CN110583395A - 一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及植物生理技术领域，尤其是一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，包括配置培养基、种子筛选、种子处理、播种与盐胁迫处理、统计种子萌发数和耐盐性评价几个步骤实现对粳稻种子耐盐性进行准确评测。本发明通过人工配置海水溶液，模拟滨海和内陆盐碱地不同的盐分环境，测定待测材料在盐胁迫条件下相对于非胁迫条件下，发芽率和发芽势受到的影响程度，最终比较和确定品种的耐盐性，这种方式大大简化了评估技术，实验周期端，实验组数量少，省时省力，大大节省了实验成本。

Description

一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法

技术领域

本发明涉及植物生理技术领域，尤其涉及一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法。

背景技术

粳稻，稻的一种，茎杆较矮，叶子较窄，深绿色，米粒短而粗，其米粒不粘，粳稻籽粒阔而短，较厚，呈椭圆形或卵圆形，籽粒强度大，耐压性能好，加工时不易产生碎米，出米率较高，米饭胀性较小；目前，粳稻在一些地区的中低产田中大量种植，由于中低产田和盐碱地土地盐碱度较高，因此，筛选出具有更好耐盐性粳稻品种对于粳稻推广种植以及进一步的盐碱地改造都是十分有意义的，粳稻的种子萌发是生长发育过程中对盐分胁迫最敏感的时期，盐胁迫会降低种子发芽率和延迟萌发时间或降低发芽势，因而对草本地被植物的种子萌发期盐胁迫的研究十分必要，然而，现有地被植物萌发期耐盐性的评估方法是在光照培养箱中用培养皿进行培养种子，但是，这些方法技术程序复杂，耗时和耗费人力较多，成本也较高。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在评估技术复杂导致费事费力的缺点，而提出的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，包括如下步骤；

步骤1：配置培养基；采用细沙作为培养基质，并配置不同浓度梯度的单盐溶液作为培养基溶液，具体的实施步骤如下：

A、取200-400Mmol/L的氯化钠溶液作为基础溶液，然后加入100-200Mmol/L的氯化钾溶液，再加入10％质量浓度的硫酸钠和碳酸氢钠溶液；

B、继续加入10％质量浓度的溴化钾和氟化钠溶液，然后加入5％质量浓度的硼酸溶液调节混合溶液酸碱度，使得混合溶液的PH在3-5；

C、继续加入15％质量浓度的六水氯化镁和二水氯化钙溶液，最后加入100-200ML的纯水；

步骤2：种子筛选；选取颗粒饱满、大小均匀一致、成熟能够萌发的粳稻种子，除霉去杂；

步骤3：种子处理；对粳稻种子进行表面处理，保证粳稻种子的萌发能力，具体的实施步骤如下：

(1)、首先，对粳稻种子进行杀菌处理，将粳稻种子通过15％质量浓度的次氯酸钠溶液进行浸泡，浸泡时间为5-10分钟，再用纯水冲洗；

(2)、然后，进行渗透调节，将粳稻种子放入100Mmol/L的硝酸钾溶液，浸泡种子2-3小时，再纯水冲洗；

(3)、最后，进行低温干燥处理，将湿润粳稻种子放置于温度设置为25摄氏度干燥箱中，并打开通风功能，持续12小时，使种子脱水干燥；

步骤4；播种与盐胁迫处理；将步骤3处理后的粳稻种子分别散播在不同氯化钠溶液浓度的培养基中，并在种子表面覆盖3-5毫米的细沙，然后用喷壶每日喷洒相应的氯化钠溶液进行盐胁迫处理作为实验组，用喷壶喷洒水作为对照组，同时在温室内进行培育；

步骤5：统计种子萌发数；在盐胁迫处理期内连续观测，并分别将对照组与实验组中的发芽数进行统计，记录不同氯化钠溶液浓度的培养基中种子的萌发数量；

步骤6：耐盐性评价；根据步骤5统计的发芽数计算出种子发芽率和发芽势，进而计算相对发芽率、相对盐害率和盐害指数，完成对种子的萌发和耐盐性评价。

优选的，在步骤1中，氯化钠溶液的浓度分别为200Mmol/L、250Mmol/L、300Mmol/L、350Mmol/L和400Mmol/L四组，氯化钾溶液的浓度为100Mmol/L、150Mmol/L和200Mmol/L三组，最终可设置12组培养基作为实验组。

优选的，在步骤3中，选择用100Mmol/L的硝酸钾溶液浸种2小时，目的在于，因为收获种子时，种子长在不同植株、不同部位上，其成熟度不能完全一致，为了保证种子初始渗透势一致。

优选的，在步骤3中，在用100Mmol/L的硝酸钾溶液浸种2小时后，需要采用纯水冲洗3-5次，并用吸水纸吸干种子表面水分，要求保证种子处于露白前状态。

优选的，在步骤6中，相对发芽率(％)＝盐胁迫处理期内全部正常发芽粒数/正常条件下全部正常发芽萌发种子数×100％。

优选的，在步骤6中，相对盐害率的计算公式为：A＝100×(B-b)/B，其中,A为X材料Y性状的相对盐害率，B为正常培养条件下X材料Y性状的测定值的平均值，b为在盐胁迫条件下X材料Y性状的测定值的平均值。

本发明提出的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，有益效果在于：本发明通过人工配置海水溶液，模拟滨海和内陆盐碱地不同的盐分环境，测定待测材料在盐胁迫条件下相对于非胁迫条件下，发芽率和发芽势受到的影响程度，最终比较和确定品种的耐盐性，这种方式大大简化了评估技术，实验周期端，实验组数量少，省时省力，大大节省了实验成本。

附图说明

图1为本发明提出的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法的流程图

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

参照图1，一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，包括如下步骤；

步骤1：配置培养基；采用细沙作为培养基质，并配置不同浓度梯度的单盐溶液作为培养基溶液，具体的实施步骤如下：

A、取200-400Mmol/L的氯化钠溶液作为基础溶液，然后加入100-200Mmol/L的氯化钾溶液，再加入10％质量浓度的硫酸钠和碳酸氢钠溶液；

B、继续加入10％质量浓度的溴化钾和氟化钠溶液，然后加入5％质量浓度的硼酸溶液调节混合溶液酸碱度，使得混合溶液的PH在3-5；

C、继续加入15％质量浓度的六水氯化镁和二水氯化钙溶液，最后加入100-200ML的纯水；

步骤2：种子筛选；选取颗粒饱满、大小均匀一致、成熟能够萌发的粳稻种子，除霉去杂；

步骤3：种子处理；对粳稻种子进行表面处理，保证粳稻种子的萌发能力，具体的实施步骤如下：

(1)、首先，对粳稻种子进行杀菌处理，将粳稻种子通过15％质量浓度的次氯酸钠溶液进行浸泡，浸泡时间为5-10分钟，再用纯水冲洗；

(2)、然后，进行渗透调节，将粳稻种子放入100Mmol/L的硝酸钾溶液，浸泡种子2-3小时，目的在于，因为收获种子时，种子长在不同植株、不同部位上，其成熟度不能完全一致，为了保证种子初始渗透势一致，再纯水冲洗，并用吸水纸吸干种子表面水分，要求保证种子处于露白前状态；

(3)、最后，进行低温干燥处理，将湿润粳稻种子放置于温度设置为25摄氏度干燥箱中，并打开通风功能，持续12小时，使种子脱水干燥；

步骤4；播种与盐胁迫处理；将步骤3处理后的粳稻种子分别散播在不同氯化钠溶液浓度的培养基中，并在种子表面覆盖3-5毫米的细沙，然后用喷壶每日喷洒相应的氯化钠溶液进行盐胁迫处理作为实验组，用喷壶喷洒水作为对照组，同时在温室内进行培育；

步骤5：统计种子萌发数；在盐胁迫处理期内连续观测，并分别将对照组与实验组中的发芽数进行统计，记录不同氯化钠溶液浓度的培养基中种子的萌发数量；

步骤6：耐盐性评价；根据步骤5统计的发芽数计算出种子发芽率和发芽势，进而计算相对发芽率、相对盐害率和盐害指数，完成对种子的萌发和耐盐性评价，相对发芽率(％)＝盐胁迫处理期内全部正常发芽粒数/正常条件下全部正常发芽萌发种子数×100％；相对盐害率的计算公式为：A＝100×(B-b)/B，其中,A为X材料Y性状的相对盐害率，B为正常培养条件下X材料Y性状的测定值的平均值，b为在盐胁迫条件下X材料Y性状的测定值的平均值。

在步骤1中，氯化钠溶液的浓度分别为200Mmol/L、250Mmol/L、300Mmol/L、350Mmol/L和400Mmol/L四组，氯化钾溶液的浓度为100Mmol/L、150Mmol/L和200Mmol/L三组，最终可设置12组培养基作为实验组；

在本发明中，通过相对盐害率的计算公式：A＝100×(B-b)/B，Z为粳稻种子的盐害指数，具体的计算公式为：

结果表明，Z值越大，材料受到盐害的伤害越大，反之，Z值越小，表示材料的耐盐性越强,根据盐害指数，按照以下标准，划分耐盐等级，数值精确到小数点后1位；

盐害指数0≤Yi≤20％时定为耐盐等级1级，高耐盐；

盐害指数20≤Yi≤40％时定为耐盐等级2级，耐盐；

盐害指数40≤Yi≤60％时定为耐盐等级3级，中耐盐；

盐害指数60≤Yi≤80％时定为耐盐等级4级，对盐敏感；

盐害指数80≤Yi≤100％时定为耐盐等级5级，对盐极敏感。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，包括如下步骤；

步骤1：配置培养基；采用细沙作为培养基质，并配置不同浓度梯度的单盐溶液作为培养基溶液，具体的实施步骤如下：

A、取200-400Mmol/L的氯化钠溶液作为基础溶液，然后加入100-200Mmol/L的氯化钾溶液，再加入10％质量浓度的硫酸钠和碳酸氢钠溶液；

B、继续加入10％质量浓度的溴化钾和氟化钠溶液，然后加入5％质量浓度的硼酸溶液调节混合溶液酸碱度，使得混合溶液的PH在3-5；

C、继续加入15％质量浓度的六水氯化镁和二水氯化钙溶液，最后加入100-200ML的纯水；

步骤2：种子筛选；选取颗粒饱满、大小均匀一致、成熟能够萌发的粳稻种子，除霉去杂；

步骤3：种子处理；对粳稻种子进行表面处理，保证粳稻种子的萌发能力，具体的实施步骤如下：

(1)、首先，对粳稻种子进行杀菌处理，将粳稻种子通过15％质量浓度的次氯酸钠溶液进行浸泡，浸泡时间为5-10分钟，再用纯水冲洗；

(2)、然后，进行渗透调节，将粳稻种子放入100Mmol/L的硝酸钾溶液，浸泡种子2-3小时，再纯水冲洗；

(3)、最后，进行低温干燥处理，将湿润粳稻种子放置于温度设置为25摄氏度干燥箱中，并打开通风功能，持续12小时，使种子脱水干燥；

步骤4；播种与盐胁迫处理；将步骤3处理后的粳稻种子分别散播在不同氯化钠溶液浓度的培养基中，并在种子表面覆盖3-5毫米的细沙，然后用喷壶每日喷洒相应的氯化钠溶液进行盐胁迫处理作为实验组，用喷壶喷洒水作为对照组，同时在温室内进行培育；

步骤5：统计种子萌发数；在盐胁迫处理期内连续观测，并分别将对照组与实验组中的发芽数进行统计，记录不同氯化钠溶液浓度的培养基中种子的萌发数量；

步骤6：耐盐性评价；根据步骤5统计的发芽数计算出种子发芽率和发芽势，进而计算相对发芽率、相对盐害率和盐害指数，完成对种子的萌发和耐盐性评价。

2.根据权利要求1所述的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，在步骤1中，氯化钠溶液的浓度分别为200Mmol/L、250Mmol/L、300Mmol/L、350Mmol/L和400Mmol/L四组，氯化钾溶液的浓度为100Mmol/L、150Mmol/L和200Mmol/L三组，最终可设置12组培养基作为实验组。

3.根据权利要求3所述的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，在步骤3中，选择用100Mmol/L的硝酸钾溶液浸种2小时，目的在于，因为收获种子时，种子长在不同植株、不同部位上，其成熟度不能完全一致，为了保证种子初始渗透势一致。

4.根据权利要求3所述的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，在步骤3中，在用100Mmol/L的硝酸钾溶液浸种2小时后，需要采用纯水冲洗3-5次，并用吸水纸吸干种子表面水分，要求保证种子处于露白前状态。

5.根据权利要求1所述的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，在步骤6中，相对发芽率(％)＝盐胁迫处理期内全部正常发芽粒数/正常条件下全部正常发芽萌发种子数×100％。

6.根据权利要求5所述的一种盐胁迫下粳稻种子耐盐性评测方法，其特征在于，在步骤6中，相对盐害率的计算公式为：A＝100×(B-b)/B，其中,A为X材料Y性状的相对盐害率，B为正常培养条件下X材料Y性状的测定值的平均值，b为在盐胁迫条件下X材料Y性状的测定值的平均值。