CN110583701A - 白僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂 - Google Patents

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Abstract

本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域，具体涉及一种杀草地贪夜蛾的药剂。所述药剂包括白僵菌和细菌。本发明的药剂对草地贪夜蛾的防治效果好。

Description

白僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂
技术领域
本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域，具体涉及一种白僵菌和细菌复配杀草地贪夜蛾的药剂。
背景技术
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda又名伪黏虫、秋行军虫、秋粘虫、草地夜蛾等，为节肢动物门，六足亚门，昆虫纲，有翅亚纲，鳞翅目，夜蛾科，灰翅夜蛾属，草地贪夜蛾种。草地贪夜蛾原产于美洲的热带和亚热带地区，广泛分布于美洲大陆，2016年入侵到非洲，迅速蔓延到撒哈拉以南的整个区域，2018年入侵到印度，并于2019年1月入侵我国云南西部地区，且已在我国热带和亚热带形成了虫源基地(“草地贪夜蛾迁飞行为与监测技术研究进展”，江幸福等，植物保护，2019年第45卷第1期，第12页摘要第1-2行，公开日2019年05月19日；“中国热带和亚热带地区草地贪夜蛾春夏两季钱飞轨迹的分析”，吴秋琳等，2019年第45卷第3期，第1页摘要第1-2行，公开日2019年07月03日)。
草地贪夜蛾气候寒冷地区一年可发生1-2个世代，炎热地区一年可发生3-4个世代，有世代交替现象，未发现有滞育现象。卵期2-5天；幼虫有6个龄期，白天在强光下会躲藏，夏天的幼虫期约为14天，寒冷季节为30天；老熟幼虫钻入土表下2-8cm处化蛹，如果土壤过硬，幼虫会用丝网把碎叶片和其他材料缠绕在土表结茧，夏天的蛹期约8-9天，冬天可达20-30天；成虫羽化3-4天后开始产卵，雌虫一般在其存活的前4-5天产下大部分卵，但是有时产卵持续达3周；成虫寿命7-21天。夏天完成一个世代需要约30天，夏天和秋天需要约60天，冬天需要约80天。成虫夜间活动，尤其在温暖、潮湿的夜晚活动力更强。成虫飞翔能力强，有报道称草地贪夜蛾借助风力，一个晚上能飞翔数百千米(“草地贪夜蛾及其近似种的鉴定”，孙德英等，植物检疫，2019年第33卷第4期，第37页右栏第2段第2行至第3段第3行，公开日2019年07月31日)。
草地贪夜蛾幼虫主要取食植株叶片对寄主造成危害。1龄幼虫在也片剂的一面取食叶片组织，叶片的另一面表皮仍保留，2龄和3龄幼虫先在叶片上咬出一个洞，然后在洞的内缘上咬食，可在玉米叶片上形成特殊穿孔排列的危害状。4龄以上幼虫会咬食整个叶片，经常造成植株仅剩叶梗和光杆，或者成碎裂，开裂状。幼虫也会钻入植株生长点，毁坏植物生长组织，或钻入果实和花朵内部为害。当幼虫数量众多时，大量幼虫会集体在田间爬行，暴食沿途作物，由此得名“行军虫”(“草地贪夜蛾及其近似种的鉴定”，孙德英等，植物检疫，2019年第33卷第4期，第38页左栏第1段第1-10行，公开日2019年07月31日)
草地贪夜蛾一旦传入，危害极大：(1)传播快，成虫借助风力可以快速远距离传播；(2)繁殖力强，1个雌蛾可以产2000粒卵；(3)适生范围广，可以在十几度至三十几度的温度范围内生存；(4)危害作物多，食性杂，其寄主植物广泛，为害80多种植物，最易为害玉米和水稻，还能为害小麦、甘蔗、棉花、花生、大豆、马铃薯、甘薯、烟草、番茄、辣椒等作物；(5)幼虫群集危害，啃食叶片，而且能对幼苗切根切茎取食，能蛀食心叶或未抽出的雄穗，能取食番茄等作物的花蕾和生长点，能钻入果实内取食(“草地贪夜蛾防治注意事项”，陈合等，现代农村科技，2019年第9期，第31页左栏第2段第1-10行，公开日2019年09月15日)。
草地贪夜蛾给农业生产造成了巨大损失，严重威胁我国农业生产。为此，2019年5月24日，国家农业农村部部署草地贪夜蛾防治工作时指出，应抓紧研究新科学方法，加以防治。根据全球范围内草地贪夜蛾的治理经验，生物防治是草地贪夜蛾最有效的控制手段之一(“草地贪夜蛾的生物防治研究进展”，唐璞等，农药市场信息，2019年第17期，第31页左栏第1段第9-19行，公开日2019年09月15日)。
生物农药是指既能杀死农作物害虫，又不伤害天敌；既不污染环境，又对人畜安全无威胁的生物杀虫剂和杀菌剂。与传统农药相比，生物农药具有效率高、成本低、无公害等优点，能够克服化学农药高残留、易污染、抗药性等不足(“生物农药的开发与应用”，贾方征，生物学教学，1996年第8期，第43页摘要第1-2行，公开日1996年12月31日)。
目前，活体微生物农药等新型生物农药已广泛应用于实际农业生产。但是，现有的防治草地贪夜蛾的活体微生物农药在实际应用中，对草地贪夜蛾的防治效果不佳。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种对草地贪夜蛾的防治效果好的药剂，该药剂中的白僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
杀草地贪夜蛾的药剂，包括白僵菌和细菌。
所述杀草地贪夜蛾是指物质提高昆虫纲，有翅亚纲，鳞翅目，夜蛾科，灰翅夜蛾属草地贪夜蛾种昆虫的死亡率或抑制其生长率的能力。
发明人在研究过程中意外发现，白僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
进一步，所述白僵菌为球孢白僵菌。
进一步，所述球孢白僵菌为球孢白僵菌ZJU435。
进一步，所述细菌为苏云金芽孢杆菌。
进一步，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。
进一步，白僵菌和细菌的质量比为1-5:5-9。
进一步，所述药剂为可湿性粉剂。
进一步，所述药剂还包括分散剂和/或润湿剂和/或稳定剂和/或紫外光保护剂和/或载体。
进一步，所述分散剂包括木质素磺酸钠、亚甲基双萘磺酸钠(英文简称NNO)、分散剂HK-2302或甲基萘磺酸钠的甲醛缩合物(英文简称MF)。
进一步，所述润湿剂包括Morwet EFW、十二烷基苯磺酸钠、洗衣粉或拉开粉。
进一步，所述稳定剂包括梭甲基纤维素钠或黄原胶。
进一步，所述紫外光保护剂包括腐殖酸、全脂奶粉、梭甲基纤维素或维生素C。
进一步，所述载体包括硅藻土、轻质碳酸钙或白炭黑。
进一步，所述药剂，以质量份计，包括白僵菌与细菌共计40-50份、分散剂5-10份和/或润湿剂5-10份和/或稳定剂0.5-1.0份和/或紫外光保护剂0.5-1.0份和/或载体28-49份。
本发明的目的还在于保护所述药剂的制备方法，其包括以下步骤：将原料混合均匀，即得。
本发明的有益效果在于：
本发明的药剂对草地贪夜蛾的防治效果好。
本发明的药剂中的白僵菌和细菌具有对草地贪夜蛾的协同增效作用。
本发明的药剂速效性好，其致死中时为4.70-6.17d。
本发明的药剂持效性好，用药后7d草地贪夜蛾的死亡率可达63.41％-75.61％。
本发明的药剂害虫不产生抗药性。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
以下球孢白僵菌ZJU435，由重庆大学基因工程实验室分离并提供，其活孢量为800亿个孢子/g；
以下苏云金芽孢杆菌原药由市售得到，其菌种类型苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种，生物效价为40000-60000IU/mg。
实施例1
白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为5:5，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例2
白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为4:6，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例3
白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为3:7，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例4
白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为2:8，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例5
白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌原药重量配比为1:9，二者添加总量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉与苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例6
苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂，具体组成为：称取苏云金芽孢杆菌原药，添加量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述苏云金芽孢杆菌的具体制备方法为：
将苏云金芽孢杆菌原药以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂。
实施例7
白僵菌可湿性粉剂，具体组成为：称取球孢白僵菌ZJU435孢子粉，添加量为50％wt，木质素磺酸钠10％wt，十二烷基磺酸钠5％wt，黄原胶1％wt，脱脂奶粉1％wt，白炭黑补足。
所述白僵菌可湿性粉剂的具体制备方法为：
将球孢白僵菌ZJU435孢子粉以及上述其他助剂按照上述配比称量好,用研钵研磨或低温粉碎气流机混匀、粉碎，即得所述白僵菌可湿性粉剂。
室内生测复配联合毒力测定试验：
检测白僵菌·苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂(即实施例1-5)、苏云金芽孢杆菌可湿性粉剂(即实施例6)和白僵菌可湿性粉剂(即实施例7)对草地贪夜蛾的毒力，并计算共毒系数，测试结果如表1所示；
供试虫源：于2019年6月在自云南省江城宝藏乡玉米地采集草地贪夜蛾幼虫，并在实验室用玉米叶人工饲养至F1代进行试验，饲养温度为26℃±1℃、相对湿度为60％-70％、光照/黑暗(16h/8h)；
试验方法：采用喷雾处理的分别测定实施例1-7制剂对草地贪夜蛾3龄虫的联合毒力作用；每处理3个重复，每重复15条幼虫；处理后为防止其相互残杀，喷药后立即将其分装放置于上口径为4cm，下口径3cm，高3cm的养虫盒内，饲喂干净的无药玉米叶片后放置于26℃±1℃，相对湿度为65％-75％的温室饲养；每天定时更换新鲜叶片，5天后观察其死活虫数，计算出各种试验浓度下的死亡率(％)；再根据剂量对数-死亡率几率值分析法，求出毒力回归方程和LC50；
联合毒力评价方法：
采用孙云沛共毒系数法：
毒力指数(TI)＝(标准药剂的LC50/供试药剂的LC50)×100
混剂实际毒力指数(ATI)＝药剂A单用的LC50/药剂A和B混用的LC50)×100
混剂理论毒力指数(TTI)＝TI(A)×a+TI(B)×b
式中，a表示药剂A在混剂中的百分含量；b表示药剂B在混剂中的百分含量。
共毒系数CTC＝(混剂实际毒力指数ATI/混剂理论毒力指数TTI)×100；
根据农业部农药检定所的规定，混剂配方增效的判断标准为：共毒系数大于120为增效作用；共毒系数80-120，为相加作用；共毒系数小于80，为拮抗作用；
以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同。
表1联合毒力测定结果
制剂 LC<sub>50</sub>(mg/ml) CTC
实施例6 2.70(0.95-9.17) --
实施例7 1.52(0.72-3.43) --
实施例1 2.03(0.49-12.62) 259.02
实施例2 1.65(0.34-12.80) 267.90
实施例3 1.31(0.29-8.23) 291.07
实施例4 1.44(0.40-6.90) 232.80
实施例5 1.12(0.30-5.54) 267.06
由表1可知，在球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌的质量比为1-5:5-9的配比范围内，两者复配，其共毒系数均大于120，均表现出协同增效作用；其中在球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌的质量比为3:7时，其共毒系数最高，达291.07。由此证明，球孢白僵菌ZJU435与苏云金芽孢杆菌具有对草地贪夜蛾的显著协同增效作用。
室内毒力测定
检测实施例1-7的制剂的室内毒力，并以清水处理为空白对照；
供试虫源：于2019年6月在自云南省江城宝藏乡玉米地采集草地贪夜蛾幼虫，并在实验室用玉米叶人工饲养至F1代进行试验，饲养温度为26℃±1℃、相对湿度为60％-70％、光照/黑暗(16h/8h)；
试验方法：每处理3个重复，每重复15只幼虫；使用Potter喷雾塔，以每处理400ul药液量对幼虫进行直接喷雾；为防止其相互残杀喷药后立即将其分装放置于上口径为4cm，下口径3cm，高3cm的养虫盒内，饲喂干净的无药玉米叶片后放置于26℃±1℃，相对湿度为65％～75％的温室饲养；每天定时更换新鲜叶片，连续观察7天观察其死活虫数；供药后每天观察其死活虫数，计算出死亡率(％)；并用SPASS软件统计致死中时(LT50)；
以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同；结果如表2所示。
表2室内毒力检测结果
制剂 用药量(g/L) 药后3d 药后4d 药后5d 药后6d 药后7d LT<sub>50</sub>(d)
实施例1 2 17.78％ 34.09％ 47.73％ 50.00％ 70.73％ 5.16
实施例2 2 13.33％ 22.73％ 50.00％ 52.38％ 73.17％ 5.25
实施例3 2 15.56％ 25.00％ 65.91％ 71.43％ 75.61％ 4.70
实施例4 2 13.33％ 25.00％ 29.55％ 30.95％ 68.29％ 6.15
实施例5 2 11.11％ 22.73％ 27.27％ 38.10％ 63.41％ 6.17
实施例6 2 11.11％ 22.73％ 29.55％ 35.71％ 56.10％ 6.47
实施例7 2 8.89％ 20.45％ 31.82％ 33.33％ 58.54％ 6.38
空白对照 2 0 0 0 0 0 --
由表2可知，与实施例6和实施例7相比，实施例1-5的制剂的死亡率得到了显著提高，致死中时LT50缩短了1-2天。由此证明，球孢白僵菌ZJU435和苏云金芽孢杆菌联合使用对草地贪夜蛾的室内毒力明显高于白僵菌CQMa421单剂和苏云金芽孢杆菌单剂的毒力，杀虫时间明显缩短。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.杀草地贪夜蛾的药剂，其特征在于，包括白僵菌和细菌。
2.根据权利要求1所述的药剂，其特征在于，所述白僵菌为球孢白僵菌。
3.根据权利要求2所述的药剂，其特征在于，所述球孢白僵菌为球孢白僵菌ZJU435。
4.根据权利要求1-3任一项所述的药剂，其特征在于，所述细菌为苏云金芽孢杆菌。
5.根据权利要求4所述的药剂，其特征在于，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种。
6.根据权利要求1-5任一项所述的药剂，其特征在于，白僵菌和细菌的质量比为1-5:5-9。
7.根据权利要求1-6任一项所述的药剂，其特征在于，所述药剂为可湿性粉剂。
8.根据权利要求7所述的药剂，其特征在于，还包括分散剂和/或润湿剂和/或稳定剂和/或紫外光保护剂和/或载体。
9.根据权利要求所述的药剂，其特征在于，以质量份计，包括白僵菌与细菌共计40-50份、分散剂5-10份和/或润湿剂5-10份和/或稳定剂0.5-1.0份和/或紫外光保护剂0.5-1.0份和/或载体28-49份。
10.权利要求1-9任一项所述药剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将原料混合均匀，即得。
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