CN110596021A - 台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法，属于污水处理技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：将活性污泥或生物膜用台盼蓝溶液染色处理后用光学显微镜进行检查，统计台盼蓝染色率，染色率越高，提示被测活性污泥或生物膜活性越差，反之则越高。本发明所述方法便捷、具有时效性且准确率高。
Description
技术领域
本发明涉及污水处理技术领域，具体涉及台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法。
背景技术
利用各种生物处理法的污水处理厂在运行、调试的过程中经常需要通过各种理化手段对活性污泥或生物膜测定一些指标，以便对其活性予以进行判断，这些手段及指标目前应用较多的有：测定污泥浓度(MLSS)、挥发性污泥浓度(MLVSS)、污泥沉降比(SV)、污泥容积指数(SVI)等指标，以及镜检观察生物相等。
但上述测定污泥浓度(MLSS)、挥发性污泥浓度(MLVSS)、污泥沉降比(SV)、污泥容积指数(SVI)等指标均为表面现象，虽有参考作用，但并非在所有时刻都能够反映活性污泥的实际状态，因为活性污泥中的微生物活动反映于上述指标具有明显的滞后性；并且上述指标的测定均不适用于生物膜。
镜检观察生物相所观察到的生物中，除了原生动物、后生动物能够通过其运动状态判断其状态及活性外，其余微生物均难以直接通过镜检判断其活性。
除此之外，虽然平板计数及分离培养等微生物学手段可反映活性污泥或生物膜的微生物指标与活性，但该类手段费时明显，滞后性亦明显，故目前该领域除了对污水处理厂出水的大肠杆菌或大肠菌群的测定外，较少采用该类手段。
目前并没有一种便捷、具有时效性的方法来对判断活性污泥或生物膜的活性的指标进行弥补或替换，以提高活性污泥或生物膜活性判断的准确性与便捷性。
发明内容
本发明的目的在于提供台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法。本发明所述方法便捷、具有时效性且准确率高。
本发明提供了台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法，包括以下步骤：
将活性污泥或生物膜用台盼蓝溶液染色处理后用光学显微镜进行检查，统计台盼蓝染色率，染色率越高，提示被测活性污泥或生物膜活性越差，反之则越高。
优选的是，所述台盼蓝溶液中台盼蓝的质量百分浓度为0.4～0.6％。
优选的是，所述检查时，光学显微镜放大倍数为40倍或100倍。
优选的是，所述活性污泥的染色处理包括：所述活性污泥的染色处理包括：将活性污泥与活性污泥采集处的原水混合，摇匀，将得到的摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液混合，振荡后静置，再次振荡后滴于载玻片上，盖上盖玻片。
优选的是，摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液的体积比为10:1。
优选的是，所述生物膜的染色处理包括：将生物膜采集处的原水进行过滤，得到过滤后的原水，将生物膜与过滤后的原水混合，加入台盼蓝溶液，振荡后静置，移除上清液，用接种环挑取生物膜涂抹于载玻片上，盖上盖玻片。
优选的是，所述生物膜与过滤后的原水的体积比为1:5。
优选的是，所述过滤为过0.45μm微孔滤膜。
优选的是，所述过滤后的原水和台盼蓝溶液的体积比为10:1。
优选的是，所述检查的方法包括普通法和反色法。
本发明提供了台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法。本发明所述方法能够在短时间内快速得知活性污泥或生物膜的存活状态与失去活性部分的占比，从而快速判断活性污泥或生物膜的活性，其便捷程度、时效性及观察结果的直观性均优于本领域的现有技术手段。试验结果表明，活性欠佳的活性污泥或生物膜在放大40倍观察下得到的台盼蓝染色率通常大于5％；在放大100倍观察下得到的台盼蓝染色率通常大于10％。
附图说明
图1为本发明提供的放大40倍观察得到的图像；
图2为本发明提供的放大40倍观察得到的反色图像；
图3为使用本发明提供的方法对实施例2所述污水处理厂的活性污泥进行检查的第一日(4月5日)得到的图像(放大100倍)；
图4为使用本发明提供的方法对实施例2所述污水处理厂的活性污泥进行检查的第四日(4月8日)得到的图像(放大100倍)；
图5为使用本发明提供的方法对实施例2所述污水处理厂的活性污泥进行检查的第六日(4月10日)得到的图像(放大100倍)。
具体实施方式
本发明提供了台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法，包括以下步骤：
将活性污泥或生物膜用台盼蓝溶液染色处理后用光学显微镜进行检查，统计台盼蓝染色率，染色率越高，提示被测活性污泥或生物膜活性越差，反之则越高。
在本发明中，所述台盼蓝溶液中台盼蓝的质量百分浓度为0.4～0.6％，优选为0.5％。本发明对所述台盼蓝的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的常规市售台盼蓝产品即可。
在本发明中，所述检查时，光学显微镜放大倍数为40倍或100倍。
在本发明中，所述活性污泥的染色处理包括：将活性污泥与活性污泥采集处的原水混合，摇匀，将得到的摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液混合，振荡后静置，再次振荡后滴于载玻片上，盖上盖玻片。在本发明中，所述原水指污水处理厂中与活性污泥或生物膜在同一场所的水。在本发明中，所述静置的时间优选为3～5min。在本发明中，摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液的体积比为10:1。
在本发明中，所述生物膜的染色处理包括：将生物膜采集处的原水进行过滤，得到过滤后的原水，将生物膜与过滤后的原水混合，加入台盼蓝溶液，振荡后静置，移除上清液，用接种环挑取生物膜涂抹于载玻片上，盖上盖玻片。在本发明中，所述生物膜与过滤后的原水的体积比为1:5。在本发明中，所述过滤为过0.45μm微孔滤膜。在本发明中，所述过滤后的原水和台盼蓝溶液的体积比为10:1。在本发明中，所述原水指污水处理厂中与活性污泥或生物膜在同一场所的水。在本发明中，所述静置的时间优选为3～5min。
在本发明中，所述检查的方法包括普通法和反色法。具体的，在本发明中，普通法具体优选为：对光学显微镜下所观察到的物象进行拍照，统计所得图像(如图1所示)中的活性污泥或生物膜絮体中蓝色部分的占比；反色法优选具体为：对光学显微镜下所观察到的物象进行拍照，将所得照片通过图像处理软件进行反色处理得到反色图像(如图2所示)，统计所得到的反色图像中的活性污泥或生物膜絮体中金黄色部分的占比。普通法中，使用台盼蓝溶液对活性污泥或生物膜染色处理后，其中的因死亡或细胞膜受损而失去活性的微生物细胞(本领域称“死泥”)会被染成蓝色，其余部分为为棕褐色，从而能够得知被测活性污泥或生物膜中失去活性的部分的占比，继而反映活性污泥或生物膜的活性状态。反色法中，对镜检所得图像进行反色处理后，因死亡或细胞膜受损而失去活性的微生物细胞呈现金黄色，其余部分为苍白色；反色处理后的图像更容易体现细节，故可根据实际需要选择是否对图像进行反色处理。更优选的，本发明所述统计得到的结果以百分比表示，称之为台盼蓝染色率，该结果接近该份活性污泥或生物膜样品中无活性部分的占比；该百分比越高，提示被测活性污泥或生物膜活性越差，反之则越高。
下面结合具体实施例对本发明所述的台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
本发明应用于活性污泥活性判断的详细操作流程
取样：用深水取样器在污水处理厂的生物池取1L活性污泥-原水混合物,并转移到合适容积(不小于1.2L)的容器内充分摇匀；
染色：立即取1ml上述充分摇匀的活性污泥-原水混合物，加入合适容积(3～5ml)的试管内，并加入0.1ml 0.4％台盼蓝溶液,振荡摇匀后静置3min；
镜检：再次将试管进行振荡摇匀，取适量经上述染色处理的活性污泥-原水混合物滴加于干净的载玻片上，并盖上盖玻片，放置于显微镜下选用10倍目镜加4倍物镜(放大倍数为40倍)观察，或者选用10倍目镜加10倍物镜(放大倍数100倍)观察；
拍照：使用10倍电子目镜或工业相机替换显微镜的目镜，连接计算机并调整至图像清晰，取多处物象拍照得到图像；
普通法统计：对得到的图像统计其肉眼可见的活性污泥絮体所占面积，再统计其中蓝色部分的所占面积，计算蓝色部分的占比，即得台盼蓝染色率；
反色法统计：使用图像处理软件(如windows画图、Photoshop等)对得到的图像进行反色处理，得到反色图像并统计其肉眼可见的活性污泥絮体所占面积，再统计其中金黄色部分的所占面积，计算金黄色部分的占比，即得台盼蓝染色率。
实施例2
上海某污水处理厂故障调试期间使用本发明提供的方法判断活性污泥活性
上海某污水处理厂于2019年3月出现运行故障，出水水质无法达标。经该污水处理厂及其提标改造项目部商议决定对其进行包括但不限于投加微生物制剂、加大内回流、加大曝气等措施进行调试。在此期间采用了本发明提供的方法对其污泥活性进行检查。
采用本发明对该污水处理厂的活性污泥进行检查的时间段为2019年4月5日起，至2019年4月10日出水达标为止。期间观察到的现象为：活性污泥样品的台盼蓝染色率逐步降低，提示该污水处理厂的污泥活性在逐步变高。
图3为使用本发明提供的方法对上述污水处理厂的活性污泥进行检查的第一日(4月5日)得到的图像；其台盼蓝染色率为19.7％，提示活性污泥样品及该污水处理厂的活性污泥的活性欠佳。
图4为使用本发明提供的方法对上述污水处理厂的活性污泥进行检查的第四日(4月8日)得到的图像；其台盼蓝染色率为6.7％，提示活性污泥样品及该污水处理厂的活性污泥的活性有所提高。
图5为使用本发明提供的方法对上述污水处理厂的活性污泥进行检查的第六日(4月10日)得到的图像；其台盼蓝染色率为0.4％，提示活性污泥样品及该污水处理厂的活性污泥的活性明显提高。
本实施例中放大倍数为100倍。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.台盼蓝用于活性污泥或生物膜活性判断的方法，包括以下步骤：
将活性污泥或生物膜用台盼蓝溶液染色处理后用光学显微镜进行检查，统计台盼蓝染色率，染色率越高，提示被测活性污泥或生物膜活性越差，反之则越高。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述台盼蓝溶液中台盼蓝的质量百分浓度为0.4～0.6％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检查时，光学显微镜放大倍数为40倍或100倍。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述活性污泥的染色处理包括：将活性污泥与活性污泥采集处的原水混合，摇匀，将得到的摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液混合，振荡后静置，再次振荡后滴于载玻片上，盖上盖玻片。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，摇匀后的活性污泥-原水混合物与台盼蓝溶液的体积比为10:1。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物膜的染色处理包括：将生物膜采集处的原水进行过滤，得到过滤后的原水，将生物膜与过滤后的原水混合，加入台盼蓝溶液，振荡后静置，移除上清液，用接种环挑取生物膜涂抹于载玻片上，盖上盖玻片。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述生物膜与过滤后的原水的体积比为1:5。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述过滤为过0.45μm微孔滤膜。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述过滤后的原水和台盼蓝溶液的体积比为10:1。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检查的方法包括普通法和反色法。
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