CN110824166A - 一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于分子生物学技术领域，尤其是一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，针对现有的现有的肿瘤检测方法检测结果体现不明显且速度较慢问题，现提出如下解决方案，具体包括以下步骤：步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存。通过提取待检测血液进行处理，使用表面激光电离特异性结合的蛋白质后与检测标志物结合进行检测，具有快速、准确、高通量、灵敏度高等特点，加快了肿瘤标记物的筛选，检测过程安全简便、检测速度快，并且能够根据检测数据反映肿瘤的大小、估计疗效、预计肿瘤的复发和转移，为医护人员提供了较为安全可靠的治疗基础。

Description

一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法
技术领域
本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法。
背景技术
癌症已是造成人类死亡的第二大病因，我国新发癌症病例约占世界的1/4。世界卫生组织指出1/3的癌症可通过早期诊断及时治愈。肿瘤标志物是肿瘤细胞直接产生或由非肿瘤细胞经肿瘤细胞诱导产生的物质。研究表明，当肿瘤发生时，标志物浓度明显异常，标示着肿瘤的存在。肿瘤标志物检测研究为无创的癌症早期诊断提供新的思路。利用库伦阻塞、量子尺寸效应等特殊效应的微纳传感器实现肿瘤标志物定量检测也已经成为癌症早期诊断的主要研究方法。
现有的肿瘤检测方法大多是通过化学发光、酶免疫或放射免疫的方式进行检测，检测结果体现不明显且速度较慢，因此，发明一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法很有必要。
发明内容
本发明提出的一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，解决了现有的方法检测结果体现不明显且速度较慢问题。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，具体包括以下步骤：
步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存；
步骤二：将所需检测血清细胞取出后在消毒后的检测室内的检测台上，使用特定的吸附芯片对检测细胞进行吸附，吸附15-25min后形成特异性结合的蛋白质和非特异性结合的蛋白质，将非特异性结合的蛋白质洗脱得到含有特异性结合的蛋白质的待检测液；
步骤三：对待检测液通入适量的电流，与特异性结合的蛋白质形成荷电离子，同时将检测台表面温度提高至36℃，静置10-20min使其自然凝固，随后加入多肿瘤标志物进行检测；
步骤四：将检测过程中的数据和变化进行记录，并使用计算机通过质谱图进行进一步对比和鉴别，最终由计算机得出检测结果。
优选的，所述步骤一中血浆和血清在24h内检测需存放在2-6℃环境保持，血浆和血清在3-5天内检测需存放在-25- -15℃环境保持，血浆和血清长时间保持需存放在-60--80℃环境保存。
优选的，所述步骤二中检测台表面温度保持在25-35℃，检测前需进行多次消毒并与其他设备试剂隔离。
优选的，所述步骤三中使用激光发生器对特异性结合的蛋白质进行处理，使特异性结合的蛋白质表面符上电荷。
优选的，所述步骤三中肿瘤标志物根据检测需求分别选取不同种类的标志物，也可选用多种标志物分别对特异性结合的蛋白质进行检测。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过提取待检测血液进行处理，使用表面激光电离特异性结合的蛋白质后与检测标志物结合进行检测，具有快速、准确、高通量、灵敏度高等特点，加快了肿瘤标记物的筛选，检测过程安全简便、检测速度快，并且能够根据检测数据反映肿瘤的大小、估计疗效、预计肿瘤的复发和转移，为医护人员提供了较为安全可靠的治疗基础；本发明中，通过根据检测需求分别选取不同种类的标志物，使用多种标志物进行检测，能够同时对多种肿瘤疾病进行快速鉴定，便于在数量较多的情况下起到高效的检测效率，提高整体的工作效率。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例一：
一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，具体包括以下步骤：
步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存，血浆和血清在24h内检测需存放在2℃环境保持，血浆和血清在3-5天内检测需存放在-25℃环境保持，血浆和血清长时间保持需存放在-60℃环境保存；
步骤二：将所需检测血清细胞取出后在消毒后的检测室内的检测台上，检测台表面温度保持在25℃，检测前需进行多次消毒并与其他设备试剂隔离，使用特定的吸附芯片对检测细胞进行吸附，吸附15min后形成特异性结合的蛋白质和非特异性结合的蛋白质，将非特异性结合的蛋白质洗脱得到含有特异性结合的蛋白质的待检测液；
步骤三：对待检测液通入适量的电流，使用激光发生器对特异性结合的蛋白质进行处理，使特异性结合的蛋白质表面符上电荷，与特异性结合的蛋白质形成荷电离子，同时将检测台表面温度提高至36℃，静置10min使其自然凝固，随后加入多肿瘤标志物进行检测；
步骤四：将检测过程中的数据和变化进行记录，并使用计算机通过质谱图进行进一步对比和鉴别，最终由计算机得出检测结果。
实施例二：
一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，具体包括以下步骤：
步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存，血浆和血清在24h内检测需存放在6℃环境保持，血浆和血清在3-5天内检测需存放在-15℃环境保持，血浆和血清长时间保持需存放在-80℃环境保存；
步骤二：将所需检测血清细胞取出后在消毒后的检测室内的检测台上，检测台表面温度保持在35℃，检测前需进行多次消毒并与其他设备试剂隔离，使用特定的吸附芯片对检测细胞进行吸附，吸附25min后形成特异性结合的蛋白质和非特异性结合的蛋白质，将非特异性结合的蛋白质洗脱得到含有特异性结合的蛋白质的待检测液；
步骤三：对待检测液通入适量的电流，使用激光发生器对特异性结合的蛋白质进行处理，使特异性结合的蛋白质表面符上电荷，与特异性结合的蛋白质形成荷电离子，同时将检测台表面温度提高至36℃，静置20min使其自然凝固，随后加入多肿瘤标志物进行检测；
步骤四：将检测过程中的数据和变化进行记录，并使用计算机通过质谱图进行进一步对比和鉴别，最终由计算机得出检测结果。
实施例三：
一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，具体包括以下步骤：
步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存，血浆和血清在24h内检测需存放在4℃环境保持，血浆和血清在3-5天内检测需存放在-20℃环境保持，血浆和血清长时间保持需存放在-70℃环境保存；
步骤二：将所需检测血清细胞取出后在消毒后的检测室内的检测台上，检测台表面温度保持在30℃，检测前需进行多次消毒并与其他设备试剂隔离，使用特定的吸附芯片对检测细胞进行吸附，吸附20min后形成特异性结合的蛋白质和非特异性结合的蛋白质，将非特异性结合的蛋白质洗脱得到含有特异性结合的蛋白质的待检测液；
步骤三：对待检测液通入适量的电流，使用激光发生器对特异性结合的蛋白质进行处理，使特异性结合的蛋白质表面符上电荷，与特异性结合的蛋白质形成荷电离子，同时将检测台表面温度提高至36℃，静置15min使其自然凝固，随后加入多肿瘤标志物进行检测；
步骤四：将检测过程中的数据和变化进行记录，并使用计算机通过质谱图进行进一步对比和鉴别，最终由计算机得出检测结果。
实施例四：
参照上述实施例中提出的肿瘤标志物分子检测方法，检测所用的肿瘤标志物根据检测需求分别选取不同种类的标志物，也可选用多种标志物分别对特异性结合的蛋白质进行检测，具体选用参照下表：
肿瘤类型 首选标志物 备选标志物
肺癌 NSE,CYFRA21-1 CEA ,Scc,ACTH,CT
乳腺癌 CA15-3 CEA,CA549,HCG, Ferritin,PR,ER
胃癌 CA72-4 CA19-9,CA50,CEA
肝癌 AFP AFU,GGT,CEA
结肠癌 CEA CA19-9,CA 125,CA 50,CA72-4
胰腺癌 CA19-9 CEA,CA242, CA50
骨髓癌 β2-M /
针对不同的肿瘤检测选用合适的标志物进行检测，上表中简略举例常见的肿瘤检测及标志物的种类，针对不同的患者和不同部位的肿瘤检测，在步骤一中的血液采集前也需要有不同的注意事项，如抗雄激素治疗前列腺癌时可抑制PSA 产生，导致PSA假阴性结果；唾液和汗液污染标本可使 SCC升高，导尿和直肠镜检查后，血液PSA和PAP 值可升高；肝、肾功能异常和胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成肿瘤标志物如CEA、ALP、GGT、细胞因子等浓度增高，采集前应分别针对不同的情况对患者进行提醒和确认，确保检测结果的准确。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤一：对所需检测部位的肿瘤进行血液采集，血液标本采集后及时使用离心设备进行处理，将血浆和血清分离后分别放置在低温环境下保存；
步骤二：将所需检测血清细胞取出后在消毒后的检测室内的检测台上，使用特定的吸附芯片对检测细胞进行吸附，吸附15-25min后形成特异性结合的蛋白质和非特异性结合的蛋白质，将非特异性结合的蛋白质洗脱得到含有特异性结合的蛋白质的待检测液；
步骤三：对待检测液通入适量的电流，与特异性结合的蛋白质形成荷电离子，同时将检测台表面温度提高至36℃，静置10-20min使其自然凝固，随后加入多肿瘤标志物进行检测；
步骤四：将检测过程中的数据和变化进行记录，并使用计算机通过质谱图进行进一步对比和鉴别，最终由计算机得出检测结果。
2.根据权利要求1所述的一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，其特征在于，所述步骤一中血浆和血清在24h内检测需存放在2-6℃环境保持，血浆和血清在3-5天内检测需存放在-25- -15℃环境保持，血浆和血清长时间保持需存放在-60- -80℃环境保存。
3.根据权利要求1所述的一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，其特征在于，所述步骤二中检测台表面温度保持在25-35℃，检测前需进行多次消毒并与其他设备试剂隔离。
4.根据权利要求1所述的一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，其特征在于，所述步骤三中使用激光发生器对特异性结合的蛋白质进行处理，使特异性结合的蛋白质表面符上电荷。
5.根据权利要求1所述的一种便捷的肿瘤标志物分子检测方法，其特征在于，所述步骤三中肿瘤标志物根据检测需求分别选取不同种类的标志物，也可选用多种标志物分别对特异性结合的蛋白质进行检测。
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