CN110771507B - 一种黄芪人工种子制备方法 - Google Patents

一种黄芪人工种子制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110771507B
CN110771507B CN201911172969.6A CN201911172969A CN110771507B CN 110771507 B CN110771507 B CN 110771507B CN 201911172969 A CN201911172969 A CN 201911172969A CN 110771507 B CN110771507 B CN 110771507B
Authority
CN
China
Prior art keywords
artificial
transplanting
astragalus
seeds
treatment
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201911172969.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110771507A (zh
Inventor
侯义龙
蔡军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dalian University
Original Assignee
Dalian University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dalian University filed Critical Dalian University
Priority to CN201911172969.6A priority Critical patent/CN110771507B/zh
Publication of CN110771507A publication Critical patent/CN110771507A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110771507B publication Critical patent/CN110771507B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques
    • A01H4/006—Encapsulated embryos for plant reproduction, e.g. artificial seeds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/10—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material
    • A01G24/12—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing inorganic material containing soil minerals
    • A01G24/15—Calcined rock, e.g. perlite, vermiculite or clay aggregates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
    • A01G24/22—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing plant material
    • A01G24/23—Wood, e.g. wood chips or sawdust
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
    • A01G24/28—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing peat, moss or sphagnum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明属于植物生物技术领域，公开了一种黄芪人工种子制备方法。在超净工作台上，将无菌的黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂中进行离子交换反应5‑15min；而后以无菌水漂洗10‑20min，终止反应；捞起晾干；移栽时，采用木屑：腐殖土：珍珠岩＝1‑5：1‑5：1‑5作为移栽基质，进行移栽炼苗，保持基质湿润，空气湿度在70‑90％，每天喷水4‑5次，进行室内炼苗移栽。以现代植物组织培养技术为基础，建立一个具有体系稳定、出苗率高、较为简便实用等优点的黄芪人工种子技术体系，为黄芪苗木快繁奠定基础。

Description

一种黄芪人工种子制备方法
技术领域
本发明属于植物生物技术领域，本发明涉及一种黄芪人工种子制备方法。
背景技术
植物人工种子(Artificial seeds)或合成种子(Synthetic seeds)即人为制造的种子。人工种子技术是在植物离体培养技术基础上发展起来的一门新兴技术。人工种子是一种含有植物胚状体或芽等繁殖体、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。人工种子的概念最早是由Murashige于1978年第4届国际植物组织细胞培养大会上提出的。Murashige认为随着植物组织培养技术的不断发展，可以用少量的外植体同步培养出众多的胚状体，这些胚状体被包埋在某种胶囊内使其具有种子的功能，可以直接用于田间播种。1985年，日本学者Kamada将人工种子的概念延伸，他认为使用适当的方法包埋由组织培养所产生的具有发育成完整植株的分生组织(芽，愈伤组织，胚状体和生长点等)，可取代天然种子用于播种的颗粒体均可称为人工种子。1995年，中国科学家陈德富等将人工种子的概念进一步扩展，他们认为植物离体培养中产生的体细胞胚或能发育成完整植株的分生组织(如胚状体、芽和茎段等)，包埋在含有营养物质和具有保护功能的外壳内，形成的在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体均可称之为人工种子。近年来，该概念已从狭义的体细胞胚的包被发展到对任何合适的植物繁殖体的包被，如不定芽、块茎、腋芽、芽尖、原球茎、愈伤组织和发根等繁殖体的包被。
黄芪，又名绵芪。多年生草本，产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史，其有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。由于长期大量采挖，近几年来野生黄芪的数量急剧减少，有趋于绝灭的危险。为此确定该植物为渐危种，国家三级保护植物。
黄芪的繁殖方式通常采用播种繁殖，且黄芪种子的硬实率较低(30-60％)，导致出苗不齐，出苗率较低，后代长势差异较大，不利于管理。人工种子可以提供一种快速繁殖黄芪苗木的途径，且可弥补上述不足。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明提供一种黄芪人工种子制备方法，以现代植物组织培养技术为基础，建立一个具有体系稳定、出苗率高、较为简便实用等优点的黄芪人工种子制备方法技术体系，为黄芪苗木快繁奠定基础。
本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：
一种黄芪人工种子制备方法，具体步骤如下：
在超净工作台上，将无菌的黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂中进行离子交换反应5-15min；而后以无菌水漂洗10-20min，终止反应；捞起晾干；移栽时，采用木屑：腐殖土：珍珠岩＝1-5：1-5：1-5作为移栽基质，进行移栽炼苗，保持基质湿润，空气湿度在70-90％，每天喷水4-5次，进行室内炼苗移栽。
所述移栽基质优选为木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1。
所述包埋剂为人工胚乳，配方是：MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+3wt％蔗糖。
所述凝固剂为人工种皮，配方是：3wt％海藻酸钠+2wt％CaCl2+5wt％纤维素+1wt％半纤维素。
所述的MS是一种植物组织培养的基本培养基，英文全称是Murashige-Skoog。
所述NAA全称为萘乙酸，所述IBA全称为吲哚丁酸。
本发明与现有技术相比的有益效果是：
本发明建立的黄芪人工种子制备方法技术体系稳定性好，制作较为简便，出苗率高。是首次进行黄芪人工种子的研制。本发明经过筛选得到的人工胚乳是最适宜黄芪生根的培养基，即是黄芪最佳的人工胚乳，人工种皮是经过筛选的最佳人工种皮，最有利于人工种子的萌发，移栽基质是经过筛选的最佳基质，最有利于人工种子的成活，珍珠岩透气性和吸水性良好，腐殖土又称营养土，含有较为丰富的有机质核矿质元素，碎木屑疏松透气，渗水性强，三者之间作用协同互补，三者配合可为植物提供一个良好的生长发育环境。木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1作为移栽基质成活率最高、效果最好。
附图说明
图1为本发明制作得到的黄芪人工种子。
图2为本发明黄芪人工种子萌发初期。
具体实施方式
下面通过具体实施例详述本发明，但不限制本发明的保护范围。如无特殊说明，本发明所采用的实验方法均为常规方法，所用实验器材、材料、试剂等均可从商业途径获得。
实施例1
在超净工作台上，将无菌的黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂(人工胚乳，配方是：MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+3wt％蔗糖)中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂(人工种皮，配方是：3wt％海藻酸钠+2wt％CaCl2+5wt％纤维素+1wt％半纤维素)中进行离子交换反应15min。而后以无菌水漂洗20min，终止反应。捞起晾干。移栽时，采用木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1作为移栽基质，进行移栽炼苗，保持基质湿润，空气湿度在80％，每天喷水4～5次，进行室内炼苗移栽。
实施例2
在超净工作台上，将无菌黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂(人工胚乳，配方是：1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+3wt％蔗糖)中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂(人工种皮，配方是：1wt％海藻酸钠+1wt％CaCl2+1wt％纤维素+3wt％半纤维素)中进行离子交换反应5min。而后以无菌水漂洗10min，终止反应。捞起晾干。移栽炼苗时三种基质碎木屑、土壤、珍珠岩的比例为5：1：1，保持基质湿润，空气湿度在80％，每天喷水4～5次，进行室内炼苗移栽。
实施例3
在超净工作台上，将无菌黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂(人工胚乳，配方是：1/4MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+3wt％蔗糖)中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂(人工种皮，配方是：5wt％海藻酸钠+3wt％CaCl2+3wt％纤维素+5wt％半纤维素)中进行离子交换反应10min。而后以无菌水漂洗15min，终止反应。捞起晾干。移栽炼苗时三种基质碎木屑、土壤、珍珠岩的比例为1：1：5，保持基质湿润，空气湿度在80％，每天喷水4～5次，进行室内炼苗移栽。
一、研究实验数据
1.人工胚乳的筛选
首先进行最适生根培养基的筛选，将最适生根培养基去除琼脂作为人工胚乳。以MS、1/2MS、1/4MS为基本培养基，设定NAA浓度为：0.5～2.0mg/L；IBA浓度为：0.5～2.0mg/L；蔗糖浓度均为3％，琼脂浓度均为7％。作3因素3水平正交设计，不考虑交互作用，通过正交试验筛选人工胚乳配方。以茎段生根率为筛选指标(见表1-1)。
实验设计：人工胚乳中，基本培养基为MS(A1)、1/2MS(A2)、1/4MS(A3)；NAA浓度设计为0.5mg/L(B1)、1.0mg/L(B2)、2.0mg/L(B3)；IBA浓度设计为0.5％mg/L(C1)、1.0％mg/L(C2)、2.0mg/L(C3)。采取正交设计的方法，实验处理组合共9个，每个处理设5次重复。即：
A1B1C1处理1
A1B2C2处理2
A1B3C3处理3
A2B1C2处理4
A2B2C3处理5
A2B3C1处理6
A3B1C3处理7
A3B2C1处理8
A3B3C2处理9
表1-1不同处理的生根率(％)
Figure BDA0002289222950000041
表1-2对表1-1结果的方差分析
Figure BDA0002289222950000042
Figure BDA0002289222950000051
表1-3对表1-1数据的差异显著性检验
处理 平均数 5％差异 1％差异
处理2 76.00 a A
处理1 60.00 b B
处理7 58.00 b B
处理3 56.00 b B
处理5 52.00 b B
处理6 52.00 b B
处理9 52.00 b B
处理4 50.00 b B
处理8 50.00 b B
实验结果：处理组合A1B2C2(即：MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+3wt％蔗糖)是最适宜的生根培养基，在该培养基上生根率最大。
2.人工种皮的筛选
以黄芪愈伤组织小块茎为繁殖体，MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+3wt％蔗糖为人工胚乳，进行进行适宜的人工种皮的筛选。人工种皮以浓度为1wt％～5wt％的海藻酸钠、浓度为1wt％～3wt％的CaCl2、浓度为1wt％～5wt％的纤维素和浓度为1wt％～5wt％的半纤维素溶液相互配合。作4因素3水平正交设计，不考虑交互作用，通过正交试验筛选人工种皮。以人工种子在MS+3wt％蔗糖培养基上的萌发率为筛选指标(见表2-1)。
实验设计：人工种皮中，海藻酸钠浓度为1％(A1)、3％(A2)、5％(A3)；CaCl2浓度为1％(B1)、2％(B2)、3％(B3)；纤维素浓度为1％(C1)、3％(C2)、5％(C3)；半纤维素浓度为1％(D1)、3％(D2)、5％(D3)。采取正交设计的方法，实验处理组合共9个，每个处理设5次重复。即：
A1B1C1D1处理1
A1B2C2D2处理2
A1B3C3D3处理3
A2B1C2D3处理4
A2B2C3D1处理5
A2B3C1D2处理6
A3B1C3D2处理7
A3B2C1D3处理8
A3B3C2D1处理9
表2-1不同处理的萌发率(％)
Figure BDA0002289222950000061
表2-2对表2-1结果的方差分析
变异来源 自由度 平方和 均方 F值 F0.05 F0.01
处理间 8 1920.00 240.00 3.48** 2.21 3.05
误差 36 2480.00 68.89
总变异 44 4400.00
表2-3对表2-1数据的差异显著性检验
Figure BDA0002289222950000062
Figure BDA0002289222950000071
实验结果：处理组合A2B2C3D1(即：3wt％海藻酸钠+2wt％CaCl2+5wt％纤维素+1wt％半纤维素)是最适宜的人工种皮配方。
3.移栽基质的筛选
采用碎木屑、腐殖土、珍珠岩三种基质按不同比例配比(1～5：1～5：1～5)。进行移栽炼苗，保持基质湿润，空气湿度在80％，每天喷水4～5次，进行室内炼苗移栽。
实验设计：移栽基质中，碎木屑、腐殖土、珍珠岩三种基质采用了三种配比，即碎木屑：腐殖土：珍珠岩＝5：1：1、碎木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1和碎木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：1：5。考查上述三种配比时，人工种子的成活率(见表3-1)。每个处理每盆移栽10粒种子，设置5次重复。
表3-1不同配比基质上移栽成活率(％)
Figure BDA0002289222950000072
表3-2对表3-1的方差分析
Figure BDA0002289222950000073
Figure BDA0002289222950000081
表3-3对表3-1数据的差异显著性检验
处理 平均数 5％差异 1％差异
处理2 76.00 a A
处理3 62.00 b AB
处理1 58.00 b B
实验结果：碎木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1的配比是最佳基质，在该基质上移栽成活率最大。
以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例，而并非本发明可行实施的全部实施例。对于本领域一般技术人员而言，在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而易见的改动，都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。

Claims (1)

1.一种黄芪人工种子制备方法，其特征是，具体步骤如下：
在超净工作台上，将无菌的黄芪愈伤组织小块茎放入到包埋剂中，混合均匀，然后用吸管每次吸取一个繁殖体，滴到凝固剂中进行离子交换反应5-15min；而后以无菌水漂洗10-20min，终止反应；捞起晾干；移栽时，采用木屑：腐殖土：珍珠岩＝1：3：1作为移栽基质，进行移栽炼苗，保持基质湿润，空气湿度在70-90％，每天喷水4-5次，进行室内炼苗移栽；
所述包埋剂为人工胚乳，配方是：MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L+3wt％蔗糖；
所述凝固剂为人工种皮，配方是：3wt％海藻酸钠+2wt％CaCl2+5wt％纤维素+1wt％半纤维素。
CN201911172969.6A 2019-11-26 2019-11-26 一种黄芪人工种子制备方法 Active CN110771507B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911172969.6A CN110771507B (zh) 2019-11-26 2019-11-26 一种黄芪人工种子制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911172969.6A CN110771507B (zh) 2019-11-26 2019-11-26 一种黄芪人工种子制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110771507A CN110771507A (zh) 2020-02-11
CN110771507B true CN110771507B (zh) 2022-07-01

Family

ID=69392521

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911172969.6A Active CN110771507B (zh) 2019-11-26 2019-11-26 一种黄芪人工种子制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110771507B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113317203A (zh) * 2021-06-28 2021-08-31 大连大学 一种广藿香人工种子培养方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103641543A (zh) * 2013-11-23 2014-03-19 大连大学 一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基
CN105409778A (zh) * 2015-12-22 2016-03-23 广西壮族自治区药用植物园 红腺忍冬无菌组培苗叶柄不定芽诱导的方法
CN107079626A (zh) * 2017-06-15 2017-08-22 湖南农业大学 一种通过种植苋菜减少土壤重金属镉、铅污染的方法
CN107410028A (zh) * 2017-08-22 2017-12-01 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种黄芪种苗的培养方法
CN113142054A (zh) * 2021-04-26 2021-07-23 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心（宁夏农业生物技术重点实验室） 一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030086981A1 (en) * 2001-09-17 2003-05-08 The Nisshin Oil Mills, Ltd. Glycerin fatty acid ester for palliate a symptom of premenstrual syndrome, a palliative of premenstrual syndrome, oil or fat composition for palliate a symptom of premenstrual syndrome, and food and drink for palliate a symptom of premenstrual syndrome
CN101981443B (zh) * 2008-04-03 2014-05-07 株式会社津村 抑肝散的生物测定方法
AU2013203272C1 (en) * 2012-06-01 2019-01-17 Agriculture Victoria Services Pty Ltd Novel organisms
CN105851748B (zh) * 2016-04-01 2018-11-30 李国清 一种黄芪复合抗疲劳饮料及其制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103641543A (zh) * 2013-11-23 2014-03-19 大连大学 一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基
CN105409778A (zh) * 2015-12-22 2016-03-23 广西壮族自治区药用植物园 红腺忍冬无菌组培苗叶柄不定芽诱导的方法
CN107079626A (zh) * 2017-06-15 2017-08-22 湖南农业大学 一种通过种植苋菜减少土壤重金属镉、铅污染的方法
CN107410028A (zh) * 2017-08-22 2017-12-01 南京工业大学大丰海洋产业研究院 一种黄芪种苗的培养方法
CN113142054A (zh) * 2021-04-26 2021-07-23 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心（宁夏农业生物技术重点实验室） 一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"白三叶人工种子制作技术研究";邢小姣;《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）农业科技辑》;20170315(第3期);第35页第5.1.2.1节、第42页第6.1.2.1-6.1.2.2节、第45页第6.2.1.4节 *
"蒙古黄芪高频再生体系的建立";王宏霞等;《中药材》;20170302;第40卷(第1期);第18页第2.5节、第20页第3.4节 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110771507A (zh) 2020-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. A micropropagation system for cloning of hemp (Cannabis sativa L.) by shoot tip culture
Huh et al. Effects of altering medium strength and sucrose concentration on in vitro germination and seedling growth of Cypripedium macranthos Sw
AU739097B2 (en) Method for inducing and determining maturity in conifer somatic embryos
Chee Somatic embryogenesis and plant regeneration of squash Cucurbita pepo L cv. YC 60
SE534887C2 (sv) Förfarande för stratifiering och förvaring av somatiska embryon
CN110771507B (zh) 一种黄芪人工种子制备方法
CN112470929B (zh) 大花红景天根颈顶端组织获得再生植株的方法
CN103461119B (zh) 粗枝云杉体细胞胚胎发生与植株再生方法
Lee et al. Zygotic embryo culture is an efficient way to optimize in vitro growth in Panax ginseng
CN110771510B (zh) 一种丁香人工种子的制作方法
Shahinozzaman et al. In vitro clonal propagation of a fast growing legume tree-Acacia mangium Willd. employing cotyledonary node explants
CN110771509B (zh) 一种甘草人工种子及其培养方法
CN110771508B (zh) 一种蓝莓人工种子制备方法
CN103651078A (zh) 一种筛选转基因植物种子的方法
CN113142060A (zh) 一种日本紫珠快速高效繁殖的方法
Behera et al. Effect of plant growth regulator on in-vitro micropropagation of Bitter Yam (Dioscorea hispida Dennst.)
CN110771506B (zh) 一种红枫人工种子的制作方法
WO2016112165A1 (en) Late embryo development and maturation at colder temperature
CN106900552B (zh) 一种促进鱼木离体快速繁殖的培养基套盒及方法
CN105993955A (zh) 一种黄花倒水莲离体快繁育苗方法
Radojević et al. In vitro propagation of Dianthus ciliatus ssp. dalmaticus and D. giganteus ssp. croaticus (Caryophyllaceae) from stem segment cultures.
CN111134021A (zh) 一种以胚为外植体的齿叶冬青组培快繁方法
Cavallaro et al. Improving in vitro mass proliferation of carob (Ceratonia siliqua L.) from seedling apices by temporary immersion systems
CN105123522A (zh) 一种广西美登木的组织培养快速繁殖方法
Bandara et al. A review on in vitro propagation of turmeric (Curcuma longa Ln.)

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant