CN110551174B - 氨基酸和氨甲环酸修饰的二酮哌嗪,其制备,活性和应用 - Google Patents

氨基酸和氨甲环酸修饰的二酮哌嗪,其制备,活性和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了下面结构的3R‑(吲哚‑3‑甲基)‑6R‑[4‑(AA‑氨甲环酰氨基正丁基)]‑2,5‑二酮哌嗪(式中AA为L‑Met残基、L‑Pro残基、L‑Trp残基、L‑Tyr残基)。公开了它们的抗肿瘤转移兼抗炎活性,因而本发明公开了它们在制备抗肿瘤转移兼抗炎药物中的应用。
Figure DDA0001683465090000011

Description

氨基酸和氨甲环酸修饰的二酮哌嗪,其制备,活性和应用
技术领域
本发明涉及3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪。涉及它们的制备方法,涉及它们的抗肿瘤转移兼抗炎作用,涉及它们在制备抗肿瘤转移兼抗炎药物中的应用。本发明属于生物医药领域。
技术背景
近年来多项流行病学及相关研究结果，已证实多种肿瘤的发生及发展与炎症有关，占所有肿瘤的15％左右，通过抑制慢性炎症，可降低癌前病变患者的癌症发病和(或)复发的风险，此前，发明人曾公开S,S-,R,R-,R,S-和S,R-四种构型的的二酮哌嗪在0.5μM浓度可抑制HCCLM3(高转移人肝癌细胞)迁移和侵袭。后来发明人又公开R,R-构型的二酮哌嗪在最低有效剂量为5μmol/kg/天的剂量时可抑制C57BL/6小鼠的肿瘤向肺转移。为了降低最低有效剂量，发明人对R,R-构型的二酮哌嗪的丁氨基展开了各种修饰。经过3年探索，发现用L-Met、L-Pro、L-Trp、L-Tyr酰化R,R-构型的二酮哌嗪的4-氨基正丁基可使抗肿瘤转移兼抗炎的最低有效剂量降至0.5μmol/kg/天。最低有效剂量降低10倍表明，这种结构修饰有突出的技术效果。根据这些发现，发明人提出了本发明。
发明内容
本发明的第一个内容是提供下面结构的3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(式中AA为L-Met残基、L-Pro残基、L-Trp残基、L-Tyr残基)。
Figure GDA0002974643620000011
本发明的第二个内容是提供3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(式中AA为L-Met残基、L-Pro残基、L-Trp残基、L-Tyr残基)的制备方法,该方法包括：
(1)D-Trp-OBzl与Boc-D-Lys(Cbz)反应得到Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl；
(2)冰浴下在氯化氢的乙酸乙酯溶液中(4M)Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl脱除Boc得到D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl；
(3)D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl用乙酸乙酯溶解，得到的溶液用浓度为5％的碳酸氢钠水溶液洗后，环合生成3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪；
(4)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(1)经催化氢解脱除苄氧羰基得到3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(2)；
(5)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(2)与Boc-氨甲环酸反应生成3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(3)；
(6)冰浴下在氯化氢的乙酸乙酯溶液中(4M)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(3)脱除Boc得3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)；
(7)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)与Boc-L-AA缩合得化合物3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5a-d)；
(8)冰浴下在氯化氢的乙酸乙酯溶液中(4M)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5a-d)脱除Boc得3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(6a-d)。
本发明的第三个内容是评价3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(TXA(AA)-氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(式中AA为L-Met残基、L-Pro残基、L-Trp残基、L-Tyr残基)抑制C57BL/6小鼠抗肺癌转移活性及对ICR小鼠抗炎活性。
附图说明
图1. 3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪的合成路线(式中AA为L-Met残基、L-Pro残基、L-Trp残基、L-Tyr残基).5a,6a中AA为L-Met残基；5b,6b中AA为L-Pro残基；5c,6c中AA为L-Trp残基；5d,6d中AA为L-Tyr残基；i)N,N-二环己基碳二亚胺(DCC),N-羟基苯并三氮唑(HOBt),N-甲基吗啉(DMM),四氢呋喃(THF)；ii)4N氯化氢-乙酸乙酯试剂；iii)乙酸乙酯,5％碳酸氢钠；iv)甲醇,N,N-二甲基甲酰胺(DMF),Pd/C,H2；v)N,N-二环己基碳二亚胺(DCC),N-羟基苯并三氮唑(HOBt),N-甲基吗啉(DMM),无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
实施例1制备Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl
将1.930g(5mmol)Boc-D-Lys(Cbz)混悬于100mL干燥四氢呋喃(THF)，在冰浴下依次向悬浮液中加入0.747g(5.5mmol)的1-羟基苯并三氮唑(HOBt)及1.243g(6.0mmol)的N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)，然后搅拌30分钟。之后加入1.620g(5.2mmol)D-Trp-OBzl·HCl。反应混合物逐滴加入N-甲基吗啉(NMM)调节pH值至8-9。反应混合物先在冰浴下搅拌1h，然后在室温下搅拌反应12h。反应混合物过滤，滤液减压浓缩，残余物用150mL的乙酸乙酯溶解。分别用饱和5％硫酸氢钾水溶液、饱和氯化钠水溶液各萃洗三次。乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥12小时。过滤，减压浓缩至干。得到黄色糖浆经硅胶柱层析分离纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:3～1:1)，得到2.423(73.2％)g标题化合物，为粉红色固体粉末。ESI-MS(m/e):657[M+H]+。
实施例2制备D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl
冰浴搅拌下1.9g(2.5mmol)Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl与40mL氯化氢的乙酸乙酯(4M)缓慢混合。得到的溶液在冰浴中搅拌3小时。之后，反应混合物减压抽干，残留物用干燥乙酸乙酯充分搅匀后抽干，重复三次。残留物再用无水乙醚磨洗三遍得到1.7g(93％)标题化合物，为深红色固体粉末。ESI-MS(m/e):557[M+H]+。
实施例3制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(1)
将1.7g(3.1mmol)D-Lys(Cbz)-D-Trp-Obzl用100mL乙酸乙酯溶解。得到的溶液用浓度为5％的碳酸氢钠水溶液洗三次，乙酸乙酯层减压浓缩并于室温搅拌12小时，待白色固体充分析出后过滤得0.76g(46.5％)标题化合物。ESI-MS(m/e):449[M+H]+。
实施例4制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(2)
于0.900g(2mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(1)加入10mL甲醇与10mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解，加入90mg Pd/C至上述溶液中，抽尽茄瓶中的空气，通入氢气室温搅拌反应12小时。滤去Pd/C，滤液减压浓缩至干得到白色固体粉末0.600(95％)标题化合物。ESI-MS(m/e):315[M+H]+。
实施例5制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(3)
采用实施例1的方法从0.668g(2.6mmol)Boc-氨甲环酸和0.813g(2.6mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪(2)得到0.77g(53.8％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI-MS(m/e):554[M+H]+；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.88(s,1H),8.05(s,1H),7.94(s,1H),7.58(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(t,J＝4.8Hz,1H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.03(s,1H),7.02(m,1H),6.93(t,J＝7.4Hz,1H),6.81(t,J＝5.6Hz,1H),4.11(m,1H),3.50(m,1H),3.25(dd,J1＝4.0Hz,J2＝14.2Hz,1H),3.00(dd,J1＝4.0Hz,J2＝14.4Hz,1H),2.76(m,4H),1.97(m,1H),1.68(m,4H),1.37(s,9H),1.27(m,3H),0.96(m,3H),0.83(m,2H),0.58(m,3H)。
实施例6制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)
按照实施例2的方法，从0.75g(1.35mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(3)得到0.65g(98.3％)标题化合物，为淡黄色固体。ESI-MS(m/e):454；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.94(s,1H),8.04(s,1H),8.02(br,3H),7.94(s,1H),7.58(m,2H),7.31(d,J＝8.0Hz,1H),7.04(s,1H),7.03(m,1H),6.93(t,J＝7.2Hz,1H),4.11(m,1H),3.50(m,1H),3.24(dd,J1＝3.4Hz,J2＝14.2Hz,1H),3.02(dd,J1＝3.4Hz,J2＝14.4Hz,1H),2.76(m,2H),2.63(m,2H),2.02(m,1H),1.76(m,4H),1.53(m,1H),1.32(m,2H),0.97(m,5H),0.60(m,3H)。
实施例7制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Met-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5a)
按照实施例1的方法，从0.55g(2.2mmol)Boc-Met和0.99g(2mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)得到0.50g(36.1％)标题化合物，为淡黄色固体粉末。ESI-MS(m/e):685[M+H]+；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.91(s,1H),8.05(s,1H),7.95(s,1H),7.78(m,1H),7.55(m,2H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.03(s,1H),7.02(m,1H),6.92(m,2H),4.10(m,1H),3.83(m,1H),3.49(m,1H),3.24(dd,J1＝4.4Hz,J2＝14.4Hz,1H),3.00(dd,J1＝4.1Hz,J2＝14.4Hz,1H),2.89(m,2H),2.75(m,2H),2.42(m,2H),2.02(s,3H),1.99(m,1H),1.73(m,6H),1.37(s,9H),1.29(m,3H),0.95(m,3H),0.84(m,2H),0.58(m,3H)。
实施例8制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Pro-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5b)
按照实施例1的方法，从0.48g(2.2mmol)Boc-Pro和0.99g(2.0mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)得到0.50g(38.0％)标题化合物，为淡黄色固体粉末。ESI-MS(m/e):651[M+H]+；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.88(s,1H),8.04(s,1H),7.94(s,1H),7.83(m,1H),7.58(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(m,1H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.04(s,1H),7.02(m,1H),6.93(m,1H),4.11(m,1H),4.02(m,1H),3.50(m,1H),3.27(m,2H),3.24(dd,J1＝3.9Hz,J2＝14.3Hz,1H),3.01(dd,J1＝3.9Hz,J2＝14.3Hz,1H),2.87(m,2H),2.75(m,2H),2.02(m,2H),1.72(m,7H),1.40(m,3H),1.33(s,9H),0.96(m,3H),0.85(m,2H),0.60(m,3H)。
实施例9制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Trp-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5c)
按照实施例1的方法，从0.69g(2.2mmol)Boc-Trp和1.00g(2.1mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)得到0.96g(63.4％)标题化合物，为淡黄色固体粉末。ESI-MS(m/e):740[M+H]+；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.89(s,1H),10.82(m,1H),8.03(s,1H),7.93(s,1H),7.80(m,1H),7.58(m,2H),7.49(m,1H),7.31(m,2H),7.04(m,6H),6.73(m,1H),4.11(m,2H),3.50(m,1H),3.25(dd,J1＝4.0Hz,J2＝14.4Hz,1H),3.18(m,1H),3.02(m,2H),2.90(m,2H),2.75(m,2H),1.97(m,1H),1.66(m,4H),1.32(s,9H),1.20(m,3H),0.98(m,3H),0.83(m,2H),0.61(m,3H)。
实施例10制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Tyr-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5d)
按照实施例1的方法，从0.57g(2.2mmol)Boc-Tyr和0.90g(2.0mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(4)得到0.62g(43.0％)标题化合物，为淡黄色固体粉末。ESI-MS(m/e):717[M+H]+；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.89(s,1H),9.18(s,1H),8.05(s,1H),7.94(s,1H),7.78(m,1H),7.57(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(m,1H),7.29(d,J＝7.8Hz.1H),7.04(s,1H),7.02(m,3H),6.92(m,1H),6.79(d,J＝8.5Hz,1H),6.64(d,J＝8.1Hz,2H),·4.11(m,1H),4.02(m.1H),3.50(m,1H),3.24(dd,J1＝4.1Hz,J2＝14.4Hz,1H),3.01(dd,J1＝4.4Hz,J2＝14.4Hz,1H),2.88(m,2H),2.74(m,4H),1.96(m,1H),1.66(m,4H),1.32(s,9H),1.26(m,3H),0.96(m,3H),0.80(m,2H),0.59(m,3H)。
实施例11制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Met-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(6a)
按照实施例2的方法，从0.11g(0.16mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Met-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5a)得到0.09g(90.2％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI-MS(m/e):585[M+H]+；
Figure GDA0002974643620000051
3220,3056,2922,2856,1656,1548,1452,1363,1326,1256,1231,1151,1095,1010,926,898,743；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.94(s,1H),8.64(m,1H),8.35(m,3H),8.05(s,1H),7.94(s,1H),7.57(m,2H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.04(s,1H),7.02(m,1H),6.92(m,1H),4.10(m,1H),3.85(m,1H),3.49(m,1H),3.24(dd,J1＝3.8Hz,J2＝14.4Hz,1H),2.98(m,3H),2.74(m,2H),2.48(m,2H),2.05(s,3H),2.00(m,3H),1.72(m,4H),1.30(m,3H),0.94(m,5H),0.58(m,3H)。
实施例12制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Pro-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(6b)
按照实施例2的方法，从0.14g(0.26mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Pro-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5b)得到0.11g(88.5％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI-MS(m/e):551[M+H]+；
Figure GDA0002974643620000052
3214,3058,2926,2862,1659,1548,1451,1359,1324,1257,1092,1010,924,742；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.94(s,1H),9.98(m,1H),8.62(m,1H),8.49(m,1H),8.06(s,1H),7.94(s,1H),7.57(m,2H),7.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.04(s,1H),7.02(m,1H),6.92(m,1H),·4.28(m,1H),4.10(m,1H),3.49(m,1H),3.21(m,3H),2.99(m,3H),2.75(m,2H),2.29(m,1H),2.00(m,1H),1.87(m,2H),1.71(m,5H),1.31(m,3H),0.94(m,5H),0.57(m,3H)。
实施例13制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Trp-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(6c)
按照实施例2的方法，从0.105g(0.14mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Trp-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5c)得到0.090g(93.4％)标题化合物，为淡黄色粉末。ESI-MS(m/e):640[M+H]+；
Figure GDA0002974643620000061
3230,3020,2926,2856,1656,1550,1457,1333,1259,1096,1011,929,743,613；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝11.10(s,1H),10.98(m,1H),8.53(m,1H),8.31(s,1H),8.07(s,1H),7.95(s,1H),7.66(d,J＝7.7Hz,1H),7.58(m,2H),7.34(d,J＝14.90Hz,1H),7.31(d,J＝14.90Hz,1H),7.21(m,1H),7.01(m,5H),4.10(m,1H),3.97(m,1H),3.49(m,1H),3.24(dd,J1＝3.9Hz,J2＝14.5Hz,1H),3.18(m,2H),3.01(dd,J1＝4.2Hz,J2＝14.5Hz,1H),2.93(m,1H),2.78(m,2H),1.95(m,1H),1.59(m,4H),1.23(m,3H),0.94(m,3H),0.74(m,2H),0.58(m,3H)。
实施例14制备3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Tyr-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(6d)
按照实施例2的方法，从0.203g(0.18mmol)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-Tyr-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪(5d)得到0.163g(88.2％)标题化合物，为白色粉末。ESI-MS(m/e):617[M+H]+1；
Figure GDA0002974643620000062
3210,3062,2926,2856,1658,1547,1515,1451,1326,1260,1233,1103,1010,990,896,744；HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ/ppm＝10.93(s,1H),9.39(br,1H),8.39(m,1H),8.25(s,3H),8.04(s,1H),7.94(s,1H),7.56(m,2H),7.31(d,J＝7.8Hz,1H),7.03(s,1H),7.01(m,3H),6.93(m,1H),6.71(m,2H),·4.11(m,1H),3.94(m.1H),3.50(m,1H),3.24(dd,J1＝4.0Hz,J2＝14.4Hz,1H),3.01(m,3H),2.75(m,4H),1.96(m,1H),1.61(m,4H),1.26(m,3H),0.98(m,3H),0.76(m,2H),0.60(m,3H)。
实验例1评价化合物6a-d的抗肿瘤活性
本测定模型用Lewis小鼠肺癌细胞(LLC,购自ATCC)接种，选用DMEM培养基(含10％经灭活的胎牛血清,1×105U/L青霉素和100mg/L链霉素),按照贴壁细胞培养方法每两天传代一次，富集细胞。待细胞生长状态良好并处于对数生长期时消化细胞，用生理盐水调整细胞密度至1×107个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。取近交系C57BL/6雄性小鼠(SPF级,体重20±2g)，左手固定小鼠。用75％乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌注射器往小鼠腋部皮下注射LLC肿瘤细胞悬液，每只小鼠注射0.2mL。小鼠接种10天后，长出直径约4-5mm的肿瘤即为瘤源。接种10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠乙醚麻醉，脱颈椎处死。用75％乙醇浸泡10min，消毒，在超净工作台上剥离瘤体。选择生长良好的肿瘤组织在无菌平皿中剪碎，置于玻璃制造的组织匀浆器内。按瘤块重比生理盐水体积为1比3(g比mL)的比例加温度为4℃的生理盐水，轻轻研磨制成细胞悬液。细胞悬液过200目细胞筛制单细胞悬液。用生理盐水调单细胞悬液的细胞密度至1.5×107个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。左手固定近交系C57BL/6雄性小鼠，用75％的乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌注射器于小鼠腋部皮下注射瘤细胞悬液，每只注射0.2mL。接种10天后小鼠长出直径4-5mm的肿瘤，按测得的肿瘤体积将接种小鼠随机分组。每组12只小鼠。接种肿瘤的第11天小鼠或腹腔注射公认的抗肿瘤转移肽RGDS的生理盐水溶液(剂量为20μmol/kg/天)或口服化合物6a-d的生理盐水溶液(剂量为0.5μmol/kg/天)或口服生理盐水(剂量为10mL/kg/天)，每天给1次药，连续给药12天，每隔两天测量并记录肿瘤体积。最后一次给药的次日测量瘤体积，乙醚麻醉脱颈椎处死，取小鼠的肿瘤称重，取小鼠的肺并计算肿瘤肺部转移的瘤节数。用t检验对数据进行统计分析。结果见表1。在0.5μmol/kg/天(即最低有效剂量降低10倍)剂量下化合物6a-d不仅有效地抑制肿瘤肺转移，而且活性与20μmol/kg/天剂量的RGDS没有显著性差异。这些数据表明，本发明有显著的技术效果。
表1化合物6a-d的抗肿瘤转移活性
Figure GDA0002974643620000071
a)与生理盐水比p<0.01,与RGDS比p>0.05；b)与生理盐水比p<0.01,与RGDS比p<0.05；n＝12
实验例2评价化合物6a的抗肿瘤活性剂量依赖关系
本测定模型用Lewis小鼠肺癌细胞(LLC,购自ATCC)接种，选用DMEM培养基(含10％经灭活的胎牛血清,1×105U/L青霉素和100mg/L链霉素),按照贴壁细胞培养方法每两天传代一次，富集细胞。待细胞生长状态良好并处于对数生长期时消化细胞，用生理盐水调整细胞密度至1×107个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。取近交系C57BL/6雄性小鼠(SPF级,体重20±2g)，左手固定小鼠。用75％乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌注射器往小鼠腋部皮下注射LLC肿瘤细胞悬液，每只小鼠注射0.2mL。小鼠接种10天后，长出直径约4-5mm的肿瘤即为瘤源。接种10天的Lewis肺癌荷瘤小鼠乙醚麻醉，脱颈椎处死。用75％乙醇浸泡10min，消毒，在超净工作台上剥离瘤体。选择生长良好的肿瘤组织在无菌平皿中剪碎，置于玻璃制造的组织匀浆器内。按瘤块重比生理盐水体积为1比3(g比mL)的比例加温度为4℃的生理盐水，轻轻研磨制成细胞悬液。细胞悬液过200目细胞筛制单细胞悬液。用生理盐水调单细胞悬液的细胞密度至1.5×107个/mL。胎盘蓝染色，使活细胞计数>95％。左手固定近交系C57BL/6雄性小鼠，用75％的乙醇对小鼠右前肢腋窝皮肤消毒。右手持1mL无菌注射器于小鼠腋部皮下注射瘤细胞悬液，每只注射0.2mL。接种10天后小鼠长出直径4-5mm的肿瘤，按测得的肿瘤体积将接种小鼠随机分组。每组12只小鼠。接种肿瘤的第11天小鼠或腹腔注射公认的抗肿瘤转移肽RGDS的生理盐水溶液(剂量为20μmol/kg/天)或口服化合物6a的生理盐水溶液(剂量为0.5μmol/kg/天、0.05μmol/kg/天、0.005μmol/kg/天)或口服生理盐水(剂量为10mL/kg/天)，每天给1次药，连续给药12天，每隔两天测量并记录肿瘤体积。最后一次给药的次日测量瘤体积，乙醚麻醉脱颈椎处死，取小鼠的肿瘤称重，取小鼠的肺并计算肿瘤肺部转移的瘤节数。用t检验对数据进行统计分析。结果见表2。在0.5μmol/kg/天剂量下化合物6a不仅有效地抑制肿瘤肺转移，而且活性与20μmol/kg/天剂量的RGDS没有显著性差异。在剂量降低10倍后，即0.05μmol/kg/天剂量下化合物6a仍有效抑制肿瘤肺转移。这些数据表明，本发明有显著的技术效果。
表2化合物6a的抗肿瘤转移活性剂量依赖关系
Figure GDA0002974643620000081
a)与生理盐水比p<0.01,与RGDS比p>0.05；与剂量为0.05μmol/kg/天的6a比p<0.05；b)与生理盐水比p<0.01,与剂量为0.005μmol/kg/天的6a比p<0.05；c)与生理盐水比p>0.05；n＝10。
实验例3评价化合物6a-d的抗炎活性
1)化合物6a-d用生理盐水溶解；阿司匹林用生理盐水溶解作为阳性对照；生理盐水作为阴性对照。
2)化合物6a-d的口服剂量为0.5μmol/kg，生理盐水的口服剂量为0.2mL/20g，阿司匹林口服剂量为1.11mmol/kg。均为每日单次给药。
3)实验动物为ICR雄性小鼠(清洁级)，体重20±2g，每组12只小鼠。
4)ICR雄性小鼠静息一天后，随机分组，每组12只。采用序贯法按照药物相应剂量对各组小鼠灌胃给药。给药30分钟后按照给药顺序用移液枪在小鼠右耳外廓均匀涂抹30μL二甲苯，使造模完成。涂完二甲苯后，可观察到小鼠右耳变为红色，然后变白变厚。造模2小时后将小鼠摘眼球取血并断颈处死，将小鼠左右两耳沿耳根剪下，让两耳重合叠放，用直径为7mm的电动打孔器在两耳的相同位置打孔，取圆形耳片，分别称取重量，按以下公式计算耳肿胀度：
耳肿胀度＝右耳原片重量-左耳原片重量
实验数据采用t检验和方差分析。结果见表3。由表3可以看出，在0.5μmol/kg口服剂量下，化合物6a-d具有显著的抗炎活性。本发明有显著的技术效果。
表3化合物6a-d的抗炎活性
Figure GDA0002974643620000091
a)与生理盐水组比p<0.01；n＝12。

Claims (3)

1.下面结构的3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪,
Figure FDA0002950907010000011
式中AA为L-Met残基、L-Pro残基、L-Trp残基或L-Tyr残基。
2.权利要求1所述的3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪的制备方法，该方法由以下步骤构成：
(1)D-Trp-OBzl与Boc-D-Lys(Cbz)反应得到Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl；
(2)冰浴下在氯化氢的4M乙酸乙酯溶液中Boc-D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl脱除Boc得到D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl；
(3)D-Lys(Cbz)-D-Trp-OBzl用乙酸乙酯溶解，得到的溶液用浓度为5％的碳酸氢钠水溶液洗后，环合生成3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪；
(4)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-苄氧羰基氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪经催化氢解脱除苄氧羰基得到3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪；
(5)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-(4-氨基正丁基)-2,5-二酮哌嗪与Boc-氨甲环酸反应生成3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪；
(6)冰浴下在氯化氢的4M乙酸乙酯溶液中3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪脱除Boc得3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪；
(7)3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(氨甲环酸氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪与Boc-L-AA缩合得化合物3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪；
(8)冰浴下在氯化氢的4M乙酸乙酯溶液中，3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(Boc-AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪脱除Boc得3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪。
3.权利要求1所述的3R-(吲哚-3-甲基)-6R-[4-(AA-氨甲环酰氨基正丁基)]-2,5-二酮哌嗪在制备抗肿瘤转移兼抗炎药物中的应用。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105503833A (zh) * 2014-10-20 2016-04-20 首都医科大学 吲哚哌嗪-二酮,其制备及治疗作用
CN106349148A (zh) * 2015-07-13 2017-01-25 首都医科大学 具有抗肿瘤转移和抗炎活性的新型吲哚类化合物，其合成和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105503833A (zh) * 2014-10-20 2016-04-20 首都医科大学 吲哚哌嗪-二酮,其制备及治疗作用
CN106349148A (zh) * 2015-07-13 2017-01-25 首都医科大学 具有抗肿瘤转移和抗炎活性的新型吲哚类化合物，其合成和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Comparative Evaluation of Some New Tranexamic Acid Derivatives and Their Copper (II) Complexes for Antitumor, Analgesic, Bactericidal and Fungicidal Activities;M. FAYYAZ KHAN等;《Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences》;20020131;第15卷(第1期);第55-62页 *
寡肽转运蛋白PepT2(1-134)的原核表达与氨甲环酸药物分子的修饰;王朋;《中国优秀硕士学位论文全文数据库》;20130115;A006-98 *

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