CN111122544A - 基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法 - Google Patents
基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法。将玻璃滤纸一端用加热夹夹住,平放在加热板上进行加热,将滤纸另一端浸入纳米粒子溶液与检测分子溶液的混合溶液中,混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹持处时,溶剂遇热挥发,纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干,得到基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底。本发明提供的表面增强拉曼散射基底具有制备简单,成本低,耗时短,灵敏性高,重复性好等优异特性,在实际样品检测方面具有很大的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于纳米技术、表面增强拉曼散射光谱技术领域,具体涉及一种基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法。
背景技术
表面增强拉曼光谱技术(SERS)作为一种分子检测技术,具有检测无损,快速,指纹识别等优异特点,在食品检测、生物传感、环境监测、军事安全等领域具有广泛的应用前景。SERS检测是一个复杂的过程,涉及到等离子体纳米结构、检测分子以及入射激光三者之间的相互作用。在过去的十几年间,众多具有“热点”结构的纳米材料SERS基底已经被合成并用于SERS检测。
在低浓度的溶液中检测出分析物,实现高灵敏检测对于SERS技术来说是十分重要的。然而,在大多数实际检测应用中,高灵敏SERS检测很难实现,其中一个很重要的原因是由于溶液分析物的“扩散极限”,导致检测分子不能够完全分布定位到“热点”区域。因此,在低浓度溶液中富集和定位少量目标分析物到特定的“热点”区域对于高灵敏分子识别和检测至关重要。如何在短时间内浓缩大量分析物溶液并将待测物精确地限制在小尺寸的敏感“热点”区域,仍然是一个巨大的挑战。
在众多SERS基底制备与检测方法中,分子富集方法是一种通过浓缩富集分子将待测物富集定位到“热点”区域的有效方法,可以大大提高SERS检测灵敏性与可重复性。然而,目前分子富集方法主要集中在超疏水表面分子滑移缩聚,此方法需要制备超疏水滑移型衬底,增加了实验周期与实验成本。因此,开发新的分子富集方法对SRES检测具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,通过富集浓缩使检测分子与“热点”区域结合,提高SERS检测的灵敏性与可重复性。
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案是:
一种基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,将玻璃滤纸一端用加热夹夹住,平放在加热板上进行加热,将滤纸另一端浸入纳米粒子溶液与检测分子溶液的混合溶液中,混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹持处时,溶剂遇热挥发,纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干,得到基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底。
本发明进一步的改进在于,纳米粒子为金纳米粒子、金纳米星或金纳米棒。
本发明进一步的改进在于,金纳米粒子溶液通过以下过程制得:
将氯金酸溶液加热到沸腾,然后加入柠檬酸钠溶液,继续加热沸腾至无色变为红色,得到金纳米粒子溶液;
其中,氯金酸溶液的浓度为0.25mmol/L,柠檬酸钠溶液的质量分数为1%,氯金酸溶液的体积为100mL,柠檬酸钠溶液的体积为0.7mL。
本发明进一步的改进在于,纳米粒子溶液与检测分子溶液的体积比为1:(1-5)。
本发明进一步的改进在于,检测分子溶液为结晶紫溶液、西地那非溶液或多菌灵溶液。
本发明进一步的改进在于,纳米粒子溶液与检测分子溶液的溶剂为乙醇、甲醇或乙腈。
本发明进一步的改进在于,滤纸为玻璃滤纸或孔径为100-250μm的亲水聚四氟乙烯滤膜。
本发明进一步的改进在于,夹持处的温度为90-120℃。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
1)本发明能够在短时间内将金纳米粒子与检测分子富集浓缩在一个狭小的区域,金纳米粒子富集浓缩后产生了大量的热点,并且,检测分子与金纳米粒子的同步浓缩能够使检测分子富集到热点区域。大大增加了SERS检测的灵敏性与可重复性。
2)本发明工艺简单,成本低,耗时短,重复性较好。相对于常用的溶液在超疏水表面的富集浓缩方法,此方法不需要制备超疏水滑移衬底,减少了实验周期与实验成本。
附图说明
图1为基于毛细作用与溶剂加热蒸发现象的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法过程示意图。其中,a为示意图,b为实物图,c为混合溶液通过毛细力流动蒸过程发图;
图2为实施例8的浓缩富集金纳米粒子与检测分子的夹痕区域(即夹持处)的SEM图,其中,a为低倍SEM图;b为高倍SEM图。
图3为实施例1-4的不同温度下在玻璃滤纸上浓缩富集金纳米粒子与CV分子的实物图;
图4为实施例8的富集加热区域不同位置示意图及CV拉曼光谱图;其中,a为富集加热区域不同位置示意图,b为图a中富集加热区域横向不同位置的CV拉曼光谱图;c为图a中富集加热区域纵向不同位置的CV拉曼光谱图;
图5为实施例4-8的不同CV溶液用量下的CV拉曼光谱图以及不同CV溶液用量下在1171cm-1与1612cm-1拉曼峰处强度随CV体积变化图,其中,a为CV拉曼光谱图,b为拉曼强度随CV体积变化图。
图6为不同CV浓度的拉曼光谱图;
图7为不同CV浓度的检出几率图;
图8为不同西地那非浓度的拉曼光谱图;
图9为不同多菌灵浓度的拉曼光谱图。
具体实施方式
下面结合附图,对本发明进一步详细说明。
参见图1,本发明的富集型表面增强拉曼散射基底的制备思路为:将滤纸一端夹夹子进行加热,滤纸另一端浸入到待测物溶液里,溶液在滤纸的毛细力作用下流动上升,到达加热处时溶剂蒸发,通过加热截止方法,使得检测分子与金纳米粒子同时停留在狭小的加热区域,起到对检测分子与金纳米粒子同时浓缩富集的作用。具体步骤如下:
步骤1,制备金纳米粒子:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,并搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠溶液,继续加热并沸腾20-30分钟,溶液由无色变为红色,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并将离心所得产物重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
步骤2,将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热。稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子溶液(溶剂为乙醇、甲醇或乙腈)与结晶紫(CV)溶液(溶剂为乙醇、甲醇或乙腈)体积比为1:1-5的混合溶液中,混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干,SERS基底制备完成。
步骤1中所用的滤纸为玻璃滤纸。玻璃滤纸可用其他表面光滑,孔径在100-250μm的亲水聚四氟乙烯滤膜代替。
步骤1中所用的玻璃滤纸为长方形。
加热铁夹可用其他导热夹代替。
金纳米粒子可选择其他具有等离子体效应的金纳米星或金纳米棒等纳米粒子代替。
混合溶液选择的乙醇溶液可用其他易挥发的甲醇、乙腈等溶剂代替。
铁夹加热温度要高于乙醇沸点,最优加热温度为120℃。
步骤2中金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和1mL。
优选的,步骤2中所述的长方形滤纸直径尺寸为5mmol*18mmol。
下列实施例仅用于说明本发明,但并不用来限定本发明的实施范围。
实施例1
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度90℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和1mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例2
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为100℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和1mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例3
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为110℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和1mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例4
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为120℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和1mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热的夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例5
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并将重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为120℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和0.2mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热夹的夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例6
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹痕处的温度为120℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和0.4mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热夹的夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例7
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为120℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和0.6mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热夹的夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例8
1)金纳米粒子的制备:在锥形瓶中加入97.5mL的超纯水和2.5mL 10mmol/L的氯金酸溶液,搅拌加热到110℃,溶液沸腾后,加入0.7mL质量分数为1%的柠檬酸钠,继续加热沸腾30分钟,溶液由无色变为红色,金纳米颗粒形成,得到金纳米粒子胶体溶液,将得到的金纳米粒子胶体溶液离心并重新分散到10mL乙醇中,得到金纳米粒子溶液;
2)将玻璃滤纸剪成长方形,尺寸为5mmol*18mmol。将滤纸一端用小铁夹夹住,平放在加热板上进行加热,使小铁夹的夹持处的温度为120℃。加热稳定3分钟后,将滤纸另一端浸入金纳米粒子与检测分子的混合乙醇溶液中,金纳米粒子溶液与检测分子溶液所用的体积分别为0.2mL和0.8mL。混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹子的夹持处时,乙醇遇热挥发,金纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在加热的夹持处,混合溶液全部蒸干后,SERS基底制备完成。
实施例1-4中的检测分子溶液为结晶紫溶液,并且结晶紫溶液的浓度为1×10- 5mol/L。若是检测其他分子,则可以加入其他检测分子溶液。
图2表明本发明的富集方法可以将金纳米粒子与检测分子同时富集到狭小的夹痕加热区域,富集宽度约为100μm。
图3表明在加热温度为120度时,CV分子会完全停留在加热区域。而加热温度为90-110℃时,会有少量CV分子越过加热富集区域停留在加热区域上方。因此选择加热温度为120℃。
图4表明加热富集区域不同位置的分子富集效果不同。图4中,数字1-7表示夹痕处沿长度方向不同位置,Ⅰ-Ⅲ表示夹痕处沿高度方向不同位置,由于溶液在滤纸上的测流效应以及溶液的加热蒸发速率问题,更多的检测分子会停留在加热富集区域的顶部及两端。因此在拉曼检测时,通过图4中b和c比较,优选图4中a中的位置1或7,即两端位置进行拉曼测试。
图5表明随着CV溶液体积的增多,CV的拉曼信号逐渐增强,呈线性变化。
实施例9
测试检测限,采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,检测溶液的浓度分别为1×10-9mol/L、1×10-11mol/L、1×10-13mol/L、1×10-15mol/L、1×10-16mol/L,检测结果见图6。
图6的拉曼测试结果表明,利用此富集方法,对CV分子的检测限可达到10-16mol/L。
实施例10
测试检测几率,采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,检测溶液的浓度分别为1×10-9mol/L、1×10-11mol/L、1×10-13mol/L、1×10-15mol/L、1×10-16mol/L,检测结果见图7。
参见图7,在检测溶液不同浓度下制备的样品表面数字1和7的位置随机选点进行检测,CV分子浓度在10-12mol以上时可以100%检测到分子拉曼信号,CV浓度为10-13mol/L时有80%的检出几率。
实施例11
测试西地那非的检测限,采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,检测分子为西地那非,检测溶液的浓度分别为1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L,检测结果见图8。
实施例12
采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,检测分子为多菌灵,检测溶液的浓度分别为1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L、1×10-11mol/L,检测结果见图9。
参见图8和图9,对西地那非与多菌灵的检测限可分别达到10-10mol/L和10-11mol/L。可见,本发明可以实现对西地那非、多菌灵与结晶紫等检测分子的检测。
实施例13
采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,纳米粒子为金纳米星,纳米粒子溶液与检测分子溶液的溶剂为乙醇、甲醇或乙腈。
实施例14
采用实施例4中的方法,与实施例4不同在于,纳米粒子为金纳米棒,纳米粒子溶液与检测分子溶液的溶剂为乙醇、甲醇或乙腈。
Claims (8)
1.一种基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,将玻璃滤纸一端用加热夹夹住,平放在加热板上进行加热,将滤纸另一端浸入纳米粒子溶液与检测分子溶液的混合溶液中,混合溶液沿着玻璃滤纸通过毛细力上升,到达加热的夹持处时,溶剂遇热挥发,纳米粒子与检测分子同时停留,富集浓缩在夹持处,混合溶液全部蒸干,得到基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底。
2.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,纳米粒子为金纳米粒子、金纳米星或金纳米棒。
3.根据权利要求2所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,纳米粒子为金纳米粒子,金纳米粒子溶液通过以下过程制得:
将氯金酸溶液加热到沸腾,然后加入柠檬酸钠溶液,继续加热沸腾至无色变为红色,得到金纳米粒子溶液;
其中,氯金酸溶液的浓度为0.25mmol/L,柠檬酸钠溶液的质量分数为1%,氯金酸溶液的体积为100mL,柠檬酸钠溶液的体积为0.7mL。
4.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,纳米粒子溶液与检测分子溶液的体积比为1:(1-5)。
5.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,检测分子溶液为结晶紫溶液、西地那非溶液或多菌灵溶液。
6.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,纳米粒子溶液与检测分子溶液的溶剂为乙醇、甲醇或乙腈。
7.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,滤纸为玻璃滤纸或孔径为100-250μm的亲水聚四氟乙烯滤膜。
8.根据权利要求1所述的基于毛细作用的富集型表面增强拉曼散射基底的制备方法,其特征在于,夹持处的温度为90-120℃。
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