CN110799542A

CN110799542A - 抗-b7h3抗体用于治疗中枢神经系统癌症的用途

Info

Publication number: CN110799542A
Application number: CN201880040310.2A
Authority: CN
Inventors: K·克雷默; N-K·章; O·巴德斯加德; C·J·默勒圣佩德罗
Original assignee: Y Monoclonal Antibody Pharmaceutical Co Ltd; Memorial Sloan Kettering Cancer Center
Current assignee: Y Monoclonal Antibody Pharmaceutical Co Ltd; Memorial Sloan Kettering Cancer Center
Priority date: 2017-05-12
Filing date: 2018-05-14
Publication date: 2020-02-14
Also published as: BR112019023776A2; EA201992683A1; EP3635012A1; RU2019140833A; JP2023016969A; RU2019140833A3; CA3062335A1; EP3635012A4; AU2018265888A1; US20200197546A1; KR20200008580A; JP2020520382A; WO2018209346A1

Abstract

本公开的主题提供了抗‑B7H3抗体用于治疗中枢神经系统(CNS)中的癌症的用途，该癌症包括转移至CNS的肿瘤，特别是软脑膜癌。

Description

抗-B7H3抗体用于治疗中枢神经系统癌症的用途

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年5月12日提交的美国临时申请第62/505,558号的优先权，其全部内容通过引用以其整体并入，并要求其优先权。

序列表

该说明书通过引用并入于2018年5月14日通过EFS提交的序列表。根据37C.F.R.§1.52(e)(5)，序列表文本文件，标识为0727340700SL，文件大小为21,716字节，并于2018年5月14日创建。以电子方式提交于2018年5月14日的序列表没有超出说明书的范围，因此不包含新内容。

发明领域

本公开的主题涉及抗-B7H3抗体用于治疗中枢神经系统(CNS)中的癌症的用途，所述癌症包括转移至CNS的肿瘤，尤其是软脑膜癌(leptomeningeal carcinomatosis)。

背景技术

成人CNS肿瘤包括原发性CNS肿瘤(由CNS内部产生的癌细胞形成)和转移至CNS的肿瘤(癌细胞从起源于机体其他器官的原发性肿瘤扩散至CNS)。每年在美国诊断出约20,000例新的原发性CNS肿瘤病例，估计美国所有癌症患者中有24-45％患有脑转移。软脑膜(包围大脑和脊髓的内部两层膜)已成为导致复发的药聚区(sanctuary)部位。当肿瘤细胞进入脑脊液通路、到达大脑和脊髓内较远的位置、定居并生长时，发生软脑膜转移(LM；也称为软脑膜癌)。人们普遍认为LM总是致命的。

原发性CNS肿瘤是青少年和年轻人(15-39岁)中第三常见的癌症，也是该年龄组第三大最常见的癌症死亡原因。另一方面，比起儿童，转移性CNS肿瘤在成人中最常见。因此，仍然需要针对成人CNS肿瘤的创新治疗。

附图说明

图1.与所有经¹³¹I-8H9治疗的患者相比，在cRIT 8H9前在MSK治疗的小儿神经母细胞瘤患者的生存率。

图2.与经¹³¹I-8H9治疗的患者相比，2003年之前在MSK治疗的小儿神经母细胞瘤患者的生存率。使用Kaplan-Meier分析，对用完整的CNS定向疗法治疗的64名患者(蓝线)、用¹³¹I-8H9和其他疗法治疗的29名患者(红线)和在2003年开始该方案之前在MSK治疗的19名患者(紫色)的生存率进行比较。

图3.基于初次诊断神经母细胞瘤时的年龄的存活率。

图4A-4B.在进入研究时患有可测量疾病的患者组(4A和4B)首次放射影像学改善的时间。水平条形图的长度等于受试者参与方案03-133或研究后随访的持续时间。通过将治疗前扫描与治疗后扫描比较，确定放射影像学改善。改善定义为完全缓解(completeresponse)、部分缓解(partial response)或无疾病证据(no evidence of disease)。◆菱形是在首个131I-8H9周期之后的首次放射影像学改善的日期。

向右的空心箭头指示在其状态日期活着的患者。▼向下的实心箭头指示死亡的日期。Y轴代表个体患者，X轴代表时间。Y＝有放射学反应(radiological response)，N＝没有所述的放射反应。

图5.多灶性局灶性CNS神经母细胞瘤缓解>7年。CNS复发表明无数幕上、幕下和脊髓转移。

图6.亚组分析和对总体患者生存率的影响。通过对用¹³¹I-8H9治疗的患者亚组进行Kaplan-Meier分析，评估了特定变量对总体患者生存的影响。(A)在初次诊断神经母细胞瘤时≤18个月(蓝线)和>18个月(红线)的患者中评估了年龄对生存率的影响。(B)在经¹³¹I-8H9治疗的具有扩增MYCN的患者(蓝线)中和具有未扩增MYCN肿瘤的患者(红线)中，评估了MYCN状态对生存率的影响。(C)在从2003-2009入选方案的患者(蓝线)中和在从2010-2016入选的患者(红线)中，评估了入选方案的年代对生存率的影响。(D)在未经CSI治疗的患者(蓝线)中以及在¹³¹I-8H9 cRIT之前用CSI治疗的患者(红线)中，评估了先前的CSI疗法对生存率的影响。

发明内容

本公开的主题涉及抗-B7H3抗体用于治疗CNS癌症的用途，该癌症包括原发性CNS癌症和转移至CNS的癌症。在具体的实施方式中，将抗-B7H3抗体施用于CNS中，以治疗成人受试者中癌症的软脑膜转移。

在某些非限制性实施方式中，本公开的主题提供用于治疗人受试者中的癌症的方法，其包括将治疗有效量的特异性结合B7H3的抗体或其抗原结合片段施用于受试者的CNS中。在某些实施方式中，癌症是原发性CNS癌症或转移至CNS的癌症。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段与放射性同位素和/或治疗形式(therapeutic modality)(例如，螯合剂化合物或抗癌剂)结合(conjugate)。在某些实施方式中，人受试者是成人。在某些实施方式中，癌症转移至软脑膜。在某些实施方式中，转移至CNS的癌症是在CNS外部产生的实体瘤。在某些实施方式中，实体瘤选自肉瘤、黑素瘤、卵巢癌和横纹肌肉瘤。在某些实施方式中，实体瘤选自黑素瘤、卵巢癌和横纹肌肉瘤。在某些实施方式中，中枢神经系统(CNS)癌症选自神经母细胞瘤和原发性复发性CNS恶性肿瘤。在某些实施方式中，转移至CNS的癌症是选自乳腺癌(例如三阴性乳腺癌)和肺癌(例如小细胞肺癌和非小细胞肺癌)的实体瘤。在某些实施方式中，抗体或抗原结合片段来源于8H9和/或在结构上与其相关，其包括，但不限于，鼠源、人源化、嵌合和人形式的8H9(见下文)。

在某些非限制性实施方式中，本公开的主题提供了用于治疗人受试者中的癌症的方法，其包括将治疗有效量的与放射性同位素和/或其他治疗形式结合的特异性结合人B7H3的抗体或其抗原结合片段施用于该受试者。在某些实施方式中，癌症是包括B7H3阳性癌症或肿瘤细胞的任何癌症。在某些实施方式中，癌症对于受试者的CNS来说是原发性的或转移性的，并且将抗体施用于受试者的CNS中。在某些实施方式中，受试者是成人。在某些实施方式中，该受试者不是成人。

在某些非限制性实施方式中，与特异性结合B7H3的抗体或其抗原结合片段选自鼠源抗体或其抗原结合片段、人源化抗体或其抗原结合片段、嵌合抗体或其抗原结合片段和人抗体或其抗原结合片段。在某些实施方式中，抗体是鼠源抗体或其抗原结合片段。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段与B7H3的FG-环结合。在某些实施方式中，抗体或抗原结合片段是8H9、来源于其和/或在结构上与其相关，包括但不限于鼠源、人源化、嵌合和人形式的8H9(见下文)。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括：(a)包括SEQ ID NO:3(NYDIN)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；(b)包括SEQ ID NO:4(WIFPGDGSTQY)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；(c)包括SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；(d)包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；(e)包括SEQ ID NO:7(YASQSIS)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；和/或(f)包括SEQ ID NO:8(QNGHSFPLT)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括：(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区；和/或(b)包括SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的轻链链可变区。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段至少包括：(a)包括SEQ ID NO:3(NYDIN)、SEQ ID NO:4(WIFPGDGSTQY)或SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR；和(b)包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)、SEQ ID NO:7(YASQSIS)或SEQ IDNO:8(QNGHSFPLT)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR。

在某些实施方式中，将抗体或其抗原结合片段鞘内施用于受试者。在某些实施方式中，将抗体或其抗原结合片段通过脑室内装置施用于受试者。在某些实施方式中，脑室内装置是脑室内导管。在某些实施方式中，脑室内装置是脑室内贮器(reservoir)。

在某些实施方式中，与抗体或片段缀合(conjugate)的放射性同位素是¹²⁴I、¹³¹I、¹⁷⁷Lu或^99mTc。

在某些实施方式中，本公开的方法还包括将一个治疗周期(treatment cycle)的抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者。在某些实施方式中，该方法包括将两个治疗周期的所述抗体或其抗原结合片段施用于受试者。在某些实施方式中，一个治疗周期包括剂量测定(dosimetry)剂量和治疗剂量。在某些实施方式中，治疗有效量为约10mCi至约200mCi。在某些实施方式中，治疗有效量为约50mCi。

在某些实施方式中，该方法相对于未接受治疗的对照受试者或对照受试者群体延长受试者的生存期。在某些实施方式中，该方法相对于未接受治疗的对照受试者或对照受试者群体延长受试者中癌症的缓解期(remission)。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括与SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的同源性为至少约80％、约90％、约95％、约99％或约100％的氨基酸序列。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段具有SEQ ID NO:17的氨基酸224-241。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段具有SEQ ID NO:17的氨基酸242-267。

在某些实施方式中，治疗形式选自一种或更多种螯合剂化合物、一种或更多种化学治疗剂、一种或更多种检查点抑制剂和放射疗法。在某些实施方式中，将并非放射性同位素的治疗形式与抗体结合。在某些实施方式中，治疗形式是螯合剂化合物。在某些实施方式中，放射性同位素经由螯合剂化合物例如DOTA、DOTA样(DOTA-like)化合物或DTPA与抗体或其抗原结合片段间接结合。在某些实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段与螯合剂化合物缀合，其中螯合剂化合物与放射性同位素结合。在某些实施方式中，螯合剂化合物是DOTA或DTPA。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段与螯合剂化合物(例如DOTA、DTPA或相关化合物)缀合，螯合剂在体外或体内与放射性同位素(例如¹²⁴I、¹³¹I、¹⁷⁷Lu或^99mTc)结合。

在某些实施方式中，治疗形式是单克隆抗体3F8(MoAb 3F8)、粒细胞-巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)或其组合。在某些实施方式中，将治疗形式施用于受试者的CNS中和/或全身性施用于受试者。在某些实施方式中，将治疗形式与抗体或其抗原结合片段同时或相继施用于受试者。

另一方面，本公开提供特异性结合人B7H3的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与螯合剂化合物缀合，其中所述螯合剂化合物与放射性同位素结合。

在某些实施方式中，抗体选自鼠源抗体及其抗原结合片段、人源化抗体及其抗原结合片段、嵌合抗体及其抗原结合片段和人抗体及其抗原结合片段。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段是鼠源抗体或其抗原结合片段。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段与B7H3的FG-环结合。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括：a)包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；b)包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；c)包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；d)包括SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；e)包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；和f)包括SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段包括：(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区；和(b)包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的轻链链可变区。

在某些实施方式中，放射性同位素是¹²⁴I、¹³¹I、¹⁷⁷Lu或^99mTc。在某些实施方式中，螯合剂化合物是DOTA或DTPA。

在某些实施方式中，治疗形式是单克隆抗体3F8(MoAb 3F8)、粒细胞-巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)或其组合。在某些实施方式中，将治疗形式施用于受试者的CNS中和/或全身性施用于受试者。在某些实施方式中，其中将治疗形式与抗体或其抗原结合片段同时或相继施用于受试者。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段是DOTA-8H9缀合物(conjugate)或DTPA-8H9缀合物。在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段是¹⁷⁷Lu-DOTA-8H9缀合物或¹⁷⁷Lu-DTPA-8H9缀合物或(177)LU-CHX-A″-DTPA-8H9。

在某些实施方式中，抗体或其抗原结合片段是单链可变片段(scFv)。在某些实施方式中，scFv包括SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列的一部分。

在另一方面，本公开提供包括本文公开的抗体或其抗原结合片段的组合物。

在另一方面，本公开提供包括本文公开的抗体或其抗原结合片段以及药学上可接受的载体的药物组合物。

在另一方面，本公开提供用于对受试者中的肿瘤进行成像的方法，其包括将本文公开的抗体或其抗原结合片段施用于受试者。

在另一方面，本公开提供用作药物的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供用于治疗癌症的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供用于治疗中枢神经系统(CNS)癌症的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供用于治疗转移性CNS神经母细胞瘤、肉瘤、黑素瘤、卵巢癌和原发性复发性CNS恶性肿瘤的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供在对受试者中的肿瘤进行成像的方法中使用的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供在本文公开的方法中使用的本文公开的抗体或其抗原结合片段。

在另一方面，本公开提供本文公开的抗体或其抗原结合片段在制备用于对携带该抗体或其抗原结合片段所识别的抗原的肿瘤细胞进行成像的药物中的用途。

在另一方面，本公开提供本文公开的抗体或其抗原结合片段在制备用于本文公开的方法的药物中的用途。

A.在某些非限制性实施方式中，本公开的主题提供用于治疗成年人受试者中的CNS癌症的方法，包括将治疗有效量的特异性结合人B7H3的抗体或其抗原结合片段施用于受试者的CNS中，其中癌症是原发性中枢神经系统(CNS)癌症或转移至CNS的癌症，并且抗体或片段与放射性同位素和/或其他治疗形式结合。

A1.根据A所述的方法，其中癌症转移至软脑膜。

A2.根据A所述的方法，其中转移至CNS的癌症是非CNS实体瘤。

A3.根据A2所述的方法，其中实体瘤选自黑素瘤、卵巢癌和横纹肌肉瘤。

A4.根据A所述的方法，其中抗体选自鼠源抗体、人源化抗体、嵌合抗体和人抗体。

A5.根据A所述所述的方法，其中抗体是鼠源抗体。

A6.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段与B7H3的FG-环结合。

A7.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段包括：

(a)包括SEQ ID NO:3(NYDIN)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1；

(b)包括SEQ ID NO:4(WIFPGDGSTQY)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2；

(c)包括SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3；

(d)包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1；

(e)包括SEQ ID NO:7(YASQSIS)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2；和

(f)包括SEQ ID NO:8(QNGHSFPLT)所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

A8.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段包括：

(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区，和

(b)包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的轻链可变区。

A9.根据A所述的方法，其中将抗体或其抗原结合片段鞘内施用于受试者。

A10.根据A所述的方法，其中将抗体或其抗原结合片段通过脑室内装置施用于受试者。

A11.根据A所述的方法，其中脑室内装置是脑室内导管。

A12.根据A所述的方法，其中脑室内装置是脑室内贮器。

A13.根据A所述的方法，放射性同位素为¹³¹I、¹⁷⁷Lu或^99mTc。

A14.根据A所述的方法，包括将一个治疗周期的抗体或其抗原结合片段施用于受试者。

A15.根据A所述的方法，包括将两个治疗周期的抗体或其抗原结合片段施用于受试者。

A16.根据A所述的方法，其中一个治疗周期包括剂量测定剂量和治疗剂量。

A17.根据A所述的方法，其中治疗有效量为约10mCi至约200mCi或者约10mCl至约100mCi。

A18.根据A所述的方法，其中治疗有效量为约50mCi。

A19.根据A所述的方法，其中该方法延长受试者的生存期。

A20.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段结合人B7H3多肽，其包括与SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的同源性为至少约80％、约90％、约95％、约99％或约100％的氨基酸序列。

A21.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段结合人B7H3多肽，其包括SEQID NO:17所示的氨基酸序列。

A22.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段结合人B7H3多肽，其具有SEQID NO:17的氨基酸224-241。

A23.根据A所述的方法，其中抗体或其抗原结合片段结合人B7H3多肽，其具有SEQID NO:17的氨基酸242-267。

A24.根据A所述的方法，进一步包括向受试者施用额外的治疗形式，例如，但不限于，一种或更多种化学治疗剂、一种或更多种检查点抑制剂和/或放射疗法。可以将这些一种或更多种额外的治疗与本文所述的B7H3定向的抗体或抗原结合片段同时或相继施用于CNS中和/或全身性施用。

具体实施方式

本文引用的所有出版物、专利和其他参考文献通过引用整体并入本公开。

出于清楚公开的目的而不是为了限制，详细描述分为以下小节：

1.定义

2.抗-B7H3抗体

3.治疗方法

1.定义

在以下描述中，关于术语的使用将遵循某些约定。通常，本文所用的术语旨在与本领域技术人员已知的那些术语的含义一致地解释。

如本文所用，术语“抗体”不仅是指完整的抗体分子，而且也指保留免疫原结合能力的抗体分子的片段。这样的片段在本领域中也是公知的，并且在体外和体内均经常使用。因此，如本文所用，术语“抗体”不仅是指完整的免疫球蛋白分子，而且也指公知的活性片段F(ab')₂和Fab。F(ab')₂和缺少完整抗体Fc片段的Fab片段从循环中清除得更快，并且可以具有更少的完整抗体的非特异性组织结合(Wahl等人,J.Nucl.Med.24:316-325(1983))。本发明的抗体包括完整的全天然抗体、双特异性抗体；嵌合抗体；Fab、Fab'、单链V区片段(scFv)、融合多肽和非常规抗体。在某些实施方式中，抗体是糖蛋白，其至少包括通过二硫键相互连接的两个重(H)链和两个轻(L)链。每个重链包括重链可变区(本文缩写为V_H)和重链恒定(C_H)区。重链恒定区包括三个结构域CH1、CH2和CH3。每个轻链由轻链可变区(在本文中缩写为V_L)和轻链恒定C_L区。轻链恒定区包括一个结构域C_L。V_H和V_L区可以进一步细分为称作互补决定区(CDR)的高变区，其间散布有更加保守的称作框架区(FR)的区域。每个V_H和V_L由三个CDR和四个FR组成，它们从氨基端到羧基端按以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，上述宿主组织或因子包括免疫系统的各种细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1 q)。

如本文可互换地使用，术语抗体的“抗原结合部分”、“抗原结合片段”或“抗原结合区”是指抗体的与抗原结合并使抗体具有抗原特异性的区或部分；抗原结合蛋白的片段，例如，抗体包括保留特异性结合抗原(例如肽/HLA复合物)的能力的一个或更多个抗体片段。已经显示，抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来执行。包括在术语抗体的“抗原结合部分”内的结合片段的实例包括Fab片段，由V_L、V_H、C_L和CH1结构域组成的单价片段；F(ab)₂片段，包括在铰链区由二硫键连接的两个Fab片段的二价片段；由V_H和CH1结构域组成的Fd片段；由抗体的单臂的V_L和V_H结构域组成的Fv片段；由V_H结构域组成的dAb片段(Ward等人,1989Nature 341:544-546)；和分离的互补决定区(CDR)。

“CDR”定义为抗体的互补决定区氨基酸序列，其是免疫球蛋白重链和轻链的高变区。参见，例如，Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，美国国立卫生研究院第4届美国卫生和公共服务部(4th U.S.Department of Health and HumanServices,National Institutes of Health)(1987)。如本文所用，术语“高变区”或“HVR”是指抗体可变结构域的在序列上高变(“互补决定区”或“CDR”)和/或在结构上形成界定的环(“高变环”)和/或含有与抗原接触的残基(“抗原接触”)的每个区域。通常，抗体在可变区中包括三个重链和三个轻链CDR或CDR区。CDR为抗体与抗原或表位的结合提供大多数接触残基。

而且，尽管Fv片段的两个结构域V_L和V_H由单独的基因编码，但是可以使用重组方法通过人工的肽连接体将它们连接起来，使其能够被制备成单一的蛋白质链，其中V_L和V_H区配对形成单价分子。这些被称作单链Fv(ScFv)；参见，例如，Bird等人,1988Science 242:423-426；和Huston等人,1988Proc.Natl.Acad.Sci.85:5879-5883。这些抗体片段使用本领域技术人员已知的常规技术获得，并且以与完整抗体相同的方式对片段进行效用的筛选。

如本文所用，“特异性结合B7H3”的抗体是指以5×10^-7M或更小、1×10^-7M或更小、5×10^-8M或更小、1×10^-8M或更小、5×10^-9M或更小、1×10^-9M或更小、5×10^-10M或更小、1×10^-10M或更小、5×10^-11M或更小或者1×10^-11M或更小的K_d与B7H3(例如人B7H3)结合的抗体。

与参考抗体结合抗原(例如，B7H3)的“竞争结合的抗体”或“交叉竞争结合的抗体”是指在竞争检验(competition assay)中阻断了参考抗体与抗原(例如，B7H3)结合的约50％或更高例如约55％或更高、约60％或更高、约65％或更高、约70％或更高、约75％或更高、约80％或更高、约85％或更高、约90％或更高、约95％或更高、约98％或更高或者约99％或更高的抗体，相反地，参考抗体在竞争检验中阻断了抗体与抗原(例如B7H3)的结合的约50％或更高例如约55％或更高、约60％或更高、约65％或更高、约70％或更高、约75％或更高、约80％或更高、约85％或更高、约90％或更高、约95％或更高、约98％或更高或者约99％或更高。示例性的竞争检验描述于以下文献中：“Antibodies”，Harlow和Lane(冷泉港出版社，冷泉港，纽约(Cold Spring Harbor Press,Cold Spring Harbor,NY))(1988)。在某些实施方式中，参考抗体是鼠源性抗-B7H3抗体。在某些实施方式中，参考抗体是8H9。

与参考抗体结合抗原(例如，B7H3)的“竞争结合的抗体或抗原结合片段”或“交叉竞争结合的抗体或抗原结合片段”是指在竞争检验中阻断了参考抗体与抗原(例如，B7H3)结合的约50％或更高例如约55％或更高、约60％或更高、约65％或更高、约70％或更高、约75％或更高、约80％或更高、约85％或更高、约90％或更高、约95％或更高、约98％或更高或者约99％或更高的抗体或抗原结合片段，相反地，参考抗体在竞争检验中阻断了抗体或抗原结合片段与抗原(例如B7H3)的结合的约50％或更高例如约55％或更高、约60％或更高、约65％或更高、约70％或更高、约75％或更高、约80％或更高、约85％或更高、约90％或更高、约95％或更高、约98％或更高或者约99％或更高。示例性的竞争检验描述于以下文献中：“Antibodies”，Harlow和Lane(冷泉港出版社，冷泉港，纽约)(1988)。

序列同源性或序列同一性通常使用序列分析软件(例如，威斯康星大学生物技术中心遗传计算机组，威斯康星大学麦迪逊大道1710号，威斯康辛州53705(the GeneticsComputer Group,University of Wisconsin Biotechnology Center,1710UniversityAvenue,Madison,Wis.53705)的序列分析软件包，BLAST、BESTFIT、GAP或PILEUP/PRETTYBOX程序)进行测量。这种软件通过对各种置换、缺失和/或其他修饰指定同源性程度来匹配相同或类似的序列。在确定同一性程度的示例性方法中，可以使用BLAST程序，其概率得分在e^-3和e^-100之间指示密切相关的序列。

药剂例如抗-B7H3抗体或其抗原结合片段的“治疗有效量”是指剂量上有效并在必要的时间段内有效达到所需治疗或预防结果的量，上述结果例如，治疗癌症(例如，CNS原发性癌症或转移至CNS的癌症，如软脑膜)。

如本文所指，“受试者”可以是人或非人受试者，例如，但不限于，非人灵长类、狗、猫、马、啮齿动物、兔子等。成人受试者是达到至少18岁或至少20岁的受试者。成人非人受试者是已经达到性成熟的受试者。不是成人的人受试者是小儿受试者。

如本文所用，“施用于受试者的CNS中”是施用于受试者的脑脊液、蛛网膜下腔、脑膜组织和/或神经系统(脑和/或脊髓)组织中的一种或更多种中。

如本文所用，“治疗”(及其语法变化，例如“治疗”或“治疗”)是指试图改变被治疗的个体的自然病程的临床干预，其可以用于预防或者在临床病理学的过程中进行。合意的治疗效果包括，但不限于，延长生存期、预防疾病复发、减轻症状、减轻疾病的任何直接或间接病理后果、预防转移、降低疾病进展速度、缓解或减轻疾病状态以及缓解或改善预后。在某些实施方式中，本公开的主题的抗体用于延缓疾病的发展或减慢疾病的进展，上述疾病例如原发于CNS的癌症或转移至CNS的癌症(例如软脑膜)。

如本文所用，术语“约”或“大约”是指本领域普通技术人员所确定的特定值在可接受误差范围内，其将部分取决于如何测量或确定该数值，即测量系统的极限。例如，按照本领域的实践，“约”可以表示3个或3个以上的标准偏差内。可替代地，“约”可以表示给定值至多20％、优选至多10％、更优选至多5％、再更优选至多1％的范围。另外可选地，特别是关于生物系统或方法，该术语可以意指在数值的数量级内，例如5倍以内或更优选2倍以内。

如本文所述，除非另有说明，否则任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围均应理解成包括在所述范围内的任何整数的值，以及在适当时包括其分数(例如整数的十分之一和百分之一)。

2.抗-B7H3抗体

本公开的主题提供抗-B7H3抗体或其抗原结合片段，其用于治疗癌症，例如原发于CNS的癌症或转移至CNS(例如至薄壁组织或软脑膜)的癌症。抗-B7H3抗体可以是鼠源抗体、人源化抗体、嵌合抗体或人抗体。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与B7H3多肽结合。在某些实施方式中，B7H3多肽是人B7H3多肽。B7H3多肽可以具有与以下提供的SEQ ID NO:17的同源性(在此同源性可以使用标准软件例如BLAST或FASTA确定)为至少约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约99％或约100％的氨基酸序列或其片段，和/或可以任选包括至多一个或至多两个或至多三个氨基酸置换(例如，保守性置换)。在某些实施方式中，B7H3多肽包含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，B7H3多肽可以具有作为SEQ ID NO:17的连续部分的氨基酸序列，其长度为至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少40、至少50、至少60、至少70、至少80、至少90、至少100、至少150、至少200、至少250、至少300、至少350、至少400、至少450、至少500和至多534个氨基酸。另外可选地或额外地，在非限制性的各种实施方式中，B7H3多肽具有SEQ ID NO:17的氨基酸1-534、1-50、50-100、100-150、150-200、200-250、224-241、242-267、241-267、250-300、300-350或350-400、400-450、450-500和500-534的氨基酸序列。在某些实施方式中，B7H3多肽包括SEQ ID NO:17的氨基酸224-241。SEQ ID NO:17的氨基酸224-241具有氨基酸序列NPVLQQDAHSSVTITPQR(SEQ ID NO:15)。在某些实施方式中，B7H3多肽包括SEQ ID NO:17的氨基酸242-267。SEQ ID NO:17的氨基酸242至267具有氨基酸序列SPTGAVEVQVPEDPVVALVGTDATLR(SEQ ID NO:16)。

MLRRRGSPGMGVHVGAALGALWFCLTGALEVQVPEDPVVALVGTDATLCCSFSPEPGFSLAQLNLIWQLTDTKQLVHSFAEGQDQGSAYANRTALFPDLLAQGNASLRLQRVRVADEGSFTCFVSIRDFGSAAVSLQVAAPYSKPSMTLEPNKDLRPGDTVTITCSSYQGYPEAEVFWQDGQGVPLTGNVTTSQMANEQGLFDVHSILRVVLGANGTYSCLVRNPVLQQDAHSSVTITPQRSPTGAVEVQVPEDPVVALVGTDATLRCSFSPEPGFSLAQLNLIWQLTDTKQLVHSFTEGRDQGSAYANRTALFPDLLAQGNASLRLQRVRVADEGSFTCFVSIRDFGSAAVSLQVAAPYSKPSMTLEPNKDLRPGDTVTITCSSYRGYPEAEVFWQDGQGVPLTGNVTTSQMANEQGLFDVHSVLRVVLGANGTYSCLVRNPVLQQDAHGSVTITGQPMTFPPEALWVTVGLSVCLIALLVALAFVCWRKIKQSCEEENAGAEDQDGEGEGSKTALQPLKHSDSKEDDGQEIA(SEQ ID NO:17)

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是鼠源抗体。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是抗体8H9，其公开于美国专利号：7,737,258、7,666,424、8,148,154、7,740,845、8,414,892、9,062,110和8,501,471，以及国际专利公开号WO2008/116219，通过引用将其整体并入。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段包括：包括SEQ ID NO:3(NYDIN)所示氨基酸序列的重链可变区CDR1、包括SEQ ID NO:4(WIFPGDGSTQY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR2、包括SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR3、包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR1、包括含有SEQID NO:7(YASQSIS)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR2和/或包括SEQ ID NO:8(QNGHSFPLT)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体包括(a)包括SEQ IDNO:1所示氨基酸序列的重链可变区和/或(b)包括SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的轻链可变区。SEQ ID NO:1-8提供如下。

QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTNYDINWVRQRPEQGLEWIGWIFPGDGSTQYNEKFKGKATLTTDTSSSTAYMQLSRLTSEDSAVYFCARQTTATWFAYWGQGTLVTVSAAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK(SEQ IDNO:1)

DIVMTQSPATLSVTPGDRVSLSCRASQSISDYLHWYQQKSHESPRLLIKYASQSISGIPSRFSGSGSGSDFTLSINSVEPEDVGVYYCQNGHSFPLTFGAGTKLELKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC(SEQ IDNO:2)

NYDIN(SEQ ID NO:3)

WIFPGDGSTQY(SEQ ID NO:4)

QTTATWFAY(SEQ ID NO:5)

RASQSISDYLH(SEQ ID NO:6)

YASQSIS(SEQ ID NO:7)

QNGHSFPLT(SEQ ID NO:8)

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与抗体8H9交叉竞争结合B7H3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与参考抗体交叉竞争结合B7H3，该参考抗体包括：包括SEQ ID NO:3(NYDIN)所示氨基酸序列的重链可变区CDR1、包括SEQID NO:4(WIFPGDGSTQY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR2、包括SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR3、包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR1、包括SEQ ID NO:7(YASQSIS)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR2和包括SEQID NO:8(QNGHSFPLT)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与参考抗体交叉竞争结合B7H3，该参考抗原包括(a)包括SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的重链可变区和(b)包括SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的轻链可变区。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段结合B7H3上的与抗体8H9相同的表位。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段结合B7H3上的与参考抗体相同的表位，该参考抗体包括：包括SEQ ID NO:3(NYDIN)所示氨基酸序列的重链可变区CDR1、包括SEQ ID NO:4(WIFPGDGSTQY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR2、包括SEQ ID NO:5(QTTATWFAY)所示氨基酸序列的重链可变区CDR3、包括SEQ ID NO:6(RASQSISDYLH)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR1、包括SEQ ID NO:7(YASQSIS)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR2和包括SEQ ID NO:8(QNGHSFPLT)所示氨基酸序列的轻链可变区CDR3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段结合B7H3上的与参考抗体相同的表位上，该参考抗体包括(a)包括SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的重链可变区和(b)包括SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的轻链可变区。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是单链可变片段(scFv)。scFv可以是鼠源、人源化或人scFv。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是鼠源scFv。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是包括SEQ ID NO:9所示氨基酸序列(下文提供)的scFv。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是包括SEQ ID NO:13所示氨基酸序列(下文提供)的scFv。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是包括SEQ ID NO:14所示氨基酸序列(下文提供)的scFv。

QVKLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTNYDINWVRQRPEQGLEWIGWIFPGDGSTQYNEKFKGKATLTTDTSSSTAYMQLSRLTSEDSAVYFCARQTTATWFAYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPTTLSVTPGDRVSLSCRASQSISDYLHWYQQKSHESPRLLIKYASQSISGIPSRFSGSGSGSDFTLSINSVEPEDVGVYYCQNGHSFPLTFGAGTKLELKQAA(SEQ ID NO:9)

QVKLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTNYDINWVRQRPEQGLEWIGWIFPGDGSTQYNEKFKGKATLTTDTSSSTAYMQLSRLTSEDSAVYFCARQTTATWFAYWGQGTTVTVSSDGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPTTLSVTPGDRVSLSCRASQSISDYLHWYQQKSHESPRLLIKYASQSISGIPSRFSGSGSGSDFTLSINSVEPEDVGVYYCQNGHSFPLTFGAGTKLELKQAA(SEQ ID NO:13)

QVKLQQSGAELVEPGASVKLSCKASGYTFTNYDINWVRQRPEQGLEWIGWIFPGDGSTQYNEKFKGKATLTTDTSSSTAYMQLSRLTSEDSAVYFCARQTTATWFAYWGQGTTVTVSSDGGGSGGGGSGGGGSDIELTQSPTTLSVTPGDQVSLSCRASQSISDYLHWYQQKSHESPQLLIKYASQSISGIPSRFSGSGSGSDFTLSINSVEPEDVGVYYCQNGHSFPLTFGAGTELELEQAA(SEQ ID NO:14)

编码SEQ ID NO:9的核苷酸序列是SEQ ID NO:10(有义)和SEQ ID NO:11(互补)。SEQ ID NO:10和11提供如下。

caggtcaaac tgcagcagtc tggggctgaa ctggtaaagc ctggggcttc agtgaaattgtcctgcaagg cttctggcta caccttcaca aactatgata taaactgggt gaggcagagg cctgaacagggacttgagtg gattggatgg atttttcctg gagatggtag tactcaatac aatgagaagt tcaagggcaaggccacactg actacagaca catcctccag cacagcctac atgcagctca gcaggctgac atctgaggactctgctgtct atttctgtgc aagacagact acggctacct ggtttgctta ctggggccaa gggaccacggtcaccgtctc ctcaggtgga ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggatcgg acatcgagctcactcagtct ccaaccaccc tgtctgtgac tccaggagat agagtctctc tttcctgcag ggccagccagagtattagcg actacttaca ctggtaccaa caaaaatcac atgagtctcc aaggcttctc atcaaatatgcttcccaatc catctctggg atcccctcca ggttcagtgg cagtggatca gggtcagatt tcactctcagtatcaacagt gtggaacctg aagatgttgg agtgtattac tgtcaaaatg gtcacagctt tccgctcacgttcggtgctg ggaccaagct ggagctgaaa caggcggccg c(SEQ ID NO:10)

gtccagtttg acgtcgtcag accccgactt gaccatttcg gaccccgaag tcactttaacaggacgttcc gaagaccgat gtggaagtgt ttgatactat atttgaccca ctccgtctcc ggacttgtccctgaactcac ctaacctacc taaaaaggac ctctaccatc atgagttatg ttactcttca agttcccgttccggtgtgac tgatgtctgt gtaggaggtc gtgtcggatg tacgtcgagt cgtccgactg tagactcctgagacgacaga taaagacacg ttctgtctga tgccgatgga ccaaacgaat gaccccggtt ccctggtgccagtggcagag gagtccacct ccgccaagtc cgcctccacc gagaccgcca ccgcctagcc tgtagctcgagtgagtcaga ggttggtggg acagacactg aggtcctcta tctcagagag aaaggacgtc ccggtcggtctcataatcgc tgatgaatgt gaccatggtt gtttttagtg tactcagagg ttccgaagag tagtttatacgaagggttag gtagagaccc taggggaggt ccaagtcacc gtcacctagt cccagtctaa agtgagagtcatagttgtca caccttggac ttctacaacc tcacataatg acagttttac cagtgtcgaa aggcgagtgcaagccacgac cctggttcga cctcgacttt gtccgccggc g(SEQ ID NO:11)

在某些实施方式中，编码与B7H3多肽结合的scFv的核苷酸序列具有SEQ ID NO:12所示的核苷酸序列(提供如下)。

caggtcaaac tgcagcagtc tggggctgaa ctggtaaagc ctggggcttc agtgaaattgtcctgcaagg cttctggcta caccttcaca aactatgata taaactgggt gaggcagagg cctgaacagggacttgagtg gattggatgg atttttcctg gagatggtag tactcaatac aatgagaagt tcaagggcaaggccacactg actacagaca catcctccag cacagcctac atgcagctca gcaggctgac atctgaggactctgctgtct atttctgtgc aagacagact acggctacct ggtttgctta ctggggccaa gggaccacggtcaccgtctc ctcagatgga ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggatcgg acatcgagctcactcagtct ccaaccaccc tgtctgtgac tccaggagat agagtctctc tttcctgcag ggccagccagagtattagcg actacttaca ctggtaccaa caaaaatcac atgagtctcc aaggcttctc atcaaatatgcttcccaatc catctctggg atcccctcca ggttcagtgg cagtggatca gggtcagatt tcactctcagtatcaacagt gtggaacctg aagatgttgg agtgtattac tgtcaaaatg gtcacagctt tccgctcacgttcggtgctg ggaccaagct ggagctgaaa caggcggccg c(SEQ ID NO:12)

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是人源化抗体。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是人源化抗-B7H3抗体，其公开于国际专利公开号WO2016/033225中，其通过引用以其整体并入本文。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体是人源化B7-H3-反应性抗体，其公开于美国专利号8,802,091和9,441,049中，其通过引用以其整体并入本文。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与国际专利公开号WO2016/033225中公开的人源化抗-B7H3抗体交叉竞争结合B7H3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段结合B7H3上的与国际专利公开号WO2016/033225中公开的人源化抗-B7H3抗体相同的表位上。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与美国专利号8,802,091和9,441,049中公开的人源化B7-H3-反应性抗体交叉竞争结合B7H3。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段结合B7H3上的与美国专利号8,802,091和9,441,049中公开的人源化B7-H3-反应性抗体相同的表位上。

例如，但不作为限制，交叉竞争抗体可以与参考抗体(例如，抗体8H9，国际专利公开号WO2016/033225中公开的人源化抗-B7H3抗体，或美国专利号8,802,091和9,441,049中公开的人源化B7-H3-反应性抗体)结合相同的表位区，例如相同的表位、相邻的表位或重叠的表位。

这些交叉竞争抗体可以基于其与参考抗体交叉竞争的能力在标准B7H3结合检验中加以识别。例如，可以使用Biacore分析、ELISA检验或流式细胞术来证明与参考抗体的交叉竞争。测试抗体抑制参考抗体与B7H3(例如人B7H3)结合的能力证明，测试抗体可以与参考抗体竞争与B7H3的结合，因此结合B7H3上的与参考抗体相同的表位区。在某些实施方式中，交叉竞争抗体结合B7H3(例如人B7H3)上的与参考抗体相同的表位。

在竞争测定的非限制性实例中，固定化抗原，例如B7H3(例如，人B7H3)多肽，可以在包括结合抗原的第一标记抗体和测试其与第一抗体竞争结合抗原的能力的第二未标记抗体的溶液中孵育。在某些实施方式中，第二抗体可以存在于杂交瘤上清液中。作为对照，将固定化抗原在包括第一标记抗体但不包括第二未标记抗体的溶液中孵育。在允许第一抗体与抗原结合的条件下孵育后，去除过量的未结合抗体，并测量与固定化抗原缔合(associated)的标记物的量。如果测试样品中与固定化抗原缔合的标记物的量相对于对照样品大大减少，例如，大于约50％，则表明第二抗体正在与第一抗体竞争结合抗原。参见Harlow和Lane(1988)Antibodies:ALaboratory Manual第14章(冷泉港实验室，冷泉港，纽约)。

在某些实施方式中，交叉竞争抗体对于B7H3(例如人B7H3)的K_d为约5×10^-7M或更小、约1×10^-7M或更小、约5×10^-8M或更小、约1×10^-8M或更小、约5×10^-9M或更小、约1×10^- ⁹M或更小、约5×10^-10M或更小或者约1×10^-10M或更小。

在某些实施方式中，抗-B7H3抗体与放射性同位素缀合，产生细胞毒性放射性药物，也称作放射性免疫缀合物。可以与抗体缀合用于诊断或治疗的放射性同位素的实例包括，但不限于，²¹¹At、¹⁴C、⁵¹Cr、⁵⁷Co、⁵⁸Co、⁶⁷Cu、¹⁵²Eu、⁶⁷Ga、³H、¹¹¹In、⁵⁹Fe、²¹²Pb、¹⁷⁷Lu、³²P、²²³Ra、²²⁴Ra、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁷⁵Se、³⁵S、^99mTc、²²⁷Th、⁸⁹Zr、⁹⁰Y、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹³¹I和α-发射粒子。Α-发射粒子的非限制性实例包括²⁰⁹Bi、²¹¹Bi、²¹²Bi、²¹³Bi、²¹⁰Po、²¹¹Po、²¹²Po、²¹⁴Po、²¹⁵Po、²¹⁶Po、²¹⁸Po、²¹¹At、²¹⁵At、²¹⁷At、²¹⁸At、²¹⁸Rn、²¹⁹Rn、²²⁰Rn、²²²Rn、²²⁶Rn、²²¹Fr、²²³Ra、²²⁴Ra、²²⁶Ra、²²⁵Ac、²²⁷Ac、²²⁷Th、²²⁸Th、²²⁹Th、²³⁰Th、²³²Th、²³¹Pa、²³³U、²³⁴U、²³⁵U、²³⁶U、²³⁸U、²³⁷Np、²³⁸Pu、²³⁹Pu、²⁴⁰Pu、²⁴⁴Pu、²⁴¹Am、²⁴⁴Cm、²⁴⁵Cm、²⁴⁸Cm、²⁴⁹Cf和²⁵²Cf。在某些实施方式中，放射性同位素可以在^94mTc、⁶⁴Cu、⁶⁸Ga、⁶⁶Ga、⁷⁶Br、⁸⁶Y、⁸²Rb、^110mIn、¹³N、¹¹C和¹⁸F当中选择。制备放射性免疫缀合物的方法是本领域已确立的。放射性免疫缀合物的实例是市售的，包括Zevalin^TM(IDECPharmaceuticals)和Bexxar^TM(Corixa Pharmaceuticals)，类似方法可以用于使用本发明的抗体制备放射性免疫缀合物。

放射性标记的抗体药剂可以根据本领域公知的技术制造。例如，单克隆抗体可以通过与碘化钠和/或碘化钾以及化学氧化剂例如次氯酸钠或酶促氧化剂例如乳过氧化物酶接触而被碘化。提供的抗体药剂可以通过配体交换法用锝-99m标记，例如，通过将高锝酸盐用亚锡溶液还原，将经还原的锝螯合中Sephadex柱上，并将抗体应用于该柱。在某些实施方式中，使用直接标记技术来标记提供的抗体剂，例如通过孵育高锝酸盐、还原剂例如SNCI2、缓冲溶液例如邻苯二甲酸钠钾盐溶液和抗体。通常用于将以金属离子形式存在的放射性同位素与抗体结合的中间官能团是二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)或亚乙基二胺四乙酸(EDTA)或1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)或对氨基苄基-DOTA(DOTA-Bn)。放射性同位素可以通过例如剂量测定法(dosimetry)来检测。

1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(也称为DOTA)是具有式(CH₂CH₂NCH₂CO₂H)₄的有机化合物。该分子由中心的12元四氮杂(即含有四个氮原子)环组成。DOTA用作络合剂(complexing agent)，尤其是对镧系元素离子。它的络合物(complexes)具有作为造影剂和癌症治疗的医学应用。有若干种形式的DOTA，每种都具有不同的动力学和稳定性常数。双官能螯合剂可以结合金属，并仍具有用于共价连接肽的化学反应性官能团。

通过将四个羧基之一作为酰胺连接，可以将DOTA与单克隆抗体缀合。

戊酸或二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)是由具有五个羧甲基的二亚乙基三胺主链组成的氨基多元羧酸。DTPA的分子式为C₁₄H₂₃N₃O₁₀，IUPAC名称为2-[双[2-[双(羧甲基)氨基]乙基]氨基]乙酸。DTPA是用于制备放射性药物的乙二胺四乙酸盐和螯合剂。DTPA可以螯合未结合的细胞外放射性免疫治疗剂的金属部分，从而将放射性免疫治疗剂局部聚集至更高浓度，提高肿瘤细胞放射细胞毒性，同时使正常组织免受放射细胞毒性的影响。此外，DTPA在放射成像过程中作为与放射性同位素的络合物使用。作为螯合剂，DTPA通过形成至多8个键来包裹金属离子。过渡金属通常形成少于八个的配位键，因此在与这些金属形成络合物后，DTPA仍具有与其他试剂结合的能力。

在某些实施方式中，每抗体药剂用于缀合的DOTA分子或DTPA分子的数目选自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个DOTA分子或DTPA分子。在某些实施方式中，DOTA或DTPA是中间官能团。在某些实施方式中，放射性标记的抗体包含2或3个DOTA分子或DTPA分子。

以用⁹⁰Y、¹¹¹In、⁶⁸Ga和¹⁷⁷Lu放射性标记的DOTA-肽使用时，可实现高比活性。对DTPA-肽进行放射性标记时，可以实现甚至更高的的比活性。使用DOTA-肽的主要缺点是放射性金属的掺入需要加热和时间，而DTPA-肽则可以在室温下进行放射性标记。虽然一定数量的放射性对于通过成像系统检测目标组织摄取是必需的，但可以施用一致的低质量剂量DTPA-肽。

在某些实施方式中，放射性标记的抗体药剂是¹⁷⁷Lu-DOTA-8H9缀合物或¹⁷⁷Lu-DTPA-8H9缀合物或(177)LU-CHX-A″-DTPA-8H9。

在某些实施方式中，通过施用治疗有效量的¹⁷⁷Lu-DOTA-8H9、¹⁷⁷Lu-DTPA-8H9或(177)LU-CHX-A″-DTPA-8H9，治疗小儿人受试者的癌症，其包括但不限于原发于或转移至CNS的癌症。在某些相关的实施方式中，将¹⁷⁷Lu-DOTA-8H9、¹⁷⁷Lu-DTPA-8H9或(177)LU-CHX-A″-DTPA-8H9施用于小儿人受试者的CNS中。

3.治疗方法

可以将本公开主题的抗-B7H3抗体以足以预防、抑制或减少癌症进展的量施用于患有癌症(例如，原发于CNS的癌症或转移至CNS的癌症)的人受试者(例如，成人受试者)用于治疗性治疗。进展包括，例如，癌症的生长、侵袭、转移和/或复发。

在某些实施方式中，相对于未接受所述治疗的对照受试者或对照受试者群体，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段延长受试者的生存期。在某些实施方式中，生存期延长至少约25％、或至少约30％、或至少约50％。

在某些实施方式中，相对于不接受所述治疗的对照受试者或对照受试者群体，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段延长受试者中癌症的缓解期(remission)。

在某些实施方式中，该方法包括将治疗有效量的抗-B7H3抗体或其抗原结合片段(或其药物组合物)施用于受试者，以在受试者中产生抗癌效果。在某些实施方式中，“抗癌效果”是指以下中的一项或多项：总体(aggregate)癌细胞质量的减小、癌细胞生长速率的降低、癌细胞增殖的减少、肿瘤质量的减小、肿瘤体积的减小、癌细胞增殖的减小、癌细胞生长速率的降低或癌症转移的减少。在某些实施方式中，抗癌效果是癌细胞数量的减小。在某些实施方式中，在癌症是实体瘤的情况下，抗癌效果可以是肿瘤大小的减小和/或肿瘤生长速率的降低。在某些实施方式中，抗癌效果是脑脊液中NB细胞的减少。在某些实施方式中，抗癌效果是总体癌细胞负荷的减小。在某些实施方式中，抗癌效果是细胞增殖速率的降低和/或细胞死亡速率的提高。在某些实施方式中，抗癌效果是生存期的延长。在某些实施方式中，抗癌效果是相对于未接受所述治疗的对照受试者或对照受试者群体直至复发的间隔延长。

治疗有效量可以取决于疾病的严重程度和受试者自身免疫系统的一般状态。在某些实施方式中，抗-B7H3抗体或其抗原结合片段与放射性同位素例如本文公开的那些(例如¹³¹I)缀合。在某些实施方式中，治疗有效量为约1mCi至约200mCi，例如，约1mCi至约10mCi、约10mCi至约200mCi、约10mCi至约160mCi、约10mCi至约120mCi、约10mCi至约100mCi、约10mCi至约70mCi、约10mCi至约50mCi、约50mCi至约200mCi、约100mCi至约200mCi、约100mCi至约120mCi、约120mCi至约160mCi、约50mCi至约100mCi、约40mCi至约60mCi、约60mCi至约80mCi或者约80mCi至约100mCi。在某些实施方式中，治疗有效量为约40mCi至约60mCi。在某些实施方式中，治疗有效量为约10mCi、约20mCi、约30mCi、约40mCi、约50mCi、约60mCi、约70mCi、约80mCi、约90mCi、约100mCi、约110mCi、约120mCi、约130mCi、约140mCi、约150mCi、约160mCi、约170mCi、约180mCi、约190mCi或约200mCi。在某些实施方式中，治疗有效量为约50mCi。在某些实施方式中，治疗有效量不大于约100mCi。在某些实施方式中，治疗有效量不大于约50mCi。

在某些实施方式中，该方法包括将一个治疗周期的抗-B7H3抗体或其抗原结合片段施用于受试者。在某些实施方式中，该方法包括将至多两个、至多三个、至多四个或至多五个治疗周期的抗-B7H3抗体或其抗原结合片段施用于受试者。在某些实施方式中，该方法包括将两个治疗周期的抗-B7H3抗体或其抗原结合片段施用于受试者。在某些实施方式中，该方法包括将额外的治疗周期(例如，两个新的治疗周期)施用于复发的患者。

在某些实施方式中，一个治疗周期包括治疗剂量(treatment dose)。在某些实施方式中，治疗剂量为约1mCi至约100mCi，例如，约1mCi至约10mCi、约10mCi至约100mCi、约10mCi至约40mCi、约10mCi至约70mCi、约10mCi至约50mCi、约50mCi至约100mCi、约40mCi至约60mCi、约60mCi至约80mCi或者约80mCi至约100mCi。在某些实施方式中，治疗剂量为约40mCi至约60mCi。在某些实施方式中，治疗剂量为约50mCi。在某些实施方式中，在一个治疗周期的第1周期间施用治疗剂量。在某些实施方式中，在一个治疗周期的第2周期间施用治疗剂量。

在某些实施方式中，一个治疗周期包括剂量测定剂量(dosimetry dose)和治疗剂量。在某些实施方式中，剂量测定剂量为约1mCi至约10mCi，例如,约1mCi至约3mCi、约3mCi至约5mCi、约5mCi至约7mCi或者约7mCi至约10mCi。在某些实施方式中，剂量测定剂量为约1mCi、约2mCi、约3mCi、约4mCi、约5mCi、约6mCi、约7mCi、约8mCi、约9mCi或约10mCi。在某些实施方式中，剂量测定剂量为约2mCi。在某些实施方式中，剂量测定剂量在治疗剂量之前施用。在某些实施方式中，在一个治疗周期的第1周期间施用剂量测定剂量。

在某些实施方式中，一个治疗周期还包括观察期。在某些实施方式中，观察期持续约2周，随后是治疗剂量。在某些实施方式中，一个治疗周期还包括治疗后评估。在某些实施方式中，治疗后评估持续约1周，随后是观察期。

在某些实施方式中，在已经用一种或更多种其他癌症治疗对受试者进行治疗之后给予所述治疗。在某些实施方式中，在用一种或更多种其他癌症治疗对受试者进行治疗的同时或相继给予以上治疗。这些其他癌症治疗方法的实例包括但不限于手术、化疗、检查点抑制剂和放射。

在某些实施方式中，如果在首个治疗周期中的治疗剂量之后(例如，在首个治疗周期的治疗剂量后约4周)受试者没有表现出任何客观的疾病进展(例如，如通过神经学或放射影像学检查确定)，并且没有经历任何3级或4级不良事件(例如，如美国国家癌症研究所(National Cancer Institute，NCI)所定义)，则将第二治疗周期施用于受试者。3级不良事件通常被定义成“严重和不期望的不良事件(需要住院治疗或侵入性干预；灌输(transfusion)；选择性介入放射治疗；治疗性内窥镜检查或手术的显著症状)”。4级不良事件通常被定义成“威胁生命或致残的不良事件(并发急性，威胁生命的代谢或心血管并发症，例如循环衰竭、出血、败血症；威胁生命的生理后果；需要重症监护或紧急侵入性手术；紧急介入放射影像学程序，治疗性内窥镜检查或手术)”。可控制的发烧、头痛、恶心和呕吐并非意料之外的3级或4级不良事件。

在某些实施方式中，每个治疗周期，受试者接受至多约0.5mg、至多约1mg、至多约2mg、至多约3mg、至多约4mg、至多约5mg、至多约6mg、至多约7mg、至多约8mg、至多约9mg、至多约10mg、至多约15mg或至多约20mg的抗-B7H3抗体。在某些实施方式中，每个治疗周期，受试者接受至少约0.5mg、至少约1mg、至少约2mg、至少约3mg、至少约4mg或至少约5mg的抗-B7H3抗体。

在某些实施方式中，一个治疗周期持续约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周或约10周。在某些实施方式中，一个治疗周期持续约5周。

在某些实施方式中，在施用抗-B7H3抗体之前，除去等于要注射的抗-B7H3抗体的体积的脑脊髓液。在某些实施方式中，在施用抗-B7H3抗体期间注射速率不超过1mL/min。

给药方案(dosing schedules)也将随疾病的状态和受试者的状态而变化，并且通常在每天单次推注(bolus)剂量或连续输注(infusion)至多次施用的范围内，或者通过治疗医师和受试者的病情指示。

可通过抗-B7H3抗体治疗的医疗状况的鉴别完全在本领域技术人员的能力和知识之内。例如，患有原发性CNS癌症或转移至CNS的癌症的人个体适合于施用抗-B7H3抗体。本领域的临床医生可以例如通过使用临床测试、身体检查和医学/家族史，容易地确定个体是否是这种治疗的候选者。在某些实施方式中，癌症转移至软脑膜。在某些实施方式中，癌症是实体瘤。

可以用抗-B7H3抗体治疗的原发性CNS癌症的非限制性实例包括松果体母细胞瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、脊索瘤、星形细胞瘤、成胶质细胞瘤、非典型畸胎样横纹肌样瘤(ATRT)、具有多层玫瑰结的胚胎性肿瘤(embryonal tumor with multilayered rosettes，ETMR)和脉络丛癌。在某些实施方式中，癌症选自松果体母细胞瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、脊索瘤、星形细胞瘤和成胶质细胞瘤。在某些实施方式中，癌症是实体瘤，例如，松果体母细胞瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、成胶质细胞瘤或脊索瘤。

可以用抗-B7H3抗体治疗的转移至CNS(例如转移至软脑膜)的癌症的非限制性实例包括肉瘤、视网膜母细胞瘤、黑素瘤、卵巢癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌和肺癌(例如小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC))。在某些实施方式中，癌症选自黑素瘤、卵巢癌、横纹肌肉瘤、乳腺癌和肺癌(例如，小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC))。在某些实施方式中，癌症是黑素瘤。在某些实施方式中，癌症是卵巢癌。

在某些实施方式中，可以通过抗-B7H3抗体治疗的癌症是8H9反应性的。8H9反应性癌症在美国专利公开号2002/0102264中公开，其通过引用以其整体并入本文。8H9反应性癌症包括，但不限于，不同谱系的癌症：神经外胚层、间质(mesenchymal)和上皮(epithelial)。

可以使用任何合适的方法或途径将抗-B7H3抗体或其抗原结合片段施用于CNS中。在某些实施方式中，将抗-B7H3抗体或其抗原结合片段鞘内施用。在某些实施方式中，将抗-B7H3抗体或其抗原结合片段通过脑室内装置施用。在某些实施方式中，脑室内装置是脑室内导管。在某些实施方式中，脑室内装置是脑室内贮器，例如，但不限于，Ommaya贮器。在某些实施方式中，施用可以通过脊髓穿刺进行或脑实质内进行。

抗-B7H3抗体可以以额外地包括药学上可接受的载体的组合物的形式施用。适当的药学上可接受的载体包括，例如，水、盐水、磷酸盐缓冲盐水、右旋糖(dextrose)、甘油、乙醇等中的一种或更多种，以及其组合。药学上可接受的载体可以进一步包括少量辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲剂，其延长结合蛋白质的保质期或有效性。如本领域所公知，可以配制注射剂的组合物，以便在施用于哺乳动物后提供活性成分的快速、持续或延迟的释放。

在某些实施方式中，向受试者施用额外的治疗形式。治疗形式的非限制性实例包括化学治疗剂、检查点抑制剂和放射疗法。在某些实施方式中，治疗形式是单克隆抗体3F8(MoAb 3F8)、粒细胞-巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)或其组合。可以将这些一种或更多种额外的治疗与本文所述的B7H3-定向抗体或抗原结合片段同时或相继施用于CNS中和/或全身性施用。

实施例

通过参考以下实施例将更好地理解本公开的主题，实施例作为本公开的主题的示例提供，而不是作为限制。

实施例1：使用¹³¹I-8H9治疗转移至中枢神经系统的神经母细胞瘤的方法.

背景

转移至中枢神经系统的神经母细胞瘤(CNS NB)难以治疗且几乎总是致命的(中位生存期<6个月，36个月生存率为<10％)。用放射性碘化单克隆抗体¹³¹I-8H9进行的脑室内室间隔放射免疫疗法(compartmental radioimmunotherapy，cRIT)提供了根除脑脊液中NB细胞的治疗策略。

进行临床研究以证明¹³¹I-8H9 cRIT延长CNS NB受试者的生存期的临床疗效。

研究设计和治疗方案

纪念斯隆-凯特琳癌症中心(MSK)的合格受试者具有CNS NB的放射影像学或病理学确认。入选的受试者接受(1)结合¹³¹I-8H9 cRIT加全身免疫疗法的基于MSK替莫唑胺(temozolamide)/伊立替康(irinotecan)的CNS挽救方案，或(2)¹³¹I-8H9 cRIT的非方案疗法(non-regimen therapies)。数据表示成诊断出CNS转移后的总体生存率。

¹³¹I-8H9的一个治疗周期如下：

第1周：¹³¹I-8H9(剂量测定剂量：2mCi成像测试剂量)

第2周：¹³¹I-8H9(治疗剂量)

第3周和第4周：观察期

第5周：头部和脊柱的重复MRI，脑脊液细胞学检查

受试者接受至多两个周期的¹³¹I-8H9治疗。为了测量累积毒性和药代动力学，并评估对¹³¹I-8H9(例如人抗-小鼠抗体)的全身免疫反应，在最后一次脑室内注射后4周没有客观疾病进展(通过神经学或放射影像学检查确定)且没有意料之外的3级或4级毒性(可控制的发烧或头痛、恶心、呕吐不包括在内)的受试者有资格以第一疗程期间的相同施用剂量进行第二次注射。在第二次治疗注射后，受试者接受相同的治疗计划和治疗后评估。

结果

自方案启动以来，接受MSK治疗的105名CNS NB患者当中，有80名经¹³¹I-8H9 cRIT治疗，其包括57名完成了完整的CNS挽救方案。用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的80名受试者的中位年龄为4.39岁。

该研究的起始剂量对于每个受试者为每周期10mCi ¹³¹I-8H9，剂量水平范围至80mCi ¹³¹I-8H9。8明确患有神经母细胞瘤CNS/LM转移的受试者接受了10mCi至70mCi的剂量。在10-50mCi的剂量范围下，比活性约平均为5mCi/mg ¹³¹I-8H9，在50-100mCi的剂量范围下，约为50mCi/mg ¹³¹I-8H9。3岁或以下的受试者对其剂量进行了调整。

在19名可评估癌症的受试者中，用¹³¹I-8H9治疗在7名(36％)受试者中产生了至少部分反应。在分析中，经¹³¹I-8H9治疗的受试者中有45名(56％)在CNS转移后仍生存了4.8-152个月(中位58个月)，包括有36名(45％)生存了至少36个月，有23名(29％)生存了至少60个月。相比之下，在MSK在cRIT成为该机构的标准治疗之前(1989-2003年)治疗的19名CNSNB受试者的历史群体在CNS转移后生存了2天至44个月(中位数5.5个月)，包括有2名(11％)生存了至少36个月，无一生存超过44个月。对经¹³¹I-8H9治疗的受试者进行的亚组分析，确定了初次诊断NB的年龄(<18个月)和复发性疾病的定位(与CNS隔离)是与生存成正相关的因素。MYCN致癌基因的扩增、入选研究的时间期间或者补充的全脑全脊髓放疗(craniospinal irradiation)都不是与这些受试者生存相关的因素。

结论

在MSK治疗的CNS NB患者中有76％接受了¹³¹I-8H9 cRIT，大约一半完成了用¹³¹I-8H9 cRIT进行的积极的CNS挽救方案。在42％的受试者中，尽管有晚期的CNS受累，包括有或没有软脑膜疾病的多发性实质肿块，但超过50％的用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的患者仍然生存，近50％至少生存36个月。¹³¹I-8H9 cRIT代表了CNS NB治疗的重大进展，其是几乎总是致命的疾病，目前尚无令人满意的标准疗法。

实施例2：使用¹³¹I-8H9的鞘内放射免疫疗法用于成人受试者的中枢神经系统/软脑膜(CNS/LM)肿瘤.

年龄大于18岁且患有CNS/LM肿瘤的13名成人受试者使用cRIT用¹³¹I-8H9治疗。这13名成人受试者的平均年龄为35.1岁，范围从19.4至53.5岁。被治疗的13名成人受试者的诊断包括原发性CNS肿瘤(松果体母细胞瘤N＝1、室管膜瘤N＝2、成神经管细胞瘤N＝3、脊索瘤N＝1)和转移至CNS的肿瘤(黑素瘤N＝3、横纹肌肉瘤N＝2、卵巢癌N＝1)。

剂量测定剂量治疗后，出于进行性疾病和依从性考虑，从研究中移除了13名受试者中的2名。根据实施例1中公开的方案，用¹³¹I-8H9cRIT对其余11名成人受试者进行治疗，治疗剂量为10mCi至80mCi。11名受试者中的5名通过经历第二周期的¹³¹I-8H9疗法接受第二治疗剂量。总体而言，这11名受试者接受的平均剂量为约50mCi，总剂量范围在约10至约160mCi。

首次治疗剂量后的MRI复查显示2名受试者(均患有转移性横纹肌肉瘤)的放射影像学改善；三名受试者的疾病稳定；五名受试者进行性疾病；一名患者在进入方案时没有疾病。¹³¹I-8H9 cRIT治疗后的平均生存时间大于一年。在接受¹³¹I-8H9 cRIT治疗的11名成人受试者中，首次注射¹³¹I-8H9后，1名受试者生存92个月，1名生存17个月，两名生存约6个月。

尽管为了清楚理解的目的已经通过图示和实施例的方式详细描述了本公开的主题，但是这些描述和实施例不应解释为限制本公开的主题的范围。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容通过引用明确地以其整体并入。

实施例3：在表达中枢神经系统恶性肿瘤的具有B7-H3的患者中用脑室内¹³¹I-8H9 进行放射免疫疗法：1/2期研究

引言

许多肿瘤已知有中枢神经系统(CNS)转移的倾向。尽管进行了积极的治疗，但治愈仍然是一项艰巨的挑战，并且预后悲观(1,2)。对流增强递送(convection enhanceddelivery)或隔室脑室内施用(cRIT)之后的放射性标记的肿瘤特异性单克隆抗体的脑部渗透和沉积可以克服血脑屏障障碍并改善检测和治疗(3-10)。在纪念斯隆-凯特琳癌症中心(MSK)进行的1期临床研究表明，使用标记有碘131的抗-GD2鼠源mAb 3F8进行cRIT具有可行性(11)。

8H9是对分布在许多小儿和成人实体瘤的细胞膜上的表面免疫调节糖蛋白B7-H3具有特异性的鼠源mAb(12)。当用碘124进行放射性标记时，8H9可以用于通过正电子发射断层扫描(PET)评估药物的定位和剂量测定。当用碘131加以放射性标记时，8H9可以递送治疗剂量的放射并抑制小鼠的肿瘤(13)。碘131发出的β射线穿透至多3mm，导致DNA损伤以及结合的和邻近的肿瘤细胞以及肿瘤脉管系统的细胞死亡。cRIT

为了改善中枢神经系统(CNS)的原发性和转移性肿瘤的预后，在第1/2期临床研究中，将隔室放射免疫疗法(cRIT)与靶向B7-H3的脑室内¹²⁴I和¹³¹I标记的8H9一起施用。

患者和方法

简言之，合格标准包括B7-H3反应性CNS原发性或转移性肿瘤、充足的脑脊髓液(CSF)流量、<3级主要器官毒性、血小板>50,000/μL和ANC>1000/μL。患者接受脑室内2mCi的¹²⁴I-或¹³¹I-8H9用于成像，以及10-80mCi的¹³¹I-8H9用于治疗。剂量测定基于48小时的系列CSF、血液采样和闪烁扫描(scintigraphy)。第5周进行随访磁共振成像。在没有3级或4级毒性或进行性疾病的情况下重复注射。记录肿瘤反应和总生存期(OS)。

具有复发性原发性或转移性CNS肿瘤的患者入选(2004-2017)试验¹³¹I-8H9 cRIT的MSK方案(clinicalstudys.gov NCT00089245)。在MSK使用iodogen技术将8H9纯化并加以放射性标记(14)。在2-40mCi剂量范围下，比活性平均为～5mCi/mg ¹³¹I-8H9，对于>50mCi的治疗剂量，比活性平均为～50mCi/mg ¹³¹I-8H9。

获得患者或监护人的知情同意。合格标准包括通过免疫组织化学检测的B7-H3肿瘤反应性、稳定的神经系统状态、无阻塞性或症状性脑积水、绝对中性粒细胞计数>1000/μl、血小板计数>50,000/μl、血清胆红素<3.0mg/dL和血清肌酐<2mg/dL。允许在先的局灶性或全脑全脊髓放疗(CSI)或化疗，但入选前不得少于3周。通过治疗前¹¹¹-铟二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)研究，评估留置脑室进入装置(例如Ommaya导管)的位置、通畅性和CSF流量。

临床和疾病评估

治疗前后的评估包括详细的病史、体格检查、全血细胞计数(CBC)、综合概况、甲状腺功能测试以及CSF的总蛋白、葡萄糖、细胞计数、细胞学检查。在cRIT之前的3周内和之后的1个月内，对所有患者均进行具有或没有钆的脑和脊髓的基线磁共振成像(MRI)研究。对于神经母细胞瘤患者，根据国际神经母细胞瘤分期系统(the InternationalNeuroblastoma Staging System)进行分期(15,16)。CNS神经母细胞瘤定义为软脑膜疾病或CNS实质或硬脑膜中的转移性沉积，不包括基于颅骨的转移；神经母细胞瘤患者的疾病评估还包括¹²³I-间碘苄胍(MIBG)、主要部位的计算机断层扫描(CT)以及骨髓穿刺和活检。cRIT ¹³¹I-8H9完成后，大约每3个月通过脑和脊柱MRI和CSF细胞学检查来评估疾病状态，其包括神经母细胞瘤患者的主要部位CT扫描、MIBG扫描、骨髓评估。

剂量测定估算

患者在48小时内接受2mCi ¹²⁴I-8H9或¹³¹I-8H9的成像剂量，然后分别进行CSF和血液采样以及3次PET或SPECT扫描，以在治疗剂量之前对剂量测定进行评估。确定全脑全脊柱轴中的放射性分布和活性浓度以及疾病斑块和周围正常组织的辐射剂量。CSF、脑室、脊髓、正常脑和血液的¹³¹I-8H9辐射暴露是基于¹³¹Iβ辐射完全局部吸收的假设。测得的等分试样进行计数，以估计依赖于时间的活性浓度。将各个时间-活性数据拟合成指数函数并进行积分，以生成曲线下的衰减面积(AUC)，其代表如前所述的血液和CSF中的累积活性浓度(11)。

¹³¹I-8H9疗法

为了最大程度地减少甲状腺摄取并防止可能的脑膜炎反应，在注射之前用口服SSKI滴剂、Cytomel和对乙酰氨基酚对患者进行术前用药。从注射前的晚上开始，地塞米松以每天两次1mg施用6剂(对于20公斤以下的患者为0.5mg)。

基于临床前研究，此阶段的起始剂量为mCi选择成10mCi¹³¹I-8H9，每周注射10mCi¹³¹I-3F8(至多40mCi)的2期研究可以安全地给予(24)。患者接受单剂量的10-80mCi ¹³¹I-8H9，1-4剂量水平为5mCi/mg；5-8剂量水平为50mCi/mg。每3-6名患者的剂量增加量为10mCi。自2009年以来，在该高度预处理的人群中>50mCi的剂量预期有骨髓抑制，在扩展队列中施用50mCi ¹³¹I-8H9的统一治疗剂量。毒性通过不良事件通用术语标准(CommonTerminology Criteria for Adverse Events，CTCAE)3.0版定义，在第一个周期后的5周内观察。如果在给定剂量水平下3名患者中有≥1名的毒性等级≥3，则在该剂量水平上增加3名更多的患者。剂量限制毒性(DLT)定义为在一水平上6名患者中有2名或更多患者发生≥3级的毒性，在该水平上，最大耐受剂量(MTD)被确定为低于DLT一个剂量水平。评估疾病或先前治疗引起的骨髓抑制，但未包括在MTD评估中。

基于年龄和相应的CSF体积进行剂量调整，这是鞘内施用的治疗的常规做法，具体如下：≤12个月大的患者接受50％的剂量减少；13-36个月大的患者接受33％的剂量减少；>36个月大的患者接受全剂量。

CNS疾病的放射影像学评估

在进入研究时不要求患者具有可测量的疾病。最近完成了抢救性放疗、手术和/或化疗的大多数患者缺乏可评估的放射影像学疾病。放射影像学图像由董事会认证的MSK诊断神经放射学家检查。由于最新的首创性神经肿瘤脑转移(RANO-BM)反应评估在研究开始时尚未实施，因此放射影像学改善的评估计算成从最初的¹³¹I-8H9治疗到放射影像学改善的首次证据(可测量的实质疾病大小减小或软脑膜疾病患者增强改善)的时间²³。对于可评估疾病的患者，生成游泳者图(Swimmer plots)，以显示到首次放射影像学改善证据的时间(以周计)、患者参与研究或随访的时间以及生存状态。通过计算从最初的¹³¹I-8H9治疗到最后一次CNS疾病的放射影像学评估的时间，评估反应的持久性。

统计学评估

基于纳入¹³¹I-8H9 cRIT在提高生存率方面的结果的假设和试验数据，对患者进行了扩展队列治疗(25)。从诊断CNS复发的时间开始计算生存数据。生成Kaplan-Meier图，以评估总体生存期、中位生存期和95％置信区间(SAS、Cary、NC)。为了评估包括组织学诊断、年龄、先前复发的次数和进入研究时的疾病状态的特定因素对总体生存期的影响，在目标亚组上生成Kaplan-Meier图。进行Mantel-Cox分析，以评估以下预后意义：接受的注射次数、递送的总mCi ¹³¹I-8H9和递送至CSF的¹³¹I-8H9总剂量。

历史上治疗的CNS神经母细胞瘤转移小儿患者

在开始¹³¹I-8H9 cRIT治疗方案之前，有19名CNS神经母细胞瘤患者在MSK进行过治疗。在用₁₃₁I-8H9治疗的神经母细胞瘤患者的生存分析中，将该组以及文献中的生存报告用作比较组。

结果

用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的患者的人口统计学和剂量

134名患者接受了412次cRIT ¹²⁴I-8H9和¹³¹I-8H9注射治疗。首次注射cRIT的中位年龄为8.5岁(范围1.2-53.5岁)。诊断包括转移性CNS神经母细胞瘤(n＝93)、肉瘤(n＝6)、黑素瘤(n-4)、卵巢癌(n＝l)和原发性复发性CNS恶性肿瘤，包括成神经管细胞瘤/PNET(n＝15)、室管膜瘤(n＝9)、具有多玫瑰结的胚胎性肿瘤(n＝2)、横纹肌瘤(n＝l)、脊索瘤(n＝l)和脉络丛癌(n＝2)(表1)。由于进行性疾病(神经母细胞瘤，N＝1)和不依从性(室管膜瘤，N＝1)，在给予治疗剂量之前将两名患者移出。37名患者在剂量递增阶段10-80mCi ¹³¹I-8H9(10mCi n＝7，20mCi n＝3，30mCi n＝6，40mCi n＝3，50mCi n＝3，60mCi n＝4，70mCi n＝6，80mCi n＝5)接受治疗。其余95名患者在扩大的队列在统一剂量水平50mCi ¹³¹I-8H9下接受治疗。

不良事件概要

在门诊设置的儿科、核医学和辐射安全小组的直接协助下，患者在床边例行进行清醒治疗。经历有罕见的1级或2级短暂性头痛、发烧、呕吐(自限性，用对乙酰氨基酚、止吐药可控制)。最常见的不良事件是具有在先得全脑全脊髓放疗、骨髓储备不良(进入研究时血小板<100K)的患者的3级或4级骨髓抑制(表2)，并且主要在接受>50mCi ¹³¹I-8H9的患者中观察到。在该经过大量先前治疗的患者人群中预期有骨髓抑制，因此，注意到但因剂量限制毒性而被排除。在132名患者中，有73位(59％)按计划接受了4次注射(2次剂量测定和2次完全治疗剂量)。患者由于进行性疾病(n＝29)、延长的骨髓抑制(n＝20)、急性化学性脑膜炎(n＝3)、CSF流量改变的硬膜下积液(subdural collections)的发展(n＝2)、骨髓增生异常(n＝2)和自动退出(n＝l)而未接受第2周期。在第1周期在任何患者中均未观察到化学性脑膜炎，但3名患者在第三次注射后的再治疗中观察到化学性脑膜炎，表现为急性头痛、发烧、呕吐和无菌性CSF脑脊髓细胞增多；所有这些都是用支持性护理治疗的自限性事件，在数天内解决。没有达到非骨髓抑制性DLT(表2)。

剂量测定分析

通过CSF采样和¹³¹I-8H9 SPECT对89名患者进行了剂量测定的测量；45名患者通过¹²⁴I-8H9 PET进行了剂量测定的测量。同位素和核扫描的变化是基于同位素的可利用性和预算限制，¹²⁴I-8H9 PET的成本明显更高。两种方法均通过CSF和血液采样观察到了有利的治疗窗口。通过CSF采样观察到吸收至CSF的总剂量的患者间变化性；相比较于血液中的2.6cGy/mCi，整个队列的平均CSF吸收剂量为104.9cGy/mCi。通过CSF采样，平均总CSF吸收剂量为3368.8cGy(范围677-13143cGy)。平均CSF清除时间为6.7小时。神经母细胞瘤患者接受的平均总治疗剂量¹³¹I-8H9为67.2mCi(19.6-104.9mCi)。65名接受总CSF递送剂量评估的患者接受的CSF总剂量>2100cGy，包括有24名仅接受1次治疗剂量。通常，与¹³¹I-8H9 SPECT相比，在¹²⁴I-8H9 PET之后确定目标区域的图像质量最高，与CSF采样相比，患者间变化性较小。

神经母细胞瘤亚组分析

93名具有转移性CNS神经母细胞瘤的患者接受了188次示踪剂和治疗注射(16名为剂量递增臂；77名为扩大队列)；46名患者(50％)接受了单次治疗注射；47位患者(50％)接受了2次治疗注射。CNS神经母细胞瘤复发时，患者在可行的情况下进行活检或瘤体减灭手术(debulking surgery)，然后进行放疗和化疗。图1提供了用¹³¹I-8H9治疗的患者与MSK在cRIT前的CNS神经母细胞瘤患者相比较的总生存率的Kaplan-Meier图。对2组患者进行分析：第1组患者接受了完整的CNS和全身定向治疗，包括放疗、替莫唑胺/伊立替康、cRIT¹³¹I-8H9加上如前所述使用静脉内MoAb 3F8和GMCSF的全身免疫治疗(13)。第2组患者用所有其他疗法和cRIT ¹³¹I-8H9治疗(图2)。

用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的93名患者中，有42名(53％)从CNS转移开始至数据截止日期(范围：4.8-152.4个月)仍然生存。在这93名患者中，98％生存了至少6个月，88％生存了至少12个月，71％生存了至少36个月，51％生存了60个月以上。用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的患者的中位生存期为31.8(3.8-170.1)个月(95％置信区间[CI]下限：35.2个月)。相比之下，在19名MSK在cRIT前的患者中，有6名(32％)生存了至少6个月，4名(21％)生存了至少12个月，2名(11％)生存了36个月以上，无一生存到60个月。MSK对照队列的总生存期为2天至44.1个月，估计中位生存期为5.5个月(95％CI：1.1-8.7个月)。

93名患者中有18名(47％)死于与CNS疾病复发相关的原因-单独的CNS复发(11名患者)或CNS和全身性复发(7名患者)。16名患者(42％)死于全身性疾病的复发。4名患者(11％)死于神经母细胞瘤以外的其他原因。死亡与CNS疾病的复发无关的患者比例(20/38，53％)为¹³¹I-8H9疗法在治疗CNS神经母细胞瘤中的有效性提供了进一步的证据。这些患者在最初的¹³¹I-8H9治疗后在没有CNS疾病的复发的情况下生存了至多89.8个月。开始¹³¹I-8H9疗法后，有11名生存了超过一年，4名生存了至少2年。

具有CNS神经母细胞瘤的婴儿的结果

小于18个月大的最初诊断为神经母细胞瘤的18名患者发生了CNS转移；12名(66％)具有MYCN扩增肿瘤。患者CNS神经母细胞瘤发展为疾病复发部位(N＝13)或在难治性全身性神经母细胞瘤的背景下(N＝5)。在开始cRIT ¹³¹I-8H9之前，3名患者发展出有症状的神经母细胞瘤，进展，并死于全身性(N＝2)或CNS(n＝l)神经母细胞瘤。在其余15名中，有12名接受了CNS挽救计划，其中包括放疗、化疗和cRIT ¹³¹I-8H9。与在大于18个月大时最初诊断的患者相比，这一亚组年轻患者在cRIT ¹³¹I-8H9之后的总体生存期显著延长(p＝0.0096；)(图3)。从检测出CNS疾病起，有12名患者保持以平均6.3年(1.6-11.8年)的平均值长期生存(图3)，包括有1名患者在整个鞘(thecal)空间有数百个神经母细胞瘤转移性肿块(图5)。

基于放射影像学评估的¹³¹I-8H9 cRIT在CNS神经母细胞瘤患者中的疗效

在用¹³¹I-8H9 cRIT治疗的93名患者中，有21名(23％)在接受最初的¹³¹I-8H9治疗时具有CNS/LM疾病的放射影像学证据。图4A-4B提供了这些患者的初始治疗后放射影像学评估结果的表格总结。其中，9名(43％)表现出放射影像学改善(指数病变大小减小和/或软脑膜增强降低)，9名患者(43％)在初次放射影像学评估时表现出稳定的疾病。¹³¹I-8H9治疗的长期临床益处的进一步客观证据可以通过放射影像学稳定性的持久性分析来提供。尽管用¹³¹I-8H9治疗的93名患者的中位生存期(58个月)大大超过了历史患者(5.5个月)，但生存率的显著提高并不一定与疾病的长期、持久缓解相关。用¹³¹I-8H9治疗在许多患者中引起了持久的反应。根据现有数据，放射影像学反应的中位持续时间为49周(95％CI：32.1-73.7周)，范围为2.6周至676周(13年)。然而，放射影像学反应的中位持续期可能被大大低估，因为许多患者的生存期都远远超过了其末次扫描日期。尽管如此，对¹³¹I-8H9治疗的放射影像学反应的中位持续期(11.3个月)超过了5.5个月的历史中位生存期(图4A-4B)。

亚组分析及对总生存率的影响

有一些可能会影响生存的因素无法在总体生存分析中反映出，包括已知的人口统计学和遗传风险因素、进入研究时的疾病特征、¹³¹I-8H9之前的复发次数以及cRIT 8H9之后接受的其他治疗。为了确定这些危险因素对用¹³¹I-8H9治疗的患者的总生存率的影响，进行亚组分析。

对于神经母细胞瘤队列，若干风险因素始终与神经母细胞瘤的进展和总生存率相关，包括诊断时的年龄、INSS阶段和MYCN扩增状态。尽管最初诊断的年龄可预后，但具有MYCN扩增肿瘤的患者的总生存率尚不明确(p＝0.2490)。基于何时接受治疗(即研究期间的前一半[2004-2009年]与后半部分[2010年至今])，确定患者的生存率是否存在任何差异。与更新近治疗的CNS神经母细胞瘤患者相比，早期治疗的CNS神经母细胞瘤患者的生存率没有差异(p＝0.8851)。¹³¹I-8H9 cRIT之前的CSI对这些患者中的总生存率没有任何影响(p＝0.9343)。当施用21Gy CSI与18Gy CSI时，也没有统计学差异(图6)。另外注意到，通过CSF采样，在接受>50mCi ¹³¹I-8H9或接受>2100cGy的患者当中，生存率没有统计学差异。尽管统计学上不显著(p＝0.08)，对于接受2次¹³¹I-8H9治疗注射的患者，注意到有生存率提高的趋势。

对于其他患者队列，已观察到6/15复发性成神经管细胞瘤患者、3/9复发性室管膜瘤患者、2名具有多层玫瑰结的胚胎性肿瘤患者和1名复发性脉络丛癌患者的生存期延长(表4)。

总体上，134名患者(93名神经母细胞瘤、11名其他非CNS肿瘤和30名原发性CNS肿瘤)接受了412次注射。平均吸收剂量为CSF中104.9cGy/mCi，血液中2.6cGy/mCi。急性毒性有限。尽管不是剂量限制性毒性，但在具有先前的全脑全脊髓放疗和在剂量≥60mCi¹³¹I-8H9的患者中发现了3或4级骨髓抑制。与使用传统疗法的报告相比，神经母细胞瘤队列的OS得以改善。

讨论

靶向B7家族的检查点调节剂处于癌症研究的最前沿，有力的证据证明B7-H3对T-细胞增殖具有关键的调节作用。B7-H3表达与几种癌症的不良预后显著相关，并且与正常人体组织相比，在癌症中独特地过量表达。呈现出完备的数据(长达13年)，该数据是对于儿科群体中的绝症胚胎性肿瘤的耐受性良好的基于cRIT的方案的数据，该方案结合了隔室放射性标记的抗-B7-H3。对于若干组织学诊断，包括经治疗的复发性CNS神经母细胞瘤、成神经管细胞瘤、室管膜瘤、脉络丛癌和具有多层玫瑰结的胚胎性肿瘤，有利的不良事件特征、治疗指标和延长的生存期，均极大地令人鼓舞。使用脑室内¹²⁴I-8H9和¹³¹I-8H9进行cRIT似乎是安全的，急性毒性可控，即使在非常年轻、经过大量在先治疗的患者中也是如此。肿瘤细胞的细胞毒性归因于¹³¹I-辐射的直接作用，但它有可能是成功清除显微肿瘤细胞的二级机制基础，其可以部分地原因在于CSF空间的8H9补体激活。已经显示，在脑室内利妥昔单抗(rituximab)用于复发性CNS淋巴瘤后，补体成分C3和C5b-9存在于脑脊液中(17)。最近的证据表明，已知的弥漫性肿瘤血管过量表达B7-H3；靶向肿瘤血管可以具有额外的治疗益处。

考虑当前可用的治疗选择，从历史上和目前来看，诊断为复发性CNS神经母细胞瘤的小儿患者的预后仍然很差。在多个地点和国家报告的预期生存期通常不超过6个月，超过3年的长期生存期发生在少于10％的患者中(18-20)。本研究的历史患者队列与这些先前的研究一致，这些研究报告了CNS转移后生存时间短，预后不良。在2004年开始cRIT之前，在MSK治疗的患者的中位总生存期为5.5个月；19名患者中只有2名生存至少36个月，无一生存超过44个月。不论疗法或患者地理位置如何，在过去的40年中，这些数字都没有显著变化。cRIT ¹³¹I-8H9的引入代表着该疾病治疗的重大进展，中位总生存期和治愈率均显著提高。

随着近年来CNS神经母细胞瘤幸存者数量的增加，致力于使与幼儿中全脑全脊髓放疗(craniospinal radiation)有关的已知风险降至最低，最重要的是神经认知功能缺陷、内分泌病变和生长迟缓。数据表明，神经认知损害的程度(即轻度、中度或重度)表现出剂量-反应模式(11)。该趋势进一步表明，全脑全脊髓放疗和cRIT的结合能够根除不适合手术切除的大块软脑膜沉积物。在cRIT-挽救治疗队列中，半数患者接受了2160cGy CSI治疗，这是局部控制神经母细胞瘤原发肿瘤的标准剂量。自2009年以来，随着cRIT递送的目标cGy的增加，CSI剂量降低至1800cGy，占该队列患者的一半。数据表明，联合外放射疗法1800cGy和cRIT，治疗效果没有明显下降。而且，由于在最初诊断时的在先放疗、极小的年龄或父母的选择，5名患者接受<18Gy CSI，但仍保持了长期的CNS疾病控制。尽管仅在最近才进行研究，与传统的光子治疗相比，质子束放疗可以是额外的使长期发病率最小化的方式，其向健康组织递送辐射显著减少。旨在控制大量实质性和结节性软脑膜疾病的减剂量全脑全脊髓放疗和靶向微转移神经母细胞瘤的cRIT，可以足以延长生存期。

研究的另一焦点在于，确定通过cRIT ¹³¹I-8H9递送至CSF的最佳cGy，以完全消除微转移沉积物。当患者最初入选¹³¹I-8H9的I期研究时，8H9的剂量有所不同。随后所有患者均入选扩大的II期队列，平均治疗剂量为50mCi ¹³¹I-8H9。尽管在所有患者中，到达红骨髓的平均剂量是相当一致，但通过cRIT递送至CSF的cGy/mCi剂量却变化很大。这可能是基于先前的手术、放疗、存在或不存在大块病变而导致的CSF流量变化速率的反映，所有这些均导致cRIT之前固有的CSF流量差异。由于大多数患者用cRIT治疗作为微转移的巩固，因此根除肿瘤病变所需的注射抗体的比例也很难评估。而且，对脑转移患者的其他免疫-PET研究表明，即使在同一患者的不同病灶中，抗体摄取也可能高度可变(12)。对于接受>50mCi¹³¹I-8H9的患者或者对于通过CSF采样接受到达CSF的>2100cGy的患者，没有发现生存率的差异。这表明除非考虑同时降低CSI剂量，否则更高剂量的cRIT可能是不必要的。

已经付诸努力来鉴别哪些患者处于发展复发性CNS疾病的风险中。风险因素包括在初次诊断神经母细胞瘤时的诊断性腰椎穿刺和MYCN扩增(19,20)。识别驱动转移过程的基因组突变一直具有挑战性。在CNS转移瘤及其CNS前原发瘤的肿瘤对的SNP分析中，仅发现少量的基因组病变的特异性和复发性差异(21)。然而，在一系列13例具有相应原发性肿瘤的CNS神经母细胞瘤转移中，发明人之前显示miR-29a可能是CNS转移的生物标志物；下调可以在CNS进展中发挥关键作用(22)。miR-29a的已知肿瘤靶标包括CDC6、CDK6和DNMT3A和B7-H3。发现这些靶标在脑转移瘤中的差异表达比其配对的原发瘤要高(22)。对于高复发风险患者，采用耐受性良好的基于cRIT的疗法进行预防性治疗有待探索。

具有¹³¹I-8H9的cRIT是安全的，对CSF和血液具有良好的剂量测定，并有望改善涉及CNS的恶性肿瘤的预后。CNS的转移性肿瘤可以被完全根除，消除恶性肿瘤的药聚区部位。脑室内放射免疫疗法可以成功地并入用于包括CNS神经母细胞瘤在内的多种小儿组织学的治疗策略中。这些数据支持对于其他高危肿瘤的作用，包括复发性成神经管细胞瘤、室管膜瘤、脉络丛癌、具有多层玫瑰结的胚胎性肿瘤。总体而言，CNS神经母细胞瘤转移患者中有60％达到长期缓解，包括33％的多发实质转移患者。对于以cRIT ¹³¹I-8H9用CNS定向疗法治疗的具有B7-H3过量表达肿瘤的患者，观察到生存优势。

表1：组织学诊断

*1名患者在接受治疗注射之前因进行性疾病而被移出

+1名患者在接受治疗注射之前因不依从性而被移出

**132名进行注射治疗

表2：组织学不良事件概况

表3：神经母细胞瘤队列特征

除非另有说明，否则数字表示频率，括弧中为百分比

表4：其他胚胎性和其他CNS恶性肿瘤的生存期

参考文献

1.Wiens AL,Hattab EM.The pathologic spectrum of solid CNS metastasesin the pediatric population.J Neurosurg Pediatr 2014,14(2):129-135.

2.De B,Kinnaman MD,Wexler LH,Kramer K,Wolden SL.Central nervoussystem relapse of rhabdomyosarcoma.Pediatr Blood Cancer.2018Jan；65(1).doi:10.1002/pbc.26710.Epub 2017Jul 11.

3.Pizzo ME,Wolak DJ,Kumar NN,Brunette E,Brunnquell CL,Hannocks MJ,Abbott NJ,Meyerand ME,Sorokin L,Stanimirovic DB,Thorne RG.Intrathecalantibody distribution in the rat brain:surface diffusion,perivasculartransport and osmotic enhancement of delivery.J Physiol.2018 Feb 1；596(3):445-475.doi:10.1113/JP275105.Epub 2017 Dec 18

4.Convection-Enhanced Delivery for Diffuse Intrinsic Pontine GliomaTreatment.Zhou Z,Singh R,Souweidane MM.Curr Neuropharmacol.2017；15(1):116-128.

5.Kramer K,Smith-Jones PM,Humm JL,Zanzonico P,Pandit-Taskar N,Carrasquillo J,Modak S,Tickoo S,Gerald WL,Dunkel IJ,Khakoo Y,Gilheeney SW,Souweidane MM,Larson SM,and Cheung NKV.Radioimmunotherapy for High-Risk andRecurrent Central Nervous System(CNS)Cancers:Results of a Phase II Study withintra-Ommaya ¹³¹I-3F8.NeuroOncology 2010；12(6):ii48

6.Kramer K,Kushner BH,Modak S,Pandit-Taskar N,Smith-Jones P,ZanzonicoP,Humm JL,Xu H,Wolden SL,Souweidane MM,Larson SM,Cheung NK.

Compartmental intrathecal radioimmunotherapy:results for treatmentfor metastatic CNS neuroblastoma.J Neurooncol 2010；97(3):409-187.

7.Mehta AI,Choi BD,Ajay D,Raghavan R,Brady M,Friedman AH,Pastan I,Bigner DD,Sampson JH.Convection enhanced delivery of macromolecules for braintumors.Curr Drug Discov Technol.2012 Dec；9(4):305-10.

8.Pizer BL,Papanastassiou V,Moseley R,Tzanis S,Hancock JP,KemsheadJT,et al.Meningeal Leukemia and Medulloblastoma-Preliminary Experience withIntrathecal Radioimmunotherapy.Antibody Immunoconj.1991；4(4):753-61.

9.Bigner DD,Brown MT,Friedman AH,Coleman RE,Akabani G,Friedman HS,etal.Iodine-131-labeled antitenascin monoclonal antibody 81C6 treatment ofpatients with recurrent malignant gliomas:phase I study results.Journal ofclinical oncology:official journal of the American Society of ClinicalOncology.1998；16(6):2202-12.

10.Cokgor I,Akabani G,Friedman HS,Friedman AH,Zalutsky MR,ZehngebotLM,et al.Long term response in a patient with neoplastic meningitis secondaryto melanoma treated with(131)I-radiolabeled antichondroitin proteoglycansulfate Mel-14 F(ab')(2):a case study.Cancer.2001；91(9):1809-13.

11.Kramer K,Humm JL,Souweidane MM,Zanzonico PB,Dunkel IJ,Gerald WL,etal.Phase I study of targeted radioimmunotherapy for leptomeningeal cancersusing intra-Ommaya 131-I-3F8.Journal of clinical oncology:official journal ofthe American Society of Clinical Oncology.2007；25(34):5465-70.

12.Modak S,Kramer K,Gultekin SH,Guo HF,Cheung NK.Monoclonal antibody8H9 targets a novel cell surface antigen expressed by a wide spectrum ofhuman solid tumors.Cancer Res.2001；61(10):4048-54.

13.Modak S,Guo HF,Humm JL,Smith-Jones PM,Larson SM,CheungNK.Radioimmunotargeting of human rhabdomyosarcoma using monoclonal antibody8H9.Cancer Biother Radiopharm.2005；20(5):534-46.

14.Miraldi FD,Nelson AD,Kraly C,Ellery S,Landmeier B,Coccia PF,etal.Diagnostic imaging of human neuroblastoma with radiolabeledantibody.Radiology.1986；161(2):413-8.

15.Brodeur GM,Seeger RC,Barrett A,Berthold F,Castleberry RP,D'AngioG,et al.International criteria for diagnosis,staging,and response totreatment in patients with neuroblastoma.J Clin Oncol.1988；6(12):1874-81.

16.Monclair T,Brodeur GM,Ambros PF,Brisse HJ,Cecchetto G,Holmes K,etal.The International Neuroblastoma Risk Group(INRG)Staging System:An INRGTask Force Report.Journal of Clinical Oncology.2009；27(2):298-303.

17.Kadoch C,Li J,Wong VS,Chen L,Cha S,Munster P,et al.Complementactivation and intraventricular rituximab distribution in recurrent centralnervous system lymphoma.Clinical cancer research:an official journal of theAmerican Association for Cancer Research.2014；20(4):1029-41.

18.Kellie SJ,Hayes FA,Bowman L,Kovnar EH,Langston J,Jenkins JJ,3rd,etal.Primary extracranial neuroblastoma with central nervous system metastasescharacterization by clinicopathologic findings and neuroimaging.Cancer.1991；68(9):1999-2006.

19.Kramer K,Kushner B,Heller G,Cheung NK.Neuroblastoma metastatic tothe central nervous system.The Memorial Sloan-kettering Cancer CenterExperience and A Literature Review.Cancer.2001；91(8):1510-9.

20.Matthay KK,Brisse H,Couanet D,Couturier J,Benard J,Mosseri V,etal.Central nervous system metastases in neuroblastoma:radiographic,clinical,and biologic features in 23 patients.Cancer.2003；98(1):155-65.

21.Cobrinik D,Ostrovnaya I,Hassimi M,Tickoo SK,Cheung IY,CheungNK.Recurrent pre-existing and acquired DNA copy number alterations,includingfocal TERT gains,in neuroblastoma central nervous system metastases.Genes,chromosomes&cancer.2013；52(12):1150-66.

22.Cheung IY,Farazi TA,Ostrovnaya I,Xu H,Tran H,Mihailovic A,etal.Deep MicroRNA sequencing reveals downregulation of miR-29a inneuroblastoma central nervous system metastasis.Genes,chromosomes&cancer.2014；53(10):803-14.

23.Alexander BM,Brown PD,Ahluwalia MS,Aoyama H,Baumert BG,Chang SM,Gaspar LE,Kalkanis SN,Macdonald DR,Mehta MP,Soffietti R,Suh JH,van den BentMJ,Vogelbaum MA,Wefel JS,Lee EQ,Wen PY；Response Assessment in Neuro-Oncology(RANO)group.Clinical trial design for local therapies for brain metastases:aguideline by the Response Assessment in Neuro-Oncology Brain Metastasesworking group.Lancet Oncol.2018 Jan；19(1):e33-e42.doi:10.1016/S1470-2045(17)30692-7.

24.Kramer K,Pandit-Taskar N,Humm JL,Zanzonico PB,Haque S,Dunkel IJ,Wolden SL,Donzelli M,Goldman DA,Lewis JS,Lyashchenko SK,Khakoo Y,CarrasquilloJA,Souweidane MM,Greenfield JP,Lyden D,De Braganca KD,Gilheeney SW,Larson SM,Cheung NKV.A phase II study of radioimmunotherapy with intraventricular 131I-3F8for medulloblastoma.Pediatr Blood Cancer.2017 Sep 22.doi:10.1002/pbc.26754.(PMID:28940863)

25.Kramer K,Kushner BH,Modak S,Pandit-Taskar N,Smith-Jones P,Zanzonico P,Humm JL,Xu H,Wolden SL,Souweidane MM,Larson SM,CheungNK.Compartmental intrathecal radioimmunotherapy:results for treatment formetastatic CNS neuroblastoma.Journal of Neurooncology,97:409-418,2010.(PMID:19890606)

序列表

<110> 纪念斯隆-凯特琳癌症中心

<120> 抗-B7H3抗体用于治疗中枢神经系统癌症的用途

<130> 072734.0700

<150> US 62/505,558

<151> 2017-05-12

<160> 17

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 442

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 1

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Ser Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Thr Thr Ala Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr

180 185 190

Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro

210 215 220

Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro

225 230 235 240

Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys

245 250 255

Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp

260 265 270

Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu

275 280 285

Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met

290 295 300

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser

305 310 315 320

Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly

325 330 335

Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln

340 345 350

Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe

355 360 365

Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu

370 375 380

Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe

385 390 395 400

Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn

405 410 415

Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr

420 425 430

Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys

435 440

<210> 2

<211> 214

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 2

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Tyr

20 25 30

Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly His Ser Phe Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala

100 105 110

Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly

115 120 125

Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile

130 135 140

Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu

145 150 155 160

Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr

180 185 190

Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Asn Glu Cys

210

<210> 3

<211> 5

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 3

Asn Tyr Asp Ile Asn

1 5

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 4

Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Ser Thr Gln Tyr

1 5 10

<210> 5

<211> 9

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 5

Gln Thr Thr Ala Thr Trp Phe Ala Tyr

1 5

<210> 6

<211> 11

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 6

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Tyr Leu His

1 5 10

<210> 7

<211> 7

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 7

Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser

1 5

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 8

Gln Asn Gly His Ser Phe Pro Leu Thr

1 5

<210> 9

<211> 243

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 9

Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Ser Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Thr Thr Ala Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Leu

130 135 140

Ser Val Thr Pro Gly Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

145 150 155 160

Ser Ile Ser Asp Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser

165 170 175

Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro

180 185 190

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile

195 200 205

Asn Ser Val Glu Pro Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly

210 215 220

His Ser Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

225 230 235 240

Gln Ala Ala

<210> 10

<211> 731

<212> DNA

<213> 小鼠

<400> 10

caggtcaaac tgcagcagtc tggggctgaa ctggtaaagc ctggggcttc agtgaaattg 60

tcctgcaagg cttctggcta caccttcaca aactatgata taaactgggt gaggcagagg 120

cctgaacagg gacttgagtg gattggatgg atttttcctg gagatggtag tactcaatac 180

aatgagaagt tcaagggcaa ggccacactg actacagaca catcctccag cacagcctac 240

atgcagctca gcaggctgac atctgaggac tctgctgtct atttctgtgc aagacagact 300

acggctacct ggtttgctta ctggggccaa gggaccacgg tcaccgtctc ctcaggtgga 360

ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggatcgg acatcgagct cactcagtct 420

ccaaccaccc tgtctgtgac tccaggagat agagtctctc tttcctgcag ggccagccag 480

agtattagcg actacttaca ctggtaccaa caaaaatcac atgagtctcc aaggcttctc 540

atcaaatatg cttcccaatc catctctggg atcccctcca ggttcagtgg cagtggatca 600

gggtcagatt tcactctcag tatcaacagt gtggaacctg aagatgttgg agtgtattac 660

tgtcaaaatg gtcacagctt tccgctcacg ttcggtgctg ggaccaagct ggagctgaaa 720

caggcggccg c 731

<210> 11

<211> 731

<212> DNA

<213> 小鼠

<400> 11

gtccagtttg acgtcgtcag accccgactt gaccatttcg gaccccgaag tcactttaac 60

aggacgttcc gaagaccgat gtggaagtgt ttgatactat atttgaccca ctccgtctcc 120

ggacttgtcc ctgaactcac ctaacctacc taaaaaggac ctctaccatc atgagttatg 180

ttactcttca agttcccgtt ccggtgtgac tgatgtctgt gtaggaggtc gtgtcggatg 240

tacgtcgagt cgtccgactg tagactcctg agacgacaga taaagacacg ttctgtctga 300

tgccgatgga ccaaacgaat gaccccggtt ccctggtgcc agtggcagag gagtccacct 360

ccgccaagtc cgcctccacc gagaccgcca ccgcctagcc tgtagctcga gtgagtcaga 420

ggttggtggg acagacactg aggtcctcta tctcagagag aaaggacgtc ccggtcggtc 480

tcataatcgc tgatgaatgt gaccatggtt gtttttagtg tactcagagg ttccgaagag 540

tagtttatac gaagggttag gtagagaccc taggggaggt ccaagtcacc gtcacctagt 600

cccagtctaa agtgagagtc atagttgtca caccttggac ttctacaacc tcacataatg 660

acagttttac cagtgtcgaa aggcgagtgc aagccacgac cctggttcga cctcgacttt 720

gtccgccggc g 731

<210> 12

<211> 731

<212> DNA

<213> 小鼠

<400> 12

caggtcaaac tgcagcagtc tggggctgaa ctggtaaagc ctggggcttc agtgaaattg 60

tcctgcaagg cttctggcta caccttcaca aactatgata taaactgggt gaggcagagg 120

cctgaacagg gacttgagtg gattggatgg atttttcctg gagatggtag tactcaatac 180

aatgagaagt tcaagggcaa ggccacactg actacagaca catcctccag cacagcctac 240

atgcagctca gcaggctgac atctgaggac tctgctgtct atttctgtgc aagacagact 300

acggctacct ggtttgctta ctggggccaa gggaccacgg tcaccgtctc ctcagatgga 360

ggcggttcag gcggaggtgg ctctggcggt ggcggatcgg acatcgagct cactcagtct 420

ccaaccaccc tgtctgtgac tccaggagat agagtctctc tttcctgcag ggccagccag 480

agtattagcg actacttaca ctggtaccaa caaaaatcac atgagtctcc aaggcttctc 540

atcaaatatg cttcccaatc catctctggg atcccctcca ggttcagtgg cagtggatca 600

gggtcagatt tcactctcag tatcaacagt gtggaacctg aagatgttgg agtgtattac 660

tgtcaaaatg gtcacagctt tccgctcacg ttcggtgctg ggaccaagct ggagctgaaa 720

caggcggccg c 731

<210> 13

<211> 243

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 13

Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Ser Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Thr Thr Ala Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Leu

130 135 140

Ser Val Thr Pro Gly Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

145 150 155 160

Ser Ile Ser Asp Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser

165 170 175

Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro

180 185 190

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile

195 200 205

Asn Ser Val Glu Pro Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly

210 215 220

His Ser Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

225 230 235 240

Gln Ala Ala

<210> 14

<211> 243

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 14

Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Glu Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Ser Thr Gln Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Thr Thr Ala Thr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser Asp Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Thr Thr Leu

130 135 140

Ser Val Thr Pro Gly Asp Gln Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

145 150 155 160

Ser Ile Ser Asp Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser

165 170 175

Pro Gln Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro

180 185 190

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Ser Ile

195 200 205

Asn Ser Val Glu Pro Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly

210 215 220

His Ser Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Glu Leu Glu Leu Glu

225 230 235 240

Gln Ala Ala

<210> 15

<211> 18

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 15

Asn Pro Val Leu Gln Gln Asp Ala His Ser Ser Val Thr Ile Thr Pro

1 5 10 15

Gln Arg

<210> 16

<211> 26

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 16

Ser Pro Thr Gly Ala Val Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val Val

1 5 10 15

Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu Arg

20 25

<210> 17

<211> 534

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 17

Met Leu Arg Arg Arg Gly Ser Pro Gly Met Gly Val His Val Gly Ala

1 5 10 15

Ala Leu Gly Ala Leu Trp Phe Cys Leu Thr Gly Ala Leu Glu Val Gln

20 25 30

Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu

35 40 45

Cys Cys Ser Phe Ser Pro Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn

50 55 60

Leu Ile Trp Gln Leu Thr Asp Thr Lys Gln Leu Val His Ser Phe Ala

65 70 75 80

Glu Gly Gln Asp Gln Gly Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe

85 90 95

Pro Asp Leu Leu Ala Gln Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu Gln Arg Val

100 105 110

Arg Val Ala Asp Glu Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser Ile Arg Asp

115 120 125

Phe Gly Ser Ala Ala Val Ser Leu Gln Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys

130 135 140

Pro Ser Met Thr Leu Glu Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Ser Ser Tyr Gln Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val

165 170 175

Phe Trp Gln Asp Gly Gln Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr

180 185 190

Ser Gln Met Ala Asn Glu Gln Gly Leu Phe Asp Val His Ser Ile Leu

195 200 205

Arg Val Val Leu Gly Ala Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn

210 215 220

Pro Val Leu Gln Gln Asp Ala His Ser Ser Val Thr Ile Thr Pro Gln

225 230 235 240

Arg Ser Pro Thr Gly Ala Val Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val

245 250 255

Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu Arg Cys Ser Phe Ser Pro

260 265 270

Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn Leu Ile Trp Gln Leu Thr

275 280 285

Asp Thr Lys Gln Leu Val His Ser Phe Thr Glu Gly Arg Asp Gln Gly

290 295 300

Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala Gln

305 310 315 320

Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu Gly

325 330 335

Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser Ile Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val

340 345 350

Ser Leu Gln Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ser Met Thr Leu Glu

355 360 365

Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr Val Thr Ile Thr Cys Ser

370 375 380

Ser Tyr Arg Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe Trp Gln Asp Gly Gln

385 390 395 400

Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gln Met Ala Asn Glu

405 410 415

Gln Gly Leu Phe Asp Val His Ser Val Leu Arg Val Val Leu Gly Ala

420 425 430

Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro Val Leu Gln Gln Asp

435 440 445

Ala His Gly Ser Val Thr Ile Thr Gly Gln Pro Met Thr Phe Pro Pro

450 455 460

Glu Ala Leu Trp Val Thr Val Gly Leu Ser Val Cys Leu Ile Ala Leu

465 470 475 480

Leu Val Ala Leu Ala Phe Val Cys Trp Arg Lys Ile Lys Gln Ser Cys

485 490 495

Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Glu Asp Gln Asp Gly Glu Gly Glu Gly

500 505 510

Ser Lys Thr Ala Leu Gln Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys Glu Asp

515 520 525

Asp Gly Gln Glu Ile Ala

530

Claims

1.一种用于治疗人受试者的中枢神经系统(CNS)癌症的方法，包括将治疗有效量的特异性结合人B7H3的抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者的CNS中，其中所述癌症是原发性中枢神经系统(CNS)癌症或转移至CNS的癌症，并且所述抗体或其抗原结合片段与放射性同位素和/或治疗形式结合。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述人受试者是成人。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述癌症转移至软脑膜。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述转移至CNS的癌症是非CNS实体瘤。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述实体瘤选自肉瘤、黑素瘤、卵巢癌和横纹肌肉瘤。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述实体瘤选自黑素瘤、卵巢癌和横纹肌肉瘤。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述中枢神经系统(CNS)癌症选自神经母细胞瘤和原发性复发性CNS恶性肿瘤。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段选自鼠源抗体或其抗原结合片段、人源化抗体及其抗原结合片段、嵌合抗体及其抗原结合片段和人抗体及其抗原结合片段。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段是鼠源抗体或其抗原结合片段。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段与B7H3的FG-环结合。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包括：

(a)包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1，

(b)包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2，

(c)包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3，

(d)包括SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1，

(e)包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2，和

(f)包括SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包括：

(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区，和

(b)包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的轻链链可变区。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中将所述抗体或其抗原结合片段鞘内施用于所述受试者。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中将所述抗体或其抗原结合片段通过脑室内装置施用于所述受试者。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述脑室内装置是脑室内导管。

16.根据权利要求14所述的方法，其中所述脑室内装置是脑室内贮器。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述放射性同位素为¹²⁴I、¹³¹I、¹⁷⁷Lu或⁹⁹mTc。

18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其包括将一个治疗周期的所述抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者。

19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其包括将两个治疗周期的所述抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者。

20.根据权利要求18或19所述的方法，其中一个治疗周期包括剂量测定剂量和治疗剂量。

21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为约10mCi至约200mCi或者约10mCi至约100mCi。

22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为约50mCi。

23.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中所述方法延长所述受试者的生存期。

24.根据权利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述方法延长所述受试者中癌症的缓解期。

25.根据权利要求1-24中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包括与SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的同源性为至少约80％、约90％、约95％、约99％或约100％的氨基酸序列。

26.根据权利要求1-25中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包括SEQID NO:17所示的氨基酸序列。

27.根据权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段具有SEQID NO:17的氨基酸224-241。

28.根据权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段具有SEQID NO:17的氨基酸242-267。

29.根据权利要求1-28中任一项所述的方法，其中所述治疗形式选自一种或更多种螯合剂化合物、一种或更多种化学治疗剂、一种或更多种检查点抑制剂和放射疗法。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述治疗形式是螯合剂化合物。

31.根据权利要求29或30所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段与螯合剂化合物缀合，其中所述螯合剂化合物与放射性同位素结合。

32.根据权利要求29-31中任一项所述的方法，其中所述螯合剂化合物是DOTA或DTPA。

33.根据权利要求29所述的方法，其中所述治疗形式是单克隆抗体3F8(MoAb 3F8)、粒细胞-巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)或其组合。

34.根据权利要求1-33中任一项所述的方法，其中将所述治疗形式施用于所述受试者的CNS中和/或全身性施用于所述受试者。

35.根据权利要求1-34中任一项所述的方法，其中将所述治疗形式与所述抗体或其抗原结合片段同时或相继施用于所述受试者。

36.一种特异性结合人B7H3的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与螯合剂化合物缀合，其中所述螯合剂化合物与放射性同位素结合。

37.根据权利要求36所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段选自鼠源抗体及其抗原结合片段、人源化抗体及其抗原结合片段、嵌合抗体及其抗原结合片段和人抗体及其抗原结合片段。

38.根据权利要求36或37所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是鼠源抗体或其抗原结合片段。

39.根据权利要求36-38中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与B7H3的FG-环结合。

40.根据权利要求36-39中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括：

a.包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的重链可变区CDR1，

b.包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的重链可变区CDR2，

c.包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的重链可变区CDR3，

d.包括SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR1，

e.包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR2，和

f.包括SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的轻链可变区CDR3。

41.根据权利要求36-40中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括：

(a)包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的重链可变区，和

(b)包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的轻链链可变区。

42.根据权利要求36-41中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述放射性同位素为¹²⁴I、¹³¹I、¹⁷⁷Lu或⁹⁹mTc。

43.根据权利要求36-42中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述螯合剂化合物是DOTA或DTPA。

44.根据权利要求36-43中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括与SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的同源性为至少约80％、约90％、约95％、约99％或约100％的氨基酸序列。

45.根据权利要求36-44中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包括SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。

46.根据权利要求36-45中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段具有SEQ ID NO:17的氨基酸224-241。

47.根据权利要求36-46中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段具有SEQ ID NO:17的氨基酸242-267。

48.根据权利要求36-47中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是DOTA-8H9缀合物或DTPA-8H9缀合物。

49.根据权利要求36-48中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是¹⁷⁷Lu-DOTA-8H9缀合物或¹⁷⁷Lu-DTPA-8H9缀合物或(177)LU-CHX-A″-DTPA-8H9。

50.根据权利要求36-49中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述其抗原结合片段是单链可变片段(scFv)。

51.根据权利要求50所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述scFv包括SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列的一部分。

52.一种组合物，其包括权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段。

53.一种药物组合物，其包括权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，和药学上可接受的载体。

54.一种对受试者中的肿瘤进行成像的方法，其包括将权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者。

55.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段用作药物的用途。

56.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段用于治疗癌症的用途。

57.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段用于治疗中枢神经系统(CNS)癌症的用途。

58.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段用于治疗转移性CNS神经母细胞瘤、肉瘤、黑素瘤、卵巢癌和原发性复发性CNS恶性肿瘤的用途。

59.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在对受试者中的肿瘤进行成像的方法中的用途。

60.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在权利要求1-35中任一项所述的方法中的用途。

61.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在制备用于杀伤和/或减少肿瘤细胞和/或抑制肿瘤生长的药物中的用途。

62.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在制备用于对携带有所述抗体或其抗原结合片段所识别的抗原的肿瘤细胞进行成像的药物中的用途。

63.权利要求36-51中任一项所述的抗体或其抗原结合片段在制备用于权利要求1-35中任一项所述的方法的药物中的用途。