CN110558327A - 一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，包括有效成分、磺酰化壳聚糖囊壁材料和助剂，所述杀菌制剂的有效成分包括2,4‑二乙酰基间苯三酚、异菌脲，其中，2,4‑二乙酰基间苯三酚占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14%，异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14%，其余是磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂。通过本发明，杀菌制剂具有高度的环境相容性，有助于提高其靶向性和智能性，避免活性成分的过快降解、延长持效期、降低施药量、提高防治效果，对生物农药的研制和保障食品安全工程建设具有重大意义。

Description

一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂
技术领域
本发明涉及一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，属于农药制剂学研究领域。
背景技术
目前，在大棚温室果蔬生产过程中，因致病性真菌引起的病害尤为严重，而传统化学农药大量、频繁的使用所造成的果蔬、粮食中农药残留超标以及土壤微环境恶化等问题，已引起了社会的广泛关注，因此，研究及开发可替代化学农药的微生物制剂或生物农药具有巨大的市场潜力和应用前景。利用有益微生物进行生物防治是控制病害、减少化学污染的重要途径。其中研究比较深入的是假单胞菌属(Pseudomonas)和芽孢杆菌属(Bacillus)的生防细菌。假单胞杆菌是一种广泛分布于植物根际的革兰氏阴性细菌。这类细菌因其繁殖量大、与植物根围适应性好而作为植物病害生防菌得到了广泛的研究和应用。一些农业生产中危害严重的土传病害，如小麦全蚀病(Gaeumannomyces graminis)、烟草黑根腐病(Thielaviopsis basicola)、棉花立枯病(Rhizoctonia solani)以及番茄青枯病(Ralstonia solanacearum)等因荧光假单胞菌(P.fluorescens)生防菌株的应用而得到有效控制。其生防机制主要涉及5个方面：(1)抗生作用，即产生抗生性次生代谢产物，抑制病菌生长；(2)竞争作用，包括位点和营养竞争；(3)菌寄生；(4)抗菌蛋白及胞壁降解酶指分泌对病菌有毒的抗菌蛋白或多肽及分解病菌细胞壁的几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和蛋白酶等；(5)诱导抗性，即菌体或其代谢物诱导植株产生抗性，抵抗病菌的侵染。对于一种生防菌来说，其生防作用是一种或两种以上综合的效应。这5种作用中，由于抗生代谢物(抗生素)和抗菌蛋白等，可以通过微生物发酵提取，制成大量无活体的生物农药，因而具有更广阔的应用前景，如井岗霉素、阿维菌素、申嗪霉素、Bt等。
随着时代的发展，我国也大力提倡研发环保新型剂型，一些环保新剂型在化学农药中的产量已在逐步上升，研究应用生物农药的环保新型剂型已是时代发展的必然趋势。壳聚糖作基质载体材料，在纳米载体的制备中已经受到越来越多的关注。壳聚糖作为药物载体不仅可以控制药物释放、延长药物疗效、降低药物毒副作用、提高疏水性药物的稳定性、改变给药途径，还可以大大加强制剂的靶向给药能力，被认为是一种最具希望的高分子药物跨膜输送载体。目前，各种壳聚糖及其衍生物已被用于制备纳米载药体系。随着研究的深入，以壳聚糖为基材的纳米粒子制备方法不断发展，极大地丰富了纳米载药体系的种类和功能。但壳聚糖分子间或分子内氢键作用强，溶解性能差，导致其表面吸附能力差，液体表面张力弱，更不能形成大分子胶束。壳聚糖只能溶于酸性的水溶液，这在一定程度上限制壳聚糖的应用。
如何使壳聚糖溶于中性或碱性水溶液，并适合负载不同类型的药物，这成为制备壳聚糖纳米载药体系的关键问题。壳聚糖改性的重要目的是改善其在水中的溶解性能。赋予壳聚糖及其衍生物一些新颖的理化特性可以丰富它们作为功能材料的用途，这也是近些年来研究的热点。壳聚糖衍生物的胶束具有可控的纳米尺寸，稳定性又远远超过脂质体或纳米乳之类材料，而且可生物降解的聚合物胶束没有脂质体常见的毒性，是增溶疏水农药的理想载体。合成出粒径较小、临界胶束浓度较低的壳聚糖衍生物纳米胶束，从而获得能显著延长农药缓释时间的纳米载体，制备出的壳聚糖衍生物胶束显著提高，将更适合作为农药的载体系统。
灰霉病是温室大棚蔬菜经常发生且危害严重的一种病害，番茄、黄瓜等蔬菜受害一般可造成减产20％～30％，严重时可达50％以上。因为蔬菜大棚内冬春季气温低、湿度大，此病害可造成蔬菜叶片枯死，落花落果，对保护地蔬菜的产量和品质影响很大，给菜农造成较大经济损失。本发明专利中制备的微胶囊制剂具有高度的环境相容性，有助于提高其靶向性和智能性，避免活性成分的过快降解、延长持效期、降低施药量、提高防治效果，对生物农药的研制和保障食品安全工程建设具有重大意义。
发明内容
本发明专利针对上述现有的技术不足，本发明是提供一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，该制剂用于防治蔬菜灰霉病等病害，持效期长，对环境污染小，施药简便。
本发明的目的是这样实现的，一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，包括有效成分、磺酰化壳聚糖囊壁材料和助剂，其特征在于：所述杀菌制剂的有效成分包括2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲，其中，2,4-二乙酰基间苯三酚占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％，异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％，其余是磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂。
所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的质量配比为7:5、7:3、7:1、3:7或5:7。
所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的最佳配比为7:1。
通过本发明，提供的一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，制剂由2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲作为有效成分，通过磺酰化壳聚糖制备成微胶囊剂，其中2,4-二乙酰基间苯三酚化学结构式见图1。
所述杀菌制剂由有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲制备而成，其中2,4-二乙酰基间苯三酚占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％，异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％；制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的质量配比为7:5、7:3、7:1、3:7或5:7，其中制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的最佳配比为7:1。
磺酰化壳聚糖囊壁材料为市场上常见的现有的，也可以用本说明书中所叙方法制备得到，助剂为市场上常见的现有的。
磺酰化壳聚糖的合成、结构鉴定：合成分三步进行，首先在壳聚糖的氨基上接枝强疏水性的十八醇疏水甘油醚后，再进行磺酰化，制备两亲性壳聚糖衍生物载体，合成路线如下。
①十八烷氧基缩水甘油醚的合成：为获得较高产率的十八烷基缩水甘油醚，以反应物十八醇与环氧氯丙烷的摩尔比、NaOH用量、反应时间、反应温度为试验因素，产率为考察指标，进行L9(43)的正交设计，合成路线见图2。
②N-(3-十八烷氧基-2-羟基丙基)壳聚糖的制备：取6.0g高度脱乙酰壳聚糖，以120mL2％乙酸溶解(20滴，100mL)，用20％NaOH溶液沉淀(40mL)，将沉淀搅碎，抽虑，去离子水冲洗，使pH接近7.0，挤压干水份，得疏松溶胀的壳聚糖并转入250mL三口瓶。加入18.0g十八烷氧基缩水甘油醚(OGE)，加入70mL异丙醇作为反应介质，63℃保温反应3h，过滤，滤饼以20mL甲苯洗涤4次，除去未反应的十八烷氧基缩水甘油醚，得到纯净的N-(3-十八烷氧基-2-羟基丙基)壳聚糖，60℃真空干燥12h备用，合成路线见图3。
③N-(3-十八烷氧基-2-羟丙基)-O-磺酰基壳聚糖制备：取35mL甲酰胺溶剂于三口瓶中，在冰水浴条件下逐滴加入5mL氯磺酸，取2.0g第二步产物加入三口瓶中，升高温度至68℃，反应6h后，停止反应，倒出以20％NaOH调节pH至略偏碱性，以丙酮沉淀，抽滤，滤饼以热的无水乙醇(60℃)洗涤2～3次，60℃真空干燥得微黄色粉末磺酰化壳聚糖(NOSCS)，合成路线见图4。
微胶囊剂的制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，微胶囊剂的电镜图片见图5。
本发明公开了一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，属于农药制剂学研究领域，其由2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲、磺酰化壳聚糖囊壁材料和农药助剂等制备而成，其中2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比分别为0.1～14％、0.1～14％。所制备的杀菌制剂具有高度的环境相容性，有助于提高其靶向性和智能性，避免活性成分的过快降解、延长持效期、降低施药量、提高防治效果，对生物农药的研制和保障食品安全工程建设具有重大意义。
附图说明
图1为2,4-二乙酰基间苯三酚的化学结构式；
图2为十八烷氧基缩水甘油醚的合成反应；
图3为N-(3-十八烷氧基-2-羟丙基)壳聚糖的合成；
图4为N-(3-十八烷氧基-2-羟丙基)-O-磺酰基壳聚糖的制备；
图5为本发明的一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂。
具体实施方式
下面的实施例是对本发明技术方案进一步说明，但本发明的内容并不局限于此(以下实施例所有组成均按质量百分比计)。
一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，所述杀菌制剂的有效成分包括2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲，其他包括磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂，其中，2,4-二乙酰基间苯三酚占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％，异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14％，其余是磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂。
所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的质量配比为7:5、7:3、7:1、3:7或5:7。
所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的最佳配比为7:1。
实施例1、12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度7.0％、异菌脲的质量浓度5.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚7.7g、异菌脲5.5g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂50mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的97g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为7.0g，异菌脲的质量为5.0g，微胶囊剂的电镜图片见图5。
实施例2、10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度7.0％、异菌脲的质量浓度3.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚7.7g、异菌脲3.3g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂40mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的100g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为7.0g，异菌脲的质量为3.0g。
实施例3、8.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度7.0％、异菌脲的质量浓度1.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚7.7g、异菌脲1.1g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂40mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的102g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为8.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为7.0g，异菌脲的质量为1.0g。
实施例4、10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度3.0％、异菌脲的质量浓度7.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚3.3g、异菌脲7.7g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂40mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的100g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为3.0g，异菌脲的质量为7.0g。
实施例5、12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度5.0％、异菌脲的质量浓度7.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚5.5g、异菌脲7.7g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂50mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的97g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为5.0g，异菌脲的质量为7.0g。
实施例6、14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度0.1％、异菌脲的质量浓度14.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚0.11g、异菌脲15.5g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂50mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的95g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为0.1g，异菌脲的质量为14.0g。
实施例7、14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度14.0％、异菌脲的质量浓度0.1％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚15.5g、异菌脲0.11g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂50mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的108g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到95g质量浓度为14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为14.0g，异菌脲的质量为0.1g。
实施例8、16.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂：微胶囊剂中2,4-二乙酰基间苯三酚的质量浓度14.0％、异菌脲的质量浓度2.0％。
制备方法：准确称取待装载的有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚15.5g、异菌脲2.2g的有效组合物于烧瓶中，加入丙酮和乙醇混合溶剂50mL(丙酮与乙醇的体积比为1:1)，磁力搅拌下溶解有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲后加入上述所制备的93g磺酰基壳聚糖纳米载体，以1滴/s的速度逐滴加40mL三蒸水，继续搅拌4h使溶剂充分挥发，加入抗冻剂乙二醇8mL，然后转移到培养皿里，减压真空除气泡及未挥发的有机溶剂，随后转入-80℃冰箱预冻(2h)。样品放入冷冻干燥机中进行干燥，加入丙酮20mL后进行洗脱(洗脱3次)再过滤。上层滤渣收集后再除水干燥，干燥后得到100g质量浓度为16.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂，2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂中：2,4-二乙酰基间苯三酚的质量为14.0g，异菌脲的质量为2.0g。
实施例9、室内抑菌活性试验
把2,4-二乙酰基间苯三酚原药和异菌脲原药分别配制成10μg/mL的母液，置于4℃冰箱中备用。母液再用适量的无菌水溶解后，在单剂室内抑菌活性测定的基础上，按2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲母液的质量比分别为7∶5、7∶3、7∶1、3∶7、5∶7进行配比，采用生长速率抑制法测定混剂的抑制率。在初筛的基础上，将2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲母液及5种混配组合各设置5个梯度的质量浓度。以药剂有效成分在培养基中的浓度为毒理试验浓度，配制成含药马铃薯蔗糖琼脂糖培养基的系列平皿。采用无菌水作空白对照。测试方法将保留的番茄灰霉病病菌转接到马铃薯蔗糖琼脂糖培养基平皿中，在25℃活化72h，然后在近菌落边缘用打孔器制取直径为5mm的菌饼，并转接到配比稀释配制的含药马铃薯蔗糖琼脂糖培养基列平皿和空白对照平皿中。每个处理重复3次。于25℃培养5d，待对照中菌落约长至平皿直径的4/5时，采用十字交叉法量取菌落直径。以药剂浓度对数值为自变量x、菌丝生长平均抑制率的概率值为因变量y，计算出毒力回归方程和相关系数r，根据回归方程求出各药剂的抑制中浓度EC50值及共毒系数。
表1各药剂对番茄灰霉病菌的室内毒力(5d)
供试药剂 毒力回归方程 EC<sub>50</sub>值(μg/mL) 相关系数 共毒系数
2,4-二乙酰基间苯三酚 y＝2.5002+1.8236x 23.48 0.9943 /
异菌脲 y＝2.6881+2.1885x 11.39 0.9804 /
2,4-二乙酰基间苯三酚∶异菌脲＝7∶5 y＝2.5759+2.1483x 13.44 0.9882 121.12
2,4-二乙酰基间苯三酚∶异菌脲＝7∶3 y＝2.6005+2.1836x 12.56 0.9870 141.83
2,4-二乙酰基间苯三酚∶异菌脲＝7∶1 y＝2.6329+2.1176x 13.12 0.9965 158.04
2,4-二乙酰基间苯三酚∶异菌脲＝3∶7 y＝2.8803+2.1840x 9.34 0.9656 144.12
2,4-二乙酰基间苯三酚∶异菌脲＝5∶7 y＝2.9105+1.9405x 11.93 0.9919 121.48
由表1可以看出，2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲、2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲各个配比混配对番茄灰霉病的抑制中浓度EC50值按序(7:5、7:3、7:1、3:7和5:7)分别为13.44、12.56、13.12、9.34和11.93μg/mL；2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲各个配比混配的共毒系数按序(7:5、7:3、7:1、3:7和5:7)分别为121.12、141.83、158.04、144.12和121.48。2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲配比为7:5、7:3、7:1、3:7和5:7具有增效作用，其中配比为7:1时增效作用最明显。
实施例10、田间药效试验
试验田在江苏省宜兴市省现代农业产业园的番茄温室大棚内，前茬为辣椒，试验地土壤肥沃，沙壤质褐土，pH值7.0，有机质质量含量为2.5％。番茄灰霉病常年发生。各处理药剂分别为空白对照组、对照1(2％2,4-二乙酰基间苯三酚悬浮剂)、对照2(45％异菌脲悬浮剂)、实施例1(12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例2(10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例3(8.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例4(10.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)和实施例5(12.0％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例6(14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例7(14.01％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)、实施例8(16％2,4-二乙酰基间苯三酚·异菌脲微胶囊剂)。施药时间为2019年7月14日，在番茄结果期灰霉病发生初期施药，东西两端各设4行的保护行，所有试验小区的栽培管理条件一致，能满足试验要求。每个小区面积30m2，3次重复，采用随机区组排列。药后14d进行调查统计，每小区采用五点取样法，每点调查2株，每株自上至下调查10片叶，调查各级病叶片数量，并计算各处理对番茄灰霉病的防控效果。各制剂对番茄灰霉病的防控效果见表2。
表2各制剂对番茄灰霉病的防控效果(14d)
各处理 防效效果(％)
对照组 /
2％2,4-二乙酰基间苯三酚悬浮剂 55.27±1.55
45％异菌脲悬浮剂 100
实施例1 97.48±2.07
实施例2 92.56±1.84
实施例3 79.42±2.53
实施例4 83.54±1.05
实施例5 87.54±0.97
实施例6 92.57±0.54
实施例7 93.86±1.02
实施例8 96.55±1.26

Claims (3)

1.一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，包括有效成分、磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂，其特征在于：所述杀菌制剂的有效成分包括2,4-二乙酰基间苯三酚、异菌脲，其中，2,4-二乙酰基间苯三酚占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14%，异菌脲占所述杀菌制剂总质量的质量百分比为0.1～14%，其余是磺酰化壳聚糖囊壁材料、助剂。
2.根据权利要求1所述的一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，其特征在于：所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的质量配比为7:5、7:3、7:1、3:7或5:7。
3.根据权利要求1所述的一种防治番茄灰霉病的杀菌制剂，其特征在于：所述杀菌制剂中有效成分2,4-二乙酰基间苯三酚与异菌脲的最佳配比为7:1。
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