CN110927331A - 一种钉螺活性检测装置及活性检测和驱螺液药效检测方法 - Google Patents

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蒋俊明
张清东
费世民
徐蓉
孙启祥
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Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry
Southwest University of Science and Technology
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RESEARCH INST OF FORESTRY SCIENCE SICHUAN PROV
Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry
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Abstract

本发明公开了一种钉螺活性检测装置及活性检测和驱螺液药效检测方法，采用洗净烘干的培养皿，在培养皿内铺设有定性滤纸，所述定性滤纸上设有活性检测标识区，所述活性检测标识区是以定性滤纸的中心点为圆心设置的中心圆，并以中心圆为中心设有若干个同心圆。与现有技术相比，本发明通过将要检测的钉螺放置于活性检测标识区中心圆内，经过时间间隔观察测定每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价钉螺活性强弱和判断钉螺死活数量。在中心圆内滴下药液后，将需检测的活螺放置于检测标识区中心圆内，经过分段测试各圈内钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价驱螺效果，单位时间内距圆心点距离越远，驱螺效果越好。

Description

一种钉螺活性检测装置及活性检测和驱螺液药效检测方法
技术领域
本发明涉及一种检测方法，尤其涉及一种钉螺活性检测装置及活性检测和驱螺液药效检测方法。
背景技术
血吸虫病是危害人民身体健康最重要的，在全球74个国家和地区流行，流行区人口达6亿，曾有2亿人受感染。我国分布的是日本血吸虫(简称血吸虫病)。解放初期统计，全国约1千万余患者，一亿人口受到感染威胁，有螺面积近128亿平方米，全国有13个省、市、自治区有本病分布。
解放后，中国各级政府对血吸虫病防治极为重视，开展了大规模的群众性防治工作，取得了显著成绩。特别是近30年来，我国采取以治病、防病为主，并由卫生部门牵头，农、林、水、国土、教育等多部门结合的综合防治策略，目前血吸虫病的流行态势得到了根本性改变。四川已于2015年实现了全省域的阻断达标。但血吸虫病极易反复，重新爆发可能性极大，因此，对血吸虫病的防治仍不敢松懈，灭螺、防病仍是今后各流行区的重要任务之一。
血吸虫病主要是通过钉螺作为中间宿主来传播的，灭螺或控制钉螺种群数量是控制血吸虫病流行的主要途径。因此钉螺在疫区分布数量和密度是评价疫区血吸虫病流行风险的重要指标，也是各地疾控中心评估疫区达标的主要标准(国内消灭血吸病共分传播控制阶段、传播阻断阶段、传播消除阶段和消灭血吸虫四个阶段)。因此无论采用化学药物灭螺，还是综合治理，钉螺活性检测都是一个必不可少的步骤，同时也是开展钉螺药物研究的重要环节。
根据钉螺调查规范，钉螺死活鉴别方法是先将钉螺洗净后放入盛20℃左右水的培养皿或瓷杯中，观察2～3h，凡开厣活动，伸出软体组织，用针刺后有反应的为活螺；凡没有活动，针刺无反应的，用敲击法鉴别死活，即用小锤逐个轻轻敲碎钉螺外壳，软体组织不收缩者为死螺。叶品凯等2014年采用0.05％的中性红水溶液处理30分钟后，压碎螺壳，在体视显微镜下观察软体组织着色情况，着色的为活螺，不着色的为死螺。而钉螺活性检测主要采用试管爬行法，也称逃逸法，根据爬行高度判断活性强弱。
以上方法表明，传统方法存在2个主要问题：其一，活性检测和死活判断是分别检测；其二，检测是逐个检测，效率较低，较费工费时，量化数据不足。
发明内容
本发明的目的就在于提供一种解决上述问题，结合传统检测方法，发明了一种对钉螺活性以及驱螺液的驱螺效果综合检测装置及方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种钉螺活性检测装置，采用洗净烘干的培养皿，在培养皿内铺设有定性滤纸，所述定性滤纸上设有活性检测标识区，所述活性检测标识区是以定性滤纸的中心点为圆心设置的中心圆，并以中心圆为中心设有若干个同心圆。
作为优选，所述定性滤纸为直径90mm的圆形滤纸，所述定性滤纸上的中心圆直径为20mm，并以中心圆外边界向外按5mm的间距画5个同心圆，其中最外圆边界与滤纸边界间距为10mm。
一种钉螺活性检测方法，方法步骤如下，
a.根据测试钉螺数量，准备若干个培养皿，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸，并对培养皿进行标号；
c.将要检测的10-20只钉螺放于定性滤纸的圆心处，盖好培养皿的上盖；
d.按2小时、4小时、8小时、10小时、12小时、18小时、24小时间隔，记录每一圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，判断钉螺死活数量和活性强弱。
作为优选，步骤e中，判断钉螺死活数量方法为24小时内仍在中心圆圈内的数量为死螺，中心圆圈外活螺。
作为优选，步骤e中，进行活性强弱计算方法为：
钉螺活力系数＝各圈数钉螺数×所在圈数之和试验钉螺数活力×6；
数学表达式为：
Figure BSA0000183603720000031
A：钉螺活性指数；N0：放置钉螺总数；i：外圈数i＝0，1，2，3，4，5，6；Ni：各圈钉螺数；
其中中心圈为0，从中心圆至外，圈数分别0、1、2、3、4、5、6；钉螺全部在中心圆内，活力系数为0，全部至最外圈，活力系数为1。
一种驱螺液药效检测方法，方法步骤如下，
a.根据待测试驱螺液数量，准备若干个培养皿，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸，并对培养皿进行标号；
c.先在中心圆的圆心处滴2滴试验驱螺液溶液，随后将要检测的钉螺10-20只放于定性滤纸的圆心处，然后盖好培养皿的上盖；
d.分别按5分钟、10分钟、30分钟、60分钟，120分钟观测各圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价驱螺效果。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明将要检测的钉螺放置于活性检测标识区中心圆内，经过时间间隔观察测定每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价钉螺活性强弱，离圆心越远证明钉螺活性越强，24小时内逃跑出中心圆的钉螺为活螺，中心圆内的为死螺，以此判断钉螺死活数量。在中心圆内滴下药液后，将需检测的活螺放置于检测标识区中心圆内，经过分段测试各圈内钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价驱螺效果，单位时间内距圆心点距离越远，驱螺效果越好。
附图说明
图1为本发明钉螺活性检测装置的结构示意图；
图2为本发明定性滤纸的正面示意图。
图中：1、培养皿；2、定性滤纸；21、中心圆；22、同心圆。
具体实施方式
下面将对本发明作进一步说明。
实施例：参见图1、图2一种钉螺活性检测装置，采用洗净烘干的培养皿1，在培养皿1内铺设有定性滤纸2，所述定性滤纸2上设有活性检测标识区，所述活性检测标识区是以定性滤纸2的中心点为圆心设置的中心圆21，并以中心圆21为中心设有若干个同心圆22。所述定性滤纸2为直径90mm的圆形滤纸，所述定性滤纸2上的中心圆21直径为20mm，并以中心圆21外边界向外按5mm的间距画5个同心圆22，其中最外圆边界与滤纸边界间距为10mm。以本装置作为钉螺活性以及药性效果的检测装置。
一种钉螺活性检测方法，方法步骤如下，
a.根据测试钉螺数量，准备若干个培养皿1，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿1内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸2，并对培养皿1进行标号；
c.将要检测的10-20只钉螺放于定性滤纸2的圆心处，盖好培养皿1的上盖；
d.按2小时、4小时、8小时、10小时、12小时、18小时、24小时间隔，记录每一圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，判断钉螺死活数量和活性强弱。
判断钉螺死活数量方法为：24小时内仍在中心圆21圈内的数量为死螺，中心圆21圈外活螺。
进行活性强弱计算方法为：
钉螺活力系数＝各圈数钉螺数×所在圈数之和试验钉螺数活力×6；
数学表达式为：
Figure BSA0000183603720000051
A：钉螺活性指数；
N0：放置钉螺总数；
i：外圈数i＝0，1，2，3，4，5，6；
Ni：各圈钉螺数；
其中中心圈为0，从中心圆21至外，圈数分别0、1、2、3、4、5、6；钉螺全部在中心圆21内，活力系数为0，全部至最外圈，活力系数为1。
实验：一种植物酒精提取物的灭螺效果
Figure BSA0000183603720000061
于2017年10月发明人在四川仁寿洪峰乡的试验统计数据，每个浓度3个重复，每支试验放10只活螺，按浓度梯度浸泡72小时后的观测数据，数据统计计算时，将3只试验钉螺小计计算，即试验钉螺总数为30只。
计算结果显示：
1)随观测时间的延长，钉螺活力系数成增加趋势，基本于10小时后趋于稳定，而钉螺死亡率，随观测时间增加，而有所降低；
2)以浓度10ppm的毒杀后钉螺活性最低，依次为2.5ppm、5ppm、7.5ppm和1ppm，而从钉螺最终死亡率看，仍以10ppm最高，钉螺死亡率达73.3％，其次为2.5ppm，其它三个浓度对钉螺毒杀效果一致，即53.3％。
一种驱螺液药效检测方法，
a.根据待测试驱螺液数量，准备若干个培养皿1，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿1内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸2，并对培养皿1进行标号；
c.先在中心圆21的圆心处滴2滴试验驱螺液溶液，随后将要检测的钉螺10-20只放于定性滤纸2的圆心处，然后盖好培养皿1的上盖；
d.分别按5分钟、10分钟、30分钟、60分钟，120分钟观测各圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价驱螺效果。
实验：以2018年4月氯硝柳胺的驱螺数据为例，计算其驱螺效果。
表2. 1ppm氯硝柳胺驱螺系数计算表
Figure BSA0000183603720000071
表2说明，随着观测时间增加，驱螺系数也随之增加，若以120分钟均值看，1ppm驱螺系数为0.617，由于氯硝柳胺为目前公认的化学灭螺剂，其它的药物试验可以此标准，比它高，说明驱螺效果更好。
本发明者根据多年试验，结合传统检测方法，发明了一种新的综合检测方法，即可检测钉螺死活，同时也可定量检测钉螺活性强弱，同时该方法可用于药物对钉螺的驱螺作用大小的检测。
以上对本发明所提供的一种钉螺活性检测装置及活性检测驱螺液效检测方法进行了详尽介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，对本发明的变更和改进将是可能的，而不会超出附加权利要求所规定的构思和范围，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (6)

1.一种钉螺活性检测装置，其特征在于：采用洗净烘干的培养皿，在培养皿内铺设有定性滤纸，所述定性滤纸上设有活性检测标识区，所述活性检测标识区是以定性滤纸的中心点为圆心设置的中心圆，并以中心圆为中心设有若干个同心圆。
2.根据权利要求1所述的一种钉螺活性检测装置，其特征在于：所述定性滤纸为直径90mm的圆形滤纸，所述定性滤纸上的中心圆直径为20mm，并以中心圆外边界向外按5mm的间距画5个同心圆，其中最外圆边界与滤纸边界间距为10mm。
3.根据权利要求1所述的一种钉螺活性检测方法，其特征在于：方法步骤如下，
a.根据测试钉螺数量，准备若干个培养皿，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸，并对培养皿进行标号；
c.将要检测的10-20只钉螺放于定性滤纸的圆心处，盖好培养皿的上盖；
d.按2小时、4小时、8小时、10小时、12小时、18小时、24小时间隔，记录每一圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，判断钉螺死活数量和活性强弱。
4.根据权利要求3所述的一种钉螺活性检测方法，其特征在于：步骤e中，判断钉螺死活数量方法为24小时内仍在中心圆圈内的数量为死螺，中心圆圈外活螺。
5.根据权利要求3所述的一种钉螺活性检测方法，其特征在于：步骤e中，进行活性强弱计算方法为，
钉螺活力系数＝各圈数钉螺数×所在圈数之和试验钉螺数活力×6；
数学表达式为：
Figure FSA0000183603710000021
A：钉螺活性指数；N0：放置钉螺总数；i：外圈数i＝0，1，2，3，4，5，6；Ni：各圈钉螺数；
其中中心圈为0，从中心圆至外，圈数分别0、1、2、3、4、5、6；钉螺全部在中心圆内，活力系数为0，全部至最外圈，活力系数为1。
6.根据权利要求1所述的一种驱螺液药效检测方法，其特征在于：方法步骤如下，
a.根据待测试驱螺液数量，准备若干个培养皿，晾干或烘干备用；
b.在每个试验的培养皿内铺设一张带活性检测标识区的定性滤纸，并对培养皿进行标号；
c.先在中心圆的圆心处滴2滴试验驱螺液溶液，随后将要检测的钉螺10-20只放于定性滤纸的圆心处，然后盖好培养皿的上盖；
d.分别按5分钟、10分钟、30分钟、60分钟，120分钟观测各圈钉螺数量；
e.根据每一圈钉螺数量，通过统计学原理分析计算，评价驱螺效果。
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