CN110672576B - 一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及纳米材料的应用领域，具体地，涉及一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法。采用两步法水相合成碲化镉量子点，用于对异烟肼含量的荧光检测。通过考察pH值、离子强度、量子点用量、反应时间及温度对反应体系的影响，结果表明，异烟肼浓度在2.92×10‑5~1.02×10‑3 mol/L时，体系中量子点发光明显受到抑制，而且存在一个良好的线性关系，检出限为4.826×10‑7 mol/L，相对标准偏差为0.296％(n=10)，精密度很好。本发明所建立的方法简单快速、成本低廉、抗干扰能力好，可直接检测分析。该方法不仅提供了一种简单检测异烟肼含量的方法，而且还拓宽了量子点荧光检测方法应用的研究。

Description

一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法
技术领域
本发明涉及纳米材料的应用领域，具体地，涉及一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法。
背景技术
异烟肼，学名4-吡啶甲酰肼，又称雷米封(isoniazid，4-Pyridinecarboxylicacid hydrazide，分子量为137.14，缩写INH)。异烟肼是用于治疗结核病的一线药物，尤其是在与其他抗结核药物的联用时能发挥出更好的治疗效果。异烟肼作为治疗结核病药物的作用机理主要是通过阻碍结核菌菌壁分枝菌酸的合成，从而促使结核杆菌失去了耐酸染色性、疏水性、增殖力等能力死亡。异烟肼还能与结核菌的菌体辅酶结合，阻止其相应催化作用，从而达到结核菌菌壁分枝菌酸不能够顺利合成的目的，妨碍结核病病菌的繁殖生长。
近年来，我国对药品中的异烟肼的检测方法有很多，常见的有容量法、紫外可见分光光度法、化学发光法、高效液相色谱法等等。
容量法是基于异烟肼中的酰肼基具有还原性，利用氧化还原滴定法来测量其含量的一种测量方法，这种方法准确度和精密度都较高，但缺点是它不适合于微量组分的分析，只适合于常量组分分析。
紫外可见分光光度法是基于异烟肼中具有共轭体系来检测含量的方法，该方法准确、简单、方便。共轭体系使得异烟肼具有较高的紫外吸收能力，可以利用其吸收系数来测定目标物的含量。
化学发光法是基于异烟肼与一些试剂发生反应，从而生成有一定发光特性的复合物，最后可以通过异烟肼浓度与发光强度在某浓度范围内呈线性关系，来测量异烟肼的含量，这种方法测量灵敏度高，简单易行。
根据中国药典记录，高效液相色谱法是异烟肼含量测定的国标法。高效液相色谱法的梯度洗脱法可同时测量异烟肼与其他药物分子的含量，高效液相色谱法具有高度的选择性，同时其测得的结果准确，可运用于微量的测定，灵敏度高。但高效液相色谱法实验过程复杂，而且实验成本相对昂贵，不利于一般测定的使用。
量子点(QuantumDots)是近年来发展起来的一种新型半导体荧光纳米材料。量子点作为纳米材料有其独特的纳米性质，当粒子的尺寸进入纳米量级时，量子点的尺寸效应、介电限域效应、宏观量子隧道效应和表面效应都会被尺寸限域所引起，这会导致量子点展现出多种宏观材料所没有的物理和化学性质。在这些性质的基础上，使得量子点在许许多多的行业上都有一定的发展潜力，例如量子点在生物标记、疾病诊断、医药的检测及功能材料的强化等方面都有广阔的应用前景。
与传统的有机染料相比较，量子点具有多种优势。例如它的发射光谱相对较窄和对称，且它的激发光谱相对较宽。量子点同时拥有较高的荧光量子产率、较长的荧光寿命和良好的生物相容性。一般量子点形成的材料尺寸与通常的荧光染料分子尺寸相近，所以可以代替荧光染料更好地运用于生物医学研究。正因以上优势，量子点是一种非常理想的荧光探针。相同种类的量子点材料能够通过改变尺寸，从而产生一系列颜色分明、发光波长不同的标记物家族，这是染料分子所不具备的功能。在稳定性方面，量子点能够接受多次的激发作用光发射荧光，而有机染料分子却一般会分解。
异烟肼在用药治疗过程中，可能会引起诸多不良反应，这些副作用与异烟肼用量有一定的关系。因此，对于异烟肼含量的测定在药品质量控制或用药安全方面都具有重要意义。量子点得益于其优秀的荧光性质和较高的灵敏度，使得它在含量分析检测中取得了很好的发展。
发明内容
为了实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法，具体步骤如下：
(一)采用两步法合成CdTe量子点：
(1)制备NaHTe溶液：在氮气保护下，将NaBH4加入装有水的试剂瓶中，待固体溶解完全后，迅速向其中加入Te粉，然后在常温下反应2-4h(优选为2h)，得到NaHTe溶液；
(2)Cd前驱体溶液制备：在氮气保护、搅拌下，将CdC12·2.5H2O溶于水，然后向其中加入巯基丙酸，并用NaOH溶液调节体系的pH值至10～11，得到Cd前驱体溶液；
(3)CdTe量子点：在氮气氛围下，将步骤(1)制备的NaHTe溶液快速加入步骤(2)的Cd前驱体溶液中，然后在100-150℃、氮气氛围下回流2-4h(优选为在100℃、氮气氛围下回流2h)，得到CdTe量子点原液，用水稀释后，得到CdTe量子点溶液，用于检测异烟肼含量；
所述NaBH4、Te粉、CdC12·2.5H2O与巯基丙酸的用量比为(3-5)mmol：1mmol：1mmol：(100-300)μL，优选为4mmol：1mmol：1mmol：150μL；
(二)CdTe量子点检测异烟肼含量
(a)在比色管中，加入pH＝3-7、浓度为0.05-0.2mol/L(优选为pH＝3-5、浓度为0.05-0.2mol/L)的磷酸盐缓冲溶液以及步骤(一)的CdTe量子点溶液和一定量不同浓度的异烟肼标准溶液，形成待测体系溶液，待测体系溶液室温下反应5-30min(优选为10min)后，测定体系的荧光强度，建立CdTe量子点溶液的荧光强度与异烟肼浓度的线性关系；
(b)将步骤(一)的CdTe量子点溶液和pH＝3-7、浓度为0.05-0.2mol/L(优选为pH＝3-5、浓度为0.05-0.2mol/L)的磷酸盐缓冲溶液加入到待测异烟肼溶液中，形成待测体系溶液，待测体系溶液室温下反应5-30min(优选为10min)后，检测荧光强度，根据步骤(a)的线性关系，获得待测体系溶液中异烟肼的含量。
进一步的，所述步骤(2)中NaOH溶液的浓度为1mol·L-1。
进一步的，所述步骤(a)和步骤(b)中待测体系溶液中CdTe量子点的浓度均为3.38×10-8mol·L-1-1.352×10-7mol·L-1，优选为8.45×10-8mol·L-1。
进一步的，所述步骤(a)和步骤(b)中磷酸盐缓冲溶液与CdTe量子点溶液加入量的体积比均为1:(0.2-0.8)，最优选为1:0.5。
进一步的，所述步骤(a)为：在比色管中，加入一定量的pH＝5、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲溶液、CdTe量子点溶液和不同浓度的异烟肼标准溶液，室温下反应10min后，测定体系的荧光强度，建立CdTe量子点溶液的荧光强度与异烟肼浓度的线性关系。
进一步的，所述步骤(a)中加入异烟肼标准溶液后体系中异烟肼的浓度分别为：2.92×10-5、5.83×10-5、8.75×10-5、1.17×10-4、1.46×10-4、1.75×10-4、2.92×10-4、5.84×10-4、1.02×10-3mol/L，异烟肼标准溶液浓度[Q]在2.92×10-5～1.02×10-3mol/L内，异烟肼浓度[Q]与荧光猝灭程度即F0/F呈良好的线性关系，其线性相关系R2＝0.9917，线性方程为F0/F＝1.1436+643[Q]。
与现有技术相比，本申请具有以下优点和有益效果:
本发明采用两步法水相合成碲化镉量子点，用于对异烟肼含量的荧光检测。通过考察pH值、离子强度、量子点用量、反应时间及温度对反应体系的影响，结果表明：异烟肼浓度在2.92×10-5～1.02×10-3mol/L时，体系中量子点发光明显受到抑制，而且存在一个良好的线性关系，检出限为4.826×10-7mol/L，相对标准偏差为0.296％(n＝10)，精密度很好。并且通过研究得出，异烟肼对CdTe量子点的猝灭的方式主要是动态猝灭。
本发明的量子点荧光猝灭法测定异烟肼的线性范围换算成质量浓度为4-140μg.mL-1，检出限为0.066μg.mL-1。文献[Journal ofChromatography B,2001,766(1):181-187.]报道的HPLC-UV方法测定异烟肼的线性范围为0.5-8μg.mL-1。文献[中华劳动卫生职业病杂志，2013，31(7)：546-547]报道的紫外分光光度法测定异烟肼的线性范围为5-30μg.mL-1，检出限为2.0μg.mL-1。文献[分析试验室，2014，3(5)：586-588]报道的基于有机试剂的荧光猝灭法测定异烟肼的线性范围为在0.10～8.0μg.mL-1，检出限为40.2ng/mL。
对比可见：本发明方法相对高效液相色谱法虽然线性范围的下限略高，但线性范围较宽，且本发明方法对仪器的要求更低；相对紫外分光光度法来说，本发明方法在线性范围和检出限方面都有明显优势；与基于有机试剂的荧光猝灭法相比，虽然本发明方法在检出限方面没有优势，但本发明方法的线性范围上限明显较高，并且量子点波长可调、耐光漂白、宽激发窄发射等优良的光谱特性使得本发明方法具有较好的应用价值。
本发明所建立的方法简单快速、成本低廉、抗干扰能力好，可直接检测分析。该方法不仅提供了一种简单检测异烟肼含量的方法，而且还拓宽了量子点荧光检测方法应用的研究。
附图说明
图1为实施例1制备的CdTe量子点的红外光谱图。
图2为实施例1实验一中不同pH值的磷酸盐缓冲溶液下CdTe量子点及CdTe-INH体系的荧光强度变化趋势图。
图3为实施例1实验二中不同浓度的磷酸盐缓冲溶液(PBS)浓度下CdTe量子点及CdTe-INH体系的荧光强度变化趋势图。
图4为实施例1实验三中不同CdTe量子点用量V(mL)下CdTe-INH体系的荧光强度变化趋势图。
图5为实施例1实验四中不同反应时间下CdTe-INH体系的荧光强度变化趋势图。
图6为实施例1实验五中异烟肼浓度对CdTe量子点荧光光谱的影响图。
图7为实施例1实验五中异烟肼浓度与CdTe量子点荧光猝灭的定量关系图。
图8为实施例1实验七中相对浓度干扰物质对CdTe-INH体系荧光的影响。
图9为实施例1实验七中低浓度的Ag+、Cu2+离子和掩蔽后的Ag+、Cu2+离子对CdTe-INH体系荧光的影响。图8和图9的纵坐标中F0和F分别为加干扰物前后量子点和异烟肼混合液的荧光强度，纵坐标(F0-F)/F0越接近0，表明干扰越小。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案做详细的说明。
以下实施例中异烟肼购自上海源叶生物科技有限公司，其他物质均是市面上购买的商品。
实施例1一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法，具体步骤如下：
(一)采用两步法合成CdTe量子点，具体如下：
(1)NaHTe溶液：往试剂瓶中加入10mL蒸馏水，通氮气除氧后将4mmol的NaBH4加入试剂瓶中，待固体溶解完全后，迅速向其中加入1mmol的Te粉，在氮气保护、常温下反应2h，得到NaHTe溶液。
(2)Cd前驱体：往250mL三口烧瓶中加入100mL蒸馏水，在25℃下通氮气搅拌，取1mmol CdC12·2.5H2O加入烧瓶中，溶解完全后向此溶液中加入150μL巯基丙酸，并用1mol·L-1NaOH溶液调节溶液的pH值到10～11，得到Cd前驱体溶液。
(3)CdTe量子点：将新制得的NaHTe溶液快速加入装有Cd前驱体溶液的三口烧瓶中，得到橙红色透明溶液，然后在100℃、氮气氛围下回流2h，得到CdTe量子点，将得到的CdTe量子点用水稀释5倍后用于后续异烟肼含量的检测，经测定和计算，稀释后的工作液中CdTe量子点的浓度为8.45×10-7mol/L。
CdTe量子点的红外光谱图如图1所示。1566cm-1处的吸收峰对应的是C＝O伸缩振动；2934cm-1处的吸收峰是-CH2中C-H的伸缩振动引起的；同时可以明显看到3434-3350cm-1处有较宽的吸收峰，说明此处有O-H的伸缩振动。证明巯基乙酸包覆的CdTe量子点制备成功。
(二)CdTe量子点检测异烟肼含量
在10mL的比色管中，加入一定酸度和浓度的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，一定体积的浓度为8.45×10-7mol·L-1的CdTe量子点和不同浓度的异烟肼标准溶液，定容到5mL，混合摇匀。室温下反应一定时间后，测定体系的荧光强度，记录荧光光谱。
实验一不同pH的PBS缓冲溶液对CdTe量子点以及CdTe-INH体系荧光强度的影响
以CdTe量子点检测异烟肼含量操作步骤中不加异烟肼溶液作对照，固定最终测试体系中异烟肼标准的浓度为1.458×10-4mol/L，检测时间为10min，CdTe量子点的用量为0.5mL，探究不同pH梯度的PBS缓冲溶液(1mL，0.1mol/L)对CdTe量子点以及CdTe-INH体系荧光强度的影响，结果如图2所示(图中带三角形标识的曲线为不加异烟肼溶液时的检测结果)。由图可知，随着pH值的依次增加，CdTe量子点溶液的荧光强度先增强后减弱，在pH＝4～5范围内荧光强度最强。加入INH后，当溶液呈碱性时，pH的变化对CdTe-INH体系荧光强度影响较小，但INH对CdTe体系的荧光猝灭也较小。相反，当溶液呈酸性时，异烟肼对量子点的猝灭效果明显。当pH＝3时，对量子点的荧光猝灭较大。但因量子点自身在强酸性条件下不稳定，荧光强度较弱，为提高检测的灵敏度，选择pH＝5为最佳条件。
实验二溶液中离子强度对CdTe量子点及CdTe-INH体系荧光强度的影响
在实验一最优实验设置的基础上，固定其他条件不变，考察不同浓度的PBS缓冲溶液(pH＝5)对CdTe量子点及CdTe-INH体系荧光强度的影响。以不加异烟肼溶液做对照，CdTe量子点在不同浓度PBS缓冲溶液中荧光强度变化如图3所示(图中带三角形标识的曲线为不加异烟肼溶液时检测结果)。由图3可知，随着PBS溶液浓度增大，CdTe量子点溶液的荧光强度逐渐下降，但INH对CdTe量子点荧光强度的影响却不断增加。在PBS溶液浓度为0.05mol/L之后两者均趋于平缓，离子强度对其的影响较小。最终选择0.1mol/LPBS缓冲溶液为最佳条件。
实验三溶液中CdTe量子点用量对CdTe-INH体系荧光强度的影响
CdTe量子点用量太高或太低，在一定程度上会影响异烟肼测定的线性范围和灵敏度。所以在实验二最优实验条件的基础上，固定其他的实验条件，改变CdTe量子点用量，以不加异烟肼为对照，考察溶液中量子点用量对CdTe-INH体系荧光强度的影响，结果如图4所示(图中带三角形标识的曲线为不加异烟肼溶液时检测结果)。由图4可以发现，随着量子点用量的增加，CdTe-INH体系中的荧光强度变化值的趋势先快后趋于慢。量子点用量大于0.5mL时，体系中荧光强度差值变化较小，所以选择最佳的量子点用量为0.5mL。
实验四反应时间对CdTe-INH体系荧光强度的影响
异烟肼对量子点的猝灭过程需要一定的反应时间。在实验三最优实验条件的基础上，固定其他的实验条件，改变反应时间，考察反应时间对CdTe-INH体系中荧光强度的影响，结果如图5所示。从图5可以发现，加入异烟肼后，量子点荧光强度迅速下降，反应为2～10min时，体系中荧光强度继续下降，但溶液的荧光强度变化速率减小，说明异烟肼与量子点猝灭反应过程迅速。在反应时间10min过后，体系相对平稳，所以选择最佳的反应时间为10min。
实验五不同浓度的异烟肼溶液对量子点荧光光谱的影响
配制不同浓度的异烟肼溶液，在实验四最优实验条件的基础上，固定其他的实验条件，观察最终检测体系中一定梯度浓度的异烟肼溶液对量子点荧光光谱的影响，结果如图6所示(图中1～9曲线代表异烟肼的浓度分别为2.92×10-5、5.83×10-5、8.75×10-5、1.17×10-4、1.46×10-4、1.75×10-4、2.92×10-4、5.84×10-4、1.02×10-3mol/L)。从图6中可以发现，随着异烟肼浓度逐渐增加，体系中量子点的荧光强度也随着规律下降。定量拟合得出的结果如图7所示，异烟肼浓度[Q]在2.92×10-5～1.02×10-3mol/L的范围内与量子点荧光的猝灭程度存在一个良好的线性关系，其R2＝0.9917，线性方程为F0/F＝1.1436+643[Q]。按3倍标准偏差计算出的检出限为4.826×10-7mol/L，相对标准偏差为0.296％(n＝10)，重现性很好。
实验六加标回收实验
为了验证该方法在实际样品中检测异烟肼的可行性，在实验四最优实验条件的基础上，在两组空白溶液中加入一定量的异烟肼标准溶液进行回收率实验(溶液中异烟肼的最终浓度如表1所示)，结果如表1所示。其加标回收率为85.24％～92.26％。说明该方法的分析准确度良好，能够用于实际样品的检测。
表1样品加标回收结果
Figure BDA0002272840350000081
实验七抗干扰性测定实验
干扰实验主要是考察几种常见的金属离子和与药物共存物质对异烟肼猝灭量子点的荧光强度影响。在实验四最优实验条件的基础上，考察在CdTe体系中分别增加相对INH质量浓度50倍的Na+(氯化钠)、可溶性淀粉、氨基乙酸、DL-a-氨基丙酸、L-半胱氨酸，以及相对INH质量浓度1倍的Fe3+(硫酸铁)、SCN-(硫氰酸钠)、Cd2+(氯化镉)、K+(碘化钾)、NH4 +(氯化铵)、Ni2+(硫酸镍)、Ca2+(碳酸钙)、Ag+(硫酸银)、Cu2+(硫酸铜)、维生素C后对荧光强度的影响，结果如图8所示。在图8(A)中我们可以发现，50倍的干扰物基本无干扰，而图8(B)中除了Cu2+、Ag+离子对CdTe-INH体系猝灭严重外，等浓度的其他干扰物基本无干扰。
针对Cu2+、Ag+对量子点的猝灭，通过利用掩蔽剂柠檬酸钠和硫氰酸钠来掩蔽其作用效果，来提高体系的抗干扰性，分别为：在CdTe体系中增加相对INH质量浓度0.01倍的硫酸银以及一定量的硫氰酸钠溶液，其中硫氰酸钠溶液加入后，体系中硫氰酸钠的浓度为70mg/L；在CdTe体系中增加相对INH质量浓度0.01倍的硫酸铜以及一定量的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠加入后，体系中柠檬酸钠的浓度为36mg/L，结果如图9所示。由图可知，体系中加入与INH质量浓度比为1：100的Cu2+或Ag+时，干扰较大，但是在体系中加入相应掩蔽剂后，体系的抗干扰能力增强。低浓度的Ag+对异烟肼测定还是有一定的影响，当加入掩蔽剂后，对金属离子有一定的掩蔽作用，与单独Ag+对异烟肼的猝灭比较，猝灭率可控制在10％以内。该检测方法选择性良好，而且实验操作简单方便，对于实际检测异烟肼存在很好的前景。
实施例2利用量子点荧光猝灭法测定药物中异烟肼的含量，具体方法如下：
在上述实验四的最优条件下，对市售异烟肼药片中异烟肼的含量进行测定，根据药片标示量配制三种不同浓度的异烟肼待测液，使其在最终测定液中异烟肼的标示浓度分别为3.646×10-5、1.458×10-4、7.292×10-4mol/L。药品的标示规格为：100mg(每片)，取1片药片用蒸馏水配制原液浓度为1g/L的异烟肼溶液。
具体方法如下：
在10mL的比色管中，加入1mL磷酸盐缓冲溶液(pH＝5，0.1mol/L)、0.5mL浓度为8.45×10-7mol·L-1的CdTe量子点和一定量的异烟肼待测溶液，定容到5mL，混合摇匀，分别使得最终测定液中异烟肼的浓度分别为3.646×10-5、1.458×10-4、7.292×10-4mol/L。室温下反应10min后，测定体系的荧光光谱，与同样条件下不加异烟肼待测溶液的结果比较，记录荧光强度的变化值，代入实验五得到的工作曲线方程，求得待测液中异烟肼的含量，结果如表2所示。
表2实际药片中异烟肼测定结果
Figure BDA0002272840350000091

Claims (6)

1.一种利用量子点荧光猝灭法测定异烟肼的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤如下：
(一)采用两步法合成CdTe量子点：
(1)制备NaHTe溶液：在氮气保护下，将NaBH4加入装有水的试剂瓶中，待固体溶解完全后，迅速向其中加入Te粉，然后在常温下反应2-4h，得到NaHTe溶液；
(2)Cd前驱体溶液制备：在氮气保护、搅拌下，将CdC12·2.5H2O溶于水，然后向其中加入巯基丙酸，并用NaOH溶液调节体系的pH值至10～11，得到Cd前驱体溶液；
(3)CdTe量子点：在氮气氛围下，将步骤(1)制备的NaHTe溶液快速加入步骤(2)的Cd前驱体溶液中，然后在100-150℃、氮气氛围下回流2-4h，得到CdTe量子点原液，用水稀释后，得到CdTe量子点溶液，用于检测异烟肼含量；
所述NaBH4、Te粉、CdC12·2.5H2O与巯基丙酸的用量比为(3-5)mmol：1mmol：1mmol：(100-300)μL；
(二)CdTe量子点检测异烟肼含量
(a)在比色管中，加入pH＝3-7、浓度为0.05-0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液、步骤(一)的CdTe量子点溶液和一定量不同浓度的异烟肼标准溶液，形成待测体系溶液，待测体系溶液室温下反应5-30min后，测定体系的荧光强度，建立CdTe量子点溶液的荧光强度与异烟肼浓度的线性关系；
(b)将步骤(一)的CdTe量子点溶液以及pH＝3-7、浓度为0.05-0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液加入到待测异烟肼溶液中形成待测体系溶液，待测体系溶液室温下反应5-30min后，检测荧光强度，然后根据步骤(a)的线性关系，获得待测体系溶液中异烟肼的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中NaOH溶液的浓度为1mol·L-1。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)和步骤(b)中待测体系溶液中CdTe量子点的浓度均为3.38×10-8mol·L-1—1.352×10-7mol·L-1。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)和步骤(b)中磷酸盐缓冲溶液与CdTe量子点溶液加入量的体积比均为1：(0.2-0.8)。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)为：在比色管中，加入一定量的pH＝5、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲溶液、步骤(一)制备的CdTe量子点溶液和不同浓度的异烟肼标准溶液，室温下反应10min后，测定体系的荧光强度，建立CdTe量子点溶液的荧光强度与异烟肼浓度的线性关系。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中异烟肼标准溶液的浓度分别为：2.92×10-5、5.83×10-5、8.75×10-5、1.17×10-4、1.46×10-4、1.75×10-4、2.92×10-4、5.84×10-4、1.02×10-3mol/L，异烟肼浓度[Q]与荧光猝灭程度F0/F呈良好的线性关系，其线性相关系数R2＝0.9917，线性方程为F0/F＝1.1436+643[Q]。
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