CN110680837A - 一株植物乳杆菌及其在提高肠道il-17f表达量方面的应用 - Google Patents

一株植物乳杆菌及其在提高肠道il-17f表达量方面的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株植物乳杆菌及其在提高肠道IL‑17F表达量方面的应用，属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明开发的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM8610可改善肠道健康，具体体现在：(1)耐酸耐胆盐能力较强；(2)代时较短；(3)可显著降低肠道中IL‑17F的表达量；(4)可显著恢复体重；(5)可显著恢复DAI。因此，植物乳杆菌CCFM8610在制备改善肠道健康的产品(如食品、药品或保健品等)中，具有巨大的应用前景。

Description

一株植物乳杆菌及其在提高肠道IL-17F表达量方面的应用
技术领域
本发明涉及一株植物乳杆菌及其在提高肠道IL-17F表达量方面的应用，属于微生物技术领域以及医药技术领域。
背景技术
肠道是盘曲在人体腹部的消化道。大部分的消化作用与近乎全部的食物、营养物质的吸收都在肠道中进行，对于人体健康至关重要。
在人体肠道内栖息着约1014个细菌，被称为肠道菌群。肠道菌群在人体内发挥着重要作用，诸如肠道屏障(防止毒素与致病菌感染)、营养代谢(小分子营养物质吸收合成)、免疫调节(激活淋巴细胞，促进免疫球蛋白分泌)、肝-肠循环、脑-肠循环等，与健康息息相关。外界的环境因素或饮食甚至于情绪变化会导致肠道菌群的组成发生改变，引发诸多病症。因此维持肠道菌群平衡是至关重要的。
白细胞介素指人体内参与免疫应答，免疫调节反应的多种细胞因子。在人体内，白细胞介素可以有效激活免疫细胞，介导T细胞、B细胞活化，并在炎症反应中起到重要作用。IL-17F是活化的单核细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞以及粘膜上皮细胞分泌的一种白细胞介素。在肠道内，IL-17F可以诱导T细胞激活，并刺激肠上皮细胞，成纤维细胞产生多种促炎细胞因子(如IL-6等)，进而诱发炎症发生。
益生菌是一类对宿主健康有益的活的微生物。机体补充益生菌可以有效改善肠道微环境，促进营养物质的产生，增强免疫并促进食物消化吸收。研究表明，益生菌可以有效调节人体细胞因子的表达，并抑制炎症产生。因此，益生菌作为新型膳食因子已经受到人们的关注。
然而，现阶段IL-17F的关注热点多集中在使用药物或免疫抑制剂抑制IL-17F表达以抑制疾病方面或是研究IL-17F在疾病模型中的致病机理。诸如使用免疫抑制剂对IL-17F靶向抑制，显著控制了银屑病的发展(BioDrugs.2019Aug；33(4):391-399)。而在结肠炎模型中对IL-17F的促炎作用进行了研究，发现IL-17F诱导了Ang4和PLA2等抗菌肽的表达，降低了有益菌XIVa丰度，并增加了促炎菌普氏菌属的丰度，诱导了结肠炎的加重(Natureimmunology.2018Jul；19(7):755-765)。在国内外专利中，多为针对IL-17F的抗体研发(CN109641953A，2019-04-16)，或是使用IL-17F抗体治疗疾病方面(US10308723，2019-06-04)。少有补充益生菌以抑制IL-17F表达以缓解疾病的专利出现。
植物乳杆菌是一种广泛存在于自然界中的乳酸菌，也是被广泛用于保健食品中的一种益生菌。研究表明，植物乳杆菌在抗氧化(Biological trace elementresearch.2012Dec；150(1-3):264-271)抑制致病菌(CN109628354A，2019-04-16)，降低食品生物胺含量(CN109588656A，2019-04-09)等方面具有显著效果。并能有效抑制促炎细胞因子的表达，并抑制炎症信号通路激活(BMC microbiology.2019Jul；19(1):170)。但现阶段，并没有使用植物乳杆菌抑制机体肠道IL-17F表达的相关研究与专利出现。因此，有必要对单一植物乳杆菌菌株调控IL-17F的效果进行探究，并开发出具有抑制IL-17F表达量的植物乳杆菌。这不仅可以为以膳食疗法调控抑制炎症奠定基础，更是有极为重要的经济意义。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一株植物乳杆菌在制备降低肠道IL-17F表达量的产品中的应用，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM8610，已经公开于公开号为CN102827796A的专利申请中。
所述植物乳杆菌CCFM8610具有以下特征：
(1)在MRS培养基上培养48h后的菌落呈圆形、白色、光滑；
(2)耐模拟胃肠液：在pH为3的含有3g/L胃蛋白酶的生理盐水中培养3h后，继续在pH为8的含有1g/L胰蛋白酶和0.3％(m/v)(即0.3g/100mL)胆盐的生理盐水中培养4h，存活率为83.18±0.34％；
(3)在MRS培养基上生长，代时为188.8±13.8min；
(4)可显著降低肠道中IL-17F的表达量。
(5)可显著恢复小鼠体重与疾病活动指数。
本发明的一种实施方式中，所述产品中，植物乳杆菌CCFM8610的活菌数为不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
本发明的一种实施方式中，所述产品中，植物乳杆菌CCFM8610的活菌数为不低于1×108CFU/mL或1×108CFU/g。
本发明的一种实施方式中，所述产品包含食品、药品或保健品。
本发明的一种实施方式中，所述药品含有植物乳杆菌CCFM8610、药物载体和/或药用辅料。
在本发明的一种实施方式中，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒以及脂质体。
在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含赋形剂或附加剂。
在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂的一种或几种。
在本发明的一种实施方式中，所述附加剂包含微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素或精制卵磷脂。
在本发明的一种实施方式中，所述药物的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
本发明的有益效果：
本发明公开了一株植物乳杆菌CCFM8610在降低肠道IL-17F表达方面的应用，具体体现在：
(1)胃肠道耐受能力是益生菌在肠道内定殖的基础，耐酸耐胆盐能力强的菌株在肠道中更有可能存活，这有助于益生菌在肠道内发挥益生作用，本发明的植物乳杆菌CCFM8610耐酸耐胆盐能力较强，具有较高的胃肠道耐受能力，在pH为3的含有胃蛋白酶的生理盐水中培养3h后，继续在pH为8的含有胰蛋白酶和胆盐的生理盐水中培养4h，植物乳杆菌CCFM8610的存活率为83.18±0.34％；
(2)代时直接反映了微生物生长速度的快慢，代时短的菌株在肠道环境中竞争更多营养物，这有利于菌株的代谢，有利于促进菌株调节肠道微环境，本发明的植物乳杆菌CCFM8610代时较短，为124.2±4.33min，具有较快的生长能力；
(3)IL-17F是人体中重要的一种细胞因子，可诱导T细胞激活，促进多种细胞分泌促炎细胞因子，加剧肠道炎症，而本发明的植物乳杆菌CCFM8610可显著抑制肠道中IL-17F的表达，灌胃本发明的植物乳杆菌CCFM8610 7天后，小鼠肠道中IL-17F的表达量明显降低，为2.78±0.19pg/mg蛋白；
(4)体重直接反映了机体健康程度，是肠道炎症的直观指标，而本发明的植物乳杆菌CCFM8610可显著恢复小鼠体重，灌胃本发明的植物乳杆菌CCFM8610 7天后，小鼠体重得到显著恢复；
(5)疾病活动指数(Disease activity index,DAI)是结合患病个体的体重下降百分率、粪便形态和粪便潜血三种情况进行综合评价得到的评分，反映了疾病的严重程度，灌胃本发明的植物乳杆菌CCFM8610 7天后，小鼠的DAI明显恢复。
因此，本发明的植物乳杆菌CCFM8610在制备改善肠道健康的产品(如食品、药品或保健品等)中，具有巨大的应用前景。
附图说明
图1：植物乳杆菌CCFM8610在MRS平板固体培养基上培养48小时后的菌落形态。
图2：植物乳杆菌CCFM8610在1000倍放大下的菌体形态。
图3：植物乳杆菌CCFM8610的生长曲线。
图4：不同株植物乳杆菌在模拟胃液下培养3h后继续于模拟肠液下培养4h的存活率；其中，横坐标是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM259、CCFM362、CCFM382、CCFM436、CCFM595、CCFM601、CCFM634、CCFM8610的编号。
图5：不同株植物乳杆菌在体外培养过程中的代时；其中，横坐标是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM382、CCFM8610的编号。
图6：不同株植物乳杆菌16S rDNA基因最大似然树。
图7：不同株植物乳杆菌对结肠炎小鼠IL-17F表达量的影响；其中，“#”表示显著低于造模组IL-17F表达量水平(P<0.05)。
图8：不同株植物乳杆菌对结肠炎小鼠体重指数的影响；其中，“*”表示与造模组体重具有显著性差异(P<0.05)。
图9：不同株植物乳杆菌对结肠炎小鼠DAI的影响；其中，“*”表示与造模组DAI具有显著性差异(P<0.05)。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的阐述。
下述实施例中涉及的胃蛋白酶1:10000U(产品编号：A600688、CAS：[9001-75-6])购自生工生物工程(上海)股份有限公司；下述实施例中涉及的胰蛋白酶1:250(产品编号：64008867、CAS：[9002-07-7])购自国药集团化学试剂有限公司；下述实施例中涉及的胆盐购自上海拜力生物科技有限公司；下述实施例中涉及的葡萄糖购于国药集团化学试剂有限公司；下述实施例中涉及的脱脂乳粉购自内蒙古伊利实业集团股份有限公司，下述实施例中涉及的便隐血匹拉米洞半定量检测法试剂盒购自上海承新科贸发展有限公司。
下述实施例中涉及的培养基如下：
MRS液体培养基(g/L)：蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、葡萄糖20g/L、无水乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二胺2g/L、K2HPO4·3H2O 2.6g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、MnSO4·7H2O 0.25g/L、吐温-80 1g/L、蒸馏水1000g/L。
MRS固体培养基(g/L)：蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、葡萄糖20g/L、无水乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二胺2g/L、K2HPO4·3H2O 2.6g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、MnSO4·7H2O 0.25g/L、吐温-80 1g/L、琼脂20g/L、蒸馏水1000g/L。
实施例1：植物乳杆菌的培养
将植物乳杆菌CCFM8610接入MRS固体培养基上于37℃培养48h后，观察其菌落。图1为植物乳杆菌CCFM8610在MRS平板固体培养基上培养48小时后的菌落形态，发现其菌落呈圆形、白色、光滑。
实施例2：植物乳杆菌的形态观察
将实施例1中的植物乳杆菌CCFM8610接入MRS固体培养基上于37℃培养48h。取洁净载玻片一张，在火焰上微微加热。待冷却后，在中央部位滴加一小滴无菌水，用接种环在火焰旁挑取MRS固体培养基上少量菌体与水混合。烧去接种环上多余菌体，在用接种环将菌体途程直径1cm的均匀薄层。待其自然干燥后，在微火上加热3～4次固定。在涂片处滴加1～2滴结晶紫溶液，染色1min。用水轻轻洗去染液，用吸水纸轻轻吸去载玻片上水分。干燥后以显微镜进行镜检。
图2为植物乳杆菌CCFM8610在1000倍放大下的菌体形态。
实施例3：植物乳杆菌的生长曲线
将实施例1中的植物乳杆菌CCFM8610接入MRS固体培养基上于37℃培养48h。挑取生长状态良好的单菌落接种到MRS液体培养基中，静置培养24h。分别在培养2h，4h，6h，8h，10h，12h，16h，20h，24h时取菌悬液测定OD600，并绘制植物乳杆菌CCFM8610的生长曲线。
图3为植物乳杆菌CCFM8610的生长曲线。
实施例4：不同植物乳杆菌对模拟胃肠液的耐受性
具体步骤如下：
将植物乳杆菌CCFM8610、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM259(保藏编号CGMCC No.10342，已经公开于公开号为CN105002112A的专利申请中)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM362(保藏编号CCTCC M206032，已经公开于公开号为CN1844363A的专利申请中)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM382(保藏编号CGMCC No.9734，已经公开于公开号为CN104357349A的专利申请中)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM436(保藏编号CGMCC No.12470，已经公开于公开号为CN105969700A的专利申请中)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM595(保藏编号CGMCC No.9511，已经公开于公开号为CN107988123A的专利申请中)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM601(保藏编号CGMCC No.12227，已经公开于公开号为CN106085901A的专利申请中)以及植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM634(保藏编号CGMCC No.9740，已经公开于公开号为CN105132308A的专利申请中)分别接入MRS液体培养基中于37℃培养18h后，离心收集细胞，将收集到的细胞经生理盐水洗涤，洗涤结束后，再次离心收集细胞，将收集到细胞分别重悬于pH为3(pH由HCl溶液调节)的含有3g/L胃蛋白酶的生理盐水中至菌液OD600为5.0，取1mL菌液进行平板活菌计数作为菌液中植物乳杆菌的原始活菌数，将剩余菌液置于37℃培养3h，将培养后的菌液离心收集细胞，将收集到的细胞再次重悬于pH为8(pH由NaOH调节)的含有1g/L胰蛋白酶和0.3％(m/v)胆盐的生理盐水中至菌液OD600为5.0，置于37℃培养4h后，取1mL菌液进行平板活菌计数作为耐受模拟胃肠液后菌液中植物乳杆菌的活菌数。
其中，耐受胃肠液后的存活率(％)＝(耐受模拟胃肠液后菌液中植物乳杆菌的活菌数/菌液中植物乳杆菌的原始活菌数)100％。
检测结果如下：由图4可知，在pH为3的含有胃蛋白酶的生理盐水中培养3h后，继续在pH为8的含有胰蛋白酶和胆盐的生理盐水中培养4h，植物乳杆菌CCFM8610的存活率为83.18±0.34％、植物乳杆菌CCFM259的存活率为76.28±0.58％、植物乳杆菌CCFM361的存活率为76.68±0.39％、植物乳杆菌CCFM382的存活率为71.11±0.09％、植物乳杆菌CCFM436的存活率为77.46±0.21％、植物乳杆菌CCFM595的存活率为76.64±0.57％、植物乳杆菌CCFM601的存活率为75.27±0.29％、植物乳杆菌CCFM634的存活率为77.03±0.15％。
可见，植物乳杆菌CCFM8610对模拟胃肠液的耐受能力更强，植物乳杆菌CCFM382对模拟胃肠液的耐受能力较弱。
实施例5：不同植物乳杆菌的代时
具体步骤如下：
(1)在MRS培养基上，正常活化菌株3代；
(2)将实施例4中的植物乳杆菌CCFM8610与植物乳杆菌CCFM382分别接入MRS液体培养基中于37℃培养。自菌株对数生长期开始每隔1h取样一次测定OD600，至菌株对数生长期结束为止。
(3)根据OD600数据计算出不同植物乳杆菌菌株的代时。
由图5可知，植物乳杆菌CCFM8610代时较低，为124.2±4.33min。植物乳杆菌CCFM382代时较长，分别为141.6±3.34min。
实施例6：不同植物乳杆菌的16S rDNA基因序列比较
将植物乳杆菌CCFM8610、植物乳杆菌CCFM382以及商业化植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ST-III(保藏编号CGMCC NO.0847)进行PCR扩增16S rDNA，PCR产物送至英潍捷基(上海)贸易有限公司进行测序。将测序得到的结果在NCBI中进行比较并使用Mega软件对16S rDNA基因序列进行分析，结果如图6所示。16S rDNA基因最大似然树表明，植物乳杆菌CCFM8610与植物乳杆菌CCFM382、植物乳杆菌ST-III位于不同进化支上，表明植物乳杆菌CCFM8610与其他两株菌亲缘关系较远，具有显著差异。
实施例7：不同植物乳杆菌对小鼠肠道IL-17F表达量的影响
具体步骤如下：
将植物乳杆菌CCFM8610与植物乳杆菌CCFM382分别接入MRS液体培养基中于37℃培养18h后，离心收集细胞，经生理盐水洗涤后分别重悬于13％(m/v)的脱脂乳粉溶液中至菌浓度为5×109CFU/mL，获得菌悬液，将菌悬液于-80℃下保存待用。
取体重在26～28g的SPF级C57black/6雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为：空白组、造模组、灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液的CCFM8610组、灌胃植物乳杆菌CCFM382菌悬液的CCFM382组。其中，CCFM8610组、CCFM382组为实验组。
实验共14天：第一周(7天)为小鼠适应期；第8天开始灌胃直至实验结束，实验组分别灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液与植物乳杆菌CCFM382菌悬液。菌悬液以1×109CFU/只/天的剂量进行灌胃，空白组、造模组仅灌胃等量脱脂乳粉溶液作为对照；共灌胃7天。
在灌胃结束后第2天处死小鼠，通过购自南京森贝伽生物科技有限公司的小鼠白细胞介素17F(IL-17F)酶联免疫分析试剂盒对不同实验组小鼠肠道中IL-17F的表达量进行测定，并用购自碧云天生物技术有限公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒对小鼠肠道蛋白浓度进行测定。
由图7可知，造模组小鼠、CCFM382组小鼠肠道中IL-17F的表达量没有显著差异。而灌胃植物乳杆菌CCFM8610后，小鼠肠道中IL-17F的表达量显著下降，为2.78±0.19pg/mg蛋白，对于抑制宿主肠道IL-17F表达的效果最为显著。
可见，本发明植物乳杆菌CCFM8610可显著降低小鼠肠道中IL-17F的表达量，具有明显优势。
实施例8：不同植物乳杆菌对小鼠体重的影响
具体步骤如下：
将实施例4中的植物乳杆菌CCFM8610与植物乳杆菌CCFM382分别接入MRS液体培养基中于37℃培养18h后，离心收集细胞，经生理盐水洗涤后分别重悬于13％(m/V)的脱脂乳粉溶液中至菌浓度为5×109CFU/mL，获得菌悬液，将菌悬液于-80℃下保存待用。
取体重在26～28g的SPF级C57black/6雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为：空白组、造模组、灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液的CCFM8610组、灌胃植物乳杆菌CCFM382菌悬液的CCFM382组。其中，CCFM8610组、CCFM382组为实验组。
实验共14天：第一周(7天)为小鼠适应期；第8天开始灌胃直至实验结束，实验组分别灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液与植物乳杆菌CCFM382菌悬液。菌悬液以1×109CFU/只/天的剂量进行灌胃，空白组、造模组仅灌胃等量脱脂乳粉溶液作为对照；共灌胃7天。
在8-14天中，每天检测每只小鼠的体重。
由图8可知，实验第14天时，与空白组相比造模组的体重显著下降。灌胃植物乳杆菌CCFM8610的小鼠体重得到明显恢复。灌胃植物乳杆菌CCFM382的小鼠体重与造模组相比没有明显变化。
可见，本发明植物乳杆菌CCFM8610能显著恢复小鼠体重，具有明显优势。
实施例9：不同植物乳杆菌对小鼠DAI的影响
具体步骤如下：
将实施例4中的植物乳杆菌CCFM8610与植物乳杆菌CCFM382分别接入MRS液体培养基中于37℃培养18h后，离心收集细胞，经生理盐水洗涤后分别重悬于13％(m/v)的脱脂乳粉溶液中至菌浓度为5×109CFU/mL，获得菌悬液，将菌悬液于-80℃下保存待用。
取体重在26～28g的SPF级C57black/6雄性小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为：空白组、造模组、灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液的CCFM8610组、灌胃植物乳杆菌CCFM382菌悬液的CCFM382组。其中，CCFM8610组、CCFM382组为实验组。
实验共14天：第一周(7天)为小鼠适应期；第8天开始灌胃直至实验结束，实验组分别灌胃植物乳杆菌CCFM8610菌悬液与植物乳杆菌CCFM382菌悬液。菌悬液以1×109CFU/只/天的剂量进行灌胃，空白组、造模组仅灌胃等量脱脂乳粉溶液作为对照；共灌胃7天。
在8-14天中，每天检测每只小鼠的粪便潜血、粪便形态(粪便潜血、粪便形态检测根据便隐血匹拉米洞半定量检测法试剂盒说明书进行)。
由图9可知，实验第14天时与空白组相比，造模组的DAI显著上升，为3.585±0.17。灌胃植物乳杆菌CCFM8610的小鼠DAI显著下降，为2.00±0.55。灌胃植物乳杆菌CCFM382的小鼠DAI与造模组相比没有明显变化，为3.24±0.17。
可见，本发明植物乳杆菌CCFM8610能显著恢复小鼠DAI，具有明显优势。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一株植物乳杆菌在制备降低肠道IL-17F表达量的产品中的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CCFM8610。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌CCFM8610的活菌数为不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌CCFM8610的活菌数为不低于1×108CFU/mL或1×108CFU/g。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包含食品、药品或保健品。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药品含有植物乳杆菌CCFM8610、药物载体和/或药用辅料。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒或脂质体。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药用辅料包含赋形剂或附加剂。
8.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药用辅料包含溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂的一种或几种。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述附加剂包含微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素或精制卵磷脂。
10.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
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