CN110604747B - 一种蜂胶纳米粒、制备方法、应用及其冻干粉的制备方法 - Google Patents

一种蜂胶纳米粒、制备方法、应用及其冻干粉的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种蜂胶纳米粒的制备方法，通过加入稳定剂，并在超声条件下，将蜂胶有机相溶液与水相混合，然后减压旋转蒸发除去有机溶剂，得到蜂胶纳米粒。本发明采用纳米技术将蜂胶制成纳米颗粒，有效解决了蜂胶溶解性差以及由其带来的难以分散、难以给药、难以进一步制剂加工等一系列问题，提升蜂胶的应用价值，具有良好的工业化前景。

Description

一种蜂胶纳米粒、制备方法、应用及其冻干粉的制备方法
技术领域
本发明涉及一种蜂胶纳米粒、制备方法、应用及其冻干粉的制备方法，属于医药和保健品领域。
背景技术
蜂胶是蜜蜂从植物的树芽，树皮上采集的树脂，混以蜜蜂的舌腺、蜡腺等腺体的分泌物，经蜜蜂加工转化而成的具有芳香性不透明的胶状物质，用于维持整个群体健康的有效物质，一个5～6万只的蜂群一年只能生产蜂胶100-150克。自古以来，蜂胶就被人们所认识，被称为“天然抗生素”，被科学家誉为“紫色黄金”。
蜂胶成分相当复杂，主要成分是黄酮类化合物，已被鉴定的黄酮类化合物有70多种。此外还含有酚类、醇类、有机酸、萜类化合物、芳香醛、醇类、酯类及多种氨基酸、酶、维生素、矿物质等。
蜂胶是一种具有广泛药理功效的蜂产品，有天然抗生素之称，具有广泛的生物学活性。据国内外大量研究证明，蜂胶具有以下功能：抗氧化、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、伤口愈合、血糖调节和抗糖尿病、神经保护、胃肠道保护、口腔保健和粘膜修复、促进组织细胞再生、降血脂、缓解更年期症状等，同时具有很好的抗微生物活性，对细菌、真菌乃至寄生虫的生长均有良好的抑制作用，特别是近年来围绕蜂胶抗耐药菌的研究，也为开发新的抗生素药物提供思路(程瑞,王燕，蜂胶的生物学功能及其应用前景，畜牧与饲料科学，2012,33(8):60-62；王凯等，2016年国内外蜂胶研究概况，蜜蜂杂志，2017，5:1-5；郑宇斐等，2017年国内外蜂胶研究概况(一)，蜜蜂杂志，2018，4：6-9)。
蜂胶已被广泛应用于医药、食品、化妆品、农业和畜牧兽医等领域。然而，由于它难溶于水给实际应用带来了困难，同时口服吸收和生物利用度也较低。因此如何制备一种溶解性好、便于应用、生物利用度高的蜂胶是本领域技术人员亟需解决的技术问题。
纳米粒是所有纳米大小纳米颗粒的统称，其包括胶束、脂质体、固体脂质纳米粒、纳米球、纳米囊、纳米混悬剂等结构上各不相同的纳米载药体系。由于药物纳米粒具有很小的粒径，比表面积巨大，所以可提高药物的表观溶解度、加速溶出、增大吸收接触面积，从而提高难溶性药物生物利用度，并可用于静脉注射。纳米混悬剂(nanosuspensions)是一种特殊的纳米粒，是由纯药物形成纳米大小的颗粒、其外周“包覆”稳定剂分子使其稳定下来的载药纳米粒。在各种纳米给药系统中，如胶束、脂质体、聚合物纳米粒(包括纳米球、纳米囊)载药量较低，固体脂质体纳米粒和某些聚合物胶束对某些药物载药量稍高(可达20％甚至30％)，载药量最高的是纳米混悬剂和纳米晶。纳米混悬剂(nanosuspensions)是一种特殊的纳米粒，是由纯药物形成纳米大小的颗粒、其外周“包覆”稳定剂分子使其稳定下来的载药纳米粒。当纳米混悬剂中辅料用量较少且药物在纳米粒中以结晶形式存在时，也成为纳米晶(nanocrystals)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种蜂胶纳米粒，该纳米粒为水相胶体分散体系，可满足口服、注射、外用、腔道给药等多种给药方式的需求，并可用于保健品以及含漱、牙膏、护肤等多种快消品和日化制品，从而有效解决了由于蜂胶不溶于水而带来的给药困难和应用方面的不便。将蜂胶制备成纳米大小的颗粒之后，其体外溶出速度和程度都会明显加快，细胞摄取更快，非注射给药的生物利用度也会提高；静脉注射之后也会因EPR效应(enhancedpermeability and retention effect)而提高药物在肿瘤、炎症部位的聚集，显著改善疗效。本发明制备的蜂胶纳米粒还可加入适量冻干保护剂之后冻干保存，或作为中间体用于制备其他终端制剂。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种蜂胶纳米粒，其平均粒径为50-500nm，由质量比为1:(0.1-10)的蜂胶和稳定剂制备得到，所述稳定剂为水溶性稳定剂和/或脂溶性稳定剂。
本发明采用纳米技术将蜂胶制成纳米颗粒，有效解决了蜂胶溶解性差以及由其带来的难以分散、难以应用或给药、难以进一步制剂加工等一系列问题，提升蜂胶的应用价值，具有良好的工业化前景。
进一步，水溶性稳定剂选自泊洛沙姆、油酸钠；
脂溶性稳定剂选自维生素E-甲氧基聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、聚己内酯-甲氧基聚乙二醇(PCL-mPEG)、卵磷脂、氢化卵磷脂、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇(DSPE-mPEG)、聚乳酸-甲氧基聚乙二醇(PLA-mPEG)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物-甲氧基聚乙二醇(PLGA-mPEG)；
其中，泊洛沙姆选自泊洛沙姆P188、泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P124、泊洛沙姆P237和泊洛沙姆P338中的一种或几种；
PCL-mPEG、PLA-mPEG、PLGA-mPEG中，PCL、PLA、PLGA嵌段的分子量范围为1000-10000，优选分子量2000-5000，mPEG嵌段的分子量范围为1000-10000，优选分子量2000-5000。
采用上述进一步的有益效果在于：以TPGS、P188、PCL-mPEG、卵磷脂、氢化卵磷脂、DSPE-mPEG、油酸钠、PLA-mPEG、PLGA-mPEG为稳定剂，制备的蜂胶纳米粒平均粒径在100-300nm，室温放置稳定，均可用于腔道给药和外用。其中以HP-HP-β-环糊精为稳定剂的蜂胶纳米粒还可用于注射给药；以TPGS、DSPE-mPEG2000、卵磷脂为稳定剂的蜂胶纳米粒，可直接用于包括静脉注射在内的注射给药，口服时需要装入肠溶胶囊或制备成肠溶片等肠溶制剂；以P188为载体制备的蜂胶纳米粒稳定性最好，还可直接用于口服、静脉给药和其他注射给药。在本发明的实施例中，蜂胶纳米粒中蜂胶的浓度最高达到了50mg/mL，便于实现蜂胶在较高的剂量或用量下体内给药或应用。
进一步，上述蜂胶纳米粒中由蜂胶和稳定剂的质量比优选为1:(0.2-5)。
采用上述进一步的有益效果在于，本发明的蜂胶纳米粒当药载比(蜂胶与稳定剂的重量比)高于1:1时，制备的纳米粒从结构上看属于纳米混悬剂；当药载比低于1:5时，制备的纳米粒从结构上看属于胶束；当药载比介于1:(1-5)时，制备的纳米粒为一种介于胶束和纳米混悬剂之间的纳米粒，从结构上看和聚合物纳米粒比较接近。当使用较高的药载比时，稳定剂用量少，能在维持蜂胶高度分散的胶体状态，实现蜂胶的高效递送或应用的同时，减少辅料可能存在不良影响，尤其是在静脉注射给药时。对于那些价格较高的辅料，高药载比的蜂胶纳米粒还可以有效降低纳米粒的成本，在本发明的方案中，蜂胶纳米粒中蜂胶的浓度最高可达50mg/mL。
本发明还提供了上述蜂胶纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)将蜂胶和脂溶性稳定剂溶于有机溶剂中作为有机相；
(2)将水溶性稳定剂溶于水中作为水相；
(3)在超声或搅拌条件下，将步骤(1)中的有机相滴加至水相中，得到混合相；
(4)减压旋转蒸发混合相，去除有机溶剂之后，即得蜂胶纳米粒。
在本发明蜂胶纳米粒的制备方法中，当稳定剂为脂溶性的TPGS、卵磷脂、PCL-mPEG、SPE-mPEG2000、PLA-mPEG、PLGA-mPEG，或含这些水溶性稳定剂时，在制备蜂胶纳米粒时，将这些稳定剂和药物共溶于有机溶剂作为有机相；当稳定剂为亲水性的泊洛沙姆P188、油酸钠，或含这些水溶性稳定剂时，在制备蜂胶纳米粒时，将这些稳定剂溶于水作为水相。
进一步，上述有机溶剂为乙醇、丙酮、甲醇中的任一种或几种的混合；
采用上述进一步的有益效果在于：采用上述溶剂作为药用辅料，可有效提高本发明纳米粒蜂胶的安全性。
进一步，步骤(1)中，每100mL有机溶剂中加入0.01-100g蜂胶。
进一步，步骤(4)中，减压旋转蒸发温度为20-60℃，优选30-45℃为，更优选为45℃。
本发明蜂胶纳米粒的制备，对超声条件没有很高的要求，研究过程中发现从100W-250W的超声对蜂胶纳米粒的制备没有明显影响。本发明对搅拌速度也没有严格要求，通常500rpm以上转速都可以，但尽量不要低于200rpm。
进一步，步骤(4)还包括在除去全部有机溶剂后，采用0.45um微孔膜过滤或在2000r/min条件下离心5min除去大颗粒的操作。
采用上述进一步的有益效果在于：当蜂胶纳米混悬剂中蜂胶浓度为10mg/mL以及更高的情况下，微孔膜过滤或者离心便于除去可能存在的少量大粒径的纳米粒。
本发明还提供了上述蜂胶纳米粒在制备口服液、片剂、粉剂、颗粒剂、散剂、膜剂、微囊剂、溶液剂、凝胶剂、注射剂、外用制剂中的应用，所制成的制剂可供口服、注射、外用、腔道给药，以及制备牙膏、含漱用品和洗浴用品。
本发明还提供了一种蜂胶纳米粒冻干粉的制备方法，具体为：将上述蜂胶纳米粒与冻干保护剂混合成混悬剂后，冷冻干燥即得蜂胶纳米粒冻干粉，
其中，冻干保护剂占所述混悬剂总质量的0.1％-20％。
进一步，上述冻干保护剂为蔗糖、葡萄糖、半乳糖、海藻糖、麦芽糖、甘露醇、BSA、P188、乳清蛋白中的任一种或几种的混合。
附图说明
图1为实施例4制备的蜂胶纳米粒(TPGS为稳定剂)的粒径分布图；
图2为实施例5制备的蜂胶纳米粒(泊洛沙姆P188为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度2mg/mL)的粒径分布图；
图3为实施例8制备的蜂胶纳米粒(泊洛沙姆P188为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度5mg/mL)的粒径分布图；
图4为实施例13制备的蜂胶纳米粒(DSPE-mPEG 2000为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度5mg/mL)的粒径分布图；
图5为实施例14制备的蜂胶纳米粒(氢化卵磷脂为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度2mg/mL)的粒径分布图；
图6为实施例18制备的蜂胶纳米粒(卵磷脂为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度5mg/mL)的粒径分布图；
图7为实施例22制备的蜂胶纳米粒(PLA2000-mPEG2000为稳定剂，药载比5:1,蜂胶浓度2mg/mL)的粒径分布图；
图8为实施例25制备的蜂胶纳米粒(PCL5000-mPEG5000为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度2mg/mL)的粒径分布图；
图9为实施例31制备的蜂胶纳米粒(油酸钠为稳定剂，药载比5:1,蜂胶浓度10mg/mL)的粒径分布图；
图10为实施例32制备的蜂胶纳米粒(PLGA-mPEG为稳定剂，药载比2:1,蜂胶浓度6mg/mL)的粒径分布图；
图11为实施例38制备的蜂胶纳米粒(油酸钠为稳定剂，药载比5:1,蜂胶浓度20mg/mL)的粒径分布图；
图12为实施例5制备的蜂胶纳米粒的透射电镜形貌图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg TPGS在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后得蜂胶纳米粒。
测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为131.3nm，PDI值为0.287，表面电位为-25.5mV。室温放置5天后，平均粒径为122.2nm，PDI值为0.246，表面电位为-28.5mV。
实施例2
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mg TPGS在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为177.4nm，PDI值为0.251，表面电位为-33.0mV。
实施例3
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2.5mgTPGS在超声条件下溶于1ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇后，在2000r/min转速下离心5min除杂，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为169.5nm，PDI值为0.254，表面电位为-10.2mV。
实施例4
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mgTPGS在超声条件下溶于2ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为115.0nm，PDI值为0.261，表面电位为-16.8mV。
实施例5
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在1000rpm搅拌条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为122.0nm，PDI值为0.158，表面电位为-21.0mV。室温放置5天后，平均粒径为128.4nm，PDI值为0.147，表面电位为-21.8mV。
实施例6
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为245.5nm，PDI值为0.241，表面电位为-36.5mV。
实施例7
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于1ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，在2000r/min的转速下离心5min除杂，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为213.8nm，PDI值为0.230，表面电位为-0.562mV。
实施例8
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取10mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于4ml水中作为水相；(2)称取20mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为134.1nm，PDI值为0.143，表面电位为-13.1mV。
实施例9
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取15mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为132.8nm，PDI值为0.176，表面电位为-21.8mV。
实施例10
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mgDSPE-mPEG2000和10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL去离子水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为105.5nm，PDI值为0.29，表面电位为-22.0mV；室温放置4天后，平均粒径为119.2nm，PDI值为0.329，表面电位为-10.5mV。
实施例11
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mgDSPE-mPEG和10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL去离子水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为149.0nm，PDI值为0.255，表面电位为-38.8mV。
实施例12
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mgDSPE-mPEG和10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将步骤(1)中获得的有机相缓慢滴加到2mL去离子水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，在2000r/min的转速下离心5min除杂，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为186.6nm，PDI值为0.224，表面电位为-4.73mV。
实施例13
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)称取20mg蜂胶和10mg的DSPE-mPEG2000完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到4mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为96.4nm，PDI值为0.254，表面电位为-19.9mV。
实施例14
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)称取30mg蜂胶和15mg氢化磷脂完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到15mL水中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为113.5nm，PDI值为0.177，表面电位为-19.6mV。
实施例15
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg卵磷脂在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为99.5nm，PDI值为0.180，表面电位为-20.9mV；室温放置4天后，平均粒径为111.8nm，PDI值为0.216，表面电位为-13.6mV。
实施例16
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mg卵磷脂在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为118.2nm，PDI值为0.184，表面电位为-37.3mV。
实施例17
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg卵磷脂在超声条件下溶于1ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，在2000r/min的转速下离心5min除杂，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为260.6nm，PDI值为0.207，表面电位为-7.86mV。
实施例18
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取10mg卵磷脂在超声条件下溶于4ml水中作为水相；(2)称取20mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将步骤(3)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为130.0nm，PDI值为0.149，表面电位为-21.5mV。
实施例19
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取15mg卵磷脂在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将、有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，在2000r/min的转速下离心5min除杂，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为206.9nm，PDI值为0.198，表面电位为-40.5mV。
实施例20
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取10mg的PLA10000-mPEG10000和10mg蜂胶完全溶于0.5ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为125.8nm，PDI值为0.167，表面电位为-29.2mV。室温放置4天后，平均粒径为136.8nm，PDI值为0.122，表面电位为-25.5mV。
实施例21
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg的PLA5000-mPEG5000和10mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为132.4nm，PDI值为0.142，表面电位为-27.6mV。室温放置3天后，平均粒径为139.6nm，PDI值为0.146，表面电位为-27.5mV。
实施例22
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mg的PLA2000-mPEG2000和10mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为141.1nm，PDI值为0.195，表面电位为-33.7mV。
实施例23
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg的PLA1000-mPEG2000和10mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将步骤(1)中获得的有机相缓慢滴加到1mL水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为245.6nm，PDI值为0.234，表面电位为-1.81mV。
实施例24
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取10mg的PLA2000-mPEG2000和20mg蜂胶完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到4mL水相中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为199.7nm，PDI值为0.160，表面电位为-16.1mV。
实施例25
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)将10mg蜂胶和PCL5000-mPEG5000完全溶于0.3ml乙醇中，得有机相；(2)250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到5mL水中，得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为132.5nm，PDI值为0.230，表面电位为-23.8mV。
实施例26
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)将10m蜂胶和2mg的PCL2000-mPEG2000完全溶于乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将步骤(1)中获得的有机相缓慢滴加到5mL水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为173.7nm，PDI值为0.256，表面电位为-37.8mV。
实施例27
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)将10mg蜂胶和10mg PCL10000-mPEG10000完全溶于0.3mL乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到2mL水中，获得混合相；(3)将步骤(2)中获得的混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为303.4nm，PDI值为0.128，表面电位为-16.6mV。
实施例28
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)将20mg蜂胶和5mg PCL2000-mPEG2000完全溶于0.4ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到2mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为109.7nm，PDI值为0.259，表面电位为-27.5mV。
实施例29
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)将30mg蜂胶和15mg PCL2000-mPEG2000完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到3ml水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为166.9nm，PDI值为0.232，表面电位为-16.4mV。
实施例30
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取15mg油酸钠在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为115.8nm，PDI值为0.176，表面电位为-62.2mV。
实施例31
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取6mg油酸钠在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为149.0nm，PDI值为0.176，表面电位为-63.1mV。
实施例32
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取15mgPLGA5000-mPEG5000和30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到5mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为133.3nm，PDI值为0.143，表面电位为-67.1mV。
实施例33
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取6mgPLGA2000-mPEG5000和30mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(2)在250W超声条件下，将步骤(1)中获得的有机相缓慢滴加到3mL水中，获得混合相；(3)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为136.6nm，PDI值为0.181，表面电位为-59.5mV。
实施例34
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取15mg泊洛沙姆P188、15mg油酸钠在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取60mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为160.7nm，PDI值为0.308，表面电位为-0.32mV。
实施例35
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：
(1)取15mg泊洛沙姆P188、15mgTPGS在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取60mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为140.6nm，PDI值为0.231，表面电位为-1.83mV。
实施例36
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取2mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于10ml水中作为水相；(2)称取20mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W和40Hz的超声条件下，将有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为182.3nm，PDI值为0.191，表面电位为-2.43mV。
实施例37
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取20mg泊洛沙姆P188在超声条件下溶于2mL水中作为水相；(2)称取2mg蜂胶完全溶于0.5ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W和40Hz的超声条件下，将步骤(2)中获得的有机相缓慢滴加到步骤(1)中获得的水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇之后，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为92.5nm，PDI值为0.08，表面电位为-8.62mV。
实施例38
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取12mg油酸钠在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取60mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加水相中，获得混合相；(4)将混合相45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为216.3nm，PDI值为0.201，表面电位为-63.1mV。
实施例39
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取18mg油酸钠在超声条件下溶于3ml水中作为水相；(2)称取90mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为216.3nm，PDI值为0.201，表面电位为-60.9mV。
实施例40
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取25mg油酸钠在超声条件下溶于2ml水中作为水相；(2)称取100mg蜂胶完全溶于0.6ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W超声条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为368.5nm，PDI值为0.275，表面电位为-65.3mV。
实施例41
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P407在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，得有机相；(3)在800rpm搅拌条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，得混合相；(4)混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得纳米粒平均粒径为145.2nm，PDI值为0.186，表面电位为-19.3mV。
实施例42
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P124在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在200W搅拌条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得纳米粒平均粒径为162.1nm，PDI值为0.146，表面电位为-22.5mV。
实施例43
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P237在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W搅拌条件下，将有机相缓慢滴加到水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得纳米粒平均粒径为151.8nm，PDI值为0.163，表面电位为-21.8mV。
实施例44
蜂胶纳米粒的制备方法，步骤为：(1)取5mg泊洛沙姆P338在超声条件下溶于5ml水中作为水相；(2)称取10mg蜂胶完全溶于0.2ml乙醇中，获得有机相；(3)在250W搅拌条件下，将有机相缓慢滴加水相中，获得混合相；(4)将混合相在45℃条件下减压旋转蒸发，去除所有乙醇，得蜂胶纳米粒。测得纳米粒平均粒径为172.6nm，PDI值为0.149，表面电位为-24.1mV。
试验例1
蜂胶纳米粒室温放置稳定性考察
按照实施例4、8、13、18、24、28、30、32中方法制备蜂胶纳米粒，25℃室温放置两周，取样测平均粒径为、多分散指数PDI和表面电位为，结果见表1，可知所制备的蜂胶纳米粒放置稳定性良好，其中以油酸钠、PLGA-mPEG、TPGS、PCL-mPEG为稳定剂的纳米粒室温放置稳定性最好。
表1蜂胶纳米粒室温放置14天后的粒径
Figure BDA0002253896200000191
观察发现，实施例8、13、18、24产品底部出现少许沉淀，振荡无法完全分散；实施例4、28底部出现少量沉淀，振摇后可完全分散。
试验例2蜂胶纳米粒在生理介质中的稳定性
配制含有1.8％NaCl、10％葡萄糖(Glu)和2倍浓度的PBS(2×PBS)的溶液以及人工胃液和人工肠液。按照实施例4、8、13、18、24、30、32中的方法以不同稳定剂制备蜂胶纳米粒，取适量与1.8％NaCl、10％Glu和2倍浓度的PBS混匀，37℃孵育并在特定的时间点测其粒径的变化；另取适量于4倍体积的人工胃液和人工肠液混合，摇匀，37℃孵育并在特定的时间点测其粒径的变化，结果见表2至表8，可见以油酸钠为稳定剂的蜂胶纳米粒既能口服给药(在人工胃肠夜中保持纳米大小)，又能静脉注射给药(在5％葡萄糖、PBS和血浆中保持纳米大小)；而以油酸钠为稳定剂的蜂胶纳米粒在生理介质中稳定性更佳。
表2TPGS稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000201
结论：当以TPGS为载体时，制得得蜂胶纳米粒可以在葡萄糖和人工肠液中稳定存在，在PBS中粒径增大了125nm左右，在生理盐水和人工胃液中37℃孵育2h开始出现沉淀，不能用于口服。
表3P188稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000202
结论：当以P188为载体制备的蜂胶纳米粒稳定性最好，在常见的生理介质如生理盐水、5％葡萄糖、PBS、人工胃肠液中均稳定存在，且粒径没有明显变化，说明可用于注射、口服、腔道给药和外用。
表4DSPE-mPEG2000稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000203
Figure BDA0002253896200000211
结论：当以DSPE-mPEG2000为载体制备的蜂胶纳米粒可以在5％葡萄糖、PBS、人工肠液中稳定存在，但在生理盐水和人工胃液中出现少量聚集，提示该纳米粒可用于注射、腔道给药和外用，装入肠溶胶囊后也可口服给药。
表5卵磷脂稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000212
结论：当以卵磷脂为载体制备的蜂胶纳米粒可以在5％葡萄糖、PBS、人工肠液中稳定存在，但在生理盐水和人工胃液中发生聚集沉淀，提示该纳米粒可用于注射、腔道给药和外用，装入肠溶胶囊后也可口服给药。
表6PLA-mPEG稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000213
Figure BDA0002253896200000221
结论：以PLA-mPEG为载体制备的蜂胶纳米粒，在5％葡萄糖、PBS中稳定存在，在生理盐水、人工胃液、人工肠液中孵育后发生少量聚集，提示该纳米粒能用于注射、腔道给药和外用，口服给药效果稍差。
表7油酸钠稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000222
结论：以油酸钠为载体制备的蜂胶纳米粒稳定性也不错，除在生理盐水中粒径增大到微米级别外，在5％葡萄糖、PBS、血浆、人工胃液、人工肠液中粒径虽个别有所增大，但都在纳米范围内，可视为较稳定存在，提示该纳米粒可用于注射、腔道、口服给药和外用等多种给药途径。
表8PLGA-mPEG稳定的蜂胶纳米粒在介质中孵育不同时间的粒径和PDI
Figure BDA0002253896200000223
Figure BDA0002253896200000231
结论：以PLGA-mPEG为载体制备的蜂胶纳米粒，具有和P188为载体的纳米粒相似的稳定性，即在所有常用的生理介质诸如生理盐水、5％葡萄糖、PBS、血浆、人工胃液、人工肠液中粒径均没有明显变化，提示该纳米粒可广泛用于注射、腔道、口服给药和外用等多种给药途径。
试验例3蜂胶纳米粒的冷冻干燥和复溶
3.1PLGA-mPEG为稳定剂的蜂胶纳米粒的冻干保护效果
冻干保护剂的筛选：按实施例32制备10mg/mL的蜂胶纳米粒，测的平均粒径为为142.3±4.18nm。分别加入0.5％的蔗糖、葡萄糖、半乳糖、海藻糖、麦芽糖、甘露醇、BSA、P188，冷冻干燥，加入等体积的纯水复溶，测得所得蜂胶纳米粒平均粒径为如表9所示，可知0.5％的牛血清白蛋白和0.5％的P188为保护剂是，蜂胶纳米粒冻干保护效果较好。
表9蜂胶纳米粒加入5％的不同保护剂冻干复溶后的平均粒径
Figure BDA0002253896200000232
除BSA外组，其余各组均有沉淀，超声后不能全部溶解。
BSA冻干保护剂浓度筛选：基于表9的结果，选取BSA为冻干保护剂进行浓度筛选。取上述按实施例32制备的浓度为10mg/mL的蜂胶纳米粒，分别加入0.5％、1％、1.5％、2％的BSA，冷冻干燥，加入等体积纯水复溶，测的平均粒径为如表10所示，可知1.5％和2％的BSA为冻干保护剂均可有效实现蜂胶纳米粒的冻干复溶。
表10BSA冻干保护剂用量与复溶后纳米粒的粒径
BSA 0.5％ 1％ 1.5％ 2％
粒径(nm) 330.2±15.6 248.8±9.5 212.1±3.8 179.0±6.2
乳清蛋白浓度筛选：BSA价格较乳清蛋白高，且多有报道提示乳清蛋白能够起到良好的冻干保护效果。取上述按制备例32制备的浓度为10mg/mL的蜂胶纳米粒，分别加入0.5％、1％、1.5％、2％的BSA，冷冻干燥，加入等体积纯水复溶，测的平均粒径如表-11所示，可知1％的乳清蛋白即可起到很好的保护作用。
表11乳清蛋白冻干保护剂用量筛选
Figure BDA0002253896200000241
3.2泊洛沙姆P188为稳定剂的蜂胶纳米粒的冻干保护效果
按照实施例8的方法制备以泊洛沙姆P188为稳定剂的蜂胶纳米粒，各取2mL的纳米粒混悬液若干份，分别加入0％、0.5％、1.0％、1.5％、2.0％和2.5％的乳清蛋白以及0.5％的P188作为冻干保护剂，冷冻干燥，加入2mL纯水，振荡，测定粒径和多分散指数。结果如表12所示，可知以P188为载体、药载比2:1的蜂胶纳米粒具有较好的冻干复溶特性，不加任何保护剂时，也能冻干复溶，只是PDI值偏大；加入0.5％、1.0％P188之后冻干，复溶后粒径和PDI值均较好；乳清蛋白也是该纳米粒较好的冻干保护剂，加入量在2.0％时冻干保护效果最好。
表12.以P188为载体、药载比2:1的蜂胶纳米粒冻干复溶后的粒径和粒度分布
Figure BDA0002253896200000242
3.3PLA-mPEG为稳定剂的蜂胶纳米粒的冻干保护效果
按照实施例24的方法制备以PLA-mPEG为稳定剂的蜂胶纳米粒，各取2mL的纳米粒混悬液若干份，分别加入0％、0.5％、1.0％、1.5％、2.0％和2.5％的乳清蛋白为冻干保护剂，冷冻干燥，加入2mL纯水，振荡，测定粒径和多分散指数。结果如表12所示，可知以PLA-mPEG为载体的蜂胶纳米粒，不加任何保护剂时，冻干后无法复溶；乳清蛋白是该纳米粒较好的冻干保护剂，加入量在0.5％时就能取得很好的冻干保护效果。
表13以PLA-mPEG为载体、药载比2:1的蜂胶纳米粒胶乳不同量的乳清蛋白作为保护剂冻干复溶后的粒径和粒度分布
Figure BDA0002253896200000251
3.4TPGS和卵磷脂为稳定剂的蜂胶纳米粒的冻干保护效果
按照实施例4和18的方法分别制备以TPGS、卵磷脂为稳定剂的蜂胶纳米粒，各取2mL的纳米粒混悬液若干份，分别加入1.5％P188、1％BSA、1.5％的乳清蛋白为冻干保护剂，冷冻干燥，加入2mL纯水，振荡，测定粒径和多分散指数。结果不加任何保护剂时，两种冻干后无法复溶；加入1.5％P188、1.5％乳清蛋白、1％BSA冻干，当以乳清蛋白和BSA为冻干保护剂时得到的冻干粉较蓬松，复溶较易，当以P188为冻干保护剂时得到的冻干粉蓬松度低于前两者，但复溶后粒径变化较小，而且P188是药典批准的可用于口服或静脉注射的药用辅料，故1.5％P188可作为蜂胶纳米粒的最优冻干保护剂。(见表14)。
表14以TPGS、卵磷脂为载体时蜂胶纳米粒冻干保护剂筛选
Figure BDA0002253896200000252
Figure BDA0002253896200000261
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种蜂胶纳米粒，其特征在于，所述蜂胶纳米粒的平均粒径为50-200nm，由质量比为1:1~5:1的蜂胶和稳定剂制备得到，所述稳定剂为水溶性稳定剂和/或脂溶性稳定剂；
所述水溶性稳定剂选自泊洛沙姆P188、油酸钠；
所述脂溶性稳定剂选自维生素E-甲氧基聚乙二醇琥珀酸酯、聚己内酯-甲氧基聚乙二醇、卵磷脂、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇、聚乳酸-甲氧基聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物-甲氧基聚乙二醇；
所述聚己内酯-甲氧基聚乙二醇、聚乳酸-甲氧基聚乙二醇和聚乳酸-羟基乙酸共聚物-甲氧基聚乙二醇中，聚己内酯、聚乳酸和聚乳酸-羟基乙酸共聚物嵌段的分子量范围为1000-10000，甲氧基聚乙二醇嵌段的分子量范围为1000-10000。
2.一种权利要求1所述蜂胶纳米粒在制备片剂、粉剂、颗粒剂、膜剂、凝胶剂、微囊剂、溶液剂、注射剂、外用制剂以及在制备含漱用品和洗浴用品中的应用。
3.一种蜂胶纳米粒冻干粉的制备方法，其特征在于，将权利要求1所述的蜂胶纳米粒与冻干保护剂混合成混悬剂后，冷冻干燥即得所述蜂胶纳米粒冻干粉；
所述冻干保护剂占所述混悬剂总质量的1-2.5%;
所述冻干保护剂为BSA、P188、乳清蛋白中的任一种或几种的混合。
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