CN111084836A - 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用 - Google Patents

一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111084836A
CN111084836A CN201911301409.6A CN201911301409A CN111084836A CN 111084836 A CN111084836 A CN 111084836A CN 201911301409 A CN201911301409 A CN 201911301409A CN 111084836 A CN111084836 A CN 111084836A
Authority
CN
China
Prior art keywords
combination
pathogenic bacteria
antibiotic
mrsa
reyanning
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911301409.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111084836B (zh
Inventor
杜成强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tsing Hua De Ren Xi'an Happiness Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Tsing Hua De Ren Xi'an Happiness Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tsing Hua De Ren Xi'an Happiness Pharmaceutical Co ltd filed Critical Tsing Hua De Ren Xi'an Happiness Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN201911301409.6A priority Critical patent/CN111084836B/zh
Publication of CN111084836A publication Critical patent/CN111084836A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111084836B publication Critical patent/CN111084836B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A61K36/288—Taraxacum (dandelion)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
    • A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/539—Scutellaria (skullcap)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/84—Valerianaceae (Valerian family), e.g. valerian
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用，其克服了中药制剂、抗生素单独使用产生抗药性、效果不佳的问题，热炎宁与抗生素头孢西丁、利奈唑胺联用发挥协同作用，为临床上采用中药制剂和抗生素联合治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染提供指导。本发明采用的技术方案为：一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用，热炎宁采用热炎宁合剂，抗生素为头孢西丁或利奈唑胺，病原菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。热炎宁稀释倍数为1:8，头孢西丁浓度为4mg/ml时为两药联用的最低抑菌浓度；1/8MIC热炎宁与1/2MIC利奈唑胺的组合较每种单一药物具有更强的抑菌效果。

Description

一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂联合抗生素的应用方法，尤其是涉及一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用。
背景技术：
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是造成社区获得性感染和医院内感染的主要致病菌。MRSA感染发病率和死亡率高，已成为一个主要的公共卫生问题。万古霉素(Vancomycin,Van)是治疗MRSA感染的首选药，其疗效正在下降。头孢西丁(Cefoxitin,FOX)曾经是治疗MRSA的一线药物，由于长期大量使用，其对MRSA的敏感性下降，虽然目前临床上已不用于MRSA的治疗，但因其安全性高、价格便宜等特点，临床上仍广泛应用于感染性疾病的治疗。利奈唑胺(LNZ)是一种用于治疗MRSA的临床一线抗生素，最近已出现抗药性报道。联合用药是当前治疗疾病的主流趋势，中药与抗生素联用具有有效应对MRSA感染的潜力。中药具有多成分、多靶点、整体性的特征，用于治疗感染性疾病已有几千年的历史。研究表明中药与某些抗生素联用治疗MRSA感染发挥协同增效的作用，能够提高抗生素的敏感性、增强疗效。热炎宁(ReYanNing,RYN)是临床上治疗上呼吸道感染的一线药物，由蒲公英、虎杖、北败酱、半枝莲组成，具有清热解毒、活血祛瘀、消痈散结、消肿止痛等功效。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用，其克服了现有技术中中药制剂、抗生素单独使用产生抗药性、效果不佳的问题，热炎宁与抗生素头孢西丁、利奈唑胺联用发挥协同作用，为临床上采用中药制剂和抗生素联合治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染提供指导。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用。
一种用于抗病原菌的热炎宁联合抗生素。
一种热炎宁联合抗生素在制备抗病原菌的联合用药物中的用途。
所述病原菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
所述抗生素为头孢西丁或利奈唑胺。
热炎宁采用蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的水提取物制得，蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的重量比为1～3:1～3:1～3:1。
热炎宁为热炎宁合剂、热炎宁颗粒或热炎宁片剂，抗生素为口服剂或注射剂。
热炎宁合剂稀释倍数为1:8，头孢西丁浓度为4mg/ml时为两药联用的最低抑菌浓度；1/8MIC热炎宁合剂与1/2MIC利奈唑胺的组合较每种单一药物具有更强的抑菌效果
与现有技术相比，本发明具有的优点和效果如下：
1、本发明通过网络药理学预测和体外细菌实验确认，在药物干预MRSA中，RYN与Van联用出现拮抗作用与Gαi Signaling相关；RYN与FOX联用出现协同作用，其机制与MRSA致病因子SarA和Atl，及Glucocorticoid Receptor Signaling相关。本发明为临床上RYN联合FOX治疗MRSA感染提供指导，也开辟了中西药联用治疗感染性疾病的新思路和新方法。
2、本发明为RYN和LNZ对游离MRSA和MRSA生物膜的协同作用提供了体外证据，并揭示了它们的最佳联用剂量，从而为MRSA联合治疗奠定了基础。多组分，多靶点的中药复方联合抗生素的使用将成为对抗MRSA感染的有前途的策略。
附图说明：
图1为RYN、FOX和Van网络映射MRSA网络的作用点图；
图2为RYN网络和Van网络分子对Gαi Signaling的调控图(箭头实线代表Van、虚线代表RYN；箭头向上代表促进、向下代表抑制)；
图3生物膜形成中单用和联用对MRSA的LNZ和RYN的抑制率图；
图4为MRSA生物膜的CLSM分析图。
具体实施方式：
本发明为一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用，病原菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，抗生素为头孢西丁或利奈唑胺。热炎宁采用蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的水提取物制得，蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的重量比为1～3:1～3:1～3:1。热炎宁为热炎宁合剂、热炎宁颗粒或热炎宁片剂，优选热炎宁合剂。抗生素为口服剂或注射剂。热炎宁合剂稀释倍数为1:8，头孢西丁浓度为4mg/ml时为两药联用的最低抑菌浓度；1/8MIC热炎宁合剂与1/2MIC利奈唑胺的组合较每种单一药物具有更强的抑菌效果
实验例一：
1材料
1.1药物靶蛋白和MRSA相关基因
从《中药大辞典(第二版)》查找RYN中蒲公英、虎杖、北败酱、半枝莲的化学成分；在中药系统药理学分析平台(TCMSP)中，根据各个成分的ADME(Absorption,Distribution,Metabolism,Excretion)性质确定具有成药性的活性成分；从PubChem数据库中检索这些活性成分对应的人类靶蛋白。查找到蒲公英、虎杖、北败酱、半枝莲的靶蛋白各103，256，45，97个。在ChEMBL、ETCM和PubChem数据库检索Van和FOX的靶蛋白，剔除非实证获得和重复者，入选Van靶蛋白134个，FOX靶蛋白65个；在Ensembl Bacteria、Uniprot和PubMed数据库中检索MRSA致病相关基因，剔除重复者，共入选80个基因。
1.2细菌实验材料
热炎宁(ReYanNing,RYN国药准字Z20050493)由清华德人西安幸福制药有限公司提供；头孢西丁(Cefoxitin,FOX)购于中国食品药品检定研究所；注射用盐酸万古霉素(Vancomycin,Van批号No.657)，日本EliLilly Japan K.K,Seishin Laboratories公司产品；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(ATCC 43300)购自美国ATCC公司。
胰蛋白胨(LP0024)和酵母提取物(LP0021)为英国OXOID公司产品；TTC(17779-10X10ML-F)为美国Sigma公司产品；
Figure BDA0002321883610000051
BacLightTM Bacterial Viability Kit(L-7012)为美国Invitrogen公司产品；恒温恒湿培养箱由上海森信实验仪器有限公司生产；高压灭菌锅由日本三洋企业生产；分光光度计为上海美谱达仪器厂生产。
2方法
2.1 RYN、Van和FOX干预MRSA的作用和机制预测
参考以往的类似研究，把RYN、Van、FOX的靶蛋白及MRSA相关基因进行格式归一化处理，然后导入IPA网络分析平台，采用Network analysis功能模块构建药物靶蛋白网络和MRSA基因网络，通过网络的映射分析，发现RYN、Van和FOX干预MRSA的相关靶点和通路。
2.2药物最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)测定
从MRSA平板中挑取单菌落置于3ml LB培养基，并于37℃,280r/min震摇过夜。次日取出菌液，用LB培养基将上述菌液稀释至A600＝0.02，采用96孔板微量肉汤稀释法分别测定RYN、Van和FOX单用对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)。取无菌96孔板，采用倍比稀释的方法将药液稀释成一定成浓度，其中RYN的浓度梯度范围为1/2-1/1024药物原液，Van的浓度梯度范围为128-0.25mg/L，FOX的浓度梯度128-0.25mg/L，每孔加入100ul稀释好的药液，每个浓度设置三个复孔，另外每孔再加入100ul A600＝0.02的菌液，总体积200ul。同时设置阴性对照孔和阳性对照孔，其中阴性对照孔加入200ul LB培养基，阳性对照孔加入200ul A600＝0.02的菌液。于37℃恒温恒湿培养箱培养24小时候后加入0.25％的TTC溶液30ul，于上述条件继续培养30min，通过肉眼观察培养孔内的颜色，当呈现红色时，表示孔内有细菌生长，孔内出现无色时的最小浓度即为细菌生长的最低抑制浓度(MIC)。另外，基于RYN本身颜色过深，采用细菌划板的方法判读，分别挑取热炎宁不同浓度的孔进行划板，37℃恒温恒湿箱培养24h后，肉眼观察小于5个单菌落的最低浓度则被判定为最低抑菌浓度(MIC)，上述实验均重复三次。
2.3棋盘法联合药敏实验测定
采用倍比稀释的方法分别将RYN、Van和FOX稀释成一定浓度梯度。取无菌96孔板，从左到右依次将RYN的浓度从1:1倍比稀释至1/64原液，每孔加入50ul稀释液；从上到下依次将Van从1:1倍比稀释成浓度梯度为16—0.25mg/L，每孔加入50ul；最后每孔再加入100ulA600＝0.02的菌液，使总体积保持在200ul。同时分别设置RYN、Van各个浓度单用孔和只加200ul培养基的质控孔。同理，按照上述方法制备RYN与FOX联用的96孔板，上述实验均重复三次。
2.4分数抑制指数(FIC)计算
∑FIC＝FICA+FICB，其中FICA＝MIC A药联用/MIC A药单用，FICB＝MIC B药联用/MIC B药单用[13]。根据欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST，2010)评估标准[14]如下:当FIC指数≤0.5，表示两药联用为协同作用；当FIC指数＞0.5且≤1，表示两药联用为相加作用；当1＜FIC指数≤2，表示两药联用为无关作用；当FIC指数＞2，则表示为拮抗作用。
3结果
3.1 RYN、Van和FOX干预MRSA的作用和机制
RYN网络和FOX网络映射MRSA网络的共同作用点是SarA(Staphylococcalaccessory regulator A)和Atl(Autolysins)，RYN网络通过26s proteasome与FOX网络相连(图1)；最显著相关的生物通路是Glucocorticoid Receptor Signaling，两药对其调节方向一致(表1)，提示两药可能存在协同作用。RYN网络和Van网络针对MRSA网络没有共同作用点，最显著相关的生物通路是Gαi Signaling(图1和表2)。在Gαi Signaling中，RYN网络分子等上调，而Van网络分子等下调，提示两药可能存在拮抗作用(图2)。
Figure BDA0002321883610000071
表1 Fox网络和RYN网络相关信号通路及其被激活的状态
Figure BDA0002321883610000072
表2 Van网络和RYN网络相关信号通路及其被激活的状态
3.2药物最低抑菌浓度(MIC)测定结果
MIC测定结果，当RYN浓度为1/2原液时，孔内的细菌被完全抑制生长，即表示其MIC为1/2；当Van的浓度为4mg.L-1时，孔内的细菌被完全抑制生长，即表示其MIC为4mg.L-1；当FOX的浓度为32mg.L-1时，孔内的细菌被完全抑制生长，即表示其MIC为32mg.L-1。
3.3棋盘法药敏实验测定结果
如表3、表4所示，RYN与Van联用时，FIC＝3，表现为拮抗作用；RYN 1/8原液浓度与FOX 4mg.L-1为两药联用的MIC值，FIC＝0.375，表示两药联用为协同作用。
Figure BDA0002321883610000081
注：孔内无细菌生长记为阴性，即“-”；孔内有细菌生长记为阳性，即“+”
表3热炎宁联合万古霉素对MRSA的MIC
Figure BDA0002321883610000082
注：孔内无细菌生长记为阴性，即“-”；孔内有细菌生长记为阳性，即“+”
表4热炎宁联合注射用头孢西丁对MRSA的MIC
实验例二：
目的：探讨RYN和LNZ联合作用对MRSA的协同效应。
方法：采用微量肉汤稀释法测定RYN和LNZ对游离MRSA菌株的最低抑菌浓度(MICs)。采用棋盘法研究了RYN与LNZ的抗菌作用。通过2,3-双-(2-甲氧基-4-硝基-5-磺基苯基)-2H-四唑-5-甲酰苯胺(XTT)还原方法检测生物膜中的MRSA。在生物膜的发育和形成中观察两种药物的抗生物膜效应。使用激光共聚焦扫描显微镜观察给药后生物膜中用syto9染色的活细胞。
结果：MRSA菌株对RYN敏感，MIC值为1/2，而LNZ的MIC值为4μg/ml。RYN通过降低其MIC来显着增强测试抗生素的活性。LNZ的抑菌效果在0h时比RYN更显著，而RYN在6h时的抑菌效果比LNZ更显著。1/8MIC RYN和1/2MIC LNZ的组合比每种单一药物具有更强的抑菌效果(图3)，图3为生物膜形成中单用和联用对MRSA的LNZ和RYN的抑制率。与对照组相比，单用和联用的RYN和LNZ的作用在统计学上是具有显著性差异(**P<0.01)。0h时2μg/ml LNZ组优于1/16RYN组，6h后1/16RYN组抑制率均大于2μg/ml LNZ组。2μg/ml LNZ+1/16RYN组在各时间点的抑制率均高于两种药物单用。
RYN组中的活菌数明显低于LNZ组(图4)，图4为MRSA生物膜的CLSM分析。不同给药组作用于成熟生物膜MRSA，包括(a)对照组，(b)2μg/ml LNZ组，(c)1/16RYN组，和(d)2μg/mlLNZ+1/16RYN组。比例尺＝5μm。MRSA生物膜用SYT09染色，并用CLSM以10倍的放大倍数观察。(a)MRSA成熟生物膜表面粗糙，荧光值信号强，表明生物膜中的活菌活性高；(b)荧光信号与(a)大致相同，生物膜的厚度基本不变，体积没有显着变化；(c)，(d)荧光信号减弱，生物膜厚度显着减少，表面分布松散。
MRSA是临床上常见的致病菌，自1961年英国科学家首次发现后，相继在日本、澳大利亚、美国等国家出现，至今已经遍及全世界。以MRSA感染为主的医院和社区感染性疾病发病率和死亡率居高不下，已经成为全球难题。尽管万古霉素仍然是最有效的抗MRSA药物之一，但它有许多不良反应，如低血压、静脉炎、肾毒性、耳毒性、过敏反应、中性粒细胞减少症等；而且自上世纪九十年代以来，临床上已经出现了大量的耐万古霉素的MRSA菌株。头孢西丁属于头霉素类抗生素，具有高度抗β-内酰胺酶性质，临床上也被用于治疗MRSA，有研究报道，其与多种β-内酰胺结合可增强其体外抗CA-MRSA菌株的活性。热炎宁是临床治疗金黄色葡萄球菌感染的常用药，具有抑杀MRSA的潜力。联合用药是目前治疗复杂疑难疾病的主流趋势，中药与抗生素联用有望用于治疗MRSA感染。本发明采用网络药理学方法和体外细菌实验探讨热炎宁分别与万古霉素、头孢西丁联用对抗MRSA的抗菌效应及机制。发现SarA和Atl是RYN和FOX针对MRSA的共同作用点，与Glucocorticoid Receptor Signaling相关，RYN网络通过26s proteasome与FOX网络相连，提示两药可能存在协同作用；RYN和Van针对MRSA没有共同作用点，与Gαi Signaling相关，两药对其调节作用相反，提示两药可能存在拮抗作用。细菌实验发现热炎宁与万古霉素联用表现出拮抗作用，而与头孢西丁联用表现出协同作用。
SarA是与毒力因子调控有关的核心元件之一，在MRSA生物被膜形成过程中起着重要的作用。Atl是由atl基因编码的一种水解酶，可以导致金黄色葡萄球菌的细胞分裂和细胞自溶。糖皮质激素受体(GR)是一种转录因子，参与调节许多复杂的信号通路。研究表明，通过下丘脑-垂体-肾上腺轴合成的糖皮质激素对宿主抵抗内毒素至关重要。此外，糖皮质激素对革兰氏阳性和阴性脓毒症具有保护作用。通过作用于SarA、Atl及GlucocorticoidReceptor Signaling可能是RYN和FOX对MRSA发挥协同抗菌作用的机制。26s proteasome是位于泛素-蛋白酶体系统(UPS)中心的26S蛋白酶体，几乎参与了所有真核生物的细胞过程。研究发现，结构上与26S蛋白酶体相似的ClpQ与其ATP酶配偶ClpY结合形成双组分蛋白酶ClpYQ，在高温条件下可以促进金黄色葡萄球菌的生长。RYN可能通过抑制26s proteasome表达而影响FOX的网络功能，从而增强抗MRSA的作用。Gαi Signaling是调控金黄色葡萄球菌诱导的炎症细胞因子和趋化因子表达的重要信号通路。RYN和Van的网络分子对其调节作用相反，提示两药拮抗作用的发生可能与Gαi Si naling有关。这些结果为进一步RYN分别与FOX和Van联用干预MRSA感染机制探索奠定了基础。此外，万古霉素分子结构中含有酰胺键、酚羟基、羧基等基团，易发生自身水解使活性下降，或者其自身的酚羟基、羧基等与热炎宁化学成分中的咖啡酸、大黄蒽醌、虎杖苷、黄酮等发生中和反应，从而改变药物自身结构也可能是两药联用活性降低从而出现拮抗作用的原因。

Claims (8)

1.一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用。
2.一种用于抗病原菌的热炎宁联合抗生素。
3.一种热炎宁联合抗生素在制备抗病原菌的联合用药物中的用途。
4.根据权利要求1、2或3所述的用途，其特征在于：所述病原菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述抗生素为头孢西丁或利奈唑胺。
6.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：热炎宁采用蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的水提取物制得，蒲公英、虎杖、北败酱和半枝莲的重量比为1～3:1～3:1～3:1。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：热炎宁为热炎宁合剂、热炎宁颗粒或热炎宁片剂，抗生素为口服剂或注射剂。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：热炎宁合剂稀释倍数为1:8，头孢西丁浓度为4mg/ml时为两药联用的最低抑菌浓度；1/8MIC热炎宁合剂与1/2MIC利奈唑胺的组合较每种单一药物具有更强的抑菌效果。
CN201911301409.6A 2019-12-17 2019-12-17 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用 Active CN111084836B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911301409.6A CN111084836B (zh) 2019-12-17 2019-12-17 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911301409.6A CN111084836B (zh) 2019-12-17 2019-12-17 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111084836A true CN111084836A (zh) 2020-05-01
CN111084836B CN111084836B (zh) 2021-12-10

Family

ID=70395643

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911301409.6A Active CN111084836B (zh) 2019-12-17 2019-12-17 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111084836B (zh)

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR930012031A (ko) * 1991-12-30 1993-07-20 이승동 포공영으로부터 항균활성이 높은 엑기스의 추출, 정제방법
JPH11228407A (ja) * 1998-02-06 1999-08-24 Alps Yakuhin Kogyo Kk フラボン誘導体によるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ：ＭＲＳＡ）に対するβ−ラクタム剤感受性誘導作用
CA2448606A1 (en) * 2001-06-01 2002-12-12 Incyte Genomics, Inc. Nucleic acid-associated proteins
CN101024640A (zh) * 2007-03-13 2007-08-29 温州医学院 蒲公英中的木质素及其抗菌活性和医药用途
CN101085050A (zh) * 2007-07-03 2007-12-12 清华德人西安幸福制药有限公司 清热解毒制剂药物及其制备方法
CN102198182A (zh) * 2011-06-03 2011-09-28 裴有刚 一种治疗间质性肺炎的药物
CN102861136A (zh) * 2012-09-14 2013-01-09 郭玲玲 一种治疗肺炎的药物及其制备方法
KR101806800B1 (ko) * 2015-09-30 2017-12-08 주식회사 루바마네이처 황금 추출물을 포함하는 복합 천연 방부제 및 그 제조방법
CN107951870A (zh) * 2016-10-14 2018-04-24 复旦大学 一种含有白藜芦醇的抑制耐药金葡菌的药物组合物
CA3052477A1 (en) * 2017-02-13 2018-08-16 Cooper Tire & Rubber Company Tire tread compound
CN108578572A (zh) * 2018-05-16 2018-09-28 昆明鸿顺畜禽养殖有限公司 一种防治产蛋鸡啄癖的中药饲料添加剂及其制备方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR930012031A (ko) * 1991-12-30 1993-07-20 이승동 포공영으로부터 항균활성이 높은 엑기스의 추출, 정제방법
JPH11228407A (ja) * 1998-02-06 1999-08-24 Alps Yakuhin Kogyo Kk フラボン誘導体によるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ−Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ：ＭＲＳＡ）に対するβ−ラクタム剤感受性誘導作用
CA2448606A1 (en) * 2001-06-01 2002-12-12 Incyte Genomics, Inc. Nucleic acid-associated proteins
CN101024640A (zh) * 2007-03-13 2007-08-29 温州医学院 蒲公英中的木质素及其抗菌活性和医药用途
CN101085050A (zh) * 2007-07-03 2007-12-12 清华德人西安幸福制药有限公司 清热解毒制剂药物及其制备方法
CN102198182A (zh) * 2011-06-03 2011-09-28 裴有刚 一种治疗间质性肺炎的药物
CN102861136A (zh) * 2012-09-14 2013-01-09 郭玲玲 一种治疗肺炎的药物及其制备方法
KR101806800B1 (ko) * 2015-09-30 2017-12-08 주식회사 루바마네이처 황금 추출물을 포함하는 복합 천연 방부제 및 그 제조방법
CN107951870A (zh) * 2016-10-14 2018-04-24 复旦大学 一种含有白藜芦醇的抑制耐药金葡菌的药物组合物
CA3052477A1 (en) * 2017-02-13 2018-08-16 Cooper Tire & Rubber Company Tire tread compound
CN108578572A (zh) * 2018-05-16 2018-09-28 昆明鸿顺畜禽养殖有限公司 一种防治产蛋鸡啄癖的中药饲料添加剂及其制备方法

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUAN LEI，ET AL: "A Stable Isotope Approach to Determine Herbivorous Diets of Wintering Geese at Dongting Lake, China", 《湿地科学》 *
WANG Y , ET AL: "Study on Antimicrobial susceptibility tests of different Chinese herbal Medicines against E.coli isolated from chicken colibacillosis", 《CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE》 *
云红: "热炎宁颗粒的抗菌作用研究", 《湖南中医杂志》 *
包梅，等: "热炎宁合剂联合万古霉素或头孢西丁干预MRSA的抗菌作用", 《时珍国医国药》 *
周晓琼，等: "热毒宁联合注射用头孢西丁钠治疗小儿肺炎的效果及价值分析", 《当代医学》 *
张喜荣，等: "联合用药治疗200例手足口病的临床观察", 《国外医学医学地理分册》 *
杨伟琴: "头孢他啶联用热炎宁治疗小儿肺炎的临床效果观察", 《海峡药学》 *
苏艳丽，等: "耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中西医治疗研究进展", 《中国中医急症》 *
高晓霞: "热炎宁质量控制方法与指标成分大黄素药代动力学研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）医药卫生科技缉》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111084836B (zh) 2021-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wintola et al. The antibacterial, phytochemicals and antioxidants evaluation of the root extracts of Hydnora africana Thunb. used as antidysenteric in Eastern Cape Province, South Africa
Owolabi et al. Antifungal and antibacterial activities of the ethanolic and aqueous extract of Kigelia africana (Bignoniaceae) stem bark
Alabi et al. Comparative studies on antimicrobial properties of extracts of fresh and dried leaves of Carica papaya (L) on clinical bacterial and fungal isolates
Okeke et al. Evaluation of extracts of the root of Landolphia owerrience for antibacterial activity
Kumarasamy et al. Screening seeds of Scottish plants for antibacterial activity
EP2826473B1 (en) Antibacterial use of patchoulol
Falkinham III et al. Proliferation of antibiotic-producing bacteria and concomitant antibiotic production as the basis for the antibiotic activity of Jordan's red soils
Mao et al. Diversity and antibacterial activity of fungal endophytes from Eucalyptus exserta
Abubakar et al. Phytochemical and antibacterial investigations of moringa (Moringa oleifera) leaf extract on selected bacterial pathogens
Agarwal et al. Evaluation of chemical composition and efficacy of Chinese propolis extract on Porphyromonas gingivalis and Aggregatibacter actinomycetemcomitans: An: in vitro: study
Bensizerara et al. Antimicrobial activity of xerophytic plant (Cotula cinerea Delile) extracts against some pathogenic bacteria and fungi
CN114948915B (zh) 百里醌在制备抗副猪嗜血杆菌药物中的应用
Shahwany et al. Antibacterial and anti-biofilm activity of three phenolic plant extracts and silver nanoparticles on Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumoniae
CN111084836B (zh) 一种热炎宁联合抗生素在干预抗病原菌的抗菌作用中的应用
Semwal et al. Antimicrobial activity of Phoebe lanceolata and Stephania glabra; preliminary screening studies
Saad et al. Determination of minimum inhibitory concentration utilizing microtitre plate bioassay for three Malaysian Herbal Medicines
Bindu et al. Antimicrobial activity screening of M. minuta extracts
Hamma et al. Phytochemical screening and antibacterial activity of the crude extract of scent leaf (Ocimum gratissimum) on Escherichia coli and Staphylococcus aureus
Kovalev et al. Antimicrobial activity of extracts of Iris hungarica and Iris sibirica
da S Rocha et al. Extracts and fractions of Croton L.(Euphorbiaceae) species with antimicrobial activity and antioxidant potential
Saâ et al. Antibacterial Effect of Bitter Leave (Vernonia amygdalina) on Klebsiella pneumoniae
Eze et al. Antibacterial, phytochemical and antioxidant properties of the leaf and root bark extract of Baphia nitida on bacteria associated with wound and enteric infections
Atika Antifungal activity of pare leaf (Momordica charantia L.) methanol extract
Kenneth et al. Phytochemical and antimicrobial properties of crude n-hexane and methanol extracts of Cola acuminata nuts
Slipchenko et al. Study of antibacterial properties of the emulgel with scutellaria baicalensis extract

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant