CN110618225A - 一种构建数据库检测激素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种构建数据库检测激素的方法，属于药物分析领域。本发明提供的一种构建数据库检测激素的方法，包括以下步骤：(1)构建常见激素的液相色谱‑质谱数据库：(2)处理样品，进行检测；(3)将步骤(2)检测所得液相色谱‑质谱图与步骤(1)数据库中的液相色谱‑质谱图进行比对。本发明构建了一种基于常见激素的液相色谱质谱数据库，为检测和排查激素提供了方法依据和技术支持。本发明构建的基于常见激素的液相色谱质谱数据库能够快速、灵敏、即时和准确的用于检测激素，满足快速、动态、即时监测激素的实际需求，具有突出贡献。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种构建数据库检测激素的方法。
背景技术
激素是一类由内分泌腺或内分泌细胞分泌的高效生物活性物质，通过传递信息、调节各种组织细胞的代谢活动来影响人体的生理活动。激素对机体的各种生理过程如代谢、生长、发育、繁殖等起重要的调节作用，是生命中的重要物质。激素在人体内的含量很低，但调节作用极为显著，且在机体内的变化对健康有很大的影响。
激素的使用已十分广泛，目前已被人们用于食品、药品和化妆品等领域中。
摄入含有激素的食品不仅会引起动物自身生理特征的变化，而且在动物生长发育过程中会残留于动物身体里，通过食物链进入人体，人们长时间摄入激素，会产生如性早熟、第二性征异常等现象并可能诱发各种癌症，影响人类身体健康。
如果长期使用添加激素的化妆品，激素可通过皮肤吸收，将会对消费者健康造成威胁。雌激素的过量使用会导致女性患乳腺癌和子宫肌瘤的发病率大大提高，还可引起月经不调、色素沉着、黑斑、皮肤变薄和萎缩等不良反应。对于年轻女性来说，自身雌激素水平较高，在使用此类功效明显的化妆品时更应谨慎。皮肤长痘、易过敏的消费者在使用含糖皮质类激素的化妆品后见效快，皮肤明显变好，但长期使用会导致皮肤出现干燥脱皮、红血丝、色素沉着等现象，更为严重的是出现激素依赖性皮炎，对含有激素的美容化妆品产生了依赖性，用之症状好转或消失，停用后症状复发，很难治愈，给消费者带来精神和身体的严重伤害。
糖皮质激素类药物临床应用广泛，生理剂量的糖皮质激素对维持机体内环境平衡起着非常重要的作用。药物剂量的糖皮质激素具有的抗炎、抗过敏、抗毒素、抗休克及免疫抑制等多种作用，在病情危急、挽救生命时可发挥其独特的功效。然而，临床滥用糖皮质激素则会引发各种不良反应。
由此可知，准确检测激素及其含量是十分有必要且具有重大意义的。
发明内容
本发明的目的即是构建一种常用激素的液相色谱-质谱数据库，提供一种基于该数据库的检测激素的方法。
为解决该技术问题，本发明提供了一种构建数据库检测激素的方法，包括以下步骤：
(1)构建常见激素的液相色谱-质谱数据库：
(2)处理样品，进行检测；
(3)将步骤(2)检测所得液相色谱-质谱图与步骤(1)数据库中的液相色谱-质谱图进行比对。
所述步骤(1)包括配制常见激素的标准溶液，采用液相色谱和质谱对其进行检测。
其中，液相色谱检测条件为：
色谱柱：Thermo SCIENTIFIC Hypersll GOLD a(100mm×2.1mm，1.9μm，美国Thermo Fisher公司)；
流动相A：0.1％甲酸水；
流动相B：乙腈：
柱温：40℃；
样品室：温度5℃；
液相色谱检测中色谱流动相配比如表1所示：
表1液相色谱检测中色谱流动相配比
其中，质谱检测条件为：
质量分析器：四级杆-静电场轨道阱，电喷雾离子源；
鞘气流量：40Arb；
辅助气流量10Arb；
喷雾电压：4.00KV；
离子源温度：350℃，
毛细管温度：320℃。
质谱检测中一级精确质量数获取采取正离子全扫模式，质量扫描范围：m/z 80-1000。
质谱检测中二级碎片图谱获取模式采用目标离子监测模式，分辨率为35000，碰撞能量为NCE：15、35。
所述激素包括烯丙孕素，16-α-羟基泼尼松龙，己酸孕酮，17-α-雌二醇，17-α-羟孕酮，17-α-羟孕酮醋酸酯，醋酸炔诺酮，诺龙，丙酸诺龙，癸酸诺龙，羟孕酮，醋酸氯睾酮/醋酸氯司替勃，甲基氢化泼尼松(甲基泼尼松龙)，阿氯米松双丙酸酯，安西奈德，雄烯二酮，倍他米松双丙酸酯，倍氯米松双丙酸酯，倍氯米松，倍他米松，倍他米松戊酸酯，倍他米松21醋酸酯，勃地龙，布地奈德，醋酸氯地孕酮，丙酸氯倍他索，氯倍他松丁酸酯，氯司替勃，可的松，醋酸可的松，醋酸环丙氯地孕酮，环丙孕酮，达那唑，地夫可特，去氧皮质酮，地塞米松，地塞米松醋酸酯，双氟拉松双醋酸酯，双甲乙炔睾酮，甲炔诺孕酮，去氢孕酮(地屈孕酮)，表睾酮，雌三醇，雌酮，炔雌醇，炔孕酮，氟氢可的松21醋酸酯，氟氢可的松，氟米松，氟轻松，氟轻松醋酸酯，氟米龙，氟替卡松丙酸酯，孕二烯酮，己酸各司孕甾醇，哈西奈徳，卤甲松，丁酸氢化可的松，氢化可的松戊酸酯，氢化可的松醋酸酯，氢化可的松琥珀酸酯，氢化可的松，甲羟孕酮，甲羟孕酮17醋酸酯，醋酸甲地孕酮，美仑孕酮，甲基泼尼松，美雄诺龙，美雌醇，去氢甲睾酮，甲基泼尼松龙21醋酸酯，甲基睾酮，莫米他松糠酸酯，苯丙酸诺龙，尼尔雌醇，醋酸诺美孕，乙诺酮，氧甲氢龙，泼尼卡酯，泼尼松龙，泼尼松龙醋酸酯，泼尼松，泼尼松醋酸酯，孕酮，斯坦唑醇，环戊丙酸睾，庚酸睾酮，睾酮，醋酸睾酮，十一酸睾酮，群勃龙醋酸，群勃龙，曲安西龙，曲安奈德和曲安西龙双醋酸酯。
本发明的有益效果：
本发明构建了一种基于常见激素的液相色谱质谱数据库，为检测和排查激素提供了方法依据和技术支持。本发明构建的基于常见激素的液相色谱质谱数据库能够快速、灵敏、即时和准确的用于检测激素，满足快速、动态、即时监测激素的实际需求，具有突出贡献。
附图说明
图1是Altrenogest烯丙孕素的检测图谱
图2是16-alpha-Hydroxyprednisolone 16alpha-羟基泼尼松龙(RT＝2.54)的检测图谱
图3是17-a-Hydroxyprogesterone caproate己酸孕酮的检测图谱
图4是17-alpha-Estradiol 17-alpha-雌二醇的检测图谱
图5是17-alpha-Hydroxyprogesterone 17α羟孕酮的检测图谱
图6是17-alpha-Hydroxyprogesterone 17-acetate 17α羟孕酮醋酸酯的检测图谱
图7是19-Norethindrone acetate醋酸炔诺酮的检测图谱
图8是19-Nortesterone(Nandrolone)诺龙的检测图谱
图9是19-Nortestoterone decanoate癸酸诺龙的检测图谱
图10是21-Hydroxyprogesterone羟孕酮的检测图谱
图11是4-Chlorotestosterone acetate醋酸氯睾酮/醋酸氯司替勃的检测图谱
图12是6-alpha-Methylprenisolone甲基氢化泼尼松(甲基泼尼松龙)的检测图谱
图13是Alclomethasonedipropionate阿氯米松双丙酸酯的检测图谱
图14是Amcinonide安西奈德的检测图谱
图15是Androstenedione雄烯二酮的检测图谱
图16是Batamethasonedipropionate倍他米松双丙酸酯的检测图谱
图17是Beclometasonedipropionate倍氯米松双丙酸酯的检测图谱
图18是Beclomethasone倍氯米松的检测图谱
图19是Betamethasone倍他米松的检测图谱
图20是Betamethasone 17-valerate倍他米松戊酸酯的检测图谱
图21是Betamethasone 21-acetate倍他米松21醋酸酯的检测图谱
图22是Boldenone勃地龙的检测图谱
图23是Budesonide布地奈德的检测图谱
图24是Chlormadinone acetate醋酸氯地孕酮的检测图谱
图25是Clobetasol propionate丙酸氯倍他索的检测图谱
图26是Clobetasone 17-butyrate氯倍他松丁酸酯的检测图谱
图27是Clostebol氯司替勃的检测图谱
图28是Cortisone可的松的检测图谱
图29是Cortisone 21-acetate醋酸可的松的检测图谱
图30是Cyproterone acetate醋酸环丙氯地孕酮的检测图谱
图31是Cyproterone环丙孕酮的检测图谱
图32是Danazol达那唑的检测图谱
图33是Deflazacort地夫可特的检测图谱
图34是Desoxycorticosterone去氧皮质酮的检测图谱
图35是Dexamethasone地塞米松的检测图谱
图36是Dexamethasone 21-acetate地塞米松醋酸酯的检测图谱
图37是Diflorasonediacetate双氟拉松双醋酸酯的检测图谱
图38是Dimethisterone双甲乙炔睾酮的检测图谱
图39是D-Norgestrel(Levonorgestrel)甲炔诺孕酮的检测图谱
图40是Dydrogesterone去氢孕酮(地屈孕酮)的检测图谱
图41是Epiandrosterone表睾酮的检测图谱
图42是Estriol雌三醇的检测图谱
图43是Estrone雌酮的检测图谱
图44是Ethinylestradiol炔雌醇的检测图谱
图45是Ethisterone炔孕酮的检测图谱
图46是Fludrocortisone 21-acetate氟氢可的松21醋酸酯的检测图谱
图47是Fludroxycortide(Flurandrenolide)氟氢可的松的检测图谱
图48是Flumethasone氟米松的检测图谱
图49是Fluocinoloneacetonide氟轻松的检测图谱
图50是Fluocinonide氟轻松醋酸酯的检测图谱
图51是Fluorometholone氟米龙的检测图谱
图52是Fluticasone propionate氟替卡松丙酸酯的检测图谱
图53是Gestodene孕二烯酮的检测图谱
图54是Gestonorone caproate己酸各司孕甾醇的检测图谱
图55是Halcinonide哈西奈徳的检测图谱
图56是Halometasone卤甲松的检测图谱
图57是Hydrocortisone 17-butyrate丁酸氢化可的松的检测图谱
图58是Hydrocortisone 17-valerate氢化可的松戊酸酯的检测图谱
图59是Hydrocortisone 21-acetate氢化可的松醋酸酯的检测图谱
图60是Hydrocortisone 21-hemisuccinate氢化可的松琥珀酸酯61)Hydrocortisone(Cortisol)氢化可的松的检测图谱
图61是Hydrocortisone(Cortisol)氢化可的松的检测图谱
图62是Medroxyprogesterone甲羟孕酮的检测图谱
图63是Medroxyprogesterone 17-acetate甲羟孕酮17醋酸酯的检测图谱
图64是Megestrol 17-acetate醋酸甲地孕酮的检测图谱
图65是Melengestrol acetate美仑孕酮的检测图谱
图66是Meprednisone甲基泼尼松的检测图谱
图67是Mestanolone美雄诺龙的检测图谱
图68是Mestranol美雌醇的检测图谱
图69是Metandienone去氢甲睾酮的检测图谱
图70是Methylprednisolone 21-acetate甲基泼尼松龙21醋酸酯的检测图谱
图71是Methyltestosterone甲基睾酮的检测图谱
图72是Mometasonefuroate莫米他松糠酸酯的检测图谱
图73是Nandrolonephenylpropionate苯丙酸诺龙的检测图谱
图74是Nilestriol尼尔雌醇的检测图谱
图75是Nomegestrol 17-acetate醋酸诺美孕的检测图谱
图76是Norethandrolone乙诺酮的检测图谱
图77是Oxandrolone氧甲氢龙的检测图谱
图78是Prednicarbate泼尼卡酯的检测图谱
图79是Prednisolone泼尼松龙的检测图谱
图80是Prednisolone 21-acetate泼尼松龙醋酸酯的检测图谱
图81是Prednisone泼尼松的检测图谱
图82是Prednisone 21-acetate泼尼松醋酸酯的检测图谱
图83是Progesterone孕酮的检测图谱
图84是Stanozolol斯坦唑醇的检测图谱
图85是Testosteron cypionate环戊丙酸睾的检测图谱
图86是Testosteron enanthate庚酸睾酮的检测图谱
图87是Testosterone睾酮的检测图谱
图88是Testosterone 17-acetate醋酸睾酮的检测图谱
图89是Testosterone undecanoate十一酸睾酮的检测图谱
图90是Trenbolone Acetate群勃龙醋酸的检测图谱
图91是Trenbolone群勃龙的检测图谱
图92是Triamcinolone曲安西龙RT＝2.42的检测图谱
图93是Triamcinoloneacetonide曲安奈德的检测图谱
图94是Triamcinolonediacetate曲安西龙双醋酸酯的检测图谱
图95是Difucortolonevalerate二氟拉松双醋酸酯的检测图谱
图96是6-alpha-fluoro-isoflupredone双氟物/氟-异氟泼尼龙的检测图谱
图97是Algestoneacetophenide双颊孕酮的检测图谱
图98是Ciclesonide环索奈德的检测图谱
图99是Desonide地奈德的检测图谱
图100是Difluprednate二氟孕甾丁酯(二氟泼尼酯)的检测图谱
图101是Flunisolide氟尼缩松的检测图谱
图102是Fluorometholone 17-acetate氟米龙醋酸酯的检测图谱
图103是Hydrotriamcinoloneacetate氢化曲安奈德的检测图谱
图104是Isoflupredone氟醋酸泼尼松/氟泼尼松醋酸酯的检测图谱
图105是Loteprednoletabonate氯替泼诺的检测图谱
图106是Paramehasoneaceponate醋酸对氟米松的检测图谱
图107是Paramethasone帕拉米松/对氟米松的检测图谱
图108是Prednisolonevaleroacetate泼尼瓦酯的检测图谱
图109是Rimexoione对甲丙酰龙/瑞美索龙的检测图谱
图110是Desoximetasone去羟米松的检测图谱
图111是Triamcinolone acetonide 21-acetate醋酸曲安奈德21醋酸酯的检测图谱
图112是Triamcinolonediacetate去安西龙双醋酸酯的检测图谱
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实验部分
1.1仪器、材料和试剂
Ultimate 3000超高效液相色谱仪(美国Thermo Fisher公司)；Q-Exactive超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱组合式高分辨质谱仪(美国Thermo Fisher公司)；
1.2仪器条件
1.2.1色谱条件
色谱柱：Thermo SCIENTIFIC Hypersll GOLD a(100mm×2.1mm,1.9μm,美国Thermo Fisher公司)。流动相A为0.1％甲酸水，B为乙腈，柱温40℃，样品室温度5℃。
表1：色谱条件的流动相配比
1.2.2质谱条件
质量分析器：四级杆-静电场轨道阱；电喷雾离子源；鞘气流量：40Arb，辅助气流量10Arb；喷雾电压：4.00KV；离子源温度：350℃，毛细管温度：320℃。
一级精确质量数获取采取正离子全扫模式，质量扫描范围：m/z 80-1000。二级碎片图谱获取模式采用目标离子监测模式，分辨率为35000，碰撞能量为NCE：15、35。
2.1结果
配制上述激素的标准溶液，进行检测，结果如表2-4和图1-112所示。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。
Claims (8)
1.一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建常见激素的液相色谱-质谱数据库：
(2)处理样品，进行检测；
(3)将步骤(2)检测所得液相色谱-质谱图与步骤(1)数据库中的液相色谱-质谱图进行比对。
2.根据权利要求1所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，所述步骤(1)包括配制常见激素的标准溶液，采用液相色谱和质谱对其进行检测。
3.根据权利要求2所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，其中，液相色谱检测条件为：
色谱柱：Thermo SCIENTIFIC Hypersll GOLD a(100mm×2.1mm，1.9μm，美国ThermoFisher公司)；
流动相A：0.1％甲酸水；
流动相B：乙腈：
柱温：40℃；
样品室：温度5℃。
4.根据权利要求2所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，其中，质谱检测条件为：
质量分析器：四级杆-静电场轨道阱，电喷雾离子源；
鞘气流量：40Arb；
辅助气流量10Arb；
喷雾电压：4.00KV；
离子源温度：350℃，
毛细管温度：320℃。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，液相色谱检测中色谱流动相配比为：
6.根据权利要求1-4任一项所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，质谱检测中一级精确质量数获取采取正离子全扫模式，质量扫描范围：m/z80-1000。
7.根据权利要求1-4任一项所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，质谱检测中二级碎片图谱获取模式采用目标离子监测模式，分辨率为35000，碰撞能量为NCE：15、35。
8.根据权利要求1-4任一项所述的一种构建数据库检测激素的方法，其特征在于，所述激素包括烯丙孕素，16-α-羟基泼尼松龙，己酸孕酮，17-α-雌二醇，17-α-羟孕酮，17-α-羟孕酮醋酸酯，醋酸炔诺酮，诺龙，丙酸诺龙，癸酸诺龙，羟孕酮，醋酸氯睾酮/醋酸氯司替勃，甲基氢化泼尼松(甲基泼尼松龙)，阿氯米松双丙酸酯，安西奈德，雄烯二酮，倍他米松双丙酸酯，倍氯米松双丙酸酯，倍氯米松，倍他米松，倍他米松戊酸酯，倍他米松21醋酸酯，勃地龙，布地奈德，醋酸氯地孕酮，丙酸氯倍他索，氯倍他松丁酸酯，氯司替勃，可的松，醋酸可的松，醋酸环丙氯地孕酮，环丙孕酮，达那唑，地夫可特，去氧皮质酮，地塞米松，地塞米松醋酸酯，双氟拉松双醋酸酯，双甲乙炔睾酮，甲炔诺孕酮，去氢孕酮(地屈孕酮)，表睾酮，雌三醇，雌酮，炔雌醇，炔孕酮，氟氢可的松21醋酸酯，氟氢可的松，氟米松，氟轻松，氟轻松醋酸酯，氟米龙，氟替卡松丙酸酯，孕二烯酮，己酸各司孕甾醇，哈西奈徳，卤甲松，丁酸氢化可的松，氢化可的松戊酸酯，氢化可的松醋酸酯，氢化可的松琥珀酸酯，氢化可的松，甲羟孕酮，甲羟孕酮17醋酸酯，醋酸甲地孕酮，美仑孕酮，甲基泼尼松，美雄诺龙，美雌醇，去氢甲睾酮，甲基泼尼松龙21醋酸酯，甲基睾酮，莫米他松糠酸酯，苯丙酸诺龙，尼尔雌醇，醋酸诺美孕，乙诺酮，氧甲氢龙，泼尼卡酯，泼尼松龙，泼尼松龙醋酸酯，泼尼松，泼尼松醋酸酯，孕酮，斯坦唑醇，环戊丙酸睾，庚酸睾酮，睾酮，醋酸睾酮，十一酸睾酮，群勃龙醋酸，群勃龙，曲安西龙，曲安奈德和曲安西龙双醋酸酯。
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| Title |
|---|
| MINGQIN KANG ET AL.: "Extraction and determination of hormones in cosmetics by homogeneous ionic liquid microextraction high-performance liquid chromatography", 《J. SEP. SCI.》 * |
| 方从容 等: "QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中125种兽药残留", 《色谱》 * |
| 罗辉泰 等: "分散固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时快速测定化妆品中81种糖皮质激素", 《色谱》 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110618225B (zh) | 2021-11-26 |
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