CN110622890A - 一种野生石首鱼类快速人工受精的方法 - Google Patents

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翁华松
黄匡南
刘志民
余训凯
包欣源
陈佳
潘滢
刘兴彪
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    • A01K61/00—Culture of aquatic animals
    • A01K61/10—Culture of aquatic animals of fish
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    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Abstract

本发明提供了一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，属于水产养殖技术领域。一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，包括以下步骤：将性腺成熟雌鱼沿胸鳍处往泄殖孔推压，通过挤压将卵巢卵子挤出，得到卵子；取出雄鱼的精巢，将所述精巢剪碎后置于保存液中，得到含有精子的保存液；将所述卵子和含有精子的保存液混合，得到的混合液转移到海水中通过静置分层筛选受精卵进行孵化培育。采用本发明提供的人工受精方法，受精率达到85％以上，孵化率95％以上，存活率80％以上，极大程度减少环境因素对野生石首鱼类产卵、受精、孵化的影响，大大提高了受精率、孵化率以及存活率，人为手段控制了整个初期生产的不利因素。

Description

一种野生石首鱼类快速人工受精的方法
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种野生石首鱼类快速人工受精的方法。
背景技术
目前，野生石首鱼类的繁育为传统的自然海区产卵、受精、孵化，自然海区中因为环境变换和其他海中生物的捕食，导致总体受精率低，孵化率低以及存活率低，极大程度限制了野生石首鱼类的大量繁殖；另外由于人为的过度捕捞导致野生石首鱼类资源骤减，海区野生资源少，单纯靠自然恢复很难将资源量扩大。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，提高了受精率、孵化率低以及存活率。
本发明提供了一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，包括以下步骤：
1)将性腺成熟雌鱼沿胸鳍处往泄殖孔推压，通过挤压将卵巢卵子挤出，得到卵子；
2)取出雄鱼的精巢，将所述精巢剪碎后置于保存液中，得到含有精子的保存液；
3)将所述卵子和含有精子的保存液混合，得到的混合液转移到海水中通过静置分层筛选受精卵进行孵化培育；
其中，步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序的限制。
优选的，步骤3)中所述卵子和精子的数量比为1～2:1。
优选的，步骤1)中性腺成熟雌鱼的选择标准为挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压，有透明卵液流出判定为性腺成熟雌鱼。
优选的，在所述挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压前，还包括擦拭去鱼体表面粘液。
优选的，步骤2)中所述保存液为蒸馏水或盐度为2.5～4‰的海水。
优选的，步骤2)中所述取出雄鱼的精巢的方法为从雄鱼的泄殖孔的肌肉处剪开，取出精巢。
优选的，所述雄鱼或雌鱼为新鲜捕捞的雄鱼或雌鱼；
所述捕捞方法如下：在农历五月至六月小潮水期间，在采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天打捞定置网，将捕捞到的石首鱼用于精子或卵子的收集。
本发明提供了一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，通过从性腺成熟雌鱼中收集卵子，从雄鱼中收集精子，将收集的精子和卵子人为作用下混合受精，大大提高野生石首鱼类受精率。采用本发明提供的人工受精方法，受精率达到85％以上，孵化率95％以上，存活率80％以上，极大程度减少环境因素对野生石首鱼类产卵、受精、孵化的影响，大大提高了受精率，孵化率以及存活率，人为手段控制了整个初期生产的不利因素。相比于野生石首鱼类繁殖属于自然海区受精，受精率一般在3～10％，孵化率为20％左右，存活率一般在10-15％，本发明提供的人工受精方法在受精率方面是自然受精的7～20倍，孵化率方面提高了3倍多，存活率方面提高了4～7倍。
进一步的，本发明提供的人工受精方法，进一步限定了性腺成熟雌鱼的选择标准、雄鱼或雌鱼的捕捞方法等，为人工筛选成熟卵子或采集新鲜野生鱼种提供可行办法。
具体实施方式
本发明提供了一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，包括以下步骤：
1)将性腺成熟雌鱼沿胸鳍处往泄殖孔推压，通过挤压将卵巢卵子挤出，得到卵子；
2)取出雄鱼的精巢，将所述精巢剪碎后置于保存液中，得到含有精子的保存液；
3)将所述卵子和含有精子的保存液混合，得到的混合液转移到海水中通过静置分层筛选受精卵进行孵化培育；
其中，步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序的限制。
本发明将性腺成熟雌鱼沿胸鳍处往泄殖孔推压，通过挤压将卵巢卵子挤出，得到卵子。
在本发明中，性腺成熟雌鱼的选择标准优选为挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压，有透明卵液流出判定为性腺成熟雌鱼。在所述挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压前，还优选包括擦拭去鱼体表面粘液。所述雌鱼为新鲜捕捞的雌鱼；所述捕捞方法如下：在农历五月至六月小潮水期间，在采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天打捞定置网，将捕捞到的石首鱼用于卵子的收集。
取出雄鱼的精巢，将所述精巢剪碎后置于保存液中，得到含有精子的保存液。
在本发明中，所述雄鱼优选为新鲜捕捞的雄鱼或雌鱼；所述捕捞方法如下：在农历五月至六月小潮水期间，在采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天打捞定置网，将捕捞到的石首鱼用于精子或卵子的收集。所述取出雄鱼的精巢的方法优选为从雄鱼的泄殖孔的肌肉处剪开，取出精巢。所述保存液为蒸馏水或盐度为2.5～4％‰的生理盐水的海水。
得到卵子和精子后，本发明将所述卵子和含有精子的保存液混合，得到的混合液转移到海水中通过静置分层筛选受精卵进行孵化培育。
在本发明中，所述卵子和精子的数量比优选为1～2:1，更优选为2:1。所述混合的时间优选为1～2min，更选为1.5min。通过静置分层筛选受精卵的标准优选为浮于上层的受精卵。本发明对所述孵化培育的方法没有特殊限制，采用本领域所孰知的孵化方案即可。
下面结合实施例对本发明提供的一种野生石首鱼类快速人工受精的方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
农历五月至六月小潮水期间，采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天乘船至野生石首鱼类的采捕区打捞定置网，将捕捞起来的石首鱼放置在0.5～1吨水桶中。
性腺成熟雌鱼筛选：轻轻挤压石首雌鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔轻微推压，有透明卵液流出即可判定为怀卵雌鱼。雄鱼不筛选。
挤卵前准备：使用干毛巾将鱼体表面粘液擦拭赶紧。
挤卵方法：挑选性腺成熟雌鱼，用手沿胸鳍处往泄殖孔推压，将卵巢卵子通过挤压的方式挤出至干净烧杯或者容器中。
雄鱼精子的获取方法：用剪刀剪开雄鱼泄殖孔处肌肉，取出精巢，放在培养皿中用加少量纯净水，用剪刀将精巢剪碎，并在培养皿中和蒸馏水充分混合后全部倒入装有卵子的烧杯中搅匀1min，卵子和精子的数量比为2:1。将精卵混合液倒入装有海水的塑料桶中带回岸上，通过静置分层筛选优质受精卵进行孵化培育。
通过上述人工受精方法，采用常规方法统计受精、孵化情况。受精率为91％，孵化率97％，存活率82％。
实施例2
农历五月至六月小潮水期间，采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天乘船至野生石首鱼类的采捕区打捞定置网，将捕捞起来的石首鱼放置在0.5～1吨水桶中。
性腺成熟雌鱼筛选：轻轻挤压石首雌鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔轻微推压，有透明卵液流出即可判定为怀卵雌鱼。雄鱼不筛选。
挤卵前准备：使用干毛巾将鱼体表面粘液擦拭干净。
挤卵方法：挑选性腺成熟雌鱼，用手沿胸鳍处往泄殖孔推压，将卵巢卵子通过挤压的方式挤出至干净烧杯或者容器中。
雄鱼精子的获取方法：用剪刀剪开雄鱼泄殖孔处肌肉，取出精巢，放在培养皿中用加少量纯净水，用剪刀将精巢剪碎，并在培养皿中和蒸馏水充分混合后全部倒入装有卵子的烧杯中搅匀2min，卵子和精子的数量比为1:1。将精卵混合液倒入装有海水的塑料桶中带回岸上，通过静置分层筛选优质受精卵进行孵化培育。
通过上述人工受精方法，采用常规方法统计受精、孵化情况。受精率为85％，孵化率94％，存活率81％。
实施例3
农历五月至六月小潮水期间，采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天乘船至野生石首鱼类的采捕区打捞定置网，将捕捞起来的石首鱼放置在0.5～1吨水桶中。
性腺成熟雌鱼筛选：轻轻挤压石首雌鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔轻微推压，有透明卵液流出即可判定为怀卵雌鱼。雄鱼不筛选。
挤卵前准备：使用干毛巾将鱼体表面粘液擦拭干净。
挤卵方法：挑选性腺成熟雌鱼，用手沿胸鳍处往泄殖孔推压，将卵巢卵子通过挤压的方式挤出至干净烧杯或者容器中。
雄鱼精子的获取方法：用剪刀剪开雄鱼泄殖孔处肌肉，取出精巢，放在培养皿中用加少量纯净水，用剪刀将精巢剪碎，并在培养皿中和盐度为2.5‰的海水。充分混合后全部倒入装有卵子的烧杯中搅匀1.5min，卵子和精子的数量比为2:1。将精卵混合液倒入装有海水的塑料桶中带回岸上，通过静置分层筛选优质受精卵进行孵化培育。
通过上述人工受精方法，采用常规方法统计受精、孵化情况。受精率为87％，孵化率95％，存活率82％。
对比例1
农历五月至六月小潮水期间，采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天乘船至野生石首鱼类的采捕区打捞定置网，将捕捞起来的石首鱼放置在0.5～1吨水桶中。
挤卵前准备：使用干毛巾将雌鱼体表面粘液擦拭干净。
挤卵方法：用手沿胸鳍处往泄殖孔推压，将卵巢卵子通过挤压的方式挤出至干净烧杯或者容器中。
雄鱼精子的获取方法：用剪刀剪开雄鱼泄殖孔处肌肉，取出精巢，放在培养皿中用加少量纯净水，用剪刀将精巢剪碎，并在培养皿中和蒸馏水充分混合后全部倒入装有卵子的烧杯中搅匀1min，卵子和精子的数量比为2:1。将精卵混合液倒入装有海水的塑料桶中带回岸上，通过静置分层筛选优质受精卵进行孵化培育。
通过上述人工受精方法，采用常规方法统计受精、孵化情况。受精率为52％，孵化率63％，存活率45％。分析受精率、孵化率及存活率低的原因是在挤卵前未挑选性成熟的雌鱼，导致收集的卵子存在较大比例未成熟卵，导致降低受精卵不能正常生长和发育，进而影响孵化率和存活率。
对比例2
农历五月至六月小潮水期间，采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天乘船至野生石首鱼类的采捕区打捞定置网，将捕捞起来的石首鱼放置在0.5～1吨水桶中。
性腺成熟雌鱼筛选：轻轻挤压石首雌鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔轻微推压，有透明卵液流出即可判定为怀卵雌鱼。雄鱼不筛选。
将筛选得到的性腺成熟雌鱼和雄鱼按照数量比1:1的比例置于养殖池中进行自然受精，培养1～2d后收集受精卵。将精卵混合液倒入装有海水的塑料桶中带回岸上，通过静置分层筛选优质受精卵进行孵化培育。
通过上述人工受精方法，采用常规方法统计受精、孵化情况。受精率为57％，孵化率63％，存活率75％。分析受精率、孵化率及存活率低的原因可能是虽然该人工方法排除了自然海域中环境变换和其他海中生物的捕食的不利因素，但是精子和卵子的成熟期不一致，导致受精率低，进而影响孵化率和存活率。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种野生石首鱼类快速人工受精的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将性腺成熟雌鱼沿胸鳍处往泄殖孔推压，通过挤压将卵巢卵子挤出，得到卵子；
2)取出雄鱼的精巢，将所述精巢剪碎后置于保存液中，得到含有精子的保存液；
3)将所述卵子和含有精子的保存液混合，得到的混合液转移到海水中通过静置分层筛选受精卵进行孵化培育；
其中，步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序的限制。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤3)中所述卵子和精子的数量比为1～2:1。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1)中性腺成熟雌鱼的选择标准为挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压，有透明卵液流出判定为性腺成熟雌鱼。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，在所述挤压石首鱼腹部或沿胸鳍处往泄殖孔推压前，还包括擦拭去鱼体表面粘液。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2)中所述保存液为蒸馏水或盐度为2.5～4‰的海水。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2)中所述取出雄鱼的精巢的方法为从雄鱼的泄殖孔的肌肉处剪开，取出精巢。
7.根据权利要求1～6任意一项所述方法，其特征在于，所述雄鱼或雌鱼为新鲜捕捞的雄鱼或雌鱼；
所述捕捞方法如下：在农历五月至六月小潮水期间，在采捕前根据潮流情况放置定置网到采捕海区内，采捕当天打捞定置网，将捕捞到的石首鱼用于精子或卵子的收集。
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