CN111096327A - 一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，使用温度为‑40～0℃，组分为瑞茛消毒剂、除冰剂和溶剂按比例混合。本发明公开的瑞茛复合消毒剂适于在低温环境(‑40～0℃)下使用，而且可以根据需要选择不同的除冰剂，杀菌稳定性好，适用于养殖场、公共场所、设备器械及种蛋等的消毒；此外，对繁殖菌或病毒具有优异的杀菌效果，对运载车辆的杀菌率均超过了99.9％，符合农业部兽药评审中心1992农(牧药)字第101号‑《兽用消毒剂鉴定技术规范》(试行)规定；且本配方金属腐蚀性低，能够满足运载车辆金属车厢的消毒要求。

Description

一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂
技术领域：
本发明涉及一种消毒剂，尤其涉及一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂。
背景技术：
随着当今全球化深入发展，国与国，以及地区与地区之间的交流往来更为密切频繁。出入境人员以及物资流动的增加为疾病防控带来了巨大压力，这些疫病不仅会对人员生命财产带来威胁，同时也会影响卫生安全形势、进出口贸易以及经济文化交流活动。特别是，近年来国内外重大动物疫情的频繁发生，不仅造成大量畜禽死亡，严重影响动物产品的质量安全，阻碍畜牧业的发展和农民的盈收，而且直接危害人类健康，给畜牧业和公共卫生事业造成巨大损失。而口岸动物以及动物产品运输过程是国内外疫情传播的主要途径之一。
因此，运输车辆的消毒工作是预防和控制动物疫病疫情的传播中十分重要的一环，目前用于运输车辆消毒的消毒剂的种类繁多，普遍使用的主要有苯扎溴铵(新洁尔灭)、氯苄烷铵(洁尔灭)等，这类消毒剂毒性与刺激性低，水溶性好，使用方便且性质稳定，但这类消毒剂对部分微生物杀灭效果不好，受有机物影响大，且价格较高；而且几乎所有的消毒剂的消毒效果均随环境温度的降低而显著下降，甚至无效。
发明内容：
本发明的目的在于对现有配方进行改进，针对繁殖菌及病毒研制出在低温(-4444℃)下均有杀灭效果好的特性，且无腐蚀的环境友好型瑞茛复合消毒剂。
本发明由如下技术方案实施：一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，使用温度为-40～0℃，组分为瑞茛消毒剂、除冰剂和溶剂按比例混合。
进一步的，使用温度为-20～0℃时，瑞茛消毒剂浓度为5～10％(v/v)，溶剂为水。
进一步的，所述除冰剂为乙醇，其含量为5～41％(v/v)。
进一步的，所述除冰剂为乙二醇，其含量为5～40％(v/v)。
进一步的，所述除冰剂为丙二醇，其含量为5～35％(v/v)。
进一步的，所述除冰剂为氯化钠，其含量为0.1～0.3wt％。
进一步的，使用温度为-40～-20℃时，瑞茛消毒剂浓度为5～20％(v/v)，溶剂为水。
进一步的，所述除冰剂为乙二醇，其含量为35～50％(v/v)。
进一步的，所述除冰剂为丙二醇，其含量为35～55％(v/v)。
本发明的优点：本发明公开的瑞茛复合消毒剂适于在低温环境(-40～0℃)下使用，而且可以根据需要选择不同的除冰剂，杀菌稳定性好，对繁殖菌或病毒具有优异的杀菌效果，适用于养殖场、公共场所、设备器械及种蛋等的消毒；此外，对运载车辆的杀菌率均超过了99.9％，符合农业部兽药评审中心1992农(牧药)字第101号-《兽用消毒剂鉴定技术规范》(试行)规定；且本配方金属腐蚀性低，能够满足运载车辆金属车厢的消毒要求。
具体实施方式：
附图说明：
图1：瑞茛复合消毒剂对金属腐蚀性统计图。
实施例1：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，成分为瑞茛消毒剂5％(v/v)，除冰剂乙醇5％(v/v)，溶剂为水。
实施例2：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，成分为瑞茛消毒剂7％(v/v)，除冰剂乙醇23％(v/v)，溶剂为水。
实施例3：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，成分为瑞茛消毒剂10％(v/v)，除冰剂乙醇41％(v/v)，溶剂为水。
实施例4：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，成分为瑞茛消毒剂1％(v/v)，除冰剂乙醇3％(v/v)，溶剂为水。
实施例5：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为氯化钠，其含量是0.1wt％。
实施例6：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为氯化钠，其含量是0.2wt％。
实施例7：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为氯化钠，其含量是0.3wt％。
实施例8：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为氯化钠，其含量是0.05wt％。
实施例9：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为丙二醇，其含量是5％(v/v)。
实施例10：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为丙二醇，其含量是20％(v/v)。
实施例11：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为丙二醇，其含量是35％(v/v)。
实施例12：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为丙二醇，其含量是3％(v/v)。
实施例13：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为乙二醇，其含量是5％(v/v)。
实施例14：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为乙二醇，其含量是25％(v/v)。
实施例15：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为乙二醇，其含量是40％(v/v)。
实施例16：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-20～0℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2相比，除冰剂为乙二醇，其含量是3％(v/v)。
实施例17：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂丙二醇含量为35％(v/v)。
实施例18：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂丙二醇含量为47％(v/v)。
实施例19：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂丙二醇醇含量为55％(v/v)。
实施例20：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂丙二醇含量为30％(v/v)。
实施例21：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂为乙二醇，含量为35％(v/v)。
实施例22：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂为乙二醇，含量为43％(v/v)。
实施例23：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂为乙二醇，含量为50％(v/v)。
实施例24：
本实施例瑞茛复合消毒剂针对-40℃～-20℃温度下的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及鸡新城疫病毒(NDV)消毒，与实施例2比，除冰剂为乙二醇，含量为20％(v/v)。
实施例25：
利用实施例1-24的消毒剂配方对满洲里口岸的车辆进行消毒实验，其中实施例1-24的实验温度列于表1，繁殖菌和病毒的消毒时长为15min。
繁殖菌选用大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌，病毒选用鸡新城疫病毒(NDV)。
繁殖菌和病毒的消毒实验方法：
将染有特定细菌的菌片(1454146CFU/片)放到高压灭菌后的无菌滤纸袋内，扎紧袋口，置待消毒车辆的不同部位。消毒结束后，进行活菌计数，并计算杀菌率。根据农业部兽药评审中心992农(牧药)字第141号——兽用消毒剂鉴定技术规范》(试行)的规定，杀菌率达到99.9％，即可评为该消毒液有效。
繁殖菌和病毒菌片制备方法：
(1)使用大小14mm×14mm的滤纸作为载体材料。载体经高压蒸汽灭菌后，使用滴染法染菌。
(2)使用浊度计调整菌悬液的含菌量约为1×148CFU/mL～5×148CFU/mL，将载体滤纸片平铺在洁净的无菌平皿内，用移液器逐片滴加菌液24μL，利用滴染法染菌。置37℃恒温培养箱或室温干燥备用。
(3)每个菌片(载体)的回收菌数应为5×145CFU/片～5×146CFU/片，同批试验中所有菌片的细菌浓度必须相同。
繁殖菌和病毒悬液制备方法：
(1)细菌繁殖体悬液的制备
a.以无菌操作的方式开启菌种管，用毛细吸管加入适量的营养肉汤培养基，缓慢吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.4mL414.4mL营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，置37℃培养18h～24h。或从microbank中取出一粒菌株接种于平皿上，置37℃培养18h～24h，挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，置37℃培养18h～24h，即为第3代培养物。
b.取第3～6代的营养琼脂培养基培养18h～24h的新鲜斜面培养物，用5.4mL吸管吸取3.4mL～5.4mL稀释液(一般用TPS，酸化水用生理盐水)加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔后，将洗液移至另一无菌试管中，使用电动混匀器混合24s或在手掌上振打84次，使细菌混匀。
c.初步制成的菌悬液，可以使用细菌浊度计初步测定其含菌浓度，然后以稀释液稀释至所需浓度。
d.细菌繁殖体悬液应在4℃冰箱内保存备用，不得过夜使用。
(2)细菌悬液的制备
a.以无菌操作方式开启菌种管，用毛细吸管加入适量营养肉汤培养基，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.4mL～14.4mL营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，接种于营养琼脂斜面，置37℃培养18h～24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，置37℃培养18h～24h，即为第3代培养物。
b.取第3～6代的营养琼脂培养基培养18h～24h的新鲜斜面培养物，用接种环取菌落接种于营养琼脂斜面培养，将斜面试管置37℃恒温培养箱内培养5d～7d。
c.用接种环取菌苔少许涂于玻片上，固定后以革兰氏染色法染色，并在显微镜(油镜)下进行镜检。当形成率达95％以上时，即可进行以下处理。否则，应继续在室温下放置一定时间，直至达到上述形成率后再进行以下处理。
d.用5.4mL吸管吸取3.4mL～5.4mL生理盐水加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。吸出菌悬液集中于含玻璃珠的无菌三角烧瓶中，振摇5min。
e.将三角烧瓶置45℃水浴中24h，使菌自溶断链，分散成单个。
f.用无菌棉花或纱布过滤悬液，清除琼脂凝块。
g.将悬液置无菌离心管内，以3444r/min速度离心34min。弃上清液，加蒸馏水吹吸使重新悬浮，本步骤重复3遍。
h.将洗净的悬液放入含适量小玻璃珠的三角烧瓶内，84℃水浴14min，以杀灭残余的细菌繁殖体。待冷至室温后，摇匀分装保存于4℃冰箱中备用。有效使用期为半年。
i.悬液在使用时，应先进行活菌培养计数。
消毒后菌片活菌计数方法：
c.待试验菌与消毒剂相互作用至各规定时间，将菌片放入含1.4mL中和剂的无菌PE管中，将其在电动混合器混合24s，或在手掌上振敲84次，使得菌片上的细菌被洗脱进中和液中。
d.吸取144μL上述洗液，按活菌培养计数方法测定存活菌数。
e.喷雾器换装新浓度消毒液前，应将原残留消毒剂洗净，再换装新浓度消毒剂。
f.设立直接用染菌载体做活菌计数的阳性对照。
g.所有试验样本在37℃温箱培养，培养24小时后观察最终计数结果。
h.试验重复3次，计算各组的活菌数(CFU/片)，并换算为对数值，计算杀菌率。
杀菌率计算方法：
以杀菌率或杀灭指数作为评价标准。按照农业部(消毒技术规范)标准杀菌率(Pt)达99.9％，计算公式如下：
消毒t时的杀菌率(Pt)＝[(n0-nt/n0)]×100％
式中n0为消毒前或对照组活菌数；nt为消毒后或实验组活菌数。
杀菌实验结果列于表1。
实施例26：
利用实施例3的消毒剂进行金属腐蚀性的测定。
方法步骤
(1)使用具有表面活性作用的清洁剂浸泡10min，充分去油，洗净后以120号粒度水砂纸磨去除金属片表面的氧化层，之后使用自来水冲净。分别测量金属片的直径、厚度、孔径(精确至0.1mm)。用无水丙酮或无水乙醇再次脱脂。放置于50℃恒温培养箱中干燥1h，待其温度降至室温后称重，每个金属片称重3次，精确至0.1mg，取其平均值作为试验前重量。称重时，应穿戴洁净手套，不可用手直接接触金属样片。
(2)按消毒剂使用的最高浓度配制试验所用消毒液，用以浸泡试验样片。浸泡时，每一金属片需浸泡在200mL消毒液中。
(3)金属样片用塑料线悬挂于消毒液中，并用标签标明编号和日期。一次性浸泡72h。若消毒剂中含有易挥发或不稳定的有效成分，根据情况酌情更换消毒液，直至浸泡72h。
(4)每种金属每次试验放置3片样片。浸泡时，若同种金属每一样片相隔1cm以上，可在同一容器内(含600mL消毒液)进行。
(5)浸泡到规定时间后，取出金属片，先用自来水冲洗，再用毛刷或其它软性器具去除腐蚀产物。如仍有清除不掉的腐蚀产物，可按GB 10124所介绍的下列清除方法：
铜片：在室温下浸泡于盐酸溶液(500mL 36％～38％盐酸加蒸馏水至1000mL，盐酸比重为1.19)中1min～3min。
碳钢片：置含锌粉200g/L的氢氧化钠溶液中，煮沸5min～30min。
铝片：浸泡于三氧化铬磷酸溶液(三氧化铬20g，磷酸500mL，加蒸馏水至1000mL。磷酸比重为1.69)中，升温至80℃，持续5min～10min。如还未清除干净，可在室温浸于硝酸(比重1.42)溶液中1min。
不锈钢：浸泡于60℃硝酸溶液(66％～68％硝酸100mL加蒸馏水至1000mL)20min。或浸于70℃柠檬酸铵溶液(柠檬酸铵150g加蒸馏水至1000m L)中10min～60min。
(6)金属样片除去腐蚀产物并清洗后，用滤纸吸干表面水分，并置于垫有滤纸的平皿中，放入50℃恒温培养箱，干燥1h后，用镊子夹取，待其温度降至室温后分别在天平上称重。以其称量3次的平均值作为试验后重量。
称重时，与试验前相同，应戴洁净手套，勿以手直接接触样片(下同)。
(7)样片在用化学法去除腐蚀物时，需设立相应的空白对照，以此校正误差。空白对照样片与试验组样片同样进行表面的处理、清洁和称重，但不经过消毒剂浸泡。事后随同试验组样片用相同方法进行化学处理、水冲洗、干燥、称重，并计算其平均失重值。
(8)试验全过程需设立不锈钢片浸泡于蒸馏水的对照，浸泡前后的重量差应＜0.3mg。否则，在找出原因后，全部试验重做。
(9)以金属腐蚀速率(R)平均值表达，在计算时应减去空白对照组样片的失重值。计算公式如下：
Figure BDA0002350701230000141
式中R为腐蚀速率，mm/a(毫米/年)；m为试验前金属片重量，g；mt为试验后金属片重量，g；mk为化学处理去除腐蚀产物样片失重值，g，试验中未进行化学清除处理者，计算时在公式中删去mk值；S为金属片的表面积总值，cm2；t为试验时间，h；d为金属材料密度，kg/m3。
腐蚀性分级标准
Figure BDA0002350701230000151
表1杀菌实验结果表
Figure BDA0002350701230000152
Figure BDA0002350701230000161
实施例1-24中，实施例1-3、实施例5-7、实施例9-11、实施例13-15、实施例17-19、实施例21-23的配方为根据本发明要求保护的配方配制，实施例4、8、12、16、20和24的配方不在本发明要求保护的范围内，且除冰剂的含量低于保护范围内的含量；由上表可知，实施例1-3、实施例5-7、实施例9-11、实施例13-15、实施例17-19、实施例21-23的复合消毒剂消毒效果能够符合农业部兽药评审中心1992农(牧药)字第101号-《兽用消毒剂鉴定技术规范》(试行)规定，对繁殖菌、病毒具有优良的杀灭效果；而实施例4、8、12、16、20和24的复合消毒剂效果不符合农业部兽药评审中心1992农(牧药)字第101号-《兽用消毒剂鉴定技术规范》(试行)规定，对繁殖菌、病毒杀灭效果差。
使用实施例3的消毒剂浸泡铜片、铝片、碳钢片和不锈钢片浸泡72h后，将金属片在浸泡前和浸泡后分别称重，计算出瑞茛消毒剂对金属片的腐蚀速率(图1)。比较4种不同的金属片的腐蚀速率可以看出，瑞茛消毒剂对不同金属片材质，其腐蚀程度也不同。消毒剂对铜片和不锈钢片无腐蚀性；对碳钢片的腐蚀程度较小，对铝片的腐蚀性较其他大，是4种金属片中腐蚀速度最快的，其腐蚀速率达到了0.024mm/a。故根据腐蚀速率可以判断，瑞茛消毒组合对铜片、碳钢片和不锈钢片基本无腐蚀(R＜0.01)，对铝片则有轻度腐蚀(0.0100＜R＜0.100)。可见实施例3的消毒剂配方对金属腐蚀性低，而实施例3中瑞茛消毒剂浓度较高，可见其余含有较低瑞茛消毒剂的配方具有更低的金属腐蚀性，所以本发明要求保护的消毒剂作为低温消毒组方可用于北方地区口岸现场的消毒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，使用温度为-40～0℃，组分为瑞茛消毒剂、除冰剂和溶剂按比例混合。
2.根据权利要求1所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，使用温度为-20～0℃时，瑞茛消毒剂浓度为5～10％(v/v)，溶剂为水。
3.根据权利要求2所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为乙醇，其含量为5～41％(v/v)。
4.根据权利要求2所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为乙二醇，其含量为5～40％(v/v)。
5.根据权利要求2所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为丙二醇，其含量为5～35％(v/v)。
6.根据权利要求2所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为氯化钠，其含量为0.1～0.3wt％。
7.根据权利要求1所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，使用温度为-40～-20℃时，瑞茛消毒剂浓度为5～20％(v/v)，溶剂为水。
8.根据权利要求7所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为乙二醇，其含量为35～50％(v/v)。
9.根据权利要求7所述的一种适于低温使用的瑞茛复合消毒剂，其特征在于，所述除冰剂为丙二醇，其含量为35～55％(v/v)。
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