CN110613848A - Tipe1作为靶点在制备防治银屑病的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了TIPE1作为靶点在制备防治银屑病的药物中的应用，TIPE1与银屑病的发展呈正相关，适当浓度的TIPE1抗体治疗咪喹莫特小鼠银屑病模型，能够改善鳞屑和皮损厚度，并且通过抑制ERK信号来达到抑制银屑病发展以及抑制皮损。TIPE1抗体相比其它治疗银屑病药物，干预靶点更加明确，其针对的是银屑病发病的炎症通路中ERK信号相关分子通路。同时，TIPE1抗体安全性良好，TIPE1抗体特异性结合TIPE1，可以来源于兔的多克隆抗体，以及其辅料BSA都对身体无毒副作用。

Description

TIPE1作为靶点在制备防治银屑病的药物中的应用

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及TIPE1在制备防治银屑病中的应用。

背景技术

银屑病是慢性的、免疫介导的炎症性皮肤病，其主要特征为表皮基底层角质形成细胞增殖加速，与欧美等国家1%~3%的发病率相比，我国银屑病的发病率较低。其主要的临床表现为上覆白色鳞屑的红斑或斑块，该病病程长及易复发的临床特征可能严重影响患者的日常生活。到目前为止，银屑病的确切病因尚不完全清楚。因此，深入研究该病的发病机制，寻找针对银屑病新的治疗方法是目前该领域的研究热点。

TIPE1 (TNFAIP8L1, tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 1）是TNFAIP8（tumor necrosis factor-α-induced protein 8）家族中的一员，TNFAIP8家族是近几年新发现的一组蛋白，包括TIPE(TNFAIP8) ,TIPE1 (TNFAIP8L1),TIPE2(TNFAIP8L2)及TIPE3 (TNFAIP8L3)。TIPE1位于细胞质内，也被称为Oxi-β，是一个没有信号肽也没有跨膜域的稳定蛋白，在2011年因其特异性抗体的研制而被首次发现。近年来研究发现TIPE1在众多人来源的肿瘤细胞系中在mRNA水平均表现出高表达，并可以通过调控细胞凋亡来参与肿瘤的发生发展。但TIPE1在炎症性疾病中的表达及作用仍有待我们更进一步的研究。

发明内容

本发明人研究发现，TIPE1与银屑病的发展呈正相关，适当浓度（5ug/mL）的TIPE1抗体治疗咪喹莫特小鼠银屑病模型，能够改善鳞屑和皮损厚度，并且通过抑制ERK信号来达到抑制银屑病发展以及抑制皮损。因此，TIPE1可作为在制备防治银屑病的药物中的靶点。

所述的药物在基因水平和/或蛋白水平以TIPE1作为药物靶点。

所述的药物是针对TIPE1的抗体。

所述的药物是阻碍TIPE1表达或转录的DNA或RNA。

所述的药物是阻碍或抑制TIPE1活化ERK信号的药物。

进一步地，siRNA敲除TIPE1的载体可用于制备防治银屑病的药物。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

TIPE1抗体相比其它治疗银屑病药物，干预靶点更加明确，其针对的是银屑病发病的炎症通路中ERK信号相关分子通路。

TIPE1抗体安全性良好，TIPE1抗体特异性结合TIPE1，可以来源于兔的多克隆抗体，以及其辅料BSA都对身体无毒副作用，具有良好的安全性。

附图说明

图1为咪喹莫特小鼠的皮损部分组织的HE染色及免疫组织化学染色的结果；

图中：（a）正常对照组小鼠背部皮肤；（b）咪喹莫特小鼠背部皮肤，可见明显的红斑鳞屑；（c）正常对照组小鼠背部皮肤的HE染色（Scale bar: 300 μm）；（d）小鼠正常皮肤组织中，TIPE1弱阳性表达（Scale bar: 20 μm）；（e）咪喹莫特小鼠背部皮肤的HE染色，可见表皮明显增厚及少量炎症细胞浸润（Scale bar: 600 μm）；（f）咪喹莫特小鼠皮损组织中，TIPE1阳性表达于增厚的表皮全层（Scale bar: 20 μm）。

图2为人体正常皮肤组织和银屑病皮损组织中TIPE1免疫组化及半定量对比图；

图中：（a）正常皮肤组织中，TIPE1弱表达于表皮基底层（Scale bar: 300 μm）；（b）和（c）银屑病皮损组织中，TIPE1阳性表达于几乎表皮全层（Scale bar: 600 μm）。

图3为在HaCaT细胞和HEKa细胞用M5刺激后24小时，提取细胞总mRNA，real-timePCR测TIPE1 mRNA的相对表达变化。

图4为在HaCaT细胞和HEKa细胞用M5刺激后48小时，提取细胞总蛋白质，westernblot测TIPE1 蛋白质的相对表达变化。

图5为在HaCaT细胞和HEKa细胞应用si-negative 和si-TIPE1敲除TIPE1后48小时，提细胞总蛋白，检测相关分子的western blot。

图6为在HaCaT细胞应用si-negative和si-TIPE1敲除TIPE1后24小时、48小时及72小时的细胞增殖。

图7为在HEKa细胞应用si-negative和si-TIPE1敲除TIPE1后24小时、48小时及72小时的细胞增殖。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

本发明发现在银屑病患者皮损和咪喹莫特小鼠皮损中TIPE1表达升高，应用M5（IL-17A, IL-22, IL-1a, OSM 和 TNF-a混合物）刺激HaCaT和HEKa细胞模拟银屑病细胞水平后，TIPE1表达升高；这些提示TIPE1与银屑病的发展呈正相关，下面对本发明进一步详细的说明。

1）咪喹莫特小鼠模型的建立

购买6-7周BALB/c小鼠，2% 水合氯醛麻醉后，剃去背部毛约2*2cm大小，外用咪喹莫特乳膏62.5mg，每天一次，外用不同浓度（0.5ug/ml、1 ug/ml、5 ug/ml及10 ug/ml）的TIPE1抗体（catalog number：bs-16608R）40ul，每天一次，每天拍照，共7天，第八天脱颈椎处死小鼠后，取皮损，进行HE染色及免疫组织化学染色。

不同浓度的TIPE1外用治疗咪喹莫特小鼠的免疫组织化学染色的结果如图1所示，其中对照组为0.1%叠氮钠，治疗组分别为0.5ug/ml、1 ug/ml、5 ug/ml及10 ug/ml的TIPE1；

咪喹莫特小鼠皮损对照实验结果表明经过常规的治疗银屑病药物外用和TIPE1抗体治疗后，小鼠皮损症状均明显改善。

2）利用免疫组织化学染色法对正常皮肤组织和银屑病皮损组织中的TIPE1进行检测

1）免疫组织化学染色

（1）临床标本的处理

将手术过程中得到的标本用生理盐水彻底冲洗，去除血液和污染物，随后将组织块置于4%多聚甲醛中，固定24h。

（2）载玻片的处理

a）将载玻片洗洁精超声清洗后，放入重铬酸钾-浓硫酸混合液中浸泡24h；

b）酸缸中取出后用自蒸馏水冲洗至完全干净，置于烤箱中60℃烘干过夜；

c）为防止组织掉片，载玻片需经3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷（3-Aminopropyl-Triethoxysilane, APES）处理。将APES原液与丙酮1:50稀释成工作液，将洗净的玻片放入新配置的APES工作液中停留30s后取出；

d）取出玻片，停顿10s钟，再放入丙酮溶液30s，涮去未结合的APES；

e）再置于烤箱中烘干2h，装盒后备用。

（3）石蜡包埋和组织切片

a）包埋组织：先在模具中加入一些液态石蜡，稍微冷却后，将待包埋的组织置于石蜡之中，并排列整齐，再将塑料模具盒盖上，最后加入少许液体石蜡，冷却使其变成固态；

b）切片：将包埋好的组织从模具上取下来，置于石蜡切片机上，调节切片的厚度4μm，连续切片；

c）切片置于60℃烤箱中烤90min，然后转入37℃烤箱中过夜。

（4）免疫组织化学染色步骤

a）将组织切片置于二甲苯中脱蜡10min×2次；

b）再依次置于无水酒精、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精各10min；

c）置于PBS中水化5min×3次；

d）滴加新鲜配制的3%H2O2，室温孵育20min，以阻断内源性过氧化物酶，然后用PBS洗5min×3次；

e）将切片放入盛0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）的高压锅中，加热至压力阀开始喷气时开始计时2min，然后离开热源，冷却后取下气阀，取出切片，蒸PBS洗5min×3次；

f）滴加5%山羊血清37℃封闭20min，甩除勿洗；

g）加一抗：滴加稀释好的一抗工作液（TIPE1的稀释比例为1:100），4℃过夜；

h）室温复温30min，用PBS洗5min×3次；

i）加二抗：滴加生物素标记二抗，37℃孵育30min，PBS洗5min×3次；

j）滴加辣根过氧化酶标记的链霉卵白素，37℃孵育20min，PBS洗5min×3次；

k）按照说明书配制DAB显色液，滴加于切片上，显色3-5min，显微镜下观察显色反应；

l）清水冲洗后，用苏木素复染2min，再用清水冲洗；

m）将切片依次置于70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、无水酒精各3min，二甲苯透明10min×2次；

n）中性树胶封片，阴性对照以PBS代替一抗，其余步骤相同，在显微镜下观察、拍照并对结果进行分析。

（5）免疫组化染色结果的判定

由两位医师分别双盲阅片。阳性表达为细胞质和（或）细胞核内出现黄色、棕黄色或褐色颗粒。在400倍镜下随机挑选10个视野，观察细胞染色强度，计算阳性细胞百分率。阳性率≤5%为0分，6%~25%为1分，26%~50%为2分，51%~75%为3分，>75%为4分；染色强度分为4级，无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。每个视野阳性细胞百分率与染色强度相乘为该视野得分，最终得分为5个视野得分的平均值。0分为阴性(-)，1~4分为弱阳性(+)，5~8分为中等程度阳性(++)，9~12分为强阳性(+++)。

检测结果分别如图2所示，结果表明在皮损组织中TIPE1的含量较正常组织提升明显。以上结果表明TIPE1与银屑病的发展呈正相关。

3）应用real-time PCR检测M5刺激HaCaT和HEKa细胞模拟银屑病细胞中TIPE1mRNA的相对表达变化

应用M5（IL-17A, IL-22, IL-1a, OSM 和 TNF-a混合物）刺激HaCaT和HEKa细胞模拟银屑病细胞水平，然后提取TIPE1 RNA和总蛋白进行检测；具体操作如下：

（1）细胞复苏

a）将细胞冻存管从液氮罐中取出，立即置于37℃水浴箱中，使其在1min内迅速融化；

b）加入事先准备好的含有5ml 10% FBS的DMEM培养基的中，800rpm离心5min，弃去上清；

c）加入5ml含10% FBS的DMEM培养基重悬细胞，接种到25cm2培养瓶中，置 37℃、5%CO2培养箱中培养，次日更换培养基。

（2）细胞培养

细胞常规培养于37℃恒温、5%CO2培养箱中，每2d更换一次培养基。

（3）细胞传代

a）当细胞覆盖率达到80%以上时，可以进行传代。先弃去旧的培养基，用PBS洗2次；

b）加入2ml 0.25%胰酶消化，37℃放置约5min，在倒置显微镜下观察，可见细胞变圆，细胞间隙变大，此时立刻加入4ml含10% FBS的DMEM培养基终止消化，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，转入离心管中；

c）将细胞悬液移至离心管，800 rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基重悬，重新接种于新的培养瓶中继续培养。一般传代比例为1:2-4。

（4）细胞冻存

a）当细胞覆盖率达到80%以上且状态较好时时，可进行细胞冻存。先弃去旧的培养基，用PBS洗2次；

b）用0.25%胰酶消化，含10% FBS的DMEM培养基终止消化，转移到离心管中，800 rpm离心5min；

c）弃去上清，加入1ml细胞冻存液，吹打均匀，转移至冻存管中；

d）将冻存管放入冻存盒中后，放入-80℃冰箱过夜，最后转移到液氮罐中进行长期保存。

细胞总RNA的提取及反转录成cDNA

（1）细胞总RNA的提取

a）提前用DEPC浸泡实验所需的枪头、枪头盒、EP管等过夜，以除去RNA酶；

b）弃去六孔板或1.5cm培养皿中的培养基，用PBS洗两遍；

c）加入1ml Trizol静置2min，用加样枪吹打数下，转移至1.5ml EP管中，轻柔颠倒10次，冰上放置5min

d）加入200μl氯仿，上下颠倒10次，使其充分混匀呈乳白状，冰上放置5min，然后4℃12000rpm离心15min；

e）小心地将上层无色透明的上清液（约300μl）转移至新的1.5ml EP管中，加入等体积的异丙醇，轻柔颠倒10次，然后冰上放置20min；

f）4℃ 12000rpm离心15min，可见管底有白色沉淀，小心弃去上清；

g）加入预冷的75%乙醇1ml洗涤沉淀，然后4℃ 7500rpm离心5min；

h）弃去上清，室温干燥5-10min，可见底部白色沉淀物变为透明，加入适量的（30-50μl）DEPC水，弹匀并放置在55-60℃ 10min，使RNA充分溶解；

i）RNA纯度和浓度的测定：吸取1μl提取的RNA加入99μl DEPC水中（稀释100倍），于分光光度仪上测OD260nm和OD280nm值，OD260/OD280 在1.9-2.0之间说明所提取的RNA纯度较高。总RNA浓度（µg/m1）=A260 nm×40×稀释倍数，以备其后反转录为cDNA实验所需，余RNA产物放于-80℃冰箱保存备用。

（2）反转录反应

a）在冰上向PCR管中按照如下反转录体系加入试剂，混匀之后短暂离心；

5×RT super mix	4μl
		RNA	2μg
DEPC水	加至总体积20μl

b）放入PCR仪中，反转录条件：25℃，10min；42℃，30min；85℃，5min；

c）反转录产物放入-20℃保存备用。

4）普通PCR

（1）PCR扩增反应

a）向反转录好的20μl cDNA中加入80μl DEPC水（即稀释至5倍）；

b）在冰上向PCR管中按照如下体系加入试剂，混匀之后短暂离心。引物序列见表1；

cDNA	5μl
		Primer Forward	1μl
Primer Reverse	1μl
		GoTaq® qPCR Master Mix	10μl
RNase RNA Free ddH<sub>2</sub>O	3μl
		Total Volume	20μl

表1 PCR引物序列

名称	引物序列
		h-TIPE1	Forward:5’-TCT GCT TCG AGA GTA GGC-3’
	Reverse:5’-GCG GTA CAG CTC ATC CAG-3’
		h-GAPDH	Forward:5’-AGG TCC ACC ACT GAC ACG TT-3’
	Reverse:5’-GCC TCA AGA TCA TCA GCA AT-3’

b）放入PCR仪中，反应条件如下所示：

（2）琼脂糖凝胶电泳

a）配2.5%的琼脂糖凝胶，室温冷却20-30min待其凝固成凝胶；

b）取各个RNA样品10µl，Marker 6µl混匀，加入加样孔中；

c）电泳：110V电压下电泳20-30min，用凝胶紫外分析仪观察并拍照。

5）荧光实时定量PCR（qRT-PCR）

（1）在冰上向PCR管中按照如下体系加入试剂，混匀之后短暂离心；

cDNA	5μl
		Primer Forward	1μl
Primer Reverse	1μl
		GoTaq® qPCR Master Mix	10μl
RNase RNA Free ddH<sub>2</sub>O	3μl
		Total Volume	20μl

（2）放入实时定量PCR仪中，反应条件如下所示：

（3）结果判定：用2-ΔΔCt的方法对CT值进行分析，计算该基因的相对表达量。

4）应用Western Blot检测M5刺激HaCaT和HEKa细胞模拟银屑病细胞中TIPE1 蛋白的相对表达变化

（1）细胞总蛋白的提取

a）按照100:1的比例将配置好的RIPA裂解液和PMSF混合均匀，放置于冰上；

b）弃去六孔板（或1.5cm培养皿等其他容器）中的培养基，用PBS洗2次；

c）每孔加入150μl（可根据需要调整用量）的裂解液，冰上裂解20min；

d）冰上充分刮下细胞，并完全转移至EP管中；

e）在液氮中反复冻融3次；

f）4℃ 12000rpm离心15min，吸取上清，并转移至另一EP管中；

g）BCA法测蛋白浓度：将A液和B液（试剂盒内）按照50:1的浓度混合均匀，加入干净的96孔板中，每个孔内加入98μl后，再加入2μl所提蛋白/标准蛋白品（0，0.25，0.5，1，2μg/μl），在振荡器上震荡混合均匀后，放入37℃恒温箱中30min后取出，在分光光度仪上测定OD562nm，并根据绘制的标准曲线，计算出蛋白浓度。

h）蛋白内加入5×上样缓冲液（蛋白样品1/4体积的），95℃煮5min后可置于-20℃保存备用。

（2）SDS-PAGE电泳

a）先配制聚丙烯酰氨凝胶电泳的下层胶，待胶凝固后，再倒入上层胶，并插入洗净干燥的梳子，确保无气泡，静置20-30 min待其聚合；

b）将提前配置好的胶固定于蛋白电泳槽中，根据蛋白浓度，调整上样量，同时加入预染蛋白分子量marker（根据情况调整用量）以确定待检蛋白的分子量；

c）电泳：加样后，于15mA恒流电泳30min后用25mA恒流电泳约60min，直至溴酚兰跑至分离胶底部停止电泳；

d）完整取下凝胶，置于转膜缓冲液中。

（3）转膜

a）事先准备2张滤纸和1张PVDF膜，尺寸和SDS-PAGE凝胶的大小相符合；

b）先将PVDF 膜在甲醇中浸泡1min，后浸泡于转移缓冲液中备用；

c）从阴极向阳极依次放置滤纸-凝胶-PVDF膜-滤纸，注意各层间无气泡；

d）230mA恒流转膜1.5-2h。

（4）封闭

将PVDF膜在5％脱脂奶粉或BSA（TBST配置）的封闭液室温封闭1h。

（5）抗体孵育

a）依据个人需要（根据抗体的分子量大小）将PVDF膜裁成适当宽度的条带；

b）TBST轻轻漂洗后，加入事先配制好的一抗，4℃过夜；

c）分别回收一抗，将膜用TBST漂洗3次，每次10min；

d）加入配好的二抗，室温放置1h；

e）再用TBST将漂洗膜3次，每次10min。

（6）显影（暗室中操作）

a）取相同体积的化学发光试液A液和B液，使用前混合均匀；

b）将配置好的发光液均匀平铺于PVDF 膜上，反应1min后，用滤纸吸干发光液，放置胶片，根据曝光结果调整曝光时间；

c）取出胶片浸入显影液中，清水漂洗后定影，晾干后进行扫描采图与分析。

（7）膜再生strip法

a）发光后的PVDF膜先用TBST漂洗5min；

b）加入适量的膜再生液后，室温放置30min；

c）TBST再次漂洗5min×3次；

d）重新封闭、抗体孵育、显影，重复步骤（4）-（6）。

real-timePCR测TIPE1 mRNA的相对表达变化检测结果如图3所示，Western blot测TIPE1 蛋白质的相对表达变化结果如图4所示，结果表明刺激HaCaT和HEKa细胞模拟银屑病细胞水平后，TIPE1表达升高。

5）对M5刺激HaCaT和HEKa细胞应用siRNA敲除TIPE1后进行检测

针对TIPE1的siRNA为si-negative control、si-TIPE1-1、si-TIPE1-2和si-TIPE1-3，其序列分别为如表2所示：（请提供具体的序列）

表2

siRNA转染过程

a）转染前24h将约 1.5-2×105个细胞接种至6孔板，用含10%FBS DMEM培养基在37℃、5%CO2的温箱中孵育24h，转染时细胞融合度需要达到60-70%；

b）将Lipofectamine 2000以5μl/孔加入250μl/孔的Opti-MEM减血清培养基中，轻轻上下颠倒混匀后室温孵育5min；

c）分别取5μl/孔的TIPE1-siRNA和阴性对照siRNA分别加入250μl/孔的Opti-MEM减血清培养基中混合均匀；

d）将b）和c）中的液体混合，轻柔颠倒混匀，室温孵育20min，以便形成siRNA与Lipofectamine 2000的转染复合物；

e）把相应的siRNA与Lipofectamine 2000 的混合液滴加到各孔中，用纯DMEM培养基补充至每孔的液体总量为2ml，轻柔地摇晃6孔板以混匀，做好标记后将6孔板放入细胞培养箱；

f）常规培养6h后，更换为含10%FBS和1%双抗的普通DMEM培养基。

（3）转染效率的验证

a）转染24h后提取RNA进行qRT-PCR实验检测TIPE1 mRNA表达水平；

b）转染48h后提取蛋白进行Western Blot实验检测TIPE1蛋白表达水平。

图5为在HaCaT细胞和HEKa细胞应用si-negative control、si-TIPE1-2和si-TIPE1-3敲除TIPE1后48小时，或在TIPE1被抑制后再用M5 刺激HaCaT细胞和HEKa细胞，提细胞总蛋白，分别检测相关分子的western blot。

结果表明在TIPE1被抑制表达之后ERK表达降低，但用M5 刺激细胞后，ERK表达降低的现象有所恢复，提示TIPE1可能通过活化ERK信号来促成银屑病的进展。

6）MTT法检测敲除TIPE1对HaCaT细胞和HEKa细胞增殖的影响

（1）取对数生长期的细胞，用胰酶消化收集细胞后，用含10%FBS的DMEM培养基制成单个细胞悬液，调整细胞密度为2.5×10⁴个/ml；

（2）96孔板中每孔加入200μl细胞悬液（5×10³个细胞/孔），每组设5个复孔，同时设置空白对照组只加培养基，37℃、5%CO₂细胞培养箱中常规培养；

（3）24h后行转染（各种试剂用量按照6孔板/96孔板培养基体积换算）；

（4）于转染后24h进行检测。测时每孔加入0.5mg/ml的MTT溶液20μl，置于培养箱中继续孵育4h，弃去液体，每孔加入150μl DMSO，室温震荡10min溶解结晶，在波长490 nm测定吸光度（OD）值；

（5）转染后48h、72h分别重复步骤（4）；

（6）以无细胞完全培养液为本底对照，绘制细胞生长曲线（以平均OD值为纵坐标，以时间为横坐标）。

在HaCaT细胞和HEKa细胞应用si-negative control、si-TIPE1-2和si-TIPE1-3敲除TIPE1后24小时、48小时及72小时的细胞增殖如图6和图7所示，结果表明TIPE1被抑制表达后影响到所模拟的银屑病细胞的增殖，提示TIPE1促进细胞银屑病细胞的增殖。

综上实验检测表明，TIPE1与银屑病的发展呈正相关，适当浓度的TIPE1抗体治疗咪喹莫特小鼠银屑病模型，能够改善鳞屑和皮损厚度，并且通过抑制ERK信号来达到抑制银屑病发展以及抑制皮损。

鉴于此，TIPE1可以作为靶点在制备防治银屑病的药物中的应用。而且可以在基因水平和/或蛋白水平以TIPE1作为药物靶点。比如通过阻碍TIPE1表达或转录的DNA或RNA，或者是阻碍或抑制TIPE1作用ERK信号的药物。相应的， TIPE1的抗体可用于制备防治银屑病的药物，siRNA敲除TIPE1的载体也可以用于制备防治银屑病的药物。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。

Claims (6)

1.TIPE1作为靶点在制备防治银屑病的药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物在基因水平和/或蛋白水平以TIPE1作为药物靶点，通过抑制AKT信号来促成银屑病的进展以及抑制皮损。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述的药物是针对TIPE1的抗体。

4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述的药物是阻碍TIPE1表达或转录的DNA或RNA。

5.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述的药物是阻碍或抑制TIPE1活化ERK信号的药物。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，siRNA敲除TIPE1的载体可用于制备防治银屑病的药物。