CN110538140A - 葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶、制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括50‑150mg的葛根素、体积比为8‑20％的丙二醇、用量比为15‑30％的泊洛沙姆407、用量比为1‑15％的泊洛沙姆188、余量的水，其中，用量比为单位为g/mL的质量体积比。一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝的制备方法及所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在制备治疗低压缺氧脑损伤鼻用药物中的应用。本发明具有治疗低压缺氧脑损伤的有益效果。

Description

葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶、制备方法及应用
技术领域
本发明涉及葛根素药物技术领域。更具体地说，本发明涉及葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶、制备方法及应用。
背景技术
原位凝胶是一种能基于外界物理因素(如pH、温度、离子强度等)发生由液态到凝胶态转变的生物黏附性制剂，即以溶液状态给药后立即在用药部位发生相转变，形成的非化学交联的固体或半固体制剂，是一种对环境因素敏感的新型给药载体，原位凝胶使用方便，具有很好的组织相容性和生物粘附力，不会让人体感到不适，且生物利用度高，能在局部滞留较长时间发挥药效。
葛根是豆科植物的块根，葛根素(Puerarin)是从中药葛根中分离的异黄酮类化合物，具有扩张血管、降血压、抗炎、抗氧化的药理作用，常规主要用于抗心肌缺血和脑缺血的治疗，其主要剂型有注射剂和片剂，临床主要用于治疗心脑血管疾病，但是片剂口服进入人体后生物利用度较低，不利于发挥药效，而注射剂则会使人体感觉到较大的不适。
由于葛根素水溶性差、渗透性差，且有溶血副作用，如何将葛根素制备成鼻用温度敏感型原位凝胶，并且考察其对低压缺氧所致脑损伤的治疗作用是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶。
一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶制备方法及所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在制备治疗低压缺氧脑损伤鼻用药物中的应用。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括50-150mg的葛根素、体积比为10-14％的丙二醇、用量比为20-26％的泊洛沙姆407、用量比为1-7％的泊洛沙姆188、余量的水，其中，用量比为单位为g/mL的质量体积比。
优选的是，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括150mg的葛根素、体积比为10％的丙二醇、用量比为23％的泊洛沙姆407、用量比为4％的泊洛沙姆188、余量的水。
优选的是，所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，还包括1mg的薄荷脑。
一种葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶制备方法，包括以下步骤：
S1、称取葛根素并向其中加入丙二醇溶解葛根素，得葛根素丙二醇溶液；
S2、采用冷凝法配置包含泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的空白凝胶；
S3、将空白凝胶加入至葛根素丙二醇溶液中定容后涡旋混匀。
优选的是，步骤S2具体为：称取泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，并均匀撒在水上在磁力搅拌下分散均匀，然后置于4℃冰箱冷藏至充分溶胀并溶解，得空白凝胶。
优选的是，步骤S1具体为称取葛根素、薄荷脑混合后加入丙二醇溶解，得葛根素丙二醇溶液。
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的应用，所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在制备治疗低压缺氧脑损伤鼻用药物中的应用。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、建立HPLC方法测定葛根素含量，采用大鼠鼻腔灌流模型，判定葛根素透鼻黏膜吸收效率为7.1×10-3，即较易透过鼻腔吸收。
第二、以丙二醇为葛根素溶剂，有效解决葛根素水溶性差的问题，并促进葛根素渗透性，通过优化处方，获得黏度在低温条件下较小，为流动液体状态，方便给药到鼻腔内部，相转变之后凝胶体系黏度急剧增大，可延长药物在鼻腔的滞留时间的葛根素温度敏感型原位凝胶(胶凝温度为34.3℃、胶凝时间为2分54秒)，且进一步通过剪切模式下模量和粘度变化测试可知该原位凝胶存在剪切变稀现象，表明其通针性好，方便鼻腔给药。
第三、薄荷脑由薄荷的叶和茎提取，适量薄荷脑的加入在不影响原位凝胶胶凝温度和胶凝时间的基础上，能够改善葛根素的透皮吸收，即提高葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的生物利用率。
第四、通过血象分析确定葛根素温度敏感型原位凝胶通过鼻腔给药方式不会对小鼠血液循环造成影响，进一步建立缺氧大鼠模型确定葛根素温度敏感型原位凝胶具有较好的透鼻粘膜特性及抗缺氧作用，可用于治疗低压缺氧性脑损伤。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的葛根素透鼻黏膜吸收效率图；
图2为本发明的其中一种技术方案中所述空白凝胶室温下的状态图；
图3为本发明的其中一种技术方案中所述空白凝胶室温下的状态图；
图4为本发明的其中一种技术方案所述葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在10～40℃温度范围内模量和黏度变化的结构示意图；
图5为本发明的其中一种技术方案中所述葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在0.1～100rad/s剪切模式下模量和黏度变化的结构示意图；
图6为Qn-t释放曲线；
图7为小鼠静脉血红细胞计数图；
图8为小鼠静脉血红蛋白含量图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实验1>
以泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、葛根素用量为考察因素，以胶凝温度和胶凝时间为考察指标，通过正交实验进行处方筛选，正交实验因素水平如下表1所示：
表1正交实验因素水平
A(％) B(％) C(％)
水平 泊洛沙姆407(w/v) 泊洛沙姆188(w/v) 丙二醇(v/v)
1 20 1 10
2 23 4 12
3 26 7 14
按照如下表2试验号1-9所示进行9个制备实验，每个制备实验的制备方法为：
S1、称取葛根素并向其中加入丙二醇溶解葛根素，得葛根素丙二醇溶液；
S2、称取泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，并均匀撒在水上在磁力搅拌下分散均匀，然后置于4℃冰箱冷藏至充分溶胀并溶解，得空白凝胶；
S3、将空白凝胶加入至葛根素丙二醇溶液中定容后涡旋混匀。
<实验2>
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，其特征在于，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括150mg的葛根素、体积比为10％的丙二醇、用量比为23％的泊洛沙姆407、用量比为4％的泊洛沙姆188、余量的水。
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取葛根素并向其中加入丙二醇溶解葛根素，得葛根素丙二醇溶液；
S2、称取泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，并均匀撒在水上在磁力搅拌下分散均匀，然后置于4℃冰箱冷藏至充分溶胀并溶解，得空白凝胶；
S3、将空白凝胶加入至葛根素丙二醇溶液中定容后涡旋混匀。
<实验3>
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，其特征在于，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括150mg的葛根素、1mg的薄荷脑、体积比为10％的丙二醇、用量比为23％的泊洛沙姆407、用量比为4％的泊洛沙姆188、余量的水。
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取葛根素、薄荷脑混合后加入丙二醇溶解，得葛根素丙二醇溶液；
S2、称取泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，并均匀撒在水上在磁力搅拌下分散均匀，然后置于4℃冰箱冷藏至充分溶胀并溶解，得空白凝胶；
S3、将空白凝胶加入至葛根素丙二醇溶液中定容后涡旋混匀。
检测实验
1：葛根素含量测定方法的建立
1.1色谱条件
Agilent C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；葛根素流动相甲醇-水(40:60)；葛胺酮流动相甲醇-0.01辛烷磺酸钠(40:60)；7-(6-溴己基)-葛根素流动相(60:40)；检测波长250nm，流速1.0mL/min，进样量10μl，柱温30℃。
1.2线性范围考察
称取葛根素8.50mg，置于10mL容量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得0.85mg/mL母液，移液管分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1、2mL母液，稀释成浓度为17.0、34.0、51.0、68.0、85.0、170.0μg/mL的对照品溶液。
按1.1项下色谱条件进行测定，以葛根素质量浓度(x)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标进行回归，标准曲线方程为y＝36044x-80.084(r＝0.9997)，表明葛根素在17.00-170.00μg/mL与峰面积线性关系良好。
2：大鼠在体鼻腔灌流实验
2.1鼻腔灌流液的配制
称取葛根素2mg，500μl甲醇溶解，加入9.5mL生理盐水配制成200μg/mL的鼻腔灌流液，平行测定3次。
2.2鼻腔灌流
选择质量200±20g的SD雄性大鼠，腹腔注射水合氯醛麻醉，取仰卧位，固定四肢于鼠板上进行手术，切开颈部皮肤组织暴露气管和食管。气管开小口，切口后部插入聚乙烯管，以供大鼠正常呼吸。为防止聚乙烯管脱落，用手术分缝合线将聚乙烯管与气管固定在一起打死结。继续分离食管，缝合线将暴露部分食管上部结扎，防止灌流液从切口后部流入胃肠道，影响实验结果。于结扎处下方开口，切口下方插入聚乙烯管，通过食道前部到达鼻腔底部，插入食管的聚乙烯管另一端与恒流泵硅胶管相连，硅胶管另一端插入灌流液，依靠恒流泵使灌流液通过鼻腔循环，缝合线结扎固定。
打开恒流泵，首先用生理盐水循环整个通路，观察通路是否有漏液情况，排空生理盐水。取10mL鼻腔灌流液于量筒中，插入硅胶管开启恒流泵，第一滴灌流液从鼻腔流出开始计时，分别于0、10、20、30、45、60、90、120min各取样0.2mL，后补加循环液(鼻腔灌流液)0.2mL，每个样品在4000r·min-1的转速下分别离心10min，吸取上清液，得每个时间的待检测样品，测定各时间待检测样品的剩余药物浓度Cn，循环死体积为V0＝
(7-V1)。剩余药量Qn采用体积校正法计算。
其中，Qn为第n个时间点的剩余药量(μg)，(Vn+V0)为第n个时间循环液的实际体积(mL)，Cn为第n个取样点测得的药物质量浓度(μg/mL)，C0为补加的循环药液的质量浓度(μg/mL)。
通过不同时间点的剩余药量Qn计算出各时间点剩余药量的百分率X，其中，X＝Qn/Q0；
取对数后与相对应时间t进行线性回归lnX＝-Kt，回归直线的斜率即为吸收速度常数K，K的大小反应葛根素鼻黏膜吸收的速率。
结果具体如图1所示，显示葛根素透鼻黏膜吸收速率常数为7.1×10-3，即葛根素较易通过鼻黏膜吸收。
3：胶凝时间和胶凝温度检测
3.1、依据试验号1-9制备的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶为样本，采用试管倾斜法测定胶凝温度和胶凝时间，具体为：取5mL葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶于10mL离心管中，开启水浴锅，温度以1℃/min升高至40℃，试管液面始终低于水浴锅液面，每隔15s倾斜试管45℃，观察凝胶是否流动，凝胶凝固后将温度传感器插入凝胶内部记录胶凝温度，凝胶由溶液状态转变为半固体状态的时间记为胶凝时间，结果具体如下表2-4所示：
表2胶凝温度正交实验结果
表3胶凝温度正交实验结果方差分析表
方差来源 SS f MS F P
A 95.55 2 47.77 84.14 0.012
B 26.95 2 13.47 23.73 0.040
C 0.44 2 0.22 0.39 0.720
误差 1.14 2 0.57
通过方差分析可知：胶凝温度主要由A(泊洛沙姆407)和B(泊洛沙姆188)用量决定(P<0.05)，其中，泊洛沙姆407为主要影响因素。C(丙二醇)的加入对温敏凝胶胶凝温度基本无影响(P>0.05)。
表4胶凝时间正交实验结果
表5胶凝时间正交实验结果方差分析表
方差来源 SS f MS F P
A 51.62 2 25.81 87.72 0.011
B 12.51 2 6.26 21.27 0.045
C 5.52 2 2.76 9.39 0.096
误差 0.59 2 0.29
通过方差分析可知：胶凝时间主要由A(泊洛沙姆407)和B(泊洛沙姆188)用量决定(P<0.05)，C(丙二醇)对胶凝时间影响较小(P>0.05)。
由于鼻腔生理温度为34-35℃，鼻腔给药之后要尽可能快的由溶液转变为半固态，能够更好发挥缓控释优势，因此优选接近鼻腔温度34℃、胶凝时间短的温敏凝胶处方，具体如下：
根据胶凝温度筛选得到处方为A2B2C1(23％泊洛沙姆407、4％泊洛沙姆188、10％丙二醇)，本处方配制得到的空白温敏凝胶(未添加葛根素)室温下流动性较好，具体如图2所示；根据胶凝时间筛选得到处方为A2B1C1(23％泊洛沙姆407、1％泊洛沙姆188、10％丙二醇)，本处方配制得到的空白温敏凝胶(未添加葛根素)室温下流动性差，胶凝温度低，具体如图3所示，不符合室温下呈溶液状态，鼻腔温度34℃左右呈半固态的鼻腔温敏凝胶要求。因此，综合考虑胶凝温度和胶凝时间两种因素，最终确定处方为A2B2C1，即23％泊洛沙姆407、4％泊洛沙姆188和10％丙二醇组成的温敏凝胶。
3.2依据<实验2>和<实验3>制备的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶为样本，采用试管倾斜法测定胶凝温度和胶凝时间，其中，试管倾斜法具体如3.1记载，结果如下表6所示：
表6胶凝时间和胶凝温度检测结果
胶凝温度(℃) 胶凝时间(min)
实验2 34.3 2分54秒
实验3 34.5 2分56秒
由表6可知，实验2-3制备的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的胶凝温度符合鼻腔温度的要求，且胶凝时间较短。
4、透皮吸收试验
4.1、离体皮肤的制备
将SPF级健康雄性BALB/c小鼠脱臼处死，将腹部鼠皮剥下，去除鼠毛、皮下脂肪，用生理盐水洗净、浸泡后置于冰箱中冷藏备用；
4.2、实验方法
以<实验2>和<实验3>中步骤S1制备的葛根素丙二醇溶液作为供试药液；
将完整皮肤固定在上下池之间，在下池加入生理盐水，上池加入供试药液，恒速电磁搅拌，按照预定的时间(0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h)从下池取样1mL，并随即补充等量的生理盐水，用HPLC色谱测定样品浓度，并计算不同时间的累积渗透量；
根据不同时间的累积渗透量可知，实验3中步骤S1制备的葛根素丙二醇溶液在每个时间点的累积渗透量大于实验2中步骤S1制备的葛根素丙二醇溶液在对应时间点的累积渗透量，即薄荷脑的添加能够促进葛根素的透皮吸收。
5、流变学测定
使用安东帕高级旋转流变仪测定实验2制备的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶流变学性质，取适量葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶放置在旋转流变仪平板与锥体之间的空隙中，逐渐减小两者的距离，最终两者距离缩短为1mm，滤纸擦拭挤压出的凝胶溶液。设定应变率为0.5％，升温速度为每分钟上升1℃，考察温度10-40℃范围内测定葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的模量及黏度变化；设定剪切频率ω在0.1-100rad·s-1范围，测定34℃下载药凝胶的模量及黏度变化，具体如图4-5所示，其中：G”表损耗模量，G”大时，温敏凝胶呈现可自由流动的溶液状态；G’代表储能模量，较大时温敏凝胶呈现半固体状态，凝胶的储能模量越高，弹性形变能力越好，交联度升高，凝胶化学交联网络结构趋于完善。
由图4可知，随温度升高过程中，在27℃左右出现胶凝点G’＝G”，此时弹性模量与储能模量相等，凝胶出现相转变。在10-27℃过程中，G”>G’凝胶呈溶液状态；27℃以后G”和G’均有增大的趋势，且G’始终大于G”，此时凝胶为半固体状态。到达鼻腔温度34℃时，G’明显大于G”表明在鼻腔环境下，凝胶呈现稳定的半固体状态。即葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶黏度在低温条件下较小，为流动液体状态，方便给药到鼻腔内部，相转变之后凝胶体系黏度急剧增大，可延长药物在鼻腔的滞留时间。
由图5可知，在剪切模式34℃条件下，G’一直高于G”，说明鼻腔温度下凝胶固体性质始终强于液体，凝胶结构稳定，0.1～100rad/s剪切力作用下体系黏度随剪切力增加黏度下降，表明凝胶存在剪切变稀现象，表明其通针性好，方便鼻腔给药。
6、体外释放
6.1人工鼻液配制
称取氯化钠7.91g，氯化钾3.68g，氯化钙0.51g加1000ml去离子水超声溶解。
6.2透析袋预处理
选用截留分子量为7000Da的透析袋，将透析袋剪成6cm长的小段，浸在沸水中煮30min，取出后浸泡在50％乙醇溶液中，4℃保存备用。
6.3体外释放-透析袋法
采用透析袋体外实验方法，对实验2制备的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶体外释放特性进行考察。取葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶1ml，加入到处理好的表面积大小相同的透析袋中，两端用黑色缝合线缠紧，保证体外释放扩散面积相等，将透析袋置于装有50ml人工鼻液的离心管中，拧紧盖子，作为温敏凝胶组；
称取30mg葛根素，溶于1ml丙二醇中，同样加入到透析袋中缠紧置于人工鼻液中，作为对照组；
将温敏凝胶组和对照组置于恒温摇床，37℃，100rpm/min恒温振荡，分别于0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、20、24h取袋外介质1ml，同时补加相同体积人工鼻液，0.22μm滤膜过滤后，进HPLC含量测定，计算药物累积释放率。平行制备3份取平均值。
其中，Qn为累积释放率(％)；V为释放介质体积(ml)；Cn为第n各取样点测得的浓度(μg/ml)；Ci为第i个取样点测得的浓度(μg/ml)；V0为取样体积(ml)；A为加入凝胶的含药质量(μg)。以Qn对时间t作图，可得Qn-t释放曲线，具体如图6所示，具体为：
对照组(葛根素原料药)在6h左右释放完全，温敏凝胶组(葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶)在24h释药量达到80％以上，说明葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶具有缓释作用，延长药物鼻腔滞留时间，能够更好的发挥药效。
6.4释药方程拟合
体外释放曲线分别用零级、一级、Higuchi方程和Ritger-Peppas指数模型进行拟合，得出药物释放机制，利于释药分析，具体如下表6所示：
表6体外释放曲线拟合结果
释药动力学 方程 r
零级动力学 Q<sub>n</sub>＝3.2243t+25.826 0.8234
一级动力学 ln(100-Q<sub>n</sub>)＝0.0901t+4.4075 0.9724
Higuchi Q<sub>n</sub>＝19.807t<sup>1/2</sup>+1.7023 0.9527
Ritger-Peppas lnQ<sub>n</sub>＝0.602lnt+2.8129 0.9444
通过方程拟合发现葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶体外释放符合一级动力学方程，说明释放速率与药物浓度或药量成正比。
7、药效学试验
7.1血象分析
SPF级健康雄性BALB/c小鼠24只，随机分为正常组(A1)、生理盐水组(A2)、空白凝胶组(A3)、葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶组(为便于表述，即为图7-8中的葛根素组)(30mg/kg)(A4)，每组6只，其中：
正常组(A1)不作任何处理；
生理盐水组(A2)单侧鼻孔给药0.9％生理盐水20μl；
空白凝胶组(A3)单侧鼻孔给药空白水凝胶20μl；
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶组(A4)按照给药剂量每日单侧鼻孔给药20μl；
连续给药7天，最后一次给药1h后小鼠尾静脉取血。用刀片快速斜面划破小鼠尾静脉，出现血滴后快速用微量采血管吸取10μl，迅速注入提前准备好的稀释液中，轻轻摇匀，使血液均匀分散在稀释液中，避免凝血块出现。全自动血细胞分析仪检测红细胞(RedBlood Cell，RBC)计数、血红蛋白(Hemoglobin，HGB)含量，具体如图7、8所示：
小鼠尾静脉血象分析主要考察葛根素有无提高血液携氧能力，结果显示葛根素凝胶可以显著提高小鼠血液中红细胞计数(P<0.05)，血红蛋白含量也有所提高，且生理盐水和空白凝胶组与正常组相比无显著性差异，说明鼻腔给药方式和空白凝胶基质不会对小鼠血液循环造成影响。
7.2小鼠急性低压缺氧实验
低压缺氧实验是考察急性低压缺氧条件下机体抗缺氧能力，取7.1中尾静脉取血后的正常组小鼠不做任何处理，7.1中尾静脉取血后生理盐水组、空白凝胶组、葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶组小鼠放入低压氧舱，10min内上升至相当于海拔10000m高度，记录30min内小鼠死亡只数，并计算死亡率。
其中，
表7急性低压缺氧实验结果
组别 死亡数(只) 死亡率(％)
正常组 0 0
生理盐水组 5 83
空白凝胶组 4 67
葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶组 1 17
急性低压缺氧实验结果可以看出葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶组可以降低小鼠在极端低压缺氧条件下的死亡率，进一步结合鼻腔灌流、血象分析确定葛根素具有较好的透鼻粘膜特性及抗缺氧作用，可用于治疗缺氧性损伤。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (7)

1.葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，其特征在于，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括50-150mg的葛根素、体积比为10-14％的丙二醇、用量比为20-26％的泊洛沙姆407、用量比为1-7％的泊洛沙姆188、余量的水，其中，用量比为单位为g/mL的质量体积比。
2.如权利要求1所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，其特征在于，每5mL的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶包括150mg的葛根素、体积比为10％的丙二醇、用量比为23％的泊洛沙姆407、用量比为4％的泊洛沙姆188、余量的水。
3.如权利要求2所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶，其特征在于，还包括1mg的薄荷脑。
4.如权利要求1-2任一项所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、称取葛根素并向其中加入丙二醇溶解葛根素，得葛根素丙二醇溶液；
S2、采用冷凝法配置包含泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的空白凝胶；
S3、将空白凝胶加入至葛根素丙二醇溶液中定容后涡旋混匀。
5.如权利要求4所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的制备方法，其特征在于，步骤S2具体为：称取泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，并均匀撒在水上在磁力搅拌下分散均匀，然后置于4℃冰箱冷藏至充分溶胀并溶解，得空白凝胶。
6.如权利要求4所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的制备方法，其特征在于，步骤S1具体为称取葛根素、薄荷脑混合后加入丙二醇溶解，得葛根素丙二醇溶液。
7.如权利要求1-6任一项所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶的应用，其特征在于，所述的葛根素鼻用温度敏感型原位凝胶在制备治疗低压缺氧脑损伤鼻用药物中的应用。
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