CN111089970A - 一种过敏原去除效果的检测方法 - Google Patents

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冯素梅
赵金丹
张亚兵
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Abstract

本发明实施例公开了一种过敏原去除效果的检测方法，涉及分析测试技术领域，检测方法包括如下步骤：将商品化过敏原附在试验样块和阳极对照样块上；将附有过敏原的试验样块装载于需要检测的器具中或者试验基材上，运行需要检测的器具指定的除过敏原程序，测定运行后试验样块上的过敏原浓度Ti；将附有过敏原的阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；根据Ti和T0i的测定值计算过敏原去除率。本发明实施例提供一种过敏原去除效果的检测方法，以解决现有检测方法因为提取的过敏原浓度不太精准而导致最终对防过敏效果的确定存在误差的问题。

Description

一种过敏原去除效果的检测方法
技术领域
本发明实施例涉及分析测试技术领域，具体涉及一种过敏原去除效果的检测方法。
背景技术
过敏性疾病(变态反应性疾病)被世界卫生组织(WHO)列为二十一世纪重点防治的三大疾病之一，根据世界变态反应组织报告，全世界有20％-30％的人被过敏问题困扰。引起过敏的过敏原有很多种，包括食物、花粉、尘螨、霉菌、宠物毛发等几十余种。
家用电器是人们日常生活中经常会接触的物件，为了满足过敏体质人群的特殊需求，很多家用电器制造商推出了具有防过敏功效的家用电器，如：洗衣机、干洗机、净化器、蒸汽拖把、衣物护理机等，这些家用电器一般都搭载防过敏程序，能针对易过敏体质人群的特殊需求提供精准洗护体验服务。为了帮助客户展示产品功效，并让零售商和消费者确信产品性能与制造商声称的一致，制造商会找权威机构出示一份具有权威标准的检测报告，帮助制造商区分独特的产品功能，并增加消费者在产品购买时的信心。
目前国内对于家用电器过敏原去除效果的检测手段是空白的，国外对于家用电器过敏原去除效果的检测手段一般采用NSF协议P351，该协议采用模仿过敏原污染少量衣物样本放入其他典型衣服负载中的方法来确定洗衣机去除过敏原和杀灭尘螨的能力，该协议获取过敏原的方式是直接从螨虫等实物上提取过敏原，这种方式提取的过敏原浓度不太精准，导致最终对防过敏效果的确定存在误差。
发明内容
为此，本发明实施例提供一种过敏原去除效果的检测方法，以解决现有检测方法因为提取的过敏原浓度不太精准而导致最终对防过敏效果的确定存在误差的问题。
为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：
根据本发明实施例的第一方面，一种过敏原去除效果的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：
将商品化过敏原附在试验样块和阳极对照样块上；
将附有过敏原的试验样块装载于需要检测的器具中或者试验基材上，运行需要检测的器具指定的除过敏原程序，测定运行后试验样块上的过敏原浓度Ti；
将附有过敏原的阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；
根据Ti和T0i的测定值计算过敏原去除率。
通过上述技术方案，使用直接购买的过敏原纯度较高，浓度较稳定，使得试验操作更加精准，测得的过敏原去除率更精准。
进一步地，所述检测方法包括如下步骤：
S1：对试验负载、试验样块、阳极对照样块进行灭菌、烘干、冷却至室温后备用；
S2：将经步骤S1处理后的试验样块、阳极对照样块分别置于无菌培养皿中，将适量过敏原分别均匀滴染于所述试验样块和所述阳极对照样块上，(25±1)℃条件下静置，待所述试验样块和阳极对照样块表面微干后得到过敏原试验样块和过敏原阳极对照样块；
S3：将过敏原试验样块与试验负载连接后一起装载于需要检测的器具中或者试验基材上，运行指定的除过敏原程序后检测过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti；将过敏原阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；
S4：根据过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti和过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i计算过敏原去除率。
进一步地，S1中，所述灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min；所述烘干温度为60℃。
进一步地，S2和S3中，过敏原浓度的测定方法具体如下：将需检测的试验样块或者阳极对照样块放入10mL过敏原提取液PBST中，25℃条件下200r/min振荡18h提取过敏原，取上清液按照相应的ELISA试剂盒使用说明进行检测。
通过上述技术方案，提取过敏原的时间为18h，时间较其他检测方法的提取时间长，有利于过敏原的精确提取，进而保证试验结果的准确性。
进一步地，步骤S1还包括对需要检测的器具空载连续运行两个除过敏原程序。
进一步地，所述过敏原选自尘螨过敏原Der p 1、尘螨过敏原Der f 1、狗皮屑过敏原Can f 1、花粉过敏原Amb a 1、蟑螂过敏原Bla g 2或猫皮屑过敏原Fel d 1。
进一步地，所述器具为家用电器。
进一步地，所述家用电器为洗衣机、干洗机、洗干一体机、蒸汽拖把或衣物护理机。
本发明实施例具有如下优点：
本发明实施例一种过敏原去除效果的检测方法使用直接购买的过敏原纯度较高，浓度较稳定，使得试验操作更加精准，测得的过敏原去除率更精准；在过敏原检测过程中，提取过敏原的时间较其他检测方法的提取时间长，有利于过敏原的精确提取，进而能进一步地保证试验结果的准确性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。
本说明书所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容能涵盖的范围内。
图1为本发明实施例2提供的过敏原试验样块在试验负载的分布图；
图2为本发明实施例3提供的试验负载在地板除过敏原试验基材上的分布图；
图中：过敏原试验样块101，试验负载102，附有过敏原试验样块的试验负载103，地板除过敏原试验基材104。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1-4实验用过敏原是从市场上直接购买来的商品化过敏原，其类型为尘螨过敏原(Der p 1)、尘螨过敏原(Der f 1)、狗皮屑过敏原(Can f 1)、花粉过敏原(Amb a1)、蟑螂过敏原(Bla g 2)、猫皮屑过敏原(Fel d 1)；
以下实施例采用ELISA法检测过敏原浓度，其中ELISA试剂盒选用Indoor生物技术公司，测量时于酶标仪405nm下进行检测。每个试验样块测定3次确保测试结果的准确性。
实施例1-4中过敏原去除率按照公式(B.1)计算：
Figure BDA0002309525050000051
式中：
i—周期数；
Pi—过敏原去除率，％；
Ti—过敏原试验样块上的残留过敏原浓度，ng/mL；
T0i—过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度，ng/mL。
注：若过敏原试验样块上的过敏原用ELISA法均未检出，去除率用每次试验的标准品最低检出浓度进行计算。
同一规格的洗衣机、干衣机、洗干一体机、衣物护理机、蒸汽拖把，要在同一条件下至少试验1台，每台进行3次试验，每次试验后计算过敏原去除率，取其3次过敏原去除率的算术平均值作为最终结果。
实施例1
本实施例用采用的试验负载、试验样块、阳极对照样块的规格如下：
试验负载：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，经过脱浆预处理制成330mm×330mm的方巾。干衣机使用的负载初始含水率为(60±5)％。
洗衣机试验样块、阳极对照样块：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，经过脱浆预处理制成25mm×75mm的试验样块、阳极对照样块。
干衣机、洗干一体机试验样块、阳极对照样块：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，经过脱浆预处理制成100mm×100mm的试验样块、阳极对照样块。
一种过敏原去除效果的检测方法，该检测方法针对洗衣机、干衣机、洗干一体机，所述检测方法包括如下步骤：
S1：试验负载、试验样块、阳极对照样块的预处理：试验前，所有的试验负载、试验样块、阳极对照样块在121℃条件下灭菌20min，60℃烘干，冷却至室温后保存备用。灭菌后的试验负载、试验样块、阳极对照样块保存时间最长不得超过1周。
对需要检测的器具的预处理：试验前空载连续运行两个除过敏原程序。
S2：将经步骤S1处理后的试验样块、阳极对照样块分别置于无菌培养皿中，将适量过敏原分别均匀滴染于试验样块、阳极对照样块上，(25±1)℃条件下静置，待试验样块、阳极对照样块表面微干后得过敏原试验样块和过敏原阳极对照样块；
S3：在15min内将S2得到的过敏原试验样块分别用胶钉固定到330mm×330mm的试验负载上，装载进需要检测的器具中，连接及装载方法应符合GB 21551.5的要求，启动除过敏原程序。试验负载为洗衣机、干衣机、洗干一体机额定容量的30％。另，干衣机或洗干一体机的干衣程序负载量按照干负载(含水率低于3％)计算，称量后再制备符合含水率要求的试验负载。
程序运行结束后，45min内取出过敏原试验样块，将过敏原试验样块放入10mL过敏原提取液PBST中，25℃条件下200r/min振荡18h提取过敏原，取上清液按照相应的ELISA试剂盒使用说明检测过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti；将过敏原阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；
为了确保试验组与对照组的初始条件一致，进而保证试验的有效性，过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i应在如表1的范围内：
表1过敏原种类与过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i范围值
Figure BDA0002309525050000061
Figure BDA0002309525050000071
S4：根据过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti和过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i计算过敏原去除率。
实施例2
本实施例用采用的试验负载、试验样块、阳极对照样块的规格如下：
试验负载：采用衬衣实物负载(成分：65％棉，35％涤纶；款式：男士；尺寸：L,175/92A)。
试验样块、阳极对照样块：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为21±2支数；纬纱为21±2支数，经过脱浆预处理制成25mm×75mm的试验样块、阳极对照样块。
一种过敏原去除效果的检测方法，该检测方法针对衣物护理机，所述检测方法包括如下步骤：
S1：试验负载、试验样块、阳极对照样块的预处理：试验前，所有的试验负载、试验样块、阳极对照样块在121℃条件下灭菌20min，60℃烘干，冷却至室温后保存备用。灭菌后的试验负载、试验样块、阳极对照样块保存时间最长不得超过1周。
对需要检测的器具的预处理：试验前空载连续运行两个除过敏原程序。
S2：将经步骤S1处理后的试验样块、阳极对照样块分别置于无菌培养皿中，取100μL过敏原稀释至一定浓度形成过敏原溶液，过敏原溶液分别均匀滴染于试验样块、阳极对照样块上，(25±1)℃条件下静置，待试验样块、阳极对照样块表面微干后得过敏原试验样块和和过敏原阳极对照样块；
S3：如图1所示，将S2得到的三块过敏原试验样块101用胶钉沿试验负载102背面纵向均匀固定在试验负载上，一起装载于需要检测的器具中，运行所述器具指定的除过敏原程序；
程序运行结束后，45min内取出过敏原试验样块，将过敏原试验样块放入10mL过敏原提取液PBST中，25℃条件下200r/min振荡18h提取过敏原，取上清液按照相应的ELISA试剂盒使用说明检测过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti；将过敏原阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；为了确保试验组与对照组的初始条件一致，进而保证试验的有效性，过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i应在实施例1如表1的范围内；
S4：根据过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti和过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i计算过敏原去除率。
实施例3
本实施例用采用的试验基材、试验负载、试验样块、阳极对照样块的规格如下：
试验基材：地板除过敏原试验基材符合GB/T 4100-2015中附录G规定的干压陶瓷砖(E≤0.5％BIa类)，尺寸规格(长×宽)：800mm×800mm。，
地板除过敏原试验负载：10mm×10mm的盖玻片。
试验样块、阳极对照样块：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，脱浆预处理长度为800mm，宽度为试验样机清洁头宽度。
一种过敏原去除效果的检测方法，该检测方法针对蒸汽拖把，所述检测方法包括如下步骤：
S1：试验负载、试验样块、阳极对照样块的预处理：试验前，所有的试验负载、试验样块、阳极对照样块在121℃条件下灭菌20min，60℃烘干，冷却至室温后保存备用。灭菌后的试验负载、试验样块、阳极对照样块保存时间最长不得超过1周。
S2：将经步骤S1处理后的三块试验样块和三块阳极对照样块分别置于无菌培养皿中，将10μL制备好的过敏原溶液分别均匀滴染于试验样块、阳极对照样块上，(25±1)℃条件下静置，待试验样块、阳极对照样块表面微干后得过敏原试验样块和过敏原阳极对照样块；
S3：将S2得到的过敏原试验样块与试验负载连接，取三块附有过敏原试验样块的试验负载103均匀摆放在地板除过敏原试验基材104上，其摆放位置如图2所示，蒸汽拖把开启至最大档位，在试验负载上以(0.2±0.02)m/s的速度，以推拉方式进行扫描式清洁，运行时间5min，运行结束后，将过敏原试验样块取下，先置于10mL磷酸盐缓冲液(PBST，pH 7.2～7.4)中，再置于(25±1)℃条件下，200r/min振荡18h提取过敏原，取上清液按照相应的ELISA试剂盒使用说明检测过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti；将过敏原阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；为了使过敏原阳极对照样块上的过敏原回收率达80％以上，进而保证试验的有效性，过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i应(3-5)ng/mL范围内；
S4：根据过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti和过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i计算过敏原去除率。
实施例4
本实施例除了以下技术特征与实施例3不同，其他技术方案同实施例3：
本实施例用采用的试验基材、试验负载、试验样块、阳极对照样块的规格如下：
试验基材：地毯除过敏原试验基材符合GB/T 14252-2018中机织地毯的要求，尺寸为40mm×60mm，绒毛长度为4mm。
地毯除过敏原试验负载：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，经过脱浆预处理制成25mm×75mm的试验负载。
试验样块、阳极对照样块：用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21±2)支数；纬纱为(21±2)支数，脱浆预处理长度为800mm，宽度为试验样机清洁头宽度。
步骤S2中过敏原溶液的添加量为100μL；过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i应(30-50)ng/mL范围内；
步骤S3中蒸汽拖把开启至最大档位，在试验负载上以(0.08±0.008)m/s的速度在试验样块表面进行扫描式清洁运行，以推1次拉1次为1个循环，运行15循环。
将采用实施例1-3的检测方法进行检测，得到的实施数据如表2。
表2采用实施例1-3的检测方法得到的实验数据
Figure BDA0002309525050000101
Figure BDA0002309525050000111
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
将商品化过敏原附在试验样块和阳极对照样块上；
将附有过敏原的试验样块装载于需要检测的器具中或者试验基材上，运行需要检测的器具指定的除过敏原程序，测定运行后试验样块上的过敏原浓度Ti；
将附有过敏原的阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；
根据Ti和T0i的测定值计算过敏原去除率。
2.如权利要求1所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
S1：对试验负载、试验样块、阳极对照样块进行灭菌、烘干、冷却至室温后备用；
S2：将经步骤S1处理后的试验样块、阳极对照样块分别置于无菌培养皿中，将适量过敏原分别均匀滴染于所述试验样块和所述阳极对照样块上，(25±1)℃条件下静置，待所述试验样块和阳极对照样块表面微干后得到过敏原试验样块和过敏原阳极对照样块；
S3：将过敏原试验样块与试验负载连接后一起装载于需要检测的器具中或者试验基材上，运行指定的除过敏原程序后检测过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti；将过敏原阳极对照样块放置与运行时间相同的时间后测定过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i；
S4：根据过敏原试验样块上的残留过敏原浓度Ti和过敏原阳极对照样块上的过敏原浓度T0i计算过敏原去除率。
3.如权利要求2所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，S1中，所述灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min；所述烘干温度为60℃。
4.如权利要求2所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，S2和S3中，过敏原浓度的测定方法具体如下：将需检测的试验样块或者阳极对照样块放入10mL过敏原提取液PBST中，25℃条件下200r/min振荡18h提取过敏原，取上清液按照相应的ELISA试剂盒使用说明进行检测。
5.如权利要求2所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，步骤S1还包括对需要检测的器具空载连续运行两个除过敏原程序。
6.如权利要求1所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，所述过敏原选自尘螨过敏原Der p 1、尘螨过敏原Der f 1、狗皮屑过敏原Can f 1、花粉过敏原Amb a 1、蟑螂过敏原Bla g 2或猫皮屑过敏原Feld 1。
7.如权利要求1所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，所述器具为家用电器。
8.如权利要求7所述的一种过敏原去除效果的检测方法，其特征在于，所述家用电器为洗衣机、干洗机、洗干一体机、蒸汽拖把或衣物护理机。
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