.0～6.0g碳酸氢钠、适量去污剂和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶50～70min，干燥，即可。优选地，所述去污剂为十二烷基硫酸钠。
第二方面，本发明提供一种所述壳聚糖载药微球CMs-CIP的制备方法，其包括如下步骤：
S1：将壳聚糖和盐酸环丙沙星溶于醋酸水溶液中，制成壳聚糖和盐酸环丙沙星的混合溶液；
S2：向上述混合溶液中加入液体石蜡和司班-20，惰性气体保护下乳化；
S3：搅拌下，加入质量分数为3.7％的甲醛，反应1h后，加入质量分数为37％的甲醛，反应1h；
S4：反应结束后，通入氨气固化10～35min，然后在40～60℃下水浴搅拌30min；
S5：依次用石油醚、丙酮和无水乙醇超声洗涤，最后将无水乙醇中的产物离心；
S6：将离心后的沉淀物用去离子水浸泡并于4℃环境下放置过夜；
S7：将浸泡后的沉淀物冷冻干燥，即得所述壳聚糖载药微球CMs-CIP。
本发明方法制备的所述壳聚糖载药微球CMs-CIP的粒径均匀，能较好地嵌入到壳聚糖/丝素蛋白(CS/SF)支架中。所述壳聚糖载药微球CMs-CIP在水环境中容易水化，不能有效缓释CIP。而本发明将所述壳聚糖载药微球CMs-CIP嵌入到CS/SF基质中后，能有效缓释CIP，避免了CIP爆释。
优选地，所述步骤S1中，制备所述混合溶液时，壳聚糖、盐酸环丙沙星和醋酸水溶液的配比为，壳聚糖:盐酸环丙沙星:醋酸水溶液＝100mg：10mg：1mL，所述醋酸水溶液的质量分数为3％。
优选地，所述乳化的转速为500r/min，乳化时间为80～150min，优选为120min。乳化的转速会直接影响乳滴大小，且转速达到一定程度时才能对分散相进行破碎，但转速过大会使乳滴大小不均匀。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP是一种治疗海水浸泡伤的优越材料；首先，其呈均匀的多孔网状结构，可很好地吸收伤口渗出液，使伤口保持合适的水分环境，增加伤口与外界氧气的接触面积，促进伤口愈；其次，其可达到缓释CIP的效果，能有效避免爆释引起的副作用，且释放出的CIP具有广谱抗菌性，能抵御伤口感染。
附图说明
图1为实施例1制备的CMs微球和实施例2制备的CMs-CIP微球的扫描电镜图；
图2为实施例1制备的CMs微球和实施例2制备的CMs-CIP微球的粒径分布图；
图3为实施例3中以不同比例的丝素蛋白/壳聚糖混合溶液制备的CS/SF支架的吸水率；其中，壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液为A(100:0)，B(75:25)，C(50:50)，D(25:75)，E(0:100)；
图4为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架的吸水率；
图5为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架的孔隙率；
图6为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架的机械性能；
图7为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架在有溶菌酶存在条件下的降解率；
图8为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架的细胞存活率测定结果；
图9为实施例5的支架的药物释放曲线；
图10为实施例3(壳聚糖溶液：丝素蛋白溶液＝50:50)、实施例4、实施例5、实施例6和实施例7的支架的抑菌圈实验结果。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，本发明通过下列实施例进一步说明。显然，下列实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。应理解，本发明实施例仅用于说明本发明的技术效果，而非用于限制本发明的保护范围。
本发明实施例提供一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP的制备方法，具体步骤如下：
(1)称取2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，得到壳聚糖溶液；
(2)将4.5～5.5g碳酸氢钠、适量的十二烷基硫酸钠和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶50～70min；称取清洗干燥后的蚕茧1.8～2.5g溶于0.5L氯化钙/乙醇水溶液中，制备丝素蛋白溶液；氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇、无水氯化钙配置而成；将丝素蛋白溶液透析后在室温条件下以5000rpm离心10min，取上清液，得到浓度约为3.5％的丝素蛋白溶液，保存于4℃的环境中，备用；
(3)将步骤(1)的壳聚糖溶液和步骤(2)的丝素蛋白溶液按1:1的比例混合，按8～12mg/mL的添加量加入壳聚糖载药微球(CMs-CIP)，混合均匀，随后加入1mL京尼平水溶液(京尼平含量为70～140mg/mL)；
(4)放入-20℃冰箱中过夜，冷冻干燥即得所述抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP。
所述壳聚糖载药微球(CMs-CIP)的制备方法，包括如下步骤：
S1：将1g壳聚糖和100mg盐酸环丙沙星溶于10mL质量分数为3％的醋酸水溶液中，制成壳聚糖和盐酸环丙沙星的混合溶液；
S2：向上述混合溶液中加入一定量的液体石蜡和1.7～2.2g司班-20，氮气保护下，以500r/min乳化80～150min；
S3：搅拌下，加入12～16mL质量分数为3.7％的甲醛，反应1h后，加入一定量质量分数为37％的甲醛，反应1h；
S4：反应结束后，通入氨气固化10～35min，然后在40～60℃下水浴搅拌30min；
S5：依次用石油醚、丙酮和无水乙醇超声洗涤数次，最后将无水乙醇中的产物离心；
S6：将离心后的沉淀物用适量去离子水浸泡并置于4℃冰箱中过夜；
S7：将浸泡后的沉淀物冷冻干燥，即得所述壳聚糖载药微球(CMs-CIP)。
实施例1～7采用的实验方法：
(1)吸水性
用天平称量支架的重量，记为Mo，将支架置于PBS(10mmol/L，pH＝7.4)溶液中，30min后快速用滤纸吸去表面的水分，称重记录样品质量为Mw。每个样品平行做三次实验，求其平均值，样品吸水率X按照下列公式计算：
Figure BDA0002352732500000071
其中，Mo为干支架的重量(g)；Mw为吸水后支架的重量(g)；X为支架的吸水率(％)。
(2)孔隙率
用介质饱和法测定样品的孔隙率，用天平称量支架的重量，记为W1，将支架浸泡于无水乙醇中，至样品吸附饱和后，两面附以滤纸一定压力吸收30s后，迅速称重记为W2，每个样品平行做三次实验，求其平均值，样品孔隙率P按照下列公式计算：
Figure BDA0002352732500000072
其中，ρ为无水乙醇的密度，0.79g/cm3；V为待测支架的体积，cm3。
(3)体外降解
对支架的降解行为进行了监测。初始称重支架(W0)浸泡在PBS或含10000U/mL溶菌酶的PBS溶液中，置于恒温摇床(37℃，70rpm)。在测量的时间点，去除水凝胶并称重(Wt)。并分别于3、7、14、21、28天分别取出样品，超纯水清洗，冻干称重。并在特定的时间点对支架进行扫描电镜观察支架形貌，采用下列公式计算出支架的体外降解率：
降解率(％)＝(Wo-Wt)/Wo×100％
(4)支架体外药物释放
将支架沉浸在20mL的PBS缓冲溶液中，密封后置于37℃、100rpm的恒温摇床中模拟体外释放。在指定的时间点取出100μL释放液，同时补加100μL同温度的新鲜的PBS溶液。采用直接紫外光谱法分别测定释放液中CIP含量，计算药物累计释放量。
第n个时间点时药物的累计释放量的计算公式为：
m＝(c1+c2+c3+…+cn-1)v+mn
c为不同时间点的药物浓度，v为每个时间点的取样体积，mn为第n个时间点溶液中药物总质量。
(5)细胞存活率：采用CCK8定量分析支架表面细胞的存活率。在指定的时间间隔取出相应的孔板，每孔加100μL CCK8工作液，在37℃恒温二氧化碳培养箱(含5％的CO2)中孵育1～2h后，用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD)。
(6)抑菌圈试验
将支架(直径8mm)的圆型试样，在超净工作台紫外照射30min灭菌。在固体LB培养基上滴取100μL上述菌悬液，用涂布棒均匀涂布贴上待测样品，正置15min后将培养皿放置于37℃生化培养箱中倒置培养。培养24h后取出观察培养基上的细菌生长情况并记录抑菌圈直径(D)。
实施例1：壳聚糖微球(CMs)的制备
(1)称取1g壳聚糖，溶解于10mL质量分数为3％的醋酸水溶液中，制备壳聚糖溶液；
(2)将一定量的液体石蜡和2g司班-20加入上述壳聚糖溶液中，氮气保护下，以500r/min乳化90min；
(3)搅拌条件下，向上述乳化液中加入14mL质量分数为3.7％的甲醛，反应1h后，再加入一定量质量分数为37％的甲醛，反应1h；
(4)反应结束后，通入氨气固化25min，然后55℃水浴搅拌30min；
(5)反应结束后，依次用石油醚、丙酮和无水乙醇超声洗涤数次，最后将无水乙醇中的产物离心；
(6)将离心后的沉淀物用适量去离子水浸泡，并置于4℃冰箱中过夜；
(7)将浸泡后的沉淀物冷冻干燥，得到所述壳聚糖微球(CMs)。
从图1可看出，壳聚糖微球CMs呈球形，粒径均匀。从图2可看出，CMs的平均水动力直径为29.53μm。
实施例2：壳聚糖载药微球(CMs-CIP)的制备
(1)将1g壳聚糖和100mg盐酸环丙沙星溶于10mL质量分数为3％的醋酸水溶液中，制成壳聚糖和盐酸环丙沙星的混合溶液；
(2)将一定量的液体石蜡和2g司班-20加入上述混合溶液中，氮气保护下，以500r/min乳化90min；
(3)搅拌下，加入14mL质量分数为3.7％的甲醛，反应1h后，再加入一定量质量分数为37％的甲醛，反应1h；
(4)反应结束后，通入氨气固化25min，然后55℃水浴搅拌30min；
(5)反应结束后，依次用石油醚、丙酮和无水乙醇超声洗涤数次，最后将无水乙醇中的产物离心；
(6)将离心后的沉淀物用适量去离子水浸泡，并置于4℃冰箱中过夜；
(7)将浸泡后的沉淀物冷冻干燥，得到所述壳聚糖载药微球(CMs-CIP)。
从图1可看出，壳聚糖载药微球CMs-CIP呈球形，粒径均匀，同时CMs-CIP的表面比较粗糙。从图2可看出，CMs-CIP的平均水动力直径为82.50μm。表明，CIP的加入可能会改变CMs-CIP中丝素蛋白的亲疏水性能。此外，CIP还会增加微球的亲水性和丝素蛋白的分子间距离。作为一种水溶性抗生素，CMs-CIP在水环境中发生了水膨胀，微球容易水化。
实施例3：壳聚糖/丝素蛋白(CS/SF)支架的制备
(1)称取2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，得到壳聚糖溶液；
(2)称取5g碳酸氢钠、适量的十二烷基硫酸钠和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶60min；称取清洗干燥后的蚕茧2g溶于0.5L氯化钙/乙醇水溶液中，制备丝素蛋白溶液；氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇、无水氯化钙配置而成；将丝素蛋白溶液透析后在室温条件下以5000rpm离心10min，取上清液，得到丝素蛋白溶液，保存于4℃的环境中，备用；
(3)将步骤(1)的壳聚糖溶液和步骤(2)的丝素蛋白溶液按100:0，75:25，50:50，25:75，0:100的比例进行混合，得到不同比例的丝素蛋白/壳聚糖混合溶液；
(4)分别将1mL京尼平水溶液(京尼平含量为100mg/mL)加入上述丝素蛋白/壳聚糖混合溶液中，分别取400μL均匀的液体转入48孔板，常温放置交联12h后，放入4℃冰箱中缓慢预冻和静止脱泡；
(5)将48孔板放入-20℃冰箱中过夜，最后将48孔板放入冷冻干燥机，24h后取出，即得到CS/SF支架。
从图3可看出，不同比例的丝素蛋白/壳聚糖混合溶液制备的CS/SF支架的吸水率不同，CS:SF＝50:50的CS/SF支架的吸水率比其它组高。因此，选用CS:SF＝50:50比列作为下一步试验的最佳浓度。
从图4可看出，CS/SF支架(CS:SF＝50:50)的吸水率的测试结果为2179.63±16.19％，证明了材料具有良好的吸水性。
从图5可看出，CS/SF支架(CS:SF＝50:50)的孔隙率为80.12±3.113％，是具有较好功能性的支架。作为组织支架而言，这种高孔隙率的性质有助于吸收伤口表面大量的渗出液，此外，表面多孔的结构也有助于营养物质的分散，使细胞更好地生长，促进伤口愈合。
从图6可看出，CS/SF支架(CS:SF＝50:50)的抗拉强度范围为0.8～1.4MPa，适用于伤口护理上的应用。另外，CS/SF支架的断裂伸长率比较高，断裂伸长率表示材料的柔韧性，CS/SF支架在断口处的伸长率在5％～15％之间，可以保护伤口免受外部的碰撞。由此可见，CS/SF支架有比较好的抗断裂强度和柔韧性，适合于敷料的临床应用。
采用溶菌酶水解法研究了支架的生物降解，降解速率如图7所示。从图7可看出，CS/SF支架于28天之内在pH＝7.4，T＝37℃的PBS溶液混合10000U/mL溶菌酶中的降解速率。CS/SF支架的重量随着孵育时间的增加而逐渐减少。同时，CS/SF支架的抗酶解性能提高，两周内仍有59％未完全降解。从以上结果可知，采用京尼平交联方法制备CS/SF支架能有效地提高支架的酶降解稳定性，从而延长支架的使用周期，减少支架的更换次数。本实验进一步采用CCK8法定量检测细胞活力和增殖率。如图8所示，CS/SF支架的细胞存活率与对照组相差无几，证明CS/SF支架具有良好的生物相容性，有利于小鼠成纤维细胞L929细胞的生长和增殖。支架的抗菌性能通过抑菌圈实验测定，从图10可知CS/SF支架对所有的细菌均没有明显的抑菌圈，这可能是因为壳聚糖自身抗菌能力较弱导致的。
实施例4：壳聚糖/丝素蛋白/壳聚糖微球复合支架(CS/SF/CMs)的制备
(1)称取2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，得到壳聚糖溶液；
(2)称取5g碳酸氢钠、适量的十二烷基硫酸钠和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶60min；称取清洗干燥后的蚕茧2g溶于0.5L氯化钙/乙醇水溶液中，制备丝素蛋白溶液；氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇、无水氯化钙配置而成；将丝素蛋白溶液透析后在室温条件下以5000rpm离心10min，取上清液，得到丝素蛋白溶液，保存于4℃的环境中，备用；
(3)将步骤(1)的壳聚糖溶液和步骤(2)的丝素蛋白溶液按50:50的比例进行混合，加入实施例1的壳聚糖微球CMs(10mg/mL)混合均匀，随后加入1mL京尼平水溶液(京尼平含量为100mg/mL)；
(4)取400uL均匀的液体转入48孔板，常温放置交联12h后，放入4℃冰箱中缓慢预冻和静止脱泡；
(5)将48孔板放入-20℃冰箱中过夜，最后将48孔板放入冷冻干燥机，24h后取出，即得到CS/SF/CMs复合支架。
从图4可知，CS/SF/CMs复合支架的吸水率的测试结果为1906.68±97.235％,证明了材料具有良好的吸水性。
从图5可以看出，CS/SF/CMs复合支架的孔隙率为83.09±2.211％，一般情况下，拥有80％～90％的孔隙率的支架被认为是具有较好功能性的支架。作为组织支架而言，这种高孔隙率的性质有助于吸收伤口表面大量的渗出液，此外，表面多孔的结构也有助于营养物质的分散，使细胞更好地生长，促进伤口愈合。
从图6可看出，CS/SF/CMs支架的抗拉强度范围为0.8～1.4MPa，适用于伤口护理上的应用。另外，CS/SF/CMs支架的断裂伸长率在5％～15％之间，可以保护伤口免受外部的碰撞。由此可见，CS/SF/CMs支架有比较好的抗断裂强度和柔韧性，适合于敷料的临床应用。
采用溶菌酶水解法研究了支架的生物降解，降解速率如图7所示，可以观察CS/SF/CMs支架于28天之内在pH＝7.4，T＝37℃的PBS溶液混合10000U/mL溶菌酶中的降解速率。CS/SF/CMs支架的重量随着孵育时间的增加而逐渐减少。同时，CS/SF/CMs支架的抗酶解性能提高，两周内仍有54％未完全降解。从以上结果可知，采用京尼平交联方法制备CS/SF/CMs支架能有效地提高支架的酶降解稳定性，从而延长支架的使用周期，减少支架的更换次数。本实验进一步采用CCK8法定量检测细胞活力和增殖率。
如图8所示，CS/SF/CMs支架的细胞存活率优于对照组，证明本实施例制备的CS/SF/CMs支架具有良好的生物相容性，有利于小鼠成纤维细胞L929细胞的生长和增殖。支架的抗菌性能通过抑菌圈实验测定，从图10可知CS/SF/CMs支架对所有的细菌均没有明显的抑菌圈。
实施例5：抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP的制备
(1)称取2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，得到壳聚糖溶液；
(2)称取5g碳酸氢钠、适量的十二烷基硫酸钠和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶60min；称取清洗干燥后的蚕茧2g溶于0.5L氯化钙/乙醇水溶液中，制备丝素蛋白溶液；氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇、无水氯化钙配置而成；将丝素蛋白溶液透析后在室温条件下以5000rpm离心10min，取上清液，得到丝素蛋白溶液，保存于4℃的环境中，备用；
(3)将步骤(1)的壳聚糖溶液和步骤(2)的丝素蛋白溶液按50:50的比例进行混合，加入实施例2的壳聚糖载药微球CMs-CIP(10mg/mL)混合均匀，随后加入1mL京尼平水溶液(京尼平含量为100mg/mL)；
(4)取400uL均匀的液体转入48孔板，常温放置交联12h后，放入4℃冰箱中缓慢预冻和静止脱泡；
(5)将48孔板放入-20℃冰箱中过夜，最后将48孔板放入冷冻干燥机，24h后取出，即得到CS/SF/CMs-CIP复合支架。
从图4可知，CS/SF/CMs-CIP复合支架的吸水率的测试结果为2248.99±111.897％,证明了材料具有良好的吸水性。
从图5可以看出，CS/SF/CMs-CIP复合支架的孔隙率为87.48±3.716％，一般情况下，拥有80％～90％的孔隙率的支架被认为是具有较好功能性的支架。作为组织支架而言，这种高孔隙率的性质有助于吸收伤口表面大量的渗出液，此外，表面多孔的结构也有助于营养物质的分散，使细胞更好地生长，促进伤口愈合。
从图6可以看出，CS/SF/CMs-CIP支架的抗拉强度范围为0.8～1.4MPa，适用于伤口护理上的应用。另外，CS/SF/CMs-CIP支架的断裂伸长率在5％～15％之间，可以保护伤口免受外部的碰撞。由此可见，CS/SF/CMs-CIP支架有比较好的抗断裂强度和柔韧性，适合于敷料的临床应用。
采用溶菌酶水解法研究了支架的生物降解，降解速率如图7所示，可以观察CS/SF/CMs-CIP支架于28天之内在pH＝7.4，T＝37℃的PBS溶液混合10000U/mL溶菌酶中的降解速率。CS/SF/CMs-CIP支架的重量随着孵育时间的增加而逐渐减少。同时，CS/SF/CMs-CIP支架的抗酶解性能提高，两周内仍有54.8％未完全降解。从以上结果可知，采用京尼平交联方法制备CS/SF/CMs-CIP支架能有效地提高支架的酶降解稳定性，从而延长支架的使用周期，减少支架的更换次数。
本实验进一步采用CCK8法定量检测细胞活力和增殖率。如图8所示，CS/SF/CMs-CIP支架的细胞存活率优于对照组，证明本实施例制备的CS/SF/CMs-CIP支架具有良好的生物相容性。
利用测定药物累计释放浓度的方法在PBS中测定了。CS/SF/CMs-CIP支架的CIP释放曲线，结果如图9所示，药物释放的前16小时内，总CIP的释放量为32.58±2.96％。随后，药物释放率下降，6天后仍有近53.1％的CIP在创面敷料中未释放，这可能是由于交联键更密集，导致CIP释放受阻所致。不过，部分药物未被释放可以赋予支架基质的抗菌能力，防止微生物对伤口的攻击。
支架的抗菌性能通过抑菌圈实验测定，从图10可知，CS/SF/CMs-CIP支架对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌圈直径分别为(33.4±2.03mm)、(35.24±1.31mm)和(39.1±0.71mm)，抑菌性能较优。
实施例6：壳聚糖/壳聚糖载药微球支架(CS/CMs-CIP)的制备
(1)称取2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，得到壳聚糖溶液；
(2)将实施例2的壳聚糖载药微球CMs-CIP(终浓度10mg/mL)加入步骤(1)的壳聚糖溶液中，混合均匀，随后加入1mL京尼平水溶液(京尼平含量为100mg/mL)；
(3)取400uL均匀的液体转入48孔板，常温放置交联12h后，放入4℃冰箱中缓慢预冻和静止脱泡；
(4)将48孔板放入-20℃冰箱中过夜，最后将48孔板放入冷冻干燥机，24h后取出，即得到CS/CMs-CIP支架。
从图4可知，CS/CMs-CIP共混支架的吸水率的测试结果为1734.01±100.411％,证明了材料具有良好的吸水性。
从图5可以看出，CS/CMs-CIP共混支架的孔隙率为66.54±1.98％，表明其孔隙率较差。
从图6可以看出，CS/CMs-CIP支架的抗拉强度范围为0.8～1.4MPa，适用于伤口护理上的应用。另外，CS/CMs-CIP支架的断裂伸长率在5％～15％之间，可以保护伤口免受外部的碰撞。由此可见，CS/CMs-CIP支架有比较好的抗断裂强度和柔韧性，适合于敷料的临床应用。
采用溶菌酶水解法研究了支架的生物降解，降解速率如图7所示，可以观察CS/CMs-CIP支架的重量随着孵育时间的增加而逐渐减少。同时，CS/CMs-CIP支架的抗酶解性能提高，两周内仍有50.4％未完全降解，因此可以减少支架的更换次数。
本实验进一步采用CCK8法定量检测细胞活力和增殖率。如图8所示，CS/CMs-CIP支架的24h细胞存活率与对照组相当，48h细胞存活率优于对照组，证明本实施例制备的CS/CMs-CIP支架具有良好的生物相容性，有利于小鼠成纤维细胞L929细胞的生长和增殖。
支架的抗菌性能通过抑菌圈实验测定，从图10可知CS/CMs-CIP支架敷料对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌圈直径分别为(30.0±3.83mm)、(31.17±1.06mm)和(33.4±2.78mm)。
实施例7：丝素蛋白/壳聚糖载药微球支架(SF/CMs-CIP)的制备
(1)称取5g碳酸氢钠、适量的去污剂和适量剪碎的蚕茧倒入1L去离子水中，沸水浴脱胶60min；称取清洗干燥后的蚕茧2g溶于0.5L氯化钙/乙醇水溶液中，制备丝素蛋白溶液；氯化钙/乙醇水溶液由摩尔比为8∶2∶1的水、无水乙醇、无水氯化钙配置而成；将丝素蛋白溶液透析后在室温条件下以5000rpm离心10min，取上清液，得到丝素蛋白溶液，保存于4℃的环境中，备用；
(2)将实施例2的壳聚糖载药微球CMs-CIP(终浓度10mg/mL)加入步骤(1)的丝素蛋白溶液中，混合均匀，随后加入1mL京尼平水溶液(京尼平含量为100mg/mL)；
(3)取400uL均匀的液体转入48孔板，常温放置交联12h后，放入4℃冰箱中缓慢预冻和静止脱泡；
(4)将48孔板放入-20℃冰箱中过夜，最后将48孔板放入冷冻干燥机，24h后取出，即得到SF/CMs-CIP支架。
从图4可知SF/CMs-CIP共混支架的吸水率的测试结果为2098.23±154.31％,证明了材料具有良好的吸水性。
从图5可以看出，SF/CMs-CIP共混支架的孔隙率为59.35±2.356％，一般情况下，拥有80％～90％的孔隙率的支架被认为是具有较好功能性的支架。
从图6可以看出，SF/CMs-CIP支架的断裂伸长率在5％～15％之间，SF/CMs-CIP支架的抗拉强度不在范围0.8～1.4MPa内。
采用溶菌酶水解法研究了支架的生物降解，降解速率如图7所示，可以观察SF/CMs-CIP支架的重量随着孵育时间的增加而逐渐减少。同时，SF/CMs-CIP支架的抗酶解性能提高，两周内仍有63.3％未完全降解。
本实验进一步采用CCK8法定量检测细胞活力和增殖率。如图8所示，SF/CMs-CIP支架的细胞存活率优于对照组，证明本实施例制备的SF/CMs-CIP支架具有良好的生物相容性，有利于小鼠成纤维细胞L929细胞的生长和增殖。支架的抗菌性能通过抑菌圈实验测定，从图10可知SF/CMs-CIP支架对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌圈直径分别为(29.7±0.773mm)、(29.3±2.99mm)和(34.1±1.33mm)。
通过以上结果分析可知，CS/SF/CMs-CIP的抗菌效果最好，同时也表现出最优的吸水率、孔隙率和机械性能，因此可作为海战伤创面支架。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：将壳聚糖溶液与丝素蛋白溶液混合，加入包载盐酸环丙沙星的壳聚糖载药微球CMs-CIP，混合均匀，加入交联剂，冷藏过夜后冷冻干燥，即得所述抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖溶液与所述丝素蛋白溶液的体积比为1:1。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖载药微球CMs-CIP的添加量为5～15mg/mL。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述交联剂为浓度为70～140mg/mL的京尼平水溶液，其添加量为0.01mL/mL。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖溶液的制备方法为：将2g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的醋酸水溶液中，持续搅拌使其完全溶解，即得所述壳聚糖溶液。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述丝素蛋白溶液的制备方法为：称取清洗干燥后的蚕茧1.8～2.5g，加入到0.5L氯化钙/乙醇水溶液中溶解，将所得的溶液透析后，在室温下进行离心，所得上清液即为所述丝素蛋白溶液；优选地，所述离心的转速为5000rpm，时间为10min。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖载药微球CMs-CIP的制备方法为：
S1：将壳聚糖和盐酸环丙沙星溶于醋酸水溶液中，制成壳聚糖和盐酸环丙沙星的混合溶液；
S2：向上述混合溶液中加入液体石蜡和司班-20，惰性气体保护下乳化；
S3：搅拌下，加入质量分数为3.7％的甲醛，反应1h后，加入质量分数为37％的甲醛，反应1h；
S4：反应结束后，通入氨气固化10～35min，然后在40～60℃下水浴搅拌30min；
S5：依次用石油醚、丙酮和无水乙醇超声洗涤，最后将无水乙醇中的产物离心；
S6：将离心后的沉淀物用去离子水浸泡并于4℃环境下放置过夜；
S7：将浸泡后的沉淀物冷冻干燥，即得所述壳聚糖载药微球CMs-CIP。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，制备所述混合溶液时，壳聚糖、盐酸环丙沙星和醋酸水溶液的配比为，壳聚糖:盐酸环丙沙星:醋酸水溶液＝100mg：10mg：1mL，所述醋酸水溶液的质量分数为3％。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，乳化的转速为500r/min，乳化时间为80～150min。
10.一种促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP，其特征在于，由如权利要求1～9任一项所述的促进海水浸泡创面愈合的抗菌复合支架CS/SF/CMs-CIP的制备方法制得。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115591006A (zh) * 2022-09-14 2023-01-13 苏州大学（Cn） 天然抗菌的茶多酚-丝素/壳聚糖栓塞微球及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101991875A (zh) * 2010-10-29 2011-03-30 上海硅健生物材料有限公司 介孔生物活性玻璃和壳聚糖复合多孔止血材料及制备方法
WO2015003155A1 (en) * 2013-07-03 2015-01-08 The American University In Cairo Bio-compatible apitherapeutic nanofibers
CN106039416A (zh) * 2016-06-27 2016-10-26 华中科技大学同济医学院附属协和医院 壳聚糖—丝胶蛋白复合生物支架及其制备方法和应用
CN108159485A (zh) * 2017-12-28 2018-06-15 广州贝奥吉因生物科技有限公司 一种负载姜黄素/明胶微球复合物的壳聚糖/丝素蛋白支架、其制备方法及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101991875A (zh) * 2010-10-29 2011-03-30 上海硅健生物材料有限公司 介孔生物活性玻璃和壳聚糖复合多孔止血材料及制备方法
WO2015003155A1 (en) * 2013-07-03 2015-01-08 The American University In Cairo Bio-compatible apitherapeutic nanofibers
CN106039416A (zh) * 2016-06-27 2016-10-26 华中科技大学同济医学院附属协和医院 壳聚糖—丝胶蛋白复合生物支架及其制备方法和应用
CN108159485A (zh) * 2017-12-28 2018-06-15 广州贝奥吉因生物科技有限公司 一种负载姜黄素/明胶微球复合物的壳聚糖/丝素蛋白支架、其制备方法及其应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WEN ZENG ET AL: "Incorporation of Chitosan Microspheres into Collagen chitosan scaffolds for the controlled release of nervegrowth factor", 《PLOS ONE》 *
YONG LAN ET AL: "therapeutic efficacy of antibiotic loaded gelatin microsphere silk fibroin scaffolds in infected full thickness burns", 《ACTA BIOMATERIALIA》 *
叶鹏: "缓释左氧氟沙星三维丝素蛋白 壳聚糖 纳米羟基磷灰石复合骨组织工程支架材料的制备与表征", 《中国组织工程研究》 *
张文元: "壳聚糖丝素蛋白与真皮间充质干细胞的体外复合培养", 《中国组织工程研究与临床康复》 *
王珊: "壳聚糖微球对Pb离子的吸附性研究", 《咸阳师范学院学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115591006A (zh) * 2022-09-14 2023-01-13 苏州大学（Cn） 天然抗菌的茶多酚-丝素/壳聚糖栓塞微球及其制备方法

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